Pen!

aruh Pemberian >itamin # dan

52

THE EFFECT OF VITAMIN C AND E SUPPLEMENTATION ON BLOOD MDA AND CHOLESTEROL OF ALLOXAN INDUCED-DIABETES MELLITUS RABBITS ABSTRACT Uncontrolled diabetes mellitus (DM) caused stress oxidative. Oxidative stress was a condition caused by inbalance free radicals and anti oxidant in the human body. Production free radicals increased lipid peroxidation that can produced malondialdehyd (MDA). xo!enous anti oxidant li"e vitamin # and are needed to prevent the effects of free radicals on diabetic patients and diabetic complication. $his study was aimed to investi!ate the effects of vitamin # and supplementation on blood MDA and #holesterol of alloxan induced%diabetes mellitus rabbits. $he experimental laboratory research conducted &' rabbits wei!ht of ())%*)) !ram and a!e between ' % ( months and later divided into ( !roups. $he first !roup was the ne!ative control+ second !roup was the positive control (alloxan induced)+ third !roup was treated with vitamin # (, m!-day) and vitamin (*.' .U-day) per oral for &/ days. Data were analy0ed usin! One 1ay Anova with convidence of de!ree 223. 4esults showed mean MDA blood level in ne!ative control !roup was *.'/5 6 ).*'( 7mol-ml+ positive control !roup was 2.*,5 6 ).*52 7mol-ml+ treated !roup was ,.(', 6 &.*'8 7mol-ml. 4esult showed si!nificant differences in mean of MDA blood levels of rabbits between the ( !roups (p 9).)&) and three was no si!nificant differences in mean cholesterol blood of rabbits between the ( !roups (p: ).)&). ;rom this study can be concluded that vitamin # and supplementation has potential effect in MDA blood level and but not chan!e to cholesterol blood alloxan induced%diabetes mellitus rabbits. <eywords= diabetes mellitus % vitamin # % >itamin PENDAHULUAN Diabetes melitus adalah !an!!uan metabolisme yan! secara !enetis dan "linis termasu" hetero!en den!an menifestasi hilan!nya toleransi terhadap "arbohidrat. DM ditandai oleh hiper!li"emia puasa+ ateros"leroti"+ mi"ro an!iopati dan neuropati. DM ?i"a tida" ditan!ani secara bai" ma"a a"an timbul "ompli"asi pada berba!ai or!an tubuh+ bai" secara mi"ro vas"uler (nefropati+ retinopati dan neuropati) maupun ma"ro vas"uler+ Penya"it @antun! <oroner (P@<)+ stro"e dan "a"i diabeti". Di ne!ara barat 8)3 "ematian disebab"an oleh ateros"lerosis diabeti" yaitu a"ibat P@<+ sedan!"an A "ematian disebab"an oleh penya"it pem% buluh darah yan! lain seperti+ stro"e dan % malondialdehid % cholesterol

penya"it pembuluh darah Perifer >ascular Disease (P>D).(&) Biper !li"emia dapat menin!"at"an pembentu"an radi"al bebas melalui beberapa me"anisme+ den!an arti "ata ter?adinya penin!"atan Cstress oxidativeC. Penin!"atan stress o"sidatif pada penderita DM menyebab"an ter?adinya "etida" seimban!an antara radi"al bebas den!an anti o"sidan dalam tubuh (endo!en) dan penin!"atan produ"si MDA di dalam membran eritrosit. Dimana MDA merupa% "an petanda pero"sida lipid. DM ?u!a menin!"at"an "olesterol darah yan! menyebab"an ateros"lerosis.(') Malondialdehid (MDA) merupa"an salah satu produ" final dari lipid pero"sidasi+ senyawa ini terbentu" a"ibat de!radasi dari radi"al bebas hidro"sil

Majalah Kedokteran Andalas No.2. Vol.31. Juli Desember 2007

Pen!aruh Pemberian >itamin # dan

(OB) terhadap asam lema" ta" ?enuh+ yan! selan?utnya di transformasi men?adi radi"al yan! san!at rea"tif. <emampuan radi"al hidro"sil membentu" rea"si rantai den!an abstra"si & atom hidro!en dari membran sel terbentu"lah lipid pero"sida. <elan?utan dari rea"si ini terputusnya rantai asam lema" men?adi senyawa MDA+ 2%hidro"si nonenal+ etana dan pentana. Demua aldehid ini mempunyai daya perusa" yan! tin!!i terhadap sel tubuh. <adar MDA a"an menin!"at sesuai den!an fun!si intensitas o"sidatif+ sehin!!a MDA a"an ber"uran! bila sistem pertahanan bai".(() fe" radi"al bebas yan! tida" seimban! den!an anti o"sidan endo!en pada penderita DM dan "emun!"inan ter?adinya "ompli"asi dapat di antisipasi den!an anti o"sidan e"so!en seperti vitamin # dan vitamin . >itamin # dan vitamin telah di "enal seba!ai anti o"sidan non en0imatis. $erutama vitamin adalah suatu anti o"sidan yan! san!at rea"tif dalam menan!"ap radi"al bebas+ sehin!!a berubah men?adi radi"al yan! lebih stabil. >itamin merupa"an anti o"sidan yan! be"er?a pada membran sel "arena vitamin mudah larut dalam lema". >itamin # merupa"an suatu anti o"sidan yan! mempunyai sifat polaritas yan! tin!!i "arena banya" men!andun! !u!us hidro"sil sehin!!a mudah larut dalam air. <arena itulah vitamin # terdapat di dalam cairan e"stra seluler. Bal ini memberi"an "euntun!an "arena vitamin # mudah di ubah oleh tubuh. Oleh "arena itu vitamin # dapat berea"si dan mampu menetralisir radi"al bebas yan! bersifat CaEeuosF.(*) Penelitian dila"u"an men!!una"an "elinci+ dimana "elinci diberi alo"san sehin!!a "elinci menderita DM+ terhadap "elinci percobaan di u"ur "adar MDA dan <olesterol darah. Delan?utnya "elinci di beri anti o"sidan vitamin # dan vitamin . Detelah itu dila"u"an pemeri"saan "adar MDA dan "olesterol darah.

53

Untu" penetapan "adar MDA den!an men!!una"an metode CplacerF den!an cara "olorimetri den!an alat spe"trofotometer spe"troni" '& di!ital pada pan?an! !elomban! /(' nm. Pen!u"uran "adar "olesterol den!an metode Giebermann Hurchart. CARA KERJA Bahan Hinatan! percobaan yan! di!una"an adalah "elinci ?antan+ ber?umlah ') e"or+ umur ' I ( bulan den!an berat badan ()) I *)) !ram. <elinci ini di a"limatisasi dalam "ondisi laboratorium selama & min!!u den!an diberi ma"an dan minum yan! cu"up. Pada hari tera"hir diu"ur !lu"osa darah "elinci. <elinci di pilih untu" "elompo" adalah "elinci yan! mempunyai !lu"osa darah normal (5) I &') m!-dl). Dari ') "elinci di pilih secara aca" &' e"or yan! mempunyai "adar !lu"osa darah normal. Rancangan Perco aan $erdiri dari ( "elompo" "elinci+ masin!% masin! "elompo" sebanya" * e"or. <elompo" . = Adalah "elompo" "ontrol ne!atif. <elinci pada "elompo" ini hanya di beri ma"an dan minum yan! cu"up. <elompo" .. = Adalah "elompo" "ontrol positif. <elinci pada "elompo" ini di beri perla"uan den!an alo"san den!an "onsentrasi &/) m!-"! HH secara intra peritonial. Detelah itu di u"ur "adar !lu"osa darah setiap hari sampai "elinci dinyata"an DM+ yaitu den!an "adar !lu"osa darah :&/) m!-dl. Delan?utnya pemeri"saan "adar MDA dan "olesterol darah dila"u"an pada hari tera"hir. <elompo" ... = Adalah "elompo" perla"uan. <elinci di beri perla"uan den!an alo"san den!an "onsen% trasi &/) m!-"! HH secara intra peritonial+ setelah dinyata"an DM den!an pen!u%

Majalah Kedokteran Andalas No.2. Vol.31. Juli Desember 2007

Pen!aruh Pemberian >itamin # dan

"uran !lu"osa darah+ "elinci pada "elompo" ini di beri "ombinasi vitamin # dan secara oral selama &/ hari den!an dosis vitamin #+ , m!-hari dan vitamin + *+' .U- hari. Pemeri"saan "adar MDA dan "olesterol darah dila"u"an pada hari tera"hir. Pen!ambilan sampel darah "elinci dila"u"an dari arteri carotis interna. Cara !eng"#"ran MDA $an #o%e&'ero% $arah #e%(nc( a. Pen!u"uran MDA Penetapan "adar MDA darah "elinci men!!una"an metoda Placer et. al+ berdasar"an rea"si $hiobarbituric Acid ($HA) den!an MDA. Prinsip metoda ini adalah pen!aruh panas dan asam a"an mempercepat de"omposisi lipid pero"sida men?adi MDA. MDA yan! di produ"si selama pero"sidasi berea"si den!an $HA men!hasil"an "romo!en merah muda yan! selan?utnya di u"ur spe"trofotometer Dpectronic '& di!ital pada pan?an! !elomban! /(' nm. Datuan MDA di!una"an nmol-ml. b. Pen!u"uran "olesterol Penetapan "adar "olesterol darah "elinci men!!una"an metoda Giberman Hurchard. Prinsip metoda ini adalah rea"si pembentu"an warna hi?au I biru dari "olesterol den!an rea!en pewarna (asam asetat anhidrat dan asam sulfat pe"at). Delan?utnya di u"ur den!an spe"trofotometer Dpectroni" '& di!ital pada pan?an! !elomban! /,8 nm. HASIL Peng"#"ran #a$ar g%"#o&a $arah Basil pen!u"uran "adar !lu"osa darah puasa sebelum dan sesudah indu"si alo"san dapat di lihat pada tabel &.

54

No & ' ( * / 5 , 8 2 &) && &' &( &* &/ &5 &, &8 &2 ') K

Ta e% )* Ha&(% !eng"#"ran #a$ar g%"#o&a $arah !"a&a &e e%"+ $an &e&"$ah (n$"#&( a%o#&an Ka$ar g%"#o&a $arah !"a&a #e%(nc( Se e%"+ $( Se'e%ah $( (n$"#&( a%o#&an (n$"#&( a%o#&an ,+g-$%. ,+g-$%. &)) &52 8' &*, 8/ &/5 25 &5( 2& &/* 2' &*& &&5 &,5 &&' &8& 8& &52 25 &55 82 &,& &)( &/' 8' J 2& J 2) J 22 J &&* JJ 2) JJ &(5 JJ &)& JJ 2,+( &5'+8

<eteran!an = J"elinci untu" "ontrol JJ"elinci mati Herdasar"an tabel & terlihat bahwa ter?adi penin!"atan "adar !lu"osa darah puasa "elinci setelah diindu"si alo"san dan &) e"or diantaranya dinyata"an DM.

Majalah Kedokteran Andalas No.2. Vol.31. Juli Desember 2007

Pen!aruh Pemberian >itamin # dan

55

Ma%on$(a%$eh($ ,MDA. $an #o%e&'ero% $arah Ta e% /* Pengar"h !e+ er(an V('a+(n C $an E 'erha$a! #a$ar MDA $an #o%e&'ero% #e%(nc( $(a e'e& +e%('"& a#( a' (n$"#&( a%o#&an Ke%o+!o# MDA Ko%e&'ero% N01 ,X 2 SD. ,X 2 SD. ,n+o%-+%. ,+g-$%. . *+'/5 6 ,*+2,5 6 )+*'( '&+/2' .. 2+*,5 6 5)+/5( 6 )+*52 &)+2'* ... ,+(', 6 ,8+*/& 6 &+*'8 &/+&/8 <eteran!an = . = <elompo" "ontrol ne!atif. <elompo" yan! tida" di beri apa%apa. .. = <elompo" "ontrol positif. <elompo" yan! diindu"si+ tanpa pemberian vitamin # dan vitamin . ...= <elompo" "ontrol perla"uan. <elompo" yan! diindu"si+ den!an pemberian vitamin # dan vitamin . Dari hasil analisis secara statisti" den!an Anova satu arah untu" rerata "adar MDA+ terdapat perbedaan yan! berma"na (p 9 )+)&) antara "elompo" "ontrol ne!atif den!an "elompo" positif+ antara "elompo" ne!atif den!an "elompo" perla"uan dan antara "elompo" positif den!an "elompo" perla"uan. Dan tida" terdapat perbedaan yan! berma"na (p : )+)&) secara statisti" pada rerata "adar "olesterol. PEMBAHASAN Pen!u"uran !lu"osa darah "elinci sebelum dan sesudah pemberian alo"san pada tabel & menun?u"an ter?adinya penin!% "atan "adar !lu"osa darah puasa "elinci. Pemberian alo"san dapat menim%bul"an hiper !li"emia yan! permanen "arena alo"san secara sele"tif merusa" sel pan"reas yan! mense"resi hormon insulin

melalui pen!ambilan secara cepat alo"san oleh sel%sel pan"reas+ pembentu"an senyawa 4eactive Oxy!en Dpecies (4OD) dan penin!"atan "alsium sitolsoli" secara simultan pada sel pan"reas.(/+5) Basil pen!u"uran "adar MDA darah diperlihat"an pada tabel '+ dimana "elompo" "ontrol ne!atif memili"i "adar rerata MDA darah terendah yaitu *+'/5 6 )+*'( nmol-ml. Analisis statisti" menun?u% "an bahwa terdapat perbedaan yan! berma"na (p 9 )+)&) antara "elompo" "ontrol ne!atif den!an "elompo" "ontrol positif dan "elompo" perla"uan. Bal ini disebab"an "arena "elinci pada "elompo" "ontrol ne!atif tida" diindu"si den!an alo"san+ sehin!!a tida" ter?adi DM yan! a"an menyebab"an ter?adinya stres o"sidatif. Pada "eadaan normal+ radi"al bebas tetap dihasil"an secara fisiolo!is namun dapat dinetralisir oleh anti o"sidan endo!en (super o"sida dismutase+ "atalase dan !lutation pero"sidase) sehin!!a pembentu"an radi"al bebas yan! baru dapat di ce!ah atau radi"al bebas yan! ada di ubah men?adi mole"ul yan! "uran! memili"i dampa" ne!atif dan pada a"hirnya dapat men!uran!i efe" ne!atif radi"al bebas terhadap asam lema" yan! a"an menyebab"an terbentu"nya MDA. Pen!u"uran MDA pada "elompo" "ontrol positif (tabel ') memili"i "adar rerata MDA darah tertin!!i yaitu 2+*,5 6 )+*52 nmol-ml. Analisis statisti" menun?u% "an bahwa terdapat perbedaan yan! berma"na (p9)+)&) den!an "elompo" "ontrol ne!atif dan terdapat perbedaan yan! berma"na den!an "elompo" perla"uan. Bal ini sesuai den!an teori pada DM bahwa menin!"atnya "adar !lu"osa darah menye% bab"an menin!"atnya "adar radi"al bebas dalam tubuh. Penin!"atan radi"al bebas ini melalui me"anisme pen!a"tifan ?alur poliol (poliol path way)+ auto o"sidasi !lu"osa dan !li"asi protein. Produ"si radi"al bebas yan! berlebihan yan! tida" seimban! den!an anti o"sidan endo!en menyebab"an

Majalah Kedokteran Andalas No.2. Vol.31. Juli Desember 2007

Pen!aruh Pemberian >itamin # dan

stress o"sidatif. 4adi"al bebas berdampa" ne!atif tehadap membran sel terutama asam lema" ta" ?enuh (fosfolipid dan !li"olipid). 4adi"al bebas dapat menimbul"an rea"si rantai yan! di "enal den!an pero"sidasi lipid. A"ibat a"hir dari rea"si ini adalah terputusnya rantai asam lema" men?adi senyawa yan! to"si" terhadap sel+ diantaranya adalah MDA. Disampin! itu tida" adanya suplementasi anti o"sidan e"so!en vitamin # dan yan! dapat menan!"ap radi"al bebas menyebab"an "elompo" "ontrol positif memili"i "adar MDA lebih tin!!i dari pada "elompo" "ontrol ne!atif dan "elompo" perla"uan. Pen!u"uran MDA pada "elompo" perla"uan (tabel ') memili"i "adar rerata MDA darah yan! lebih rendah (,+(', 6 &+*'8 nmol-ml) dari "adar rerata MDA darah "elompo" "ontrol positif+ namun lebih tin!!i dari "adar rerata MDA darah "elompo" "ontrol ne!atif. Analisis statisti" menun?u"an bahwa terdapat perbedaan yan! berma"na (p9 )+)&) den!an "elompo" "ontrol positif dan "elompo" "ontrol ne!atif. Bal ini menun?u"an bahwa pemberian vitamin # dan dapat menurun"an "adar MDA darah mende"ati "adar MDA darah dalam "eadaan fisiolo!is "arena "eadaan stres o"sidatif masih tetap ter?adi pada DM+ namun lebih bai" dari pada "elompo" "ontrol positif. Bal ini ?u!a membu"ti"an bahwa "ombinasi vitamin # dan seba!ai anti o"sidan memberi"an efe" perlindun!an yan! bai". Pemberian anti o"sidan "ombinasi vitamin # dan memberi"an efe" siner!i men!hambat pero"sidasi lema". >itamin berperan seba!ai pertahanan primer terhadap radi"al lipofili"+ sedan!"an vitamin # merupa"an !aris pertama pertahanan anti o"sidan pada plasma dari berba!ai stres o"sidatif+ sehin!!a "adar rerata MDA darah "elompo" perla"uan lebih rendah dibandin! "an den!an "adar MDA darah "elompo" "ontrol positif yan! tida" mendapat suplementasi vitamin # dan .

56

Lo!uchi dan Li"i+ meneliti bahwa pemberian vitamin # dan secara "om% binasi memberi"an efe" yan! siner!is mence!ah lipid pero"sida. <eti"a anti o"sidan mence!ah radi"al bebas a"an membentu" radi"al%radi"al anti o"sidan. 4adi"al vitamin dapat memisah"an radi"al pero"sil lain yan! dapat men!% hasil"an produ" lain. Produ" ini dapat berea"si den!an radi"al vitamin lain sehin!!a terbentu" sebuah dimer atau produ" yan! disproporsi+ selan?utnya di redu"si oleh redu"tan (vitamin # dan ubiEuinon) untu" membentu" "embali vitamin . Herdasar"an penelitian yan! telah dila"u"an dapat di"etahui bahwa hiper% !li"emia dapat menin!"at"an "adar radi"al bebas dalam tubuh yan! selan?utnya dapat menyebab"an stres o"sidatif yan! ditandai den!an ter?adinya penin!"atan "adar MDA darah. Delain itu dapat di"etahui bahwa terdapat pen!aruh pemberian vitamin # dan terhadap "adar MDA darah "elinci DM yan! di indu"si alo"san. Basil pen!u"uran "olesterol (tabel ') menun?u""an bahwa pada "elompo" "ontrol positif "adar rerata "olesterol men!alami penurunan dibandin!"an "elompo" "ontrol ne!atif+ sedan!"an pada "elompo" perla"uan memperlihat"an "enai"an rerata "adar "olesterol diban% din!"an den!an "elompo" "ontrol ne!atif dan "elompo" "ontrol positif+ namun tida" memperlihat"an perbedaan yan! berma"na (p:)+)&) secara statisti". Dari hasil ini terlihat bahwa pada "elompo" positif belum berpen!aruh terhadap "adar "olesterol+ walaupun "elinci sudah menderita DM. Delan?utnya pada "elompo" perla"uan den!an pemberian vitamin # dan ?u!a tida" memberi"an pen!aruh terhadap "adar "olesterol darah "elinci. @adi pemberian anti o"sidan vitamin # dan terhadap "elinci DM tida" memberi"an pen!aruh terhadap "adar "olesterol. KESIMPULAN

Majalah Kedokteran Andalas No.2. Vol.31. Juli Desember 2007

Pen!aruh Pemberian >itamin # dan

Herdasar"an hasil penelitian yan! di peroleh+ dapat diambil "esimpulan seba!ai beri"ut= &. Pemberian vitamin # dan dosis , m!-hari dan *+' .U-hari berpen!aruh secara berma"na menurun"an "adar MDA darah "elinci DM a"ibat di indu"si alo"san. '. Pemberian vitamin # dan dosis , m!-hari dan *+' .U-hari tida" ber% pen!aruh secara berma"na terhadap "adar "olesterol darah "elinci DM a"ibat diindu"si alo"san. SARAN Perlu dila"u"an penelitian lan?utan pen!aruh pemberian vitamin # dan terhadap a"tivitas en0im anti o"sidan endo!en seperti "atalase+ Duper O"sida Dismutase (DOD)+ !lutation pero"sidase. KEPUSTAKAAN &. Mayes+ PA. Dtru"tur dan fun!si vitamin
larut air. Dalam Hio"imia Barper+ d. '*+ ditor Murray <.+ d"".+ M#+ @a"arta. &222.

57

'. Balliwel+ H.+ Mutteeid!e+ @M. ;ree

radical in biolo!y and medicine. #larendone Press+ Oxford. &222.

(. As"andar $?o"roprawiro. An!iopati

diabeti" (ma"ro dan mi"ro an!iopati Diabeti")+ Pen!enalan dan Penan!anan. Hu"u a?ar .PD ?ilid . ;<U.+ @a"arta. &222.

*. ;avier+ A . et al. Analysis of free

radical in biolo!ical Hir"ausher+ Hoston. &22/. system.

/. Duharmiati. Pen!u?ian bioa"tivitas anti

diabetes melitus tumbuhan obat. #ermin <edo"teran+ '))(N &*N &%,.

5. D0"udels"i+ $. $he mechanism of

alloxan strepto0otocin action in H cell of the rat pancreas. Physiol. 4es. /). '))&N /(5%/*5.
Majalah Kedokteran Andalas No.2. Vol.31. Juli Desember 2007