Professional Documents
Culture Documents
מיקרוביולוגיה
1
מבנה בסיסי של התא הפרוקריוטי
)Ribosomes (+
ריבוזום )Fimbria (+/-
)Capsule (+/- שעריות
קפסולה )Pili (+/-
שעריות
)Nucleoid (+
נקלאאויד
דלקת ראות –
צילום חזה
או
Streptococcus pneumoniae
תא
4
Hans Christian J. Gram, 1853-1938
stainגרםGram גרם צביעת
שיעור כיתה הפוכה – צביעת
פפטידוגליקאן עבה פפטידוגליקאן דק
קיבוע
החיידקים
לזכוכית
5
Gram Staining
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם פפטידוגליקאן דק
פפטידוגליקאן עבה
צביעה
בקריסטל
ויולט
6
Gram Staining
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם פפטידוגליקאן דק
פפטידוגליקאן עבה
7
Gram Staining
פפטידוגליקאן עבה
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם פפטידוגליקאן דק
קיבוע
תמיסה
המכילה
יוד
8
Gram Staining
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם
פפטידוגליקאן עבה פפטידוגליקאן דק
9
Gram Staining
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם
פפטידוגליקאן עבה פפטידוגליקאן דק
שטיפה
באתנול
10
Gram Staining
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם
פפטידוגליקאן עבה פפטידוגליקאן דק
ממברנות
התא
מתפרקות
11
Gram Staining
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם
Thick peptidoglycan Thin peptidoglycan
12
Gram Staining
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם
Thick peptidoglycan Thin peptidoglycan
צביעה נגדית
עם ספרנין או
פוקסין
13
Gram Staining
פפטידוגליקאן עבה
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם פפטידוגליקאן דק
14
צביעת גרם -סיכום
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם
15
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם
חיידקים גרם
חיוביים
פפטידוגליקאן
ממברנה
ציטופלסמטית
דוגמאות:
✓ Streptococci
✓ Staphylococci
✓ Bacillus
16
חיידקים גרם שליליים
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם
פפטידוגליקאן
ממברנה
ציטופלסמטית
פריפלסמה
Outer ממברנה
חיצונית Membrane
דוגמאות:
✓ E. coli
✓ Salmonella
✓Shigella
17
דוגמאות לחיידקים שאינם נצבעים בצביעת גרם
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם
Mycobacteria Mycoplasma
מדוע ?
18
ארכיאה – מיקרואורגניזמים שאינם נצבעים בצביעת גרם
שיעור כיתה הפוכה – צביעת גרם
19
מבנה הדופן של החיידקים
20
דופן תא החיידק
• מורכב מפפטידוגליקאן
• שרשראות סוכרים העוטפות את תא החיידק
“glyco” = “sweet” •
• שרשראות הסוכרים מחוברות בניהן השרשראות פפטידים
קצרות
amino acid = “peptide” •
Microbiology: An
Evolving Science ©
2009 W. W. Norton &
21 Company, Inc.
2 – ח"א בדופן
L וD אנטטיומרים
Microbiology: An
Evolving Science ©
2009 W. W. Norton &
22 Company, Inc.
אתר הפעולה של ליזוזים – הקשר הגליקוזידי )β(1,4
Sir Alexander
23Fleming 1922
השפעת ליזוזים על דופן תא החיידק
יצירת פרוטופלסטים באמצעות ליזוזים
פרוטופלסט = תא חיידק ללא הדופן (ציטופלסמה +ממברנה)
תמיסה היפוטונית
תמיסה איזוטונית
24
גילוי הפניצילין- עכוב יצירת דופן
• 1928 – A. Fleming
discovered
penicillin,
produced by
Penicillium.
• 1940 – H. Florey
and E. Chain
performed first
clinical trials of
penicillin.
25
הפפטידוגליקאן- מבנה הדופן של חיידקים
:אבן הבנין של הפפטידולגליקן
NAG – N-acethylglucoseamine❖
NAM – N-acetylmuramic acid❖
❖טטרה פפטיד
קצרות
26
בניית הדופן -שלבים
.1אבן הבניין של הדופן ( 2סוכרים ופפטיד 5ח"א)
טרנספפטידציה סינתזה בציטופלסמה
.2אבן הבניין מובלת לאזור בניית הדופן ע"י
( bactoprenolמולקולה הידרופובית
המאפשרת מעבר דרך הממברנה
הציטופלסמטית)
.3שילוב הסוכרים בשרשרת הסוכרים
.4טרנספפטידציה -יצרת קשר בין הפפטידים –
ע"י האנזים טרנספפטיזאד= Penicillin
)Binding Protein(PBP
בתהליך משתחררת הח"א החמישית .האנרגיה
המשוחררת מפירוק הקשר משמשת לבניית הדופן
תמונה מתוךTodars online textbook of :
bacteriology
http://www.textbookofbacteriology.net/str
ucture_5.html
טרנספפטידציה מעוכבת על ידי הפנצילין
קשר בין (27אנטיביוטיקה ממשפחת הבטא לקטאם)
הפפטידים בדופן
פגיעה בשלב הטרנספפטידציה – אנטיביוטיקות βלקטמיות
28
דופן בחיידקים מורכב מפפטידוגליקאן
ליזוזים – אנזים ממערכת החיסון המפרק קשר גליקוזידי יגרום לליזיס אוסמוטי של החיידק
פנצילין – אנטיביוטיקה המעכבת את תהליך הטרנספפטידציה בבניית הדופן תגרום לליזיס אוסמוטי של החיידק
30
)+( מעטפת חיידקים גרם חיוביים
Microbiology: An
Evolving Science ©
32
& 2009 W. W. Norton
המשך -מעטפת חיידקים גרם חיוביים ()+
רצף ח"א וגשר ח"א גליצין ()Glycine interbrige
D-alanylחומצה אמינית
יחודית בטבע לחיידקים
גרם חיוביים (קיימת בדופן
בלבד)
33
)-( מעטפת חיידקים גרם שליליים
• )קפסולה (לא בכל המינים
• בעיקר רב סוכרים
• (ממברנה חיצוניתOuter Membrane
OM)
• Lipopolysaccharide
• In outer leaflet only
OM
• Lipoprotein
• מחבר בין ממברנה חיצונית לדופן
• דופן דקה
• 4-amino acid crosslinks
in peptidoglycan
• פריפלסמה עבה
ממברנה חיצונית
Outer membrane
(OM)
Microbiology: An
Evolving Science ©
35
2009 W. W. Norton &
המשך מעטפת חיידקים גרם שליליים ( -)-פורינים Porin
הפורינים מאפשרים מעבר מולקולות קטנות דרך
הממברנה החיצונית
קוטר 1nm
36
המשך -מעטפת חיידקים גרם שלילים ()-
מוות החלמה
קשורה
לפפטידוגליקאן מבנה דו שכבתי קיימת רק בחיידקים
באמצעות +LPSפוספוליפדים גרם שליליים
Lipoprotein
41
סיכום ביניים :הדופן בחיידקים
וארכיאה מבנה ותפקיד
42
ממברנת התא
מבנה בסיסי של התא הפרוקריוטי
שיעור כיתה הפוכה – מבנה הממברנה הציטופלסמטית
)Ribosomes (+
ריבוזום )Fimbria (+/-
)Capsule (+/- שעריות
קפסולה )Pili (+/-
שעריות
)Nucleoid (+
נקלאאויד
45
ממברנה -תפקידים
שיעור כיתה הפוכה – מבנה הממברנה הציטופלסמטית
47
דוגמא לחומצת שומן – פוספטדיל כולין phosphatidylcholine
שיעור כיתה הפוכה – מבנה הממברנה הציטופלסמטית
חומצות שומן
קשר אסתרי
גליצרול
Ester Linked glycerol
כולין
choline
זנב הידרופובי
פוספט
ראש הידרופילי
48
ממברנות באאוקריוטים
שיעור כיתה הפוכה – מבנה הממברנה הציטופלסמטית
49
ממברנות בארכאה
שיעור כיתה הפוכה – מבנה הממברנה הציטופלסמטית
חיידקים ארכיאה
קשר אתרי ואאקריוטים
()Ether
ליפיד אסתרי אתרי קשר בין
בממברנת גליצרול לשומן
ארכיאה D L אננטיומר
שרשראות
מסועפות ~16-18 ~20 אורך השרשרת
שרשראות לא ליפיד
מסועפות בממברנת
חיידקים לא מסועף מסועף סיעוף
ואאוקריוטים
קשר אסתרי
פחות שומן רווי יותר שומן רווי שומן רווי/לא
()Esther רווי
מתוך :אתר Khan Academy
https://www.khanacademy.org/science/biology/bac
teria-archaea/prokaryote-structure/v/prokaryotic-
and-eukaryotic-cells
51
החדירות היחסית של ממברנות למולקולות שונות
שיעור כיתה הפוכה – מבנה הממברנה הציטופלסמטית
52
חשיבות חלבוני נשא בהעברת מולקולות לתוך התא
שיעור כיתה הפוכה – מבנה הממברנה הציטופלסמטית
דיפוזיה:
• ביחס ישר למפל הריכוזים
53
צורות מעבר אקטיבי דרך הממברנה
הציטופלסמטית (העברה פעילה)
שיעור כיתה הפוכה – מבנה הממברנה הציטופלסמטית
54
Simple transporters
55
Group translocation
the phosphrotransferase system
56
The ABC system – ATP Binding Cassette
תווך בררני
שימור אנרגיה
59
יחס שטח פנים לנפח גדל ככל שגודל היצור קטן
60
צביעת גרם
• הומצאה על יד הנס כריסטאן גרם ב 1884לאבחון דלקת ראות
• מיון עולם החיידקים לשתי קבוצות חיידקים עיקריות :גרם חיוביים וגרם שלילים
• הבדל בצביעה נובע מהבדל בעובי דופן הפפטידוגליקאן
• ישנם הבדלים נוספים במעטפת של חיידקים גרם חיוביים וגרם שלילים לכל קבוצה מאפיינים
יחודיים
• יש חיידקים שאינם נצבעים בצביעת גרם (מיקרופלסמה ,מיקובטריה)
• ארכיאה אינם נצבעים בצביעת גרם