De AOAC fi cial Método 969,33

Ácidos Grasos en Aceites y Grasas

Prepa ración de los ésteres metílicos
Método Boro trifluoruro
En primer lugar Ac ción 1969
Método AOAC-IUPAC
Método del Codex-Aprobada-AOAC
Glycerides and phospholipids are saponified, and fatty ac ids are
liberated and esterified in pres ence of BF3 cat a lyst for fu ther
analysis by IR, 965.34E (see 41.1.36), or GC, 963.22F (see
41.1.29).
Method is applicable to common animal and vegetable oils and
fats, and fatty ac ids. Unsaponifiables are not re moved, and if
pres entin large amounts, may interfere with sub se quent
analyses.
Method is not suit able for preparation of methyl esters of fatty
ac ids con tain ing ma jor amounts of ep oxy, hydroperoxy, al de
hyde,ketone, cyclopropyl, and cyclopropenyl groups, and con ju
gated polyunsaturated and acetylenic com pounds be cause of par
tial or complete destruction of these groups.

Glicéridos y los fosfolípidos son saponificables, y los

identificadores de ac grasos son cia liberado y esterificados
en Presencia de gato BF3 un LYST para no fu
análisis por IR, 965.34E (véase 41.1.36), o la CG, 963.22F
(véase 41.1.29).
El método es aplicable a los animales raras y de aceites
vegetales y las grasas y las grasas ids de corriente alterna.
Insaponificable no se vuelven a mover, y si la presión Entin
grandes cantidades, pueden interferir con los análisis de
sub sí sucesivas.
El método no es capaz de adaptarse para la preparación de
los ésteres metílicos de ácidos grasos
Con ids ac ción mantener cantidades ma jor de oxi ep,
hidroperoxi, al de Hyde, cetonas, ciclopropilo, y los grupos
ciclopropenilo y ju Con cerrada poliinsaturados y libras
acetilénicos com ser causa de la destrucción par cial o total
de estos grupos.
D. Prep a ra tion

(Cau tion: See Appendix B, safety notes on dis til la tion and
petroleum ether.)
(Work in hood. Wash all glass ware immediately after use. If fatty
ac ids containing >2 double bonds are present, re move air
from methyl alcohol and flask by passing in stream of N2 few
minutes. Methyl esters should be analyzed as soon as pos sible. If
necessary, heptane solution may be kept under N2 in re friger a
tor.
For pro longed storage, seal in ampule and store in freezer or add
equivalent of 0.005% 2,6-di-tert-butyl-4-methylphenol (BHT).
For IR analysis, sol vent removal must be as complete as possible;
for GC, 5–10% solution is suit able.)
Accurate weighing is not required. Test portion size need be
known only to determine size of flask and amounts of re agents,
ac cording to Table 969.33.
Test portion ca 350 mg is preferred for GC.
(a) For fats and oils.—Add test portion to flask and then add
methanolic NaOH solution and boiling chip. Attach con denser,
and reflux until fat globules disaspear (usu ally 5–10 min). Add
BF3 solution from bulb or automatic pipet through con denser and
continue boiling 2 min. Add 2–5 mL heptane through con denser
and boil 1 min longer. Re move heat, then con denser, and add ca
15 mL saturated NaCl solution. Stop per flask and shake
vigorously 15 s
while solution is still tepid. Add additional sat u rated NaCl
solution to float heptane solution into neck of flask. Transferca 1
mL upper heptane solution into glass-stoppered test tube and add
small amount anhydrous Na2SO4 to re move H2O. If necessary,
dilute
solution to concentration of 5–10% for GC.
To recover dry esters, trans feraqueous and heptane phases to
250 mL separator. Ex tract with two 50 mL portions petroleum
ether(bp 30–60°C) or hexane. Wash combined ex tracts with 20
mL portions H2O un til acid-free to methyl red indicator. Dry
over anhydrous Na2SO4, filter, and evaporate sol vent under
stream of N2 on steam bath. If test portion is <500 mg, re duce
vol umes of sol vent and H2O.
More volatile esters may be lost if evaporation is pro longed or if
stream of N2 is too vigorous. For IR spectroscopy, terminate
evaporation as soon as sol vent is re moved. For GC, method is
applicable to fatty ac ids with 8 C at oms, if sol vent is not
completely re moved.
(b) For fatty ac ids.—Add fatty acid to flask, then add BF3
solution, and continue as in (a) with 2 min boiling under re flux.

D.Prep unadeterioración
(Cau ción: Véase el Apéndice B, las indicaciones de
seguridad en exhibición hasta que la ción y
éter de petróleo.)
(Trabajo en el capó. Lave toda la vajilla de vidrio
inmediatamente después de su uso. Si grasos que
contienen los identificadores de ca más de 2 enlaces
dobles, mover el aire de nuevo
de alcohol metílico y el matraz al pasar en la corriente de
N2 pocos minutos. Los ésteres metílicos se analizarán lo
antes posible. Si necesario, la solución de heptano puede
ser mantenido en N2 en un nuevo friger tor.
Para el almacenamiento prolongado de golf, las focas en la
ampolla y almacenar en el congelador o añadir
equivalente a 0,005% 2,6-di-terc-butil-4-metilfenol (BHT).
Para el análisis de IR, el retiro de ventilación sol debe ser lo
más completa posible; para GC, la solución de 5.10% es
capaz de adaptarse.)
Pesaje preciso no es necesario. tamaño de la prueba parte
es necesario conocido sólo para determinar el tamaño del
frasco y las cantidades de agentes de nuevo, cordones de
corriente alterna a la Tabla 969,33. ca prueba porción de
350 mg se prefiere para GC.
(A) Para las grasas y oils.-Añadir porción de muestra en el
matraz y agregue solución de NaOH y metanol y con un
intervalo de chips. Adjuntar Con más denso, y el reflujo
hasta glóbulos de grasa disaspear (min aliado usu 5-10).
Añadir la solución de BF3 bombilla o pipeta automática a
través de estafa y más denso dejar hervir 2 minutos. Añadir
2-5 ml de heptano a través de densas estafa y hervir 1
minuto más. El calor re mover, y luego más densa en
contra, y añadir aproximadamente 15 ml solución saturada
de NaCl. Stop por frasco y agitar enérgicamente 15 s
mientras que la solución sigue siendo tibia. Añadir u otros
sáb nominal solución de NaCl a flotar solución de heptano
en el cuello del matraz. Na2SO4 cantidad Transferca 1 ml
de solución heptano superior en tubo de ensayo con tapón
de vidrio y añadir pequeñas anhidro para volver a mover
H2O. Si es necesario, diluir solución a la concentración del
5-10% para la CG.
Para recuperar ésteres seco, trans fases feraqueous y
heptano que 250 ml de separación. Ex vías con dos 50 ml
de éter de -60 ° C) o hexano.petróleo porciones (pb 30
Lave combinado ex tractos con 20 ml de H2O de las
Naciones Unidas hasta que libre de ácidos al bromuro de
metilo indicador rojo. sol sobre Na2SO4 anhidro seco, el
filtro, y se evapora bajo una corriente de ventilación N2 en
baño de vapor. Si la muestra se <500 mg, reducir
volumenes de sol de ventilación y H2O.
Más ésteres volátiles pueden perderse si la evaporación es
pro o si deseaba corriente de N2 es demasiado vigoroso.
Para la espectroscopia IR, terminar evaporación tan pronto
como Sol de ventilación se vuelve a mover. Por GC, el
método es grasos aplicables a los 8 C en OMS, en caso de
ventilación sol no esidentificadores de ca con
completamente re movido.
(B) Para grasos de ca-ids. Añadir ácidos grasos de la
vasija, a continuación, agregue BF3
solución, y continuar como en (a) con 2 minutos de
ebullición bajo flujo de nuevo.