Professional Documents
Culture Documents
Modifikasi Pengolahan Durian Fermentasi Tempoyak D PDF
Modifikasi Pengolahan Durian Fermentasi Tempoyak D PDF
Departemen Teknologi Industri Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor,
Kampus IPB Darmaga, Jl. Raya Dramaga, Bogor, Indonesia
E-mail:endang.warsiki@gmail.com
Makalah: Diterima 28 Februari 2016; Diperbaiki 25 Oktober 2016; Disetujui 10 Nopember 2016
ABSTRACT
Tempoyakis one of traditional food that has short shelf life. The pasteurization and packaging
improvement could be expected can maintain the quality and extend the tempoyak’s shelf life. This research used
polyethylene terephtalate (PET) and polyamide as packaging materials; with modified atmosphere packaging
(MAP), non MAP, vacuum and non vacuum. The parameters quality of tempoyak were observed by value of pH,
sugar content, lactic acid, alcohol, lactic acid bacteria growth and total plate count. The result showed that the
best quality of tempoyak was produced by product with pasteurization treatment. Lactobacillus genus with
L.plantarum, L. casei, and L. fermentum were the dominant species of lactic acid bacteria. The result also
showed that after the tempoyak was fermented during 84 hours, then the pasteurization should be conducted to
stop the fermentation. The 84th hours was a constant phase in which that was the right time to inhibit the acid
lactic bacteria growth. Pasteurized tempoyak packaged in PET with MAP technique had the longest shelf life as
much as 84 days than others treatment whose had aboutonly 14 untill 56 days. The decreasing of tempoyak
quality at 84 days was showed by colour change of tempoyak from yelowness to brown, pH decreased from 3.97
to 3.73, lactic acid content decreased from 1.49% to 0.99%, sugar content decreased from 16.57% to 3.28%,
alcohol content of 0.32%, number of lactic acid bacteria decreased from 174.3×104cfu/g to 8.6×102 cfu/g, and
total plate count from 177×104 cfu/g to 182.3×103 cfu/g.
Keywords: modified atmosfir packaging, pasteurization, tempoyak, vacuum
ABSTRAK
Tempoyak adalah salah satu makanan tradisional hasil fermentasi spontan buah durian oleh bantuan
bakteri yang memiliki umur simpan pendek. Modifikasi pengolahan dan perbaikan kemasan diharapkan dapat
mempertahankan mutu dan memperpanjang umur simpan. Jenis kemasan yang digunakan adalah
polyetyleneterephtalate (PET) dan polyamide, dengan teknik pengemasan modified atmosfir packaging (MAP),
nonmodified atmosfir packaging (MAP), vakum, dan non vakum. Parameter mutu tempoyak yang diamati adalah
pH, kadar gula, asam laktat, alkohol, pertumbuhan bakteri asam laktat dan total bakteri. Hasil menunjukkan
bahwa mutu tempoyak terbaik diperoleh pada produk pasteurisasi. Hasil isolasi bakteri yang dominan adalah
kelompok bakteri asam laktat genus Lactobacillus dengan spesies L. plantarum, L. Casei,dan L. fermentum.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa setelah tempoyak difermentasi selama 84 jam maka pasteurisasi harus
dilakukan untuk memperlambat laju fermentasi. Pada jam ke-84 adalah fase pertumbuhan konstan yang
merupakan waktu yang tepat untuk tempoyak dipasteurisasi. Tempoyak pasteurisasi dalam kemasan PET dengan
teknik pengemasan MAP memiliki umur simpan lebih panjang yaitu 84 hari dibandingkan dengan 14 hingga 56
hari untuk tempoyak non pasteurisasi dalam kemasan PET dengan teknik pengemasan non MAP. Penurunan
mutu tempoyak ditunjukkan dengan perubahan warna dari putih kekuningan menjadi coklat dengan nilai pH
awal dari 3,97 turun menjadi 3,73, kadar asam laktat dari 1,49% turun menjadi 0,99%, kadar gula dari 16,57%
turun menjadi 3,28%, kandungan alkohol sebesar 0,32%, jumlah bakteri asam laktat dari 174,30x10 4 Cfu/g turun
menjadi 8,60x102 Cfu/g, dan total jumlah bakteri dari 177,00x104 Cfu/g menjadi182,30x123 Cfu/g.
Kata kunci:modified atmosfir packaging, pasteurisasi, tempoyak, vakum
masyarakat khas melayu seperti Lampung, Jambi, dan modified atmosfir packaging (MAP) merupakan
Sumatera Selatan, Bengkulu, Kalimantan Barat, alternatif yang baik, karena dapat menyebabkan laju
Sumatera Barat, dan Aceh. Amin et al.(2004) respirasi oleh bakteri menurun, mengurangi
melaporkan bahwa penambahan kadar garam terbaik pertumbuhan mikroba, mengurangi kerusakan oleh
untuk tempoyak adalah sekitar 3% (b/b). Fermentasi enzim, memberikan efek visual yang baik bagi
tempoyak secara spontan pada umumnya terjadi produk, dan memperpanjang umur simpan produk
sekitar 4 hingga 7 hari (Leisner et al., 2001) dan (Julianti dan Nurminah, 2006; Putu, 2011).
daging durian berubah dari massa yang padat ke Berdasarkan uraian diatas, maka tujuan dari
semisolid disertai dengan aroma asam yang kuat penelitian ini adalah : (i) memperoleh waktu
(Yuliana et al.,2011). pasteurisasi yang tepat untuk menghambat
Hasil riset terdahulu (Leisner et al., 2001) pertumbuhan bakteri asam laktat, (ii)
menyatakan bahwa BAL yang terlibat di dalam mengidentifikasi jenis BAL dalam proses fermentasi
tempoyak umumnya adalah bakteri yang bersifat durian, (iii) mendapatkan modifikasi cara
heterofermentatif. Bakteri heterofermentatif adalah pengolahan, jenis dan teknik pengemasan yang
jenis bakteri yang selain penghasil asam-asam sesuai untuk memperpanjang umur simpan
organik juga menghasilkan alkohol dan CO2. tempoyak.
Minarni et al.(2013) menyatakan bahwa laju
fermentasi yang terus berlangsung dengan cepat BAHAN DAN METODE
akan menghasilkan alkohol dengan hasil samping
CO2. Kandungan alkohol yang tinggi tidak Bahan dan Alat
diinginkan pada tempoyak karena dapat merusak Bahan yang digunakan adalah durian lokal
citrarasa. Selain faktor laju fermentasi yang cepat, yang diperoleh dari Parung Bogor, media Man
faktor yang menyebabkan kerusakan dan kebusukan Rogosa Shape (MRS) agar, Na2SO4, H2SO4,
pada tempoyak adalah proses pengemasan yang fenolftalein, KI, sodium tiosulfat, Pb-asetat, (NH4)2
kurang sesuai. Faktor-faktor tersebut dapat HPO4, larutan luff, NaOH, PCA, dan bahan kimia
mempercepat terjadinya penurunan mutu tempoyak, analisis lainnya. Jenis bahan pengemasan yang
yang secara fisik ditandai dengan(1) perubahan digunakan adalah plastik polyetyleneterephtalate
warna, (2) bau alkohol menyengat dan, (3) adanya (PET) dan polyamide. Peralatan yang digunakan
serangga seperti belatung. Oleh karena itu adalah pH meter, gas analyzer CO2 dan O2, Gas
diperlukan suatu usaha untuk mempertahankan mutu Kromatografi Shimadzu (GC-17A), refrigerator,
tempoyak dan memperpanjang umur simpan dengan mikroskop, vakum packer (model lapack 550/s), dan
cara menghambat atau memperlambat aktivitas peralatan analisis lainnya.
mikroorganisme penghasil asam. Kandungan asam
Metode
organik yang tinggi dihasilkan ketika bakteri asam
Karakteristik Buah Durian
laktat berada pada fase stasioner (Nur, 2005). Asam
Buah durian yang masak disortasi dan
organik dapat menyebabkan terjadinya penurunan
dikupas untuk mendapatkan daging durian kualitas
pH. Nilai pH yang rendah dapat menghambat
baik. Durian kualitas baik akan menentukan mutu
pertumbuhan bakteri patogen. Sampai saat ini
tempoyak. Buah durian yang digunakan berwarna
penelitian tempoyak yang ada adalah identifikasi
putih hingga kuning. Proses selanjutnya daging
bakteri (Wirawati, 2002), identifikasi bakteri
durian dipisahkan dari bijinya, bagian biji
indigenous yang memfermentasi buah durian
dikumpulkan sebagai limbah dan daging buah
(Nurmailnda et al., 2013), penambahan garam
digunakan untuk proses berikutnya dan dilakukan uji
(Amin et al., 2004), identifikasi asam organik (Nur,
komposisi kimianya yaitu kadar air, serat, abu,
2005), dan pengolahan tempoyak (Yuliana, 2007),
protein, lemak, dan karbohidrat (AOAC, 2005).
tetapi penelitian tentang usaha memperpanjang umur
simpan tempoyak belum dilakukan. Oleh karena itu, Pembuatan Tempoyak
pada penelitian ini dilakukan upaya untuk Metode yang digunakan dalam penelitian
mempertahankan mutu dan memperpanjang umur ini adalah fermentasi secara spontan. Daging buah
simpan. durian kualitas baik selanjutnya ditimbang,
Salah satu cara untuk meningkatkan umur kemudian ditaburi garam 3% (b/b) dan gula 1% (b/b)
simpan dan mempertahankan mutu tempoyak adalah secara berlapis hingga homogen, selanjutnya
modifikasi pengolahan tempoyak dengan difermentasi dalam wadah jenis plastik PET dan
pasteurisasi serta perbaikan kemasan. Pasteurisasi diinkubasi pada suhu ruang.
merupakan salah satu alternatif pengawetan suhu
rendah yang tidak atau sedikit mengubah sifat fisiko- Pembuatan Kurva Pertumbuhan Bakteri Asam
kimia bahan pangan, selain itu proses pasteurisasi Laktat (BAL)
dapat mematikan bakteri pembentuk spora serta Kurva pertumbuhan BAL ditujukan untuk
inaktivasi enzim (Estiasih dan Ahmadi, 2011). penentuan titik pasteurisasi yang tepat ketika
Selain proses pengolahan, teknik pengemasan harus pertumbuhan BAL berada pada fase stasioner. Uji
sesuai untuk tempoyak. Teknik pengemasan vakum ini dilakukan dengan cara menginokulasikan kultur
dari tempoyak hasil fermentasi pada media MRS dan vakum, sedangkan plastik PET dikemas dengan
diinkubasikan selama 24 jam pada suhu 37oC. teknik MAP dan non MAP. Teknik MAP dilakukan
Pengamatan dilakukan pada jam ke-0 dan setiap 12 dengan menginjeksikan gas CO2 kedalam kemasan
jam. Jumlah total bakteri dihitung dengan persamaan sebanyak 67% hingga 69% dan O2 sebanyak 5%
1 (Lindayani dan Hartayanie, 2013). hingga 6%. Selanjutnya hasil pengemasan disimpan
pada suhu ruang. Kode sampel dari semua
Pasteurisasi Tempoyak perlakuan. Disajikan pada Tabel 1.
Tempoyak dipasteurisasi pada suhu 65oC
selama 30 menit pada saat bakteri pembentuk Pengujian Mutu Tempoyak dalam Kemasan
tempoyak berada pada fase stasioner. Fase stasioner Uji mutu meliputi pengukuran kadar
didapatkan dari hasil kurva pertumbuhan mikroba. gulatotal (SNI 0l-2892-1992), kadar asam laktat
Tempoyak hasil fermentasi sebelum dan sesudah (AOAC, 2000), pH (SNI06-6989.11-2004), TPC
pasteurisasi diuji mutunya, tempoyak segera (SNI 01-2332.3-2006), jumlah bakteri asam laktat
dikemas dan disimpan. (Lindayani dan Hartayanie, 2013) dan alkohol (SNI
3565-2009). Pengujian dilakukan setiap dua hari
Identifikasi Jenis Bakteri Asam Laktat (BAL) selama dua minggu, dan dilanjutkan satu minggu
Penentuan BAL dilakukan dengan cara sekali selama dua minggu, dan selanjutnya tiga
menginokulasikan kultur dari tempoyak hasil minggu sekali sampai tempoyak rusak.
fermentasipada media MRS dan diinkubasikan
selama 48 jam pada suhu 37oC. Perhitungan koloni Rancangan Percobaan
yang tumbuh dilakukan setelah 48 jam. Koloni yang Rancangan percobaan yang digunakan
membentuk zona bening diidentifikasi sebagai adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) faktorial
bakteri asam laktat. Setiap koloni yang terbentuk dengan dua faktor yaitu modifikasi cara pengolahan
diamati dan diidentifikasi secara morfologi, dan (faktor pertama) dan jenis kemasan dengan teknik
jumlah koloni dihitung dengan persamaan 1. pengemasan (faktor kedua). Faktor pertama terdiri
dari dua taraf yaitu pasteurisasi dan non pasteurisasi,
Pengujian Mutu Tempoyak Sebelum dan Sesudah sedangkan faktor kedua terdiri dari empat tarafyaitu
Pasteurisasi jenis kemasan PET dengan teknik pengemasan
Variabel mutu yang diamati adalah kadar MAP, jenis kemasan PET dengan teknik
gula total (SNI 0l-2892-1992), kadar asam laktat pengemasan non MAP, jenis kemasan polyamide
(AOAC, 2000), pH (SNI06-6989.11-2004), dengan teknik pengemasan vakum, dan jenis
TPC(SNI 01-2332.3-2006) dan jumlah bakteri asam kemasan polyamide dengan teknik pengemasan non
laktat (Lindayani dan Hartayanie, 2013). Pengujian vakum.Penelitian dilakukan sebanyaktiga kali
mutu untuk melihat mutu awal tempoyak. ulangan. Analisa data menggunakan analisis ragam
(ANOVA) dengan taraf signifikansi 5%. Apabila
Pengemasan Tempoyak terdapat perbedaan antar perlakuanmaka dilanjutkan
Kemasan yang digunakan adalah plastik Uji Duncan.Model rancangan percobaan secara
polyethyleneterephthalate (PET) dan polyamide. umum dapat dilihat pada persamaan 2 (Walpole,
Plastik jenis polyamide yang sudah diisi tempoyak 2005).
dilakukan pengemasan dengan teknikvakum dan non
1
Total bakteri (cfu/gr) = Jumlah koloni per cawan × … … … … … … … … … … . … … … … … … (1)
faktor pengenceran
dimana:
Yijk = µ +Ai + Bj +(AB)ij + εijk ………………….(2)
Yijk = Mutu dan umur simpan terhadap kehidupan mikroflora alami pemfermentasi (khamir
modifikasi cara pengolahan dan bakteri) untuk menjadi asam. Mikroorganisme
tempoyak taraf ke-i, jenis dan teknik tersebutlah yang memicu terjadinya fermentasi
pengemasan taraf ke-j, dan ulangan spontan. Lebih lanjut Puspawati et al. (2010)
ke-k melaporkan bahwa pertumbuhan bakteri asam laktat
µ = Rata-rata umum dapat terus berlangsung apabila karbohidrat, asam
Ai = Pengamatan taraf ke-i dari modifikasi amino dan nutrien lainnya tersedia. Selama proses
cara pengolahan tempoyak fermentasi, karbohidrat dihidrolisis menjadi gula dan
Bj = Pengamatan taraf ke-j dari jenis dan akan diuraikan menjadi senyawa yang sederhana
teknik pengemasan seperti, asam laktat, asam asetat, asam propionat dan
(AB)ij = Pengaruh interaksi taraf ke-i dari etil alkohol oleh bakteri asam laktat. Keberadaan
modifikasi cara pengolahan senyawa-senyawa yang diproduksi oleh bakteri asam
tempoyak dan taraf ke-j dari jenis laktat tersebut dapat menyebabkan citra rasa pada
dan teknik pengemasan tempoyak dan dapat berfungsi sebagai pengawet
εijk = Pengaruh acak dari suatu percobaan (Yuliana, 2005). Selain itu tersedianya protein dan
ke-k yang memperoleh kombinasi zat gizi lain dalam buah durian dapat menyokong
perlakuan taraf ke-i dari modifikasi pertumbuhan mikroflora-mikroflora terutama bakteri
pengolahan tempoyak, taraf ke-j dari asam laktat yang memerlukan sejumlah kecil protein
jenis dan teknik pengemasan dalam pertumbuhannya.
4.1 PPM
4.0 PPNM
3.9 PNV
3.8
PNNV
3.7
pH
NPM
3.6
NPNM
3.5
NNV
3.4
3.3 NNNV
3.2
0 2 4 6 8 10 12 14 21 28 42 56 70 84
Lama penyimpanan (Hari)
Gambar 2. Nilai pH tempoyak pasteurisasi dan non pasteurisasi terhadap lama waktu penyimpanan dari berbagai
perlakuan
Adanya BAL dalam tempoyak merupakan proses perubahan kimia yang disebabkan
mengindikasikan bahwa kualitas tempoyak masih oleh aktivitas mikroorganisme untuk memperoleh
baik. Nur (2005) melaporkan bahwa pH yang energi dengan memecah gula untuk pertumbuhan
optimum bagi aktivitas bakteri asam laktat berkisar dan metabolisme dari mikroorganisme tersebut.
3,00 sampai 8,00. Produk fermentasi yang memiliki Hidrolisis gula akan menghasilkan asam piruvat,
nilai pH rendah relatif lebih tahan selama yang selanjutnya ditransformasi menjadi asam
penyimpanan dibandingkan dengan makanan yang organik, CO2, dan asetaldehid. Asetaldehid akan
mempunyai nilai pH netral atau mendekati netral. diubah menjadi etanol melalui enzim alkohol
Nilai pH rendah tidak dapat ditumbuhi oleh bakteri dehidrogenase.
patogen dan pembusuk. Umumnya mikroba patogen
dan pembusuk dapat tumbuh antara pH 6,00 hingga Asam Laktat
8,00 (Buckle et al., 2010). Semakin cepat BAL Kadar asam laktat merupakan salah satu
mampu menurunkan pH pada makanan fermentasi, indikator kualitas kimia produk tempoyak. Asam
maka semakin cepat penghambatan terhadap laktat digunakan sebagai acidulants (bahan
kebusukan produk sehingga umur simpan bisa lebih pengasam) yang dapat menurunkan pH, sehingga
panjang. Namun, batas pH paling rendah untuk pertumbuhan bakteri patogenakan terhambat. Hasil
tempoyak dengan nilai 3,00. Nilai pH 1,00 atau 2,00 analisis ragam menunjukkan bahwa modifikasi
dalam tempoyak tidak dikehendaki, dikarenakan pengolahan berpengaruh sangat nyata terhadap kadar
pada nilai tersebut dinding sel BAL terganggu dan asam laktat. Uji lanjut Duncan menunjukkan bahwa
mengalami lisis ketika kondisi lingkungan sangat tempoyak non pasteurisasi berbeda nyata dengan
asam, sehingga pertumbuhannya terhambat bahkan tempoyak pasteurisasi. Selanjutnya, hasil analisis
tidak dapat tumbuh pada kondisi tersebut (Guerra et ragam darijenis kemasan dan teknik pengemasan
al., 2006). berpengaruh sangat nyata terhadap kadar asam
laktat. Uji Duncan menunjukkan bahwa tempoyak
Total Gula yang dikemas dengan teknik pengemasan MAP dan
Gula digunakan oleh BAL sebagai nutrien vakum berbeda nyata dengan tempoyak yang
untuk pertumbuhan. Hasil analisis ragam dilakukan pengemasan dengan teknik non MAP dan
menunjukkan bahwa modifikasi pengolahan non vacum.
berpengaruh nyata terhadap kadar gula. Hasil uji Kadar asam laktat tempoyak pasteurisasi
Duncan menunjukkan bahwa tempoyak pasteurisasi pada awal penyimpanan diperoleh 1,49% dan turun
berbeda nyata dengan tempoyak non pasteurisasi. menjadi 0,99% dengan rata-rata 1,43%. Kadar asam
Hal ini dikarenakan tempoyak pasteurisasi laktat tempoyak non pasteurisasi pada awal
menghasilkan jumlah BAL lebih sedikit sehingga penyimpanan diperoleh 1,53% dan turun menjadi
kebutuhan untuk memanfaatkan gula sebagai sumber 1,09% dengan rata-rata 1,81%. Surono (2004)
energi lebih sedikit dibandingkan tempoyak non menyatakan bahwa asam laktat pada produk
pasteurisasi dengan jumlah BAL lebih banyak fermentasi dihasilkan ketika terjadi proses
(Gambar 5). Hasil analisis ragam dari jenis kemasan metabolisme BAL yang memiliki enzim aldolase
dan teknik pengemasan antar perlakuan tidak dan fosfoketolase. Aldolase akan memfermentasi
berbeda nyata. Tempoyak yang direpresentasikan heksosa menjadi asam laktat secara
dengan kadar gula terhadap lama waktu homofermentatif, sedangkan fosfoketolase merubah
penyimpanan dapat dilihat pada Gambar 3. pentosa dan glukonat menjadi asam laktat secara
Gambar 3 menunjukkan bahwa selama proses heterofermentatif. Asam laktat yang dihasilkan oleh
penyimpanan nilai kadar gula produk mengalami BAL akan disekresikan keluar sel dan terakumulasi
penurunan. Kadar gula tempoyak pasteurisasi pada di dalam substrat sehingga meningkatkan keasaman
awal penyimpanan adalah 16,57% dan turun menjadi produk. Namun demikian, proses metabolisme ini
3,28% dengan rata-rata 10,41%. Kadar gula pada akan terhenti atau terhambat akibat produk
tempoyak non pasteurisasi pada awal penyimpanan fermentasi tersebut diproses pasteurisasi atau
adalah 16,79% dan turun menjadi 2,67% dengan dipanaskan, seperti diketahui sel BAL merupakan
rata-rata 9,11%. Laju penurunan kadar gula molekul-molekul besar yang merupakan protein.
tempoyak non pasteurisasi lebih cepat dari pada Protein tidak tahan panas dan akan terdenaturasi.
tempoyak pasteurisasi. Laju penurunan kadar gula Selain itu proses pemanasan akan menginaktifkan
tempoyak disebabkan oleh adanya reaksi biokimia enzim. Akibatnya, proses produksi asam laktat akan
selama proses fermentasi, yang menghidrolisis gula terhenti karena metabolisme tidak berjalan
menjadi asam. Pada tempoyak non pasteurisasi (Chotimah, 2009), sehingga menyebabkan total
jumlah BAL lebih banyak dari pada tempoyak asam tempoyak pasteurisasi lebih rendah dari
pasteurisasi (Gambar 5), sehingga kemampuan BAL tempoyak non pasteurisasi. Hasil pengamatan kadar
mengkonversi gula menjadi senyawa-senyawa asam laktat dari semua perlakuan dapat dilihat pada
sederhana (seperti asam laktat) lebih banyak. Gambar 4.
Salsabila et al. (2013) melaporkan bahwa fermentasi
16 PPM
14 PPNM
12 PNV
Kadar gula 10 PNNV
(%)
8 NPM
6 NPNM
4 NNV
2
NNNV
0 2 4 6 8 10 12 14 21 28 42 56 70 84
Gambar 3. Kadar gula tempoyak pasteurisasi dan non pasteurisasi dari berbagai perlakuan terhadap lama
penyimpanan
2.6 PPM
2.3 PNV
Asam laktat (%)
PPNM
2.0
PNNV
1.7
NPM
1.4
NPNM
1.1 NNV
0.8 NNNV
0 2 4 6 8 10 12 14 21 28 42 56 70 84
Lama penyimpanan (Hari)
Gambar 4. Kadar asam laktat tempoyak pasteurisasi dan non pasteurisasi dari berbagai perlakuan terhadap lama
penyimpanan
Pada Gambar 4 menunjukkan bahwa dengan pernyataan Yuliana (2005), bahwa tempoyak
tempoyak yang dikemas dengan teknik pengemasan yang baik memiliki kadar asam laktat masih berada
vakum (anaerob) dan MAP (anaerob fakultatif) dalam konsentrasi yang tinggi. Penyimpanan yang
diperoleh kadar asam laktat lebih tinggi terlalu lama dapat mempengaruhi keasaman
dibandingkan dengan perlakuan lainnya.Asam laktat tempoyak. Jika kadar keasaman dari asam laktat
adalah metabolit utama dari fermentasi BAL, yang selama penyimpanan terus mengalami penurunan
dihasilkan dari oksidasi piruvat dan memproduksi artinya mutu tempoyak mulai mengalami penurunan.
asam untuk regenerasi NAD+ dari NADH yang Selain itu, perlakuan NNV merupakan tempoyak
dibentuk selama tahap glikolisis.Tahap glikolisis sel, yang dikemas dengan plastik polyamide. Jenis
tidak memerlukan oksigen untuk pertumbuhan plastik polyamide merupakan permeabilitas yang
sehingga produksi asam laktat dapat terjadi secara baik terhadap gas dan aroma, tahan gesekan,
optimal. Namun demikian, bukan berarti dalam benturan, tarikan, stabil terhadap perubahan suhu
kondisi aerob atau ketika keberadaan oksigen cukup, (Sampurno, 2006). Sifat yang demikian diduga dapat
BAL tidak mampu melakukan respirasi melindungi tempoyak dari pertukaran gas dari luar
metabolisme. Pada kondisi ini, keberadaan oksigen dan dalam kemasan. Selain itu Mujiarto (2005)
akan mempengaruhi proses fermentasi menjadi melaporkan bahwa plastik polyamide merupakan
terbatas. Kondisi aerob akan menghasilkan asam jenis kemasan yang paling bagus untuk teknik
laktat lebih rendah dari pada kondisi anaerob pengemasan vacum.
(Serrazanetti et al., 2013), sehingga dapat dimengerti Kadar asam laktat dalam tempoyak
jika kemudian vakum akan mengasilkan laktat lebih menentukan kualitas produk. Kandungan asam yang
tinggi dibandingkan kemasan MAP. Lebih lanjut, tinggi dapat menurunkan pH. Nilai pH untuk
jumlah asam laktat yang tinggi dapat merupakan pengemasan vakum pada perlakuan PNV rata-rata
racun bagi pertumbuhan bakteri yang menyebabkan 3,86 dan perlakuan NNV rata-rata 3,49. Nilai pH
produk cepat mengalami kebusukan. Hal ini sejalan pada teknik pengemasan MAP untuk perlakuan PPM
rata-rata sebesar 3,88 dan NPM rata-rata sebesar menjadi lebih lambat. Putu (2011) melaporkan
3,46. Nilai pH sebesar itu, masih tergolong kedalam bahwa dalam kondisi vakum mikroorganisme akan
pangan berasam tinggi. Golongan pangan berasam mati dengan sendirinya akibat habisnya oksigen dan
tinggi umumnya memiliki umur simpan lebih meningkatnya konsentrasi CO2 yang dihasilkan
panjang. Namun demikian, dalam kondisi anaerob, selama metabolisme. Namun BAL merupakan
gula cendrung dirubah menjadi alkohol, dan jika ini bakteri anaerob fakultatif yang artinya dapat
dibiarkan maka produk mengalami kerusakan. bertahan hidup dengan baik jika ada sedikit oksigen.
Gambar 5 dapat dilihat pada perlakuan PPM dan
Bakteri Asam Laktat (BAL) dan Jumlah Bakteri NPM dengan menggunakan teknik pengemasan
Jumlah mikroba dalam suatu bahan pangan MAP, laju penuruan jumlah BAL lebih lambat dari
merupakan salah satu indikator kualitas perlakuan lainnya. Kondisi anaerob fakultatif dapat
mikrobiologis suatu produk. Jumlah mikroba dalam dicapai dengan pengaturan kemasan, yaitu dengan
bahan pangan mempengaruhi cepat lambatnya cara menekan jumlah oksigen dengan
kerusakan bahan pangan tersebut. Pada produk menginjeksikan CO2 yang disebut dengan
fermentasi umumnya melibatkan BAL (Wirawati, pengemasan teknik MAP. Rendahnya konsentrasi O2
2002). Keberadaan BAL sangat penting dalam dan tingginya CO2 dapat memperpanjang umur
tempoyak. Kualitas tempoyak dipengaruhi pada simpan produk. Namun demikian keberadaan O 2
reaksi biokimia selama fermentasi. BAL harus dikontrol dengan baik, karena jika O2 dibawah
mengekskresikan enzim ekstraseluler pemecah batas minimal maka akan terjadi respirasi anaerob
karbohidrat dan menghasilkan gula sederhana seperti yang dapat menghasilkan alkohol. Jika hal ini
disakarida yang dapat dimanfaatkan untuk dibiarkan akibatnya dapat menyebabkan kerusakan
metabolisme dan menghasilkan asam. Pada proses produk. Muhdarsyah (2007) melaporkan bahwa
fermentasi tempoyak, BAL mempunyai peranan teknik MAP yang baik untuk penyimpanan produk
sebagai (1) mengasamkan produk dengan segar terolah adalah pada konsentrasi oksigen
memproduksi asam laktat dan, (2) menghasilkan kurang dari 10%, karena dapat menghambat
antimikroba berupa asam organik disebut terjadinya browning dan pertumbuhan mikroba.
bakteriosin. Asam laktat dan senyawa-senyawa hasil Perlakuan PPM dan NPM merupakan
fermentasi yang dihasilkan oleh BAL dapat tempoyak yang dikemas dengan plastik PET. Plastik
memberikan aroma dan rasa pada tempoyak. BAL PET merupakan jenis kemasan yang memiliki
tidak berbahaya dikonsumsi, akan tetapi dapat permeabilitas terhadap gas,uap air, dan aroma yang
menurunkan kualitas tempoyak jika jumlahnya rendah, tahan terhadap benturan, gesekan dan
berlebih karena dapat mempercepat laju fermentasi. kekuatan sobek (Sampurno, 2006). Sifat yang
Jumlah BAL yang berlebih dapat mengakibatkan demikian dapat dimungkinkan jika produk yang
populasi BAL tidak seimbang dengan nutrisi yang dikemas memiliki umur simpan lebih panjang. Salah
tersedia, sehingga terjadi kompetisi nutrisi dan BAL satu faktor yang menyebabkan produk pangan cepat
akan cepat mati yang mengakibatkan terjadi mengalami kerusakan adalah oksigen. Jika
penumpukkan metabolit. Hal ini dapat menyebabkan pertukaran gas dari dalam dan luar kemasan tinggi
kerusakan dan kebusukkan pada tempoyak dan dapat menyebabkan laju respirasi yang cepat,
terbentuk alkohol. Oleh karena itu, ketersediaan terjadinya browning. Hal demikian dapat memicu
BAL dalam tempoyak harus dikontrol. kerusakan dan kebusukan pada produk pangan.
Pasteurisasi merupakan cara yang Laju penurunan jumlah BAL yang lambat
memungkinkan untuk mengurangi jumlah BAL yang pada perlakuan PPM dan NPM (Gambar 5), diikuti
berlebih pada tempoyak, sehingga laju fermentasi dengan laju penurunan kadar asam laktatyang lambat
dapat diperlambat. Selain itu, salah satu cara pada perlakuan yang sama (Gambar 4). Konsentrasi
mengontrol agar BAL tumbuh lebih lambat adalah oksigen yang digunakan pada penelitian ini sebesar
dengan mempertahankan lingkungan dalam kemasan 5% sampai 6%. Kandungan oksigen sebesar itu
berada pada kondisi anaerob fakultatif. Apabila memungkinan BAL penghasil asam bertahan hidup
media lingkungan dalam kemasan pada kondisi lebih lama, sehingga dapat terus memproduksi asam
aerob maka akan menyebabkan laju respirasi laktat dengan laju yang lebih rendah. Akumulasi
semakin cepat, seperti terlihat pada Gambar 5 asam yang dihasilkan tersebut dapat menyebabkan
perlakuan PPNM, PNNV, NPNM, dan NNNV pada media lingkungan menjadi asam sehingga terjadi
lama penyimpanan berkisar 21 hari jumlah BAL penurunan pH. Pada Gambar 2 dapat dilihat Nilai pH
menunjukkan penurunan tajam. Selanjutnya, apabila tempoyak cukup rendah yaitu sekitar 4 hingga 3.
media lingkungan pada kondisi anaerob dapat Nilai pH sebesar itu dapat menghambat
menyebabkan pertumbuhan bakteri terhambat. pertumbuhan bakteri patogen dan pembusuk,
Seperti yang terlihat pada Gambar 5, perlakuan PNV sehingga umur simpan tempoyak bisa lebih panjang.
dan NNV telah menghasilkan jumlah BAL yang Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa
rendah. Ketersediaan konsentrasi oksigen di dalam modifikasi pengolahan berpengaruh sangat nyata
kemasan vakum lebih rendah daripada perlakuan terhadap BAL dan TPC. Uji lanjut duncan
lainnya, yang mengakibatkan pertumbuhan mikroba menunjukkan bahwa tempoyak non pasteurisasi
berbeda nyata dengan tempoyak pasteurisasi. Berbeda dengan tempoyak non pasteurisasi, jumlah
Selanjutnya, hasil analisis ragam dari jenis kemasan BAL pada awal penyimpanan cukup tinggi,
dan teknik pengemasan berpengaruh sangat nyata demikian juga dengan kadar gula (Gambar 3),
terhadap BAL dan TPC. Uji lanjut Duncan sehingga dapat menyebabkan terjadinya kompetisi
menunjukkan bahwa tempoyak yang dikemas nutrisi. Persaingan nutrisi dapat menyebabkan
dengan teknik pengemasan vakum berbeda nyata penurunan BAL karena jumlah sel yang mati lebih
dengan perlakuan lainnya. banyak dari pada sel hidup. Hasil identifikasi BAL
Oksigen merupakan nutrisi kunci untuk pada penelitian ini ditemukan Lactobacillusspesies
mikroba anaerob, biasanya ditemukan sebagai dari L. plantarum, L. casei. dan L. fermentum.Tabel
penyusun air selular dan komponen organik. 3 disajikan spesies dari Genus Lactobaciluus hasil
Mikroba yang mendapatkan energi dari proses dari penelitian
metabolisme, membutuhkan oksigen sebagai final Gambar 5 menunjukkan bahwa jumlah
oksigen atau elektron acceptor. Metabolisme yang BAL pada tempoyak pasteurisasi selama
menggunakan glukosa sebagai subtratnya penyimpanan meningkat sesaat, kemudian terjadi
membutuhkan oksigen lebih banyak. Ketersediaan penurunan. Peningkatan ini terjadi karena kadar gula
oksigen dalam proses fermentasi yang menggunakan (nutrien) yang tersedia (Gambar 3) memungkinkan
glukosa sebagai substrat lebih terbatas karena terus untuk mencukupi kebutuhan jumlah populasi BAL
digunakan secara cepat untuk proses metabolisme. (Gambar 5). Gambar 3 dapat dilihat bahwa kadar
Sehingga dapat dipahami jika dalam kondisi vakum gula tempoyak pasteurisasi masih cukup tinggi yang
jumlah bakteri lebih sedikit, dikarenakan artinya pada saat proses pemanasan tidak merusak
ketersediaan oksigen tidak mencukupi sehingga kandungan gizi tempoyak. Kandungan gula tersebut
proses metabolisme terganggu. Gambar 5 digunakan oleh BAL sebagai nutrisi atau sumber
menyajikan BAL dan total bakteri (Gambar 6) pada energi. Hampir semua BAL hanya memperoleh
semua perlakuan. energi dari metabolisme gula sehingga habitat
Gambar 5 menunjukkan bahwa jumlah pertumbuhannya hanya terbatas pada lingkungan
BAL pada tempoyak pasteurisasi selama yang menyediakan cukup gula atau bisa disebut
penyimpanan meningkat sesaat, kemudian terjadi dengan lingkungan yang kaya nutrisi (Chotimah,
penurunan. Peningkatan ini terjadi karena kadar gula 2009). Namun demikian, jika kadar gula mulai habis
(nutrien) yang tersedia (Gambar 3) memungkinkan maka akan menyebabkan penurunan jumlah BAL.
untuk mencukupi kebutuhan jumlah populasi BAL Berbeda dengan tempoyak non pasteurisasi, jumlah
(Gambar 5). Gambar 3 dapat dilihat bahwa kadar BAL pada awal penyimpanan cukup tinggi,
gula tempoyak pasteurisasi masih cukup tinggi yang demikian juga dengan kadar gula (Gambar 3),
artinya pada saat proses pemanasan tidak merusak sehingga dapat menyebabkan terjadinya kompetisi
kandungan gizi tempoyak. Kandungan gula tersebut nutrisi. Persaingan nutrisi dapat menyebabkan
digunakan oleh BAL sebagai nutrisi atau sumber penurunan BAL karena jumlah sel yang mati lebih
energi. Hampir semua BAL hanya memperoleh banyak dari pada sel hidup. Hasil identifikasi BAL
energi dari metabolisme gula sehingga habitat pada penelitian ini ditemukan Lactobacillus spesies
pertumbuhannya hanya terbatas pada lingkungan dari L. plantarum, L. casei. dan L. fermentum. Tabel
yang menyediakan cukup gula atau bisa disebut 3 disajikan spesies dari Genus Lactobaciluus hasil
dengan lingkungan yang kaya nutrisi (Chotimah, dari penelitian.
2009). Namun demikian, jika kadar gula mulai habis
maka akan menyebabkan penurunan jumlah BAL.
22 PPM
Bakteri asam laktat (Log
PPNM
17 PNV
PNNV
Cfu/g)
12 NPM
NPNM
7 NNV
NNNV
2
0 2 4 6 8 10 12 14 21 28 42 56 70 84
Gambar 5. Jumlah BAL tempoyak pasteurisasi dan non pasteurisasi dari berbagai perlakuan terhadap lama
penyimpanan
22 PPM
20
PPNM
18
PNV
16
TPC (Log Cfu/g)
14 PNNV
12 NPM
10 NPNM
8 NNV
6
NNNV
4
2
0 2 4 6 8 10 12 14 21 28 42 56 70 84
Tabel 3. Spesies bakteri asam laktat dari genus Lactobacillus pada tempoyak pasteurisasi dan non pasteurisasi
Jenis bakteri Morfologi Pewarnaan gas Produksi gas Katalase Spora
L. plantarum Batang + heterofermentatif - -
L. fermentum Batang + heterofermentatif - -
L. casei Batang + heterofermentatif - -
Sedangkan nilai total bakteri (Gambar 6) kandungan alkohol yang tinggi dapat
mengikuti nilai dari jumlah BAL (Gambar 5), mempengaruhi rasa yang tidak enak pada tempoyak.
apabila total bakteri lebih tinggi artinya ada Tabel 3 menunjukkan terdapat kandungan
mikroorganisme lain. Hal ini dikarenakan pada saat metanol pada tempoyak. Metanol merupakan
inokulasi media yang digunakan untuk total bakteri senyawa kimia yang sangat beracun jika dikonsumsi
merupakan media umum yang bisa ditumbuhi oleh manusia. Metanol diperoleh dari bahan hasil
semua bakteri, seperti BAL. Hasil identifikasi total pertanian yang mengandung karbohidrat dengan cara
bakteri dalam tempoyak ditemukan adanya bakteri fermentasi. Tempoyak merupakan makanan yang
Staphylococcus aureus, kapang Aspergillus niger, terbuat dari bahan pangan yang mengandung
dan khamir Candida parapsilosis. Keberadaan karbohidrat cukup tinggi dan difermentasi, sehingga
Staphylococcus aureus tersebut dapat memproduksi dapat dimungkinkan jika tempoyak dapat
enterotoksin yang membahayakan kesehatan menghasilkan metanol. Tempoyak yang rusak atau
konsumen jika mengkonsumsi tempoyak. busuk dapat menghasilkan CO2 dan CH4, yang
selanjutnya akan dikonversi menjadi gas sintesis
Kandungan Alkohol (CO, CO2, H2) dengan bantuan katalis. Proses
BAL yang dihasilkan dalam penelitian ini tersebut akan menghasilkan metanol.
adalah jenis bakteri yang bersifat heterofermentatif. Peningkatan produksi alkohol diikuti
Bakteri heterofermentatif mempunyai kemampuan dengan penurunan nilai pH. Hal ini dapat dilihat
untuk menghasilkan alkohol. Selain itu pada selama penyimpanan tempoyak non pasteurisasi
penelitian ini ditemukan khamir yang dapat menghasilkan kandungan alkohol lebih tinggi
memproduksi alkohol. Hasanah et al. (2012) dengan nilai pH lebih rendah, sedangkan tempoyak
melaporkan bahwa khamir mempunyai enzim yang pasteurisasi menghasilkan kandungan alkohol lebih
berperan pada proses fermentasi senyawa gula, rendah dengan nilai pH lebih tinggi (Gambar 2).
seperti memecah glukosa menjadi etanol dan CO2. Tingginya kandungan alkohol pada tempoyak non
Tabel 3 menunjukkan bahwa tempoyak pasteurisasi dikarenakan jumlah BAL lebih banyak
pasteurisasi menghasilkan kadar alkohol lebih (Gambar 5) yang memiliki kemampuan
rendah dari pada tempoyak non pasteurisasi. Hal ini menghasilkan alkohol lebih besar. Altiok (2004)
dikarenakan pada tempoyak non pasteurisasi jumlah melaporkan bahwa bakteri asam laktat mempunyai
BAL lebih banyak dan ditemukan juga khamir, peranan esensial hampir dalam semua proses
sehingga kemampuan menghasilkan alkohol menjadi fermentasi produk yaitu untuk mengasamkan produk
lebih besar. Kadar alkohol yang diperoleh pada dengan memproduksi sebagian besar asam laktat
tempoyak pasteurisasi dari berbagai perlakuan (bakteri homofermentatif), asam asetat, etanol dan
kemasan kurang dari 0,5%. Kandungan kurang dari CO2 (bakteri heterofermentatif).
0,5% diharapkan dalam tempoyak, karena
Tabel 3. Hasil analisis kandungan alkohol pada tempoyak pasteurisasi dan non pasteurisasi dari variasi perlakuan
KESIMPULAN DAN SARAN Amin MA, Jaafar Z, dan Khim L. 2004. Effect of
salt on tempoyak fermentation and sensory
Kesimpulan evaluation. AsianJ Biol Sci. 4 (5): 650-653.
Hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa AOAC.2000. Official Methods of Analysis of The
waktu pasteurisasi yang tepat pada jam ke 84. Association of Analytical Chemists.
Bakteri asam laktat yang teridentifikasi pada Washington DC : AOAC.
tempoyak adalah L. plantarum, L. casei. dan L. AOAC. 2005. Official Methods of Analysis of The
fermentum. Pasteurisasi dapat memperpanjang umur Association of Analytical Chemists.
simpan sampai 84 hari dibandingkan dengan 14 hari Washington DC : AOAC.
untuk tempoyak tanpa pasteurisasi. Jenis kemasan Buckle KA, Edwards RA, Fleet GH, Wootton M.
baik PET maupun poliamyde tidak berpengaruh 2010. Ilmu Pangan. Jakarta: UI-Press.
nyata terhadap umur simpan produk, sedangkan [BSN] Badan Standarisasi Nasional. 1992. Uji
teknik pengemasan modified atmosfir packaging makanan dan minuman. SNI No. 01-2892-
memberikan perlindungan yang lebih baik 1992. Jakarta: BSN
dibandingkan dengan vakum. Tempoyak pasteurisasi [BSN] Badan Standarisasi Nasional. 2004. Cara uji
dengan kemasan PET dan teknik modified atmosfir derajat keasaman (pH) dengan
packaging adalah produk yang terbaik. Produk ini menggunakan alat pH meter-bagian 11 air
mengalami perubahan mutu meliputi nilai pH awal dan air limbah. SNI No. 06-6989.11-2004.
dari 3,97 menjadi 3,73, kadar asam laktat dari 1,49% Jakarta : BSN.
menjadi 0,99%, kadar gula dari 16,57% menjadi [BSN] Badan Standarisasi Nasional. 2006. Cara uji
3,28%, kandungan alkohol sebesar 0,32%, jumlah mikrobiologi-bagian 3: penentuan angka
bakteri asam laktat dari 174,3×104 Cfu/g menjadi lempeng total (ALT) pada produk
8,6×102 Cfu/g dan total jumlah bakteri dari 177×10 4 perikanan. SNI No. 01-2332.3-2006.
Cfu/gmenjadi 182,3×123 Cfu/g. Jakarta : BSN.
[BSN] Badan Standarisasi Nasional. 2009. Etanol
Saran nabati. SNI No. 3565-2009. Jakarta: BSN.
Diperlukan kajian lanjut tentang mekanisme Chotimah SC. 2009. Peranan Streptococcus
dan model matematika laju penghambatan thermophillus dan Lactobacillus bulgaricus
fermentasi tempoyak akibat proses pasteurisasi dan dalam proses pembuatan yogurt. J Sci Pet.
aplikasi kemasan MAP. Selain itu diperlukan kajian 4 (2): 47-52.
untuk menemukan teknik lain dalam usaha Estiasih T dan Ahmadi. 2011. Teknologi Pengolahan
memperpanjang umur simpan tempoyak dalam Pangan. Jakarta: Bumi Aksara.
kemasan seperti penggunaan kemasan aktif pelepas Guerra NP, Bernardez PF, Mendez J, Cachaldora P,
antimikroba atau agen lain yang dapat menghambat Castro LP. 2006. Production of four
pertumbuhan BAL. potentially probiotic lactic acid bacteria and
their evaluation as feed additives for
DAFTAR PUSTAKA weaned piglets. J Anim Feed Sci Technol.
134: 89-107.
Adnan AFM dan Tan IKP. 2006. Isolation of lactic Haryanto B dan Royaningsih S. 2003. Hubungan
acid bacteria from Malaysian foods and antara ketuaan durian cv sunan dengan sifat
assessment of the isolates for industrial fisiknya. J Agritech. 23 (1): 33-36.
potential. Int J BiolTechnol. 98: 1380-1385. Hasanah H, Jannah A, dan Fasya AG. 2012.
Altiok D. 2004. Kinetic modelling of lactic acid Pengaruh lama fermentasi terhadap kadar
productionfrom whey [Disertasi]. Turkey: alkoholtape singkong (Manihot utilissima
Izmir Institute of Technology. pohl). J Alchemy. 2(1):68-79.