EFEKTIVITAS EKSTRAK BATANG BROTOWALI

(Tinospora crispa L. Miers) TERHADAP PERTUMBUHAN Streptococcus

pyogenes SECARA IN VITRO
Made Yurika Ningsari
Departemen Kedokteran Gigi Periodonsia, Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Mahasaraswati Denpasar,
Kota Denpasar
E-mail: yurikaningsari97@gmail.com

ABSTRACT
Oral hygiene that is not properly maintained will cause diseases in the oral cavity. The common periodontal diseases are
including gingivitis and periodontitis. Streptococcus is a heterogeneous, gram-positive and round-shaped bacterium that
typically forms pairs or chains during its growth period. Among Streptococcus bacteria, Streptococcus pyogenes is
known as pathogenic microorganisms that are associated with various oral cavity diseases. Various traditional
medicines have been used by the community to treat various infectious diseases caused by bacteria and fungi, one of
which is the brotowali stem (Tinospora crispa L Miers). Since brotowali has active tannins, flavonoids, saponins,
alkaloids that are scientifically proven to have the ability to be antimicrobial, antinociceptive, anti-inflammatory,
antiproliferative and antioxidant. The purpose of this study was to determine whether the antibacterial effects of
brotowali stem extract (Tinospora crispa L. Miers) on the growth of Streptococcus pyogenes. This study is a laboratory
experimental with post-test only control group design, using Mueller Hinton Agar (MHA) media testing. Tests were
carried out using the Kirby-Bauer method at concentrations of 25%, 50%, 75%, 100% and negative control of 96%
ethanol and positive control of vancomycin. Observations were made after 24 hours of incubation period. The results of
the analysis in this study note that the optimal concentration of the treatment given to this bacterium is the brotowali
extract at 50% concentration. Brotowali stem extract (Tinospora crispa L. Miers) has the activity of inhibiting the
growth of Streptococcus pyogenes bacteria, where there are significant differences between the control group and the
treatment group. This shows that the antibacterial activity of brotowali (Tinospora crispa L. Miers) stem against the
growth of Streptococcus pyogenes.

Keywords: brotowali stem extract, streptococcus pyogenes, antibacterial

PENDAHULUAN permukaan dorsal lidah, dan salah satu bakteri tersebut

Kesehatan merupakan bagian terpenting dalam
kehidupan manusia, yaitu sehat secara jasmani dan
rohani. Tidak terkecuali anak-anak, setiap orang tua
menginginkan anaknya bisa tumbuh dan berkembang
secara optimal. Kesehatan yang perlu diperhatikan
selain kesehatan tubuh secara umum, juga kesehatan
gigi dan mulut (Vonanda 2016).
Kebersihan mulut yang tidak dipelihara dengan
baik akan menimbulkan penyakit di rongga mulut.
Penyakit periodontal (seperti gingivitis dan
periodontitis) dan karies gigi merupakan akibat
kebersihan mulut yang buruk. Penyakit periodontal dan
karies gigi merupakan penyakit di rongga mulut yang
dapat menyebabkan hilangnya gigi secara patologis.
(Basuni dkk. 2014).
Penyakit periodontal masih merupakan penyakit
rongga mulut dengan prevalensi tinggi di Indonesia.
Penyakit periodontal memiliki prevalensi sebesar
96,58% pada kelompok umur 15-65 tahun dan
menduduki urutan kedua dari masalah penyakit rongga
mulut setelah karies gigi (Furoida dkk. 2014).
Rongga mulut manusia adalah sistem biologis
yang mendukung kehidupan bagi banyak spesies
mikroorganisme, tetapi ketika mikroorganisme ini
menembus ke dalam jaringan dapat menyebabkan
infeksi bakteri. Lebih dari 100 bakteri ditemukan
melekat pada setiap sel epitel terlepas yang ada di
adalah golongan Streptococcus (Elhas 2016).
Streptococcus merupakan bakteri yang
heterogen, bergram positif dan berbentuk bulat yang
secara khas membentuk pasangan atau rantai selama
masa pertumbuhannya. Di antara bakteri
Streptococcus, Streptococcus pyogenes dikenal sebagai
mikroorganisme patogen yang dihubungkan dengan
berbagai penyakit rongga mulut. Bakteri ini
menyebabkan timbulnya penyakit dengan tanda-tanda
yang khas seperti nekrosis, peradangan pasca
pencabutan dan pembentukan abses dalam rongga
mulut (Elhas, 2016).
Indonesia merupakan salah satu negara yang
kaya akan tumbuhan obat. Saat ini banyak di temukan
obat-obat herbal tradisional oleh para ilmuan. Berbagai
obat tradisional telah digunakan oleh masyarakat untuk
mengobati berbagai penyakit infeksi yang disebabkan
oleh bakteri dan jamur, salah satunya adalah batang
brotowali (Tinospora crispa L Miers). Brotowali
umumnya ditemukan tumbuh liar di hutan, ladang atau
ditanam di halaman dekat pagar. Tanaman ini
menyukai tempat terbuka dan terkena sinar matahari
(Susanti et al., 2016).
Menurut data para peneliti sebelumnya tentang
brotowali, kandungan kimia dan kegunaan brotowali di
bidang kesehatan belum sepenuhnya dipelajari secara
jelas. Beberapa sumber menyatakan bahwa brotowali
memiliki zat aktif tannin, flavanoid, saponin,
berberine, picretin, epigenin, dan resin yang secara Media Mueller Hinton Blood Agar  uji aktivitas
ilmiah terbukti memiliki kemampuan sebagai antibakteri secara in vitro  pengamatan dan
antimikroba, antinosiseptif, antiinflamasi, pengukuran  analisis data.
antiproliferatif dan antioksida (Sonata, 2014).
Ekstrak batang brotowali juga mempunyai efek HASIL DAN PEMBAHASAN
bakteriostatik terhadap Escherichia coli dan
Staphylococcus aureus. Ekstrak batang, daun, dan akar Tabel 1. Hasil Uji Mann Whiteney
brotowali secara potensial mempunyai efek Kelompok Sig, Keterangan
antimikroba (terhadap gram positif dan gram negatif), P2 0,015 Ada Perbedaan
antijamur (terhadap Candida albicans). Salah satu
penelitian melaporkan bahwa salah satu ekstrak dari P3 0,044 Ada Perbedaan
tanaman brotowali menghambat pertumbuhan P1 P4 0,881 Tidak ada Perbedaan
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus (Warsinah K+ 0,018 Ada Perbedaan
et al., 2015). K- 0,011 Ada Perbedaan
Menurut penelitian yang dilakukan oleh Susanti
et al. (2016), konsentrasi hambat minimum ekstrak P3 0,874 Tidak Ada Perbedaan
batang brotowali terhadap bakteri Staphylococcus P4 0,098 Tidak Ada Perbedaan
aureus dan Pseudomonas aeruginosa adalah pada P2
K+ 0,018 Ada Perbedaan
konsentrasi 9 %. Berberine satu contoh penting K- 0,011 Ada Perbedaan
alkaloid yang bersifat antibakteri terhadap bakteri
dengan mekanisme penghambat sintesis protein dan P4 0,137 Tidak Ada Perbedaan
kemampuan untuk berinteraksi dengan DNA. Oleh P3 K+ 0,020 Ada Perbedaan
karena itu, kemampuan alkaloid berberina ini dipercaya K- 0,013 Ada Perbedaan
mampu menekan pertumbuhan bakteri Staphylococcus
K+ 0,012 Ada Perbedaan
aureus dan Pseudomonas aeruginosa.
P4 K- 0,013 Ada Perbedaan
Menurut Muslimin et al., (2017), penelitian
secara in vitro menggunakan ekstrak batang brotowali K+ K- 0,014 Ada Perbedaan
dengan konsentrasi 8 % dan 32 % lebih sensitif Keterangan:
daripada amoxicillin yang terlihat dari terbentuknya P1 : Kelompok batang brotowali (Tinospora crispa L.
zona hambatan. Kandungan yang terdapat dalam Miers) dengan konsentrasi 25%
brotowali seperti alkaloid, flavonoid dan saponin P2 : Kelompok batang brotowali (Tinospora crispa L.
mempunyai efek antibakterial terhadap Escherichia Miers) dengan konsentrasi 50%
coli. P3 : Kelompok batang brotowali (Tinospora crispa L.
Berdasarkan uraian di atas, maka peneliti Miers) dengan kosentrasi 75%
tertarik meneliti efektivitas ekstrak batang brotowali P4 : Kelompok batang brotowali (Tinospora crispa L.
(Tinospora crispa L. Miers) terhadap pertumbuhan Miers) dengan kosentrasi 100%
Streptococcus pyogenes secara in vitro. K+ : Kelompok kontrol positif dengan pemberian
antibiotik Vancomycin
BAHAN DAN METODE K- : Kelompok kontrol negative, menggunakan etanol
Alat: blender, penyaring buncher, pisau, 96%
vacuum gas, ayakan 40 mesh, botol timbangan, neraca
analitik (adam), batang pengaduk, spatula, gelas ukur, Pada output tabel 1 menunjukkan bahwa
vacum rotary evaporator, kertas saring whatman, terdapat perbedaan yang bermakna rata-rata diameter
cawan petri, paper disk blank, mikropipet, pinset, lidi zona hambat antar kelompok perlakuan dengan
kapas steril, lampu Bunsen, inkubator, jangka sorong, kelompok kontrol negatif, terbukti dengan tingkat
timer, tabung glass, ose, waterbath. signifikansi di bawah 0,05. Sedangkan tidak terdapat
Bahan: batang brotowal, etanol 96%, Mueller perbedaan yang bermakna rata-rata diameter zona
Hinton Blood Agar, NaCl 0,9%, Streptococcus hambat antar kelompok perlakuan P1 dengan P4 dan
pyogenes ATCC 19615, ekstrak batang brotowali 25%, P2 dengan P3, P4, serta P3 dengan P4 terbukti dengan
50%, 75%, 100%, vancomycin, handscoon, masker. tingkat signifikansi di atas 0,05.
Rancangan penelitian yang digunakan pada
penelitian ini adalah post-test only control group
design. Populasi penelitian ini adalah koloni bakteri
Streptococcus pyogenes ATCC 19615 yang di dapat
dari laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran
Universitas Udayana dan jumlah sampel yang
digunakan adalah 4; artinya pada kelompok I-VI
dilakukan masing-masing 4 kali pengulangan.
Prosedur penelitian dimulai dengan:
persiapan sampel  cara kerja ekstraksi batang
brotowali  skrining fitokimia ekstrak batang
brotowali  pembuatan larutan uji  pembuatan
 Gambar 1. Zona Bening di Sekitar Disk Menunjukkan
Adanya Daya Hambat
Hasil uji antibakteri batang brotowali
(Tinospora crispa L. Miers) terhadap bakteri
Streptococcus pyogenes, sudah tampak pada
konsentrasi 25% yaitu dengan terbentuk diameter zona
hambat sebesar 11,75 mm. Zona hambat tertinggi
untuk pemberian batang brotowali (Tinospora crispa
L. Miers) ada pada konsentrasi 50% dan konsentrasi
75% dengan diameter sebesar 13,25 mm.
Menurut Davis dan Stout (1971), kriteria
kekuatan daya antibakteri sebagai berikut: diameter
zona hambat 5 mm atau kurang dikategorikan lemah,
zona hambat 5-10 mm dikategorikan sedang, zona
hambat 10-20 mm dikategorikan kuat dan zona hambat
20 mm atau lebih dikatakan sangat kuat. Berdasarkan
kategori tersebut, maka daya hambat yang dihasilkan
batang brotowali (Tinospora crispa L. Miers)
dikategorikan kuat karena menghasilkan zona hambat
diatas 10 mm.
Hasil di atas menunjukkan bahwa semakin
tinggi konsentrasi ekstrak menghasilkan daya hambat
semakin besar, yaitu pada konsentrasi 25% dan 50%,
sedangkan konsentrasi 75% menunjukkan daya hambat
yang sama dengan 50%, bahkan menurun pada
konsentrasi 100%, walaupun masih dalam kategori
antioksidan aktif. Hal ini disebabkan oleh pengaruh
senyawa bioaktif yang terdapat dalam ekstrak. Dari
hasil fitokimia diketahui mengandung senyawa
polifenol, flavonoid, tannin, dan lain-lain.
Brotowali (Tinospora crispa L.) merupakan
tumbuhan yang terdiri atas akar, batang, daun, dan
bunga. Salah satu bagian dari tanaman ini yang sering
digunakan sebagai obat dan memiliki manfaat klinis
adalah batangnya. Kandungan senyawa kimia yang
terdapat di seluruh bagian tanaman adalah alkaloid
(berberine), saponin, tanin, dan flavonoid (Malik,
2015).
Senyawa alkaloid berberine memilki efek
antimikroba karena kemampuannya untuk
berinterkalasi dengan DNA bakteri. Mekanisme
antimikiroba yaitu dengan cara menginaktivasi enzim
yang berperan dalam proses pemasangan nukleotida
pada pita DNA tunggal setelah dua pita induk bakteri
terpisah, yang akan mengakibatkan terganggunya
proses replikasi DNA (Siregar, 2010).
Selain alkaloid, brotowali (Tinospora crispa L.
Miers) juga mengandung saponin. Mekanisme kerja
saponin sebagai antibakteri adalah menurunkan
tegangan permukaan sehingga mengakibatkan naiknya
permeabilitas atau kebocoran sel dan mengakibatkan
senyawa intraseluler akan keluar (Ngajow dkk, 2013).
Flavonoid adalah senyawa aktif yang mampu
merusak dinding sel dan menyebabkan kematian sel,
dengan aktivitas menggangu fungsi metabolisme
mikroba dengan merusak dinding sel dan
mendenaturasi sel. (Priya V et al, 2010).
Selain flavonoid, batang brotowali (Tinospora
crispa L. Miers) juga mengandung tanin. Tanin yang
terkondensasi diduga akan menghambat pertumbuhan
dan aktivitas protease dari bakteri. Senyawa tanin dapat
merusak pembentukan konidia bakteri, disamping itu
tingginya kerapatan sel bakteri kemungkinan
mempengaruhi kerja senyawa aktif yang berfungsi
sebagai antibakteri pada ekstrak brotowali (Heinrich
dkk, 2010; Siregar, 2010).
Ekstrak batang brotowali mengandung beberapa
senyawa aktif yang pada konsentrasi tertentu memiliki
mekanisme antibakteri secara sinergis terutama pada
konsentrasi 25% dan 50 %, menunjukkan kemampuan
sebagai antibakteri yang meningkatkan zona hambat,
sedangkan setelah konsentrasi dinaikkan justru rata-
rata menunjukkan kestabilan bahkan penurunan
kemampuan senyawa sebagai antibakteri. Hal ini
kemungkinan disebabkan oleh adanya sifat
antagonisme senyawa bioaktif pada ekstrak brotowali
dimana yang satu mendominasi dan melemahkan yang
lain, dan semakin tinggi senyawa bioaktif justru
menyebabkan toksik bagi senyawa penyusunnya
sehingga menurunkan fungsinya, maka pada
konsentrasi 75% dan 100% menunjukkan efek yang
kurang optimal pada hasil uji. Konsentrasi optimal dari
perlakuan yang diberikan terhadap bakteri ini adalah
konsentrasi ektrak batang brotowali 50%.
SIMPULAN
Hasil penelitian menunjukkan bahwa:
a. Ekstrak batang brotowali (Tinospora crispa L.
Miers) mempunyai aktivitas menghambat
pertumbuhan bakteri Streptococcus pyogenes.
b. Kadar hambat minimum sudah terjadi pada batang
brotowali (Tinospora crispa L. Miers) dengan
konsentrasi 25%.
c. Zona hambat tertinggi untuk pemberian batang
brotowali (Tinospora crispa L. Miers) ada pada
konsentrasi 50% dan 75% dengan diameter sebesar
13,25 mm.
d. Adanya perbedaan bermakna antara kelompok
kontrol dan kelompok perlakuan. Hal ini
menunjukkan bahwa adanya aktivitas antibakteri
batang brotowali (Tinospora crispa L. Miers)
terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus
pyogenes.
UCAPAN TERIMA KASIH
Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan
Yang Maha Esa, karena atas limpahan rahmat dan
karunia-Nya penelitian ini dapat diselesaikan dengan
baik. Ucapan terima kasih penulis sampaikan atas
bantuan, bimbingan dan dukungan dari berbagai pihak
yang terlibat dalam penyelesaian penelitian ini.
DAFTAR PUSTAKA
1. Vonanda, A. 2016. Perbedaan Daya Hambat
Formula Obat Kumur Daun Sirih dengan Formula
Obat Kumur Lidah Buaya Terhadap Pertumbuhan
Bakteri Staphylococcus aureus. Skripsi. Fakultas
Kedokteran Gigi. Universitas Andalas Padang.
2. Basuni, Cholil, Putri, D.K.T. 2014. Gambaran
Indeks Kebersihan Mulut Berdasarkan Tingkat
Pendidikan Masyarakat di Desa Guntung Ujung
Kabupaten Banjar. Jurnal Kedokteran Gigi 2(1):
18-23.
3. Furoida, Y., Kusumawardani, B., Ernawati, T.
2014. Identifikasi Warna Koloni Bakteri Anaerob
 pada Gingival Crevicular Fluid Pasien Gingivitis Fitoterapi. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran
dan Periodontitis Kronis. Artikel Ilmiah Hasil EGC.
Penelitian Mahasiswa: 1-7.
4. Elhas, F. 2016. Pengaruh Jintan Hitam (Nigella
sativa) terhadap Pertumbuhan Bakteri
Streptococcus pyogenes. Kementerian Riset,
Teknologi, dan Pendidikan Tinggi. Fakultas
Kedokteran Gigi Universitas Gadjah Mada.
Yogyakarta.
5. Susanti, L. et al. 2016. Uji Formulasi Sediaan Salep
Ekstrak Batang Brotowali (Tinospora crispa L.
Miers) Kombinasi Zeolit Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus dan Pseudomonas
aeruginosa. Jurnal Kelitbangan 4(3): 234-243.
6. Sonata, K. 2014. Efek Antimikroba Ekstrak Etanol
Batang Brotowali (Tinospora crispa L. Miers)
Terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia
coli Secara In Vitro. Karya Tulis Ilmiah. Fakultas
Kedokteran. Universitas Kristen Maranatha.
Bandung.
7. Warsinah, Harwoko, Nuryati. 2015. Screening of
Volatile Compounds of Brotowali (Tinospora
crispa) and Antifungal Activity Against Candida
Albicans. International Journal of Pharmacognosy
and Phytochemical Research 7(1): 132-136.
8. Muslimin, L., Hasrah,N.R.,Jamaludin, A.W. 2017.
Sensitivity Test of Bacterium (Escherichia coli)
against Brotowali’s Extract (Tinospora crispa).
Advances in Health Sciences Research vol. 5: 105-
108.
9. Malik, M. M. 2015. The Potential of Brotowali
Stem Extract (Tinospora Crispa) as an Alternative
Antimalarial Drug. Journal Majority. 4(5): 46.
10. Siregar, N. P. S., 2010. Uji Antimikroba Ekstrak
Batang Brotowali (Tinospora crispa L. Miers)
terhadap Pseudomonas aeruginosa Secara In Vitro.
Skripsi. Fakultas Kedokteran. Universitas
Brawijaya. Surabaya.
11. Ngajow, M., Abidjulu, J., Kamu, V.S. 2013.
Pengaruh Antibakteri Ekstrak Batang Matoa
(Pometia pinnata) terhadap Bakteri Staphylococcus
aureus secara In vitro. Jurnal MIPA UNSRAT
ONLINE 2(2): 128-132
12. Heinrich, M., Barnes , J., Gibbons, S.,
Williamson, E.M. 2010. Farmakognosi dan