The  Small  Scale  

Biodiesel  Test  Manual  
A  manual  of  quality  control  test  methods  for  small  scale  and  homebrew  biodiesel  

Samuel  K.  Parker  

Dickinson  College  
Dickinson  College  Biodiesel  

 
  

Table  of  Contents  

Forward  .........................................................................................................  Error!  Bookmark  not  defined.  
1.  Method  for  Sampling  ...............................................................................................................................  3    
2.  Free  Fatty  Acid  (FFA)  Test  (Oil  Titration)  ..................................................................................................  4  
3.  27/3  Test  ..................................................................................................................................................  5  
4.  Sandy  Brae  Test  .......................................................................................................................................  6  
5.  Density  Test  .............................................................................................................................................  8  
6.  Kinematic  Viscosity  ..................................................................................................................................  9  
7.  Soap  Titration  ........................................................................................................................................  10  
8.  Acid  Number  Test  ..................................................................................................................................  12  
9.  Cloud  Point  Test  .....................................................................................................................................  13  
Work  Cited  .................................................................................................................................................  14  
 
   

1  
 
  

Forward    
 
As  with  all  commercially  produced  fuels,  petroleum  based  or  otherwise,  there  are  quality  standards  for  
biodiesel  that  must  be  met.    Biodiesel  is  often  produced  with  a  variety  of  oils,  catalysts  and  alcohols,  
because  of  this,  the  quality  of  biodiesel  can  vary  from  batch  to  batch  or  gallon  to  gallon.    The  American  
Society  for  Testing  and  Materials  (ASTM)  standards  for  commercially  produced  biodiesel  were  
established  with  the  assistance  of  the  National  Biodiesel  Board  (NBB)  (Drapcho,  Nhuan  and  Walker,  
2008).    The  standards  and  techniques  for  biodiesel  quality  in  the  U.S.  are  given  in  the  ASTM  D6751.      
 
To  ensure  that  biodiesel  meets  the  standards,  a  significant  amount  of  laboratory  testing  must  be  done  
on  the  fuel.    The  ASTM  D6751  standards  provide  the  approved  test  protocols  for  the  quality  standards  
that  must  be  met.    To  either  perform  these  tests  or  have  them  done  may  be  expensive.    Having  a  sample  
tested  by  ASTM  Certified  laboratory  can  cost  upwards  of  $50.00/sample.    For  homebrew,  collegiate  or  
generally  small  scale  biodiesel  producers,  this  will  add  up  quickly  to  amounts  that  are  no  longer  
affordable.    Alternatively,  producers  can  purchase  the  appropriate  equipment  to  test  their  own  fuel.    
The  problem  with  this  is  much  of  the  laboratory  equipment  costs  tens  of  thousands  of  dollars  and  is  
unreasonable  for  a  small  scale  producer  to  purchase  without  financial  assistance.        
 
If  possible,  performing  the  ASTM  test  and  meeting  the  standards  should  be  done.    In  many  situations,  
this  will  not  be  possible  due  to  cost  or  lack  of  equipment.    This  does  not  mean  that  high  quality  fuel  
cannot  be  produced  or  tested  for  quality.    This  booklet  has  been  put  together  with  the  homebrew  and  
small  scale  biodiesel  producer  in  mind.      It  establishes  a  set  of  test  which  can  be  done  with  a  small  
investment  and  that  ensure  the  quality  of  fuel  being  produced.      
 
I  hope  this  book  will  assist  you  in  feeling  proud  in  the  fuel  you  produce  and  make  you  confident  in  using  
it.  
 
Thank  you,  
 
Sam  Parker  
Dickinson  College  ’12    
Student  Manager  
Dickinson  College  Biodiesel    
Skparker1989@gmail.com  
   

2  
 
  

1.  Method  for  Sampling    

Why:  
Taking  a  sample  that  accurately  represents  the  fuel  or  vegetable  oil  being  tested  is  very  important.    If  
done  in  a  way  that  does  not  give  an  accurate  representation  of  the  liquid,  test  results  may  read  false.    
False  results  on  tests  may  cause  severe  problems  when  using  the  fuel  or  when  processing  the  vegetable  
oil.  
 

Procedure:  
1. Ensure  homogeneity  of  fuel  or  oil.    Mix  the  liquid,  if  possible,  for  5+  minutes  before  pulling  a  
sample.      If  this  is  not  possible  try  and  get  your  sample  directly  after  transferring  or  at  point  
which  you  feel  the  fuel  is  homogeneous.  
 
2. a.  If  you  are  pulling  a  sample  from  a  port  on  a  tank  or  a  pipe,  purge  the  lines  to  be  sure  that  you  
get  an  accurate  sample.    Do  this  by  letting  the  fuel  or  oil  to  flow  from  the  sample  port  into  a  
bucket  or  jar  for  about  5  seconds.  
 
b.  If  you  are  pulling  a  sample  with  a  syringe,  filling  the  syringe  once  with  liquid.    Drain  the  
syringe  and  then  fill  it  once  again.  
 
3. Get  a  clean  container  of  an  appropriate  size  to  hold  the  sample.    Beakers  and  canning  jars  work  
well  for  this.  
 
4.  Fill  the  container  with  the  desired  amount  of  fuel  or  vegetable  oil.    

3  
 
  

2.  Free  Fatty  Acid  (FFA)  Test  (Oil  Titration)  

 
When  to  Test:      
After  heating  oil  in  reactor,  before  mixing  methanol  and  KOH  lye.  
 
Why:    
This  test  determines  the  amount  of  KOH  lye  catalyst  that  must  be  added  to  neutralize  free  fatty  acids  
produced  when  cooking  oil  is  heated  in  a  fryer.      

Materials:  
• 125mL  E-­‐flask  
• 91+%  Isopropyl  alcohol  
• Phenolphthalein  indicator  
• 50  mL  Burette  
• 0.1%  KOH  solution  

Procedure:  
1. Add  10  mL  of  91+%  isopropyl  alcohol  to  a  125  ml  E-­‐flask.      

2. Add  1  mL  of  heated  oil  from  reactor  to  the  isopropyl  alcohol.  

3. Stir  the  alcohol  and  oil  until  the  oil  is  completely  dissolved.  

4. Add  2  drops  of  phenolphthalein  indicator.  

5. Add  30-­‐50  mL  of  0.1%  KOH  solution  to  a  burette.  

6. Slowly  add  the  0.1%  KOH  solution  to  the  E-­‐Flask  until  it  turns  pink.        

Number  milliliters  of  0.1%  KOH  added  is  equal  to  the  number  grams  of  EXTRA  KOH  beyond  normal  7.5  
g/L  that  must  be  added  per  liter  of  oil.  
 
NOTE:    Repeat  all  titrations  at  least  3  times  to  an  accuracy  of  +/-­‐  1%.      
 
Calculation:  
Total  KOH  =  (7.5  grams  KOH  +  Titration  #)  *  liters    
 

What  To  Do:    

If  the  average  titration  number  is  above  9.5  g/L,  the  oil  is  unusable.    The  amounts  of  KOH  lye  that  would  
be  needed  to  completely  neutralize  the  free  fatty  acids  in  the  oil  would  create  a  great  deal  of  soap  that  
would  make  the  batch  of  fuel  unusable.    If  this  problem  occurs,  empty  the  reactor  and  find  an  
appropriate  way  to  dispose  of  the  oil;  composting  it  is  a  good  option.  
   

4  
 
  

3.  27/3  Test    
When  to  Test:      
After  methanol  recovery  has  been  performed  on  the  batch.    If  methanol  recovery  is  not  being  used  in  
your  process  this  test  can  be  performed  after  the  washing  and  drying  of  the  fuel.  

Why:    
This  test  helps  to  determine  if  complete  conversion  of  oil  to  biodiesel  has  occurred.    It  is  important  to  
test  for  complete  conversion  of  biodiesel  because  if  it  has  no  occurred,  then  the  fuel  may  cause  engine  
issues  if  used.    

Materials:  
• Methanol  
• Test  tube  or  graduated  cylinder    
• 5+  mL  Syringe  
• Rubber  stopper    

Procedure:    
1. Add  27  mL  of  methanol  to  a  test  tube  or  graduated  cylinder.    Be  sure  that  you  have  a  way  to  
close  the  cylinder  before  adding  the  methanol.  

2. Take  a  sample  of  biodiesel.    See  Section  1  for  further  explanation  of  proper  sampling.  

3. Add  3  mL  of  biodiesel  to  the  test  tube  or  cylinder.  

4. Put  the  stopper  in  the  tube  and  shake  for  30  seconds.  

5. Let  the  test  settle  for  a  second.  Examine  the  bottom  of  the  test  tube.  If  full  conversion  has  
occurred  then  the  methanol/biodiesel  solution  will  be  crystal  clear  with  a  slight  yellow  tint.    If  
the  full  conversion  has  not  occurred  oil  “bubbles”  will  form  at  the  bottom  of  the  test  tube.  

What  To  Do:    

If  the  test  fails,  reprocess  the  biodiesel  with  a  single  stage  reaction,  run  methanol  recovery  and  test  the  
fuel  again.    

5  
 
  

4.  Sandy  Brae  Test  

When  to  Test:    
After  washing  and  drying  fuel,  prior  to  storage  or  use.  

Why:    
Moisture  in  fuel  can  cause  high  acid  values,  increase  the  risk  of  oxidation  and  potentially  promote  
corrosion  of  engines  and  fuel  tanks  in  vehicles.  This  test  is  used  to  measure  the  precise  the  amount  of  
water  in  parts  per  million  (ppm)  remaining  in  the  fuel.    

Procedure:    
(for  further  instruction  see  page  5  of  the  Sandy  Brae  instruction  manual)  
1. Add  30  ml  of  biodiesel  to  the  larger  compartment  in  test  vessel.  *  

2. Add  10  ml  of  Reagent  B  to  the  biodiesel  in  the  larger  compartment.*  
*be  careful  not  to  get  any  in  the  smaller  compartment  

3. Add  two  packets  of  Reagent  A  to  the  smaller  compartment.  Refer  to  page  9  in  the  Sandy  Brae  
Manual  for  preparation  of  Reagent  A**  
**  CAUTION!  Reagent  A  contains  Calcium  Hydride  which,  if  brought  into  contact  with  water,  
will  create  hydrogen  gas  which  is  very  flammable.  Calcium  Hydride  can  cause  eye  and  skin  
burns.    Be  carefully  not  to  get  any  Reagent  A  into  the  larger  compartment.  

4. Keeping  the  vessel  up  right,  screw  the  cap  on  tightly.    

5. Shake  vigorously  for  a  20  seconds.  

6. Observe  the  pressure  gauge.    If  the  pressure  reaches  14psi,  press  the  pressure  release  valve  and  
shake  for  another  20  seconds.    Repeat  until  the  pressure  stops.  

7. Use  the  table  at  the  end  of  the  section  (Page  7),  to  figure  out  the  water  content  in  the  fuel.  

 
What  To  Do:      
If  the  water  content  is  above  500  ppm  then  continue  to  dry  the  fuel  until  this  point  is  reached.  
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

6  
 
  

   

PSI   %  Water       PPM  

1   0.01%   100  
2   0.02%   200  
3   0.03%   300  
4   0.04%   400  
5   0.05%   500  
6   0.06%   600  
7   0.07%   700  
8   0.08%   800  
9   0.09%   900  
10   %  
0.10%   1000  
11   0.11%   1100  
12   0.12%   1200  
13   0.13%   1300  
14   0.14%   1400  
15   0.15%   1500  

7  
 
  

5.  Density  Test  
When:  
After  performing  methanol  recovery.    In  the  absence  of  methanol  recovery,  after  washing  and  drying  
fuel,  prior  to  storage  or  use.  

Why:  
This  test  is  performed  to  indicate  residual  methanol  in  biodiesel.    Residual  methanol  will  lower  the  flash  
point  of  the  fuel,  potentially  harming  engines  when  used.    Biodiesel  has  a  density  of  approximately  0.88  
g/mL,  while  methanol  has  a  density  of  approximately  0.791  g/mL.      Thus,  if  there  is  residual  methanol  in  
the  fuel,  then  the  density  will  be  reduced.    

Materials:  
• 1000  mL  Beaker  or  container  (ex.  Canning  jar)  
• Balance    
• Calculator    

Procedure:  
1. Place  1000  mL  beaker  on  the  balance  and  tare  the  weight,  otherwise  known  as  zeroing  the  
balance.  

2. Get  a  1000  mL  sample  of  biodiesel  in  the  beaker.    Do  not  forget  to  follow  proper  sampling  
technique  found  in  section  1  (page  3).  

3. Place  sample  of  biodiesel  and  beaker  on  balance.  

4. Record  weight.  

5. The  sample  should  weigh  about  880  g  +/-­‐  10  g.    If  the  sample  weighs  significantly  less,  more  than  
10  g,  than  the  biodiesel  has  residue  alcohol  (methanol)  in  it.      

What  To  Do:  

If  the  test  fails,  options  for  removing  methanol  are  methanol  recovery,  water  washing  and/or  bubble  or  
other  methods  of  drying.    If  you  wish  to  perform  methanol  recovery  and  have  not  done  so  before,  be  
sure  to  do  significant  research  into  the  process.    I  will  be  happy  to  fields  any  questions  about  methanol  
recovery,  skparker1989@gmail.com.    
   

8  
 
  

6.  Kinematic  Viscosity    
When:  
After  washing  and  drying  fuel,  prior  to  storage  or  use.  

Why:  
Kinematic  Viscosity  can  indicate  the  oxidation  stability.    High  viscosity  can  indicate  poor  oxidation  
stability.    Oxidation  stability  is  the  “shelf  life”  of  the  fuel,  or  the  length  of  time  fuel  can  be  left  unused  in  
storage  without  going  bad.  This  is  a  problem  that  derives  from  the  fuels  being  biologically  based.    

Material:  
• #0  Mini  Ford  Dip  Viscosity  Cup    
• Beaker  or  other  heat  resistance  dish  
• Thermometer  
• Stop  watch  with  accuracy  of  tenth  of  a  second  or  better  

Procedure:  
1. Heat  a  sample,  200+  mL,  of  biodiesel  to  25°C  ±  0.5°C.    Proper  temperature  is  very  important  for  
accurate  results.  

2. Completely  submerge  the  #0  Mini  Ford  Dip  Viscosity  Cup  in  the  sample  of  heated  biodiesel.    
Allow  cup  to  sit  in  biodiesel  for  1-­‐5  minutes  to  allow  for  the  cup  and  biodiesel  to  reach  equal  
temperatures.  

3. With  stop  watch  in  hand,  quickly  remove  the  #0  Mini  Ford  Dip  Viscosity  Cup  from  the  sample.  
Begin  timing  as  the  top  edge  of  the  cup  breaks  the  surface  of  the  biodiesel.    

4. Stop  the  timer  when  the  first  definite  break  in  flow  of  biodiesel  occurs  towards  the  bottom  of  
the  cup.  

5. Record  results  and  repeat  two  more  times.    Keep  temperature  “drift”  between  test  at  ±  0.2°C.  

6. The  results  are  in  seconds  and  will  need  to  be  converted  centistokes.      
The  formula  for  conversion  is-­‐  
                                                             V  =  (0.266  *  T)  –  (157/T)  
       
Where  V  is  viscosity  in  centistokes  and  T  is  time  in  seconds.  

7. The  ASTM  Standards  require  results  between  1.9  and  6.0  centistokes.  

8. Procedure  and  conversion  can  be  found  on  page  12  and  page  14,  respectively,  of  the  Mini  Ford  
Dip  Viscosity  Cup  Instruction  Manual.  

What  To  Do:  

If  this  test  gets  results  below  1.9  centistokes,  the  fuel  is  too  thin  and  blending  it  with  more  viscous  fuel  
should  be  done  before  using.    If  this  test  gets  results  above  6.0,  then  full  conversion  of  fuel  has  not  been  
achieved  and  reprocessing  the  fuel  is  required.  
   

9  
 
  

7.  Soap  Titration  
When  to  Test:      
After  washing  and  drying  fuel,  prior  to  storage  or  use  and  has  passed  Sandy  Brae  Test.  

Why:    
Determines  the  parts  per  million  of  soap  in  the  fuel.    Soap  is  formed  from  the  catalyst  used  in  
processing.      If  concentrations  of  soap  remaining  in  the  biodiesel  are  too  high  then  the  fuel  can  cause  
engine  problems  if  used.  

Materials  
• Acetone  
• E-­‐flask  
• Bromophenol  Blue  
• Syringe    
• Balance  
• Burette    
• 0.01N  HCl  solution  

Procedure:  
1. Add  100  mL  of  acetone  to  a  250  mL  E-­‐flask.  

2. Add  12  drops  of  0.04%  Bromophenol  Blue  indicator.  

3. Tare  the  flask.  

4. Add  20  grams  of  biodiesel  (approximately  23  mL)—record  actual  mass.  

5. Add  30mL  of  0.01N  HCl  solution  to  a  burette.  

6. Titrate  with  0.01N  HCl  to  a  yellow  endpoint.  

Calculation:  
PPM  Soap  (KOH)  =  mL  of  0.01N  HCl  X  320.6/2  
           
                               =  mL  0.01N  HCl  X  1  L  HCL                    X    0.01  mol  HCl  X  1  mol  soap  X  320.56  g  soap  X  1000000  
                                     1000  mL  HCl                        1  L  HCl                      1  mol  HCl            20  g  biodiesel  
 
PPM  Soap  (NaOH)  =  mL  of  0.01N  HCl  X  228.53/2  
           
                               =  mL  0.01N  HCl  X  1  L  HCL                    X    0.01  mol  HCl  X  1  mol  soap  X  228.53  g  soap  X  1000000  
                                     1000  mL  HCl                        1  L  HCl                      1  mol  HCl            20  g  biodiesel  
 
NOTE:    Repeat  all  titrations  at  least  3  times  to  an  accuracy  of  +/-­‐  1%  

What  To  Do:    

The  ASTM  standard  for  Sodium  and  Potasium  combined  is  5  ppm  or  0.05%  of  mass.  If  the  soap  content  is  
above  50  ppm,  water  wash  the  fuel  again.  If  the  soap  content  is  below  50  ppm,  the  test  has  passed  and  
is  ready  for  storage  or  use.      
10  
 
  

The  standards  for  this  test  are  set  higher  than  he  ASTM  Standard  because  it  is  very  difficult  to  test  for  
levels  as  low  as  5ppm  without  expensive  equipment  and  fuel  with  higher  levels  of  soap  can  be  used.  

11  
 
  

8.  Acid  Number  Test    

When  to  Test:    
After  washing  and  drying  fuel,  prior  to  storage  or  use  and  has  passes  Soap  Titration.  

Why:      
Determines  how  acidic  the  biodiesel  is  after  processing.    Acid  number  indicates  the  amount  of  Free  Fatty  
acids  that  are  remaining  in  the  fuel,  which  implies  incomplete  conversion  of  fuel  or  reverse  conversion.    
High  acid  number  can  cause  corrosion  in  engine  and  vehicle  parts  if  used  and  thus  meeting  the  
standards  is  important.  

Materials  
• 125mL  E-­‐flask  
• 91+%  Isopropyl  alcohol  
• Phenolphthalein  indicator  
• 50  mL  Burette  
• 0.1N  KOH  solution  

Procedure:      
1. Add  50  mL  of  91+%  isopropyl  alcohol  to  a  250  ml  E-­‐flask.  

2. Add  5  g  sample  of  biodiesel  to  250  mL  E-­‐flask.  

3. Add  2  drops  of  phenolphthalein  indicator.  

4. Stir  until  all  three  ingredients  are  fully  dissolved.  

5. Add  30mL  of  0.1N  KOH  Solution  to  a  burette.  

6. Titrate  with  0.1N  KOH  to  a  pink  endpoint.      

7. The  ASTM  limit  for  Acid  Number  is  0.50  mg  KOH/g.  

Calculation:  
Acid  #=  ml  0.1N  KOH  X  0.1N  KOH  X  56.1  
                           5  g  biodiesel    

What  To  Do:    

If  acid  number  is  at  or  below  0.50  mg  KOH/g  the  fuel  is  can  be  put  into  storage  or  be  used.    If  acid  
number  is  above  0.50  mg  KOH/g,  blend  with  fuel  that  is  low  enough  to  bring  the  combined  acid  number  
below  0.50  mg  KOH/g.    If  that  is  not  an  option  consider  caustic  stripping.      
 
Caustic  stripping  is  a  process  by  which  you  use  a  basic  chemical  solution  (KOH  in  H20),  to  reduce  the  acid  
value  of  the  biodiesel.    To  figure  out  how  much  KOH  you  need  to  add  use  the  following  equation  
Grams  of  KOH  =  Acid  #  X  3326.4  g  biodiesel  X  #  gallons  
                                         1,000  
Dissolve  the  KOH  in  about  a  liter  of  distilled  water.  Add  it  to  the  biodiesel  while  it  is  mixing.    Allow  the  
KOH  solution  to  mix  with  the  biodiesel  for  about  30  minute.    Finally  perform  wash  and  dry  steps  again.    
You  will  want  to  perform  Soap  Titration  (Section  7)  and  Acid  Number  (Section  8)  tests  again.      

12  
 
  

9.  Cloud  Point  Test  

When  to  Test:  
After  washing  and  drying  fuel,  prior  to  storage  or  use.  

Why:    
Determines  the  temperature  at  which  the  fuel  is  likely  to  plug  the  fuel  filter.    This  test  serves  to  inform  
the  user  of  the  fuel  as  to  when  he  or  she  should  begin  to  blend  the  biodiesel  to  avoid  the  gelling.    

Materials    
• Larger  Beaker  or  container    
• Thermometer  
• Small  refrigerator    

Procedure:  
1. Take  a  large  sample  of  biodiesel  (+500  mL)  in  a  beaker.  

2. Place  thermometer  into  the  biodiesel  and  place  biodiesel  in  the  refrigerator.  

3. Monitor  temperature  of  the  biodiesel  and  watch  to  see  when  fuel  begins  to  get  cloudy.  

4. ASTM  has  no  requirement  for  cloud  point,  the  test  limitations  are  noted  as  “Report”.  

What  To  Do:      

Record  the  temperature  and  inform  the  users  of  the  fuel.  
   

13  
 
  

Work  Cited  
 
ASTM  International.  "ASTM  International  -­‐  Proficiency  Testing  Programs  -­‐  Petroleum  
Products  &  Lubricants  -­‐  Biodiesel."  ASTM  International  -­‐  Standards  Worldwide.  ASTM.  Web.  
21  Sept.  2011.  <http://www.astm.org/STATQA/biodiesel.htm>.    
 
Kemp,  William  H.  "Biodiesel  Fuel  Quality."  Biodiesel  Basics  and  Beyond:  a  Comprehensive  
Guide  to  Production  and  Use  for  the  Home  and  Farm.  Tamworth,  Ont.:  Aztext,  2006.  101-­‐06.  
Print.    
 
Oak  Ridge  National  Laboratory.  "Bioenergy  Conversion  Factors."  Bioenergy  Feedstock  
Information  Network  (BFIN)  Administration  Site.  23  June  2003.  Web.  27  Dec.  2011.  
<https://bioenergy.ornl.gov/papers/misc/energy_conv.html>.    
 
Sandy  Brae  Laboratories,  Inc.  "Water  Test  Kit  Instructions."  Sandy  Brae.  Sandy  Brae  
Laboratories,  Inc.,  20  Nov.  2009.  Web.  13  Oct.  2011.  
<http://www.sandybrae.com/wtkinst.pdf>.    
 
Van,  Gerpen  Jon  Harlan.  Building  a  Successful  Biodiesel  Business:  Technology  
Considerations,  Developing  the  Business,  Analytical  Methodologies.  [United  States]:  
Biodiesel  Basics,  2006.  Print.    
 
Walker,  Roger.  "Mass,  Weight,  Density  or  Specific  Gravity  of  Liquids."  Metric  Conversion  
Tables  to  or  from  Imperial  Measurements  The  SI  System  for  Metric  Conversion.  8  Sept.  2007.  
Web.  27  Dec.  2011.  <http://www.simetric.co.uk/si_liquids.htm>.    
 

14