Professional Documents
Culture Documents
Предмет медичної мікробіології - такі види МКО, які в процесі еволюційного розвитку
адаптувалися до людського організму, в ньому накопичуються, розмножуються, ведуть
паразитичну діяльність, викликаючи інфекційні захворювання.
Форми бактерій з дефектом синтезу клітинної стінки можуть бути створені лише в
експериментальних умовах in vitro. Їх неможливо виділити з організму хворої людини.
Для цього, оброблені лізоцимом бактерії (лізоцим розщеплює пептидоглікан) поміщують
в розчин, осмотичний тиск якого однаковий з осмотичним тиском всередині МКО і якщо
МКО виживають, то вони можуть існувати у вигляді сферичних тіл.
Так з Г+ бактерій утворюються протопласти (позбавлені клітинної стінки, є тільки
цитоплазматична мембрана) ,а з Г- сферопласти (з частково зруйнованою клітинною
стінкою).
L-форми — особливі форми бактерій, які втратили клітинну стінку (частково або
повністю). Назву отримали на честь Лістеровського інституту у Лондоні. На відміну від
сферопластів та протопластів, які не можуть розмножуватись, L-форми зберігають
здатність до розмноження та розвитку.
L-форми утворюються при дії агентів, що блокують синтез клітинної оболонки
(антибіотики), в умовах підвищеної осмотичної концентрації середовища.
Найбільш активними агентами індукції L-форм є антибіотики типу пеніциліна та
циклосерина. Після вилучення антибіотиків L-форми можуть знову перетворюватися на
бактерії, що мають клітинну стінку
Морфологія:
Бактерії – одноклітинні прокаріотичні гаплоїдні МКО, які не мають хлорофілу. Не
містять диференційованого ядра, КГ, лізосом, МХ.
Форма бактерій залежить від структури клітинної стінки, а їх розташування – від
орієнтації і ступеня взаємного зв’язку клітин під час розмноження поперечним поділом
(відбувається в одній або різних площинах)
Кокоподібні:
o Диплококи – парні коки, що з’єднані по 2 клітини: бобоподібної та
ланцетоподібної форми
o Стрептококи – утв. ланцюжки різної довжини завдяки тому, що клітини
поділяються в одній площині
o Стафілококи – (грона) утв. неправильні скупчення завдяки тому, що клітини
поділяються в різних площинах
o Мікрококи – одиночне чи безладне розташування клітин
o Тетракоки – діляться в двох площинах
o Сарцини – пакети
Паличкоподібні: бактерії, бацили, клостридії, грамнегативні паличкоподібні
(кишкова паличка)
o Бацили – утворюють спори
o Клостридії (веретеноподібні, Г+) – утворюють спори
Звивисті:
o Вібріони – назва пов’язана з вібруючим характером пересування. Зігнуті палички,
мають вигляд коми
o Спірили
o Спірохети – speira – завиток, chaite – волосся
o Трепонеми – мають 12-14 завитків
o Лептоспіри – нагадують пружину із загнутими кінцями
Будова:
Постійні структури: клітинна стінка, цитоплазма, цитоплазматична мембрана,
периплазматичний простір, мезосоми, рибосоми, нуклеоїд, плазміди
Непостійні структури: джгутики, пілі (війки, фібрії, ворсинки), капсула, спори,
включення
Оболонка бактерій складається із цитоплазматичної мембрани, клітинної стінки і
капсули.
Постійні структури:
Клітинна стінка – має різну будову у Г+ і Г- бактерій:
o У Г+ складається з товстого шару (5-6 шарів) пептидоглікану-муреїну (90%) і
ниткоподібні волокна тейхоєвих і ліпотейхоєвих кислот.
Тейхоєві кислоти є видоспецифічними антигенами бактерій і у деяких бактерій беруть
участь у прикріпленні до слизових оболонок людини
o У Г- складається з:
Внутрішня оболонка - пептидоглікан-муреїн (1-2 шари - 5%)
Зовнішня оболонка –
Біліпідний шар
Ліпопротеїновий шар
Ліпополісахаридний шар – є ендотоксином і зумовлює «О»-антигенну
специфічність Г- бактерій
Фосфоліпіди
Цитоплазма – 80% води, рН у Г+ 3-4, у Г- 5-6, рідинно-кристалічна система
Має 2 зони:
o Аморфний матрикс – містить метаболіти, рибосоми, мезосоми, плазміди,
включення
o Внутрішня нуклеоїдна зона – містить ДНК, хромосоми
Цитоплазматична мембрана – подвійний шар фосфоліпідів і шар білків.
Функції:
o Транспортування молекул усередину і назовні
o Соматичний бар’єр
o Участь у синтезі клітинної стінки
o Участь в окисно-відновних р-ціях (одержання енергії)
o Участь в диханні
o Участь в утворенні мезосом
Периплазматичний простір – між цитоплазматичною мембраною і клітинною
стінкою. Містить ферменти, що здійснюють активний тр. Речовин і їхнє розщеплення
(протеази, нуклеази, гідролази). Аналог лізосом
Мезосоми – інвагінації цитоплазматичної мембрани. Є латеральні і септальні
(беруть участь у поділі)
Функції:
o Утворюють поперечні перегородки при поділі бактерій
o Окисне фосфорилювання – аналог МХ
o Участь у синтезі екзотоксинів
Рибосоми – 70s – константа седиментації (шв. зсідання в ультрацентрифузі) (50 і
30). Хімічний склад: РНК-60%, білки-40%. Функція – синтез білків
Розрізняють:
o Вільні
o Зв’язані з цитоплазматичною мембраною або мезосомами
Нуклеоїд – аналог ядра; подвійна нитка ДНК навколо осі РНК. Нитка ДНК
замкнута в кільце. Білки нуклеоїда не гістони, а поліаміни. 1n (гаплоїдний) набір
хромосом
Плазміди – позахромосомні генетичні елементи – дрібні кільцеві молекули
двониткової ДНК
Непостійні структури:
Джгутики – тонкі нитки, складаються з білка флагеліну
Поділяються за кількістю і локалізацією:
o Монотрихи – 1 полярний джгутик (на кінці клітини)
o Амфітрихи – по 1 джгутику або пучку джгутків на обох кінцях клітини
o Лофотрихи – пучок джгутиків на 1 кінці клітини
o Перитрихи – по всій поверхні
Функції:
o Рух бактерії - хемотаксис
o Антигенна функція (Н-антигени)
o Патогенез інфекцій сечового тракту шляхом просування бактерій вгору через
уретру до сечового міхура
o Рецептори для бактеріофагів
Пілі (війки, фібмбрії, ворсинки) – білкові трубчасті утворення, які покривають тіо
бактерії. Складаються з білка піліну. Немає у Г- бактерій. Забезпечують живлення,
водно-сольовий обмін, прикріплення бактерій до клітин людини
Капсула – слизовий шар, який покриває бактерію, складається з полісахаридів.
Функції:
o Захищає бактерію від бактеріофагів, фагоцитозу, антитіл;
o Беруть участь в адгезії до тканин людини
o Є фактором патогенності
Включення – запасні живильні речовини: глікоген, жири, поліметафосфат (зерна
волютину) – у збудника дифтерії – мають метахромазію – забарвлюються в інший колір,
ніж бактерій (при забарвленні метиленовим синім бактерії – блакитні, зерні волютину –
чорно-сині)
Спори – стійка життєва форма бактерій, що перебуває у спокої. Функція –
зберігання виду. Спори утворюють тільки Г+ бактерії.
У порівнянні з вегетативними клітинами, що можуть розмножуватися, спори набагато
стійкіші до несприятливих умов.
Спори забарвлюються по Цілю-Нільсону в червоний колір
Склад: містять зв’язану воду та дипіколінову кислоту – стійкість до високих температур
Стадії спороутворення:
o Підготовча
o Утворення проспори
o Формування основних оболонок спори – кортексу (специфічний шар
пептидоглікану), а також кератиноподібної оболонки
o Дозрівання – спора покривається екзоспоріумом
За сприятливих умов спора перетворюється на вегетативну форму
Вегетативна форма - форма росту та розвитку.
Морфологія:
Форма тіла – асиметрична
Симетрія – двостороння, спіральна або радіальна
Зовнішня мембрана (плазмолема) – має тришарову будову (подвійний шар
фосфоліпідів та шар білків)
Цитоплазма – поділяється на 2 шари:
o Зовнішній шар (ектоплазма) - більш щільний, однорідний і прозорий
o Внутрішній шар (ендоплазма) - зернистий, має більш рідку консистенцію -
знаходяться органели загального призначення — мітохондрії, ЕПР, КГ, лізосоми,
рибосоми
Ядро з ядерною оболонкою і ядерцем
Органели руху – війки, джгутики, псевдоподії
Органели живлення – вакуолі:
o Травна вакуоля - крапля рідини, що містить травні ферменти, котра утворюється
під час потрапляння їжі в ендоплазму. Травна вакуоля оточує харчову частинку й
переміщається тілом найпростішого, їжа перетравлюється і всмоктується в цитоплазму.
Залишки неперетравленої їжі разом з травною вакуолею викидаються назовні.
o Видільна вакуоля
Найпростіші, котрі здебільшого ведуть паразитичний спосіб життя, засвоюють їжу всією
поверхнею тіла, використовуючи в основному механізм піноцитозу
Невелика група найпростіших харчується подібно рослинам і має хлоропласти.
Розмноження – простим поділом або множинним, брунькуванням або
цистоутворенням. Для окремих представників можливе розмноження шляхом кон’югації
або копуляції
Біологічний цикл багатьох найпростіших включає вегетативну форму
(трофозоїт) і резистентну форму (цисту)
Класифікація:
1. Саркоджгутиконосці (Sarcomastigophora) – поділяються на 2 підтипи:
o Саркодові – дизентерійна амеба, умовно-патогенні амеби, непатогенні амеби
(кишкова)
o Джгутиконосці – трепаносоми, трихомонади, лейшманії, лямблії
2. Споровики (Apicomplexa) – плазмодії малярії, токсоплазми
3. Інфузорії (Ciliophora) – збудник балантидіазу (кишкові балантидії)
4. Мікроспоридії - внутрішньоклітинні паразити
Морфологія:
Гриби мають ядро з ядерною оболонкою, цитоплазму з органелами,
цитоплазматичну мембрану (яка містить фосфоліпіди і стероли) і потужну клітинну
стінку, що складається з глюкану, целюлози, хітину, білка, ліпідів та ін.
Гриби складаються з довгих тонких ниток (гіф), сплітаються в грибницю, або
міцелій.
o Гіфи нижчих грибів (фікоміцетів) не мають перегородок (септ) – одноклітинній
міцелій
o У вищих грибів (еуміцетів) гіфи розділені перегородками; їх міцелій
багатоклітинний.
Також міцелій розрізняють:
o Субстратний (вегетативний)
o Повітряний (репродуктивний)
Кінцеві розгалуження міцелію мають своєрідну форму, за якою можна
диференціювати окремі види. Це органи плодоносіння грибів, які мають ендо- і
екзоспори.
Розмноження: спорами статевим і безстатевим способами, а також вегетативним
шляхом (брунькування або фрагментація гіф)
За будовою гриби можна розділити на дві групи:
o Нитчасті (плісняві, міцеліальні) - утворюють розгалужені міцелії без великих,
легко помітних неозброєним оком, плодових тіл. Багато нитчастих грибів виробляють
вторинні метаболіти-антибіотики і мікотоксини, що токсично діють на інші живі
організми.
o Дріжджові - внетаксономічна група одноклітинних грибів, які втратили
міцеліальну будову у зв'язку з переходом до проживання у рідких і напіврідких, багатих
органічними речовинами субстратах.
Класифікація
(заснована на способі їх розмноження та за типом міцелію):
Вищі гриби:
Аскоміцети – специфічні органи статевого спороношення - сумки
Базидоміцети – спори в булавоподібних структурах
Нижчі гриби:
Ооміцети
Зигоміцети
Досконалі гриби – розмножуються статевим шляхом – злиття чоловічих і жіночих
гамет, внаслідок чого утворюються гаплоїдні клітини – спори:
Аскоміцети
Базидоміцети
Недосконалі гриби – розмножуються бестатевим шляхом – вегетативно (брунькування,
поділом грибниці, спорами):
Дейтероміцети
За видом
взаємозв’язків Сапрофіти Паразити
Облігатні (розмноження тільки
всередині клітин)
Факультативні (розмноження і
поза організмом)
Біологічні
3.Вплив променевої енергії (згубно діє на 1. Вплив одних м/о на інші – симбіоз
м/о, використовується для знезаражування (асоціативний і конкурентний).
повітря, виробів мед. призначення, ЛЗ)
Схема:
1) пошук мікроорганізмів-продуцентів, селекція високоактивних штамів;
2) культивування промислових штамів мікроорганізмів;
3) виділення, концентрація і очистка кінцевої речовини;
4) виготовлення, стандартизація і контроль готового продукту (препарату)
ПЛР дозволяє виявити мікроб без виділення чистої култури, за наявністю ДНК мікробів.
З досліджуваного матеріалу виділяють ДНК. ДНК нагрівають і вона розпадається на 2
нитки. До ДНК додають праймери комплементарного 3'-кінцям ДНК початкового гена.
Суміш охолоджують.При цьому праймери зв'язуються до комплементарних ділянок
ДНК. До суміші додають ДНК-полімеразу та нуклеотиди та встановлюють температуру,
оптимальну для функціонування ДНК-полімерази.Якщо ДНК ген і праймер
комплементарні відбувається приєднання нуклеотидів до 3'-кінців праймерів і ,у
результаті, синтез 2 копій гена. Цей цикл повторюють знову і знову. Проводять реакцію
у ампліфікаторі (приладі, що забезпечує періодичну та швидку зміну температури
(охолоджування і нагрівання) тестових пробірок із розчином, зазвичай з точністю не
менше за 0,1 °).
Широко застосовується для діагностики вірусних і бактеріальних інфекцій, для ізоляції
генетичного матеріалу, секвенування ДНК і виявлення генетичних хвороб, в
криміналістиці і для з’ясування батьківства, при ампліфікації і вимірюванні кількості
ДНК.
Розрізняється:
□ Видова (природна) лікарська стійкість
□ Набута лікарська стійкість
Механізм утворення стійких форм:
a) перетворення активної форми антибіотика в неактивну шляхом ферментативної
інактивації та модифікації.(бета-лактамази)
b) втрата проникності клітинної стінки для певного хіміотерапевтичного засобу
c) порушенням в системі специфічного транспорту певного препарата в бактеріальну
клітину(зникнення або модифікація мішені -утворення L-форм)
d) кодування резистентності у хромосомному апараті або у плазмідах(інфікування R-
плазмідами або транспозонами)
Методи визначення чутливості мікробів:
1.Дифузійні методи:
- Метод лунок
У чашки Петрі газоном засівають мікробну культуру.В агарі пробивають лунки і вносять
0,1 мл досліджуваного препарату і інкубують 18 год. при 37С.Проводять вимірювання
діаметру зони пригнічення росту для кожного препарату.
-Метод дисків
Сіять досліджувану культуру, на агар наносять диски,просочені антимікробними
препаратами,інкубують при 37С.Проводять визначення діаметру зон затримки росту та
порівнюють іх з зазначеними в інструкціях.
2.Методи серійних розведень:
рідке середовище - у пробірках готують серію подвійних розведень препарату на
рідкому поживному середовищі.У кожну пробірку вносять по 0,05 мл фіз. розчину, що
містить 106 /мл мікробних клітин.Інкубують 18-20 год при 37С.Результати враховують за
помутнінням середовища,порівнюючи з контролем.
щільне середовище - готують подвійні серійні розведення препарату,потім
вносять по 1 мл кожного розведення у пробірки,що містять по 4 мл розплавленого і
охолодженого (45С)агару.Агар засівають тест-культурою бактерій. Суміш вносять до
чашок Петрі,пробірки скошують та інкубують. Досліджують МПК.
За результатами визначають:
Мінімільна пригнічувальна концентрація (МПК) — відповідає найбільшому
розведенню препарату,що гальмує ріст тест-культури.
Мінімальна бактерицидна концентрація(МБК) — визначається внесенням у
контрольні пробірки з рідким поживним середовищем по 0,01 мл середовища з кожної
пробірки ряду розведень. Після інкубації(18-20 год)виявляють найменшу дозу препарату,
що надає бактерицидний ефект. Зазвичай вона відповідає або перевищує величину МПК.
Боротьба з лікарсько-стійкими бактеріями проводиться різними шляхами.
До них відносяться:
систематичне отримання нових хіміотерапевтичних препаратів, які відрізняються
від існуючих механізмом антибактеріальної дії.
хімічна модифікація відомих антибіотиків із захищеними активними групами,
стійкими до бактеріальних ферментів.
дослідження з вишукування інгібіторів, що пригнічують активність бактеріальних
ферментів, а також препаратів, що перешкоджають адгезії бактерій на клітинах
макроорганізму.
Екзотоксини.
За ступенем зв'язку з бактеріальною клітиною:
1.Клас А-секретуються у навколишнє середовище
2.Клас В-частково зв'язані з клітиною,а частково синтезуються
3.Клас С-пов'язані з бактеріальною клітиною
За дією на лігандні та ефекторні структури:
- гемолізини-руйнують еритроцити
- лейкоцидини-руйнують лейкоцити
- ентеротоксини-епітелій тонкої кишки
- дермонейротоксини -некроз шкірних покривів
- летальний екзотоксин-може викликати смерть
За механізмом дії на клітинні структури:
- функціональні блокатори-холероген,ексфоліатин
- цитотоксини-ентеротоксини
- мембранні токсини
До екзотоксинів належать токсини,які продукують збудники ботулізму, правця,
дифтерії, чуми, холери, коклюшу, деякі види шигел, стафілококи.
Найбільш ефективними препаратами для лікування екзотоксичних інфекцій є
антитоксичні сироватки.
Одержання екзотоксинів:
1. Вирощування мікроорганізмів на рідкому живильному середовищі. Мікроорганізми,
що виділяють екзотоксини, називають токсичними. Найчастіше гени токсичності
знаходяться в клітинах у вигляді плазмід.
2. Фільтрування через бактеріальні фільтри – клітини залишаються на фільтрі, токсини
– у фільтраті.
3. Концентрування екзотоксинів по методах осадження білка (додавання спирту,
висмоктування сірчанокислим амонієм).
4. Очищення білка токсинів.
5. Перевірка токсичності – на чутливих тваринах.
6. Визначення сили токсину в DLM (DLM – Dosis letalis minima)– це кількість
токсинів, яка викликає загибель 80-100% тварин певного виду, ваги за певний час.
Ендотоксини – це органічні сполуки, представлені ліпополісахаридом (ЛПС) клітинної
стінки – глюци доліпідопротеїновим комплексом. Токсичність комп лексу пов’язана з
ліпідною часткою ЛПС, яка у бак теріальній клітині контролюється генами хромосоми.
Ендотоксини викликають захворювання у великих дозах, інкубація триває від кількох
діб до місяців, специфічність виражена слабко, уражують ендотоксини, як правило, різні
органи і системи людини. Провідна роль у регулюванні і навіть виникненні ін
фекційного процесу належить макроорганізму. Вони термостійкі, витримують
кип’ятіння, інколи до 30 хвилин, під впливом формаліну майже не знешкоджуються,
мають пірогенну та ад’ювантну дію, викликають лейкопенію, яка з часом переходить у
лейкоцитоз, підвищують неспецифічний імунітет і гормональну активність.
За прояви біологічної дії на організм людини відповідальні всі детермінантні молекули
ендотоксину. Біологічна активність схожа з дією медіаторів запалення; ендотоксинемія
супроводжується лихоманкою, причиною якої є вихід ендогенних пірогенів із
полінуклеарних і мононуклеарних лейкоцитів.
Розповсюдження:
Бактеріємія – стан, при якому бактерії у ході розвитку інфекційного процесу можуть
надходити в кров і розноситись по всьому організму.
Вірусемія – при вірусних захворюваннях.
Септицемія – заселення бактеріями багатьох органів і тканин організму.
Токсинемія - стан, при якому бактеріальний екзотоксин чи інший токсин циркулює в
кровоносній системі і доставляється нею до клітин мішенях.
29. Вчення про імунітет. Етапи розвитку імунології. Види і форми цього прояву.
32. Імунна система організму, її органи. Роль вилочкової залози в імунній відповіді.
Клітини імунної системи, їх різновиди ( Т-,В-лімфоцити і макрофаги). Їх роль в
клітинному і гуморальному імунітеті. Імуномодулятори, імуностимулятори та
імуносупресори.
ГНТ ГУТ
35. Триклітинна система кооперації імунної відповіді. Роль окремих клітин імунної
системи, їх взаємодія. Інтерлейкіни.
Серологічні реакції:
1. Реакції серодіагностики – визначення невідомих антитіл в крові людини,
використовуючи відомі антигени (діагностикуми)
2. Реакція сероіденитфікації – визначення невідомих антигенів за допомогою
відомих антитіл (гіперімунні сироватки, поліклональні або моноклональні антитіла)
Основа серологічних реакцій полягає в утворенні комплексу АГ-АТ, зумовлена
комплементраністю антигенних детермінант і Fab (фрагмент звязування антигенів)
фрагментів антитіл.
Цей процес складаєтсья із двох послідовних фаз: специфічної (безпосереднє звязування
АТ і АГ) та неспецифічної (зміна фізико-хімічних властивостей, які й досліджують)
Основні типи:
1. Реакція алгютинації (РА) – низькодисперсні АГ (великі сполуки – клітини
мікробів чи людини). Спостерігається утворення великих агрегатів що випадають в осад
2. Реакція преципітації (РП) – високодисперсні АГ (маленькі сполуки – білки,
полісахариди). Спостерігається помутніння середовища (утворення гратчатих структур
– флокулятів)
Ці дві реакції відносно малочутливі оскільки вимагають великої концетнрації АГ і АТ.
3. Реакція непрямої аглютинації (РНА) – використання частинок-носіїв з
адсорбованими антигенами або антитілами.
4. Реакція лізису (реакція зв'язування комплементу, РЗК) – використання
властивості комплексу АГ-АТ активувати систему комплементу.
5. Реакція нейтралізації – нейтралізація антитілами токсинів певних бактерії
6. Реакція імунофлуоресценції (РІФ) – застосування мічених флуорохромом
реагентів
7. Імуноферментний аналіз (ІФА) – використання АГ чи АТ звязаних з певним
ферментом
8. Радіоімунний аналіз (РІА) – застосування мічених радіонуклідом реагентів
Реакція аглютинації – склеювання корпускулярних антигенів за допомогою антитіл з
утворенням аглютинатів (великих конгломератів), видимих неозброєним оком.
Антитіла що беруть участь називають – аглютинінами, антигени – аглютиногенами.
Використовують для:
1. Сероідентифікації
2. Серодіагностики
3. Визначення групи крові
Класифікація:
1. Пряма РА
Орієнтовні (для визначення мікроорганізмів)
Розгорнуті (для визначення антитіл у сироватці крові)
2. Непряма РА
Деякі РА мають свої істричні назви:
Реакція Відаля – діагностика черевного тифу
Реакція Вейгля – діагностика висипного тифу
Реакція Райта – діагностика бруцельозу
Імунітет — це захист організму від усього, що несе у собі ознаки чужорідної генетичної
інформації, спосіб збереження генетичної сталості клітин.
Хімічні вакцини є вакцинами другого покоління, вони містять уже очищені антигени
збудників інфекційних захворювань, отримані переважно хімічними методами.
Принцип одержання: виділення (використовують трихлороцтову кислоту, фенол,
ферменти тощо) та очищення антигенних комплексів від баластних речовин.
Переваги:
1. характеризуються слабкою реактогенністю
2. генетично і онкогенно безпечні
3. стійкі до впливу зовнішнього середовища
4. можуть використовуватися у різних асоціаціях
Недоліки: швидко виводяться з організму і є менш імуногенними.
Анатоксини (А.) – вид вакцин, який використовують для активної імунопрофілактики
токсинемічного інфекційного захворювання.
Одержання:
1) обробка екзотоксинів бактерій 0,4% розчином формаліну при 37֯С протягом 3-4
тижнів (У результаті такої обробки токсини повністю втрачають токсичні властивості,
але зберігають антигенні й імуногенні)
2) очищення від баластних речовин
3) концентрація і адсорбція на сорбентах (Al(OH)3 та ін.)
4) перевірка отриманого препарату на стерильність, нешкідливість і активність
Живі вакцини - біологічні препарати виготовленні з живих бактерій або вірусів з
пониженою вірулентністю, але вираженими імуногенними властивостями. Відносяться:
вакцини проти туберкульозу(БЦЖ), кору, жовтої гарячки, поліомієліту, сказу, віспи та
інші. Для виготовлення використовують «атенуацію» - зниження вірулентності, шляхом
несприятливих умов культивування, селекцію найменш вірулентних штамів.
Контроль живих вакцин на:
стерильність (вірусні), чистоту й типовість росту (бактеріальні вакцини) – висівом
на поживні середовища;
нешкідливість – введенням лабораторним тваринам;
активність (імуногенність) – вакцинацією тварин із подальшим їх зараженням
польовим штамом.
Переваги: індукують довготривалий і напружений поствакцинальний імунітет, є
найбільш ефективними.
Недоліки: їх важко зберігати, стандартизувати, контролювати активність. У людей зі
слабким імунітетом живі вакцини можуть викликати захворювання.
52. Анатоксини, їх одержання, очищення, одиниці виміру, використання, оцінка.
Була відкрита у 1892 році російським ученим Івановським. Він вивчав хворобу листків
тютюну - тютюнову мозаїку. Звичайними методами збудника виділити не вдавалося.
Івановський отримав сік з хворих листків, і профільтрував його та заразив здорові
листки, в результаті чого розвилась мозаїка.
Його основні відкриття:
1) мікроорганізми, що фільтруються через бактеріальні фільтри;
2) корпускулярна природа (частка);
3) інфекційність фільтрату;
4) спроможність до кристалізації.
Етапи розвитку:
Кінець XIX - початок XX-го століття. Були відкриті наступні віруси: вірус тютюнової
мозаїки; ящура; жовтої лихоманки; віспи і трахоми; поліомієліту; кору; вірус герпеса.
30-ті роки - в якості експериментальної моделі для виділення вірусів стали
використовуватися курячі ембріони, які мають високу чутливість до вірусів грипу, віспи,
лейкозу. Відкрито: вірус грипу; кліщового енцефаліту.
40 роки: Введення в вірусологію методу культури клітин стало важливою подією, яка
дала можливість отримання культуральних вакцин проти поліомієліту, паротиту, кору та
краснухи.
50-і роки: Відкрито віруси: аденовіруси; краснухи; віруси парагрипу.
70-і роки: Відкриття у складі РНК-вмісних онкогенних вірусів ферменту зворотної
транскриптази (ревертази). Відкрито віруси: вірус гепатиту B; ротавіруси, вірус гепатиту
A.
80-і роки. Компоненти вірусів, відповідальні за розвиток пухлин, назвали онкогенами.
Відкрито віруси: імунодефіциту людини; вірус гепатиту C.
Морфологічні форми:
- сферичнівіруси грипу, кору
- паличкоподібні
- кубоїдальні віруси натуральної віспи, папіломи, аденовіруси
- сперматозоїдні віруси бактерій — фаги
- зіркоподібні астровіруси
Ультраструктура: — геном (ДНК або РНК) — оболонка (капсид та суперкапсид)
1. Прості віруси – мають одну оболонку – капсид
2. Складні віруси – мають капсид і суперкапсид — рецепторна система (глікопротеїдні
або гліколіпідні молекули) — необов ’ язкові компоненти (ферменти зовнішні та
внутрішні)
Віріон:
Нуклеїнова к-та ДНК/РНК або відповідний нуклеопротеїди, оточений однією або двома
оболонками.
Капсида — перша оболонка, що оточує нуклеїнову к-ту. Містить капсомери — білкові
субодиниці
Нуклокапсид — містить капсид разом з нуклеїновою кислотою. Характерний для
простих вірусів
Суперкапсид — покриває нуклеокапсид. Наявний у складних вірусів. Складається з
двошарової ліпідної або білкової мембрани. В нього занурені глікопротеїди, які
утворюють шипи.
Капсомери розміщуються в певному порядку, залежно від характеру якого розрізняють 3
групи вірусів:
1. спіральний тип симетрії нуклеокапсид трубчастої форми. Пр: вірус тютюнової мозаїки
2. кубічний тип симетрії ізометричні
3. комбінований тип симетрії Пр: збудник лейкозу, саркоми
Хімічний склад:
- нуклеїнові кислоти ДНК або РНК
- білки
- вуглеводи у ортоміксовірусів
- ліпіди у ортоміксовірусів
74. Антигенна будова і види антигенної мінливості вірусу грипу. Сучасні гіпотези,
які пояснюють антигенну мінливість ортоміксовірусів.
HA – основний штамоспецифічний антиген вірусу з високим ступенем неконтрольованої
мінливості. Є тримером: мономер – паличка, що С-кінцем заглиблена у суперкапсид.
Синтезується у вигляді білка-попередника, що далі нарізається протеазами на 2 ланцюга:
важкий (НА1) та легкий (НА2), поєднані дисульфідними зв’язками. В тримері виділяють
стеблину і глобулу. В глобулі: антигенна та рецепторна області. Глобула складається
тільки з важкого ланцюга, стеблина – з обох. У верхній частині глобули розташовані
амінокислотні послідовності, що формують вірусні рецепторні ділянки; також глобула
має 4 антигенних сайти (A, B, C, D), де амінокислотна послідовність утворює петлі, тут
накопичуються мутації.
NA – штамоспецифічний антиген, є тетрамером, по 2 мономери, з’єднані дисульфідними
зв’язками. Мономер у вигляді барабанної палочки: кубічна головка, стеблина, заглиблена
в суперкапсид. На поверхні головки каталітичний центр (4 активні центри). Антигенні
детермінанти у петлях поліпептидного ланцюга, що не беруть участь у взаємодії між
ланцюгами.
Інші поверхневі та внутрішні білки (72 питання).
Два типи антигенної мінливості збудника грипу А:
Антигенний шифт - це така мінливість вірусу грипу, яка призводить до появи
штамів із зовсім новими поверхневими глікопротеїнами, тобто супроводжується
радикальним оновленням антигенів збудника. В основі шифтової мінливості лежить
процес рекомбінації генів за умов одночасного зараження чутливої клітини вірусами
грипу людини і тварин. Деякі вчені вважають, що шифт є наслідком послідовної заміни
вірусів А(Н1N1), A(H2N2), A(H3N2) по колу.
Антигенний дрейф - часткові зміни гена гемаглютиніну і нейрамінідази, при якому
відбувається заміна однієї або декількох амінокислот внаслідок точкових мутацій, що
призводить до появи штамів з незначно оновленими антигенними властивостями.
Причиною антигенного дрейфу є звичайна селекція вірусів зі зміненими властивостями
глікопротеїнів, які «вислизають» з-під колективного імунітету населення, що
перехворіло і має високий титр антитіл. Послідовний дрейф зберігає вірус грипу як
біологічний вид. Внаслідок антигенного дрейфу з’являються варіанти збудника, що мать
епідемічне поширення.
Імунітет:
• специфічний: реалізується лімфоцитами, розподіляється на клітинний та гу- моральний.
- Гуморальний забезпечується IgA, IgM, IgG, які нейтралізують антигени.
- Клітинний забезпечується Т-лімфоцитами та макрофагами.
Після захворювання виникає постінфекційний імунітет, при повторному інфікуванні
імунна відповідь буде швидшою та сильнішою.
• неспецифічний:
- інтерферон,
- фагоцитоз заражених вірусами клітин,
- неспецифічні інгібітори вірусу,
- гарячкова реакція
Тривалий постінфекційний імунітет забезпечують клітинні механізми (Т-і В-лімфоцити).
Структура:
• куляста форма
• складний: суперкапсид із шипами, містить білок НN для адсорбції та білок F для злиття,
нуклеокапсид спіральний ( містить білки NP, P та L)
• 1 нитковий РНК- вірус (потребує реплікації)
Репродукція:
•здійснюється у цитоплазмі:
- прикріплення до клітини
- проникнення, злиття оболонок
- транскрипція за допомогою РНК залежної РНК полімерази
- синтез вірусних білків
- вихід вірусу з клітини брунькуванням
Культивування:
• первинно-трипсинізовані культури
• Цитопатична дія (ЦПД) – синцитіі, симпласти.
Діагностика:
• Патогенез
- Вхідні ворота – ВДШ, слизова оболонка рота
- Вірус потрапляє у привушну залозу через вивідну протоку
- Репродукується у слинних залозах
- Ймовірна повторна вірусемія та ураження ЦНС
• Діагностика
- Матеріал – слина, сеча, кров у перші дні хвороби
- Матеріалом інфікують курячі ембріони
- Вірус виявляють в РГА з 1% суспензією еритроцитів курей
- Ідентифікація – РГГА
- Серодіагностика – РГГА, РЗК, ІФА.
• Профілактика
- Жива вакцина випускається як моновакцина або в комбінації із проти кору та
краснухи (КПК)
80. Родина Параміксовірусів. Загальна характеристика. Респіраторно-
синцитіальний вірус. Біологічні властивості, роль у розвитку патології людини.
Методи діагностики захворювань, спричинених РС-вірусами.
Морфологія
Сферична форма зі спіральним типом симетрії.
Середній розмір віріона 100-800 нм.
Мають суперкапсидну оболонку з шиповидними відростками.
Оболонка містить три глікопротеїди:
o HN, що має гемагглютинуючу і нейрамінідазну активність;
o F, відповідальний за злиття і проявляє гемолітичну і цитотоксичну активність;
o М-білок, що формує внутрішній шар вірусної оболонки.
Геном представлений одноланцюговою (-)РНК.
Реплікація цитоплазматична:
o Вірус прикріплюється до клітини хазяїна завдяки поверхневим рецепторам HN, H чи
G глікопротеїнів.
o Зливається з плазматичною мембраною; рибонуклеокапсид входить до цитоплазми.
o Послідовна транскрипція, з вірусними мРНК відбувається кеппінг і
поліаденілювання в цитоплазмі.
o Ймовірно реплікація відбувається тоді, коли достатньо нуклеопротеїда присутнього
в енкапсиді новосинтезованого антигеному і геному.
o Рибонуклеокапсид взаємодіє з матрицею білка в плазматичній мембрані і віріон від
бруньковується.
Нуклеїнова кислота тісно пов'язана з білками (білок NP та ферменти, які беруть
участь у синтезі РНК). Для РНК даної групи вірусів характерний високий вміст уридину
та низький аденіну.
Загальний антиген для родини вірусів відсутній. Параміксовіруси містять два
видоспецифічні антигени:
o внутрішній S-антиген (нуклеопротеїн)
o зовнішній Y-антиген (глікопротеїни ворсинок оболонки), що містить два самостійні
антигенні компоненти: один з них є гемаглютиніном (Н-антиген), інший - нейрамінідазою
(N-антиген).
Респіраторно-синцитіальний вірус
Респіраторно-синцитіальна вірусна інфекція - гостра вірусна інфекційна хвороба з
групи ГРВІ з тенденцією до виникнення бронхіоліту у дітей молодшого віку та осіб
похилого віку.
РС-вірус належить до роду Pneumovirus. Має багато штамів, які циркулюють у тварин та
людей. У людей паразитують віруси групи А, В. Характеризується низькою стійкістю,
віріони схильні до самораспаду, в очищеному вигляді проявляють виражений
поліморфізм. Виділяють три малих типи PC-вірусу, антигенні відмінності між якими
обумовлює специфічний поверхневий антиген.
Характер впливу на уражені клітини - утворення синцитію (мереживоподібної
структури, яка складається з клітин, пов'язаних одна з одною цитоплазматичними
відростками). Вірус має білки, які перешкоджають дії людського інтерферону.
Джерело та резервуар інфекції: людина (хворий і вірусоносій). Хворий найбільш
заразний протягом 3-6 днів від початку захворювання.
Механізм передачі - повітряно-крапельний.
Після одужання формується нестійкий імунітет.
Лабораторна діагностика:
експрес-діагностика - визначення антигенів вірусу в виділеннях з носа за
допомогою імуноферментного аналізу;
специфічні антигени виявляють в реакції зв’язування комплементу і реакції
нейтралізації.
Етіотропна терапія не розроблена.
Відтворення:
Вірусна частка зв'язується з рецепторами клітинної поверхні. Це викликає конформаційні
зміни в вірусних білків капсида, звільняючи міристинову кислоту. Вона утворює пори в
клітинній мембрані, через яку впорскується РНК. Потрапивши всередину клітини, РНК
«роздягається» і (+)нитки РНК-геному реплікується через дволанцюговий проміжний РНК
продукт, який утворюється за участі вірусної РЗРП (РНК-залежної РНК-полімерази).
Трансляція рибосомами клітин-господарів не ініціюється 5' кепом, як зазвичай, а
натомість ініціюється входженням РНК в сайт зчитування рибосом. Через 3 год після
зараження вірусні білки починають синтезуватись і в цитоплазмі близько до ядра
з'являється вакуоля, в якій вони накопичуються. Приблизно за 8 годин клітина гине і
розпадається, випускаючи вірусні частки.
Морфологія і властивості.
Ікосаедрична частка діаметром 27 нм
Капсид складається з 60 субодиниць, кожна з яких містить 4 білка (VP1-VP4)
Одноланцюгова (+)РНК.
На трьох більших білках (VP1-VP3) знаходяться поверхневі антигенні детермінатни
віріона, які викликають синтез антитіл, що нейтралізують інфекціозность вірусу.
Малий внутрішній білок VP4 пов'язаний з вірусною РНК, бере участь у встановленні
її в капсид віріона.
Резистентність.
Стійкий у зовнішньому середовищі: у воді, молоці, стічної каналізаційної воді
зберігає активність при 0 °С протягом року
Не пошкоджується розчинниками жирів
При 50 °С інактивується протягом 30 хвилин
Вірус швидко гине в 1% розчині хлораміну, 3% перекису водню, чутливий до УФ-
променів.
Патогенез і клініка.
Джерело інфекції - хворі люди і вірусоносії.
Шлях зараження - фекально-оральний, частіше аліментарний або водний.
Інкубаційний період 7-14 днів.
Вірус потрапляє в носоглотку (лімфоглоткового кільця Пирогова), далі в лімфатичний
апарат тонкого кишечника, а потім проникає в кров. З кров'яного русла може проникати
в ЦНС, якщо нейтралізуючі антитіла не виробляються в кількостях, достатніх для
блокування цього шляху. В ЦНС вірус поширюється уздовж нервових волокон і в процесі
внутрішньоклітинного розмноження може пошкодити або повністю зруйнувати нервові
клітини, результатом чого може бути млявий параліч. Найчастіше вражаються клітини
передніх рогів спинного мозку, у важких випадках вірус проникає в головний мозок.
Порушення функцій периферичних нервів і рухової мускулатури є наслідком
розмноження вірусу в мотонейронах. Зміни в цих клітинах розвиваються швидко.
Можуть бути:
безсимптомна інфекція
легкі клінічні форми без паралічів
асептичний серозний менінгіт
паралітичний поліомієліт (відзначається в 1% випадків поліовірусной інфекції).
Лабораторна діагностика
Для програми ліквідації поліомієліту важливе значення має диференціація між штамами
дикого і вакцинного штаму.
Віруси Коксакі
В даний час відомо 30 серотипів Коксакі-вірусів, з них до групи Коксакі А відносяться 1-
24 серотипу (тип 23 відсутня), до В - 1-6 серотипи.
Віруси ЕСНО.
Назва є абревіатурою зі слів enteric cytopathogenic human orphans. Так як їх роль в
патології людини довго залишалася невідомою, вони були названі «сиротами».
Особливості:
Не патогенні для новонароджених мишей,
Мають гемаглютинін,
Спорідненість до лімфоїдної тканини
Відомі 1-33 серотипи (крім 10, 22, 23, 28), які ідентифікуються в реакції нейтралізації,
полімеразній ланцюговій реакциї, імуноферментному аналізі.
Морфологія і властивості.
Сферична форма і кубічний тип симетрії.
Розмір 20-30 нм.
Геном утворений позитивної молекулою РНК, що не сегментована. Величина
молекули невелика.
Молекула РНК пов'язана з однією молекулою білка.
Капсидна оболонка складається з 32 капсомеров і 3 великих поліпептидів.
Суперкапсидної оболонки немає.
Реплікація вірусу здійснюється в цитоплазмі. Збірка клітин господаря, заповнення
капсида також здійснюються в цитоплазмі; вивільнення вірусу супроводжується лізисом
клітини
Віруси втрачають свої інфекційні властивості в кислому середовищі. Добре
зберігаються при низьких температурах. Необхідна для реплікації температура дорівнює
33 °C, її підвищення вище 37 °C блокує останню стадію розмноження.
Антигенна структура:
за структурою єдиного типоспецифічного антигену виділяють 113 імунологічно
різнорідних груп; групоспецифічний антиген відсутній;
у людини риновірусна інфекція викликає вироблення нейтралізуючих антигенів.
Лабораторна діагностика:
1) виділення вірусів на культурах клітин, заражених виділеннями носових ходів;
2) експрес-діагностика - імунофлюоресцентний метод; дозволяє виявити вірусний антиген
в цитоплазмі епітеліальних клітин слизової оболонки.
Патогенез
Вхідні ворота- місце укусу заразної тварини. Рух у напрямку ЦНС, ураження нейронів
головного та спинного мозку, репродукція вірусів з утворенням тілець Бабеша-Негрі.
Поширення вірусу в різні тканини та слинні залози (можливість виділення вірусу зі
слиною). Дегенеративні, запальні процеси в клітинах ЦНС.
Клінічні прояви
Інкубаційний період 10-40 днів.
Клінічні прояви 7-9 днів. Тривожність, страх, безсоння. Гідрофобія, фотофобія,
ауксофобія (спастичне скорочення м’язів глотки при спробі випити води/ яскравому
світлі/ сильному шумі відповідно.)
3-7 дні захворювання- паралічі, серцево-судинна недостатність, смерть.
Лабораторна діагностика
Прижиттєва:
1. Дослідження відбитків рогівки, біоптатів шкіри за допомогою РІФ
2. Виділення вірусу зі слини та спинномозкової рідини, інтрацеребральне інфікування
мишей-сисунців.
3. Визначення антитіл до вірусу сказу у сироватці хворих за допомогою РЗК, ІФА.
Постмортальна діагностика померлих хворих, або підозрюваних тварин:
1. Виявлення тілець Бабеша-Негрі
2. Виявлення специфічного антигену за допомогою РІФ
3. Виявлення інфекційного вірусу методом біологічної проби на мишах.
Дикий вірус сказу циркулюєв природі і є високопатогенним для людей і тварин, утворює
в нейронах головного мозку тільця Бабеша-Негрі.
Фіксований вірус сказу був одержаний Л.Пастером шляхом багаторазового
інтрацеребрального пасажу дикого вірусу через організм кролів. Має значна меншу
інфікувальну дозу, не утворює тілець Бабеша-Негрі, не з’являється у слині.
Специфічна профілактика
Цільновіріонна інактивована концентрована культурована антирабічна вакцина,
одержана на основі фіксованого вірусу сказу.
Біологічні властивості:
Господар – хордові – примати, парнокопитні, непарнокопитні та хижаки.
Шляхи передачі в природі: трансмісивний шлях, парентеральний, вертикальний.
Переносники відсутні.
Тропізм: найчастіше клітини імунної системи.
Патологічні зміни: знищують популяцію імунокомпетентних клітин, що призводить до
загибелі особин від опортуністичних інфекцій. Порушення геному можуть викликати
рак.
Класифікація:
Alpharetrovirus ( лейкоз птахів)
Betaretrovirus (вірус пухлини молочних залоз мишей)
Gammaretrovirus ( лейкоз мишей)
Deltaretrovirus ( вірус лейкозу великої рогатої худоби)
Epsilonretrovirus ( вірус саркоми шкіри Уоллі)
Lentivirus ( представник ВІЛ-1)
Spumavirus ( спумавірус людини).
Будова:
не мають ліпопротеїнової оболонки
за формою – ікосаедр, кубічного типу симетрії (12 вершин, від яких відходить по
одному відростку з булавоподібними потовщеннями на вільному кінці).
капсид складається з 252 субодиниць (капсомерів).
Стійкість:
стійкі до дії фізико-хімічних факторів
не інактивуються ефіром, хлороформом
при прогріванні (56 °С) активність вірусів знижується за декілька хвилин.
Культивування:
Культивуються тільки в тканинах господаря: в перещеплювальних культурах
клітин(КК) HeLa, первинних - клітини нирок ембріона людини, на яких виявляється ЦПД.
Репродукція вірусів супроводжується розвитком внутрішньоядерних включень. (*здатні
викликати гемаглютинацію)
Патогенез:
Аденовірусна інфекція - респіраторне захворювання людини (частіше виникають серед
дітей у віці від 6 міс. до 2 років, особливо в холодні пори року). Механізм зараження -
повітряно-краплинний +фекально-оральний. Джерело інфекції – хворий або носій.
В організмі людини аденовіруси розмножуються в епітеліальних клітинах дихальних
шляхів, кишечника, кон’юнктиві очей, мигдаликах і лімфатичних вузлах. Викликають
ГРВІ (фарингіти, ларингіти, трахеобронхіти), кон’юнктивіти, пневмонії, геморагічні
цистити. Окремі серотипи мають онкогенні властивості й зумовлюють появу пухлин у
деяких гризунів. Вони можуть також проникати ч/з плаценту, викликаючи каліцтво і
смертельні пневмонії новонароджених. У дорослих виникають рідше і мають більш легкий
перебіг.
Діагностика:
1) вірусологічна – виділення в КК аденовірусів і їхня ідентифікація за АГ-властивостями
за допомогою РЗК, РН;
2) серодіагностика – визначення збільшення титру АТК АBV.
Признаки Вид
Плазмокоагулаза + - -
Гемоліз + - -
Фосфатаза + + -
ДНК-аза + - -
Лецитиназа + - -
Окислення маніта + - -
Морфологія і фізіологія.
Культуральні властивості
Біохімічні властивості
желатин не розріджують.
Хемоорганотрофи
метаболізм бродильний
гемолітична активність.
Ферментують глюкозу з утворенням молочної кислоти
каталазонегативні
Антигени
Класифікація
Токсини
1.складний екзотоксин:
Лейкоцидин
летальний токсин
цитотоксини
ферменти патогенності
Гіалуронідазу
Фібрин азу
ДНК-азу
Протеїн азу
амілазу, ліпазу
Епідеміологія:
антропоноз;
механізм передачі – фекально-оральний;
шлях передачі: контактно-побутовий, водний, аліментарний.
Патогенез:
Клініка:
Фактори патогенності:
Адгезія і колонізація
- фімбрії
- Білки поверхневої мембрани
- Ліпополісахариди
- Нейрамінідаза
- Гіалуронідаза
- Муциназа
Захист від фагоцитозу
- К-АГ
- Групові 3-4-АГ
- ліпополісвхврид
інвазія - плазміди 120-140 meal
цитотоксична, ентеротоксична, нейротоксична дія – Екзотоксин, ендотоксин
Патогенез:
Діагностика:
І. Взяття матеріалу
блювотні маси,
промивні води шлунка та кишок,
фекалії,
слиз (гній) із місць ураження слизової оболонки під час колоноскопії,
харчові продукти (молоко, сир)ю
1. Р. коаглютинації;
2. Р з білком А золотистого стафілокока;
3. Пряма/непряма РІФ;
4. ІФА;
5. РНГА;
6. РЗК.
Біологічні властивості.
1. Морфологічні вл-ті:
- грам негативні, добре фарбуються аніліновими барвниками
- форма зігнутих палочок (нагадують кому)
- поліморфні (під впливом різних факторів можуть ставати круглими, колбоподібними,
зерноподібними)
- довжина 1,5-3 мкм, ширина 0,3-0,6 мкм
- спор і капсул не утворюють
- один полярно розташований джгутик (монотрихи) → здатні до активного руху
- у мазках із свіжих культур розташовуються поодинці, у свіжих препаратах із фекалій
нагадують зграю рибок :)
- здатні утворювати L-форми (враховуємо при лабораторній діагностиці холери!)
2. Культуральні вл-ті:
- факультативні анаероби
- невибагливі до поживних середовищ
- оптимальні умови для культивування t - 37 ͦ С, лужна реакція середовища (рН 8,5-9,5),
вміст 0,5% NaOH.
- добре ростуть на 1% лужній пептонній воді (ПВ), лужному м*ясо- лептонному агарі
(МПА) – це середовища накопичення (культивування) – на ПВ через 6-8 годин
з*являється плівка блакитного кольору; на МПА – через 10-12 годин – гладенькі, круглі,
прозорі колонії з чітко окресленими краями; при посіві на стовпчик желатину спочатку
виникає розрідження у вигляді бульки, потім нагадує лійку і завершується пошаровим
розрідженням.
- як селективні середовища (диференціально-діагностичні) використовують
1) середовище Монсура (тауро холат телурил желатиновий агар) → утв. напівпрозорі
колонії сіро-чорного кольору з каламутним краєм ( на відміну від холероподібних
вібріонів, які утв-ть блідо-сірі колонії);
2) середовище TCBS (тіосульфат цитрат бромтимол сахарозний агар) → плоскі жовті
колонії на фоні блакитно-сірого середовища.
3. Біохімічні властивості:
- Б/х активність висока
- оксидазопозитивні
- ферментують: ˂глюкозу, галактозу, мальтозу, манозу, сахарозу, лактозу (повільно)˃ до
кислоти і газу.
- не ферментують: рамному, арагінозу (останню лише після 48 год.)
- гідролізують крохмаль
- утворюють нітрити з нітратів
- розкладають білки до індолу і аміаку
- продукують: лецитиназу, гіалуронідазу, колагеназу, протеїназу, нейрамінідазу (розкладає
нейрамінову кислоту епітеліальних клітин тонкої кишки)
- розріджують желатин
- пептонізують молоко
4. Антигенні властивості:
- О-антиген – соматичний, термостабільний, типоспецифічний
- Н-антиген – джгутиковий, термолабільний, видоспецифічний
- За О-антигеном вібріони розділяють на серогрупи ( близько 200).
Збудники холери відносяться до серогрупи О1 ( V.cholerae cholerae та V.cholerae eltor) та
серогрупи О139 ( Бенгал).
Вібріони серогрупи О1 мають три антигенні фракції (А, В, С), за співвідношенням яких їх,
в свою чергу, поділяють на серовари:
Огава (АВ)
Інаба (АС)
Гікошіма (АВС)
5. Фактори патогенності:
1) Війки – адгезія до слизової оболонки
2) Фібринолізин, муциназа, гіалуронідаза – ферменти агресії
3) Холерний ентеротоксин (СТ)
- білковий екзотоксин (холеро ген)
- його синтез забезпечується геном, локалізованим на бактеріофазі
4) Нейрамінідаза
5) Токсинорегульовані пілі
- рецептори для бактеріооофага
6) Ендотоксин
- ліпополісахарид (ЛПС)
- запускає каскад арахідонової кислоти, в результаті чого виділяються простагландини, які
відповідають за спастичні болі внаслідок спазмів тонкої кишки (тенезмів)
Патогенез.
- Джерела інфекції – хвора людина, бактеріоносій, вода, гідробіонти, водорослі)
- Вхідні ворота – шлунково-кишковий тракт.
- Інкубаційний період декілька годин – 5 днів.
Вібріони потрапляють у шлунок → долають кислий бар*єр (або гинуть і тоді
захворювання не розвивається) → колонізуються у слизовій оболонці тонкого кишечника
→ проникають через шар слизу → адгезія до епітелію → холероген (СТ) блокує фермент
аденілатциклазу → накопичання цАМФ→ вихід йонів Сl з клітин → супроводжується
дуже активною секрецією води та йонів Na, K у просвіт кишки → втрата рідини,
електролітів → водяниста діарея (фекалії втрачають специфічний запах, який стає схожий
на запах риби, і нагадують рисовий відвар) → може приєднуватися блювання.
Загалом втрата рідини може складати близько 10 літрів за добу.
Втрата рідини призводить до порушень в серцево-судинній та дихальній системах.
Температура тіла близько 38-39, або нормальна.
За відсутності лікування можливе зниження температури до 34 гр за Цельсієм (стадія
«холерного альгіду»).
Імунітет.
-гуморально-клітинний, місцевий (утворені Ig перешкоджають адгезії холерних вібріонів)
-повторні захворювання трапляються дуже рідко
-у період видужання в сироватці крові збільшується кількість IgA.
Профілактика.
Неспецифічна: раннє виявлення хворих і носіїв, екстренна профілактика антибіотиками
осіб, які були у тісному контакті із хворими, дотримання правил дезінфекції
медперсоналом, що працює з хворими на холеру.
Специфічна:
-вакцина являє собою комплексний препарат ( 70% - холероген-анатоксину, 30% -
хімічного О-антигену обох біоварів і серовагів Огава та Інаба)
-проводиться за епідемічними показаннями.
Біологічні властивості.
Морфологічні вл-ті:
- Гр-, поліморфна паличка
- нерухома
- добре сприймає анілінові барвники, найкраще фарбується за Романовським-Гімзою
- біполярна структура
- утворює ніжну капсулу
Культуральні вл-ті:
- факультативний анаероб
- невибагливий до поживних середовищ, але краще росте при додаванні до них
гемолізованої крові
- оптимальна t=28 ( розмноження можливе у діапазоні 2-42)
- на рідкому середовищі → утв. плівка, від якої вниз відходять «сталактити», на дні
пробірки осад
- на МПА – колонії зі щільним жовто-каламутним центром і тонким краєм, який нагадує
мереживо – це R-форма.
Біохімічні властивості:
- декстрин, глюкоза, мальтоза, маніт, арабіноза → до кислоти і газу
- не ферментують адоніт, рамнозу, сахарозу, сечовину
- желатин не розріджують, молоко е згортають
- виділяють фібриназу, гіалуронідазу, коагулазу
Антигени та фактори патогенності:
- V- та W-антигени – перший- білок, у цитоплазмі; другий- ліпопротеїн, у зовнішній
мембрані; вони забезпечуютьздатність зберігатися у фагоцитах, їх продукція
опосередкована плазмідами.
- F1-антиген (фракція 1) – антифагоцитарна, некротична дія, глікопротеїн.
- F2-антиген - «мишачий» екзотоксин – блокує адренергічні рецептори, інгібує дихальну
активність мітохондрій
- фібриназа
- гіалуронідаза
- плазмокоагулаза
- пестицин
- бактеріальний пігмент (зв*язує гемін)
- екзоферменти – аденілатциклаза, цитохромоксидаза.
Патогенез.
Зараження відбувається:
1 – трансмісивно через укус
2 – контактно від хворої тварини
3 – аліментарно (рідко)
4 – аерогенно ( від хворого на легеневу форму)
Первинно на шкірі в місці укусу виникає осередок запалення, нагадує пустулу або
карбункул → лімфогенна генералізація → геморагічне запалення і лумфовузлах з
вираженою альтерацією → уражені лімфовузли нагадують бубон (бубонна форма),
безболісні.
Форми:
- шкірна
- бубонна
- септична (первинна і вторинна)
- легенева (первинна і вторинна)
Стадії патогенезу бубонної чуми:
1 – Лімфогенна → проникнення в регіонарні лімфовузли → утв. первинний бубон
2 – Бактеріємія → поширення до кровяного барєру ретикуло-ендотеліальної системи
3 – Септицемія → розповсюдження до забарєрних клітинних систем (генераліхація,
інтоксикація).
Імунітет.
Різної тривалості і напруженості. Відзначені випадки вторинних захворювань.
Протективна активність забезпечується імунною відповіддю, що реалізується через імунні
макрофаги.
Специфічна профілактика.
Живою протичумною вакциною ЕV (ініціали хворої дитини від якої виділили штам для
вакцини).
Біологічні властивості.
Морфологічні вл-ті:
- Гр- палички
- дрібні, еліпсоподібні, поліморфні
- нерухомі
- капсулу мають
- спор не утворюють
Культуральні вл-ті:
- факультативні аероби (краще ростуть в аеробних умовах)
- оптимальна t=37-38
- вимогливі до поживних середовищ - для культивування використовують:
1-згорнуте жовткове середовище Мак-Коя і Чепінга ( утворюються дрібні, ніжні, прозорі
колонії ніби краплинки роси)
2-глюкозо-цистиновий кровяний агар Френсіса (круглі до 3 мм в діаметрі колонії, опуклі
згладкою поверхнею, непрозорі, оточені зеленуватою облямівкою)
- добре культивуються в жовтковому мішку курячіх ембріонів ( гине на 3 добу)
Біохімічні властивості:
- виділяють сірководень
- виявляють цукролітичні властивості ( глюкоза, маноза, маніт, гліцерин) – до кислоти
- індол не утворюють
Антигенні властивості:
- соматичний О-антиген і поверхневий Vi-антиген
- соматичні антигени францісел споріднені з аналогічними бруцельозними, тому імунні
протитуляремійні сироватки здатні аглютинувати бруцел
- під час штучного культивування F. tularensis cхильна дисоціювати в R-форми із втратою
капсули, Vi-антигену і типових антигенних властивостей.
Фактори патогенності:
- екзотоксинів не утворюють
- ферментативні системи, що пригнічують фагоцитоз ( він буде незавершений)
- ендотоксин – алергенний вплив
Патогенез.
- резервуар збудника – гризуни, заражається рогата худоба.
- шляхи зараження – прямий контактний ( при контакті з тушами інфікованих тварин);
непрямий контактний ( при контакті з забрудненими гризунами речима); аліментарний
(через забруднену їжу); повітряно-пиловий; трансмісивний (через кровосисних комах,
кліщі, крім того, здатні ще й до трансоваріальної передачі збудника)
- вхідні ворота – шкіра, слизові оболонки дихальних шляхів, травної системи, очей →
лімфо генне поширення → осідання збудника в реґіонарних лімфовузлах → розмноження
→ місцева запальна реакція → прориваються у кровоток → потрапляють в внутрішні
органи (печінка, селезінка, легені), утворюючи там вторинні вогнища
- інкубаційний період – 3-8 днів
- клінічно: гарячка (38-39), інтоксикація
- Форми (залежно від шляху зараження):
1. Бубонна → болючі регіонарні лімфовузли, розміром з яйце на 2-3 день→ здатні до
1)нагноєння, розкриття норицею і спонтанного дренування або 2)розсмоктування.
2. Виразково-бубонна → виразка у місці вхідних воріт з твердими високими краями,
утворення бубонів.
3. Абдомінальна → запалення мезентеріальних лімфовузлів, виразково-некротичні
ураження ШКТ (схоже за клінікою до черевного тифу).
4. Легенева → повітряне або гематогенне зараження → тяжкий перебіг, висока
летальність.
5. Генералізована септична
Імунітет.
- довічний, стійкий
- зберігається алергізація організму, що проявляться внутрішньбошкірною пробою
Специфічна профілактика.
- за епідпоказаннями у природновогнищевих регіонах
- жива авірулентна туляремійна вакцина.
Патогенез.
- резервуар збудника – дрібна рогата худоба
- зараження – аліментарно (молоко, м'ясо ураженої худоби); водним шляхом; контактно-
побутовим шляхом ( професійний характер у працівників ветеринарії і тваринництва) →
збудник потрапляє у реґіонарні лімфатичні вузли ( частіше заглоткові, підщелепні,
мезентеріальні) → розмноження → незавершений фагоцитоз макрофагами → вони стають
внутрішнім резервуаром збудника і забезпечують захист від антитіл і хіміотерапевтичних
засобів → руйнування макрофагів → потрапляння у кров → утворення вогнищ запалення
у печінці, селезінці, кістковому мозку,ендокарді, синовіальних оболонках суглобів → з 2
тижня приєднуються алергічні ураження→ супроводжуються утворенням гранульом →
бруцельозний ендотоксин може порушувати функцію нервової системи
- клінічно: підйом температури тіла, поступово, за 7 днів до 40 градусів → літичне падіння
температури → повторні підйоми температури через 4-14 днів (нападів може бути до 10) –
таку лихоманку називають ундулюючою
- збудник здатний до внутрішньоклітинної персистенції, тому захворювання схильні до
хронічного перебігу.
Імунітет.
- нестерильний
- забезпечує лише резистентність до суперінфекції в процесі самого захворювання
Мікробіологчна діагностика.
- Бактеріологічний метод.
→ матеріал (мокрота, сеча, випорожнення, кров, гній) → посів на диференціальні поживні
середовища з лактозою, з подальшим виділенням чистої культури ідентифікацією
збудника до виду і підвиду.
- Серодіагностика проводиться шляхом постановки РЗК з О-антигеном.
Профілактика.
Засобів спвцифічної профилактики не існує.
Неспецифічна полягав у чткому дотриманні правил асептики й антисептики у лікувальних
закладах, особистої гігієни, в також дотриманн санітарних норм під час зберігання
харчових продуктів.
Морфологія. велика Гр(+) нерухома паличка 3-10 мкм завдовжки і 1-1,5 мкм
завширшки. В організмі тварин і людини утворює капсулу, яка оточує одиноку клітину
або весь ланцюжок.
У мазках із культур на рідкому середов. сибіркові бацили виглядають довгими
ланцюжками, кінці клітин обрубані або злегка втягнуті, що надає ланцюгу форму
бамбукової тростини з характерними колінчастими зчленуваннями.
B. anthracis при культивуванні на рідкому середов. продукує справжній екзотоксин, який
складається принаймні з трьох компонентів: набряковий токсин викликає некроз і набряк
шкіри у гвінейських свинок; летальний токсин (“мишачий токсин”) спричиняє смерть
білих мишей, протективний антиген, який має імуногенні властивості.
Патогенез. Вхідними воротами інф є шкіра (95-98 %), слизові оболонки верхніх
дихальних шляхів і кишечника. Існує 3 форми хвороби.
Інкубаційний період триває від 2 до 14 днів. При шкірній формі уражаються відкриті
ділянки: щоки, лоб, шия, кисті, передпліччя. На місці проникнення збудника виникає
карбункул із щільним чорним струпом (нагадує вуглинку), навколо якого виникають
вторинні пухирчики з великою кількістю сибіркових бацил.
Легенева форма має перебіг тяжкої бронхопневмонії.
Кишкова форма супроводжується блюванням, кровавим проносом і тяжкою
інтоксикацією організму. Обидві генералізовані форми, як правило, закінчуються
смертю.
Лабор. діагностика.
Матеріал для дослідження беруть при шкірній формі із вмісту пухирців на межі здорової
і ушкодженої тканини або виразки, при легеневій - мокротиння, при кишковій -
випорожнення і сечу, при септицемії - кров.
Якщо при мікроскопії мазків, забарвлених за Грамом і Романовським-Гімзою, виявляють
характерні капсульні бактерії, ставлять попередній діагноз сибірки.
Чисту культуру виділяють при посівах на рідке й щільне середов. (МПБ, МПА). Після
інкубації при 37 °С виділену культуру ідентифікують за морфологією, характером
колоній, біохімічними ознаками та лізисом специфічним бактеріофагом, який діє тільки
на сибіркові бацили. Додатково рекомендують посів на МПА з пеніциліном для
виявлення тесту “перлинного намиста”.
Біологічна проба на білих мишах або гвінейських свинках.. З метою ранньої та
ретроспективної діагностики використовують також алергічну пробу з алергеном-
антраксином.
Clostridium botulinum
122. Етапи розвитку вчення про збудника дифтерії. Теоретичні основи специфічної
профілактики дифтерії. Протидифтерійні препарати.
Сorynebacterium diphtheriae, прямі або трохи зігнуті тонкі довгі Гр(+) нерухомі
безспорові палички довжиною 1-8 мкм, шириною 0,3-0,8 мкм із невеликими
булавоподібними стовщеннями на кінцях, які представляють собою метахроматичні
зерна волютину або зерна Бабеша-Ернста. За хімічною природою вони належать до
поліметафосфатів і є запасом поживних речовин. Найкраще ці зерна виявляють при
забарвленні за методом Нейссера: цитоплазма забарвлюється в світло-коричневий, а
зерна волютину - в темно-синій колір. Скупчення нуклеїнових кислот у цитоплазмі може
надавати їм характерної смугастості (зеброподібної зернистості). У збудника дифтерії
виявлено фімбрії, які зумовлюють адгезивність.
Токсигенні властивості досліджують шляхом посіву на сер-ще Пізу. На третій день при
появі специфічних ліній преципітації в агаровому гелі й позитивній пробі на цистиназу,
виділену культуру визначають як токсигенну.
РПГА: При наявності в сироватці > 1,0 МО/мл антитоксичних антитіл, іммунітет до
дифтерії вважається стійким та тривалим.
Ці методи є найбільш простими, дешевими та дозволяють досить швидко одержати
результати досліджень. Але "золотим" стандартом визначення кількості антитіл в
сироватці крові все ж є реакція нейтралізації на морських свинках та кролях, яка
дозволяє порівняти кількість антитіл в досліджуваній сироватці зі стандартною дозою
протидифтерійних антитіл, яка нейтралізує еритрогенний ефект (гіперемію та запалення
в ділянці введення) стандартної дози дифтерійного токсину. Цей метод дуже
трудомісткий, складний та дорогий. Тому він використовується лише як національний та
міжнародний стандарт.
Рід Mycobacterium
Патогенні
M. africanum
M. avium
Властивості
Морфологія і фізіологія.
Мікобактерії туберкульозу - тоненькі, прямі або трохи зігнуті палички довжиною 1-4
мкм і шириною 0,2-0,6 мкм, гомогенні або зернисті, грампозитивні. Вони нерухомі, не
утворюють спор і капсул, можуть мати гіллясті, ниткоподібні й кокоподібні форми. У
цитоплазмі, особливо в клітинній стінці міститься велика кількість високомолекулярних
ліпідів, що зумовлює їх високу стійкість до кислот, лугів і спиртів. Вони погано
сприймають анілінові барвники, найкращий спосіб забарвлення за Цілем-Нільсеном: на
голубому фоні туберкульозні палички виглядають рубіново-червоними
Види:
-"M. africanum,
- «M. canetti»
- «M. microti.»
Імунітет
Людина має природну резистентність до туберкульозної інфекції.Ця властивість
природжена, передається спадково і ступінь її вираженості неоднаковий. В організмі
виробляються продукти проміжного обміну. До факторів природної стійкості до
туберкульозу належать і гуморальні речовини, що продукуються клітинами імунної
системи та іншими клітинами. Це система комплементу, ферменти (лізоцим,
пероксидаза), інтерферон, С-реактивний білок, інгібітори ферментів бактеріальних
клітин, бактерицидні речовини (лактоферин, молочна кислота тощо).
Серед факторів неспецифічного захисту велике значення мають фагоцити.
Профілактика
Вакцинація БЦЖ спрямована на створення специфічного протитуберкульозного
імунітету в неінфікованих осіб.
Крім вакцини БЦЖ, випускається вакцина БЦЖ-М у половинній дозі (0,5 мг в одній
ампулі, що становить 20 доз, кожна по 0,025 мг препарату). Вона призначена для
вакцинації недоношених новонароджених і дітей.
Терапія
Антимікобактеріальна терапія є основним методом лікування хворих на туберкульоз
різних органів і систем. За ефективністю антимікобактеріальні препарати поділяють на
три групи.
Збудник лепри
Лепра - хронічна генералізована інфекційна хвороба, яка характеризується ураженнями
шкіри, слизових оболонок, внутрішніх органів, периферичної нервової системи й може
тривати роками.
Інкубаційний період у середньому складає 3-5 років, але може затягуватись до 20-30
років. Найчастіше ураження локалізуються на обличчі, рідше на передпліччях і
гомілках). Розвиваються численні інфільтрати (лепроми), які містять велику кількість
лепрозних бактерій. Згодом ці лепроми розпадаються, утворюючи довго незаживаючі
виразки
Морфологія. Біологічні властивості.
Він має вигляд прямих або трохи зігнутих грампозитивних безспорових нерухомих
паличок за морфологією і хімічним складом подібних до мікобактерій туберкульозу.
Забарвлюються за способом Ціля-Нільсена в червоний колір, кислото-, луго- і
спиртостійкість їх дещо менша, ніж у туберкульозних паличок.
Єдиним резервуаром і джерелом інфекції - хворі люди.
Серед істинних мікобактерій, залежно від патогенності для людини та різних видів
тварин, виділяють такі ..
Види та диференціація збудників туберкульозу:
M. tuberculosis - людський тип, збудник туберкульозу людини;
M. bovis - бичачий тип, збудник туберкульозу великої рогатої худоби;
M. africanum - африканський тип, виділений у західній тропічній Африці, йому
притаманні риси двох попередніх типів.
Класифікація:
На підставі антигенної спорідненості( за полісахаридними антигенами) розрізняють 23
серологічні групи. Найчастіше зустрічаються: L.pomona, L.monijakov, L.grippotyphosa,
L.tarassovi, L.canicola, L.icterohaemorragiae.
Патогенез:
Шляхи передачі: водний, аліментарний, контактний.
Стадії:
1. Продромальна ( Дикі тварини – резервуари, які виділяють збудник із сечею,
забруднюючи воду та Ґрунт; із зовнішнього середовища збудник потрапляє в організм
людини і тварини через пошкоджену шкіру, слизові оболонки ротової і носової
порожнини, очей, сечостатевих шляхів, респіраторного і шлунково-кишкового тракту)
2. Бактеріємія (через активну рухливість через 5-6 хв після зараження потрапляють в
кров і з током потрапляють в паренхіматозні органи)
3. Токсична або основних клінічних симптомів (інтоксикація, гемоліз еритроцитів,
прискорення пульсу та дихання, гарячка)
4. Одужання або смерть
Хвороба протікає гостро, з жовтяницею, розвитком ниркової недостатності, з високою
летальністю.
Імунітет:
Напружений
Гуморальний
Типоспецифічний.
Мікробіологічна діагностика:
мікроскопічним методом
бактеріологічним методом
серологічним методом( Реакція аглютинації, реакція зв’язування з комплементом)
Біопроба ( на кроликах-сисунцях)
Специфічна профілактика
Вакцина, що містить антигени 4-х головних серогруп лептоспір.
Терапія:
Антибіотики
Гетерологічний лептоспірозний імуноглобулін
Борелії:
Спіралеподібні з невеликою кількістю завитків (3-8)
Добре фарбуються за методом Романовського-Гімзи, бо мають велику кількість
нуклеопротеїдів
Капнофіли ( потребують 5-10% СО2)
Культивуються на складних поживних середовищах, що містять сироватку,
тканинні екстракти
Можуть розвиватися у жовтковому мішку курячих ембріонів
Імунітет:
Гуморальний, нетривалий.
Діагностика:
Бактеріоскопічний метод ( збудник виявляється у препараті з краплі крові,
зафарбованому за Романовським – Гімзою)
Серологічний метод ( Реакція зв’язування комплемента)
Біологічна проба на щурах, мишах та морських свинках ( для диференціації
епідемічного та ендемічного поворотного тифу. Морські свинки легко заражаються
збудниками кліщового поворотного тифу, а білі миші і щури – збудниками епідемічного
поворотного тифу )
Специфічна профілактика:
Не застосовується
Терапія:
Використання антибіотиків широкого спектра дії.
Патогенез:
Стадії:
1. Ураження шкіри ( мігруюча еритема)
2. Розвиток доброякісних уражень серця і ЦНС
3. Розвиток артриту великих суглобів через 6 тижнів після початку захворюванн
Мікробіологічна діагностика:
Бактеріоскопічний метод
Серологічний метод
ПЛР ( полімеразна ланцюгова реакція)
Терапія:
Антибіотики ( тетрациклін)
Специфічна профілактика:
Не розроблена.
Класифікація:
Збудник хвороба
Rickettsia prowazekii Епідемічний висипний тиф
Ricketsia typhi Ендемічний висипний тиф
Rickettsia felis Тиф котячих білих
Особливості :
Кокоподібні бактерії
Наявні 2 фази розвитку ( 1- наявність ліпополісахариду ; 2 – відсутність
ліпополісахариду)
Утворюють спори у зовнішньому середовищі
Патогенез:
( У первинних ( природних ) осередках: резервуар – гризуни, птахи; переносники – різні
види кліщів; У вторинних ( антропургічних) осередках : резервуар – домашні тварини з
переважанням великої та дрібної рогатої худоби; переносники – кліщі)
Збудник проникає в організм через слизові оболонки або шкіру
Лімфогенним шляхом заносяться в кров – Фаза первинної рикетсіємії
Надходження в органи – Фаза дисемінації
Фагоцитоз мононуклеарами та макрофагами, де розмножуються – Фаза
розмноження
Вихід у кров - Фаза вторинної рикетсіємії
Може протікати як гостро, так і хронічно. Уражається ендокард і клапани серця,
кістковий мозок, легені з розвитком фіброзу.
Мікробіологічна діагностика:
Специфічна профілактика:
Жива вакцина на основі штаму Coxiella burnetti
Патогенез:
( Резервуар та джерело інфекції – людська популяція, переносник – одежна та головна
воші – при епідемічному тифі; Резервуар – щурі та миші, переносник – блохи – при
ендемічному тифі. )
Воші інфікуються через кров при укусі хворого
Рикетсії розмножуються в епітелії кишкового каналу воші і виділяються з
фекаліями
Інфікування людини в результаті втирання фекалій воші у подряпини на шкірі
Гіпертермія, сильний головний біль, міалгії, висипання на шкірі( спочатку на
тулубі6 потім – на кінцівках)
Порушення діяльності серцево-судинної системи ( генералізоване
внутрішньосудинне згортання крові)
Мікробіологічна діагностика:
Основний метод – серологічний ( Реакція зв’язування комплементу з рикетсіозним
антигеном (діагностичний титр 1: 80 і більше))
Реакція Вейля-Фелікса – це Реакція аглютинації з сироватками хворих на висипний
тиф. Діагностикумом є ОХ-19 Proteus vulgaris, який має загальні зі збудником висипного
тифу антигени. – Для диференціації висипного тифу та хвороби Брілла( негативна).
Діагностичний титр 1: 200 і вище.
Специфічна профілактика:
Жива вакцина з авірулентного штама рикетсії Провачека, вирощених на курячих
ембріонах.
Вакцина Вайгля з інактивованих рикетсій, вирощених у кишечнику вошей
Класифікація:
M. Pneumniae –збудник пневмонії та бронхіоліту
M. hominis, M. Genitalium – збудник ангін, респіраторних захворювань без
підвищення температури, запальні процеси нирок, сечостатевих шляхів і статевих
органах
M. urealyticum – збудник простатитів та негонорейних уретритів
Біологічні властивості:
Грамнегативні
Факультативні анаероби
Спор та капсул не утворюють
Поліморфні ( сферичні, еліпсовидні, ниткоподібні)
Відсутність клітинної стінки та її попередника
Найменший серед прокаріот розмір геному
Мінімальна кількість органел
Наявність прокаріотичного органоїду та рибосом
Цитоплазматична мембрана подібна до еукаріотичної
Розмножуються на складних середовищах, мають потребу в стеролі та в інших
факторах росту
На твердих поживних середовищах виростають дрібні колонії, що візуально
невидимі.
У напіврідких поживних середовищах утворюються кулясті колонії
Чутливі до нагрівання та дезінфікантів
Ферментація глюкози характерна для M. pneumoniаe; гідроліз аргініну - для M.
hominis ; гідроліз сечовини – для Urealyticum з утв кислоти
Антигени – мембранні білки, гліколіпіди та полісахариди
Фактори патогенності: адгезивні комплекси, перекисні радикали, ендотоксин,
гемолізин
Мікробіологічна діагностика:
1. Бактеріологічний метод
2. Експрес-метод ( реакція непрямої гемаглютинації, імуноферментний аналіз,
Реакція імунофлюоресценції)
3. Серологічна діагностика (Реакція зв’язування комплементу ( РЗК), Реакція
імунофлюоресценції ( РІФ), Імуноферментний аналіз (ІФА)
4. Полімеразна ланцюгова реакція
Порядок Chlamydiales
Родина Chlamydiaceaе
Біологічні властивості
Стадія елементарного тільця – має овоїдну форму, розмірами 0,3х0,5 мкм, клітинна стінка
у неї товста, ригідна, нуклеоід компактний, цитоплазма містить багато рибосом.
Метаболізм різко знижений – це стадія спокою, призначена для переходу від одного
хазяїна до іншого; елементарні тільця мають інфекційні властивості. В клітини хазяїна
проникають шляхом фагоцитозу. В фагосомах інфікованих клітин елементарне тільце
переходить в вегетативну стадію (репродуктивну), яка має назву “Ініціальне тільце”.
“Ініціальне тільце” характеризується сферичною формою, діаметром 1,5-1 мкм, тонкою
оболонкою, має фібрили нуклеоіду і рибосомальні елементи. Спочатку ініціальне тільце
росте, потім ділиться на дочірні клітини, які знову діляться. Особини кінцевого поділу
перетворюються в елементарні тільця, які розташовуються в цитоплазмі у вигляді
мікроколоній, оточених загальною мембраною (хламидою). Інфікована клітина на цьому
етапі гине, руйнується, елементарні тільця виходять назовні і фагоцитуються новими
клітинами.
Обидві форми грамнегативні. За Романовським-Гімза елементарні тільця фарбуються в
червоний колір, ініціальні – в голубий. Метаболізм хламідій схожий з метаболізмом
бактерій за виключенням того, що хламідії не здатні утворювати макроергічні сполуки
(АТФ, НАДФ), це робить їх енергетично залежними від господаря.
trachomatis
Урогенітальний хламідіоз і пневмонія D, F, G, H, I, J, K
новонароджених
psittaci
інфекційних хвороб
умовно-патогенних
МКО в патогенезі
профілактичних
вивчення ролі
резистентності
збудників до
препаратів у
інфекційних
лікувально-
моніторинг
закладах
внутрішньолікарня
розробка методів
епідеміологічних
терапії інфекцій у
профілактики й
лабораторної
дослідження
соматичному
них інфекцій
діагностики,
специфічної
етіотропної
стаціонарі
аспектів
У межах екосистеми для кожного виду можна описати місце існування. Це та ділянка або
життєвий простір, в якій (якому) живе даний організм (індивідуум або популяція). На
відміну від терміну "місце існування" поняття "екологічна ніша" відображає не місце у
просторі, а функцію певного виду або популяції у спільності організмів.
Мікрофлора ґрунту.
Ґрунти містять достатню кількість води, повітря та поживних речовин. У складі ґрунтів
виділяють три фази: тверду, рідку і газоподібну.
Тверда фаза утворена мінеральними та органічними речовинами. На твердих частинках
ґрунту зосереджені основні поживні речовини: гумус, органо-мінеральні колоїди, іони
Са2+, Mg2+ тощо. Більшість ґрунтових мікроорганізмів адсорбується на поверхні частинок
ґрунту, на органічних залишках та живих коренях рослин. Проте вони при цьому не
утворюють суцільної плівки, а розміщені у вигляді колоній в окремих зонах.
Рідка фаза - ґрунтовий розчин, що заповнює капіляри ґрунту і утворює навколо твердих
частинок плівки різної товщини. Вміст води у ґрунті визначає його аерацію. Великі маси
води знижують аерацію ґрунту, сприяють розвитку анаеробних процесів. У складі
ґрунтових розчинів виявлено мінеральні, органо-мінеральні та органічні речовини в
молекулярно-розчиненому або колоїдному станах. Вміст цих речовин неоднаковий в
ґрунтах різних типів і залежить від горизонту ґрунту та сезону року. Так, найбільша
кількість органічних речовин виявлена в підзолах та болотяних ґрунтах; у чорноземі
співвідношення органічних та мінеральних речовин приблизно однакове; в каштанових
ґрунтах та сіроземах більше мінеральних речовин, ніж органічних. Верхні шари ґрунту
містять більше органічних речовин, ніж нижні.
Газоподібна фаза - повітря ґрунту, що становить 25-70% його загального об'єму. Повітря
ґрунту відрізняється від атмосферного значним зростанням вмісту СО 2 (1,5-3,0% і вище
проти 0,03% в атмосферному повітрі) і зменшенням кисню, що відбувається за рахунок
мінералізації органічних речовин. Повітря ґрунту збагачене метаном, воднем, азотом,
оксидами азоту та вуглецю, леткими органічними сполуками.
Вивітрювання - початковий етап руйнування гірських порід при одночасній дії фізичних,
хімічних та біологічних факторів. Важливу роль в деструкції мінералів відіграють
нітрифікуючі та тіонові бактерії, гриби, актиноміцети. Для руйнування кристалічної
решітки мінералів і переходу хімічних елементів у рухомий стан важливе значення
мають ферментні системи цих мікроорганізмів і продукти їхньої життєдіяльності
(органічні і мінеральні кислоти, хелатуючі агенти, слизи). Під впливом мікроорганізмів,
фізичних та хімічних факторів гірська порода перетворюється у дрібнозем.
Мікрофлора води.
Найменше мікроорганізмів (10 клітин в 1 мл) містять підземні води. Незначна кількість
їх виявлена у дощовій та сніговій воді. Вміст мікроорганізмів у річковій воді значно
вищий: на глибині від 10 до 100 см нараховується від 60 тис до 10 млн клітин в 1 мл
води. Такий же численний світ мікроорганізмів у водах озер.
За рахунок інтенсивного росту ціанобактерій, біомаса яких в місцях "цвітіння" сягає 40-
50 кг/м3, у воді значно зменшується вміст кисню. Це веде до загибелі риби та інших
гідробіонтів.
Більше як 70% поверхні нашої планети покриті водами Світового океану, в яких
поширені бактерії родів Pseudomonas, Bacterium, Vibrio, Micrococcus, Sarcina,
Mycobacterium, Actinomyces, Proactinomyces та дріжджі родів Torulopsis, Rhodotorula,
Sporobolomyces і Debaryomyces.
Мікрофлора повітря.
У залежності від пори року кількість мікроорганізмів у повітрі змінюється. Якщо взяти її
взимку за 1, то навесні вона складатиме 1,7, влітку - 2, а восени - 1,2.
У повітрі лісів, особливо хвойних, мікроорганізмів дуже мало, на них згубно діють леткі
речовини - фітонциди.
Надзвичайно чисте повітря над морями, у горах. Проте бактерії і гриби були знайдені
навіть на висоті 70 км.
Численні аналізи зразків атмосферного повітря дозволили ідентифікувати у ньому до
1200 різних видів мікроорганізмів. Найпоширенішими є спорові бактерії роду Bacillus
(B.subtilis, B.megaterium, B.cereus), пігментовані сапрофітні бактерії роду Micrococcns,
сарцини, дріжджі, актиноміцети, плісеневі гриби, тобто мікроорганізми, стійкі до дії
світла і висихання.
Оскільки людина в середньому вдихає за добу 12-14 тис л повітря і при цьому майже
99% атмосферних мікроорганізмів затримується в дихальних шляхах, присутність
патогенних форм у повітрі є небезпечною для здоров'я людей.
Для деяких приміщень (операційні, пологові будинки, дитячі установи та ін.) мікробне
забруднення повітря має бути обмеженим. Так, загальна кількість мікроорганізмів в
операційному відділенні перед початком операції не повинна перевищувати 500 в 1
м3 повітря, а після операції - 1000, патогенні ж стафілококи і стрептококи не повинні
виявлятися в об'ємі 250 л повітря.
Серед БГКП окремо виділяють групу коліформних бактерій, а в ній - фекальні кишкові
палички (ФКП), які розкладають лактозу при 44,5 °С. До Е. coli відносять бактерії, що не
ростуть на цитратному агарі. Саме вони є показником свіжого фекального забруднення.
Для його визначення можна використати S. fae-calis, який порівняно швидко гине в
оточуючому середовищі.
Загальне мікробне число - це кількість колоній, які виростають при посіві 1мл води на
1,5 % м'ясо-пептонному агарі після 24 год. вирощування при температурі 37 *С. Питна
вода безпечна в епідемічному плані, якщо мікробне число не перевищує 100 в 1 мл. Цей
показник було прийнято у стандартах багатьох країн, у тому числі й в Україні.
Важливим є виявлення у воді бактерій групи кишкової палички (БГКП), які містяться у
випорожненнях людини і тварин. Кількісно наявність БГКП характеризується двома
показниками: індексом БГКП і титром БГКП.
При скороченому аналізі ґрунту визначають загальне число сапрофітних бактерій, титр
БГКП (бактерій групи кишкової палички) (колі-титр), титр анаеробів (перфрінгенс-
титр), титр термофільних бактерій.
Низькі титри БГКП свідчать, що самоочищення закінчене, ґрунт вільний від патогенних
ентеробактерій та органічних забруднень. Отримані дані порівнюють із
гельмінтологічними та хімічними показниками.
При оцінці санітарного стану закритих приміщень, залежно від задач дослідження,
визначають: загальне мікробне число, санітарно-показові мікроорганізми (стафілококи,
альфа- і бета-гемолітичні стрептококи, які є показниками контамінації повітря
мікрофлорою носоглотки людини).
164. Харчові отруєння мікробної етіології. Класифікація харчових отруєнь, які їх
спричиняють.
Харчові отруєння - гострі захворювання органів травлення, що виникають при
вживанні їжі, масивно засіяної мікроорганізмами або утримуючої токсичні для організму
речовини бактеріальної або небактеріальної природи
не є контагіозними (не передаються від хворої людини на здорову, хворіє лише той, хто
вживав недоброякісну їжу)
виникають раптово й швидко закінчуються, завдяки чому одержали назву 'спалахів'.
170. Роль води, грунту, повітря у передачі збудників вірусних інфекцій. Віруси, які
найчастіше знаходяться в об’єктах навколишнього середовища.
Роль води:
джерело розповсюдження кишкових вірусних інфекцій
патогенні для людини віруси будуть передаватися водним шляхом, якщо колі-індекс
буде більше 3 (тобто в 1л води буде більше трьох бактерій групи кишкових паличок)
віруси зберігаються у воді до 120 діб і більше (чим більша їх концентрація і чим нижча
температура, тим більші строки виживання)
найнебезпечнішими джерелами зараження є стічні води, у яких пік кількості
ентеровірусів припадає на літньо-осінній період. Разом з фекаліями людини віруси
потрапляють у стічні води.
епідемічне значення при потраплянні у воду мають віруси: ентеровіруси (поліомієліту,
Коксакі, ЕСНО), ентеровіруси типів 68-71, віруси гепатиту А, аденовіруси 40 та 41 типів,
вірус ящуру (вище перечисленні віруси найдовше зберігаються), ротавіруси, норовіруси,
каліцівіруси, астровіруси, кишкові корона віруси.
Роль грунту:
зараження підземних джерел водопостачання
епідемічне значення при потраплянні у грунт мають віруси: ентеровіруси (поліомієліту,
Коксакі, ЕСНО 1, 12, 29 серотипів), ентеровіруси типів 68-71.
віруси зберігаються у грунті від 10-13 тижнів до 6 місяців
Роль повітря:
джерело респіраторних вірусів, які викликають масові захворювання
інфікування відбувається через аерозоль в повітрі. У вірусному аерозолі віріони
знаходяться всередині краплин, які складаються зі слини, муцину, солі.
Питну воду відбирають в стерильний посуд без застосування гумових шлангів. Перед
відбором проб кран кінцевої ділянки
периферійної водопостачальної мережі тричі фламбують запаленим
спиртовим факелом і спускають воду впродовж 10-15 хв. при повністю
відкритому крані. Об'єм однієї проби - 10 л. Для нейтралізації залишків хлору в посуд
для відбору проб перед стерилізацією додають гіпосульфіт натрію з розрахунку 20 мг
на 1 л води! Далі здійснюють концентрацію вірусу та деконтамінацію матеріалу
аналогічно до проб стічних вод.
Дослідження проб води на наявність ротавірусів :
1. ІФА
2. РНГА
3. ІХА
4. електронна мікроскопія – золотий стандарт. Морфологія - колесо дитячої машинки,
розміри 70-75 нм.
5. полімеразна ланцюгова реакція зі зворотною транскрипцією.
Дослідження проб на наявність аденовірусів 40-41 типів:
1. метод електронної мікроскопії
2. РНГА із специфічним рідким діагностикумом "Аденотест"
3. ПЛР
4. ІХА.
5. Виділення та ідентифікацію аденовірусів з проб води
здійснюють у культурі клітин.
Дослідження проб на наявність ентеровірусів:
Виділення вірусів у культурі клітин RD, HeLa, HEp-2, KB, L20B і RD з метою
виявлення характерного цитопатичного ефекту. Далі ідентифікація виділених
поліовірусів мікрометодом з використання специфічних імунних сироваток
173. Роль повітряного середовища у поширенні збудників респіраторних вірусних
інфекцій. Методи відбору проб повітря та індикації респіраторних вірусів.
Роль повітряного середовища – див. питання 170.
Фільтраційний метод – здійснюють за допомогою спеціальних приладів:
мофицікованого бактеріоутримувача Речменського, ПОВ-1, ПАБ-1. Принцип
заключається у пропусканні певного об’єму повітря через уловлювальну рідину в
приладі чи фільтр. В якості уловлювальних рідин використовують цукровий бульйон або
гідролізат лактальбуміну. Улювлювальну рідину використовують для виділення та
подальшої концентрації (додають 30% розчин поліетиленгліколю) або використовують
фільтри №4.
Для виділення та вивчення осаду застосовують центрифугування. Після нього видаляють
верхній шар рідини та аналізують вірусвмісний нижній шар.
ПРАКТИЧНІ ПИТАННЯ
1. Проводити мікроскопію препарату з використанням імерсійного об’єктиву,
зробити висновок про морфологічні властивості досліджуваних мікроорганізмів.
Суть: Готуємо препарат-мазок на предметному склі із матеріалу або чистих культур
мікроорганізмів і досліджуємо у мікроскопі з метою виявлення збудників захворювань
чи дослідження їх морфологічних і тинкторіальних властивостей.
Для фарбування використовують анілінові барвники - це похідні аніліну, які
використовують для фарбування мікроорганізмів з метою збільшення їх контрастності та
подальшої мікроскопії.
При мікроскопії використовується імерсійна система, яка складається з імерсійного
об'єктиву (х 90) та імерсійного масла, яке забезпечує концентрацію променів, що
проходять через мікроскопічний об'єкт в об'єктив і, таким чином, забезпечує кращі
умови для дослідження мікроорганізмів.
Методика виготовлення бактеріального препарату-мазку
1. Приготування суспензії бактерій (беремо бактеріологічну петлю, прокалюємо в
пальнику, на предметне скло наносимо бактеріальною петлею краплинку
фізрозчину, потім вносимо бактеріальною петлею культуру бактеріальних клітин з
пробірки чи чашки Петрі і розтираємо по кругу)
2. Висушування суспензії бактерій (над вогнем) та одержання мазку.
3. Фіксація мазку (проводимо предметним склом через вогонь 3 рази). Мета
фіксації: вбити мікроби, закріпиш їх на склі і забезпечити краще їх фарбування.
4. Фарбування мазку (фарбують бактерії різними методами, але в основному методом
Грама)
5. Промивання (дистильованою водою змиваємо залишки барвника)
6. Висушування препарату-мазку (легенько промокуємо фільтрувальним папером і
даємо підсохнути остаточно на повітрі).
На готовий препарат наносимо краплину імерсійного масла і ставимо на предметний
столик мікроскопу, спочатку шукаємо поле зору під звичайним об'єктивом, а потім під
імерсійним, що дає збільшення в 90 разів, опускаємо об'єктив до моменту, коли він
доторкнеться до краплинки імерсійного масла! Регулюємо мікрогвинтом!
Висновок: якщо в полі зору круглі бактерії, то за морфологією - коки (чи кокоподібні),
якщо палички – бацили (чи паличкоподібні), якщо спіралеподібні, то звивисті. Якщо
забарвлення фіолетове чи синє — грампозитивиі, якщо червоне чи рожеве —
грамнегативні.
До переваг живих вакцин можно віднести їх природний шлях введення. Для таких
вакцин характерний тривалий напружений імунітет, менша, порівняно з іншими
вакцинами, кількість введень препарату та формування загального і місцевого імунітету.
Недоліки:
правцевий
дифтерійний
адсорбований дифтерійно-правцевий
асоційований коклюшно-дифтерійно-правцевий
ботуліновий
стафілококовий
гангренозний анатоксини
Матеріали:
Культура бактерій
Адсорбована імунна діагностична сироватка для РА на склі
0,5% розчин ИаСІ
Предметне скло
Бак. петля
Хід роботи
Облік результатів.
ПРИ постановці прямої :ІФА досліджуваний матеріал (культури грибів роду Candida)
бактеріологічною петлею наносять на знежирене предметне скло, готують тонкий мазок,
висушують його на повітрі, фіксують. На зафіксований препарат наносіть 1-2 крали
флуоресціюючої сироватки і фарбують Його у вологій камері 20-30 хв. при температурі
25 С. Після інкубації препарат промивають 2-4 рази забуференим ізотонічним розчином,
впродовж 10-15 хв. прополіскують дистильованою водою, висушують, наносять краплю
нефлуоресціюючої олії і розглядають на люмінесцентному мікроскопі за допомогою
імерсійного об'єктиву. При ньому гриби роду Candida дають яскраве світіння на темному
фоні.
Матеріали:
+-Н-+ - повна аглютинація, рідина прозора, а на дні значна кількість білого осаду;
+++ - рідина не зовсім прозора, осад менший;
++ - рідина непрозора, осад ще менший;
+ - рідина мутна, дуже незначний осад;
- - рідина рівномірно мутна, як в контролі антигену; осад відсутній. Результат в
цьому випадку вважають негативним.
Суть полягає в тому що антитіла блокують активні центри вірусу грипу і таким чином
перешкоджають гемаглютинації. Реакція вважається позитивною при відсутності
аглютинації еритроцитів. В нашому випадку ідентифіковано вірус грипу типу А,
оскільки реакція позитивна з сироваткою грипозною А.
14. Здійснити серологічну діагностику грипу. Провести облік реакції гальмування
гемаглютинації (РГГА), поставленої з парними сироватками хворого. Зробити
обґрунтований висновок.
Парні сироватки:
Необхідні складові:
1. Еритроцити барана;
2. Відомий антиген;
3. Невідомі антитіла в сироватці хворого.
Розводимо 1 сироватку в титрі від 1/10 до 1/160. Позитивна РГГА реєструється в
титрі,наприклад, 1/10 (осаджені неаглютиновані еритроцити, тому що шукаємо АТ,
парасолька там, де не вистачає АТ і вірус аглютинує еритроцити); через 2 тижні
розводимо 2 сироватку; позитивна реакція реєструється в титрі (1/80 – осаджені
неаглютиновані еритроцити). Відмічається зростання титру антитіл (в 8 разів (80:10)
(мінімум в 4 рази повинно бути). Пацієнт хворів на вірус грипу типу…
15. Пояснити суть вірусологічної діагностики поліомієліту. Встановити наявність
вірусу у клітинних культурах, інфікованих матеріалом від хворого, за
цитопатичною дією (ЦПД) і феномен бляшкоутворення. Зробити висновок. (с. 327)
Суть:
Діагностичне значення має наростання титру антитіл у другій сироватці не менше, ніж
у 4 рази в порівнянні з першою сироваткою.
Метод виявлення включень Бабеша-Негрі є досить специфічним для сказу, хоч він і
менш чутливий, ніж метод флуоресцуючих антитіл. У тканині мозку собак тільця
знаходять у 90-95 % випадків, а в людей, померлих від сказу – в 70 %.
Виготовлення мазки з гнійних виділень з уретри або ліквору хворого на гостру гонорею,
фарбують їх метиленовою синькою, за Романовським-Гімзою та Грамом.
Бактеріоскопічне дослідження
Реакція ставиться:
1. Беруть кров у хворого з вени, пальця або мочки вуха в стерильну пробірку 2-3 мл,
ставлять її в термостат на 30 хв для згортання.
Черевного тифа + + + + ─ ─
Паратифу А ─ ─ ─ ─ ─ ─ ─
Паратифу В ─ ─ ─ ─ ─ ─
Діагностикум, 2
2 2 2 2 2 -
краплі
Інкубація в
термостаті
Облік реакції
5. Остаточний облік проводять через 18-20 год знаходження пробірок при кімнатній
температурі.
При позитивній реакції аглютинації утворюється білуватий осад на дні пробірки із
більш-менш прозорою рідиною над ним.
- При негативній реакції рідина залишається каламутною, осад на дні пробірки
відсутній.
Виділення копро-, урино-, і білі культур проводять з кінця 2-го тижня захворювання.
Матеріалом для дослідження є сеча, кал, жовч. Позитивні посіви крові виявляються на
3-й тиждень захворювання у 30-40% хворих.
24. Пояснити як визначається мікробне число повітря. Врахувати результати і
зробити висновок. Врахувати результати біохімічної і провести серологічну
ідентифікацію гемокультури, виділеної від хворого. Зробити висновок.
Для визначення мікробного числа повітря використовуємо формулу Омелянського:
а∗102 ∗103 ∗5
Х=
𝑏∗10∗𝑡
Х – кількість мікроорганізмів в 1м3
а – кількість колоній, що виросли на чашці Петрі
b – час експозиції
t – площа чашки
5 – час за розрахунком Омелянського
10 – об’єм повітря в л, з якого відбувалося осадження мікроорганізмів за 5 хвилин
102 - площа на яку відбулося осадження
103 – об’єм повітря в л
Висновки робимо за таблицею наведеною нижче
На другий день неозброєним оком або за допомогою лупи 5×-10× досліджу- ють
характер росту на середовищі Плоскирєва, де шигели утворюють дрібні, про- зорі,
безбарвні колонії.
Для визначення виду шигел використовують також реакцію коаглютинації. Вид збудника
встановлюють за допомогою позитивної реакції з білком А золотистого стафілокока, на
якому адсорбовані специфічні антитіла проти шигел. На типову колонію наносять
краплю сенсибілізованого антитілами протеїну А, похитують чашку й через 15 хв під
мікроскопом спостерігають появу аглютинату. Реакцію коаглютинації можна ставити
вже на другий день дослідження, якщо на середовищі є достатня кількість
лактозонегативних колоній.
При відборі колоній використовують пробу на оксидазу або індикаторні папірці (СІП-1 –
набір для ідентифікації вібріонів). Оксидазопозитивні колонії перевіряють у РА на склі(
«слайд-аглютинація») з холерною сироваткою О1, у розведенні 1:100. При позитивній
реакції ставлять слайд-аглютинацію з сироватками Гікошіма, Інаба й Огава(1:50),
готують мазки для забарвлення за Грамом і обробляння люмінесцентними сироватками.
Позитивна РА з холерною О1 або Гікошіма, Інаба й Огава-сироватками або позитивна
реакція з люмінесцентними антитілами у поєднанні з морфологічними й культуральними
ознаками та специфічною іммобілізацією антитілами дозволяють видати попередню
відповідь про виявлення холерних вібріонів О1 серогрупи. Підозрілі колонії, що
аглютинуються і не аглютинуються холерними О1-сироватками, відсівають на
середовище Ресселя або лужний агар для виділення чистої культури та її ідентифікації.
Далі відбирають культури із середовища Ресселя й перевіряють їх у слайд-аглютинації з
холерними сироватками О1, Гікошіма, Інаба й Огава. При негативних результатах із
цими сироватками ставлять слайд-аглютинацію з холерною сироваткою О139. На основі
позитивної РА видають попередню або остаточну відповідь про виділення холерного
вібріона О1 серогрупи відповідного сировару. Якщо виділена культура реагує з
холерною сироваткою О139 при негативних результатах з О1-сироваткою, видають
відповідь про виділення холерного вібріону О139 серогрупи. При виділенні від хворого
або вібріононосія культури, яка не аглютинується сироватками, видають відповідь про
виділення холерних вібріонів не О1 серогрупи(НАГ-вібріонів).
Результат: при мікроскопії видно прямі або злегка зігнуті нерухомі грампозитивні
палички. Спор і капсул не утворюють. Палички потовщені на кінцях і нагадують
булаву. В мазках бактерії розташовуються під кутом один до одного, у вигляді букв V, Y,
L. При фарбуванні за методом Нейссера тіла бактеріальних клітин фарбуються в ніжно-
жовтий колір, зерна волютину - в темно-синій.
Сироватка крові
хворого,
інактивована і
0,5см3 0,5 см3 0,5 см3 0,5 см3
розведена 1:5
Антиген 0,5 см3 - - -
№1(специфічний)
з сироваткою -Г -Г -Г +Г
хворого
сифілісом
з нормальною +Г +Г +Г +Г
сироваткою
Позитивна реакція – коли є повна або значна затримка гемолізу (4+, 3+);
Слабопозитивна реакція – часткова затримка гемолізу (2+);
Сумнівна реакція – незначна затримка гемолізу (1+).
В разі виникнення повного гемолізу РВ вважають негативною
Кожну сироватку, що дала позитивну якісну реакцію, необхідно дослідити і кількісним
методом з послідовним її розведенням від 1:10 до 1:640
Висновок:
У 50% хворих реакція стає додатною після появи твердого шанкру. В другому і третьому
періодах сифілісу 75-90% додатних реакцій. Після лікування реакція Васермана від’ємна.
Пробірки
Контроль Контроль
Інгредієнти, мл Дослід сироватки діагностику
(КС) ма (КД)
1 2 3 4 5 6 7
Ізотонічний розчин
- 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5
хлориду натрію
У хворого беруть 2-3 мл крові з ліктьової вени або пальця, отримують сироватку,
яка повинна бути абсолютно прозорою.
Реакцію ставлять із розведеннями сироватки від 1:50 до 1:800, супроводжуючи її
відповідними контролями.
Антигеном в реакції аглютинації служить туляремійний діагностикум, в 1 мл
якого міститься 10 млрд мікробних тіл. Перед вживанням його розводять у 10 разів
Компоненти:
Номер пробірки
Компоненти, мл
7
1 2 3 4 5 6 (контр.)
Ізотонічний розчин
хлориду
0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25
натрію
Сироватка хворого
1:10 0,25→ → → → → ↓ -
Антиген рикетсій
Провачека 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25
Остаточне розведення
1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 -
сироватки
Експозиція в при 37
термостаті 18 год ° С
У три чашки Петрі з МПА внести 0,05, 0,1 і 0,2 мл питної води й розтерти
шпателем Дригальського. Аналізуючи воду з різних водойм, особливо багатих
органічними речовинами, необхідно перед висіванням її розвести у пропорції не менше
ніж 1:1000. Для цього використовують ряд пробірок із 9-ма мл стерильної водопровідної
води або фізіологічного розчину, їх нумерують (цю роботу виконує лаборант). 1 мл
досліджуваної води внести стерильною піпеткою у пробірку No 1, ретельно перемішати,
продуваючи повітря, відібрати 1 мл речовини й перенести у пробірку No 2. Після
перемішування таку ж кількість речовини перенести у пробірку No 3 (розведення
1:1000). Із пробірки No 3 висіяти по 0,05, 0,1 і 0,2 мл у чашки Петрі (рис. 11). Розтерти
шпателем Дригальського, чашки підписати й поставити в термостат із 30 °С.