數位課程注意事項

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助教: 迦寬
層析原理及GC硬體簡介

技術服務部 / 應用工程師
黃伯欣
層析原理

 層析歷史

 層析簡介

 常見層析參數
層析歷史
• 1906 - Mikhail
Semenovich Tswett：利
用碳酸鈣、石油醚分離植
物色素
• 1940’s -分配層析和紙層
析
• 1950‘s -氣相層析、薄層
層析、凝膠過濾層析、梯
度流析層析
• 1960‘s -商業高效液相層
析
層析簡介

• 將混合物分離的過程：樣品成分在管柱(固定相)
與移動相兩相間不斷進行分配。
• 其中一相固定不動， 稱為固定相 (stationary
phase)；另一相是攜帶樣品混合物流經固定相
的流體 （氣體或液體），稱為移動相 (mobile
phase)。
層析參數
不同R值影響層析峰之示意圖
影響分離度 (R)值的因素
理論版數 (N)對分離度 (R)的影響
理論板數和理論板高的計算方法
The Van Deemter Equation
The Van Deemter Equation-N2

N2
1.00

0.75
H
0.50

0.25
12-20 cm /sec

10 20 30 40 50 60

u (cm/ sec)
The Van Deemter Equation-He

1.00

He
0.75
H
0.50

0.25 22-35 cm /sec

10 20 30 40 50 60
u (cm/sec)
The Van Deemter Equation-H2

1.00

0.75
H
0.50
H2
0.25 35-60 cm/sec

10 20 30 40 50 60
u (cm/sec
The Van Deemter Equation-Compare

N2
1.00

0.75 He
H
0.50
H2
0.25

10 20 30 40 50 60
u (cm/ sec)
Different carrier gas influence
resolution

Nitrogen Nitrogen Helium Hydrogen

11.7 cm/sec 20 cm/sec 23.2 cm/sec 48 cm/sec

13.0 min 6.2 min

17.4 min
24.5 min

R= 1.76 R= 1.33 R= 1.67 R= 1.65

GC硬體簡介

 氣相層析儀組成
 氣體

 進樣口

 管柱

 檢測器
氣相層析儀組成
• 氣體
載氣：利用載氣將樣品帶入層析系統中。
檢測器氣體：檢測器所需之氣體。

• 進樣口
將樣品氣化並導入系統。

• 管柱
將樣品成分分離。

• 檢測器
對流出管柱的樣品成分進行識別和反應。

• 數據系統
對檢測器的訊號轉換為層析圖，並進行定性、定量分析。
載氣和檢測器修飾氣體

氣體必須：
惰性
乾淨
純淨-氣體純度應達99.9995%以上 (5N5)
根據所使用的檢測器類型做選擇
氣體管路連接
 氣體純化管
避免載氣中的不純物 (氧、水、雜質等)進入系統
*除氧、除水載氣 (延長管柱壽命)
*除碳氫FID (提高靈敏度)
Gas clean filter
插拔式設計，更換方便快速
高靈敏度指示劑，變色表示已達飽和，需更換
氣體經淨化後，可達到99.9999%
Big trap
大容量，經濟實惠
建議搭配
載氣  big trap  gas clean filter  進樣口
飽和
何時更換
取決於氣體的容量和純度
建議搭配大容量+指示型，顏色變了就更換
進樣口

功能：
1. 導入樣品

2. 將樣品汽化

3. 保持樣品原有特性

4. 將適當樣品量導入管柱
 進樣口類型
Packed-Column
Inlet
Split/Splitless

Cool on-column
Capillary-Column
Inlet
PTV
Inlet
Gas/Liquid Valve

Headspace
Autosampler
Auxiliary Sampling Purge & Trap
Devices Sampler

Thermal Desorbers

Pyrolyzers
Packed-column Inlet
分流/不分流進樣口 (Split/Splitless)
Septum

Liner O-Ring

Liner

Washer/Seal

Column
分流模式 (Split)

Total Flow = (septum purge flow) + (vent flow) + (column flow)

104(ml/min) = 3(ml/min) + 100(ml/min) + 1(ml/min)
不分流模式 (Splitless)

Total Flow = (septum purge flow) + (vent flow) + (column flow)

4(ml/min) = 3(ml/min) + 0(ml/min) + 1(ml/min)
Split / Splitless 差異
• 不分流模式
– 大部分樣品流進管柱
– 適合低濃度樣品
– 層析峰峰寬較寬

• 分流模式 200 pg/μL

1 μL MeCN

– 小部分樣品流進管柱 Split ratio 10

– 適合高濃度樣品
– 層析峰窄而尖銳
冷柱頭進樣口 （Cool on-column）
Programmed- temperature vaporizer
(PTV)
填充管柱 Packed Column
早期的GC管柱
靜相: 固定液或多孔吸附型填料
內徑: 2~4mm
長度: 0.5~10m
管材: 不銹鋼、玻璃、鎳、PTFE
(不建議用玻璃易碎、沒有彈性)
適用於氣體分析

注意事項

機台型號

注射口

規格
 毛細管柱Capillary column
分離效率高、便於安裝和維護
靜相: 高分子液膜(WCOT)或多孔顆粒(PLOT) 載氣 高分子液膜
0.1~5um
內徑: 0.10~0.53mm
長度: 5~100m
管材: 融合石英毛細管，外部塗層聚醯亞胺(增加彈性、耐熱度) 固體多孔顆粒
載氣 5~50um
應用範圍廣泛

Polyimide coating

Fused silica

Stationary phase
WCOT管柱極性表
樣品在管柱中分離的過程
GC常見之檢測器種類
TCD

FID

ECD

NPD(N)

NPD(P)

FPD(S)
MSD
(SIM) (SCAN)

10-15 10-12 10-9 10-6 10-3

fg pg ng ug mg
1ppt 1ppb 1ppm 0.1% 100%

1 ng in 1 uL Liquid (sg = 1) is 1 ppm Concentration

Mass Selective Detector is both: Specific and Universal
 熱傳導檢測器（Thermal Conductivity
Detector，TCD）
TCD是一個非破壞性的偵測器，被
加熱的燈絲由載氣 流量冷卻，產
生基線
當載氣含有樣品 通過時，氣體冷
卻效果改變，變化量即產生偵測器 Reference Col/Sample
信號
Flow

Flow
火焰離子檢測器（ Flame Ionization
Detector，FID）
• 火焰離子偵測器屬於電離型偵測器， Ignitor
當載氣中的有機物在氫火焰下被電
離產生正、負離子和電子，在電場Insulators Collector
作用下正離子（CHO+）往收集極
（Collector） 收集然後經放大器
放大獲得訊號。訊號的大小與物質 Air
的碳氫鍵數目成正比。 Jet
H2 and
Make-Up
gas
Jet

Ignitor Column nut

質譜儀 (Mass spectrometry)
 質譜偵測樣品碎片質荷比（m/z）來獲得分析物的
結構資訊

Ion Mass Detector Output

GC Interface
Source Analyzer (EM) (PC)
(EI or CI) (Quadrupole)

High Vacuum Pump (DP or Turbo)

Low Vacuum Pump (Mechanical)

數據系統-層析圖
數據系統-定性
數據系統-定量
Thank you