Kinetika reaksi

enzimatis
Vevi Maritha, M. Farm., Apt
• Enzim : protein yg mengkatalisis proses
biokimia dalam sel hayati yang spesifik 
produksi biomassa atau metabolit, produk
pangan, pakan, dll
• Reaksi enzimatis :
 Sistem homogen atau heterogen
 Satu substrat atau lebih
 Dasar kinetika reaksi enzimatis
• Michaelis –Menten laju awal reaksi
enzimatis dapat ditentukan berdasarkan
fungsi terhadap konsentrasi substrat dan
parameter yg berpengaruh dalam enzim
• Henri  pembentukan kompleks enzim
substrat reversibel selama reaksi
pembentukan produk dari substrat  laju
reaksi berbanding lurus dengan konsentrasi
kompleks
 Reaksi reversibel

ES
k1
1k  ES E  P
k2


d[S]
v  dt  k 1 [E][S]  k1 [ES]

d[ES]
v  dt  k 1 [E][S]  [k1  k2 ]
[ES]pembentukan (kekanan) = laju penguraian (kekiri) k
laju 1

[E][S]  [k 1  k 2 ][ES]  0
k 1 [E][S]  [k 1  k 2 ][ES]
 k 1  k2 
[E][S]  [ES]  
 k1 
k
2
k 1
Km  k
1
[E][S]  [ES]Km
[ET ]  [E]  [ES]

[ET ]  [ES][S]  [ES]Km

[ET ][S]  [ES][S]  [ES]Km

[ET ][S] [E[ES]

[ES] 

T ][S] Km  [S]
Km 
[S] [ET ][S]
v  k 2 [ES]  k 2
Km  [S]
 k [E
vmax ]
2
T
v  Km 
vmax [S]
[S]
• Kinetika reaksi Michaelis-Menten :
• v: kec awal

vmax [S]
v
Km 
[S]
 Kinetika reaksi homogen :
penentuan Km
• Persamaan Lineweaver dan Burk

vmax [S]
v
Km 
[S] [S]
1 Km  [S] Km 
  vmax [S] vmax [S]
v vmax [S]
1 Km 1  1
v  [S]
v max Vmax
• Persamaan Eadie Hofstee

vmax [S]
v
Km  [S]
v  vmax sehingga v  Km 
Km max =v   1 
 [S]
[S] 1

v
v max = [S] Km 
v
v
v  Km [S]  max

v
 Inhibisi
• Oleh produk  produk yang dihasilkan dapat
menghambat kerja enzim  kompetitif atau
tidak kompetitif
• Oleh substrat  substrat menghambat kerja
enzim (konsentrasi substrat terlalu tinggi) 
membentuk kompleks  tidak kompetitif
• Persamaan Hanes

vmax [S]
v
Km  [S]
1 Km 1  (Lineweaver  Burk)
v  [S]
1 v max v max
1
1 Km 1
v [S]  [S] [S] 
v max v max
[S]
[S] Km  [S]
v 
1 v max v max
 Inhibisi
• Kompetitif : inhibitor berkompetisi dengan
substrat untuk berinteraksi dengan sisi aktif
enzim
• uncompetitive: inhibitor menghambat kerja
enzim di sisi yg berbeda dari interaksi
substrat-enzim  terikat pada ES
• Non- kompetitif : inhibitor menghambat di sisi
berbeda, tidak menghasilkan produk 
terikat pada E atau ES
Inhibisi kompetitif
 Inhibisi kompetitif
 k1
E  S k  ES E k2
P
 1
ki
E   EI
I 

[ET]  [ES]  [E] 
[EI] vmax [S]
v
Km  1  Ki   [S]
[I]


1 1 Km  [I]  1

v vmax v  1 
Ki 
max 
[S]
K ' m  Km 1  Ki 
[I]

 
Inhibisi uncompetitive
 Inhibisi uncompetitive


k1

k1i
E  S   ES  I  ESI
I  k1
 
ES E  P
[ET]  [ES]  [E]  1 Km 1  1  [I] 
[ESI] 
v vmax [S] v 1  Ki 
v max [S] max 
Km 
 [I]  K'm
1  Ki
v   Km 
  [I] 
1  Ki
 [S]  
 [I]  
1
 Ki 
Inhibisi non-kompetitif
 Inhibisi non-kompetitif

k1
E  S   ES E k2
P
 k1


E  
ki
EI
I  ki

 ESI
ES  I 


[ET]  [ES]  [E] 
[ESI]v [S] 1
v max

Km  [S] 1  [I]
Ki

1  Km 1  1   [I]

v  v max [S] v   1 
max   Ki 

 Faktor yang mempengaruhi reaksi
enzimatis
• pH  perubahan struktur, ionisasi, pengikatan
enzim
 pH mempengaruhi muatan
 Muatan mempengaruhi struktur enzim
 Selanjutnya akan mempengaruhi reaksi ES
• Suhu
k=Ae-E/RT

• Pereaksi kimia
 Penentuan aktivitas enzim
• pH Stat  pengukuran jumlah asam (H+) yang
ditambahkan ke cairan pereaksi  volume
asam/basa terhadap waktu
• Spektrofotometri  pengukuran enzim
dengan spektrofotometer pada panjang
gelombang tertentu
 Contoh soal
• Kinetika enzim glukoamilase ditentukan pada
suatu reaktor tertutup pada suhu 40oC
berdasarkan glukosa yang terbentuk (µmol/L).
Bila volume cairan dalam reaktor 500 ml dan
larutan enzim yang digunakan 500 µL
mengandung 4g/L.
Waktu Konsentrasi awal maltosa (mM)
(menit) 50 100 150 200

2 95 110 130 140

5 230 290 320 340
10 440 570 640 670
15 700 860 960 1.000
30 1.400 1.700 1.900 2.000
• Bagaimana bentuk kinetika hidrolisis maltosa
oleh enzim glukoamilase?
• Glukosa sebagai produk juga berfungsi sebagai
inhibitor. Kinetika penghambatannya ditunjukkan
pd tabel di bawah. Tentukan model kinetika
penghambatan
Glukosa Konsentrasi substrat maltosa (mM)
(mM)
50 100 150 200

0 5,8 7,2 8 8,4

2,5 5,2 6,9 7.6 8,1
5 4,8 6,4 7,3 7,9
10 4,1 5,8 6,7 7,4

• TRK meeting 5.xlsx