F -X C h a n ge F -X C h a n ge

PD PD

!
W

W
O

O
N

N
y

y
bu

bu
to

to
k

k
lic

lic
C

C
w

w
m

m
w w
w

w
o

o
.d o .c .d o .c
c u -tr a c k c u -tr a c k

VALIDITAS PEMERIKSAAN UJI AGLUTININ O DAN

H S.typhi DALAM MENEGAKKAN DIAGNOSIS DINI
DEMAM TIFOID
Sylvia Y. Muliawan*), Lucky Hartati Moehario**), Pratiwi Sudarmono***)
*) Bagian Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Universitas Trisakti Jakarta
**) Bagian Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia Jakarta

Abstract

Diagnostic of suspected Typhoid Fever is still based on the Widal test, despite of
previous studies that had a low sensitivity and specificity. The aim of the Widal test to
examine the titer of anti O and H agglutinin S. typhi, but it is generally know that anti H
agglutinin S. typhi does not have a diagnostic value. This present study was carried out to re-
evaluate the validity of anti O agglutinin S. typhi compared to anti H agglutinin S. typhi as a
diagnostic of suspected Typhoid Fever. Our results showed that the sensitivity, specificity,
positive predictive value, and negative predictive value of anti O agglutinins S. typhi titer was
37%, 97.8%, 90.9%, and 72.6%, respectively. Moreover anti H Agglutinins S.typhi titer had a
sensitivity of 66.7%, a specificity of 82.6%, a positive predictive value of 69.2%, and a
negative predictive value of 80.9%. Based on the high result of the positive predictive value of
anti agglutinin O S. typhi titer, in the future Fever. To increase the sensitivity value of the
Widal test, we have to pay attention to the time for specimen collection, i.e. in the second or
the third weeks of fever which is a valuable time for specimen collection to diagnose. Typhoid
fever. (J.Kedoktera Trisakti 2000;19(2):82-6)

Pendahuluan Selanjutnya dari kasus-kasus penyakit

Penyakit demam rifoid yang
disebabkan oleh Salmonella typhi (S.typhi)
merupakan penyakit infeksi sistemik,
bersifat endermis, dan masih merupakan
problem kesehatan masyarakat di Negara-
negara sedang berkembang di dunia,
termasuk Indonesia. Data epidermiologis
setiap tahun diperoleh dari beberapa
Negara yang mencatat hasil laporannya
dari data klinik atau laboratorium, karena
data yang benar-benar dapat
menggambarkan insiden penyakit ini di
masyarakat sukar didapatkan. Pada
penelitian Thong, dkk. (1) yang dilakukan
pada tahun 1994, menunjukkan bahwa
pada kasus demam tifoid setiap tahun di
dunia mencapai 21 juta dengan angka
kematian lebih dari 700.000. Di Indonesia
penyakit ini mempunyai klecenderungan
meningkat yaitu insiden pada tahun 1990
adalah 92 menjadi 15.4 per 10.000
penduduk pada tahun 1994.(2) Angka
kematian penyakit demam tifoid adalah 2-
5% dari seluruh kasus kematian. (3,4)
demam tifoid, sekitar 3-5% pasien menjadi
(5,7)
karier asimtomatik , sehingga
merupakan sumber infeksi baru lagi bagi
masyarakat sekitarnya. Kecenderungan
meningkatnya angka kejadian demam
tifoid di Indonesia karena beberapa faktor,
antara lain urbanisasi, sanitasi buruk,
karier yang tidak terdeteksi, dan
keterlambatan diagnosis (1). Keterlambatan
dalam menegakkan diagnosis demam
tifoid antara lain disebabkan oleh masa
tunas penyakit yang dapat berlangsung 10-
14 hari bahkan dapat lebih panjang sampai
30 hari dan metode pemeriksaan
laboratorium yang digunakan. (3,5,7,8)
Dengan melihat data tersebut, baik insiden
demam tifoid yang makin relative tinggi,
maka dikembangkan beberapa
pemeriksaan mikrobiologi yang dapat
memberikan hasil dengan cepat, sensitive
dan dapat dipercaya. Metode tersebut
antara lain adalah penggunaan antibody
monoclonal (9,10), polymerase chain
reaction (PCR) (11,12) enzyme immunoassay
Dot (EIA dot) (13,16), dan enzyme linked

82
 F -X C h a n ge
PD
W
O
N
y
bu
to
k
lic
C
w
m
w w
w
o
.d o .c
c u -tr a c k
immunosorbent assay (ELISA) (14,17,20)
yang dikenal sebagai metode non
konvensional. Metode tersebut masing-
masing mempunyai kelemahan dan
keuntungan. Dari segi biaya pemeriksaan
metode ini memerlukan biaya yang lebih
mahal disbanding dengan cara konvesional
yaitu kultur dan uji Widal. Oleh karena itu
penelitian ini bertujuan menilai validasi
pemeriksaan titer agglutinin O dan H S.
Typhi pada psien dewasa demam tifoid
untuk membantu menegakkan diagnosis
dini demam tifoid yang sebenarnya sudah
diketahui mempunyai sensitivitas dan
spesifisitas rendah. (21)
Metode
Spesimen : darah diambil sebanyak 5
cc (untuk kultur, uji Widal dan
pemeriksaan lain) pada saat pasien masuk
Rumah Sakit (satu kali pengambilan)
dengan criteria inklusi sebagai berikut:
pasien dewasa rawat inap, panas lebih dari
5 hari terutama sore dan malam hari, suhu
diatas 380C, pra-terapi antibiotika di
Rumah Sakit. Pengumpulan specimen
dilakukan selama 6 bulan (januari sampai
dengan Juni 1997) dan terkumpul
sebanyak 143 spesimen. Kelompok studi
dibagi dalam 3 kelompok, kelompok I
dengan demam (bakteriologik S. typhi
positif) berjumlah 27 pasien; kelompok II
dengan demam (bakteriologik S. typhi
negative) berjumlah 46 pasien; dan
kelompok III dengan tidak ada demam
(bakteriologik tidak dikerjakan) berjumlah
70 pasien sebagai control.
Identifikasi S. thyphi dari specimen
dilakukan melalui biakan. Metode yang
dipakai adalah metode baku (kultur
empedu, media agar Salmonella-Shigella,
reaksi biokimia). Pemeriksaan uji Widal
dilakukan pada serum pasien dengan
metode titrasi slide cara cepat
menggunakan Kit dari Murex Diagnostica
SA, France yang terdiri dari antigen S.
Typhi O dan H. Pengenceran serum
dilakukan dengan menggunakan cairan
NACl fisiologis dalam perbandingan 1:80,
1:160, 1:320, 1 :640, 1:1280, 1:2560, dan
1:5120. Berdasarkan petunjuk Kit tersebut,
nilai cut-off (nilai ambang atas) untuk
menyatakan hasil uji Widal positif adalah
F -X C h a n ge
PD
!
W
O
N
y
bu
to
k
lic
C
w
m
w
o
.d o .c
c u -tr a c k
pada pengeceran doatas 1:80, yang artinya
aglutinasi antara serum pasien dengan anti
serum standard Kit maka dinyatakan hasil
uji Widal positif, tetapi bila tidak terjadi
aglutinasi pada uji tersebut maka hasil
dinyatakan negative.
Hasil
Dari kelompok I dengan hasil kultur
positif S.typhi, didapat hasil titer antibodi
terhadap antigen O S.typhi dengan variasi
titer negatif sampai dengan titer tertinggi
1280 (51.9% untuk titer O 160, 25.9%
untuk titer O 1280), sedangkan untuk hasil
titer antibodi terhadap antigen H S.typhi
didapat variasi titer negatif sampai dengan
titer tertinggi 5120 (18.5% untuk titer H
negatif, 7.4% untuk titer H 160, 18.5%
untuk titer H 320, 18.5% untuk titer H
640. 18.5% untuk titer H 1280, 7.4%
untuk titer H 2560 dan 3.7% untuk titer H
5120). Dari kelompok II dengan hasil
kultur negatif S.typhi mempunyai titer
antibodi terhadap antigen S.typhi
Obervariasi mulai titer negatif sampai
dengan titer 160 (87.0% untuk titer H
negatif, 10.9% untuk titer O 80, 22%
untuk titer O 160), dan untuk titer antibodi
terhadap antigen H S.typhi bervariasi
mulai titer negatif sampai dengan titer 320
(96.3% untuk titer H negatif 2.2% untuk
titer H 320). Dari kelompok lll sebagai
kontrol titer antibodi terhadap antigen O
S.typhi antibodi terhadap antigen H
S.typhi bervariasi antara titer negatif
sampai dengan titer 640 (71.4% untuk titet
H negatif, 7.2% untuk titer H 80, 4.3%
untuk titer H 160, 4.3% untuk titer H 320,
12.9% titer H 640).
Berdasarkan petunjuk Kit Murex
yang dipakai, hasil uji Widal dinyatakan
positif, bila titer aglutinin O S. Typhi
adalah diatas 80, sedangkan untuk titer
tersebut diatas 160. Dari hasil uji titer
aglutinin O S. Typhi bila dibandingan
dengan hasil kultur sebagai baku emas,
maka diperoleh sensitivitas 37%,
spesifisitas 97%, nilai pediksi positif
90.9%, dan nilai prediksi negatif 72.6%
(Tabel ) dan untuk hasil uji prediksi titer
aglutinin H S. Typhi diperoleh hasil
prediksi positif 69.2%, dan nilai prediksi
negatif 80.9% (tabel 2)
83
 F -X C h a n ge F -X C h a n ge
PD PD

!
W

W
O

O
N

N
y

y
bu

bu
to

to
k

k
lic

lic
C

C
w

w
m

m
w w
w

w
o

o
.d o .c .d o .c
c u -tr a c k c u -tr a c k

Tabel 1 : Perbandingan antara titer aglutinin O S. typhi terhadap biakan

Uji Widal Biakan Total

Positif Negatif

Positif 10 1 11

Negatif 17 45 62

Total 27 46 73

Tabel 2 : Perbandingan antara titer agglutinin H S. Typhi terhadap biakan

Uji Widal Biakan Total

Positif Negatif

Positif 10 1 11

Negatif 17 45 62

Total 27 46 73

Pembahasan hasil uji titer agglutinin H S.typhi

Dari hasil penelitian uji serologi
Widal dengan satu kali pengambilan pada
pasien dengan demam, diperoleh hasil titer
aglutinin O S.typhi dengan nilai prediksi
positif 90.9% yang artinya kemungkinan
pasien menderita demam tifoid sebesar
90.9% bila hasil uji terhadap agglutinin O
S.typhi dinyatakan positif. Hasil uji titer
agglutinin O S. typhi memberikan nilai
sensitivitas rendah, yang artinya walaupun
secara bakteriologik dinyatakan S.typhi
positif, hasil uji Widal dapat memberikan
hasil negative (22), sebaiknya hasil uji
Widal negative belum dapat
menyingkirkan diagnosis demam tifoid.
Hal ini mungkin karena pengambilan
specimen dilakukan pada minggu pertama,
sehingga titer antibody belum dapat
terdeteksi. Hal ini didukung oleh
penelitian Senewiratne, dkk. (23) yang
menyatakan kenaikan titer antibody ke
level diagnostic pada uji Widal umumnya
paling baik pada minggu ke dua atau ke
tiga, yaitu 95.7% sedangkan kenaikan titer
pada minggu pertama hanya 85.7%. Untuk
memberikan nilai prediksi negative 80.9%
yang artinya kemungkinan pasien tidak
menderita demam tifoid adalah sebesar
80.9% bila hasil uji terhadap agglutinin H
S.typhi negative. Meskupun hasil uji titer
agglutinin H S.typhi memberikan nilai
sensitivitas 66.7% yang ternyata lebih
tinggi daripada hasil uji titer agglutinin O
S.typhi, tetapi uji ini tidak mempunyai
nilai diagnostic untuk demam tifoid. Hal
ini disebabkan antara lain karena di
Indonesia demam tifoid merupakan
penyakit endermis yang secara konstan
terpapar dengan organisme tersebut dan
mempunyai titer antibody mungkin lebih
tinggi daripada daerah non-endermis pada
orang yang tidak sakit.(23,24)
Kesimpulan
Dari hasil penelitian tersebut dapat di
simpulkan bahwa pemeriksaan
laboratorium uji Widal pada satu kali
pengambilan darah pasien untuk
membantu menegakkan diagnosis demam
tifoid sebaiknya cukup dilakukan

84
 F -X C h a n ge F -X C h a n ge
PD PD

!
W

W
O

O
N

N
y

y
bu

bu
to

to
k

k
lic

lic
C

C
w

w
m

m
w w
w

w
o

o
.d o .c .d o .c
c u -tr a c k c u -tr a c k

pemeriksaan terhadap titer agglutinin O S. patients J Clin Microbiol 1998;

typhi, karena mempunyai nilai prediksi
positif 90.9%. Agar dapat meningkatkan
nilai sensitivitas pemeriksaan tersebut,
sebaiknya pengambilan darah dilakukan
pada minggu ke dua dank e tiga masa
sakit.
Daftar Pustaka
1. Thong KL. Cheong YM,
Puthucheary S. Koch CL, Pang T.
Epidemiologic analysis of sporadic
Salmonella typhi isolates and those
from outbreaks by Pulsed-Field Gel
Electrophoresis. J Clin Microbiol
1994;32(5):1135-41.
2. Departemen Kesehatan Republik
Indonesia. Data Sueveilans tahun
1994, Jakarta: Sub Direktorat
Surveilans Direktorat Epidemiologi;
1995.
3. Hoffman SL. Typhoid Fever.
In:Strickland GT. ed. Hunter’s
tropical medicine. Philadelphia:
WB. Sauders, 1991. p.344-59 1991.
4. Simanjuntak CH. Masalah demam
tifoid di Indonesia. Cermin Dunia
Kedokteran 1990; 60:31-3.
5. Juwono R. Demam tifoid. Dalam:
Soeparman, Sukaton U, Daldiyono,
Nelwan RHH, Ranakusuma ABS,
Djoerban Z, et al (eds). Ilmu
Penyakit Dalam, jilid I, edisi 3.
Jakarta, Balai Penerbit
FKUI;1996.p.435-41
6. Keusch GT. Salmonellosis.
In:Harrison’s Principle of Internal
Medicine, 14th ed. New York: 1998’
vol 1,p.950-4.
7. Mills SD, Finaly BB. Virulence
Factors of Salmonella typhi.
Southeast Asia J Trop Med Public
Health 1995;26(Suppl 2):102-6.
8. Salyers AA, Whitt DD. Salmonella
Infection. In: Bacterial
Pathogenesis. A Moleculsr
Approach Washington DC; 1994.
p.229-43.
9. Chaicumpa W, Inta WT, Khusmith
S, Tapchaisri P, Echeverria P,
Kalamhaheti T et al. Detection with
Monoclonal Antibody of S.typhi
antigen 9 in specimens From
26(9): 1824-30.
10. Ekpo P, Sarasombath S, Banchuin
N, Sirisinha S. Monoclonal
Antibodies to 52 kilodalton Protein
Salmonella typhi. J Clin Microbiol
1990;28:1818-21.
11. David LP, Koh CL, Puthucheary
SD, Devi S, Pang T. Polymerase
Chain Reaction (PCR) In the
detection of S.typhi DNA. Dalam:
Proceeding Typhoid Strategis for the
90’s, Kuala Lumpur, 1990:78-83.
12. Zhu O,LimCK, Chan YN. Detection
of Salmonella typhi by PCR.
Southeast Asian J Trop Med Public
Health 1995;26(Suppl 2): 227-9.
13. Ismail A. Development of a Dot
EIA for the rapid diagnosis of
Typhoid Fever. Dalam Proceeding
Typhoid fever Strategies for the
90’s, Kuala Lumpur,1990: 201-6.
14. Ismail A, Tuan Ibrahim TA, Choo
KE, Ghazali WNW. Recent
Advances in the rapid serodiagnosis
of Typhoid. Dalam Third Asia
Pacific Symposium on Typhoid
fever and Other Salmonellosis,
Denpasar, Bali 8 – 10 Desember 1
997; Abstrct book:32.
15. Jakson AA, Ismail A, Ibrahim A,
Kader ZSA, Nawi NM. Retropective
review of Dot Enzyme
Immunoassay test for Typhoid Fever
in an endemic area. Southeast Asia J
Trop Med Public Health, 1995;
26(4): 625-30.
16. Ong KH, Ismail A, Choo KE, Kader
ZK. Clinical field trials on the Dot
Enzyme Immunosorbent assay
(EIA) for the diagnosis of Typhoid
fever. Dalam: Typhoid Fever
Strategies for the 90’s Kuala
Lumpur, 1990:207-14.
17. Nardiello S,Pizzella T, Russo M,
Galanti B. Serodiagnosis of Typhoid
fever by Enzyme linked
Immunosorbent Assay
determination of anti Salmonella
typhi Lipopolisaccharide antibodies.
J Clin Microbiol 1984: 20(4):718-
21.
18. Sippel J, Bukhtiari N, Awan B,
Krieg R, Duncan JF, Karamat KA et

85
 F -X C h a n ge F -X C h a n ge
PD PD

!
W

W
O

O
N

N
y

y
bu

bu
to

to
k

k
lic

lic
C

C
w

w
m

m
w w
w

w
o

o
.d o .c .d o .c
c u -tr a c k c u -tr a c k

al. Indirect IgG and IgM ELISAs
and IgM capture ELISA for
detection. J Clin Microbiol 1989;
27(6): 1298-1302.
19. Rodrigues AV, Vidal YL, Puente
JL, Palacios GMR, Calva E. Early
diagnosis of Typhoid fever by an
Enzyme Immunoassay using
Salmonella typhi outer membrane
protein preparation. Eur J Clin
Microbiol Infect Dis 993;12(4):248-
54.
20. Muliawan SY, Sudarmono P,
Moehario LH. Enzyme Linked
Immunoassay for Early Outer
Membrane Protein Med J Indones
1998;7(Suppl.l):211-3.
21. Schroeder SA. Interpretation of
serologic tests for Typhoid Fever.
Jama 1968; 206(4):839-40.
22. Boomsma LJ, Guinee PAM, Jansen
WH, Maas HEM. Value of the
Widal test in the diagnosis of
Typhoid Fever in an endermic area
and suggestiond for a modification.
A preliminary study. Trop Geogr
Med 1988;40:103-8.
23. Senewirate B, Chir B, Senewiratne
K. Reassessment of Widal test in the
diagnosis of Typhoid Fever.
Gastroenterology 1997;73:233-6.
24. Rockhill RC, Moechtar A, Soetomo
A. Comparison of the Widal test
with S.typhi isolation from Typhoid
Fever isolate from Typhoid Fever
Patients in Jakarta, Indonesia
Medikal 1981;6:351-4.

86