Ecotoxicol. Environ. Contam., v. 8, n. 2, 2013, 23-30 doi: 10.5132/eec.2013.02.

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Avaliao da toxicidade das guas do Rio Cricima (Cricima, Santa Catarina, Brasil), utilizando parmetros fsico-qumicos e abordagens ecotoxicolgicas
L.M. BRUCHCHEN1; P.S. SIlVA1; F.Z. SIlVEIRA1; T.M. DEfAVERI1; C.T. PICH2 & R. GEREmIAs2*
1 2

Cincias Biolgicas, UNESC, Cricima, SC, Brasil.

Engenharia de Energia, UFSC, Ararangu, SC, Brasil. (Received July 05, 2012; Accept October 03, 2013)

Abstract Toxicity assessment on the waters from the Cricima river (Cricima, Santa Catarina, Brazil) using physicochemical parameters and ecotoxicological approaches - The Cricima river (Cricima, Santa Catarina, Brazil) receives daily potentially toxic waste generated by various human activities. This study aimed to evaluate the toxicity of water from the Cricima river, using physico-chemical parameters and ecotoxicological approaches. River water samples were collected in three different stations. The values of pH, COD, BOD, DO and hardness were determined. The following assays were performed: the acute toxicity in Daphnia magna, a test of inhibition of growth of roots in Allium cepa L. (onion), and genotoxicity (Comet test) in meristematic cells of Allium cepa L. and blood cells and liver tissue of fish Geophagus brasiliensis. The results indicated that the water collected in the central region showed increased values of COD, BOD and hardness and low values of DO. Acute toxicity was found for Daphnia magna, as well as significant inhibition of growth of the roots A. cepa and genotoxic effects in A. cepa and G. brasiliensis exposed to waters from the central region. It was concluded that the waters of the Cricima river are potentially toxic to biota exposed. Keywords: Cricima river (Cricima, Santa Catarina, Brazil), Toxicity, physico-chemical parameters, bioindicator organisms.

INTRODUO

A gua um recurso de fundamental importncia para os organismos vivos e imprescindvel s diversas atividades humanas, sendo que as atividades antrpicas podem promover o comprometimento da qualidade dos recursos hdricos. O municpio de Cricima est localizado no extremo sul catarinense e tem o Rio Sango como um dos seus principais mananciais hdricos, cujos afluentes so os rios Maina, Cricima, Cedro e Sanga do Terneiro, os quais pertencem Regio Hidrogrfica 10 (RH10) (Galatto et Alm da avaliao de parmetros fsico-qumicos, al., 2011). O curso dgua do Rio Cricima atravessa toda tambm relevante a utilizao de ensaios ecotoxicolgicos em a regio central da cidade e recebe diariamente resduos organismos bioindicadores, como forma de se obter melhor provenientes da atividade carbonfera e de outros setores avaliao da qualidade de mananciais hdricos contaminados
*Corresponding author: Reginaldo Geremias; e-mail: reginaldogeremias@gmail.com

industriais, bem como comerciais, domsticos e hospitalares (Alexandre & Krebs, 1995). Muito embora o Rio Cricima esteja sujeito contaminao por diversas classes de poluentes, ainda so poucos os estudos da qualidade de suas guas e dos possveis efeitos txicos sobre a biota exposta. Neste contexto, a avaliao de parmetros fsicoqumicos de qualidade pode contribuir para este processo e, para tanto, se pode propor a determinao do pH, oxignio dissolvido (OD), Demanda Qumica de Oxignio (DQO), demanda Bioqumica de Oxignio (DBO) e Dureza.

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(Tallini et al., 2012; Gomes et al., 2012). Neste contexto, tem sido proposto o uso de teste de toxicidade aguda em Daphnia spp pela avaliao do Fator de Toxicidade (FT). Este teste tem sido amplamente utilizado para este fim por apresentar caractersticas importantes, tais como grande potencial reprodutivo, fcil aquisio no mercado e manuteno em laboratrio, boa reprodutividade e confiabillidade dos resultados (Arambasic et al., 1995; Silva, 2002; Smy et al., 2010; Pimentel et al., 2011; Hamada et al., 2011). A utilizao de plantas superiores tambm tem sido descrita como um ensaio sensvel e rpido para a avaliao da contaminao atmosfrica, terrestre e aqutica (Calzoni et al., 2007). Em particular, tem-se sugerido o uso de Allium cepa L. como organismo bioindicador para a avaliao ecotoxicolgica de ambientes contaminados por vrias classes de poluentes (Fiskesj, 2006; Leme & Marin-Morales, 2009). Para tanto, so avaliados diversos parmetros fitotxicos, tais como bioacumulao de contaminantes em diferentes tecidos (razes, folhas e bulbos), inibio de crescimento de razes e folhas, efeitos citogenticos e mutagnicos, quando expostos a amostra teste. O uso deste vegetal em estudos ecotoxicolgicos tem sido sugerido, uma vez que oferece benefcios como sensibilidade, reprodutibilidade, resposta em breve perodo de tempo, necessidade de pouco volume de amostra de contaminante, bem como baixo custo (Richa et al., 2005; Fatima & Ahmad, 2005; Fatima & Ahmad, 2006). Testes de toxicidade aguda, sub-crnica e crnica avaliam parmetros deletrios drsticos. Desta forma, o uso de biomarcadores de alteraes bioqumicas, fisiolgicas e morfolgicas em organismos-teste vem ganhando espao como mecanismo de avaliao de impacto ambiental (Streb et al., 2002). Dentre os biomarcadores, encontram-se os que indicam efeitos genotxicos e, para tanto, podem ser empregados testes de fragmentao de DNA em clulas meristemticas de Allium cepa L. e em tecidos de peixes Geophagus brasiliensis e em outras espcies (Bortolotto et al., 2009; Moreira et al., 2010; Hoshina & Marin-Morales, 2010). Portanto, o uso de testes ecotoxicolgicos com diferentes organismos bioindicadores como microcrustceos, peixes e vegetais aliado determinao de parmetros fsico-qumicos so ferramentas importantes para uma melhor avaliao da qualidade de mananciais hdricos contaminados por resduos provenientes de atividade antrpica. A partir destes pressupostos que o presente trabalho props realizar estudos preliminares sobre o potencial txico das guas do Rio Cricima, atravs da avaliao de parmetros fsico-qumicos de qualidade e de ensaios com os organismos bioindicadores Daphnia magna, Allium cepa L. e Geophagus brasiliensis. MATERIAL E MTODO rea de Estudo e Amostragem de guas A rea de estudo do presente trabalho est inserida na regio sul do Estado de Santa Catarina, conhecida como

Bacia Carbonfera, pois encerra as maiores reservas de carvo metalrgico economicamente explorvel (SIECESC, 2013). Esta regio est situada dentro das Bacias Hidrogrficas do Rio Ararangu, Tubaro e Urussanga, ocupando uma rea de 1050 km. O municpio de Cricima um dos integrantes da Associao dos Municpios da Regio Carbonfera (AMREC), situada no extremo sul do Estado de Santa Catarina (284040S e 492212W). O municpio abrange uma superfcie territorial de 235.628 km, com uma altitude de 46 m e uma populao estimada em 188.233 habitantes (IBGE, 2006). Sua rea est limitada pelas cidades de Morro da Fumaa, Iara, Forquilhinha, Nova Veneza, Siderpolis e Cocal do Sul (AMREC, 1991). O tipo de clima o subtropical mido com vero quente (Cfa), pela classificao de Koeppen. A temperatura mdia anual 19C e a precipitao total mdia de 1600 mm, sem estao seca definida. As temperaturas mdias mensais variam de 15C no inverno a 24C no vero, com possvel ocorrncia de geada. As chuvas so bem distribudas ao longo do ano, com totais mensais variando de 80 mm em junho a 200 mm em fevereiro (CIRAM, 2012). Segundo o relatrio do Departamento Nacional da Produo Mineral DNPM (1987), a regio foi categorizada como a 14 rea Crtica Nacional para o efeito de controle de poluio da qualidade ambiental, no s pelos impactos ambientais causados pela explorao do carvo mineral, como tambm por outros fatores, tais como a atividade agrcola, o desmatamento, a gerao de efluentes industriais e domsticos. Estudos da qualidade de seus mananciais hdricos tem descrito a contaminao por metais (ex: ferro, alumnio, mangans, cobre, zinco etc), hidrocarbonetos policclicos aromticos (HPA), pesticidas, sulfatos, fosfatos, coliformes fecais e totais entre outros poluentes. No presente trabalho, foram coletadas amostras de gua superficiais (5L) a, aproximadamente, 30 cm de profundidade e distncia de 1,0 m da margem, atravs da imerso de frasco de polietileno usado como recipiente coletor. Foi realizada uma coleta em 3 diferentes estaes de amostragem, situadas no Rio Cricima: a estao 1 (283958.00S, 492113.19O, 136m altitude) corresponde proximidade da nascente, a estao 2 (284046.56S, 492231.22O, 43m altitude) situa-se no intermdio da regio central do cidade e a estao 3 (284145.24S, 492441.21O, 31m altitude) localiza-se ao final da regio central. As amostras foram e mantidas sob refrigerao (4oC) at execuo dos ensaios. Todos os ensaios foram realizados nos laboratrios da Universidade do Extremo Sul Catarinense (UNESC), em Cricima. A avaliao do pH foi realizada por potenciometria (pHmetro Analion). Para a determinao da DQO, utilizou-se o mtodo analtico de refluxo aberto. Na anlise da DBO utilizou-se o teste de DBO de cinco dias e o parmetro OD foi obtido por oximetria (oxmetro Lutron DO 5510). A determinao da dureza foi realizada por titulometria do EDTA-Na (ABNT NBR 12621, 1995). Toxicidade aguda em microcrustceos Daphnia magna Nos ensaios com Daphnia magna, organismos neonatos (2 a 26 h de vida; n=10) foram expostos por 48 horas em bqueres contendo 20 mL de diluies seriadas (100; 50;

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33,34; 25; 16,67; 12,5; 8,34; 6,25; 4,17; 3,12; 2,08; 1,56; 1,04; 0,78; 0,52; 0,39 %) das amostras de guas do Rio Cricima, temperatura de 20 2oC, com fotoperodo de 16 horas. Para o grupo controle negativo foi utilizada gua de diluio. A toxicidade aguda foi avaliada atravs da determinao do Fator de Toxicidade (FT), o qual representa a menor diluio em que no se observa mortalidade superior a 10% dos organismos nas condies do ensaio (Lattuada et al., 2009). Fitotoxicidade em Allium cepa L. Para avaliar o efeito fitotxico foi realizado teste de inibio do crescimento de razes em Allium cepa L. de acordo com Bortolotto et al. (2009), com adaptaes. Para tanto, amostras de A. cepa, obtidas a partir de fontes comerciais, tiveram suas razes retiradas e os bulbos (n=6) colocados na parte superior de tubos de polietileno de fundo cnico, contendo 50 mL das amostras de gua do Rio Cricima, temperatura ambiente e ao abrigo da luz. Para o controle negativo foi utilizada gua mineral obtida comercialmente (marca comercial: gua Mineral da Guarda; Caractersticas fsico-qumicas e composio qumica descrito no rtulo: pH a 25oC= 5,99; temperatura na fonte= 34,6oC; condutividade eltrica 25oC = 105S cm-1; resduos de evaporao a 180oC = 90,23 mg L-1; radioatividade na fonte a 20oC e 760mmHg = 53,36 maches; brio = 0,012 mg L-1; bicarbonato estequiomtrico = 29,80 mg L-1; brometo = 0,04 mg L-1; clcio = 4,624 mg L-1; cloreto = 9,52 mg L-1; estrncio = 0,013 mg L-1; fluoreto = 0,82 mg L-1; magnsio = 1,144 mg L-1; nitrato = 3,74 mg L-1; potssio = 4,08 mg L-1; ltio = 0,005 mg L-1; silcio= 17,673 mg L-1; sdio = 11,081 mg L-1; sulfato = 2,48 mg L-1). As amostras foram reabastecidas diariamente, de forma a manter os bulbos sempre em contato com as mesmas. Aps sete dias de exposio, foi medido o comprimento da maior raiz de cada bulbo. Teste de genotoxicidade em Allium cepa L. e em Geophagus brasiliensis O potencial genotxico foi avaliado, utilizando teste de fragmentao do DNA (teste Cometa) proposto por Singh et al. (1988), com modificaes. Para tanto, indivduos de Allium cepa L. (n=6) foram expostos s mesmas condies do ensaio de fitotoxicidade. Ao final da exposio, clulas meristemticas foram retiradas da regio apical das razes e homogeneizadas em soluo de extrao de ncleo. O homogenato foi diludo em agarose de baixo ponto de fuso (0,75%) e espalhado sobre lminas de microscpio prcobertas com agarose 1,5% em duplicata. Aps ficarem mergulhadas em soluo de lise a 4C por 2 horas, as lminas foram submetidas eletroforese alcalina por 30 minutos a 300 mA e 25 V. Aps a eletroforese, as lminas foram lavadas em tampo de neutralizao, enxaguadas em gua deionizada e submetidas soluo de fixao por 10 minutos. As lminas foram coradas e analisadas em microscpio ptico com aumento de 100X, sendo os resultados expressos como ndice de Dano ao DNA, com escore de 0 a 400, empregando-se unidade arbitrria.

Nos ensaios com peixes, indivduos jovens de G. brasiliensis (10 2 cm de comprimento; 35 5 g de peso corpreo) foram mantidos em aqurios de vidro, contendo gua mineral (1 peixe/5L de gua), em constante aerao, com fotoperodo claro/escuro de 12 horas, temperatura de 24 2C, alimentados diariamente ad libidum por 7 dias para aclimatao. Ao final deste perodo, os peixes foram divididos em grupos de seis indivduos e expostos por 2 horas s guas coletadas nas 3 diferentes estaes do Rio Cricima. Para o grupo controle negativo, foi utilizada gua mineral comercial, cuja marca comercial, caractersticas fsico-qumicas e composio qumica j foram descritas anteriormente. Ao final da exposio, foi coletado sangue perifrico por puno cardaca usando seringa contendo heparina. Os animais foram mortos, sendo o fgado imediatamente retirado. O sangue e o fgado foram homogeneizados em tampo PBS (phospate-bufferedsaline) e colocados em 95L de agarose de baixo ponto de fuso (0,75%) e espalhado sobre lminas de microscpio cobertas com agarose 1,5%, em duplicata. As lminas foram submetidas ao teste cometa, j descrito anteriormente, sendo tambm avaliado o ndice de Dano ao DNA. Anlise Estatstica Os resultados dos testes de fitotoxicidade e genotoxicidade foram submetidos anlise de Varincia (ANOVA), complementada pelo teste de Bonferroni. As anlises foram conduzidas usando software GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Inc. San Diego, California, U.S.A.), assumindo nvel de significncia de p<0,05. Todos os resultados foram expressos em Mdia Desvio Padro. RESULTADOS E DISCUSSO Parmetros fsico-qumicos das guas do Rio Cricima A determinao de parmetros fsico-qumicos tais como pH, DBO, DQO, OD e Dureza uma importante ferramenta de avaliao da qualidade de ambientes hdricos. Os resultados obtidos nos parmetros fsico-qumicos das guas coletadas nas estaes do Rio Cricima esto apresentados na Tabela 1. Comparando-se os resultados entre as estaes de coleta, possvel constatar que os valores de pH se mostraram prximos entre si e ligeiramente cidos. Este parmetro pode ser considerado como uma das variveis ambientais mais
Tabela 1 - Parmetros fsico-qumicos das guas coletadas nas estaes do Rio Cricima. Parmetros pH DBO 5 dias (mg L-1) DQO (mg L-1 ) OD (mg L-1 ) Dureza (mg L-1 CaCO3) 1 6,1 2 8,6 6,1 178 Estaes 2 6,5 44 88 4,2 70 3 6,1 6 38 4,5 96

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importantes em ecossistemas aquticos, pois ele interfere em processos bioqumicos, no balano de CO2, na natureza qumica da gua e na solubilidade de sais (Rodrigues et al., 2000). Em nossos estudos foi possvel observar que os valores de DBO e DQO das guas coletadas na estao 2 (DBO = 44 mg L-1 e DQO= 88 mg L-1 ) e estao 3 (DBO = 6 mg L-1 e DQO = 38 mg L-1) estiveram acima dos observados na estao 1 (DBO = 2 mg L-1 e DQO = 8,6 mg L-1). Constatou-se valores menores de OD na estao 2 (4,2 mg L-1 ) e estao 3 (4,5 mg L-1), quando comparados estao 1 (6,1 mg L-1). Os valores maiores de DBO e DQO e menores de OD observados nas estaes 2 e 3 poderiam estar associados s altas concentraes de substncias orgnicas provenientes da descarga de esgotos domsticos e resduos industriais lanados diariamente no leito do rio (Alexandre & Krebs, 1995). Estas substncias podem servir como fonte de alimento para microrganismos decompositores e aumento de sua proliferao, com consequente elevao do consumo de oxignio e diminuio dos valores de oxignio dissolvido (Mota, 1995; Sperling, 2002). O oxignio um elemento de essencial importncia para organismos aerbicos e o aumento da taxa de seu consumo pode provocar hipxia, causando efeitos nocivos biota. Em geral, valores de OD inferiores a 2 mg L-1 indicam ambiente aqutico em hipxia (Lindenschmidta et al., 2009). Entretanto, esta condio no foi observada em nossos resultados, uma vez que os valores de OD nas guas do rio coletadas nas diferentes estaes se mostraram superiores referida concentrao. Em relao ao parmetro da Dureza, observa-se que as guas da estao 1 apresentaram valores maiores, quando comparado aos demais pontos de coleta. Este perfil poderia estar associado a uma maior concentrao de ons carbonatos e bicarbonatos presentes no ponto inicial do corpo hdrico. As guas da estao 1 apresentaram valores dentro do intervalo de guas enquadradas como duras (150-300 mg L-1) e as das estaes 2 e 3 como moderadamente duras (75-150 mg L-1), o que poderia ser caracterizadas como compatveis para os sistemas biolgicos (Mendes et al., 2008). Trabalhos na literatura tambm tem descrito o comprometimento da qualidade das guas do Rio Cricima em termos de parmetros fsico-qumicos. Alexandre & Krebs (1996) observaram baixos valores de pH (4,56 a 6,25 ) e de OD (0,25 a 1,32 mg L-1), bem como elevados valores de DBO (69,01 a 481,92 mg L-1) e de DQO (287,38 a 1.010,97 mg L-1) em amostras de guas coletadas em diferentes pontos do Rio Cricima, sendo sugerido que os mesmos poderiam ser decorrentes da contaminao das guas por resduos da minerao de carvo, esgotos domsticos, comerciais e industriais. Semelhante perfil tambm foi descrito por Schnack (2007), onde foi constatado baixo valor de OD (3,25 mg L-1) e de pH (5,32) e valor de Dureza de 119,17 mg L-1 em amostras de guas do Rio Cricima em virtude da possvel presena de contaminantes ambientais em soluo. Galatto et al. (2011) constataram elevada concentrao de ferro e mangans em amostras de guas coletadas na nascente do Rio Cricima. Portanto, os resultados dos parmetros fsico-qumicos obtidos em nossos estudos permitem sugerir que guas do Rio Cricima coletadas na regio central estariam com a sua

qualidade comprometida, sugerindo o seu potencial txico para a biota exposta. Toxicidade aguda em Daphnia magna Ensaios de toxicidade aguda tm sido utilizados como ferramenta para a avaliao do potencial efeito txico de mananciais hdricos em organismos bioindicadores, incluindose os microcrustceos (Mendes et al., 2011). Os resultados obtidos no teste de toxicidade aguda em microcrustceos Daphnia magna expostos s guas coletadas nas estaes do Rio Cricima esto descritos na Tabela 2. Pode-se constatar que houve toxicidade aguda somente nos organismos expostos s guas coletadas na estao 2, sendo que nas demais no foi constatada mortalidade nas diferentes diluies utilizadas nas amostras. Schnack (2007) tambm observou toxicidade aguda em Daphnia magna (FT = 5,9) quando exposta s guas do Rio Cricima, sendo sugerido que o efeito deletrio estaria associado contaminao por diferentes poluentes. Outros trabalhos da literatura tambm tem descrito toxicidade aguda nestes microcrustceos, quando expostos gua de rios atingidos por vrios tipos de contaminantes, incluindose efluentes industriais e domsticos, resduos hospitalares contendo metais, compostos orgnicos halogenados e coliformes fecais (Emmanuela et al., 2005; Geremias et al., 2008; Lattuada et al., 2009; Xianliang et al., 2010). Tem-se proposto que em ambientes aquticos atingidos por contaminantes pode haver distrbios respiratrios, osmorregulatrios, processos mutagnicos e cancergenos e at a morte da biota exposta (Ridge & Seif, 1998). Desta forma, o efeito deletrio nos microcrustceos observados em nossos estudos poderia estar associado presena de contaminantes lanados no corpo hdrico. Fitotoxicidade em Allium cepa L. O emprego de testes de fitotoxicidade utilizando Allium cepa L. como organismo bioindicador tem sido recomendado para a avaliao da qualidade de ambientes aquticos (Mendes et al., 2011). Os resultados observados no teste de inibio do crescimento de razes em Allium cepa L. expostos s guas do Rio Cricima nas diferentes estaes de coleta e gua mineral (controle negativo) esto apresentados na Figura 1. Foi possvel constatar que as guas coletadas nas estaes 2 e 3 provocaram significativa inibio do crescimento das razes, quando comparado controle negativo. Outros trabalhos da literatura tambm tem relatado inibio de crescimento de razes de Allium cepa L. exposta a mananciais hdricos e a efluentes
Tabela 2 - Toxicidade aguda em Daphnia magna expostos s guas coletadas nas diferentes estaes do Rio Cricima. Estaes 1 2 3 Fator de Toxicidade (FT) 1 3 1

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xenobiticos especficos, conforme j discutido anteriormente. Portanto, nossos resultados permite sugerir que as guas da regio central do Rio Cricima foram capazes de promover efeitos fitotxicos, sugerindo o comprometimento de sua qualidade. Teste de genotoxicidade em Allium cepa L. e em Geophagus brasiliensis. A utilizao de biomarcadores de genotoxicidade, especificamente, teste de fragmentao do DNA de grande relevncia para avaliao de qualidade de ambientes aquticos, uma vez que so capazes de detectar alteraes em nvel biolgico antes mesmo do surgimento de efeitos letais (Geremias et al., 2012).
Figura 1. Inibio do crescimento das razes em Allium cepa L. expostas s guas coletadas nas diferentes estaes do Rio Cricima e gua mineral como controle negativo. (a) Representa diferena significativa (p<0,001) em relao ao controle negativo; (b) Representa diferena significativa (p<0,001) em relao estao 1; (c) Representa diferena significa (p<0,01) em relao estao 1. Anlise de Varincia (ANOVA), complementada pelo teste de Bonferroni.

As Figuras 2 e 3 apresentam, respectivamente, os resultados dos testes de genotoxicidade em Allium cepa L. e em peixes

oriundos de diversas atividades antrpicas (Srivastava et al., 2005; Radia et al., 2010; Geremias et al., 2012). A inibio do crescimento de razes poderia estar relacionada presena de contaminantes no meio aqutico, tais como metais e compostos orgnicos, os quais poderiam comprometer a produo de clulas meristemticas (Dovgaliuk et al., 2001; Patrcia et al., 2003; Ezaki et al., 2004; Ledislav et al., 2006; Gliska et al., 2007). Conforme tambm constatado com os microcrustceos, no foi observado o efeito fitotxico no grupo exposto s guas coletadas na estao 1, provavelmente em virtude de sua melhor qualidade, quando comparado s demais estaes de coleta. Entretanto, observou-se diferena de resultados entre Daphnia magna e Allium cepa L. expostos s guas coletadas na estao 3, o que poderia estar associada diferena em seus mecanismos de proteo e/ou detoxificao frente exposio a

Figura 2. ndice de Dano ao DNA em Allium cepa L. expostas s guas coletadas nas diferentes estaes do Rio Cricima e gua mineral como controle negativo. (a) Representa diferena significativa (p<0,001) em relao ao controle negativo; (b) Representa diferena significativa (p<0,001) em relao estao 1. Anlise de Varincia (ANOVA), complementada pelo teste de Bonferroni.

Figura 3. ndice de Dano ao DNA em clulas sanguneas (A) e em fgado (B) de Geophagus brasilienses expostos s guas coletadas nas diferentes estaes do Rio Cricima e gua mineral como controle negativo. (a) Representa diferena significativa (p<0,001) em relao ao controle negativo; (b) Representa diferena significativa (p<0,001) em relao estao 1. Anlise de Varincia (ANOVA), complementada pelo teste de Bonferroni.

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Geophagus brasiliensis expostos s guas do Rio Cricima coletadas nas diferentes estaes, bem como gua mineral como controle negativo. Pode-se constatar significativo ndice de dano ao DNA em ambos os organismos bioindicadores expostos s guas coletadas nas estaes 2 e 3, quando comparados estao 1 e ao controle negativo. Em trabalho descrito por Teixeira et al. (2004) tambm foi constatado significativo ndice de dano ao DNA determinado pelo teste cometa em Allium cepa L. expostas s guas coletadas em rio da regio sul catarinense (ID = 150,3 11,5), quando comparado ao controle negativo (ID = 47,1 4,5), tendo sido sugerido que o efeito genotxico seria decorrente da contaminao das guas por resduos da minerao de carvo. Benassi et al. (2006) avaliaram genotoxicidade em sangue e fgado de tilpia (Oreochromis niloticus) pelo teste cometa, ao serem expostos por 7, 15 e 30 dias a efluentes gerados na minerao de carvo coletados no municpio de Siderpolis, regio sul de Santa Catarina. Foi observado aumento no ndice de Dano ao DNA em clulas hepticas (50% em 7 e 15 dias) e em sangue (79%, 77% e 48% aos 7, 15 e 30 dias, respectivamente). O efeito genotxico observado em nossos estudos poderia estar associado capacidade dos contaminantes presentes nas guas em reagir diretamente com biomolculas ou de forma indireta, promovendo alterao estrutural e funcional do DNA, com conseqente processo de mutagnese, carcinognese, teratognese, aberraes cromossmicas, distrbios do ciclo celular e da diviso celular, apoptose e fragmentao do DNA (Athanasios et al., 2000; Gerber et al., 2002; Greenwell et al., 2002; Lingard et al., 2005; Gilli et al., 2007). Portanto, os resultados obtidos em todos os ensaios realizados no presente estudo permitem sugerir que as guas do Rio Cricima coletadas na regio central da cidade (estaes 2 e 3) apresentaram valores aumentados DBO e DQO e menores de OD, quando comparados s guas prximas a nascente (estao 1). Semelhante perfil tambm foi observado nos ensaios com os organismos bioindicadores, nos quais foram constatados efeitos txicos e genotxicos frente exposio s guas coletadas na regio central. Estes resultados permitem sugerir uma melhor qualidade das guas no ponto inicial do rio, vindo a ser comprometida ao longo de sua passagem pela regio central da cidade, provavelmente em virtude da descarga de contaminantes potencialmente txicos oriundos das atividades antrpicas, notadamente, de resduos industriais, comerciais, domsticos e hospitalares que so diariamente lanados em suas guas. CONCLUSO A partir dos resultados obtidos, possvel concluir que as guas do Rio Cricima coletadas nas estaes da regio central da cidade apresentaram valores de parmetros fsico-qumicos capazes de comprometer os sistemas biolgicos da biota exposta, quando comparados s amostras da regio prxima nascente do rio. Da mesma forma, tambm foram evidenciados efeitos txicos agudos em microcrustceos Daphnia magna e fitotxico

em Allium cepa L., bem como genotoxicidade em Allium cepa L. e em peixes Geophagus brasiliensis quando expostos s guas coletadas nas estaes da regio central, estando estes efeitos ausentes na exposio s guas do ponto inicial do rio. Os resultados permitem demonstrar o comprometimento da qualidade das guas partir de sua passagem pela regio central da cidade, o que poderia estar associado ao lanamento de contaminantes provenientes de diferentes atividades antrpicas. Estes estudos so considerados preliminares e, para que se tenha um melhor diagnstico da qualidade das guas do Rio Cricima, so necessrios trabalhos complementares, utilizando coletas peridicas e avaliando diferentes ensaios ecotoxicolgicos e outros parmetros fsico-qumicos de qualidade, alm da anlise de possveis contaminantes presentes no corpo hdrico. AGRADECIMENTOS Os autores agradecem Universidade do Extremo Sul Catarinense e Universidade Federal de Santa Catarina pelo suporte tcnico e financeiro. REFERNCIAS
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