Professional Documents
Culture Documents
Kullanım Amacı
Sitratlı insan plazmasında protrombin zamanı bazlı testlerde ve protrombin zamanı (PT)
tayinlerinde kullanım içindir.
Özet ve Açıklama
Dade® Innovin® Reaktifi E. coli içinde üretilen ve sentetik fosfolipidler (tromboplastin)1,
kalsiyum, tamponlar ve stabilizörlerle birleştirilen saflaştırılmış rekombinan insan doku
faktöründen hazırlanmaktadır. Reaktif, bir global tarama testi olan protrombin zamanında (PT)
ekstrensek ve ortak mekanizmalar yoluyla pıhtılaşma başlatır. Dade® Innovin® Reaktifi PT’yi
temel alan üç ana uygulamaya sahiptir2:
1. Ekstrensek pıhtılaşma sisteminin kalıtsal ya da edinilmiş pıhtılaşma bozukluklarının,
karaciğer hastalığının ya da K vitamini eksikliğinin göstergesi niteliğindeki tek ya da birleşik
eksikliklerinin tespitine yönelik hızlı bir tarama testi olarak.
2. Vitamin K antagonistleri ile yapılan oral antikoagülan tedavide hassas bir gözlem testi
olarak;
3. Spesifik pıhtılaşma faktörleri için bir test olarak.
Ek olarak, çeçitli foto-optik koagülasyon analizörleri protrombin zamanı tayininden fibrinojen
değerini elde edebilmektedir.
Dade® Innovin® Reaktifi protrombin, F.VII ve F.X gibi başka herhangi bir pıhtılaşma faktörü
içermeyen sentetik fosfolipidler ve rekombinan insan doku faktörü kullanılarak üretilmektedir.
Bu nedenle, faktör eksiklikleri ve oral antikoagülan tedavisi gören hastaların plazma örnekleri
için yüksek derecede duyarlıdır. Dade® Innovin® Reaktifi’nin duyarlılığı WHO insan beyni
referans tromboplastinine oldukça benzerdir3. Dade® Innovin® Reaktifi terapötik heparin
seviyelerine duyarlı değildir. Dade® Innovin® Ayracı'nın koagülasyon etkenleri üzerindeki
yüksek duyarlılığı ve terapötik heparin üzerindeki duyarsızlığı vitamin K antagonistleri3 ile
yapılan oral antikoagülan tedavinin gözlemlenmesi için faydalıdır. Ek olarak, yüksek duyarlılığı
(yani reaktifin orta derecede tükenmiş faktör aktivitesine olan yanıt vericiliği), hafif patolojik
aralıkta dahi, anormal plazmaların ayırt edilebilmesini sağlamaktadır.
Yöntem Prensibi
Pıhtılaşma kaskadı plazmanın optimal miktarda tromboplastin ve kalsiyumla inkübasyonu
yoluyla tetiklenir; ardından pıhtılaşma zamanı ölçülür.
Reaktifler
Not
Dade® Innovin® Reaktifi koagülasyon analizörlerinde otomatik olarak veya manuel olarak
kullanılabilir. Siemens Healthcare Diagnostics, çeşitli koagülasyon analizörleri için Referans
Kılavuzları (Uygulama Föyleri) sağlar. Referans Kılavuzları (Uygulama Föyleri) analizöre/teste
özel kullanma ve performans bilgileri sunar. Verilen bilgiler bu Kullanım Talimatlarında
belirtilenlerden farklı olabilir. Bu gibi durumlarda Referans Kılavuzları (Uygulama Föyleri)
içerisinde verilen bilgiler bu Kullanım Kılavuzunda verilen bilgilerin yerine kullanılmalıdır.
Ayrıca, lütfen cihaz üreticisi tarafından sağlanan kullanım kılavuzunda verilen talimatlara da
başvurun!
Sağlanan Materyaller
10 x 4 mL için, REF B4212-40
10 x 10 mL için, REF B4212-50, REF 10284500
12 x 20 mL için, REF B4212-100
Bileşim
Dade® Innovin® Reaktifi: Rekombinan insan doku faktörü ve sentetik fosfolipidler
(tromboplastin), kalsiyum iyonları, bir heparin nötralize edici bileşik, tamponlar ve
stabilizörlerden (bovin serum albümini) oluşan liyofilize reaktif.
Uyarılar ve Önlemler
In vitro diyagnostik kullanım içindir.
Reaktiflerin Hazırlanması
Bir şişe liyofilize Dade® Innovin® Reaktifi, şişe etiketinde belirtilen hacmi kullanarak distile ya
da deiyonize su içinde hazırlayın.
Tam sulandırma sağlamak için, suyu ekledikten hemen sonra şişenin içeriğini iyice karıştırın.
Beklemeye bırakılırsa, Dade® Innovin® Reaktifi, homojen bir solüsyon sağlamak amacıyla
kullanılmadan önce yeniden karıştırılmalıdır. 2 ile 8 °C'de saklayın. Sürekli karıştırılması
gerekmez.
Not: Koruyucu içeren su kullanmayın.
Saklama ve Stabilite
2 ile 8 °C’de saklayın. Bu sıcaklıkta açılmamış reaktif son kullanma tarihine (şişe etiketine
bakınız) kadar kullanılabilir.
Sulandırılmasından sonraki stabilite: 2 ile 8 °C 10 gün (kapalı şişe)
15 ile 25 °C 5 gün (kapalı şişe)
37 °C 24 saat (kapalı şişe)
Farklı koagülasyon analizörlerine ilişkin yerleşik stabilite konusundaki bilgiler Referans
Kılavuzları’nda (Uygulama Föyleri) belirtilmektedir.
Dondurmayın!
Kullanım süresinin dolduğunu gösteren işaretler: Şişe açılırken vakum olmaması; reaktifin
sulandırılmasının güç olması; sonuçların tekrarlanabilir olmaması.
Gerekli olan ancak sağlanmayan materyaller
Kontrol Plazma N ya da Dade® Ci-Trol® Seviye 1
Kontrol Plazma P, Dade® Ci-Trol® Seviye 2 ya da Dade® Ci-Trol® Seviye 3
PT-Multi Kalibratör (Kullanım ayrıntıları için Kullanım Talimatları'na başvurun)
Ortalama normal PT'yi (MNPT)* belirlemek için Standart İnsan Plazması veya taze normal
plazma4
Kan alma içlemi için sodyum sitrat solüsyonu (0,11 mol/L ya da 0,13 mol/L / %3,2 ya da %3,8)
Koruyucu içermeyen distile ya da deiyonize su
Plastik tüpler
Plastik aktarma pipetleri
Hassas ölçüm için 20,0 mL, 10,0 mL, 1,0 mL, 0,50 mL, 0,20 mL ve 0,10 mL’lik pipetler
Koagülasyon analizörü
Prosedür
Manuel Test:
Dade® Innovin® Reaktifi’ni önceden 37 °C’ye ısıtın.
Koagülasyon tüplerine aşağıdaki şekilde pipetle aktarın:
Plazma 0,1 mL -
Kontrol - 0,1 mL
Tüpleri ve örnekleri 1–2 dakika (maks. 5 dakika) 37 °C’de inkübe
edin
Önceden ısıtılmış Dade® Innovin® Reaktifi ilave edin 0,2 mL 0,2 mL
Kronometreyi Dade® Innovin® Reaktifi ilavesiyle aynı anda başlatın. Pıhtı oluşumu süresini
gözlemleyin.
İç Kalite Kontrol
Normal aralık : Dade® Ci-Trol® Seviye 1 ya da Kontrol Plazması N
Patolojik aralık : Dade® Ci-Trol® Seviye 2, Dade® Ci-Trol® Seviye 3 ya da Kontrol Plazması P
Test çalışmasının başlangıcında, her kalibrasyonla birlikte, reaktif şişesi değişimlerinin ardından
ve test yapılan her gün en az sekiz saatte bir iki kalite kontrol materyali seviyesi (normal ve
patolojik aralık) ölçülmelidir.
Kontrol materyali örneklerle aynı şekilde hazırlanmalı ve işleme tabi tutulmalıdır.
Her laboratuvarda kontroller için bir izin verilebilir varyasyon aralığı tespit edilmelidir. Her
reaktif ya da kontrol materyali lotu için yeni kontrol aralıkları belirlenmelidir. Bu aralık
genellikle kontrol ortalaması ± 2,5 standart sapmayı (SS) temel alır.
Kontrol değerleri belirlenen aralığın dışındaysa, koagülasyon analizörünü, kontrolleri ve
ayraçları kontrol ediniz. Hasta sonuçlarını sapmanın nedeni belli olana ve düzeltilene kadar
açıklamayın.
Sonuçlar
Günümüzde, PT sonuçlarını rapor etmek amacıyla çeşitli yöntemler kullanılıyor. Dade®
Innovin® Ayracı için ISI (Uluslararası Duyarlılık Endeksi) değerleri belirli ayraç/cihaz
kombinasyonunda kullanılır; bunlar sonuçların INR (Uluslararası Normalize Oran)4'da rapor
edilmesini sağlar. INR'nin ölçümü ve kullanımı aşağıda açıklanmıştır. Vitamin K antagonistleri
ile yapılan oral antikoagülan tedavinin gözlemi resmi talimatlarda ve literatürde4 tavsiye
edildiği gibi yalnızca INR olarak ifade edilen PT sonuçları ile rapor edilmelidir. Alternatif olarak,
referans aralığı (saniyede) ile birlikte hastanın PT'si (saniyede) sonuçları bildirmek için
kullanılabilir.
Örnek: 18 saniyelik hasta sonucu; referans aralığı 9,9 ile 11,8 saniye.
Prosedürün Sınırlamaları
Rekombinan insan doku faktöründe başka hiçbir pıhtılaşma faktörü bulunmamaktadır. Bu
nedenle, Dade® Innovin® Reaktifi’nin kullanıldığı faktör test eğrileri, diğer reaktiflere kıyasla,
en düşük eksik faktör seviyelerinde daha uzun pıhtılaşma zamanları verebilir. Bu durum faktör
test eğrilerinde düşük faktör seviyeleri için 100 saniyeden daha uzun pıhtılaşma zamanları
ortaya çıkarabilir.
Referans aralığında elde edilen fibrinojen sonuçları doğrudan bildirilebilir. Referans aralığı
dışında kalan sonuçlar bir standart fibrinojen tespit yöntemi, örneğin, Dade® Trombin Ayracı
ya da Multifibren® U ayracı içeren Fibrinojen yöntemi ile doğrulanmalıdır. Türemiş fibrinojen
testi disfibrinojenemili6 ya da uzamış PT'li hastalarda, örneğin oral antikoagülasyon7,8 altında
uygun değildir.
Lipoglikopeptit antibakteriyel ilaçlar (oritavansin veya telavansin gibi) PT’yi temel alan testlerde
interferansa sebep olabilir. İlgili ilaçların Kullanma Talimatlarına bakın.
Ürün performansını optimize etmek ve ürün özelliklerini karşılamak amacıyla Siemens çeşitli
analizörlerde bu reaktiflerin kullanımını onaylamıştır. Kullanıcı tarafından belirlenen
değişiklikler system performansını ve test sonuçlarını etkileyebileceği için Siemens tarafından
desteklenmemektedir. Reaktiflerin Siemens Uygulama Kitapçıklarında veya prospektüslerde
belirtilenler dışındaki analizörlerde kullanımı veya kullanım talimatlarında yapılan
değişikliklerin geçerliliği kullanıcı tarafından onaylanmalıdır.
Bu testin sonucu her zaman hastanın tıbbi geçmişi, klinik durumu ve diğer bulgularla birlikte
yorumlanmalıdır.
Etkileşime Giren Maddeler
Protrombin zamanı testinde elde edilen sonuçları yaygın şekilde uygulanan birçok ilaç
etkileyebilir4. Bu durum özellikle de olağan olmayan ya da beklenmeyen sonuçlar elde
edildiğinde akılda bulundurulmalıdır. Beklenmeyen anormal sonuçların elde edilmesini takiben
anormalliğin kaynağının tespit edilmesi için ilave koagülasyon çalışmaları yapılmalıdır.
Lipemik örneklerin türbiditesi (örneğin parenteral beslenmeyle görülen) türetilmiş fibrinojen
tespitinde doğruluğu engelleyebilir.
Dade® Innovin® Reaktifi mL başına yaklaşık 2,0 üniteye kadar olan fraksiyone olmayan heparin
konsantrasyonlarına duyarlı değildir. İlave yapılmış normal havuzlanmış plazma kullanılarak
heparin duyarlılığı çalışması gerçekleştirilmiştir ve heparine olan duyarlılık PT sonuçlarını
referans aralığının üst sınırını aşan değerlere uzatan örnekteki heparin konsantrasyonu ile
tanımlanır.
Lupus antikoagülant ve benzeri inhibitörler protrombin süresine müdahil olabilir ve sonuçları,
örneğin INR’lerde, antikoagülasyon derecesini tam olarak yansıtmayabilir9.
Hirudin ya da terapötik dozdaki diğer direkt trombin inhibitörleri uzamış protrombin
zamanlarına neden olabilir10,11.
Bazı kan toplama tüpleri Mg2+ iyonları içerebilir; bu durumun rekombinant tromboplastinler ile
interferansa sebep olduğu gösterilmiştir12.
Hidroksietil nişasta (HES) içeren kan plazma maddeleri analiz ile interferans oluşturabilir. Bu
nedenle, bu maddeleri içeren plazma örneklerinin PT türetilmiş fibrinojen yöntemiyle analiz
edilmemesi önerilir.
Beklenen Değerler
Sağlıklı kişilere ilişkin değerler, kullanılan tekniğe bağlı olarak laboratuvardan laboratuvara
farklılık gösterir. Bu nedenle, her laboratuvar kullanılan prosedür ve koagülasyon analizörleri
temelinde kendi referans aralıklarını belirlemelidir.
Görünürde sağlıklı kişiler ile SYSMEX CA-7000 Sistemi'nde yapılan çalışmalarda, aşağıdaki
referans aralıkları tespit edilmiştir:
Terapötik Aralıklar
INR’ye ilişkin terapötik aralıklar oral antikoagülan terapisinin endikasyonuna bağlı olarak
farklılık gösterebilir13.
Varyasyon Katsayısı
Kontrol
Test Seviyesi n Ortalama Test İçi Testler Arası Toplam
Bibliyografya
1. Spicer EK, Horton R, Bloem L, et al. Isolation of cDNA clones coding for human tissue
factor: Primary structure of the protein and cDNA. Proc Natl Acad Sci USA. 1987;
84:5148-52.
2. Quick AJ. Hemorrhagic diseases and thrombosis. Philadelphia: Lea and Febiger; 1966.
3. Bader R, Mannucci PM, Tripodi A, et al. Multicentric evaluation of a new PT reagent based
on recombinant human tissue factor and synthetic phospholipids. Thromb Haemost.
1994;71:292-9.
4. Poller L. The Prothrombin Time. WHO/LAB/98.3. 1998.
5. CLSI. Collection, Transport, and Processing of Blood Specimens for Testing Plasma-Based
Coagulation Assays and Molecular Hemostasis Assays. Approved Guideline - Fifth Edition.
CLSI document H21-A5 [ISBN 1-56238-657-3]. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400,
Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA, 2008.
6. Llamas P, Santos AB, Outeiriño J, et al. Diagnostic utility of comparing fibrinogen Clauss
and prothrombin time derived method. Thromb Res. 2004; 114: 73-4.
7. De Cristofaro R, Landolfi R. Measurement of plasma fibrinogen concentration by the
prothrombintime-derived method: applicability and limitations. Blood Coagul Fibrinolysis.
1998; 9: 251-9.
8. Wagner C, Dati F. Fibrinogen. In: Thomas L, ed. Clinical Laboratory Diagnostics. Frankfurt:
TH-Books Verlagsgesellschaft, 1998:609-12.
9. Tripodi A, Chantarangkul V, Clerici M, et al. Laboratory control of oral anticoagulant
treatment by the INR system in patients with the antiphospholipid syndrome and lupus
anticoagulant. Results of a collaborative study involving nine commercial thromoplastins.
Br J Haematol. 2001;115:672-8.
10. Tobu M, Iqbal O, Messmore HL, et al. Influence of different anticoagulant agents on
fibrinopeptide A generation. Clin Appl Thromb Hemost. 2003;9:273-92.
11. Fenyvesi T, Joerg I, Harenberg J. Influence of Lepirudin, Argatroban, and Melagatran on
prothrombin time and additional effect of oral anticoagulation. Clin Chem.
2002;48:1791-4.
12. Van den Besselaar AM, Hoekstra MM, Witteveen E, et al. Influence of Blood Collection
Systems on the Prothrombin Time and International Sensitivity Index Determined With
Human and Rabbit Thromboplastin Reagents. Am J Clin Pathol. 2007; 127: 724-9.
13. Ansell J, Hirsh J, Hylek E, et al. Pharmacology and management of the vitamin K
antagonists. Chest. 2008; 133:160S-198S.
Simgelerin Tanımı
EC REP Avrupa Birliği Yetkili Temsilcisi <n> sayıda test için yeterlidir
* Ortalama normal PT (MNPT), normal aralığın ortalama değeri olarak tanımlanır. Hasta
örneklerini analiz etmek için kullanılan yöntem kullanılarak ve uygun olduğunda, analiz
için kullanılan koagülasyon analizörü kullanılarak her bir tromboplastin lotu için özel olarak
belirlenmelidir. Uygun ise, MNPT sağlamaya yönelik geçerli laboratuvar kılavuzlarını
kullanın. ABD'deki müşteriler için, uygun CLSI kılavuzu önerilir.
Ci-Trol, Dade, Innovin ve Multifibren, Siemens Healthcare Diagnostics firmasının ticari
markalarıdır.
SYSMEX, SYSMEX CORPORATION firmasının ticari markasıdır.
Dade® Innovin® Reaktifi satın alındığında, satın alan kişiye sınırlı bir lisans verilir. Özellikle
Dade® Innovin® Reaktifini oluşturan ürünleri veya bunların parçalarını ABD ve Kanada’da
üretmek, kullanmak, satışa sunmak veya satmak için olmak üzere, belirli kullanımlar için, ABD
Patent No. 7,084,251 ve Kanada Patent No. 1,341,589 gerekmektedir. Böyle bir lisansın
koşulları için, Siemens Healthcare Diagnostics Inc., Tarrytown, NY 10591, ABD ile irtibat kurun.