io lo g ía y

ed F i s B io
a

lo g
n

CANALES
So c ie d a d P e r u a

ía M
olecu la r
IÓNICOS
-De Potasio ( K+)
-De sodio ( Na*)
-De calcio (Ca++)
-Cationes
Prof: P. núñez H. inespecíficos
-De Cloro (cl-)
Lima 2013
 Membrana, Canales e Iones

BCP-F3.7
 Unifying Themes in Ion Channel Structure

Polytopic Membrane Proteins

Oligomeric Arrangement
With Intrinsic Symmetry

Pore Size Correlates with the

Number of Subunits

•Voltage-Dependent •Ligand-Gated •Connexins

(Na+, K+, Ca++) (Ach, Gly, GABA, (Gap Junctions)
•Glutamate Receptors 5-HT)
•Mechanosensitive
 Voltage-Dependent Channels

I II III IV

Ca Channels
n=1
Na Channels

K Channels
n=4 Ca-activated K Channels
Cyclic Nuc. Channels

Inward Rectifiers
n=4
G-prot-activated Channels
Ligand-Gated Channels

A c e ty lc h o lin e R e c e p to r
G A B A R e c e p to r
n=5 G ly c in e R e c e p to r
S e ro to n in R e c e p to r

G lu ta m a te R e c e p to r
(A M PA )
(K a in a te )
n = (4 ) (N M D A )
Other Channel Families

C h lo rid e C h a n n e ls

n=2 C lC -0 C l C h a n n e l

G a p J u n c t io n s

n=6 C o n n e x in

A B C S u p e r f a m ily

n=? C FT R C l C hanne

N BD 1 R N BD 2

N BD 1
Structure-Function Relations in a Voltage-Dependent Channel

Voltage Selectivity &

Sensing Permeation Slow
Inactivation

P loop

Gating

Fast
Selective Inactivation
Oligomerization
 +
Diversity in K channels
Structural Class

6T M 4TM 6TM

Vol tag e Ga te d Ea g
Family

KQT Slo CNG

Ca
++ cNTP
Ca ++

KVLQ T nKQT2
Subfamily

eag erg elk v CNG oC NG

Sh aker Shab Shaw Sha l Slo nSlo Kir 1 Kir2 Kir3 Kir4 Kir5 nIRK
(Kv1) (Kv2) (Kv3) (Kv4 )
 Tipos de canales

1. Pueden ser selectivos al tipo de ión: canales de K+, Na+, de Ca2+, ...

2. Pueden ser activos o pasivos

3. Los activos difieren en el mecanismo de activación:
Un canal se abre o cierra siguiendo alteraciones
DA-Cap1 de diverso tipo que sufre su microentorno.
 Canal pasivo

KSJ
 despolarización

Canal de
Na+
activado por
voltaje

repolarización

KJS-F9.9
Ionotropico vs metabotropico
 Canales activados
por
neurotransmisores

Activación directa
Activación indirecta

KSJ-F13.1
 Canal activado por acetilcolina (Ach)

KSJ-F11.13
Crystal Structure of the Streptomyces K+ Channel
Doyle et al. 1998
P-loop

TM1

TM2

•KcsA is a homotetramer
•Each subunit contains two TM segments
•The selectivity filter is formed by an extended
structure positioned by a short tilted helix
Understanding Permeation and Selectivity

+ 1 +
W

_ _

•K+ Ions are stabilized by backbone Carbonyls

•It is the matching of dehydration energies what determines selectivity
•High throughput is achieved by electrostatic repulsion between sites 1 and 2
Los canales iónicos son proteínas de membrana de permeabilidad
selectiva por ciertos iones, multiméricas, con varios dominios
transmembranales, regulados por voltaje, AMPc, neurotransmisores,
ligandos, etc. representa un tipo de transporte pasivo de membrana
• Los canales iónicos realiza transporte pasivo, de acuerdo a la gradiente de
concentración sin consumo de energía,
• Pequeños poros altamente selectivos, permite el movimiento de agua e
iones.
• La velocidad de transporte es de 10 millones de iones por seg.
• Las funciones de los canales :
• --transporte de agua e iones.
• --regulación de potencial a través de la membrana.
• --transducción
• Participa : en todas las células como la frecuencia cardiaca, contracción
muscular, secreción de hormonas, visión, olfación, etc.
• Son proteínas integrales de membrana de 2 -24 dominios.
• Producto de muchos genes, los catiónicos pertenece a la familia de S5/S6,
canales de seis dominios transmembranales con compuerta de voltaje
como el Na+. Ca++, K+.
• Hay canales con compuerta por ligandos intracelulares (GMPc de la
retina.).
• Los canales de Na+,K+ potencial de acción
• Los canales de Ca++secreción, señalización, contracción muscular y
expresión genética.
Mecanismo de compuerta: presenta dos estados: cerrado<< abierto.
Algunos canales tienen tres estados: cerrado<< abierto y un estado de
inactividad.
CANALES DE SODIO

• Los canales de Na+ regulados por voltaje son proteínas de

señalización críticas responsable de la fase de ascenso inicial del
potencial de acción (PA) de tejidos excitables músculos y nervios.
• Determinan la conducción de la excitación.
• Son objeto de fármacos como litio, antiarrítmicos tipo 1.
• Los defectos genéticos por aumento o perdida. (Brugada)
• Estos canales fueron los primeros que se clonaron.(patch-clamp)
• Es el canal más reciente en la naturaleza ( se estima 5 mil millones
de años ).
• Se encuentra en todos los tejidos excitables. Más concentrados en
los axones y músculos. El miocardio expresa 100,000 canales Na+
20,000canales de tipo L de Ca++ y menos canales de K+.
• Los canales de sodio esta formado por cuatro subunidades α.
• La subunidad α es una glucoproteína de 2.000 aminoácidos.
• Cada subunidad (I-IV) unidos por enlaces citoplasmáticos.
´80s - ´90s La estructura de los canales se infirió por su secuencia

Modelo de canal de Na+

4 subunidades

6 segmentos transmembrana

CANALES: Activables por ligando (ej. Rec. de Acetil Colina)

Activables por voltaje (ej., canales de Na, K, etc)
1990s – estructura
cristalina
del AChR (N. Unwin)
Modelo 3D de un canal de K
basado en coordenadas de
cristalografía

(McKinnon, 1998)
Canales de Sodio
Cada subunidad tiene seis segmentos transmembrana (S1 a S6) que
se pliegan y dejan un poro central y hay semejanza con los canales
de calcio. Además cuenta el segmento S4 tachonado por con una
hilera de residuos básicos que esta en el interior del campo de la
membrana y se mueve hacia fuera en respuesta a la
despolarización para iniciar una serie de redistribuciones
conformacionales que culmina con la apertura del canal.
La permeación es la capacidad del poro, lo cual es papel del bucle S5-
S6. (Bucle P), que da la selectividad y especificidad para el Na+.
y la asimetría es fundamental para la permeación.
Hodgkin y Huxley planetó que los canales de Na+ pasan por varios
estados conformacionales en el proceso de apertura (activación) y
cierre (inactivación) que se deberían a la compuerta externa “m” la
activación y la compuerta “b” interna a la inactivación teniendo una
dependencia del voltaje intrínseca y funcionan de manera
independiente
Los cuatro segmentos S4 cargados positivamente actúan como aparato
detector de voltaje y constituye el poro regulador.
Canal de sodio (continuación)

• La contribución de cada segmento S4 es asimétrica y hay cooperatividad.

• Los poros pueden estar en: abiertos, cerrados ó inactivos.
• Algunos bloqueantes de los canales de Na+,como la lidocaína pueden
entrar en el canal desde el medio intracelular solo cuando el poro interno
esta abierto
• La activación esta asociada al dominio IV S4, Parece que la compuerta esta
en la cara interna de la vía de permeación. Es posible qu los movimientos
de S4 distorsionan los conectores S4-S5 lo que posteriormente produce la
apertura cierre del poro citoplasmático que forma los segmentos S6 que
actúa como compuerta física de activación.
• Es probable que el conector III-IV actúe como “tapa en bisagra” que se
acopla a un receptor formado por los bucles citoplasmáticos S4-S5 de los
dominios III-IV así como el residuo del extremo citoplasmático del dominio
IV S6. La regulación de la expresión del canal es a demanda.
• Subunidades auxiliares (β), son moduladores de la función del canal de
Na+ neuronal y muscular. A la fecha se ha descrito tres subunidades β (β1,
β2 y β 3 )asociadas a las subunidades α del canal de Na+
Canales de Potasio
• Es el canal más antiguo de la biología ( 15 millones de años).
• La principal fuente de corriente repolarizante se origina por el
movimiento de salida de los iones potasio (K+), a través de los
canales de K+ (aúnque tambíen lo hacen las corrientes
hiperpolarizantes de los intercambiadores Na+/Ca++ y la
Na/KATPasa)
• Los canales de K+ se dividen en tres categorías principales:
a. modulados por voltaje: Kv (Ito, Ikur/IK lento, IKr , Iks ).
b. rectificadores de entrada (IK1, IKACh, IKATP )
c. corrientes de potasio de fondo ( TASK-1, TWIK-1/2).
. Los regulados por voltaje esta formado por cuatro subunidades α y
subunidades accesorias en coordinación con el citoesqueleto y
complejos de señalización. Esta vía usa los antiarritmicos clase III
formado por 4 segmentos transmembranales y dos P loops canales
de reposo ó rectificadores de K+,siempre abierta y ayuda a
establecer el potencial de membrana.
K+ channel
Muestra un canal de potasio,
Operation of the ACh Receptor Channel
Conformational changes in the
TM segments of the AChR

A concerted localized disturbance thereby takes place, which

initiates small rotations of the subunits along the shaft to the
membrane. The rotations disrupt the gate by destabilizing
the ‘‘ring’’ mode of association of -helices around the pore
 Only 2 of the identical subunits are shown

From cytosolic side, the pore opens up into a vestibule; the vestibule
facilitates transport by allowing the K ions to remain hydrated even
though they are in the middle of the membrane
Canales de potasio

• Los canales de K+ modulados por voltaje (KV), es tetramérico de α

• Cada α contiene 6 dominios transmembranales de S1 a S6 cuyo
terminal amino y carboxi esta al lado interno de la membrana.
• Los segmentos S1 y S4 detectores de voltaje.
• Los segmentos S5 y S6 son críticos para formar el canal.
• Normalmente durante el transcurso del PA los canales de KV
cerrados se activan ó abren en respuesta a la despolarización.
• La reentrada en el estado de cerrado precisa la repolarización de la
membrana.
• La activación del canal KV es el acoplamiento temporal de un
sensor de voltaje con la apertura de la compuerta de activación.
• El sensor esta asociado al cuarto dominio S4 que contiene un
residuo de arginina ó lisina con carga positiva.
• Los canales de K+ catalizan el transporte selectivo de K+.
• El poro es impermeable a otros iones.
CANALES DE POTASIO

La longitud del poro es de 45°A, diámetro de 10°A lleno de agua.

Se describe tres formas de inactivación:
Tipo N: El principio de bola y cadena que bloquea el poro.
Tipo C: Cambios conformacionales de la boca externa del poro.
Tipo U: Esta muestra una dependencia del voltaje en forma de U.
Subunidades α formadoras del poro:
Canales de Calcio
• El Ca++ es elemento esencial para el acoplamiento excitación-
contracción como para excitación- secreción
• Se reconoce cinco tipos de los canales de Ca++.(L y T en el corazón,
R, N y P/Q en las neuronas.
• Los cales tipo L es de elevada conducción, sensible a 1,4
dihidropiridinas (DHP), que se activan a PA más positivo
• Canal Tipo T es menos conductancia, de apertura transitoria y
activación a potenciales mas bajos que los canales tipo L.
• El canal de Ca++ esta formado de cinco subunidades proteicas (α1,
α2, β, γ, y δ) donde cada uno tiene cuatro dominios homólogos (I-IV)
y cada uno esta formado de seis segmentos transmembranales (S1-
S6), donde el segmento S4 es el sensor de voltaje y el bucle del poro
está entre S5-S6
• El poro es de 6 A de diámetro donde la corriente de Ca++ (Ica) hace
del poro selectivo y dure 2 a 7 ms.
• El Ica iónico sirve como un segundo mensajero controlando procesos
rápidos como la contracción muscular
S5/S6 : forma el loops
S4 forma el sensor de voltaje: La carga positiva se debe a los AA lysina y
arginina, esta parte del canal es alterado al voltaje negativo
-potencial de reposo, el voltaje negativo dentro del sensor de la membrana
-potencial de acción, la carga se revierte y el sensor se mueve afuera

Específico de músculo esquelético (Cav 1.1)
Media la entrada de Ca2+ inducida por la
despolarización de la membrana
Sensor de voltaje en el acoplamiento E-C
-Estructura: 5 subunidades (1, 2,,, )
Canal Ca2+ de tipo L
Parálisis periódica [K+]
Despolarización del SL
Aumento de conductancia para el Na+
No se evita por tetradotoxína
Mutaciones en el canal, pero no se conoce
el mecanismo
ICa
• El Ca++ e el mayor mensajero intracelular que puede producir:
• a.- mediante receptor acolado a la proteína G
• b.- mecanismos de actividad enzimática (receptor de tirosinkinasa
ó receptor ser/tre kinasa)
 4. The Protein Encoded by the Cystic Fibrosis Gene:
Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR)

A Cl- channel
2 sets of 6 transmembrane domains
2 “ATP-binding cassettes” (thus “ABC transport protein”)

Cl-
out

in

N
ATP ATP

R-domain
C
unique among channels
and ABC transporters
Until 2002, we had only guesses about the atomic-scale structures
of ABC transport proteins

Big Alberts 11-16

© Garland Publishing