T

Biên

www.hutech.edu.vn
*1.2020.BIO368*
n - :
tailieuhoctap@hutech.edu.vn
 I

...................................................................................................................I
............................................................................................................ V
................... 1
...................................................................................... 1
.............................................................................. 1
...................................................... 1
.............................................................................. 4
HÓA SINH ............................................................... 5
.................................................................................................... 6
......................................................................................................... 7
.................................................................................................. 8
1.3.4 Bình tam g iác (Erlen) ....................................................................................... 8
.............................................................................................................. 9
1. ...................................................................................................... 9
..................................................................................................... 10
.............................................................................................. 10
....................................................................................................... 11
1.3.10 Buret ......................................................................................................... 12
1.4 ................................................................................................ 13
................................................................................................... 13
m cu i ............................................................................. 14
................................................................. 15
.................................................................. 15
..................................................................................................... 16
....................................................................................... 17
.............................................................................. 17
......................................................................... 18
................................................................... 19
............................................................................................. 20
................................................................................................................ 22
.......................................................... 22
.......................................... 23
.................................................................................... 23
............................................................................ 23
..................................................................................................... 23
................................................................................................... 23
..................................................................... 24
II
...................................................................................................24
.............................................................................................24
................................................................................. 25
............................................................................................25
...............................................................................................26
................................................................. 28
......................................................................................................28
.........................................................................28
................................................... 29
......................................................................................................29
.........................................29
................................................................................................................ 31
.......................................................... 31
....................................... 32
.................................................................................... 32
............................................................................ 32
......................................................................................................32
....................................................................................................32
....................................................................... 33
....................................................33
.........................................................................33
.......................................................34
3.3.4 Xác ...........................................................34
.............................................................34
.................................................35
.................................................35
3.3. .................................................................35
.....................................36
....................................................................36
..........................................36
...........................................................37
.....................................................37
................................................................................................................ 37
.......................................................... 37
............................................................................ 39
.................................................................................... 39
................................................................... 39
.............................................................................................39
.........................................................................................40
...........................................................................................42
.......................................................................................44
 III
.......................................................................... 44
......................................................................................... 46
DE .......................................................... 47
..................................................................... 47
.......................................................................... 49
................................................................................................................ 51
.......................................................... 52
.............................................................. 53
.................................................................................... 53
.............................................................................. 53
.................................................................... 53
....................................................................... 54
....................................................... 55
................................................................................ 58
e .......................................................................... 58
.......................................................................... 59
................................................................................................................ 64
.................................................................................................... 64
.................................................. 65
.................................................................................... 65
................................................................ 65
................................................................................. 65
............................................................................ 67
............................................................ 70
- chu ............ 70
................................................ 73
................................................................................................................ 76
.......................................................... 76
........................................................ 77
.................................................................................... 77
............................................................. 77
..................................................................................................... 77
...................................................................................... 77
...................................................... 78
....................................................................... 80
..................................................................................................... 80
anh .......................................................... 80
............................................. 82
................................................................................................................ 85
.......................................................... 85
CHOLESTEROL .................................. 86
IV
.................................................................................... 86
...................................................................... 86
......................................................................................................86
......................................................................87
........................................................ 88
......................................................................................................88
.........................................................................88
NG URIC ACID TRONG MÁU.............................................................. 89
......................................................................................................89
-Caraway ...........................................................................90
................................................................................................................ 91
.......................................................... 91
............................................................................................ 92
 V

Hóa Sinh
các quy ch

rate
Hóa Sinh trong thú y.

Bài 2: h

Bài 3:

Bài 4:

Bài 5:

Bài 7:

Bài 8: urea, uric acid và cholesterol

óa
.
VI
 BÀI 1: 1

BÀI 1:
LÀM V

1.1 M U

- cho sinh viên

sinh .

- các khái

- Sinh viên
.

- Sinh viên s ng
.

1.2 KHÁI NI M VÀ NGUYÊN T C

1.2.1 Nguyên t c làm vi c trong phòng thí nghi m

1.

uc
 2 BÀI 1:

2.

phép.

3. ng

4.

5.

6.
vào

7.

8.

an toàn trong phòng thí n

9.
 BÀI 1: 3
10.
a

11.

12.

13.

g bên

14.
v.v
.

15. acid hay base

16.

17.
trào ra ngoài.

18.

19.
 4 BÀI 1:

20.

21. , khóa

22.
i.

23.

1.2.2 ng pháp c p c

1. lcoho
glycerin.

2.
bicarbonate natri (NaHCO3 1%) id acetic loãng
CH3

3.

4.
 BÀI 1: 5
5.

6.
iodine

7. K

8.

9.

10.

Hình 1.1:

1.3 CÁC D NG C THÍ NGHI M HÓA SINH

 6 BÀI 1:

1.3.1 ng nghi m

16, 18, 20mm

.

Cách s

Hình 1.1:

mòn da t

tay.
 BÀI 1: 7

1.3.2 Bình c u

Hình 1.2:

ng:

Cách s

.
 8 BÀI 1:

1.3.3 C c (Becher)

, v.v (Hình 1.3)

chia

Cách s

miant.

Hình 1.4:
Hình 1.3:

1.3.4 Bình tam giác (Erlen)

Bình
nhánh và có nhánh (Hình 1.4).

ine.

Cách s

nh bình tam

.
 BÀI 1: 9
1.3.5 Ph u
(Hình 1.5)
.

Hình 1.5: Hình 1.6:

Cách s

Khi dùng ph
ng trong

1.3.6 Ph u chi t

(Hình 1.6).

Cách s
 10 BÀI 1:

1.3.7

- 1000
ml (Hình 1.7).

Hình 1.7: Hình 1.8:

Cách s

1.3.8 nh m c

10 mL, 25 mL, 50 mL, 100 mL, 250 mL, 500 mL, 1 L, 2 L (Hình 1.8). Bình
 BÀI 1: 11
g có

xác.

Cách s

tan,

vì

1.3.9 ng hút
nh xác và pipet chia

(Hình 1.9).

Hình 1.9: Pipet và micropipet Hình 1.10: Buret

 12 BÀI 1:

h.

Cách s

1.3.10 Buret

(Hình 1.10).
 BÀI 1: 13

Cách s

0.

n
và

1.4 QUANG PH K
1.4.1 Nguyên t c

i n ng a ch

spectrophotometer).

m ch y u c a m y l d ng s u lên
t b chuy n th nh d n m ng c a n 1
i chuy t qu .

Trong ph p , ng qua c c k thuâ x t nghiêm

ng ta chuy n ch t c n x m u th h
i trong su t.

X C t c a 1 ch t b ng c ch l m song song v i 1 ng chu n

có n C0 bi c:

C = A/Ao × C o

b ng c 1 bi u m uh d ng hê s (factor = Co/A o), A = OD

 14 BÀI 1:

**D ng m u tr ch a c c ch t kh c th tao

m u) c ng h p thu c c tia s dung. Pha 1 m u tr ng (dd không hay dd blank) gi ng

khi chu n bi d ng cho thu c th tao m u v o, ch kh c l không

cho ch t c n x a i chi u v i m u tr ng.

Cuvette

Hình 1.11: và cuvette có

- te

1.4.2 m cu i

m cu i (end point method) l

.
.

CT = (AT/AM).CM = AT . K
 BÀI 1: 15
OD = A; C T T hay A T
factor.

enzyme, s
- 5
- 620 nm.

- l glucose, protein, albumin, cholesterol,

triglyceride, HDL_c, LDL_c, Urea (so màu), Bilirubin.

1.4.3 ng h c hai m

a không hoàn toà

g A1

C T = (AT/A M).C M

e trong

1.4.4 ng h c enzyme
)
óa sinh .
 16 BÀI 1:

. ép

quang trung bình.

A1 = A2 - A1; A2 = A3 - A2; A3 = A4 - A3; A4 = A5 - A4

CT .K

- OT, GPT, Amylase...

1.4.5 ng d ng

- Các giai

M ).

c T).

AM A T).

Tính

AM C M và ET C T => A M /A T = CM /CT

C T = (A T/AM ) × CM hay CT = (A T/A M) × CM

ó: OD hay A

C S
 BÀI 1: 17

1.5 PHA CH DUNG D CH

d

Kh

- Dùng cân phân tích có 4- n hóa ch

- n và dán nhãn

- n dài,

- ch khác nhau
ng C N

- hân tích và tính toán khác nhau

1.5.1 Các khái ni m v n

- , % (w/w
100g
10g NaCl.

, % (w/v

10g NaOH

- , % (v/v
100ml dung
 18 BÀI 1:

CuSO4 .

- ó và

+
hay OH-
= 1.

-
2S 2O3 và I2 Na2S 4O6 + 2NaI, z
(Na 2S 2O3 ) = 1, z (I2) = 2

1.5.2 Hi u ch nh n dung d ch

c
 BÀI 1: 19

ixanal
cân chính

2SO4 0,1N; NaOH 0,1N; KMnO4 0,1N.

K= Cp/Ct = Vp/Vt

2SO 4 h
H 2SO4 màu phenolphtalein, dùng burette

(10x ,91.

1.5.3 M i quan h gi a các lo i n

C % = C(g/L) /10.d

C M = C(g/L) / M (1.2)

C N = n.C M (1.3)

C M = 10.d.C(%) / M (1.4)

C N =10.d.C(%) / N (1.5)

(N
 20 BÀI 1:

1.5.4 Dung d m

-
c

-
p
- base CH 3COOH
(0,1M)/CH3
ít.

-6,2)

dd (a): acid citric 0,1M: 21,01g C 6 H8O 7.H2

1000ml.

dd (b): 6H 5O7Na 3 .2H2

citrate có giá t (a)

(b)

:
(a) (ml) (b) (ml) pH (a) (ml) (b) (ml) pH
46,5 3,50 3,0 23,0 27,0 4,8
43,8 6,20 3,2 20,5 29,5 5,0
40,0 10,0 3,4 18,0 32,0 5,2
37,0 13,0 3,6 16,0 34,0 5,4
35,0 15,0 3,8 13,7 36,3 5,6
33,0 17,0 4,0 11,8 38,2 5,8
31,0 19,0 4,2 9,5 40,5 6,0
28,0 22,0 4,4 7,2 42,8 6,2
25,5 24,5 4,6 - - -

-8,0)

ri orthophosphate 0,2M: 27,8g NaH2PO 4

 BÀI 1: 21
(b) Dung 2HPO4 .7H2

Na 2HPO4.12H 2

ch (a) và

(a) (ml) (b) (ml) pH (a) (ml) (b) (ml) pH

93,5 6,50 5,6 45,0 55,0 6,9
92,0 8,00 5,8 39,0 61,0 7,0
90,0 10,0 5,9 33,0 67,0 7,1
87,7 12,3 6,0 28,0 72,0 7,2
85,0 15,0 6,1 23,0 77,0 7,3
81,5 18,5 6,2 19,0 81,0 7,4
77,5 22,5 6,3 16,0 84,0 7,5
73,5 26,5 6,4 13,0 87,0 7,6
68,5 31,5 6,5 10,5 89,5 7,7
62,5 37,5 6,6 8,50 91,5 7,8
56,5 53,5 6,7 7,00 93,0 7,9
51,0 49,0 6,8 5,30 94,7 8,0

m Na2HPO 4 - KH2PO4 (pH 5,0-8,0)

(a): ,9g Na2 HPO4 .12H2 O hòa tan và

(b): 2PO4

: 2HPO 4 - KH2PO 4

(a) (ml) (b) (ml) pH (a) (ml) (b) (ml) pH

10 990 5,0 372 628 6,6
18 982 5,2 492 508 6,8
30 970 5,4 612 388 7,0
49 951 5,6 726 274 7,2
79 921 5,8 818 182 7,4
121 879 6,0 885 115 7,6
184 816 6,2 936 64 7,8
264 736 6,4 969 31 8,0

(a)
 22 BÀI 1:

(b) P
000ml.

(c) -boric 0,1M: hòa tan 6,18g acid ortho-

(d)

c
-

và

C T
Câu 1: ng
95%.

Câu 2: 2SO 4 2SO4 2SO4

Câu 3: 4 4.5H 2O

Câu 4: H2 SO4 2SO4 2M.

Câu 5:

Câu 6: .
 BÀI 2: 23

BÀI 2:

2.1 M C U

- t

-
u

- Sinh

2.2 KHÁI NI M VÀ NGUYÊN T C

2.2.1 Khái ni m

trong sinh hóa (carbohydrate, protein/acid amin,

2.2.2 Nguyên t c

t
.
 24 BÀI 2:

2.3 PH N NG C A CARBOHYDRATE
2.3.1 Nguyên li u
t
fructose (monosacaride), sucrose, lactose và maltose (disacaride)
(polysacaride).

2.3.2 Các th nghi m

1. t
carbohydrate. H 2SO4 - và disacaride
phóng monosacaride. Các monosacaride
-

2. odine: Polysacaride

3. :

ion cupric (Cu 2+ e thành các ion cuppy (Cu+) t

màu vàng c

4.
acid . Vì môi
acid không t (monosacaride)
t
sacaride sacaride.

5. s. Acid

6.
ea
màu xanh.
 BÀI 2: 25
7.
-naphthol.

8. Phenylhydrazine (C H NHNH trong axetic acid

1 và C 2) có

disacaride
khác - t

9.

sacaride

2CO3

2.4 PH N NG C A PROTEIN
2.4.1 Ph n ng k t t a
e COO-,
NH3 +, OH).

Chún

1.
e

2. e

khi al
 26 BÀI 2:

2+
3. Các i , Hg2+,
Fe2+, Zn 2+, Cd 2+
rong

4.
trichloroacetic acid, sulphosalicylic acid, photphotungstic acid, picric acid, tannic
acid, photphomolybdic acid acid -sulphosalicylate,
protein-tungstate, protein-picrate, v.v.

5. acid photphotungstic và acid

6.

2.4.2 Ph n ng màu
g h
acid sau:

amino acid
Biuret Two peptide linkages
Ninhydrin -Amino acids
Xanthoproteic Benzene ring of aromatic
Millons amino acids (Phe, Tyr, Trp)
Hopkins-Cole Phenolic group (Tyr)
Sakaguchi Indole ring (Trp)
Nitroprusside Guanidino group (Arg)
Sulfur test Sulfhydryl groups (Cys)
Imidazole ring (His)
Folin Phenolic groups (Tyr)

1. c hình
o
urea
 BÀI 2: 27

các h

acid
ng th u

2. Các acid- inhydrin

Amino acid + Ninhydrin Keto acid + NH3 + CO2 + Hydrindantin

Hydrindantin + NH 3 + Ninhydrin

3. e hóa các
acid amin acid nitric

4. acid

t
nitrophenol.

5. -Cole:
e acid
me

6. -naphthol và

7. t
acid amin là cyste i

Methi i
 28 BÀI 2:

8. Acid

9. i ch: t

m tra
Molisch.

2.5 PH N NG C A NI
2.5.1 Khái ni m

, acid
uric và creatinine.

2.5.2 Các th nghi m nh tính NPN

1. t ea. Natri
ea i phóng

2. Enzyme urease

màu

3. uric acid Acid

4. : Acid acid ni acid purpuric

5. : acid
 BÀI 2: 29
2.6 THÀNH PH N B T T NG C C TI U
2.6.1 Khái ni m

(urine)

2.6.2 Các th nghi m nh tính thành ph n c ti u

1.
-sulfosalicylate.

2. bulin
n

acid e và
sunfate

Urine
Albumin Kidney damage (glomerulonephritis)
Hemoglobin Damage to kidneys urinary tract
Glucose Diabetes mellitus, renal glycosuria
Diabetes mellitus, starvation
Bile salts Obstructive jaundice
Bile pigments Obstructive jaundice và hepatic jaundice

3.
gen peroxi
O
màu xanh.
 30 BÀI 2:

4. : t
n t này

â
;
cho

5. T oxi hóa glucose: n glucose

. Enzyme glucose oxyase hydro peroxide
(H2O 2), và c
O- oxy

6. n Rothera:

-hydroxybutyrate.

7. Th m

8.
n 2SO 4

9. : nitric acid oxy hóa thành biliverdin

(màu xanh lá c dãy
màu s và

10.
t. bari sulfate
acid) oxy hóa bilirubin thành biliverdin (màu xanh
lá cây) và bilicyanin (màu xanh).
 BÀI 2: 31

c sinh hóa

Các carbohydrate

xét
õ

Câu 1: T t
monosacar ?

Câu 2: p
?

Câu 3: gì?

Câu 4: Nêu
?
 32 BÀI 3:

BÀI 3: TRONG
CÁC PH

3.1 M U

- à
m.

3.2 KHÁI NI M VÀ NGUYÊN T C

3.2.1 Khái ni m

c cùng và tiên

3.2.2 Nguyên t c

Các nguy
.
 BÀI 3: 33
3.3 CÁC TH NGHI NG
3.3.1 ng ng trong huy t thanh

acid molypden.

- -100 mg/dL]

- -Toluidine: -
acid m
).

- dase-peroxidase (GOD - POD):

pháp x
thành acid
-

3.3.2 ng urea máu

ea -

- Urea
 34 BÀI 3:

3.3.3 ng creatinine huy t thanh

t -

- Alkaline picrate:

3.3.4 ng protein huy t thanh

-8 g / dl
(albumin 3,5-5.0 g/dL; globulin 2,5- /

- Biuret: - on
ng

3.3.5 nh n bilirubin huy t thanh

- dl;
~ 0,4 mg/
 BÀI 3: 35

- van den Bergh:

den Ber acid
acid

sóng 540nm.

3.3.6 nh n n cholesterol trong huy t thanh

-225 mg/

- rid axetic:
acid

3.3.7 ng uric acid trong huy t thanh

Acid e
- nam 4-8 mg / dl -6 mg / dl)
.

- -Caraway: Uric acid

acid

3.3.8 nh n canxi huy t thanh

N cao -11 mg

- -Cresolphthalein:
-
m.
 36 BÀI 3:

3.3.9 X nh n t thanh

3-4,5 mg/d

- e
trichloroacetic acid
ph molybdic acid
1-amino 2-
naphthol-4 sulfonic acid 60 nm.

3.3.10 nh n SPGT và SGOT

Pyruvate transaminase trong
glutamate oxaloacetate transaminase trong OT; aspartate
transaminase) là hai e tham
-
-

Ng t

L-Alanine + -ketoglutarate L-glutamate + pyruvate

L-Aspartic acid + -ketoglutarate L-glutamate + oxaloacetate

- Acid
2, 4-dinitrophenyl hydrazine

3.3.11 nh ng phosphatase ki m huy t thanh

-13
dL

- Nguyên
-
ferric
 BÀI 3: 37
3.3.12 nh n amylase huy t thanh
-

- : ân thành dextrin và

3.3.13 Phân tích d ch não t y (Cerebrospinal fluid)

-
nh hóa,
-
50-75 mg/ viêm màng não lao.

- protein CSF: Acid

- glucose CSF:

Câu 1:

Câu 2: Nêu nguyên lý x ?

 38 BÀI 3:

Câu 3: ,
trên ?

Câu 4:
 BÀI 4: 39

BÀI 4: T GLUCIDE

4.1 M U

- monosaccharide và disaccharide

- carbohydrate

- drate có
.

4.2 TÍNH CH T KH C NG KH
4.2.1 Ph n ng Molish

cid

o ra
furfurals 5-Hydroxy methyl.

- : glucose 5%, saccharose 5%, maltose 5%, fructose 5%,

5%...

- : etanolic Alpha Naphthol trong ethanol)

- Acid
 40 BÀI 4:

Hình 4.1:

etanolic Alpha naphthol

cid

de de
saccharides
h.

4.2.2 Ph n ng Benedict

Carbonhydrate e
 BÀI 4: 41
-

2+
- h. thành ion Cu+
cid.

- Các ion Cu + -
Cu(OH)2
Cu2 O

- 1%, maltose 1%, fructose 1%, h

- l 4

citrate natri.

arbonate natri
Na 2CO3 4 .5H2O 17,3%; thêm

saccharose; uctose;

mô
 42 BÀI 4:

95 o

Hình 4.2: Benedict

- Màu xan - (+)

- - 0,5-1,0 G% (++)

- -1,0-1,5 G% (+++)

- - 1,5-2,0 G% (++++)

- -> 2.0 G% (+++++)

4.2.3 Ph n ng Barfoed

Cu 2+ cid
monosacaride de
de ng khi
 BÀI 4: 43

Hóa ch t:

1lit.

fructose 1%;

phút.
c.

- t.

Hình 4.3:
 44 BÀI 4:

4.2.4 Ph n ng Seliwanoff

Keto hexoses khi acid hydrochloric hành 5-hydroxy methyl furfural

n
formyl) .

fructose 1%.

Seliwanoff

1ml fructose 1%;

Thêm vào

Quan sát, ghi

- c

4.2.5 Ph n ng th y phân Sucrose

(mo xác
 BÀI 4: 45
2 CO3

Hó

lein 1%

2CO3 10%

du

e 2%

trung hòa.

m aldehyde
t nedict.

Benedict và Seliwanoff.
 46 BÀI 4: DE

Hình 4.4:
nh

4.2.6 Ph n ng Osazone

(100oC) phenyl hydrazine pH 4.3

ng

e, lactose

Acid a

Phenyl hydrazine hydrochloride

Natri acetate (CH3COONa).

cid acetic

Thêm phenyl h
 BÀI 4: 47
m

o
C 20 phút.

Glucose,

ình thành trong vòng 10-15 phút.

Hình 4.5: c

4.3 TÍNH CH T KH C A POLYSACCHARIDE

4.3.1 Ph n ng gi a tinh b t và iodine

Iodine polysacaride

po
-D- -1,4
 48 BÀI 4:

O- -1,6 O-

ha
10- - -
-

ine b

Hình 4.6: và glycogen.

: Hòa tan 4g iodine 0m ó

ine và pha

thích.

2S 2O3
 BÀI 4: 49
Di

Amylose -

Amylopectin-

Glycogen-

Dextrins-
trong quá
iodine.

Hình 4.7:
Iodine Lugol (IKI hình trái) ,
iodine .
Vàng cam - âm tính. Màu tím- .

4.3.2 Ph n ng th y phân tinh b t

thì
tinh

ph
 50 BÀI 4:

Dung

H 2SO4

lein 1%

10%

Becher 1: 2SO4

Becher 2:
37 oC
d ine

Lugol.

Làm l t c
n

Benedict
.
 BÀI 4: 51

cách n
.

- ; Quan sát - Vòng màu t

- Carbonhydrate.

- ; Quan sát- ; -
- Màu xanh
.

3- Th ; Quan sát-
; -
-
âm tính

- -
; - ructose,
. - ca
lactose, maltose và sucrose.

- ; Quan sát-
sát; - Fructose. - Glucose, galactose và
d tín
seliwanoff.

-6-
osazone); Quan sát - - mannose,
- Maltose, hedge hog Lactose.

- ;

Quan sát- Th
- Sucrose.
 52 BÀI 4:

Glucose Fructose Maltose Lactose Sucrose

Molisch Positive Positive Positive Positive Positive
Benedict Positive Positive Positive Positive Negaive
Barfoed Positive Positive Negative Negative Negative
Seliwanoff Negative Positive Negative Negative Positive
Inversion - - - - Positive
Osazone Needle Needle Sun flower Powder puff Negative
shaped shaped shaped shaped
crystals crystals crystals crystals

Câu 1:

Câu 2:

Câu 3: t
in

Câu 4:

ng

Câu 5:
 BÀI 5: 53

BÀI 5:
VÀ ENZYME

5.1 M U

-
acetone.
.

- lên

- Sinh viên q

- .

5.2 CÁC TÍNH CH T C A LIPID

5.2.1 Kh

Lipid có tính ch
tr
-

- l,

- , Na 2CO3 0,5M
 54 BÀI 5:

Qu

Cho vào

Cho và

Quan sát

Cho vào 3

10 mL 10 mL 10 mL 10 mL

Na 2CO3 10 gi - - -
Xà phòng loãng - - -
M - - -
yên trong 5 phút và

- và
.

- 2 CO 3

2 CO3.

5.2.2 Tìm th ketone c ti u

-
Acetyl-C Acetyl-CoA tham gia vào
-
-
 BÀI 5: 55
hyd
tron

Sodium nitroprussiate ketone

- NH4

- Sodium nitroprussiate 10%

n

Cho v

-
-

Sodium nitroprussiate 10% 2 gi

NH 4 1 mL 1 mL
4 m 450
.

e tím

5.2.3 Ki tinh khi t c a ch t béo và d u

1. :
 56 BÀI 5:

Hình 5.1: Ch .

Cách

2, 3.

iodine, lugol)

Ghi l ( ) trong
.
 BÀI 5: 57
2. onification:

Quá trình xà phòng h

acid

òn

Ý :

acid béo
ch

cao
id béo dài tiêu
)

hành

Cho vào :Alcohol

(1:1)
 58 BÀI 5:

p
toàn. Sau khi
xà

5.3 HO NG C A ENZYME

5.3.1 Kh o sát v enzyme catalase

hydrogenperoxide H2O 2 nên có t

oxy hóa H2 O2 .

- (H 2O2 ) 1%

-
 BÀI 5: 59

cá :

H 2O2 1%

d H 2O2 1%

5.3.2 Kh o sát v enzyme amylase

e
amylose, amylopectin, dextrin

ol

iodine
enzyme amylase.

- a enzyme amylase)

- ine 0,5% trong alcohol

- Bình tam

ly
 60 BÀI 5:

- cho vào bình

V= 100ml -4°C/1 ngày.

A.

-
không có enzyme là
amylase và

5 mL 5 mL 5 mL 5 mL
Amylase 0

1. hút
nh iodine
vào và g

C.

2.

3.

Không có 3 9
amylase amylase amylase amylase
1. 0 phút Màu

2. 5 phút Màu

3. 10 phút Màu
 BÀI 5: 61
B.

-
trong 5 phút
.

5 mL 5 mL 5 mL
0 oC 37 oC 100oC
Amylase 1 mL 1 mL 1 mL

- : sôi

1.

2.
màu

3. .

1. 0 °C 2. 37 °C 3. 100 °C
Màu Màu Màu
 62 BÀI 5:

- phosphate (pH 2, 4, 7, 10)

- Cho 5

- Cho 4 mL Thêm 1
. 37

- 7°

5 mL 5 mL 5 mL 5 mL
4 mL of pH 2 4 mL of pH 4 4 mL of pH 7 4 mL of pH 10
Amylase 0

- H

pH 2 pH 4 pH 7 pH 10
Màu Màu Màu l Màu

5 mL 5 mL 5 mL 5 mL
3 CaCl2
Amylase 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL

t
 BÀI 5: 63
n AgNO 3 , ethanol 95%, CaCl2 0,0002M

- trên

Di

Canxi clorua (CaCl2 -amylase trong khi

-

t -amylase.

1% AgNO3 95% ethanol

Màu Màu Màu
 64 BÀI 5:

Lipid ung môi phân

benzel, ether. Trong bà

.

Tìm hi

Câu 1: t ?

Câu 2:

Câu 3: alase

Câu 4: yme amylase là gì?

h amylase là gì?

Câu 5: a
 BÀI 6: 65

BÀI 6:
PROTEIN VÀ AMINO ACID

6.1 M VÀ YÊU C U

-
theo các

6.2 NH TÍNH PROTEIN VÀ ACID AMIN

6.2.1 S bi n tính c a protein

n cid
trung tính và acid on và

h
 66 BÀI 6:

- Albumin phô mai)

- 3

- nh, pipete hút

A.

D g tr

Thêm 3 ml d m và dán nhãn

1. Thêm 4 mL NaOH 10%.

2. Thê

B.

-
 BÀI 6: 67
- 3 (1N)

- Q
protein)

Chú ý
in. Pha

6.2.2 Ph n ng màu c a proteins

cid amin, peptide

acid amin.

Hình 6.2: .

iuret:
a dung
2+
d
Các acid amin và dipeptide
 68 BÀI 6:

màu xanh

màu.

Ninhydrin là
hóa aci 2, NH 3 và aldehyde.
NH 3

Ninhydrin n acid
cid hydroxyproline cho
màu vàng.

Hình 6.2: .

: cho các acid amin có

. Acid
ng các s

- ,1%: glutamic, leucine, proline,

-
 BÀI 6: 69
- 4 2%, NaOH 10% (Biuret),

- G p .

-
- 4 - Ghi
c amino acid glutamic, leucine, proline.

dung dich

-
.

ng Dung d ch Th tích
1 Glutamic 1 ml
2 Leucine 1 ml
3 Proline 1 ml
4 Lòng tr ng 1 ml
5 cm m 1 ml

-
o
C trong 4-

Xanthoproteic

- ung d t HNO3

- - 4 phút c
 70 BÀI 6:

-
2-3 mL NaOH). Chú ý:
phát ra.

- màu vàng cam, có

theo

- amin tyrosine,
prot , làm
nóng các m - 4 phút.

1. Biuret 2. Ninhydrin 3. Xanthoproteic

Glycine
Tyrosine
Gelatin
Albumin
Casein ( )

6.3 NG PROTEIN VÀ ACID AMIN

6.3.1
Sorensen - chu formol

formaldehyde (formol

nhóm cac
acid
 BÀI 6: 71

Hình 6.3: amine formaldehyde (formol)

NH 2 acid amin có
.

-
trung hò
formol trung tính.

- NH 3 4Cl, (NH 4)2SO4

- ch phân protein (acid amin)

acid ( , hu ).

- pipet 10ml, 3 erlen 250ml

 72 BÀI 6:

- 1 buret 25ml.

Dung dich A: 27,8 g NaH 2PO4 hoà tan trong 1000ml

,05g Na 2HPO4.7H 2 2 HPO4 .12H2 O pha trong

1000ml

à
h A: 39 ml + dung d

- K2HPO4.3H2O trong 1000ml

t phenolphthalein, trung hòa

- Bình 1:
.

- Bình 2:
phenolphthalein 0,5% dung d h màu tím xanh

- n

- omthymol blue
 BÀI 6: 73
1 có pH
7,0.

- Thêm

pH 9,2.

-
không

6.3.2 ng protein b

Coom
 74 BÀI 6:

serum albumin (BSA). Sau khi c

x - OD 0

- %, Albumin c

- Du
-20 0

1. Hòa tan 100mg Coomassie Brilliant Blue G-250 trong 50ml ethanol 95%, thêm
100ml 85% (w/v) acid photphoric.

2. Sau khi .

3.

- )

- g

-
 BÀI 6: 75
-

- Bradford vào

ng nghi m 0 1 2 3 4 5 KS1 KS2

c c t (ml) 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 1 1
Albumin chu n 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 - -
(0,1mg/ml)
Thu c th Bradford 4 4 4 4 4 4 4 4
N Albumin (µg/ml) 0 10 20 30 40 50 4.14
OD 595nm (tham kh o) 0 0.076 0.210 0.376 0.439 0.485 0.045

-
0

595nm.

ng tuy n tính gi a n protein (µg/ml) v i m

quang OD595 c hà ng protein P trong m u phân tích KS.

ng protein trong 1g m u cân: Protein (µg/g) = ñ

 76 BÀI 6:

Qua viên rotein và acid amin thông qua

các

nhóm NH2

Cu2+

C
Câu 1:

Câu 2: Khi nào

Câu 3: orensen

Câu 4:

Câu 5:
 BÀI 7: 77

BÀI 7:
VITAMIN VÀ KHOÁNG

7.1 M VÀ YÊU C U

- áng
.

- vi
.

7.2 NH TÍNH NG VITAMIN

7.2.1 Khái ni m

Vitamin là

vitamin
.

7.2.2 nh tính vitamin B2

acid
AgNO 3

- Viên vitamin B 2, AgNO 3 )

 78 BÀI 7:

- 3, quan sát

7.2.3 ng vitamin C b ng chu iodine

ng

KIO3

: KIO3 + 5 KI + 6HCl 6I2 + 6 KCl + 3H2O

6H 8O6), ion iodine (I- . iodine

óa acid ascorbic thành acid dehydroascorbic.
. d ascorbic, iodine

Vitamin C.

- KIO3 /KI 0,001N: Hòa tan 5,0 g kali iodine (KI) và 0,268 g kali iodate (KIO 3) trong
acid
 BÀI 7: 79
-

-
0 ml.

- 3mL
3/KI

- g dung

Hình 8.1:

min C (mg%),

3
 80 BÀI 7:

3/KI 0,001N, 100

xem

7.3 NH NG CANXI, PHOSPHO

7.3.1 Khái ni m

spho
trong ur trong

nzyme, nucleic
acid, hormone.
các enzyme tiêu

7.3.2 ng canxi t ng trong huy t thanh

9-11 mg/dl)

- -Cresolphthalein
p O-cresolphthalein (CPC)
 BÀI 7: 81

(OH)
++
Ca + O-Cresolphtalein ------------- Colored complex

O-Cresolphthalein (so màu) (R1)

borate : 12.404 g acid boric và 1OO ml Natri hydroxit

660nm

này canxi

không có canxi.
Các cha acid loãng (50% v/v).

660 nm, cuvette

Cho vào

R1 (mL) 0.5 mL 0.5 mL 0.5 mL

R2 (mL) 0.5 mL 0.5 mL 0.5 mL
(Calcium
- 10 uL -
200 mg/dL)
- - 10 uL
o o
C / 15-25
 82 BÀI 7:

-Cresolphthalein cho màu tím trong

.

Correct calcium (mg/dL) = total calcium (mg/dL) + 0.8(4-Albumin [g/dL])

7.3.3 ng phosphorus t thanh

-4,5 mg/ suy

- e
trichloroace

-amino 2-
naphthol- 620/689 nm.

Perchloric acid + Ammonium Molybdate Ammonium chloride + Molybdic acid

Molybdic acid + Inorganic Phosphorus Phosphomolybdic acid

1,2,4 Amino Naphthol Sulphonic Acid + Phosphomolybdic acid

màu xanh ( 620nm)

Trichloroacetic acid (10% TCA)

Ammonium molybdate

Perchloric acid

1,2,4 Amino Naphthol Sulphonic Acid (ANSA)

 BÀI 7: 83
Dung (0.004 mg/ml)

g 570 nm, Cuvette

trên

Acid

Hình 8.2:

Hình 8.3:
 84 BÀI 7:

(Blank) (Standard) (Test)

5 mL 5 mL
- - 5 mL
Perchloric acid 0,4 mL 0,4 mL 0,4 mL
Ammonium molybdate 0,4 mL 0,4 mL 0,4 mL
ANSA 0,2 mL 0,2 mL 0,2 mL

n 10
ng. o OD

Hình 8.3:

ospho máu (Hyperphosphataemia):

=> Hypervitaminosis D
(Chronic Nephritis).

hospho máu (Hypophosphataemia):

=> (Hyperparathyroidism)
V

ào.
 BÀI 7: 85

khoáng
.

gi
trong .

C
Câu 1:
vitamin trong bài?

Câu 2:

Câu 3:
2SO4

Câu 4:
iodine.

Câu 5: canxi, phospho trong máu.

 86 BÀI 8: EROL

BÀI 8:
URIC ACID VÀ
CHOLESTEROL

8.1 M VÀ YÊU C U

- và

-
thu

8.2 NG UREA TRONG MÁU

8.2.1 Khái ni m

cid máu
S

urea
t
 BÀI 8: 87
8.2.2 Monoxime

m
Amo
-endo-

e Diacyl + Hydroxylamine

- Diacetyl monoxime

- Ferric clorua trong sunfuric acid và ortho-phosphor

- Thio-semi

- máu urea

hêm 0,1 ml ;
 88 BÀI 8:

S sóng 578nm.

2 (Standard)
- - 0.1 mL

- 0.1 mL -
(20 mmol/L)
0.1 mL - -
DAM reagent 3 mL 3 mL 3 mL

Serum urea (mg/dL) = (T-B)/(S-B) x

8.3 NG CHOLESTEROL TRONG MÁU

8.3.1 Khái ni m

-225 mg/dL g

8.3.2

acid
2 SO4

óng 560nm.

- FeCl3 -CH 3COOH; Conc.H2SO4

- Diacetyl monoxime

- Ferric clorua trong acid sunfuric và acid ortho-

 BÀI 8: 89
- Thio-

- máu ng urea

- 3 -CH 3

- chúng là B, S và T

- - 5 mL
FeCl3 -CH 3COOH 5 mL 4.9 mL -

- 0.1 mL -
(200 mg/dL)
Conc.H2SO 4 3 mL 3 mL 3 mL
-

- (T-B) / (S-

- (T-B) / (S-B) x 200 mg/dL x

ng

- =2

8.4 NG URIC ACID TRONG MÁU

8.4.1 Khái ni m

tro - nam 4- -6 mg/dl) trong

ut.
 90 BÀI 8:

8.4.2 -Caraway

- Natri tungstate 10%.

- 2/3N sulfuric acid.

- Tungstic acid: Thêm 50ml natri tungstate 50% 50ml 2/3N cid
m
màu nâu.

- Phosphotungstic acid: Hòa tan 50g natri tungstate t

Thêm 40ml phosphoric acid
L

- Na 3CO3 10%.

- uric acid - 100mg%.

- uric acid - 1mg%.

Cách

Blank Test Standard 1 Standard 2 Standard 3

- - 1 mL 2 mL 3mL

- 3 mL - - -
3 mL - 2 mL 1 mL -
Na 3CO3 (ml) 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL
Phosphotungstate (ml) 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL
 BÀI 8: CH OLESTE ROL 91

- Hyperuricaemia

- Hypouricaemia

ch
Các

Câu 1:

Câu 2: Trình bày

máu?

Câu 3: acid trong máu?

 92

TÀI L
1. Satyanarayana U., Chakrapani U. 2019. Biochemistry. 5th Edition. Elsevier India.
ISBN: 9788131249406.

2. Karen C. Timberlake. 2014. Laboratory manual for General, Organic, and Biological
Chemistry. Third edition. Pearson. ISBN-10: 0-321-81185-2.

3.
Hutech, 2017.

4.