PENCEMARAN MAKANAN

JENIS PARAM STANDAR / BAKU

NO BAHAN PENCEMAR SUMBER
MAKANAN ETER MUTU
Produk-Produk Susu dan Analognya
ALT 30oC, 72 jam 5 x 104 koloni/ml
APM Koliform 10/ml
Susu Pasteurisasi APM Escherichia coli <3/ml Peraturan kepala
1 (Plain atau Biologi
Salmonella sp. mktt BPOM RI
berperisa)
Staphylococcus aureus 1 x 102 koloni/ml
Listeria monocytogenes negatif/25 ml
Susu steril dan susu
ALT 30oC, 72 jam setelah Peraturan kepala
2 UHT (plain atau Biologi <10 koloni/ 0,1 ml
inkubasi selama 15 hari BPOM RI
berperisa)

Susu fermentasi APM Koliform 10/ml

Peraturan kepala
3 (yoghurt) (plain Biologi
BPOM RI
atau berperisa) Salmonella sp. negatif/25 ml
Listeria monocytogenes negatif/25 ml

ALT 30oC, 72 jam 1 x 102 koloni/ml

Susu evaporasi atau Peraturan kepala
4 Biologi
susu skim evaporasi APM Koliform 10/ml BPOM RI
Salmonella sp. negatif/25 ml
Staphylococcus aureus 1 x 102 koloni/ml
ALT 30oC, 72 jam 1 x 102 koloni/g
Susu kental manis APM Koliform 10/ml
dan susu skim Peraturan kepala
5 Biologi Salmonella sp. negatif/25 ml
kental manis (plain BPOM RI
atau berperisa) Staphylococcus aureus 1 x 102 koloni/g
Kapang dan khamir 2 x 102 koloni/g
khimer nabati ALT 30oC, 72 jam 5 x 104 koloni/g
bubuk, Susu Bubuk APM Koliform 10/g* Peraturan kepala
6 Biologi
dan Susu Krim Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
Bubuk Staphylococcus aureus 1 x 102 koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 5 x 104 koloni/g
APM Koliform 10/g*
krim pasteurisasi, Peraturan kepala
7 Biologi Salmonella sp. negatif/25 g
Es Krim BPOM RI
Staphylococcus aureus 1 x 102 koloni/g
Listeria monocytogenes negatif/25 g
ALT 30oC, 72 jam 2 x 105 koloni/g
Peraturan kepala
8 Bubuk Buttemilk Biologi APM Koliform 10/g*
BPOM RI
Salmonella sp. negatif/25 g
APM Escherichia coli 10/g*
Salmonella sp. negatif/25 g Peraturan kepala
9 Keju (Semua Jenis) Biologi
Staphylococcus aureus 1 x 102 koloni/g BPOM RI
Listeria monocytogenes negatif/25 g
ALT 30oC, 72 jam 5 x 104 koloni/g
APM Koliform <3/g* Peraturan kepala
10 Tepung Es Krim Biologi
Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
Staphylococcus aureus 2 x 101 koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104 koloni/g
Puding Matang, APM Koliform <3/g* Peraturan kepala
11 Biologi
Dingin dan Beku Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
Staphylococcus aureus 1 x 104 koloni/g
12 Bubuk Whey Biologi APM Koliform <3/g* Peraturan kepala
 Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
Lemak, Minyak dan Emulsi Minyak
ALT 30oC, 72 jam 1 x 105koloni/g
APM Koliform 10/g
Peraturan kepala
13 Lemak Reroti Biologi APM Escherichia coli < 3/g
BPOM RI
Salmonella sp. negatif/25 g
Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 105koloni/g
Koliform 1 x 101koloni/g
Peraturan kepala
14 Mentega Biologi Salmonella sp. negatif/25 g
BPOM RI
Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
Listeria monocytogenes negatif/25 g
o
ALT 30 C, 72 jam 1 x 105koloni/g
APM Koliform 10/g
Peraturan kepala
15 Margarin Biologi APM Escherichia coli < 3/g
BPOM RI
Salmonella sp. negatif/25 g
Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
Es Untuk Dimakan (edible ice)
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
Es batu, es lilin, es Peraturan kepala
16 Biologi APM Koliform < 3/g
berperisa BPOM RI
Salmonella sp. negatif/25 g
Buah dan Sayur
Buah Kering ALT 30oC, 72 jam 1 x 105koloni/g
(Kismis, sale APM Koliform < 3/g Peraturan kepala
17 Biologi
pisang, mangga, BPOM RI
dll) Kapang/khamir 5 x 101koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 105koloni/g
Manisan Buah APM Koliform 10 /g Peraturan kepala
18 Biologi
Basah APM Escherichia coli < 3 /g BPOM RI
Kapang dan khamir 1 x 102koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 105koloni/g
Manisan Buah APM Koliform 10 /g Peraturan kepala
19 Biologi
Kering APM Escherichia coli < 3 /g BPOM RI
Kapang 5 x 101koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 102koloni/g
Koliform < 3 APM/g Peraturan kepala
20 Buah dalam Kaleng Biologi
Staphylococcus aureus negatif/g BPOM RI
Clostridium perfringens negatif/g

ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g

Jem, jeli buah, dan APM Koliform < 3/g Peraturan kepala
21 Biologi
marmalad, jeli agar Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g BPOM RI
Clostridium perfringens < 1 x 101koloni/g
Kapang dan khamir 1 x 102koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 105koloni/g
santan cair, pasta APM Koliform 10/g Peraturan kepala
22 Biologi
kelapa, krim kelapa Salmonella sp. < 3/g BPOM RI
Staphylococcus aureus negatif/25 g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 106koloni/g
APM Koliform 100/g
Peraturan kepala
23 Kelapa parut kering Biologi APM Escherichia coli <3/g
BPOM RI
Salmonella sp. negatif/25 g
Kapang dan khamir 1 x 102koloni/g
Nata dalam ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g Peraturan kepala
24 Biologi
kemasan APM Koliform <3/g BPOM RI
 Kapang dan khamir 1 x 102koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
APM Koliform 20/g
Lempok dan APM Escherichia coli <3/g Peraturan kepala
25 analognya yang Biologi
Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
berbasis buah
Staphylococcus aureus < 1 x 101koloni/g
Kapang dan khamir 1 x 102koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
Keripik Berbasis APM Escherichia coli <3/g Peraturan kepala
26 Biologi
Buah Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g BPOM RI
Kapang 5 x 101koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 5 x 105koloni/g
Koliform 5 x 102koloni/g
Sayuran Beku dan Peraturan kepala
27 Biologi APM Escherichia coli <3/g
Sayuran Kering BPOM RI
Salmonella sp. negatif/25 g
Kapang 1 x 102koloni/g
Acar dan Sayuran APM Koliform <3/g Peraturan kepala
28 Biologi
Asin Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
ALT 30oC, 72 jam 1 x 102koloni/g
Sayuran dalam APM Koliform <3/g Peraturan kepala
29 Biologi
Kaleng Staphylococcus aureus negatif/ g BPOM RI
Clostridium perfringens negatif/ g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
Keripik berbasis
sayur, umbi-umbian APM Escherichia coli <3/g
dan kacang-
Peraturan kepala
30 kacangan (gadung, Biologi Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g BPOM RI
singkong, talas,
kentang, ubi jalar,
jamur) Kapang 5 x 101koloni/g

ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g

Kue berbasis sayur,
umbi-umbian dan APM Koliform <3/g
kacang-kacangan Peraturan kepala
31 Biologi Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
(gadung, singkong, BPOM RI
talas, kentang, ubi
jalar, jamur)
Kapang dan khamir 1 x 102koloni/g

Kembang gula/ permen dan coklat

ALT 30oC, 72 jam 3 x 104koloni/g
Kakao bubuk, APM Escherichia coli <3/g Peraturan kepala
32 Biologi
kakao massa Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
Kapang dan khamir 1 x 102koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
Produk Kakao dan APM Escherichia coli <3/g Peraturan kepala
33 Biologi
Coklat Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
Kapang dan khamir 1 x 102koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 5 x 102koloni/g
Kembang gula APM Koliform 20/g
keras dan kembang APM Escherichia coli <3/g Peraturan kepala
34 Biologi
gula lunak bukan Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
jeli Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
Kapang dan khamir 2 x 102koloni/g
35 Kembang gula Biologi ALT 30oC, 72 jam 5 x 104koloni/g Peraturan kepala
 lunak jeli APM Koliform 20/g BPOM RI
APM Escherichia coli <3/g
Salmonella sp. negatif/25 g
Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
Kapang dan khamir 2 x 102koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 5 x 103koloni/g
APM Koliform 20/g
Kembang gula APM Escherichia coli <3/g Peraturan kepala
36 karet, kembang Biologi
Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
gula nirgula
Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
Kapang dan khamir 2 x 102koloni/g
Serelia dan produk serelia
Tepung tapioka, ALT 30oC, 72 jam 1 x 106koloni/g
tepung hunkwee,
APM Escherichia coli 10/g
tepung kacang
hijau, tepung Bacillus Cereus < 1 x 104koloni/g
singkong, tepung
sagu, tepung garut, Peraturan kepala
37 Biologi
tepung jagung,, BPOM RI
tepung gandum,
Kapang 1 x 104koloni/g
tepung beras,
tepung siap pakai
untuk kue, tepung
aren
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
APM Escherichia coli 10/g
Salmonella sp. negatif/25 g Peraturan kepala
38 Tepung pisang Biologi
Staphylococcus aureus negatif/g BPOM RI
Bacillus Cereus 1 x 104koloni/g
Kapang dan khamir 2 x 102koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
Sereal untuk Peraturan kepala
39 Biologi APM Escherichia coli <3/g
sarapan tanpa susu BPOM RI
Kapang 5 x 101koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 5 x 104koloni/g
APM Koliform 100/g
APM Escherichia coli <3/g
Peraturan kepala
40 Susu sereal bubuk Biologi Salmonella sp. negatif/25 g
BPOM RI
Staphylococcus aureus negatif/ g
Bacillus Cereus 1 x 102koloni/g
Kapang 5 x 101koloni/g
Bihun, spagetti, mi ALT 30oC, 72 jam 1 x 106koloni/g
kering, sohun, mi
APM Escherichia coli 10/g
instan, makaroni,
pasta kering produk Staphylococcus aureus 1 x 103koloni/g Peraturan kepala
40 Biologi
akhir serelia yang Bacillus Cereus 1 x 103koloni/g BPOM RI
masih perlu
pengolahan lebih Kapang 1 x 104koloni/g
lanjut
ALT 30oC, 72 jam 1 x 106koloni/g
APM Escherichia coli 10/g
Mi basah, pasta Salmonella sp. negatif/25 g Peraturan kepala
41 Biologi
mentah Staphylococcus aureus 1 x 103koloni/g BPOM RI
Bacillus Cereus 1 x 103koloni/g
Kapang 1 x 104koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 106koloni/g
Peraturan kepala
42 Tepung bumbu Biologi APM Escherichia coli <3/g BPOM RI
Bacillus Cereus 1 x 104koloni/g
 Kapang dan khamir 2 x 104koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
APM Koliform 20/g
Dodol, wingko, APM Escherichia coli <3/g
yangko berbasis Peraturan kepala
43 Biologi Salmonella sp. negatif/25 g
tepung beras ketan BPOM RI
dan wajik Staphylococcus aureus 10 koloni/g
Bacillus Cereus 1 x 102koloni/g
Kapang dan khamir 2 x 102koloni/g
APM Koliform 10/g
APM Escherichia coli negatif/g
Peraturan kepala
44 Tauco Biologi Salmonella sp. negatif/25 g
BPOM RI
Bacillus Cereus 1 x 103koloni/g
Kapang <10 koloni/g
Produk Olahan APM Koliform 10/g Peraturan kepala
45 Biologi
Tempe Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
o
ALT 30 C, 72 jam 5 x 104koloni/g
APM Koliform 20/ml
APM Escherichia coli <3/ml
Peraturan kepala
46 Sari Kedelai Biologi Salmonella sp. negatif/25 ml
BPOM RI
Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
Bacillus Cereus 1 x 103koloni/g
Kapang 5 x 101koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
Bakpia kacang APM Escherichia coli <3/g Peraturan kepala
47 Biologi
hijau Bacillus Cereus 1 x 102koloni/g BPOM RI
Kapang 1 x 102koloni/g
Produk Bakteri
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
Roti dan produk APM Escherichia coli 10/g
bakeri tawar dan Peraturan kepala
48 Biologi Salmonella sp. negatif/25 g
premiks (termasuk BPOM RI
tepung panir) Bacillus Cereus 1 x 102koloni/g
Kapang dan khamir 1 x 104koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
APM Koliform 20/g
Produk bakteri APM Escherichia coli <3/g
Peraturan kepala
49 istimewa (manis, Biologi Salmonella sp. negatif/25 g
BPOM RI
asin, gurih) Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
Bacillus Cereus 1 x 102koloni/g
Kapang dan khamir 2 x 102koloni/g
Daging dan Produk Daging
ALT 30oC, 72 jam 1 x 105koloni/g
Dendeng Sapi, APM Escherichia coli <3/g
daging asap yang Peraturan kepala
50 Biologi Salmonella sp. negatif/25 g
diolah dengan BPOM RI
panas Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
Bacillus Cereus 1 x 103koloni/g
Produk dagung ALT 30oC, 72 jam 1 x 105koloni/g
kering, (termasuk
APM Escherichia coli <3/g Peraturan kepala
51 abon); kerupuk Biologi
Salmonella sp. negatif/25 g BPOM RI
kulit, kerupuk paru,
keripik usus ayam Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
Daging olahan dan ALT 30oC, 72 jam 1 x 105koloni/g
daging ayam olahan APM Koliform 10/g Peraturan kepala
52 Biologi
(bakso, sosis, naget, APM Escherichia coli <3/g BPOM RI
burger) Salmonella sp. negatif/25 g
 Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g
Clostridium perfringens 1 x 102koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
APM Koliform <3/g
Sosis Masak (tidak
Salmonella sp. negatif/25 g Peraturan kepala
53 dikalengkan, siap Biologi
Staphylococcus aureus 1 x 102koloni/g BPOM RI
konsumsi)
Clostridium perfringens 10 koloni/g
Listeria monocytogenes negatif/25 g
Corned dalam ALT 30oC, 72 jam 1 x 102koloni/g Peraturan kepala
54 kaleng, sosis dalam Biologi
Clostridium perfringens negatif/g BPOM RI
kaleng
Ikan dan produk perikanan
Ikan filet ikan dan ALT 30oC, 72 jam 5 x 105koloni/g
produk perikanan
APM Escherichia coli <3/g
meliputi moluska,
krustase dan Salmonella sp. negatif/ 25 g
ekinodermata yang
dibekukan ; ikan, Peraturan kepala
55 Biologi
filet ikan dan hasil BPOM RI
perikanan termasuk Vibrio cholerae negatif/ 25 g
moluska, krustase
dan ekinodermata
berlapis tepung
yang dibekukan
ALT 30oC, 72 jam 5 x 105koloni/g
APM Escherichia coli <3/g
Hancuran dan sari Salmonella sp. negatif/ 25 g
ikan termasuk
Peraturan kepala
56 moluska, krustase Biologi
BPOM RI
dan ekinodermata
yang dibekukan Vibrio cholerae negatif/ 25 g

Ikan dan produk ALT 30oC, 72 jam 5 x 105koloni/g

perikanan termasuk
APM Escherichia coli <3/g
moluska, krustase
Salmonella sp. negatif/ 25 g Peraturan kepala
57 dan ekinodermata Biologi
BPOM RI
yang dikukus atau Staphylococcus aureus 1 x 103koloni/g
direbus dan atau
goreng Vibrio cholerae negatif/ 25 g
ALT 30oC, 72 jam 5 x 105koloni/g
Ikan olahan yang APM Escherichia coli <3/g
Peraturan kepala
58 diasap dengan atau Biologi Salmonella sp. negatif/ 25 g
BPOM RI
tanpa garam Staphylococcus aureus 1 x 103koloni/g
Kapang 1 x 102koloni/g
ALT 30oC, 72 jam 1 x 105koloni/g
Ikan olahan yang
APM Escherichia coli <3/g Peraturan kepala
59 dikeringkan dengan Biologi
Salmonella sp. negatif/ 25 g BPOM RI
atau tanpa garam
Vibrio cholerae negatif/ 25 g
Ikan olahan yang APM Escherichia coli <3/g
difermentasikan Salmonella sp. negatif/25 g Peraturan kepala
60 Biologi
dengan atau tanpa Staphylococcus aureus 1 x 103koloni/g BPOM RI
garam
Vibrio cholerae negatif/25 g
Ikan dan produk ALT aerob termofilik
<1 x 101koloni/g
perikanan awet, (30oC, 72 jam)
meliputi ikan dan ALT anaerob termofilik
<1 x 101koloni/g
produk perikanan (30oC, 72 jam) Peraturan kepala
61 Biologi
yang dikalengkan BPOM RI
atau difermentasi,
Clostridium sp negatif/g
termasuk moluska,
krutase dan
 ekinodermata
Telur dan produk-produk telur
Telur cair, putih ALT 30oC, 72 jam 5 x 104koloni/g
telur cair dan
APM Koliform 50/g
kuning telur cair
Salmonella sp. negatif/25 g Peraturan kepala
62 (dengan Biologi
BPOM RI
pasteurisasi) telur
beku, telur Staphylococcus aureus negatif/g
tepung/kering
Salmonella sp. negatif/25 g Peraturan kepala
63 Telur asin Biologi
Staphylococcus aureus 1
<1 x 10 koloni/g BPOM RI

ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g

makanan pencuci Peraturan kepala
mulut berbahan APM Koliform <3/g BPOM RI
64 Biologi
dasar telur
(misalnya custard) Salmonella sp. negatif/25 g
Staphylococcus aureus negatif/g
Pemanis, termasuk madu
ALT 30oC, 72 jam 1 x 104koloni/g
Pemanis selain Peraturan kepala
65 Biologi APM Koliform <3/g
madu BPOM RI
Kapang dan khamir 1X102 koloni/g
ALT <5X103 koloni/g
Peraturan kepala
66 Madu Biologi APM Koliform <3/g
BPOM RI
Kapang dan khamir <1X101 koloni/g
Garam, rempah, sup, saus, salad, produk protein
ALT 1X106 koloni/g
Herba dan rempah- Peraturan kepala
67 Biologi Koliform 1X102 koloni/g
rempah BPOM RI
APM Escherichia coli <3/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g
Koliform 1 x 10² koloni/g Peraturan Kepala
68 Bumbu Mie Instan Biologi
APM Eschericia coli <3/g BPOM RI
Kapang/Khamir 1 x 10⁴ koloni/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g
Koliform 1 x 10² koloni/g
APM Eschericia coli <3/g
Kondimen dan Peraturan Kepala
69 Biologi Salmonella sp negatif/25 g
Bumbu lainnya BPOM RI
Bacillus cereus 1 x 10² koloni/g
Clostridium perfringens 1 x 10² koloni/g
Kapang dan Khamir 2 x 10² koloni/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g Peraturan Kepala
70 Mustard Biologi
Kapang 1 x 10² koloni/g BPOM RI
ALT aerob (30⁰C, 72 Jam) <1 x 10¹ koloni/g
Sup dan Kaldu ALT anaerob (30⁰C, 72 Peraturan Kepala
71 Biologi <1 x 10¹ koloni/g
dalam Kaleng Jam) BPOM RI
Clostridium perfringens negatif/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁵ koloni/g
APM Koliform 20 /g
Sup Instan Bubuk APM Eschericia coli <3/g
Peraturan Kepala
72 (Termasuk Sup Biologi Salmonella sp negatif/25 g
BPOM RI
Krim Instan Bubuk) Staphylococcus aureus 1 x 10³ koloni/g
Clostridium perfringens 1 x 10² koloni/g
Kapang dan Khamir 1 x 10² koloni/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g
Bumbu Rasa Sapi, Peraturan Kepala
73 Biologi APM Koliform <3/g
Bumbu Rasa Ayam BPOM RI
Kapang dan Khamir 2 x 10² koloni/g
74 Saus Teremulsi Biologi ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g Peraturan Kepala
 (Misal: APM Koliform 10/g BPOM RI
Mayonnaise, Salad Salmonella sp negatif/25 g
Dressing)
Staphylococcus aureus 1 x 10² koloni/g
Sambal Terasi, APM Koliform <3/g
Kecap Kedelai,
Peraturan Kepala
75 Kecap Ikan, Kecap Biologi
Kapang 5 x 10¹ koloni/g BPOM RI
Air Kelapa, Saus
Tiram
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g
Saus Tomat, Saus APM Koliform 100/g Peraturan Kepala
76 Cabe dan Saus Non Biologi
Staphylococcus aureus 1 x 10² koloni/g BPOM RI
Emulsi lainnya
Kapang 5 x 10¹ koloni/g
Produk Oles Untuk
Salad (misalnya APM Koliform <3/g
salad makaroni,
salad kentang) dan Peraturan Kepala
77 Biologi
sandwich, tidak BPOM RI
mencakup produk Staphylococcus aureus 5 x 10² koloni/g
oles berbasis coklat
dan kacang
APM Eschericia coli <3/g Peraturan Kepala
78 Ragi Biologi
Salmonella sp negatif/25 g BPOM RI
Makanan Untuk Keperluan Gizi Khusus
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g
Formula Bayi dan Enterobacteriaceae negatif/10 g†
Formula untuk Enterobacter sakazakii negatif/10 g‡ Peraturan Kepala
79 Biologi
Keperluan Medis Salmonella sp negatif/25 g BPOM RI
Khusus bagi Bayi Staphylococcus aureus 1 x 10¹ koloni/g
Bacillus cereus 1 x 10² koloni/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g
APM Koliform <3/g §
Peraturan Kepala
80 Formula Lanjutan Biologi Salmonella sp negatif/25 g
BPOM RI
Staphylococcus aureus 1 x 10¹ koloni/g
Bacillus cereus 1 x 10² koloni/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g
APM Koliform <20/g *
Peraturan Kepala
81 MP-ASI Biskuit Biologi APM Eschericia coli negatif/g
BPOM RI
Salmonella sp negatif/25 g
Staphylococcus aureus 1 x 10² koloni/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁵ koloni/g
APM Koliform <1 x 10² /g *
MP-ASI Siap Peraturan Kepala
82 Biologi APM Eschericia coli negatif/g
Masak BPOM RI
Salmonella sp negatif/25 g
Staphylococcus aureus 1 x 10² koloni/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10² koloni/g
APM Koliform <3 /g *
MP-ASI Siap Peraturan Kepala
83 Biologi APM Eschericia coli negatif/g
Santap BPOM RI
Salmonella sp negatif/25 g
Staphylococcus aureus negatif/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g
APM Koliform <20/g *
MP-ASI Bubuk Peraturan Kepala
84 Biologi APM Eschericia coli negatif/g
Instan BPOM RI
Salmonella sp negatif/25 g
Staphylococcus aureus 1 x 10² koloni/g
85 Makanan Diet Biologi ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g Peraturan Kepala
 Khusus untuk APM Koliform <20/g BPOM RI
Keperluan Salmonella sp negatif/g
Kesehatan,
termasuk untuk Staphylococcus aureus negatif/25 g
Bayi dan Anak-
Anak Berbasis
Susu, Biskuit, Bacillus cereus 1 x 10² koloni/g
Masak, Santap, dan
Bubuk Instan
Pangan Diet untuk ALT (30⁰C, 72 Jam) 5 x 10⁴ koloni/g
Pelangsing dan APM Koliform 10² /g
Penurun Berat
Badan, Minuman E. Coli negatif Peraturan Kepala
86 Biologi
Khusus Ibu Hamil Salmonella sp negatif/25 g BPOM RI
dan atau Ibu Staphylococcus aureus 1 x 10² koloni/g
Menyusui
berbentuk Bubuk Listeria monocytogenes negatif/25 g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁵ koloni/g
Minuman Khusus APM Koliform 10/ml
Ibu Hamil dan atau E. Coli negatif Peraturan Kepala
87 Ibu Menyusui Biologi
Salmonella sp negatif/25 g BPOM RI
Berbentuk Cair
(Pasteurisasi) Staphylococcus aureus 1 x 10² koloni/ml
Listeria monocytogenes negatif/25 g
Minuman Khusus
Ibu Hamil dan atau
Peraturan Kepala
88 Ibu Menyusui Biologi ALT (30⁰C, 72 Jam) 0 koloni/ml
BPOM RI
Berbentuk Cair
(steril dan UHT)
Minuman Tidak Termasuk Produk Susu
ALT awal (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10² koloni/ml
ALT akhir (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁵ koloni/ml
Air Minum dalam Peraturan Kepala
89 Biologi APM Koliform < 2/100 ml
Kemasan BPOM RI
Salmonella sp negatif/100 ml
Pseudomonas aeruginosa negatif/ml
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/ml
Koliform 2 x 10¹ koloni/ml
Sari Buah dan Sari APM Eschericia coli < 3/ml Peraturan Kepala
90 Biologi
Sayuran Salmonella sp negatif/25ml BPOM RI
Staphylococcus aureus negatif/ml
Kapang dan Khamir 1 x 10² koloni/ml
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10² koloni/ml
Minuman Koliform 1 koloni/100 ml
Peraturan Kepala
91 Berkarbonat (Air Biologi Salmonella sp negatif/100 ml
BPOM RI
Soda, Limun dll) Staphylococcus aureus negatif/ml
Kapang dan Khamir 1 x 10² koloni/ml
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10² koloni/ml
Koliform 1 koloni/100 ml Peraturan Kepala
92 Minuman Isotoik Biologi
Salmonella sp negatif/100 ml BPOM RI
Kapang dan Khamir 1 x 10² koloni/ml
ALT (30⁰C, 72 Jam) 5 x 10² koloni/ml
APM Koliform 20/ml
APM Eschericia coli < 3/ml Peraturan Kepala
93 Sirup Biologi
Salmonella sp negatif/25ml BPOM RI
Staphylococcus aureus negatif/ml
Kapang dan Khamir 1 x 10² koloni/ml
Serbuk Minuman ALT (30⁰C, 72 Jam) 3 x 10³ koloni/g Peraturan Kepala
94 Biologi
(Berperisa atau APM Koliform < 3/g BPOM RI
 Tidak Berperisa,
Kapang dan Khamir 1 x 10² koloni/g
Tradisional, dll)
ALT (30⁰C, 72 Jam) 4 x 10² koloni/ml
APM Koliform 20 /ml Peraturan Kepala
95 Minuman Squash Biologi
Salmonella sp negatif/25ml BPOM RI
Kapang dan Khamir 1 x 10² koloni/ml
ALT (30⁰C, 72 Jam) 2 x 10² koloni/ml
APM Koliform 20/ml
Minuman Tidak Salmonella sp negatif/25ml Peraturan Kepala
100 Berkarbonat Biologi
Staphylococcus aureus 0 koloni/ml BPOM RI
Berperisa
Vibrio sp negatif/ml
Kapang dan Khamir 1 x 10² koloni/ml
ALT (30⁰C, 72 Jam) 3 x 10³ koloni/g
Teh Kering dalam Peraturan Kepala
101 Biologi APM Koliform < 3/g
Kemasan BPOM RI
Kapang 5 x 10² koloni/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 3 x 10³ koloni/g Peraturan Kepala
102 Teh Celup Biologi
Kapang 5 x 10² koloni/g BPOM RI
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10² koloni/ml
Minuman Teh APM Koliform <2 /100ml Peraturan Kepala
103 Biologi
dalam Kemasan APM Eschericia coli negatif/100 ml BPOM RI
Salmonella sp negatif/100 ml
Kopi Bubuk dalam ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁶ koloni/g Peraturan Kepala
104 Biologi
Kemasan Kapang 1 x 10⁴ koloni/g BPOM RI
Kopi Celup, Kopi ALT (30⁰C, 72 Jam) < 3 x 10² koloni/g Peraturan Kepala
105 Biologi
Instan Kapang 5 x 10¹ koloni/g BPOM RI
ALT (30⁰C, 72 Jam) 5 x 10⁵ koloni/g
APM Koliform 20/g
Peraturan Kepala
106 Kopi Campur Biologi Salmonella sp negatif/25 g
BPOM RI
Staphylococcus aureus 1 x 10² koloni/25 g
Kapang dan Khamir 1 x 10² koloni/g
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10² koloni/g
Minuman Kopi APM Koliform <2 /100ml Peraturan Kepala
107 Biologi
dalam Kemasan Clostridium perfringens negatif/100ml BPOM RI
Salmonella sp negatif/100ml
ALT (30⁰C, 72 Jam) 2 x 10² koloni/ml
APM Koliform 20 /ml
Anggur, Anggur APM Eschericia coli <3 /ml Peraturan Kepala
108 Biologi
Buah Salmonella sp negatif/25 ml BPOM RI
Staphylococcus aureus negatif/ml
Kapang dan Khamir 1 x 10² koloni/ml
Makanan Ringan Siap Santap
ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g
Makanan Ringan APM Eschericia coli <3/g Peraturan Kepala
109 Biologi
Ekstrudat Salmonella sp negatif/25 g BPOM RI
Staphylococcus aureus 1 x 10² koloni/g
Kacang Garing, ALT (30⁰C, 72 Jam) 1 x 10⁴ koloni/g
Kacang Sukro, APM Eschericia coli <3 /g
Kacang Bawang, Peraturan Kepala
110 Biologi
Kacang Telor, BPOM RI
Kacang Bali, Kapang 5 x 10² koloni/g
Kacang Goyang
Makanan dan
Minuman Sterilisasi <10 koloni/0,1 ml atau Peraturan Kepala
111 Biologi ALT (30⁰C, 72 Jam)
dalam Kemasan <10 koloni/0,1 g BPOM RI
Secara Aseptis
 1 x 10⁴ koloni/g atau
ALT (30⁰C, 72 Jam)
ml
APM Koliform <3/g atau /ml
Pangan Olahan Peraturan Kepala
112 Biologi negatif/25g atau
lainnya Salmonella sp BPOM RI
negatif/25ml
negatif/g atau
Staphylococcus aureus
negatif/ml

NO. BAHAN
GAMBAR BAHAN DAN ALAT CARA PENGGUNAAN
PENCEMAR
1. Salmonella sp. Botol pengencer Prinsip pengujian deteksi Salmonella sp.
Menurut metode analisis mikrobiologi
(MA PPOM 74/MIK/06)
1. Pre-pengkayaan non-selektif
Secara aseptik ditimbang 25 gram atau
di pipet 25 ml cuplikan ke dalam
kantong plastik stomacher steril
ditambahkan 225 ml BPW.
Batang pengaduk Dihomogenkan menggunakan
stomacher selama 30 detik dan
0
diinkubasi pada suhu 37±1 C selama
18±2 jam.
2. Pengkayaan Selektif
Cawan petri Secara aseptik di pipet biakan pra-
pengkayaan masing-masing 1 ml ke
dalam 10 ml MKTTn inkubasi pada
suhu 37±10 C selama 24±3 jam dan 0,1
ml kedalam 10 ml RVS inkubasi pada
suhu 41,5±10C selama 24±3 jam. Jaga
maksimum suhu inkubasi tidak
Inkubator melebihi 42,50C.
3. Inokulasi dan Identifikasi
Dari biakan MKTTn dan RVS di
inokulasikan masing-masing sebanyak
1 sengkelit pada permukaan BGA dan
XLD, kemudian diinkubasi pada suhu
37±10C selama 24±3 jam koloni yang
tumbuh diamati. Biakan diduga
Pipet ukur
Salmonella sp. Positif jika:
BGA : koloni dari tidak berwarna,
merah muda hingga merah dan
translusen hingga keruh
dengan lingkaran merah muda
sampai merah.
 Tabung reaksi XLD : koloni translusen dengan bintik
hitam ditengah, dan dikelilingi
zona transparan berwarna
kemerahan.
4. Konfirmasi
Dipilih dua atau lebih koloni spesifik
pada BGA dan XLD diinokulasikan
pada media TSA atau NA miring. Dari
TSA atau NA miring dilakukan uji
konfirmasi sebagai berikut:
Oven sterilisasi kering
a. TSIA
Diinokasikan koloni tersangka
dengan cara tusuk dan goresan pada
media TSIA. Inkubasi pada suhu
37±10C selama 24±3 jam. Amati
perubahan warna yang terjadi.
b. Uji Urease
Inokulasikan koloni sampel pada
media urea agar (christensen) suhu
Jarum ose 37±10C. Amati perubahan warna
biakan yang terjadi.
c. Uji Dekarboksilasi Lysine
Inokulasikan koloni sampel pada
media L.Lysine decarboxylase
diinkubasi pada suhu 37±10C
selama 24±3 jam. Amati perubahan
warna biakan dan kekeruhan yang
Stomatcer 400 cirkulator
terjadi.
d. Uji Vogas Proskeuser
Inokulasikan koloni sampel pada
media MR-VP pada suhu 37±10C
selama 24±3 jam. Tambahkan 3
tetes larutan alfa neftol dan 2 tetes
larutan KOH 40%. Amati
perubahan warna biakan yang
terjadi setelah 15 menit.
e. Uji Indol
Inokulasikan koloni sampel pada
media tryptone broth atau
tryptophan broth. Inkubasikan pada
suhu 37±10C selama 24±3 jam.
Tambahkan bebrapa tets larutan
kovac. Amati perubahan cincin
merah.
f. Uji ß-galaktosidase
 Suspensikan 0,5 ml NaCl 0,85 %
pada biakan NA miring dalam
tabung reaksi kecil steril. Masukkan
sebuah cakram ONPG, inkubasi
pada suhu 37±10C selama 24±3
jam.
g. Uji serologi
Ambil 1 ose biakan dari TSA/NA
miring suspensikan dengan 1 tets
NaCl 0,85 % dan 1 tets air dan
campurkan pada kaca objek.
Apabila diamati dengan latar
belakang gelap dan menggunakan
kaca pembesar telah terjadi
aglutinasi. Jika tidak terjadi
aglutinasi sendiri, lakukan uji
serologi dengan antisera polivalen
O, H, dan Vi. Yang terjadinya
aglutinasi maka salmonella positif.
Yang dapat dilakukan pada kaca
objek atau tabung kecil.untuk
antisera polivalen H, biakan
salmonelladiinokulasikan pada
media NA semi padat yang
diinkubasi pada 37±10C selama
24±3 jam.

2. Bahan: 1. Persiapan dan homogenisasi sampel

Baird Parker Agar (BPA) a. Secara aseptik, timbang 50 gram
Brain Heart Infusion Broth (BHIB) sampel dalam kantonng plastik.
b. Tambahkan 450 ml BPB sehingga
Coagulase Plasma (Rabbit) dengan
pengenceran diperoleh 10-1.
EDTA c. Masukkan kedalam stomacher dan
Larutan Butterfield’s Phosphate kocok dengan kecepatan 250 rpm
selama 15 detik.
Buffered (BPB)
2. Cara kerja
a. Tambahkan 1 ml larutan sampel yang
Staphylococcus Alat: berisi BPB kedalam 3 cawan petri.
Botol pengencer b. Mentebarkan sampel secara merata
aureus
dengan menggunakan batang
penyegar steril tahan cawan dalam
posisi tegak lurus sampai contoh
terserap oleh media (±10 menit). jika
tidak mudah terserap oleh media,
tempatkan cawan petri pada posisi
tegak lurus didalam inkubator selama
1 jam sebelum cawan petri dibalik.
c. Menginkubasikan pada suhu 350C
selama 45 jam sampai 48 jam.
Batang pengaduk d. Memilih cawan petri yang
 mengandung 20 koloni sampai
dengan 200 koloni dan hitung koloni
yang diduga sebagai Staphylococcus
aureus, yaitu koloni berwarna abu-
abu sampai hitam mengkilat dengan
lingkaranj cerah disekelilingnya dan
Cawan petri
seringkali lingkaran jernih, koloni
mempunyai getah kental ketika
disentuh dengan jarung ose.
3. Uji koagulasi
a. Memindahkan 5 koloni sampai
dengan 10 koloni yang diduga
sebagai Staphylococcus
aureuskedalam tabung berisi 0,2 s/d
Inkubator 0,3 ml BHIB.
b. Menginkubasikan media agara MYP
pada suhu 350C selama 18 s/d 24 jam.
c. Menambah plasma koagulase
sebanyak 0,5 ml kedalam biakan
BHIB dan campur.
d. Menginkubasikan campuran plasma
koagulase dengan biakan BHIB pada
suhu 350C selama 18 s/d 24 jam,
kemudian amati terbentuknya
Pipet ukur penggumpalan setiap 6 jam.
Staphylococcus aureuspositif apabila
terbentuknya gumpalan yang kokoh
dan utuh serta dapat bertahan dalam
tabung ketika dibalikkan.
e. Mengamati ada tidaknya koagulasi.
Bila terjadi koagulasi, lanjutkan
inkubasi pada suhu kamar selama 24
jam dan amati kembali.
Tabung reaksi f. Meratakan koloni (n) dari ketiga
cawan petri yang diwakili oleh koloni
yang memberikan reaksi
penggumpalan dan dikalikan dengan
faktor pengencernya (F) dan dihitung
jumlah Staphylococcus aureusdalam
1 gram sampel.
4. Perhitungan
𝐤𝐨𝐥𝐨𝐧𝐢 𝑩
𝑺. 𝒂𝒖𝒓𝒆𝒖𝒔 ( )=𝒏𝑿 𝑿𝐅
𝐠 𝐀
Ket:
n : Jumlah koloni (koloni/gram)
Oven sterilisasi kering A : Jumlah koloni yang diambil dari
koloni yang positif 𝑆. 𝑎𝑢𝑟𝑒𝑢𝑠
B : jumlah koloni yang sudah
ditegaskan sebagai 𝑆. 𝑎𝑢𝑟𝑒𝑢𝑠
F : Faktor pengenceran dari rata-rata
koloni yang dipakai

Jarum ose
 Stomatcer 400 cirkulator

3. 1. Ambil serbuk Media Potato Dextrosa

Agar (PDA) sebanyak 16,38 gram
disuspensi dalam 420 ml akuades.
Cawan Petri 2. Larutkan dengan pemanasan dan
disterisasi dengan autoklaf selama 15
menit pada suhu 1210C.
3. Tambahkan kloramfenikol sebanyak
0,02 gram dan diaduk merata.
4. Tuangkan dalam cawan petri dan
media dibiarkan memadat.
Erlenmeyer
5. Sebanyak 1 gram sampel dilarutkan
dengan aquades steril sebanyak 10 ml.
6. Siapkan tabung reaksi dan dan isi
dengan 9 ml akuades steril kemudian
tambahkan 1 ml larutan yang berisi
Kapang dan
sampel sebagai pengenceran 10-1
khamir
lakukan pengenceran hingga 10-4 dan
dihomogenesis.
7. 1 ml suspensi hasil pengenceran
Gelas Beker
dituang kepermukaan media PDA dan
diratakan dengan bantuan spreader
glass, sebagai kontrol digunakan media
yang ditambah kloramfenikol dan
larutan pengencer.
8. Inkubasi cawan petri pada suhu 250c
selama 3 hari.
9. Hitungan jumlah koloni.
Corong Kaca 10. Pilih cawan petri yang menunjukkan
jumlah koloni antara 40-60. Kemudian
hitung dan dikalikan dengan faktor
pengencer.
 Timbangan Analit

Tabung Reaksi

Thermometer

Bunser

colony counter

Mortal

Propipet

Spreader

Autoklaf (sturdy)
Pipet Volume
 Inkubator (memert)

4. Bacillus Cereus Bahan : 1. membuat tingkat pengeceran dari

1. mannitol – egg yolk – 10-2 sampai dengan 10-6 dengan
polymyxine agar (MYP) memindahkan 10 ml contoh yang
2. egg yolk emulsion sterile telah dihomogenkan ke dalam 90
3. bacillus cereus selective ml larutan pengencer, kemudian
supplement diaduk dengan kuat dan
4. butterfield’s photosphate dilanjutkan ke pengenceran 10-6
buffered (BPB) dilution water 2. menginokulasikan sebanyak 0,1
5. bacillus cereus ATCC 11778 ml masing-masing tingkat
(Lypo disk) pengenceran (termasuk 1:10)
Alat : menggunakan batang penyebar
botol pengencer steril diatas permukaan media agar
MYP, lakukan secara duplo
3. menginkubasikan media agar
MYP pada suhu 30oC selama 24
jam
4. mengamati koloni yang dikelilingi
oleh zona endapan yang

batang penyebar dari gelas menunukan bahwa B. Cereus

menghasilkan lecithinase berwarna
merah muda. warnanya akan
menjadi lebih jelas apabila
inkubasi dilanjutkan
5. mengamati apabila warna merah
cawan petri 15 mm x 90 mm
muda tidak jelas, lanjutkan
inkubasi selama 24 jam lagi
sebelum perhitungan koloni
6. memilih media yang mengandung
15 koloni sampai dengan 150
 koloni eosin merah muda
penghasil lechithinase.
7. memberi tanda di bagian dasar
cawan petri berdasarkan zona yang
terbentuk
8. menggunakan pena penanda untuk
Incubator
memudahkan perhitungan dan
penjumlahan coloni B. cereus
9. mengambil 5 atau lebih koloni
yang positip mengandung B.
Cereus dari media MYP dan
pindahkan ke media miring NA
untuk uji penegasan B. Cereus. uji
penegasan B Cereus yang
pipet ukur 10 ml dan 1 ml
dilakukan adalah uji media
modified VP.
uji media modified VP
1. menginkubasi B.cerus dalam
media miring NA selama 24 jam
pada suhu 30oC

tabung reaksi 2. memindahkan biakan dengan ose

3 mm dari setiap agar miring ke
tabung (13x100 mm) yang berisi
0,5 ml larutan BPB steril
kemudian dikocok dengan vortex,
untuk mensuspensikan biakan
3. menginokulasikan suspensi biakan
denga nose 3 mm ke dalam 5 ml
media VP dalam tabung
oven sterilisasi kering 4. menginkubasi tabung tersebut
selama (48± 2) jam pada suhu
35oC
5. untuk uji terbentukanya
acetymethyl-carbinol pipet 1 ml
biakan ke dalam tabung uji,
tambahkan 0,6 ml larutan alfa
naftol dan 0,2 ml KOH 40%
6. mengaduk dan menambahkan
jarum ose
sedikit Kristal keratin
7. mengamati setelah didiamkan
selama 1 jam pada suhu ruang
8. melakukan uji media modified VP
positif apabila terbentuk warna
merah muda atau violet
stomatcher 400 circulator
5. Pseudomonas Bahan : 1. Menyiapkan alat dan bahan yang
Aureginosa 1. media NA akan digunakan
2. isolate bakteri 2. Mengisi masing-masing tabung
3. air steril reaksi dengan air steril sebanyak 9
4. alkohol 70% ml
5. spiritus 3. Mengambil isolat bakteri sebanyak
6. cling warp 1 ml menggunakan suntikan lalu
7. kertas label masukkan ke tabung reaksi
Alat : pertama, kemudian di sheker atau
Cawan petri di gojok sampai homogen
4. Lalu ambil 1 ml suspensi dari
tabung reaksi pertama, pindahkan
ke tabung reaksi kedua kemudian
gojok sampai homogen, begitu
seterusnya sampai tabung ke tujuh
5. Pada pengenceran 6 dan 7 ambil
Gelas beker
0,1 ml suspense dan masukkan
kedalam cawan petri yang berisi
media NA
6. Beri label pada cawan petri,
kemudian inklusi selama 18 jam
dan amati menggunakan colony
counter. Berikut cara
7 buah tabung reaksi menggunakan colony counter :
a. Hidupkan saklar general
b. Atur knop sensifitas dan saklar
bunyi beep
c. Pilih “MODE (M)” kemudian
sesuaikan kecerahan lampu
atau warna dasar yang sesuai
dengan cara memilih panah
Batang segitiga atas atau bawah
d. Jika ingin menambah
kecerahan pada saat display
huruf “L” / light dan
didepannya nilai kecerahannya
dengan memencet panah atas
ataupun sebaliknya
e. Jika ingin merubah warna
 Suntikan dasar maka pada saat display
“C” / colour dan maka pilih
panah atas atau bawah. Ada
banyak sekali pilihan warna
dasar yang disediakan alat ini.
f. Pilihlah cawan yang jumlah
koloninya antara 30-300

Colony counter g. Letakkan cawan yang dipilih

pada alat penghitungan colony
counter
h. Hitunglah jumlah koloni
bakteri (perhitungan dapat
dilakukan dengan meletakkan
cawan secara terbalik atau
tutup cawan dibuka)
i. Manfaat garis tebal pada dasar
Laminar air flow berpola kotak-kotak itu
sebagai pedoman
j. Dengan alat perhitungan
mekanis ditangan, hitunglah
jumlah koloni pada baris
teratas lalu dari kiri kekanan.
7. Hitung jumlah koloni
menggunakan rumus
𝑥
Lampu bunsen 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 𝑝𝑒𝑟 𝑚𝑙 =
𝑝. 𝑣
X : jumlah koloni yang
didapat
P : faktor pengencer
V : volume

6. ALT, Bahan uji Angka Lempeng Total sesuai MA

ALT Aerob dan 1. plate count agar (PCA) PPOM 61/MIK/06 Prinsip :
Anaerob 2. triphenyl tetrazolium chloride 1. aseptic ditimbang 25 gram atau
(TTC) 0,5% dipipet 25 ml sampel ke dalam
3. pepton dilution fluid (PDF) kantong stomacher steril
alat : 2. setelah itu, ditambahkan 225 ml
stomacher PDF dan di homogenkan dengan
stomacher selama 30 detik
sehingga diperoleh suspensi
dengan pengenceran 10-1
3. siapkan 5 tabung atau lebih yang
masing-masing telah diisi dengan
 Erlenmeyer 9 ml PDF
4. hasil dari homogenesis pada
penyiapan sampel yang
merupakan pengenceran 10-1
dipipet sebanyak 1 ml ke dalam
tabung PDF pertama, dikocok
homgeny hingga diperoleh
pengenceran 10-2

tabung reaksi 5. dibuat pengenceran selanjutnya

hingga 10-6 atau sesuai dengan
pengenceran yang diperlukan. Dari
setiap pengenceran dipipet 1 ml ke
dalam cawan petri dan dibuat
duplo, ke dalam setiap cawan
dituangkan 15-10 ml media PDA
yang sudah ditambahkan 1% TTC
cawan petri suhu 45 oC
6. cawan petri segera digoyangkan
dan diputar sedemikian rupa
hingga suspense tersebar merata.
7. untuk mengetahui sterilisasi media
dan pengenceran dibuat uji kontrol
(Blangko)
pipet ukur
8. pada satu cawan diisi 1 ml
pengencer dan media agar, pada
cawan yang lain diisi media
9. setelah media memadat, cawan
diinkubasi suhu 35-37 oC selama
24-46 jam dengan posisi terbalik.
setelah itu jumlah koloni diamati
Incubator
dan dihitung

7. Enterobacter Taqman Cronobacter sakazakii Dalam teknik identifikasi yang normal

Sakazakii Detection Kit dilakukan menggunakan metode
konvensional.
1. Untuk mengatasi jumlah koloni
yang terlampau sedikit, sangat
dianjurkan dilakukan pre-
enrichment atau pengayaan awal.
Standar Food Drug Agency (FDA)
 Amerika Serikat memberikan
rekomendasi untuk menggunakan
medium Enterobacteriaceae
enrichment (EE) broth yang
kemudian digoreskan ke atas
medium agar VRBG.
2. Koloni yang tumbuh dan diduga
sebagai C. sakazakii selanjutnya
disubkulturkan ke atas medium
agar TSA. Pada medium TSA
agar, koloni C. sakazakii akan
berwarna kuning yang kemudian
dikonfirmasikan dengan tes
kemampuan oksidase dan
identifikasi biokimiawi. Metode
lainnya yang dapat digunakan
adalah menggunakan modifikasi
larutan lauryl sulphate broth
ditambah dengan vancomycin
yang khusus digunakan untuk
menseleksi bakteri-bakteri dari
genus Cronobacter serta suhu
inkubasi yang khusus pada 44°C.
3. Setelah diperkaya, koloni terduga
lalu dipindahkan dalam medium
kromogenik sebagai medium
selektifnya. Medium kromogenik
akan meningkatkan aktivitas
pertumbuhan C. sakazakii
sekaligus menghambat bakteri-
bakteri lainnya. Prinsip medium
kromogenik adalah memberikan
pengidentifikasian komponen alfa-
glukosidase yang dihasilkan C.
sakazakii, tetapi tidak doproduksi
oleh Enterobacteriaceae lainnya
4. Pemekatan sel bakteri menjadi
langkah berikutnya. Pemekatan
berfungsi meningkatkan jumlah
koloni aktif sehingga lapisan
immunomagnetik dapat mengikat
selsel target. Pada umumnya
metode deteksi cepat memerlukan
konfirmasi tingkat molekuler
menggunakan Polymerase Chain
 Reaction (PCR) untuk secara pasti
menyebutkan bahwa koloni
terduga adalah C. sakazakii.
Metode deteksi cepat dengan
Polymerase Chan Reaction (PCR)
1. Perkaya sampel
Tumbuhkan patogen spesifik dari
sampel yang dipilih menggunakan
prosedur pengayaan standar pada
langkah Pengayaan.
2. Siapkan sampel
Pada langkah Persiapan Sampel,
isolasi DNA untuk PCR, dan
siapkan, campur dan pipet reaksi
3. Jalankan sampel
Langkah terakhir adalah
Menjalankan Pelat pada SDS
Terapan Biosystems® atau Sistem
PCR Waktu-Nyata untuk
menganalisis sampel
8. Koliform Bahan : 1. Uji Penduga
1. Sampel makanan dan
a) Diaseptikan tangan, alat dan
minuman
2. Media laktosa cair (sudah tempat kerja
steril)
b) Sampel ditimbang sebanyak 10
3. Media BGLB/BGBL
(Brilliant Green Bile Lactosa gram memasukkan ke dalam air
Broth)
pengencer (yang mengandung
4. Media EMB (Eosin
Methylene Blue Agar) dan NaCl fisiologis) 90%
EA (sudah steril)
c) Masukkan pengencer/Na fisiologis
5. Pewarna gas
6. Alkohol dan Lactosa Broth ke dalam ke-9
7. Kapas, karet, kertas payung,
tabung reaksi sesuai banyaknya
korek api
Alat : yaitu 10 ml, 1 ml dan 0,1 ml lalu
Botol contoh steril
masukkan tabung durham.
Bungkus masing-masing tabung
reaksi dengan pembungkus kayu
d) Diinkubasi selama 2 x 24 jam
dengan suhu 37⁰C dan diamati
tertangkap tidaknya gas dalam
tabung Durham setiap 1 jam sekali
Cawan petri steril
e) Jika terdapat gas atau keruh, maka
diduga terdapat Coliform pada
tabung.
2. Uji Penegasan
a) Dasarnya yaitu hasil dari uji
pendugas yaitu banyaknya larutan
Pipet ukur 10 ml dan 1 ml steril
dengan filternya dalam tabung reaksi yang
 terdapat gas/gelembung yang
berjumlah 4 buah
b) Ambil jarum ose lalu bakar jarum
di atas pembakar Bunsen sampai
membara. Masukkan jarum ose
ke dalam tabung reaksi sampai
Pembakar Bunsen
menyentuh larutan dan angkat.
Lalu jarum ose masukkan ke
tabung berisi 10 ml, 1 ml, dan 0,1
ml sirup dengan tabung Durham
di dalamnya dengan kombinasi 3-
3-3. Usahakan tabung dan jarum
selalu dekat dengan api agar tetap
Inkubator steril
c) Masukkan tabung ke dalam
incubator/diinkubasi selama 2 x
24 jam dan diamati setiap 1 jam.
Lalu amati adanya
gas/gelembung yang terdapat
dalam tabung Durham.
Mikroskop

Tabung reaksi

Tabung durham

Timbangan mortal dan pengerus

9. E. Coli Bahan : 1. Sampel dtimbang sebanyak 50 gram,
1. Sampel Makanan kemudian dihancurkan bersama Buffer
2. Biakan E. Coli Field Phosphate (BPS) sebanyak 450
3. Lauryl trypstose Broth (LB) ml dengan blender hingga homogen
4. Eschericia coli Broth (ECB) 2. Sampel yang telah dihomogenkan
5. Eosin Metylen Blue Agar kemudian dilakukan pengenceran
(EMBA) dengan memasukkan sampel pada
6. Trytone Broth botol pertama (10-1) sebanyak
7. Media Methyl Red-Voges sebanyak 10 ml. pada botol pertama
Proskauer (MR-VP) diambil 10 ml lalu masukkan ke dalam
8. Reagen kovac, ɑ - Napthol botol kedua (10-2) yang telah
9. KOH 40% diberikan larutan BPS sebanyak 450
10. Koser citrate Broth ml. Pada botol kedua diambil 10 ml
Alat : lalu masukkan ke botol ketiga (10-3)
Tabung reaksi yang telah diberikan larutan BPS 450
ml
3. pada tes perkiraan disiapkan 9 tabung
(seri 3-3-3) untuk pengenceran
bertingkat masing-masing berisi 9 ml
Lauryl Tryptose Broth (LB). Pada 3
tabung seri (10-1), (10-2), (10-3)
dimasukkan 1 ml sampel makanan
Tabung Durham
yang telah dilarutkan dengan pelarut
BPS. 15 tabung yang telah terisi
sampel diinkubasi selama 24 jam pada
suhu 37⁰C dan diamati apakah
terbentuk gas pada tiap-tiap tabung.
Terbentuknya gas menandakan ters
perkiraan positif dan dilanjutkan ke tes
Cawan Petri penegasan.
4. Tes Penegasan hasil sampel yang
positif pada tes perkiraan dapat
dilanjutkan dengan memasukkan
sampel positif ke dalam media EC
Broth untuk uji bakteri E. Coli. Untuk
uji E. Coli ditanam 1-3 ose biakan
Pipet Mikro 1000 µl dan 10µl
positif gas ke dalam tabung yang berisi
10 ml ECB yang didalamnya terdapat
 tabung durham terbalik. Sampel
diinkubasiselama 24 – 48 jam pada
suhu 44⁰C. Daiamati tabung yang di
dalamnya terdapat gas. Banyaknya
kandungan E. Coli dapat dilihat dan
dibandingkan dengan tabel MPN.

Jarum Ose

Bunsen

Blender Steril

Autoklaf

Laminar air flow

Inkubator
10. Listeria Bahan : 1. Sampel susu diambil menggunakan
Monocytogenesis 1. Sampel cool box
2. Akuades 2. Susu yang akan di pasteurisasi
3. Listeria Selektif Agar (LSA) dimasukkan ke dalam tabung reaksi
4. Kristal violet sebanyak 10 ml setiap tabung,
5. Lugol kemudian panaskan pada 5 suhu yang
6. Safranin berbeda (suhu 75⁰C, 80⁰C, 85⁰C, 90⁰C,
7. Alkohol 70% dan 95% dan 95⁰C) dengan masing-masing
8. Kapas waktu 1 menit dan 1 tabung susu segar
9. Kertas (tanpa pasteurisasi) digunakan sebagai
10. Plastik wrap kontrol. Selanjutnya susu yang telah di
11. Aluminium foil pasteurisasi dan kontrol dilakukan
12. Kertas Label penguji parameter dan sampel yang
13. Spiritus lain disimpan di refrigerator (4⁰C)
Alat : selama 1 hari, 1 minggu, dan 2 minggu
Autoclaf 3. Pengujian Parameter
a) Perhitungan jumlah bakteri.
Dilakukan setelah pasteurisasi
dan penyimpanan susu
(pasteurisasi dan kontrol) selama
1 hari dengan metode pour plate
(cawing tuang). Sampel yang
akan diuji diencerkan 10¹ - 10⁶.
Oven
Sebanyak 1 ml dari pengenceran
yang digunakan dimasukkan ke
dalam cawan petri steril lalu
menambahkan LSA suhu 45 -
50⁰C sekitar 15 ml, kemudian
cawan petri digoyang-goyangkan
membentuk angka 8. LSA
Tabung reaksi dan Rak Tabung didiamkan sampai memadat lalu
diinkubasi pada inkubator dengan
suhu 35⁰C selama 24 jam dalam
keadaan terbalik. Selanjutnya
melalukan perhitungan jumlah
bakteri dengan menggunakan
colony counter.
b) Pengaatan Morfologi. Koloni
Gelas Ukur bakteri yang ada di dalam cawan
petri diamati warna, sifat, tepi,
elevasi, permukaan, ukuran
bakteri dan warna media.
c) Pewarnaan Gram. Bakteri yang
akan diwarnai diambil 1 ose lalu
difiksasi di atas objek glass,
selanjutnya meneteskan Kristal
Spoit ukuran 1 ml dan 10 ml
violet dan didiamkan 1-2 menit
Waterbath
lalu dicuci dengan akuades,
kemudian memberikan lugol dan
didiamkan 1-2 menit lalu dicuci
dengan alkohol 95% sampai
bersih dan diikuti akuades. Propat
diberikan safranin dan didiamkan
Gegep
selama 1-2 meit lalu dicuci
dengan akuades kemudian
dikeringkan. Prepat diamati di
bawah mikroskop dengan melihat
warna dan bentuk bakteri.
Inkubator

Timbangan analitik

Sendok

Kompor Listrik
Lemari pendingin

Termometer

Objek glass

Mikroskop

Cawan Petri

Cool Box
Bunsen

Erlenmeyer

Pipet tetes

Tube Sheker

Colony counter
Magnetik stirrer

Ose