5장 품질보증과교정 방법 -화학과 202217210 고수민

5-1. 품질 보증의 기본
- 측정 데이터 : 크로마토그램의 피크 면적이나 뷰렛의 부피 등과 같은 개별 측정값
- 처리 데이터 : 측정 데이터에 교정 절차를 적용하여 얻은 농도나 양
- 결과 : 처리 데이터에 통계 기법을 적용한 뒤 최종적으로 보고하는 평균, 표준편차,
신뢰구간 등

- 품질보증
: 품질 보증을 하는 중요한 목표는 결과 값이 고객의 요구를 충족시키는지를 확실히
하는 것이다. 데이터와 결과에 대한 명확하고 정밀한 사용목적을 적는 것은 품질 보
증의 중요한 절차이며, 그 데이터와 결과의 오용을 막는 데 도움을 준다.

- 명세서
: 사용 목적이 정해지면 숫자를 어떻게 적절히 사용할지, 분석 절차에서 어떤 주의가
필요한지를 나타낸다. 시료 채취 요건, 정확도와 정밀도. 틀린 결과의 비율, 선택성,
감도 등의 내용이 들어있어야 한다.

가양성 ; 실제 농도는 그 허용치 미만이지만 농도가 허용치를 넘는 것

가음성 : 실제 농도가 그 허용치를 초과할 때, 농도가 허용치 미만인 것

선택성 : 시료 내의 다른 화학종으로부터 분석 물질을 식별해 낼 수 있는 능력

감도 : 분석 물질의 농도 변화에 대해 믿을 수 있고, 측정 가능하게 감응하는 능력
신호 변화
감도  교정 곡선의 기울기 
분석 물질 농도 변화

+ 바탕
방법 바탕 : 분석 물질만 제외한 모든 성분이 들어 있는 시료로서, 모든 분석 절차를
거친다. 시료의 분석 물질 농도를 계산하기 전에 실제 시료의 감응으로부터 방법 바
탕의 감응을 제한다.
시약바탕 : 방법 바탕과 유사하나, 모든 시료 준비 절차를 따르지 않음. 분석 신호에
미치는 바탕의 영향을 가장 완벽하게 추정할 수 있는 방법이다.
현장 바탕 : 방법 바탕과 유사하나, 시료 채취 장소와 관련이 있음.

소량 첨가 : 시료에 대한 감응이 교정 곡선에서 예상하는 것과 같은지를 시험하기 위

해서 시료에 첨가하는, 알고 있는 양의 분석 물질을 말함.
관리 연속성 : 시료의 수집, 분석, 보관에 이르기까지의 추적이다.
오염 : 앞 단계의 용액, 더러운 유리기구, 시약 또는 실험실이나 현장 환경에서의 불
순물 등으로부터 시료나 표준 물질에 분석 물질이 부주의하게 첨가되는 것
손실 : 불완전한 이동, 보관 중의 파괴, 유리 용기에서의 증발, 침전 또는 흡착에 의
해 시료나 표준 물질로부터 분석 물질이 제거된 것

드리프트 : 신호가 느리게 변화하는 현상

교정 점검 : 농도를 알고 있는 분석 물질이 든 용액을 분석
성능 시험 시료 : 교정 점검용 시료의 농도를 알고 있는 분석자에 의해 생기는 편견
을 제거하기 위한 품질 관리 시료
표준 작업 절차 : 품질 보증의 방패 역할을 함
관리의 연속성 : 시료 수집, 보관에 이르기까지의 추적

-평가
1. 명시한 한계 안에서 분석 절차가 작동되는지를 보여 주는 데이터를 수집
2. 최종 결과가 사용 목적에 부합하는지를 증명하는 과정

프로토콜 : 정보 기록 방법을 포함하여 서류 작성 방법과 기록 대상의 방향을 제시

크로마토그래피 : 물질이 컬럼과 서로 다른 상호 작용을 통해 서로 분리되는 하나의
분리 방법
크로마토그램 : 크로마토그래피 분리 시 시간에 대한 검출기 신호 그래프
바탕선 분리 : 다음 화합물이 검출기에 도달하기 전에 그 검출기 신호가 바탕 선에
내려와야 한다는 것을 뜻함

5-2. 방법 검증(method validation)

: 분석방법이 그 의도된 목적에 부합하는 지 증명하는 과정
: 제약화학에서는 방법선택성, 직선성, 정확도, 정밀도, 범위, 검출 한계, 정량한계, 안
정성 등의 연구에 대한 방법 검증 요건을 제출할 것을 요구함

- 선택성(selectivity)
: 해당 분석 방법이 시료 속의 모든 것들로부터 분석 물질을 구별 해낼 수 있는 정도
: 선택성이 절대적이라 방해요인이 없다면, 그 방법은 고유한 것임
(ex)고유한 분석 방법들
1. 크로마토그래피(chromatography)
2. 크로마토그램(chromatogram)
3. 바탕선 분리(baseline separation)

- 직선성(linearity)
: 교정 곡선이 얼마나 한 직선을 잘 따르는지에 대한 척도

<직선성 검사 방법>
1. 최소 제곱 직선법으로 교정곡선을 그림
2. 직선위에 데이터가 분산돼 있는지 눈으로 검사(모든 표준 물질이 직선 위아래에
무작위로 산재된 상태로 직선에 가까워야함)
*잔차 그림(residual plot)
: 교정의 사용된 데이터와 최소 제곱 직선간의 차이를 강조
             
*상관 계수(correlation coefficient, R)의 제곱,  
: 흔히 직선성의 척도 상관 계수의 제곱으로 나타냄


    
  


     






- 정확도(accuracy)
: 참값에 가까운 정도
<정확도 표시 방법>
1. 미지 시료와 매트릭스가 유사한 표준 기준 물질(standard reference material)을
분석
->사용한 분석 방법의 정밀도(우연 불확정도) 내에서 기준 물질에 들어 있는 분석 물
질의 공인된 값을 알아낼 수 있어야 함
2. 두 가지 이상의 다른 방법으로 결과를 비교
->예상되는 정밀도 내에서 일치해야 함
3. 분석 물질을 소량 첨가한 바탕 시료를 분석
->미지 시료와 매트릭스가 같아야 함 보통은 예상되는 시료 농도의 0.5~1.5배 범위에
서 세 시료를 세 개씩 만든다. 불순물에 대해서는 예상 농도의 0.l~2 wt% 범위에서
세 시료를 만듦
4. 미지 시료와 매트릭스를 같게 만들지 못 할 경우에는 미지시료에 분석물질의 표준
물질 첨가(standard addition)법을 사용
->첨가한 분석 물질의 아는 양을 구하면 교정은 정확함

- 정밀도(precision)
: 반복성과 재현성
1. 기기정밀도: 한 시료의 동일한 양을 한 기기에 반복적으로 주입했을떄 관찰되는
재현성
2. 분석 내 정밀도: 한 사람이 하루 동안에 한 기기를 사용하여 균일한 물질을 분석
함으로서 평가
3. 중간 정밀도(=견고성): 같은 실험실에서 서로다른 사람이 다른날 다른기기를 사용
해 분석 할떄 관찰되는 변화
4. 실험실 간 정밀도: 동일 시료를 다른 사람이 다른 실험실에서 분석할 때 관찰되는
재현성

- 범위(range)
: 직선성, 정확도, 정밀도가 모두 수용될 수 있는 농도 구간
:동적 범위의 한 부분은 종종 낮은 농도 영역으로서 선형이라고 간주될만큼 충분히
직선성을 알 수있으므로, 농축된 시료는 분석 시 선형 구간에 들어올 수 있게 묽힐
필요가 있음

- 검출 한계(detection limit)
: 바탕과 크게다르다고 구분되는 분석 물질의 최소량
*정량 하한(lower limit of quantitation)

정량하한  

1. 기기 검출한계
2. 방법 검출 한계
3. 보고 한계

- 안정성(robustness)
: 분석방법이 실험 파라미터의 작은 변화에 영향을 받지 않는 능력

5-3 표준물질첨가 : 미지 시료(A)에 아는 양의 분석 물질(B)을 첨가시킨 다음, 증가된 신

호로부터 원래 미지 시료(A) 중에 분석 물질(a)이 얼마나 함유되어 있는가를 측정하는 방법
- 사용 가능 조건 : 분석 물질의 농도에 대한 감응이 직선성을 가져야 한다.
적정에서처럼 표준 물질을 부피가 아닌 질량을 기준으로 첨가하는 경우
높은 정밀도를 얻는다.
-표준물질 첨가식

초기 용액에서의 분석 물질의 농도 초기 용액의 신호   

  =  
최종 용액에서의 표준 물질과 분석 물질의 농도 합 최종 용액의 신호        

- 단일 용액에 대한표준 물질 첨가법의 그래프 처리 방법

- 단일 용액에 대한 연속적 표준 물질 첨가법 :

x 절편은 [X]i이다
 - x절편의 표준 불 정확도 :

- 신뢰 구간 : ±  

- 동일 부피의 다수 용액에 대한 그래프 처리 방법 (분석 과정에서 약간의 용액을 소모

하게 될 때 이용)
① 동일한 부피의 미지시료 n개 준비
② 표준 용액의 부피를 증가시키며 첨가
③ 모든 플라스크를 같은 부피로 묽힘
=> 분석 신호 IX+S 측정값

- x절편의 값 : [X]f - 그래프 :

+ 매트릭스 (matrix) : 분석 물질을 제외한 미지 시료 중에 함유되어 있는 모든 화학종

+ 매트릭스 효과 (matrix effect) : 시료 중에 존재하는 분석 물질이 아닌 다른 어떤 물질에
의해서 일으키는 분석 감도 교정 곡선의 기울기의 변화.
- 미지 시료에 진한 농도의 표준 용액을 첨가하여 매트릭스의 농도는 변화 감소
(표준물질첨가)

5-4. 내부 표준 물질(internal standard)

1. 내부표준물질
: 분석 물질과 다른 화합물, 미지시료에 첨가하는 알고있는 양의 화합물
: 분석 물질의 신호와 내부 표준 물질의 신호를 비교하여 분석물질이 얼마나 들어 있
는지 알아냄

<조건>
1. 화학적으로 안정해야함
2. 미지시료의 성분들과 반응 하지 않아야 함

<장점>
1. 분석할 시료의 양이나 기기의 감응이 매 측정마다 변하는 상황에서 유용
-> 분석물질과 내부 표준 물질 사이에 대한 검출기의 상대적 반응은 대체로 일정함.
따라서 내부 표준 물질의 농도를 알면, 분석물질의 올바른 농도를 유도할 수 있음
2. 시료의 제조 단계에서 시료의 손실이 일어날 수 있을 때 유용
-> 내부 표준 물질이 분석물질과 화학적으로 유사하면, 매트릭스의 구조적인 영향이
내부표준물질의 신호에도 유사한 영향을 줌
(화학적으로 유사하여 동일한 손실과 매트릭스 효과를 받게 되지만, 질량분석기에서
분석물질과 구별 가능)

*감응인자(response factor, F)
분석물질 신호의 면적 분석 물질 신호의 면적
  
분석 물질의 농도 표준 물질의 농도
 
   
   
    섞은 후의 분석 물질의 농도
    섞은 후의 표준 물질의 농도

2. 내부 표준 물질을 위한 다중점 교정 곡선
-실험 오차가 없다고 하면 교정 곡선 만으로도 정확한 감응 인자를 찾을 수 있음
-그러나 실험 오차는 항상 발생하므로, 다중점 교정 곡선을 선호함
분석 물질 신호 분석 물질의 농도
  
표준 물질 신호 표준 물질의 농도
  
  
  
-각 점은 감응 인자 F인 직선 상에 있음
-감응인자를 찾는데에 있어 한점을 사용하는 것 보다 다중점을 사용하는 내부 표준법
이 정확도가 높음