ORGANIZACION Y DIVERSIDAD

CELULAR

Profesor Alejandro Roth

Depto. De Biología
Fac. De Ciencias. Universidad de Chile
Teoría Celular
 Robert Hook describe “celdas” en muestra de corcho.
1674- Leeuwenhoek observa protozoos
1683- Leeuwenhoek observa bacterias

1831: Robert Brown identi ca el núcleo

1838: Schleiden & Schwann presentan

300.000 las primeras nociones de teoría Celular

1857: Kolliker describe las Mitocondrias

1882: Koch identi ca la bacteria de TB

225.000 1898: Golgi describe el AP. de Golgi

Publicaciones

1931: MET

150.000 1953: Watson y Crick

1965: SEM

1997: Clon Dolly

75.000
1998: Clon Ratones

2003: Proyecto Genoma

0
1655
-
-
1838
1875
1871
1852
1891
1844
1890
1843
1903
1899
1902
1910
1918
1919
1913
1921
1924
1929
1940
1932
1933
1928
1942
1938
1947
1950
1953
1956
1959
1962
1964
1968
1971
1974
1977
1980
1983
1986
1989
1992
1995
1998
2001
2004
2007
2010
2013
Año
fi
fi
Crion - Own work Based on: (11 April 2016). "A new view of the tree of life". Nature Microbiology 1: 16048. DOI:10.1038/nmicrobiol.2016.48. PMID 27572647.
 The tree includes 92 named bacterial phyla,
26 archaeal phyla and all ve of the
Eukaryotic supergroups. Major lineages are
assigned arbitrary colours and named, with
well-characterized lineage names, in italics.
Lineages lacking an isolated representative
are highlighted with non-italicized names
and red dots. For details on taxon sampling
and tree inference, see Methods. The names
Tenericutes and Thermodesulfobacteria are
bracketed to indicate that these lineages
branch within the Firmicutes and the
Deltaproteobacteria, respectively.
Eukaryotic supergroups are noted, but not
otherwise delineated due to the low
resolution of these lineages. The CPR phyla
are assigned a single colour as they are
composed entirely of organisms without
isolated representatives, and are still in the
process of de nition at lower taxonomic
levels. The complete ribosomal protein tree
is available in rectangular format with full
bootstrap values as Supplementary Fig. 1
and in Newick format in Supplementary
Dataset 2.

Hug, L., Baker, B., Anantharaman, K. et al. A new

view of the tree of life. Nat Microbiol 1, 16048
(2016). https://doi.org/10.1038/nmicrobiol.2016.48
fi
fi
 PODER DE RESOLUCION DEL OJO Y
DE DIFERENTES MICROSCOPIOS

Ojo desnudo

Microscopía óptica convencional. 1mm= 1,000 µm

Resolución: ≈ 250 nm (x,y); 700 nm (z) 1µm= 1,000 nm
1nm= 10 angstrom

Microscopía óptica de superresolución:

≈ 100nm ! 10 nm (x, y)

Microscopía electrónica.
Resolución práctica:
≈ 0.5 nm

Alberts et al, 2008

0.61 x 0.61x550 0.61 x 0.61x0,038nm

N x sen θ
= 1.51x0.93= 240 nm N x sen θ
= 1.00x0.93 = 0.024 nm
λ

 CELULAS EN EL CORCHO (1665)

Microscopio
compuesto

Láminas
delgadas
de corcho

Robert Hooke (1635-1703)

Teoría Celular
− Todas las formas de vida están compuestas de una o más células
− Las células provienen solamente de células preexistentes.
− La célula es la forma de vida más pequeña. (es la unidad de la vida)

Actualizada al s.XXI
− El ujo de Energía ocurre dentro de las célula
− La información genética (herencia) es pasada de célula a célula
− Todas las células tienen la misma base química
fl

Compartimentos celulares
• Citoplasma vs organelos
• Núcleo vs Citoplasma

Figure 1-30 Molecular Biology of the Cell, Fifth Edition (© Garland Science 2008)
 FUNDADORES DE LA BIOLOGIA CELULAR MODERNA
UTILIZANDO LA MICROSCOPIA ELECTRONICA Y EL
FRACCIONAMIENTO SUBCELULAR

Keith Porter Albert Claude George Palade Christian De Duve

(1912-1997). Canadá (1899-1983). (1912-2008 (1917-2013)
Bélgic Rumania. Bélgic
Premio Nóbel 1974 Premio Nóbel 1974 Premio Nóbel 1974
a

 Aportes a LA BIOLOGIA CELULAR MODERNA usando más

que LA MICROSCOPIA ELECTRONICA Y EL
FRACCIONAMIENTO SUBCELULAR

Eleanor Keith Porter Barbara McClinton Albert Claude Rita Levy-Montacinni

Carothers (1912-1997). (1882-1957). US (1899-1983). (1909-2002). Italia-US
(1882-1957). Canadá Premio Nóbe Bélgic Premio Nóbel 1986
USA 1983 Premio Nóbel 1974

George Palade Christian De Duve June Almeid Lynn Maargulis

(1912-2008 (1917-2013) (1930-2007) (1938-2011). Italia-US
Rumania. Bélgic Descubrio los Premio Nóbel 1986
Premio Nóbel 1974 Premio Nóbel 1974 Coronavirus
a

 MEGACARIOCITO QUE MUESTRA LA ESTRUCTURA

FINA DE UNA CELULA EUCARIÓTICA, FIJADA, SECCIONADA Y
TEÑIDA

Citoplasma
-Fijación con glutaraldehído
-Post fijación tetróxido de osmio
-Embebido en resina Epoxy
-Sección ultrafina: 50-60 nm
-Tinción con metales de alto
número atómico

Núcleo

Rhodin, 1963



 PULSO Y CAZA RADIOACTIVOS
f the modern era of
ularly great on the
ere found to contain
organelles that soon
es of secretion and
contributed to this
must be singled out
e and Christian de
ection between the
ndividual cell func-
5). This connection
ell fractionation and
c activities associ-
e and de Duve used
to prove the exis-
y distinct organelles
ntial functions. This
ual and experimen-
ery advance in cell
ased.
ctionation. It was at
e traffic was devel-
Palade and the im-
he spawned either
st important experi-
the functional eluci-
t secretory proteins
eticulum (ER), pass
n are packaged into
ma membrane. The
membrane became
ar biology’s DNA to
ways true!).
s best illustrated by
as, among the most
Palade and James
ly developed tech-
hich newly synthe-
ed by a pulse of ra-
ous chase periods,
with a photographic Figure 1. Exocytic Transport in Pancreatic Acinar Cells
fractionation, these
Pancreatic slices were briefly pulsed with 3H leucine, then the label
e initial appearance was chased for 0 (A), 7 (B), and 80 (C) min before fixation and
eir transient associ- preparation for EM autoradiography. The autoradiographic grains
mplex, their concen- representing newly synthesized secretory proteins were located first
es, and their secre- over the ER (A), then over the Golgi region (B), and finally over
he cell by granule the secretory/zymogen granules (C). Data are from Jamieson and
gure 1). There have Palade (1967; 1971). All micrographs are X6,400.
scenario over the
main the secretory
Fluidity, Topology, and Sorting. Concomitant with the
 FIGURE 1 Distribution of radioautographic grains
over stimulated exocrine cells at the end of a 3 min
pulse-labeling with leucine-3H. The majority of the grains
mark elements of the RER. G, elements of the Golgi
complex. )< 1~,000.

JAMIESON and PALADE (JCB. 1971; 50: 135-155

0
)

 Figure1 Distribution of radioautographic

grains over a stimulated cell after 7 min chase
incubation. Several of the grains overlie small
vesicles at the periphery of the Golgi region (Gv) and
the outermost empty cisternae of the Golgi stacks
(Gc). Saccules of the concave face of the stack
contain electron-opaque material (arrows) similar in
density to that seen in the small storage granules (sg).
Note the multivesicular body which contains dense
vesicles(asterisk), presumedly some autophagic
vacuole containing cell debris, and possibly
intracisternal granules. X 15,000.

JAMIESON and PALADE (JCB. 1971; 50: 135-155

1
)

 Figure1 Radioautogram of the apical portion of a

stimulated exocrine cell after 17 min chase
incubation. At this time the silver grains are heavily
concentrated over the parallel cisternae of the Golgi
complex (Gc) containing electron-opaque material.
The more peripherally located small vesicles (Gv)are
less highly labeled at this time. Some label has
already become associated with small secretory
granules (sg).L, acinar lumen;/d, intercalated duct
cell. X 15,000.

JAMIESON and PALADE (JCB. 1971; 50: 135-155

2
)

 Figure 1 Radioautogram of a stimulated cell

after 37 min chase incubation. Accumulation of
silver grains over small secretory granules (sg) is
evident. Z, mature zymogen granule; ly, lysosome or
pre- sumed autophagic vacuole. )< 14,000.
JAMIESON and PALADE (JCB. 1971; 50: 135-155)
3

 I 2 3 4 5
Hours incubotion

FIGURE 9 Discharge of amylase to the incubation medium in response to O.01 mM earbamyleholine or 10

units/ml pancreozymin. Controls consisted of slices incubated without sceretogogues at 37°C or at 0°C
with or without 0.01 m ~ carbamyleholine.

TABLE I
Distribution of Radioautographic Grains over Cell Components in Prestimulated Pancreatic Slices Incubated
Postpulse with Carbamylcholine
% of radioautographic grains

Chase incubation

Subcellular component 3 min (pulse) -]-7 min +17 mln +37 min + 5 7 rain

Rough endoplasmic reticulum 90.4 54.2 44.7 37.3 25.8

(89.1) (49.5) (38.4) (24.5) (16.2)
Periphery of the Golgi region 8.7 35.6 28.5 27.0 18.3
Storage granules 0.9 10.2 26.8 35.7 55.8

No. of grains counted 1082 1133 1626 914 480

Sets of pancreatic slices were stimulated for 3 h r before labeling by incubation in a m e d i u m containing
0.01 m u carbamylcholine a n d 0.04 m ~ L-leucine-lH. T h e y were then washed with leucine-free m e d i u m
and kept for 10 rain at 4°C in a carbamylcholine-free m e d i u m containing 300 # C i / m l carrier-free L-
leucine-4,5-3H (58 Ci/mmole). F o r pulse labeling the slices were b r o u g h t up to 37°C for 3 min; at the
end of the pulse one set was fixed and the others were further incubated for the times shown u n d e r re-
sumed stimulation in a chase m e d i u m containing 4.0 mM L-leucine-lH and 0.01 mM earbamylcholine.
R a d i o a u t o g r a p h i c grains appearing over mitochondria and nuclei are not included as they r e p r e s e n t
a variable and small proportion of the total cellular label (~-O-4%). F o r reference, the per cent distribu-
tion of grains over the R E R in unstimulated slices is shown in parentheses. (Data taken from our previ-
ous studies [2]).

T h e results are given in T a b l e I a n d illustrated 10). D u r i n g a subsequent 7 man chase period a

in Figs. 10-14. A t the end of the pulse, the large large proportion ( ~ 3 6 % ) of the labeled proteins
majority (~-~90%) of the grains m a r k e d labeled migrated to the periphery of the Golgi region
proteins associated with elements of the R E R (Fig. where it was associated primarily with the s m a l l

144
FIGURE 1 Radioautogram of a stimulated cell after 57
T H E JOURNAL OF CELL BIOLOGy • VOLUME 50, 1971
min chase incubation. Label is con ned mainly to small
secretory granules at the cell apex although a few grains
persist over secretory granules and other vesicular elements in
the center of the Golgi complex. L, acinar lumen. X 18~000
FIGURE 14 Radioautogram of a stimulated cell after 57 min chase incubation. Label is confined mainly
to small secretory granules at the cell apex although a few grains persist over secretory granules and other
vesicular elements in the center of the Golgi complex. L, acinar lumen. X 18~000.

150 THE JOURNAL OF CELL BIOLOGY • VOLUME 50, 1971

JAMIESON and PALADE (JCB. 1971; 50: 135-155
4
fi
)

 VER:
https://www.youtube.com/watch?v=Vs360UarP1U
¿Cómo exploramos
las células con una
centrífuga?

Christian DeDuve : Exploring

cells with a centrifuge;

Conceptos:
• Las enzimas residen en
compartimentos.

•Estos compartimentos pueden

ser purificados.

•Entre los diferentes

compartimentos existe tráfico de
23
proteínas y membranas

 Medir actividad enzimática

de cada fracción

Figure 8-9 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)

• Gel chromatography on G-75 Sephadex of subcellular fractions from kidney cortex of rats in nonpretreated groups (A and
B) and CdCl2-pretreated groups (C and D, 0.5, 1, 1, 2, and 2 mg Cd/kg as CdCl2 subcutaneously) 1hr (groups A and C)
and 4 hr (groups B and D) after a challenge dose of CdMT (0.4 mg Cd/kg as CdMT, sc). Column dimensions were 26 x
364 mm. Elution was carried out with 0.01 M Tris-HCl 0.05 M NaCl buffer, pH 7.5, containing 0.1% DOC and performed at
4°C. A portion of each fraction (3.5 ml) was assayed for absorbance at 250 nm (- - - -) and radioactivity of 109Cd ( ---- ). Ve/
Vo of the peaks No. 1, 2, and 3 are 0. 80-1. 20, 1. 20-1.40, and 1. 60-2.10, respectively

25
Histología
“La histología es un arte visual que, irónicamente está basada en la observación de
estructuras que no pueden ser observadas.”
Visual Histology Atlas e-Book David T. Moran | J. Carter Rowley
e-Book is made available to students of histology free of charge, compliments of:
http://www.VisualHistology.com

- Por lo tanto… requerimos suplementos a nuestra visión. BM

CT
1. Lupa binocular (tb. microscopio de disección):
• Visión tridimensional (ergo, disección)
C
• Aumento limitado, resolución también limitada.
2. Microscopio óptico N
• Poder de resolución menor que la membrana
celular (80 Å vs 2000 Å) N
• Capacidad de penetración en el tejido
3. Microscopio electrónico
• Alta resolución (2,5 Å)
• Baja capacidad de penetración en el tejido CT
• Preparaciones complicadas.” n

Algunas tinciones
Izuchukwu et al. BMC Infectious Diseases 2003
Tinciones básicas – hematoxilina, 3:20 doi:10.1186/1471-2334-3-20
azul de Toluidina, azul de Metileno
- Tiñen estructuras basófilas como
el núcleo y ribosomas.

Tinciones ácidas – orange G,

Eosina, Fusina ácida, tiñen los
componentes acidófilos de los
tejidos como son las mitocondrias,
gránulos de secreción, citoplasma y
otros.

Contratición – cuando se usa una

tinción para permitir el
reconocimiento de núcleo o
citoplasma.

Tinciones Metalicas dyes – plata y

oro hacen tinciones en el tejido
nervioso.
Laboratorio
https:// Dr. Christian González Billault
ightofwhimsy.wordpress.com/tag/brown/
fl

Reconocemos 4 tipos de tejidos (y

varios subtipos):
Tejido Epitelial

Electron micrograph of a longitudinal

section through the epithelium lining the
human nasal cavity. B, basal body; C,
cilium; D, degenerating cell; G, Golgi
apparatus; M, mitochondrion; N, nucleus;
NC, nasal cavity. 11,500 X
Inset: Cross section through motile cilium
from the same epithelium. Arrow, dynein
arm; arrowhead, radial spoke. 131,000 X

Visual Histology Atlas e-Book David

T. Moran | J. Carter Rowley
www.VisualHistology.com



Tejidos Epiteliales

30
 Tejido Epitelial Columnar
Simple

Células
largas y
angostas. de
una sola
célula de
espesor

31
 ORGANIZACIÓN EN LOS TUBULOS DEL
NEFRON COMO EJEMPLO DE POLARIDAD Y
DIVERSIDAD CELULAR

Ribete en cepill
Núcleos basale Túbulo
Mitocondria proximal
redondeada

Microvellosidade Túbulo
Núcleos periférico distal
Mitocondrias alargadas

Rhodin, 1963

 TEJIDOS CONECTIVO: Unión

• Unen otras estructuras corporales y les dan
sostén.

• Cubre casi todos los órganos, provee

amortiguamiento.

• No es celular
• Es clasificado por tejidos específicos mas que
por tipos de células.
• Compuesto de fibras rodeadas por una
matriz
• En ocasiones esta matriz puede ser fluida
como la sangre o el plasma.
• O elástica como el cartílago.
• Es originado en el mesénquima del embrión

Tipos de Tejido Muscular

ESPECIALIZADOS EN LA CONTRACCION
 Músculo esqueletal
• Fibras cilíndricas alargadas cuyo movimiento es
voluntario. Se pueden apreciar estrías al igual que
muchos núcleos periferales en cada fibra.
• Localización: unido al esqueleto.

Figure 23-47b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)

Contracción Muscular
 Tejido Nervioso: controla músculos,
glándulas y otros órganos
• Las neuronas transmiten impulsos. Las células gliales
sostienen y nutren a las neuronas.
 MICROFOTOGRAFIA ELECTRONICA D
TRANSMISION DE LA BACTERIA ESCHERICHIA COLI

Pared celular

Plasmalema

Ribosomas

Nucleoide:
DNA cromosómico
y plasmidial
No hay membrana
internas

Alberts et al., 2002

 MAGNETOSOMAS IN LA BACTERIA
MAGNETOSPIRILLUM magneticum

Orientación po
gravedad Crio Tomografía (Microscopía
Electrónica) que muestra una
hilera de magnetosomas: cristale
de Fe3O4 o Fe3S4

Diagrama de magnetosoma
asociados con el citoesqueleto

Murat et al., 2013

r

 MICROFOTOGRAFIAS ELECTRONICAS DE
ORGANELOS INVOLUCRADOS EN LA FOTOSINTESIS

Membranas fotosintéticas (Th

continuas con la membrana
celular (CM, flecha) e
Rhodopseudomonas. N, núcleo

Idem. Reconstrucción

Tilacoides (T) probablament

sin conexión con la membran
externa en una bacteria púrpura
CW, pared celular. N, núcleo
Murat et al., 2013
n

 CLOROSOMA (A), CARBOXISOMA (B) Y

VESÍCULAS DE GAS (C) EN BACTERIAS

XB

Organelos periféricos Organelo encargado de la Cianobacteria co

para la captura de baja fijación de carbono e vesículas cubierta
intensidades de luz, 2.00 Cianobacterias, tienen una de proteínas y llena
mts de profundidad en e cubierta de proteínas y están de gas que
oceáno Pacífico. Contiene cargados de enzimas suministran flotabilidad
bacterioclorofila
Chlorobium tepidum
Murat et al., 2013

 NANOTUBOS INTERCELULARES ENTRE

BACTERIAS (B. subtilIs)

Suministran comunicació
entre bacterias de la mism
o distinta especie. Por ellos
transitan moléculas
fluorescentes, factore
de resistencia a antibióticos e
incluso plasmidios

Dubey and Ben-Yehuda, 2011

 COMPLEJIDAD DE LOS PROTOZOOS: DIAGRAMA DE U

PARAMECIO (A) Y MET DE SU SUPERFICIE (B), QUE
MUESTRAN UN TRICOCISTO Y LA EMERGENCIA DE UN CILIO

(Esófago)

A B
MICROTOTOGRAFIA ELECTRONICA DE BARRIDO DE UN
PARAMECIO QUE MUESTRA LA COMPLEJIDAD DE SU
SUPERFICIE CILIADA
 MICROFOTOGRAFIA ELECTRONICA DE
TRANSMISION QUE MUESTRA LA ESTRUCTURA DE
LA AMEBA ACANTHAMOEBA CASTELLANII

1) Clara distinción de dominio

citoplasmáticos: ecto y endoplasm

2)Endoplasma con numeroso

organelos: complejos de Golgi (G),
vacuolas digestivas (DV) , vesícul
de expulsión de agua (WEV,
osmoregulación),
mitocondrias, núcleo y nucleólo (n)

Bowers and Korn, 1968

 METs QUE MUESTRAN LA COMPLEJA ORGANIZACIÓN DEL

ENDOPLASMA DE LA AMEBA: COMPLEJO DE LA VACUOLA
CONTRACTIL

Vacuola contráctil (WEB) y Conexiones entre la vacuola contrácti

espongioma (sistema de túbulos y el espongioma
(T) y vesículas (V) que
acumulan y transportan agua)

Bowers and Korn, 1968

 MEB DE UN PROTOZOO CILIADO (Didinium)

DEPREDADOR DE PARAMECIO

Longitud ≈ 100 μm

Pr: probosci
Pe: pectinela
de cilio
Cm: boca cerrad
Sm, evaginacione
del plasmalema

Kessel y Shih, 1976

s