Professional Documents
Culture Documents
3 : 390-396
pISSN: 1411-8327; eISSN: 2477-5665 DOI: 10.19087/jveteriner.2019.20.3.390
Terakreditasi Nasional, Dirjen Penguatan Riset dan Pengembangan, online pada http://ojs.unud.ac.id/index.php/jvet
Kemenristek Dikti RI S.K. No. 36a/E/KPT/2016
1
Program Magister,
Ilmu Penyakit dan Kesehatan Masyarakat Veteriner,
2
Departemen Parasitologi Veteriner,
Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga
Kampus C Unair, Jl. Mulyorejo, Kota Surabaya,
Jawa Timur, Indonesia 60116
Telpon +62 31 5992785, 5993016; Fax. +62 31 5993015
*Email: kk.kusnoto@yahoo.com; vindo.ocy@gmail.com
ABSTRACT
Toxocariasis is one of zoonosis diseases that caused by Toxocara spp. that is Toxocara canis.
Toxocara canis has several stages until it can infect animals and humans, namely the egg stage,
larvae first stage (L1), larvae second stage (L2), larvae third stage (L3) to adult worms. Studies
about the L2 and L2 tissue of T. canis found in paratenic hosts using Scanning Electron Microscopy
(SEM) have not been widely performed. Some of the causes include L2 being not easily to found and
identified, so research rarely raises the ultrastructural morphology of L2 and L2 tissues. Knowledge
about the ultrastructural morphology of L2 and L2 tissue of T. canis worms is very important to
determining the diagnosis, especially the etiological diagnosis. The purpose of this study is to detected
morphology of L2 and L2 tissues of T. canis using SEM. Samples from this study is faeces of dogs
that infected with toxocariasis and the digestive tract of dogs obtained from dog slaughter houses.
The sample is an adult worm of T. canis; the female worm is dissected and taken uterus to collect
worm eggs. The results of this study on microscopic and optilab examination showed a difference
between L2 and L2 tissue that the length of L2 hatched from embryonic eggs was 390 ìm and with
a width of 23.4 ìm at the midpoint of the body. Larvae second stage length from the infected
somatic tissue is 410 ìm and the width is 22.5 ìm at the midpoint, and then difference in dorsal lip,
cuticles, body ring, cervical alae, buccal capsul, tail
ABSTRAK
Toxocariasis merupakan salah satu penyakit zoonosis yang disebabkan oleh Toxocara spp.
yaitu Toxocara canis. Toxocara canis memiliki beberapa stadium hidup hingga dapat menginfeksi
hewan dan manusia, yaitu tahap telur, larva stadium pertama (L1), larva stadium kedua (L2),
larva stadium ketiga (L3) hingga cacing dewasa. Penelitian tentang jaringan L2 dan L2 dari T.
canis pada inang paratenik menggunakan Scanning Electron Microscopy (SEM) belum banyak
dilaporkan karena beberapa faktor. Beberapa penyebab antara lain karena L2 yang tidak mudah
ditemukan dan diidentifikasi, sehingga penelitian mengenai morfologi ultrastruktur jarang
dilakukan pada L2 dan L2 jaringan. Pengetahuan tentang morfologi ultrastruktur dari jaringan L2
390
Jurnal Veteriner September 2019 Vol. 20 No. 3 : 390-396
dan L2 dari cacing T. canis sangat penting dalam menentukan diagnosis, terutama diagnosis
etiologi. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendeteksi morfologi ultrastruktur L2 dan L2
jaringan T. canis menggunakan SEM. Sampel dari penelitian ini adalah feses anjing yang terinfeksi
toxocariasis dan saluran pencernaan anjing yang diperoleh dari tempat pemotongan anjing. Sampel
adalah cacing T. canis dewasa, cacing betina dibedah dan diambil dari uterus cacing untuk
mengoleksi telur. Hasil penelitian ini pada pemeriksaan mikroskopis dan menggunakan kamera
Optilab menunjukkan perbedaan antara L2 dan L2 jaringan yaitu panjang L2 yang menetas dari
telur adalah 390 ìm dan dengan lebar 23,4 ìm di titik tengah tubuh. Panjang larva stadium kedua
dari jaringan somatik mencit yang diinfeksi adalah 410 ìm dan lebarnya 22,5 ìm di titik tengah,
serta terdapat perbedaan pada dorsal lip, kutikula, body ring, cervical alae, buccal capsul, dan
tail.
Kata-kata kunci: Toxocara canis; larva stadium kedua; Scanning electron microscopy
391
Vindo, et al Jurnal Veteriner
L2 dan L2 jaringan yang terdapat pada inang kedua yang akan dikeringkan diletakkan pada
paratenik. Perlu dilakukan pemeriksaan gelas objek dengan ukuran 22 mm2 yang telah
morfologi ultrastruktur dari L2 dan L2 jaringan dibersihkan menggunakan alkohol 70% (
T. canis menggunakan teknik SEM sebagai (Tekele, 2003). Proses pen gerin gan
dasar untuk melakukan identifikasi jenis larva menggunakan alat (Critical Point Drying (CPD)
serta nantinya dapat digunakan sebagai salah dan dilakukan penempelan pada stub atau holder
satu upaya edukasi dalam hal ini mempelajari dengan menggunakan lem araldite. Pelapisan
stadium L2 dan L2 jaringan untuk meneguhkan (coating) dilakukan dengan menggunakan
diagnosis. bahan yang bersifat konduktif yaitu berupa
emas murni dengan alat Vacuum evaporator,
METODE PENELITIAN setelah itu sampel siap diperiksa dan difoto
menggunakan mikroskop elektron.
Penelitian ini menggunakan cacing dewasa Analisis data dilakukan secara deskriptif
T. canis yang diambil dari feses anjing yang yaitu berupa foto larva stadium kedua (L2) dan
terinfeksi secara alami setelah diberikan L2 jaringan T. canis dengan menggunakan dua
perlakuan pemberian piperazin dengan dosis mikroskop yaitu SEM, dan mikroskop cahaya
pemberian 100 mg/kg BB. Kemudian, cacing
dewasa yang keluar bersama feses dicuci HASIL DAN PEMBAHASAN
menggunakan aquadest dan selanjutnya
dilakukan pembedahan untuk mengoleksi telur Scanning electron microscopy (SEM)
T. canis langsung dari uterus. Setelah merupakan salah satu metode yang digunakan
pembedahan, telur yang telah dikoleksi untuk melihat morfologi ultrastruktur larva T.
dimasukkan ke dalam phosphate buffer saline canis yang dapat digunakan untuk diagnosis
(PBS) untuk proses pemupukan agar telur etiologi. Scanning electron microscopy dapat
berkembang menjadi L1 dan menjadi L2. Pada mengamati lebih rinci morfologi larva T. canis
hari ke 28, L1 berubah menjadi L2. Kemudian dan lebih akurat. Namun, saluran pencernaan
L2 diinfeksikan ke dalam tubuh mencit (Mus termasuk esofagus, usus halus, rektum dan anal
musculus) secara per oral dengan pemberian pore, hanya dapat dilihat dengan mikroskop.
dosis sekitar 10-16 larva/g berat badan. Scanning electron microscopy dapat digunakan
Langkah selanjutnya adalah proses untuk mengkonfirmasi spesies cacing serta larva
perlakuan sampel yang diperiksa menggunakan dengan mengamati perbedaan morfologi seperti
elektron mikroskop yang terdiri dari empat tahap bibir, gigi dan bagian posterior tubuh (Jantima
antara lain fiksasi, dehidrasi, perlakuan, dan et al., 2012).
pengawetan. Sampel dimasukkan ke dalam Berdasarkan laporan hasil penelitian
tabung Eppendorf kemudian dilakukan fiksasi dengan metode natif menggunakan mikroskop
pertama menggunakan glutaraldehida 3% cahaya L2 yang menetas dari telur memiliki
selama tiga jam pada suhu 4°C (sentrifugasi panjang sekitar 390 µm dengan lebar tubuh
dengan kecepatan rendah selama 15 menit), sekitar 23,4 µm, sedangkan untuk L2 jaringan
dilanjutkan dengan mencuci dengan larutan memiliki panjang tubuh 410 µm dengan lebar
PBS pH 7,4 sebanyak tiga kali, masing-masing tubuh 22,5 µm. Hal ini hampir sama dengan
lima menit pada suhu 4°C (sentrifugasi dengan penelitian yang dilaporkan oleh Tekele (2003)
kecepatan 1500 rpm selama 15 menit). yang menyatakan bahwa profil morfologi L2 dan
Kemudian dicuci dengan larutan PBS seperti L2 jaringan memiliki ukuran yang tidak jauh
cara sebelumnya. Kemudian untuk proses berbeda. Larva stadium kedua dan L2 jaringan
dehidrasi dilakukan pada alkohol bertingkat T. canis berukuran sangat kecil sekitar 197.79-
yaitu 30%, 50% dan 70% masing-masing selama 428.63 µm. Pada penelitian ini L 2 jaringan
15-20 menit pada suhu 4°C (sentrifugasi dengan memiliki ukuran lebih panjang dibanding L2 T.
kecepatan 1500 rpm selama 15 menit), canis karena L2 yang diinfeksikan pada mencit
dilanjutkan dehidrasi pada alkohol absolut 80% mengalami perubahan serta perkembangan pada
dan 90% masing-masing selama 15-20 menit jaringan somatik dan mendapatkan nutrisi dari
pada suhu ruang (sentrifugasi dengan kecepatan dalam tubuh inang sehingga menyebabkan
1500 rpm selama 15 menit), kemudian diganti ukurannya menjadi lebih panjang. Hal ini
dengan amyl acetate absolut (sebagai pengawet berbeda dengan pendapat Tekele (2003) yang
menunggu waktu pengeringan). Larva stadium menyatakan bahwa tidak ada pertumbuhan L2
392
Jurnal Veteriner September 2019 Vol. 20 No. 3 : 390-396
saat berada di jaringan mencit yang diinfeksi. otak, dan organ lainnya dan selanjutnya
Alasan lain adanya perbedaan ukuran L2 dan menyebar ke seluruh tubuh inang.
L2 jaringan belum didapat penjelasan lebih rinci. Penebalan kutikula di bagian bawah dorsal
Bagian ujung anter ior L 2 tampak lebih lip terjadi pada L2 dan L2 jaringan. Hal ini sesuai
membulat dan tumpul, namun pada L2 jaringan dengan laporan penelitian yang dilakukan oleh
memiliki bentuk yang lebih meruncing El-Naga (2018) bahwa penebalan tersebut terjadi
dibandingkan dengan L2 yang menetas dari karena pertumbuhan kutikula pada L2 dan L2
telur. Menurut El-Naga (2018) perbedaan jaringan terus terjadi. Larva stadium kedua
bentuk pada bagian dorsal lip ini berkaitan yang berasal dari telur penebalan terjadi pada
dengan proses invasi atau masuknya larva hari ke-19, sehingga pada area di bawah dorsal
stadium kedua ke dalam jaringan atau organ- lip atau yang disebut dengan buccal capsul akan
organ visceral seperti jantung, paru-paru, hati, mengalami penebalan, sedangkan pada kutikula
Gambar 2. Bagian anterior L2 jaringan Toxocara. canis diamati menggunakan Scanning Electrone
Microscopy (Keterangan: DL= dorsal lip, CA= cervical alae, e= esofhagus, K= kutikula).
393
Vindo, et al Jurnal Veteriner
Gambar 3. Bagian posterior L2 Toxocara canis (Keterangan: T: Tail, AP: Anal Pore, N= Nervus).
Gambar 4. Bagian posterior L2 Jaringan Toxocara canis. (Keterangan: T= Tail, AP= Anal Pore,
N= Nervus)
Gambar 5. Bagian tengah tubuh L2 dan L2 jaringan Toxocara canis (Keterangan: N= Nervus, e=
esophagus).
394
Jurnal Veteriner September 2019 Vol. 20 No. 3 : 390-396
yang menyelimuti tubuh larva atau body ring karena adanya asupan nutrisi dalam proses
akan semakin banyak dan terlihat akan migrasi dan menginvasi organ visceral dalam
semakin rapat dan padat. Pada L2 jaringan yang tubuh. Terdapat nervus dan esofagus yang
berasal dari mencit penebalan tersebut terlihat terlihat jelas dan terlihat memanjang. Esofagus
jelas namun pada body ring terlihat lebih sedikit memiliki panjang sekitar sepertiga dari tubuh
dibandingkan dengan L2 yang berasal dari telur L2 dan L2 jaringan.
dan terlihat lebih besar. Pada laporan penelitian Tekele (2003),
Cervical alae yang terdapat pada sisi lateral panjang esofagus sekitar sepertiga dari panjang
tubuh L2 maupun L2 jaringan hanya terlihat tubuh larva dan masih dapat mengalami
sebagai garis refraktil yang belum berkembang pertumbuhan. Penelitian ini melaporkan juga
sempurna. Menurut Tekele (2003) bahwa pada pemeriksaan mikroskopik esofagus terbagi
bentukan cervical alae berkembang sempurna menjadi empat regio, antara lain procorpus,
dan terlihat jelas ketika T. canis berada pada metacorpus, isthmus, dan terminal bulb.
stadium dewasa dan pada stadium L2 cervical Procorpus terletak pada bagian paling amterior
alae hanya terlihat sebagai garis memanjang dari tubuh larva, kemudian dilanjutkan dengan
yang terdapat pada kedua sisi tubuh T. canis. metacorpus yang dipisahkan oleh ganglion yang
Bagian posterior tubuh L2 dan L2 jaringan disebut nervus ring yang mengelilingi nervus
tampak meruncing, melengkung dan terdapat dan berdekatan dengan esofagus dan terdapat
nervus di area sekitar ekor. Terdapat bagian ventrikulus di sekitar esophagus. Pada stadium
anal pore di sekitar terminal bulb. Papilla ini regio tersebut tidak dapat ditemukan pada
precloacal yang terdapat di bagian ekor tidak stadium L2 yang menetas dari telur maupun L2
terlihat karena terkelupas. Menurut Tekele yang berasal dari jaringan mencit yang diinfeksi
(2003) pada bagian ekor L2 T. canis yang berasal larva (Tekele, 2003). Hal ini mirip dengan
dari telur maupun dari jaringan memiliki penelitian yang dilakukan, karena tidak
bentuk yang melengkung serta meruncing, pada menemukan regio tersebut, sebab stadium L2
cacing dewasa terdapat papilla precloacal yang dan L2 jaringan bukan stadium yang tepat untuk
terletak dua baris dan terdiri dari 20-30 buah melihat adanya bentukan seperti procorpus,
papilla dan terdapat sebuah papilla yang metacorpus, isthmus, terminal bulb, serta
terletak dekat dengan kloaka, namun pada ventrikulus.
stadium L2 belum ditemukan letak papilla Secara morfologi, L 2 dan L 2 T. canis
precloacal. Hal ini terjadi karena beberapa memiliki beberapa perbedaan antara lain
faktor seperti terkelupasnya papilla precloacal perbedaan ukuran, jumlah body ring atau
ketika proses preparasi dan proses pengeringan kutikula. Lapisan tubuh yang menyelimuti
sehingga pada stadium ini tidak terlihat. tubuh L2 tidak jauh berbeda dengan morfologi
Jumlah ring pada L2 yang berasal dari telur L2 jaringan T. canis, namun lapisan kutikula
sekitar 43 ring dengan ukuran yang lebih kecil yang melindungi bagian tubuh L2 memiliki
dan cenderung lebih padat, sedangkan L 2 tingkat ketebalan yang sedikit berbeda dengan
jaringan yang berasal dari mencit sebanyak 29 L2 jaringan. Hal ini berbeda dengan penelitian
ring dengan ukuran yang lebih besar dan lebih Beaver et al. (1952) dan Tekele (2003) yang
jarang. Hal ini terjadi karena pertumbuhan melaporkan bahwa L2 jaringan tidak memiliki
kutikula di dalam jaringan dan pada stadium perbedaan secara morfologi maupun pada lapisan
L2 yang menetas dari telur pada hari ke 19 (El- yang menyelimutinya dengan L2 yang berasal
Naga, 2018). Bagian tengah tubuh atau mid dari telur T. canis yang menetas secara alami.
ventral line dari L2 dan L2 jaringan tidak
memiliki perbedaan yang signifikan, namun SIMPULAN
terlihat perbedaan dari body ring L2 jaringan
yang berasal dari jaringan somatik mencit yang Simpulan dari penelitian ini adalah ada
diinfeksi L2 nampak lebih besar dan lebih perbedaan antara L2 T. canis yang berasal dari
renggang dibandingkan dengan L2 T. canis yang telur dan L2 jaringan yang berasal dari mencit
menetas dari telur. Penelitian ini sesuai dengan yang diinfeksi larva cacing. Perbedaan tersebut
penelitian El-Naga (2018) yang menyatakan meliputi panjang tubuh serta lebar tubuh L2,
adanya perkembangan kutikula pada stadium bentuk dorsal lip, jumlah body ring, penebalan
L 2 yan g berasal dari telur mau pun kutikula, serta bentuk ekor yang berbeda
perkembangan di dalam tubuh inang paratenik antara L2 dan L2 jaringan.
395
Vindo, et al Jurnal Veteriner
396