CH 10 Bacterial

Genetics

Ted

1
REF 細菌與人類的染色體比較

數量 鹼基對 染色體 質體

E. coli 1條 5 X 106 對 單套 有

人類 23 對 2.9 X 109 對 雙套 無

2
REF 複習 DNA 的構造 -
核甘酸鏈 1

3
REF 複習 DNA 的構造 -
核甘酸鏈 2

4
REF 複習 DNA 的構造 -
DNA 模型

5
REF 轉錄與轉譯

6
 Ch 10. Bacterial Genetics
I. Over view
II. The Bacterial genome 細菌的基因體
III. Bacteriophage 噬菌體
IV. DNA replication DNA 的複製
V. Gene Transfer 基因轉移
VI. Genetic variation 基因變異
VII. Gene regulation 基因調節

7
 I. Over view
• 研究材料 :E. coli

8
 II. The Bacterial genome
( 細菌的基因體 )
Genome 是什麼 ?
生物體所有的遺傳物質
細菌的 Genome 有兩類
1. The Chromosome ( 染色體 )
2. The Plasmid ( 質體 )

9
 10.01 The bacterial genome

1. 細菌染色體有必要基因與非必要基因
2. 不同基因群負責參與不同生理作用 :
蛋白質合成、 DNA 合成、能量代謝與
控制物質進出
3. 質體 (Plasmid)
可以自行複製，可能 1 個或多個
可製造毒素或促進質體轉移的蛋白質

10
III. Bacteriophage 噬菌體

1. 毒性噬菌體
2. 溫和噬菌體
3. 潛溶性細菌

11
 10.02 Bacteriophage
replication
•( 噬菌體的複製 )

1. 附著
2. 穿入
3. 合成 DNA 與蛋
白質
4. 組合
5. 釋出

12
10.03 A . Visual detection of bacteriophage
by the Plaque Method
噬菌體的計數
斑點法

10.03 A . Visual
detection of
bacteriophage by the
Plaque Method

13
 Structures of
10.3B

Representative
Bacteriophage

14
 噬菌體與宿主的關係
• 毒性噬菌體 (Virulent Phages)
• 溫和性噬菌體 (Temperate Phages)

15
10.4溫和的
噬菌體 - 形
成 Prophage

16
10.4 溫和的噬菌體
10.5 潛溶性細菌的活化

1. 以 UV 阻斷 DNA 合成，
誘發破壞噬菌體抑制蛋白
的系列反應。
2.Phage genes 開始表現，原
噬菌體與染色體剪開、分
離。
3. Phage DNA 開始複製並主
導新噬菌體顆粒之合成。
4. 釋出

17
 IV. DNA replication

1. 複製單位與複製起始點
(Replicons and replication origins)
2. 環狀與線狀複製
(Circular versus Linear replication)

18
10.06-A Bacterial chromosome- Replication bubble
( 複製泡泡 )( 環狀複製 )

• 環狀複製
19
 DNA 合成
05-02 REF

的啟動

• 由染色體上的
OriC 序列開始
以 helicase ( 解
鏈酶 ) 解開 DNA
依 5‘ 向 3’ 方向進
行
• 2 個複製叉 .. 嵌套
式泡泡 (nested
bubbles)
FIG 5-2 P34 20
10.06-B Bacterial chromosome-Rolling circle replication
( 滾動環狀複製 )( 線狀複製 )

線狀複製是一些細菌病毒、質體以及染色體轉移
(Chromosome transfer) 時所使用的機轉 21
 DNA Replication
• Ted

22
DNA 模型

23
由 5’ 向 3’ 複製

24
新核苷酸接在 3’ 碳上

25
模板股走向為 3’ 向 5’

26
新核苷酸的鹼基與模板配對

27
新核苷酸 5’ 碳之磷酸基
• 新核苷酸的 5’ 碳上
之磷酸基接在已定
位的糖的 3’ 碳上

28
新核苷酸走向為 5’ 向 3’

29
終結者

30
 V. Gene Translation
基因轉移

1. Conjugation ( 接合作用 )
2. Transduction ( 轉導作用，形質導入 )
3. Transformation ( 轉形作用，形質轉換
)

31
 V-1. 接合作用 (Conjugation)

• 基因藉由細菌與細菌的接觸而轉移
• Donor( 給與者 )( 捐贈者 )----F+
具有 F 質體，是接合性質體，
具有 Sex Pili
• F+ + F- → F+ + F+

32
V-1. 接合作用 (Conjugation)
Cell-to cell transfer of
10.07

Conjugative plasmid

33
 10.08-A Hfr 的形成
• F plasmid 嵌入環狀染色體
形成 Hfr
• Hfr + F- → Hfr + F-

34
 10.08-B 細菌染色體的
基因順序
• 細菌染色體的基因順
序可由基因進入接受
者細胞 (Recipient cell,
F-) 的時間得知

35
10.08-C 染色體進入 F- 所需的時間

36
 V-2 形質導入 (Transduction)( 轉導作用 )

• 細菌的基因藉由 Phage 進入另一細菌

• 通常為溫和性噬菌體 (Temperate Phage)

37
V-2 形質導入 (Transduction)( 轉導作用 )
10.09 Transduction
可轉導的
基因
A. 任何細菌
的基因
B. 原噬菌體
附近的基因

38
10.10 Genetic Transform( 形質轉換 )( 轉形作
用)
• 基因以裸露的方式直接進入另一細菌
• 可自然接受外來 DNA 的稱為 Competent( 適任者
)
Haemophilus influenzae
Streptococcus pneumoniae
Bacillus spp

39
10.10 Genetic Transform(
形質轉換 )

40
 VI. Genetic variation 基因變異
A. Mutation ( 突變 )
B. Mutants ( 突變株 )
C. Mutagenic agents ( 致突變劑 )
D. The Ames test for Mutagenic/Carcinogenic
agents
( 分析致突變劑 / 致癌劑之 Ames test )

41
 A. Mutation ( 突變 )
1. 鹼基取代作用
2. 添加與刪除

42
鹼基取代作用 刪除或揷入
10.11 Mutation ( 突變 )

反向倒置作用
(Inversion)

43
 B. 突變株
1. 野生型
2. 營養突變型
3. 溫度敏感突變型
4. 誤譯與無意義突變
5. 讀序 (Frame-shift) 突
變
6. 回復突變與抑制突變
7. 調節突變
8. 分離突變之選擇方法

44
10.12 無意義突變

1. 野生型
2. 無意義
突變
TAG 是終止
密碼，所
以突變使
蛋白質的
合成提前
終止。

45
 10.13 讀序改變突變
• 因刪除或插入一段核甘
酸

46
10.14 抑制者 (Suppressors)
• 無意義突變
造成蛋白質
合成提前終
止。
• tRNA 的反密
碼發生突變
，正好抑制
無意義突變
，使轉譯作
用繼續進行
。
47
 C. 致突變劑

1. 鹼基結構類似物
2. 化學修飾物
3. 讀序改變突變劑
4. 輻射線
5. 可移動之基因片段
(Transposon)

48
 UV 使鄰近的嘧啶
產生連結

X光
使 DNA 斷裂
ㄚ啶橙的插入使鹼
10.15 突
基排列發生扭曲導
致小幅度的插入或
變劑引發的
刪除 突變劑
10.15

DNA 變化 引發的 DNA

變化

亞硝酸使 C 與 A 發 溴尿嘧啶結構類似
生去胺作用，造成 鹼基，可取代 G=C
錯誤配對， 中的 C ，造成下一
次 DNA 複製錯誤
羊巠胺可以修飾
C ，使 C 的配對方
式類似 T
49
轉位子 (Transposon) 是內在的致突變劑

• Transposon 是一種 DNA 片段，可在染色體與質體

之間來去自如。
• Transposon 會影響基因功能，算是內在的致突變
劑。

50
10.16 轉位子 ( 轉座子 )(Transposon) 變換位置

51
D. The Ames test for Mutagenic/Carcinogenic agents
( 分析致突變劑 / 致癌劑之 Ames test )

• 利用營養需求變異株遇到突變劑會
回復為野生種之特性，來偵測致突
變劑。
例如 : 需組織胺的沙門氏菌遇突變
劑會突變成野生種
• 此試驗也可以用在鑑定致癌劑

52
E. 後天性抗生素抗藥性之機制

1. 抗生素攝取量減少
2. 抗生素之標的物改變
3. 獲得摧毀或修飾抗生素之能力

53
 通透性減少

10.17 抗生素抗藥性

標的物改變

抗生素去活化

54
 VII. Gene Regulation

1. 負向控制 ( Negative control)

( 抑制 (Repression))
2. 正向控制 (Positive control)
( 代謝物活化 (Catabolic activation))
3.RNA 合成酶專一性修飾作用
(Modification of RNA polymerase specificity)

55
VII-A. 抑制蛋白與活化蛋白 - 負向控制

1. 利用抑制蛋白控制
2. 培養基有乳糖才會有 β- 半乳
糖酶

56
10.18A 抑制蛋白與活化蛋白 - 負向控制

57
VII-B. 代謝物活化活化 - 正向控制

培養基中若有多種糖類則選擇葡萄
糖為優先的能量來源

58
10.18B 抑制蛋白與活化蛋白 - 正向控制

59
VII-C. Modification of RNA polymerase
specificity
• RNA 合成酶專一性修飾作用可發生於下
列情況 :
1. 微生物會因環境變化而啟動或關
閉某些基因；例如形成孢子。
2. 熱休克時，因突來的高溫 ，使細
菌產生許多新蛋白質。

60
The End

61