Professional Documents
Culture Documents
2
ISSN 0853 – 4217
ABSTRACT
Pseudomonas fluorescens has been well known as biological control agent for plant diseases control. The
problem to apply the agents widely in the field or in the level of farmer is limited technology of mass production
with low cost, due to the simple technology of propagation has not been yet available. The objective of this
research is to study the potency of liquid organic wastes as media for mass production of P. fluorescens and to
formulate them as bio-pesticide. The results showed that modification of coconut water to pH of 7.0 could be
used as media for growing P. flourescens. The P. fluorescens also could grow well in livestock liquid waste by
adding 10% meat extract. On the other hand, the liquid tofu waste and liquid compost waste became good
media for growing of P. fluorescens by addition of 10% meat extract and 1.25% sugar. Tetes tebu will be very
good media for P. fluorescens at 5% final concentration and by adding of 10% meat extract and 2.5% of sugar.
The P. fluorescens showed high antagonistic effect to Ralstonia solanacearum and Sclerotium rolfsii in all of
modified liquid organic wastes media. Survival and antagonisctic activity of P. fluorescens in modified organic
liquid wastes stored at 5oC or room temperature were 12 weeks. In vivo antagonistic and plant growth
promoting activity showed that P. fluorescens grown in liquid organic waste suppressed the incidence of stem
rot diseases caused by Sclerotium rolfsii and increased the vigor of plant growth on watermelon. Formulation of
the P. fluorescens grown in modified coconut water gave the best performance of P. fluorescens in supppressing
of plant diseases and inducing plant growth. The product of BeMOR(e) (beneficial microorganism) from the
result of this research will be proposed to be patented.
ABSTRAK
Pseudomonas fluorescens merupakan bakteri agens pengendalian hayati yang banyak digunakan untuk
pengendalian patogen tumbuhan. Namun demikian, prospek penggunaannya sebagai agen pengendalian hayati
pada tataran aplikasi di lapangan dihadapkan pada kendala mahalnya biaya pembiakan masal yang disebabkan
oleh belum tersedianya media murah untuk menggantikan medium standar laboratorium yang relatif mahal.
Tujuan penelitian adalah mengkaji pembiakan P. fluorescens pada limbah organik cair dan menformulasikannya
sebagai bio-pestisida. Hasil penelitian menunjukkan air kelapa sangat baik digunakan untuk pertumbuhan P.
fluorescens dengan memodifikasi pH hingga mencapai pH 7. Limbah cair peternakan dengan modifikasi
penambahan 10% ekstrak hewani dapat mendukung pertumbuhan P. fluorescens lebih baik dibandingkan
pertumbuhan bakteri pada media tanpa modifikasi. Sementara itu limbah cair proses pembuatan tahu dan
limbah sampah cair dapat memberikan pertumbuhan bakteri yang baik dengan penambahan 10% ekstrak
hewani dan 1.25% gula pasir. Penggunaan 5% tetes tebu dengan penambahan 10% ekstrak hewani dan 2.5%
gula pasir juga sangat baik bagi pertumbuhan P. fluorescens. Uji in vitro menunjukkan bahwa P. fluorescens
yang ditumbuhkan pada limbah-limbah organik tersebut di atas memiliki aktivitas penghambatan pertumbuhan
Ralstonia solanacearum dan Sclerotium rolfsii. P. fluorescens menunjukkan ekspresi senyawa phloroglucinol
dengan teknik hibridisasi northern. Daya tahan bakteri pada penyimpanan suhu ruang maupun suhu dingin (4oC)
berkisar sekitar 12 minggu dengan tingkat efektifitas dan juga populasi bakteri yang masih tinggi. Uji in vivo
menunjukkan adanya efektivitas penekanan penyakit busuk pangkal batang oleh Sclerotium rolfsii pada
tanaman semangka serta peningkatan pertumbuhan
1)
Dep. Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut atau vigoritas tanaman pada perlakuan dengan P.
Pertanian Bogor. fluorescens yang dibiakkan pada limbah cair maupun
media standar. Hasil penelitian ini telah berhasil
98 Vol. 14 No. 2 J.Ilmu Pert. Indonesia
diformulasikan bakteri P. fluorescens yang dibiakkan pada limbah air kelapa yang telah dimodifikasi. Nama
produk adalah Be-MOR(e) (beneficial microorganism) yang akan disempurnakan lebih lanjut untuk kemudian
dipatenkan sebagai penemuan dari penelitian ini.
Kata kunci : Pseudomonas fluorescens, limbah organik cair, agens pengendalian hayati.
Agar 15 g dan aquabidest 1 liter) dan diinkubasikan divortex pada kecepatan maximum selama 4 menit.
pada suhu ruang selama 24 jam. Kemurnian isolat Sisa sisa sel dan glass bead dipisahkan dengan
bakteri ditandai dengan koloni dengan pigmen hijau sentrifugasi pada 10.000 rpm selama 10 menit pada
kekuningan selanjutkan akan digunakan pada uji suhu 4oC. Sebanyak 15 ul 4M LiCl ditambahkan ke
selanjutnya. dalam supernatan, kemudian RNA dipresipitasikan
dengan penambahan ethanol sebanyak 2.5 X volume
Penggunaan Limbah Organik Cair sebagai supernatan dan disentrifugasi 14.000 rpm selama 15
Media Biakan Pseudomonas fluorescens menit. Pelet RNA dicuci 2 kali dengan 70% etanol
dan dikeringkan pada suhu ruang selama 20 menit.
Limbah organik yang digunakan berupa: RNA disuspensikan dalam 50 2O sterill yang bebas
limbah cair proses pembuatan tahu, tetes tebu, air RNAse.
kelapa, limbah cair peternakan dan limbah cair pada
tempat pembuangan akhir (TPA) sampah kota. 1% formaldehyde-agarose dan RNA dipindahkan
Ekstrak protein hewani menggunakan bahan limbah pada membran nilon (Hybon N+, Amersham
pemotongan hewan (usus ayam potong). Ekstrak Pharmachia) dengan blotting seperti prosedur yang
hewani dibuat dengan cara membuat kaldu usus diuraikan oleh Sambrook et al., (1989). RNA probe
ayam dengan merebus 5 gram usus ayam pada 100 dilabel dengan Digoxigenin dan disintesa in vitro
ml aquadest selama 10 menit. Kaldu yang dengan T7 RNA polymerase. Sementara itu template
didapatkan kemudian disaring dan siap digunakan DNA dihasilkan dengan PCR menggunakan primer
untuk modifikasi limbah organik cair. Limbah organik yang berkorelasi dengan amplifikasi gen phzC dan
yang telah mengandung ekstrak hewani kemudian pltM (PhzC-F: 5`-CGG TTC GAC CCA CTG GCC GTG -
ditambah gula pasir pada berbagai macam 3`, PhzC-R: 5- GTC GTC CGG GGT GGT TTC CAG
konsentrasi gula sebagai sumber karbon, selanjutnya GTG; PltM-F: 5`-GGT TCG AGC GCC TGC GGG-3`,
disterilisasi dengan autoklaf dan siap digunakan dan PltM-R: 5`-CCC CCT GGA GAA CAG CGG GTC-3`)
sebagai medium biakan untuk pembiakan yang mengandung promotor T7 RNA polymerase.
Pseudomonas fluorescens. Sebanyak 100 ml media Penyusunan sequen primer didasarkan pada data
yang telah disiapkan, diinokulasi dengan kultur DNA sekuen dari gen-gen tersebut di atas yang bisa
bakteri agens pengendalian hayati (100:1) yang diakses dari GenBank. Hybridisasi dilakukan pada
ditumbuhkan semalaman pada medium Luria Broth ( suhu 68oC semalaman menggunakan probe RNA
10 g casein, 5 g yeast exstract, 5 g NaCl, pH 7.2). yang telah dilabel sebanyak 10 ng sesuai dengan
Media biakan yang telah diinokulasi dengan pedoman penggunaan yang disusun oleh produsen
Pseudomonas fluorescens ditumbuhkan pada (Boehringer Mannheim). Sinyal pada membran hasil
inkubator bergoyang (shaker) 150 rpm pada suhu hibridisasi selanjutnya diproses dengan menggunakan
30oC. Populasi bakteri pada berbagai macam kondisi CSPD reagent kit (Roche) dan deteksi sinyal
pertumbuhan limbah organik dihitung dengan menggunakan film X-ray. Visualisasi purifikasi RNA
metode pencawanan dan selanjutnya dibuat kurva dan DNA fragmen hasil PCR menggunakan ethidium
pertumbuhan bakteri P. fluorescens. bromide yang dipaparkan pada mesin UV-
transluminator serta didokumentasikan dengan foto.
Analisis Transkripsi Gen Penyandi Senyawa Sedangkan visualisasi hasil hibridisasi northern
Antibiosis dengan Northern Blot dilakukan dengan teknik development menggunakan
larutan fixation dan developer pada ruang gelap.
Pseudomonas fluorescens ditumbuhkan dalam
100 ml medium uji (limbah organik cair dengan Uji in vitro Potensi Antagonistik Pseudomonas
berbagai modifikasi) dan medium Luria Broth sebagai fluorescens terhadap Bakteri Patogen
kontrol dan dipanen pada fase awal (lag phase), fase Ralstonia solanacearum dan Fusarim
logaritmik (log phase) serta fase stasioner (stationare oxysporum f. sp. niveum
phase) dari pertumbuhan bakteri. Sel bakteri
dipanen dengan sentrifugasi dan total RNA P. fluorescens ditumbuhkan pada limbah
diekstraksi dari sel bakteri seperti metode yang telah organik cair (pH medium dibuat pada kondisi netral
dilaporkan (Igo and Losick, 1986). Sel bakteri dengan larutan KOH atau HCL) dengan modifikasinya
disuspensikan pada 0.55 ml bufer LETS (100 mM LiCl, dalam erlenmeyer 500 ml yang berisi 100 ml
10 mM EDTA, 10 mM Tris-Hcl, pH 7.4 dan 1% SDS), medium. Selanjutnya erlenmeyer tersebut
0.5 ml glass bead (0.7 mm) dan 0.5 ml phenol- diinkubasikan pada suhu 30oC dan digoyang-
chloroform-isoamyl alcohol (24:1:1), kemudian goyangkan secara terus menerus menggunakan
100 Vol. 14 No. 2 J.Ilmu Pert. Indonesia
shaker (150 rpm). Dari fase pertumbuhan bakteri patogen pada media Luria Broth sebagai media
dimana ekspresi gen pengkode senyawa antibiotis pembanding. Pada 500 ml erlenmeyer ditambahkan
tinggi dilakukan pengujian potensi antagonisme in 100 ml media limbah organik dan ditumbuhkan
vitro. bakteri P. fluorescens seperti pada metode yang
Uji potensi antagonistik P. fluorescens yang diuraikan sebelumnya. Media hasil inkubasi tersebut
dibiakkan pada berbagai media limbah cair organik selanjutnyua disimpan pada suhu ruang atau suhu
terhadap penekanan pertumbuhan bakteri patogen 4oC selama 3 bulan. Penghitungan populasi bakteri
tuumbuhan Ralstonia solanacearum di lakukan dilakukan pada setiap minggu menggunakan metode
dengan teknik paper disck assay. R. sonacacearum pencawanan Pada media King`s B Agar. Uji potensi
ditumbuhkan hingga kepadatan populasi 106 sel/ml antagonistik terhadap bakteri dan cendawan patogen
pada media LB. Sebanyak 50 ul suspensi bakteri juga dilakukan setiap minggu selama masa
tersebut disebar pada media Nutrient Agar (NA) penyimpanan untuk mengetahui pengaruh suhu dan
hingga merata, dan kemudian dikeringanginkan lama penyimpanan terhadap efektifitas penekanan
hingga air yang ada di permukaan agar kering. patogen dari Pseudomonas fluorescens yang
Potongan kertas saring steril berbentuk bulatan ditumbuhkan pada media limbah organik cair.
dengan diameter 5 mm diletakkan di atas media agar
yang telah disebarkan R. solanacearum, kemudian 30 Uji Potensi Bio-pestisida Pseudomonas
P. fluorescens yang dibiakkan pada fluorescens Terhadap Penyakit Layu Bakteri
berbagai limbah cair organik diteteskan diatas kertas pada Cabai dan Layu Fusarium pada Tanaman
saring serta diinkubasikan pada suhu ruang. Zona Semangka
bening yang terbentuk di sekitar kertas saring
kemudian diukur untuk menentukan potensi Media tumbuh tanaman cabai dan semangka
antagonistik dari P. fluorescens. Sebagai kontrol, berupa campuran tanah dan pupuk kandang (1:1)
kertas saring lain ditetesi dengan P. fuorescens yang disterilisasi dengan autoklaf. Penambahan pupuk NPK
dibiakkan pada media standar laboratorium atau disesuaikan dengan jenis tanaman uji
media biakan tanpa P. fluorescens. (tomat/semangka). Perlakuan terdiri dari: (i)
Uji potensi antagonis terhadap F. oxysporum f. penumbuhan tanaman uji pada tanah steril tanpa
sp niveum dilakukan dengan metode dual culture. perlakuan patogen maupun agens antagonis(P.
Medium tumbuh yang digunakan adalah PDA (Potato fluorescens), (ii) penumbuhan tanaman tomat
Dextrose Agar). PDA yang yang telah ditumbuhkan dengan perlakuan patogen (R. solanacearum atau F.
F. oxysporum f.sp niveum yang berumur 3 hari pada oxysporum f.sp niveum), (iii) penumbuhan tanaman
cawan petri dilubangi dengan pelubang gabus. uji dengan penambahan agens antagonis, dan (iv)
Dengan menggunakan lup inokulasi steril dipindahkan penumbuhan tanaman uji pada tanah yang
inokulum F. oxyspsorom berupa potongan bulat ditambahkan patogen dan agens antagonis.
media PDA (diameter 0.5 cm) dan ditumbuhkan Perlakuan agen antagonis adalah penyiraman tanah
kembali pada media PDA lain yang baru. Pada sisi dengan suspensi P. fluorescens yang dibiakkan pada
lain dari media PDA diletakkan kertas saring yang media limbah organik cair maupun media King`s
dipotong memanjang dengan ukuran 4 x 40 mm Broth hingga dicapai konsentrasi agens antagonis
yang ditetesi dengan P. fluorescens yang pada tanah sebsar 9 x 106 colony forming unit (CFU)
ditumbuhkan pada berbagai media. Persentase per gram tanah kering dan kemudian dicampurkan
penghambatan pertumbuhan F. oxysporum dapat hingga merata. Inokulasi patogen dilakukan dengan
dihitung dengan membandingkan jari-jari koloni menambahkan inokulum pada campuran tanah
pertumbuhan patogen yang menjauhi agens hingga mencapai kerapatan 105 CFU per gram tanah
antagonis dengan jari-jari koloni pertumbuhan kering pada Ralstonia solanacearum dan 104 konidia
cendawan yang berhadapan dengan posisi agens Fusarium per gram tanah kering. Campuran tanah
antagonis. tersebut selanjutnya dimasukkan dalam polibag
masing masing 3 kg. Sementara itu bibit cabai dan
Uji Daya Tahan Pseudomonas fluorescens pada semangka disiapkan terpisah hingga mencapai umur
Media Pertumbuhan Limbah Organik Cair 3 minggu dan dipindahkan ke dalam polibag dengan
kedalaman 2 cm.. Penyiraman dilakukan setiap hari
Pengujian daya tahan P. fluorescens dilakukan pada pagi dan sore hari. Setiap perlakuan dilakukan
terhadap komposisi limbah organik cair yang mampu sebanyak 10 ulangan (tanaman). Parameter yang
mendukung pertumbuhan P. fluorescens serta diamati adalah intensitas penyakit layu bakteri atau
memiliki efektifitas penekanan yang tinggi terhadap layu Fusarium dengan menghitung persentasi
Vol. 14 No. 2 J.Ilmu Pert. Indonesia 101
LB LSC2
12
TB3 TH2.2
LCT3
log cfu
10
deduksi pada daerah dengan susunan asam amino terlihat pada Gambar 2 dan selanjutnya RNA tersebut
yang konservative (conserve region) dari bakteri ditransfer pada membran nilon dengan teknik
model yang telah diketahui sebelumnya yaitu blotting. Untuk memperkuat ikatan RNA dengan
Pseudomonas aeruginosa dan Pseudomonas membran nilon, maka dilakukan fiksasi dengan cara
fluorescens Pf-5 berdasarkan sekuen yang tersedia memasukkan membran nilon yang telah mengandung
pada Genbank. RNA pada oven dengan suhu 180oC selama 2 jam
Pada penelitian ini telah dilakukan isolasi DNA (teknik baking). Keberadaan RNA pada membran
kromosom P. fluorescens menggunakan Genomic nilon juga dapat dilacak dengan pewarnaan
DNA Mini Kit, amplifikasi gen penyandi senyawa menggunakan larutan methylen blue selama 15 menit
metabolit sekunder dengan polymerase chain dan kemudian dicuci dengan aquades sebanyak 3 – 5
reaction (PCR), ekstraksi fragment teramplifikasi kali. Deteksi ekpresi gen pengkode senyawa
menggunakan Gel/PCR DNA Extraction Kit .Adapun antibiosis phenazine dan pyoluteorin dilakukan
labelisasi probe dengan digoxinenin (Digoxigenin dengan cara hibridisasi antara probe (pelacak)
Labelling Kit) dilakukan sesuai dengan prosedur yang dengan RNA total yang telah ditransfer pada
tercantum dalam produk. membran nilon. Hasil deteksi ekspresi gen pengkode
senyawa phenazine tidak menunjukkan adanya sinyal
yang jelas. Diduga strain bakteri P. fluorescens isolat
Indonesia yang digunakan dalam penelitian ini tidak
mengandung gen pengkode senyawa phenazine atau
tingkat ekspresi gen tersebut sangat rendah sehingga
pelacakan ekspresi gen tersebut dengan probe yang
telah disiapkan tidak memberikan hasil positiv
(Gambar 3A).
M 1 2 3 4
pada Gambar 3B. Hal ini diduga ekspresi gen juga diikuti oleh pendaran warna kuning kehijauan
pengkode pyoluteorin pada P. fluorescens bersifat dari media yang telah dimodifikasi tersebut seperti
polysistronic (diekspresikan bersama sama dengan terlihat pada Gambar 5D dimana limbah cair LCT3
gen lain dalam satu kluster) sehingga ukuran RNA mampu mendukung pertumbuhan P. fluorescens
messenger sangat besar dan berinteraksi dengan secara baik
RNA lain sehingga signal yang dihasilkan tidak
bersifat terpisah secara jelas (Gambar 3B). Pada A B
Pseudomonas fluorescens strain Pf-5 yang telah
berhasil diketahui keseluruhan sekuen dari genom
utuhnya menunjukkan bahwa gen pengkode senyawa
pyoluteorin berada bersama 15 gen-gen lain yang
terlibat dalam sintesis senyawa tersebut dalam satu
kluster (Paulsen et al., 2005).
kecenderungan yang sama terjadi seperti pada cyanide (HCN), phospholipase C, dan exoprotease
penghambatan pertumbuhan R. solanacearum (Heeb et al., 2002).
dimana modifikasi media limbah organik cair dengan
penampakan hasil berwarna hijau kekuningan setelah 90.00
Hambatan (%)
50.00
40.00
30.00
(%)
20.00
10.00
P. fluorescens F. oxysporum 0.00
0 1 3 5 7 9 11
Minggu ke-
AKM TH TB LB
100,00
90,00
80,00
40,00
30,00
pertumbuhan miselium cendawan pada
20,00
sisi yang berhadapan dengan bakteri 10,00
antagonis. 0,00
0 1 3 5 7 9 11
Minggu ke-
AKM TH TB LB
Uji Efektivitas Antagonistik dan Daya Tahan
Pseudomonas fluorescens pada Media
Pertumbuhan Limbah Organik Cair Gambar 8. Rata-rata persentase
hambatan
maksimum P. fluorscens
terhadap
Secara umum rata-rata persentase hambatan F.oxysporum pada media limbah organik
maksimum P. fluorescens terhadap F. oxysporum cair pada beberapa minggu penyimpanan
yang dibiakkan pada media LB pada penyimpanan suhu dingin (4oC) (AKM: air kelapa
minggu ke-0 hingga 11 tetap paling tinggi, hal yang modifikasi; TH: limbah tahu; TB: tetes
sama ditunjukkkan oleh efektifitas bakteri yang tebu dan LB: luria broth)
dibiakkan pada air kelapa baik pada penyimpanan
suhu dingin maupun penyimpanan pada suhu ruang Aktivitas antagonistik tersebut berbanding
(Gambar 7 dan 8). Kemampuan Pseudomonas lurus dengan tingkat populasi P. fluorescens selama
fluorescens menekan perkembangan berbagai penyimpanan baik pada suhu uang maupun suhu
macam patogen bisa dipahami karena bakteri ini dingin. Populasi P. fluorescens pada tiga bulan
mensintesis berbagai senyawa antibiotik seperti penyimpanan tidak mengalami penurunan yang
phenazine carboxylic acid (PCA), pyrrolnitrin, oomycin sangat drastis, atau dengan kata lain bakteri agens
A, 2,4-diacetylphloroglucinol (Phl), dan pyoluteorin hayati tersebut mampu bertahan hingga 11 minggu
(Plt) (Schnider et al., 1995). Dilaporkan pula pada setelah dibiakkan pada limbah cair organi baik pada
strain strain tertentu mampu memproduksi hydrogen suhu ruang maupun pada suhu dingin (4oC)
Vol. 14 No. 2 J.Ilmu Pert. Indonesia 105
(Gambar 9 dan 10). Hal ini memberikan keuntungan Uji Potensi Bio-pestisida Pseudomonas
tersendiri dimana formulasi bakteri ini pada limbah fluorescens Terhadap Penyakit Layu Bakteri
organik cair dapat dilakukan untuk jangka waktu pada Tomat dan Layu Fusarium pada Tanaman
yang cukup lama. Dinamika populasi yang tinggi Semangka
justru ada pada media standar laboratorium (media
LB). Data dinamika populasi P. fluorescens yang Data kualitatif dari hasil pengtamatan visual
dibiakkan pada berbagai media limbah cair serta menunjukkan bahwa tanaman semangka yang diberi
dilakukan penyimpanan pada suhu ruang dan suhu perlakuan agens hayati yang dibiakkan pada media
dingin menunjukkan fluktuasi populasi yang rendah. LB (luria broth) dapat bertahan lebih baiik
Namun demikian secara umum penyimpanan pada dibandingkan dengan kontrol dari serangan patogen
suhu dingin memberikan stabilitas populasi yang lebih Sclerotium rolfsii serta memberikan efek pemicu
baik dibandingkan dengan penyimpanan pada suhu pertumbuhan tanaman yang ditunjukkan dari
ruang. vigoritas tanaman yang lebih baik dibandingkan
kontrol. Namun demikian perlakuan agens hayati
yang dibiakkan pada limbah air kelapa dan limbah
tahu belum mampu menekan serangan S. rolfsii,
tetapi mampu memberikan efek pertumbuhan
tanaman yang lebih baik.
masal dan dikomersialkan seperti terlihat pada penulis sampaikan kepada KNRT atas kepercayaan
Gambar 11. dan pendanaan yang telah diberikan.
Limbah organik cair dengan atau tanpa Duffy BK, Defago G. 1999. Environmental factor
penambahan nitrogen atau karbon pada konsentrasi modulating antibiotic and siderophore
tertentu dapat dijadikan media alternatif untuk biosyntesis by Pseudomonas fluorescens
pembiakan masal P. fluorescens. Air kelapa sangat biocontrol strain. Applied and Environmental
baik digunakan untuk pertumbuhan P. fluorescens Microbiology 65(6):2429-2438.
dengan cara memodifikasi pH hingga mencapai pH 7.
Giyanto, A. A. Nawangsih dan K. H. Mutaqin. 1999.
Limbah cair peternakan dengan modifikasi
Analisis keragaman molekuler Pseudomonas
penambahan 10% ekstrak jeroan ayam (ekstrak
kelompok fluorescens dengan teknik RAPD
hewani) dapat mendukung pertumbuhan P.
(Random Amplified Polymorphic DNA) dan
fluorescens lebih baik dibandingkan pertumbuhan
studi potensi antagonistic terhadap Ralstonia
bakteri pada media tanpa penambahan komponen
solanacearum pada tomat. Laporan Penelitian
apapun. Sementara itu limbah cair proses pembuatan
Proyek Pengkajian dan Penelitian Ilmu
tahu dan limbah sampah cair dapat memberikan
Pengetahuan Dasar. Dirjen Pendidikan Tinggi.
pertumbuhan bakteri yang baik dengan penambahan
Departemen Pendidikan Nasional.
10% ekstrak jeroan ayam dan 1.25% gula pasir.
Penggunaan tetes tebu 5% dengan penambahan Hamdan H, Weller DM, Thomashow LS. 1991.
10% ekstrak jeroan ayam dan 2.5% gula pasir juga Relative importance of fluorescens
sangat baik bagi pertumbuhan P. fluorescens. Uji siderophores and other factors in biological
potensi antagonisme antara P. fluorescens dengan control of Gaeumannomyces graminis var.
bakteri patogen Ralstonia solanacearum dan F. tritici by Pseudomonas fluorescens 2-27 and
oxysporum yang ditumbuhkan pada media limbah M4-80R. Applied Environmental Microbiology
cair organik termodifikasi secara umum menunjukkan 57(11):3270-3277.
potensi yang baik bagi penekanan patogen. Deteksi
Heeb, S., C Blumer, and D. Haas. 2002. Regulatory
ekspresi senyawa antimikroba phenazine dan
RNA as mediator in GacA/RsmA-dependent
pyoluteorin dengan teknik hibridisasi northern
global control of exoproduct formation in
menunjukkan ekspresi senyawa tersebut pada setiap
Pseudomonas fluorescens CHAO. J. Bacteriol.
fase pertumbuhan. Efektifitas dan daya tahan
184:1046-1056.
populasi P. fluorescens mampu bertahan hingga pada
11 minggu penyimpanan pada suhu ruang maupun Howell, C. R. and R. D. Stipanovic. 1980. Supression
suhu dingin (4oC). Phytium ultimum induced damping-off of
Uji in vivo pada tanaman semangka cotton seedlings by Pseudomonas fluorescens
menunjukkan bahwa perlakuan agen hayati P. and its antibiotic pyoluteorin. Phytopatology
fluorescens yang dibiakkan pada media Luria broth 70:712-715.
mampu menekan tingkat serangan penyakit layu
Igo, M. and Losick, R. 1986. Regulation of promoter
fusarium serta meningkatkan vigor tanaman. Pada
that is utilized by minor formsof RNA
perlakuan lain menunjukkan bahhwa aplikasi P.
polymerase holoenzyme in Bacillus subtilis. J
fluorescens yang dibiakkan padsa media limbah
Mol. Biol. 191:615-624.
organik air kelapa dan limbah kurang efektif menekan
penyakit busuk pangkal batang, namum dapat Loper, J. E. 1988. Role of fluorescens siderophore
memicu pertumbuhan tanaman. production in biological control of Pythium
ultimum by a Pseudomonas fluorescens strain.
Phytopathology 78: 166-172.
UCAPAN TERIMA KASIH Paulsen Ian T., Caroline M Press, Jacques Ravel,
Donald Y Kobayashi, Garry S A Myers, Dmitri V
Penelitian ini didanai oleh Kementrian Negara Mavrodi, Robert T DeBoy, Rekha Seshadri,
Riset dan Teknologi (KNRT) Republik Indonesia Qinghu Ren, Ramana Madupu, Robert J
melalui program Penelitian Insentif Riset Dasar Dodson, A Scott Durkin, Lauren M Brinkac,
tahun anggaran 2007-2008. Ucapan terimakasih Sean C Daugherty, Stephen A Sullivan, Mary J
Vol. 14 No. 2 J.Ilmu Pert. Indonesia 107
Rosovitz, Michelle L Gwinn, Liwei Zhou, Davd J fluorescens CHAO enhances antibiotic
Schneider, Samuel W Cartinhour, William C production and improves biocontrol abilities.
Nelson, Janice Weidman, Kisha Watkins, Kevin J.Bacteriol. 177:5387-5392.
Tran, Hoda Khouri, Elizabeth A Pierson, Leland
Sharifi-Tehrani, A., M. Zala, A. Natsch, Y. Moenne
S Pierson III, Linda S Thomashow & Joyce E
Loccoz, and G. Defago. 1998. Biocontrol of
Loper. 2005. Complete genome sequence of
soil-borne fungal plant diseases by 2,4-
the plant commensal Pseudomonas fluorescens
diacetylphloroglucinol-producing fluorescens
Pf-5. Nature Biotechnology. 5:873-878.
pseudomonads with different restriction
Rodriguez, F. and W. F. Pfender. 1997. Antibiosis profiles of amplified 16S rRNA. Er. J. Plant.
and antagonism of Schlerotinia homeocarpa Pathol. 104:631-643.
and Drechslera poae by Pseudomonas
Vigliar R, Sdepanian VL, Neto UF. 2006. Biochemical
fluorescens Pf-5 in vitro and in planta.
profile of coconut water from coconut palms
Phytopathology 87:614-621.
planted in an inland region. Jornal de Pediatria
Sambrook, J., E. F. Fritsch, and T. Maniatis. 1989. 82(4):308-312.
Molecular cloning: a laboratory manual, 2 nd
Xu, G. W., and D. C. Gross. 1986. Selection of
ed. Cold Spring Harbor Press. New York.
fluorescens pseudomonads antagonistic to
Schnider, U., C. Keel, C. Blumer, J. Troxler, G. Erwinia carotovora and suppressive potato
Defago, and D. Haas.1995. Amplification of seed piace decay. Phytopathology 414-422.
housekeeping sigma factor in Pseudomonas