You are on page 1of 6

!

Objetivos :
I ,f

I@

GevteYC: O'o+e\1er ADi\l de cebollo reollwV\dD-ll0tS plro~1-\CO Fya w cu.ar'x!r~lcocio~-,

celuLar, de lo mern bruno

_/

: reacClOY1
,/

1,

, de \o

fuvf(wlox: G..tuV\.+lfKCl~ AO deuY\o cebolla utllilOdo-lo


di~ev \0 Y't V\(l .
T y\-tyOOuCClY1. El. AOt\\ LCOY\~-h~e,e\ material
crdo..? lU0 lns1YuCOoY1e.S
o~aY\ SYY\.O
CDrl-tteneV}
I
v

l! /"

lJ

heredrtorio de lAY' (~d,VlcLuo.Eh l estn e.squ.ed~en ~~l',(, \O.:s celuta.s PJlYO COY'IsnvlY ~'0
V!V . l(Jd05 \ts celuLa.s que

yYV\.teY'\eY1o

UhQLq)l

idntico de ADN.CaOOlAYlO ded[a:)

rorte d~ cl~
. t=- V\oones

\Y\S-tru.COn5

'd POyeso

fOnY\ClYl ;SW1

UY\

emro~1

mdlvldu.o
\eeUhO

"'-Oj clulas CO\1.dlFererrle~ FOnYlO5

se extraer d Aa . de los ctulc6 q.e fOrlY.n G\na cebJUa \as cLCllo.SfLAccwl0-ta5, comO to..s nuestr~ () las de las cerollS COntienen ADN en e\ lv1terior CieLAY1 comporttmlenio \layYlC.(do nucleo celuJo(. fbyello paro eAroer e\ AON, debemro yojy)per \a lY1.embronet ce!u(or j tambY\ lo WlemhrUYO h<ACIDr. En e5-\e
X~f\memO

Loo cidos

Y'lUClelCOS '6()Y1 deilpo

nt1yoge't1cdos, de elevado peso 'fY()\ew(or, eYllazo-

I~ dCD eVllQ0 posoones 8' ~ 51 d~l05 QZUCClres gue lo confqrmon lOJddo.s V\C1c~ 1\ ' ros s: pueden encontrar en io5 celuLm QWCladbs o. pYclet'QS, de6t ponrlCtdOn

d~

FUo!mevtre eV\ CU0 COY\. concel'rtraClOnL5

\uqor Q COmp\~j05 .\\omodo~ nucleo-p'rO+dYlOS 0WS Lompl~JOS xtedenseY :e~ra~


CDl\'\:nenie5 ot ~'( tra~ad03 en. mluClones CO\l dclOOS

ol-to:s de ID\es '61 esto. htdrollJl..5 corrtwlUO '5e p(odu.oro.n nuclL9Sllios ';-{FlVlalmen1e FO'5fD1o:S oZi;cp.ye5 lj roBeS. X)JKOS lj pltll'Y1ldLCOS. LC prate\YlCA-S(J:ue}o.comtaVl de: uYLcarac~Y bb.slto \')1\evrt'fQS ~uecomo lo t"ndiCb SU roYY\'o,e I l00 oodO) nudelco5 pn:rseVl+an un cometer Ctodol' eX/5teh daoS
-tl~

de dos Rtbo nuclelco).

vtLlCletC03

ADN C.Aodo Dezsoxlrrlbonudel(o) Ij flR-N CALdo del


l
o o

Coy-oc+e({.stlca~ Benemles

ADN
o

De0OX\Wt\x)80

Rlbo.sa

\
rtro~rodas
lt~eYlly\Q

(: Nucleo+tdos:
o

b:1sts

\1

&:mes h l tro~ enad.a0 :


- RHL(O~ : A-deY\\Y/.Cl ~

- R.H"l~:

GuohlnG
@

.-. - P'W1JYIl d leos . O toc, YlQ ~ U rno lo.

\1

GUOY\lY\0

~
o

tu

Y\ClQY\ '.

Ir'"

- ~~flmldlca,s : GfCOhQlA Tlm\~l. f'r\YYlp_~eh cte ('" FCJ'f\YCcQY\ ~enhco.

lD

fuY\ClpY': pwecto 3\Y11esLS

pro-tem .

dtetapoS de

La p.l\,\c\6V1 tu\1ciclmerrlal del AONe:>t dlYedol'Ylevrle I[!lado (()Yl el 'tY01eral gen +uo de lo.~ celulo..s pUdleYLdC5e en.coni'tDGe 'fY1oY'loca-tenoYlo en atguVlos 'tyHCOoy-~a.V\~moJ 9 eY\ orqQt'Hsmas ~peOFlCi'Y1eYrte 5u.penore5 en fOTl11Ode
rlUCleo-p,<otelY\05
eVL

"
~ "

,1.

105 cromOSO~

del ADN.

CoY\-tlfue eJ ADN \u \nFOYYYlo.cl~ gent-hco ~. esto SIrVe de h101de . xtYU lo. rephco~ de AQN o LCl .de FtR-N que despU'~ eyvlY (bYO la 0ntffilj pr(rlelCO.
FLAVtdo Wlerd-o. Mtodo de lo Dl~nllQtrl vo .
I I . . /

lodo mtodo q.ynY\\co fXlYQla c~n+1 t:~(QCl~ deuodos YlUclelC05 :se ba~ en lCL determmocloY\ de QLguhO CUSto..'l1ClO qUWY\ICO~e5ente Ch3.A compOSlOOY1 COmo 19 Bed' ~ el f6SfD~Odr\\o~~, de::oAIHlto)Q" bODe5 puncooo p\(\ m: d-

r'

(D.:)(
-

a~1 s+e +ipo de


r

CUOY1+q:'lCQCIOY1
. I

(Se vu.elve
~

\'YlOS espeCLF-ICO.

t:sio-s met-odos decuon.11pCOCion co\onmehlcCl~1 Ms o menos e5pe.C(:tCQS pal'O pentosm o de50x.l:er.to~o.s, ~to qUtere deor }:Jue BenemIYYl'rrre \QP~senao
de peYltosas o \Y/terpere
UV\CA
eYl

(o determlnCtClOYJ de de00xl perr1-0jC15.

seo el
\iA eY\

ONA e R NA a fOrl-'Y de lo coV\tLdo..d eY\contro.clct de ~dew)(\,(,(lbo::LlS o nloJtos (eocr\Vo.s 0eqY\ c:eo. el CO-80, este Q.5pecto e) \Y'Ylporl-onte recordnr que los. QZUCY~ eY\ \.o() Y~)i:oftdos de pUYl nQ5 (SOY! lYlcts F-rewen-temerrtea"'\, pOY n1edlO de u \10 cahbraClY1 de lo evtnYlo de ~ento.0p e deoO)(lpen-t()O
CQ00
I

d\F.lcuH-od \Y'1portan-t-e en -tules mtodos es e\ calculor, tacan+tdod de

rocLo depeYldlendo

esto 'P

YYlueoiro de dado Ylu.cl\Q) .~\ F\ Uy\lcomerlfe de \00 fe.OL+t vos corno Lodq::en damlna.
r

mecha de

U\1o.

cu.Clr\~lce:~YJde ftDN se \x.I:so en el YJle-udo slt BurtoV1 (1 QCo5)J 0e \oaSCA


lCl t()+\~Cl.clOy) de
pO'f LCt~
de00Xlrrl

QwJ 1

de Dl3cne (d'fem\om,no

pemosOJ dd t')c\Yocto de dddS nucletcm


4-/
0

bDS01 e~-trroc;clOYI da
Co'(\

cono

pYoduc~o
cOY\

UYl

color

el y-eochVode

cido aCtlco).

Perra \Y\cyementoY
ot'fO(5 (Om~ro

tCA 5eY'1G blhda.d de [a rer-cci\1 se agrego aCEia\dehldo 'd se

feqUOY Lo \\:terp:renQa

dtci

~yn\(\

en yeposo.

i-e

EndtW\UCIQY> do1to..desoxlpentoX'\ se con Vl:(1e enet a\~YY\ente reoctivo 8--h\Ghxdeva\\Y!. atolehuo Q-ue v-eCclona con \0. C'lfena\lY\lV\O ~ra dox el cOh1puesto azul Cf-LE' Q~ybe Q bcOrHYl deocu.e..rd-D o, tOa f>xpenmeY\:tm reollzo..cl.os fX:ly!?itftQr lj en lQ~ ModlFlCCA'- ~
COY)

La ventaJa cAelo dq:enlam\no

es que~ie' /,col0Qnte rroCClCro sele:+lvo\'Y)Cj)

ltls 2-de00:X:lp-eYrtoSO,,5.

c10.0 deJ r<le-todo

aoyeS de

Gl\le~
I

8 M~ers, cOYlelpn de encovrtYor uno .de+envHt'\OJVYI ec5 CLabsor XU1..C'LCt .

.:

mClJt\yYlQ

~et'lobtll

.~~.------------------------------------------------~~. (xxhon puede co~tl'u\Y de


AoN por ~lemplD de una fjJLUCl0\1 de AO\\\ de 50lmYJ I que n05 perrntte. detey_ W\W\Qyel-tipo de~erlldo de e()t', en e\ \Q'fob\ema, cor uY\O \ytterp.OloCLciYt fO bre la.l'~19 rxct'oo de las densdacAeJ ptiCos deJo ~lUClQY p-oblerr a\~r lJV\Q veo.ca01'i tPpeCL'p.co {pY dEBOXI}Y3"t03D.S romo \ clt.eox\\'Y\bo~1 aUYlque -te~Y'005 lo. p'((:sevloo de ARN, esre '(lO \Y\+erpey' en lo CLYl+tpCOOr7 ~Ct que e\ RN A Y'D p'fe6e vrIo de;::()~lpeY1to00J
Reaa:i6vI~t\ero{.
De0o'J..\ '(n toso + ttEB ~

UV\CI Cuwo

se

pCIY1W

de CDY1Centraoone:)

C0Y10ClOOS

,13- nIcAYo)( llevo. hYl + di ftl' d Qm\ylO


~,. \V1 ~rO
{

..;;:::=::.

CO'Xl'1{J0"2ftv

OlU.\ .
\Qw

de 1C(X) fA L

, M vIdrioS de reloj :) QfU tu\? de e\1SO.~e


Cl~~~;,.I\q:f'OO~1SlDs:'5

o, ~ 1
~ 3
e

(1

B\stu'(( o cuch'dlo~ y'Q:).o de ~r(eClf1ttod)) lCml

vnTIS de p'(ed~dGtdo Z)\'l1L

., Z, proppe-ras ~ 1 1 Mo:hca. v\umetn< lOrnL


V050

l GYCldlllo
1 PI2etO

..
r

. y Celda.s de cuarzo pena e5.:ec-

+ro ::otoh1eoo.
o

- -

7 EspCtTofD+Ol11eim."

) o o

29 NaC\

Acetaldd1tdo 0.1 M
./

~~
cj~

L-Iu.nol

01

5/0

,JaOH.

E
o SotUClOll
/

de .A-cetoldehllAU
\ L '\ r<lO \

,.l_

0.1 tv1 C25rnL}

O.02SL \O.IWlOl\i4.059'\

o.=tOOS qq~IKP

1 ml

\10r\\

KA\=

0.14\\

h'\l de

acetoldentdo

o.\~ll
o

W\\

de a.cefulde~ltdo0e-Ue\tYl
do
UV\CL
i

auYl.C\fOYO

de 25 'Y1l en \-hO

'Dl~t\OYY\

(OPA) el
urteY((){mevrte
.

S~ riepOYO
rol

O-p w-tl de -\h ... 50y


LCttco slactal
1

w oJ. 4

<>/0.

3e

~SQVl

0.259 de DPA ~ se dcueve


de 25\"f1L,
COYl

eYl

f:e HeVQCA -UVl afOro

dedo

'op\ho
Q;

(Le
o

nol
95
"fo

pdt

NCDhol

EtlllCa

",. Pe:xl'( 2.9 de NoLl ~ d\~o\verlo ~ 90ml de H-zO en un vecode26()mte ABye?Jor tOYY\l de ae+efgen+e hqUldo tj \t1oWtenet20Y ~lYlfD'r<tOY
~~~a. .

Mefcdolc~(Cl.
I

."

ExtYoccirl de /tON. V 1. Corror la zono COhnol (zonade enh1edlO) dg cMla en cuodro~ " 2. 1 ezcbr los +rozas de ceboUC\ COh la 3eluoc:n de extraccin 5\Yl ponnor espuma. ,3. 'LtCCOVlCl~u.do del '11'(+15 O en su defEdO COy) ()~udo de un procesado\'" de ollmen~ a h1dximo ve\oclCiCd P9r 3J 0'9V11das. L\. Filtrar el I~wdo qbte\1ldo con Q~udo de UY'lQ ~o en un \'050 de pveopdodos de
\CO h1l \OS1-O (o lllid.
<

5. Anod\r

-tern,
.f\OOO\Y

- Se coYi9.J9.po f~a.en Trozospe~ye~ ~ COYl a~da de una 80sa S' Qp!c& '

3 cucharadas de ,fugo de ~fXAPQSP ~ mezclar bien.

Y ~qUfrtctCA elJuqo
E..-fOt1 po

en UY) tubo d ensa~e. __ efl-LHvClt"evrle al FIltrado, haClendolo resbolorCUldadosomeni-e

por la\) eP~dE$ del vcxso ~YO fOrmar una co[X) ~bYe el Fi H-rcdo, ~a'( Yeposar r 3 D "h1l,! \1031-a que ~e pxme um zono +((rbla -errtre Las de s fOSes. 7. 'Irr\Yvduor varilla o \XJh\\os ).\ extraer tos flbros ~larcm de DNfl- ~ co(ocoy_-en un tD de ehfO~0) a~hdorm CYl lo fXJrd de ste poru que e5tUrron bl~n . . LOvox el ONA CQV'I ,tt\ "\O\'Y'lL de E+O Q I 98 '10 o 95"'/a deJondo refXXPY' 1mm en el Etotl ~ fehyor e\ EiOi con <Aro.p peto. d-e 10t'\'\ll C~.()rr\1P(O('i&,de A
,-

i, ~olocor ~ ~ \. de. ADN 2. f2otulor


- -

:vn-~

"J

de dlluD()y\ 500 }I9/ml.


-::
1 -2

+U~ de en5a~e::JoY\QdIY
3

~,

1 \'Yl L de cido per-elonco


~Y) l-j

2(f/o.

CoY"(Y)trccin
I

lo-=td:b ~
5 ~ 62.5 .M9/rtIL 15 lAsYlL

1?;\OYlCO

ADN
500 fl9/'Ml

25 ft3/h'lL 1COfll

3=t,5 jl!JJty1l 50A9/n1l 150 ).AL 20D)-L

~est(awi lemo.
/"'"'

-' .- 2COOpl

250pL.

300f'lL

/tDN
prob\eYY
PCA1

19C<)f4
~
I

IB50jAL

15CO,}.lL

rtSO)Al

10,r:r

1nJ;;L

1::eo-fiL
en un

3. ?aYer +Odm

as

COn

iap1 de

pl.sftcD o Ylldrollzor
anOO\f

bctn~ a
, ~

4 O C( d UY'CIVl+e '-\. K:mer Lo:s tubos o e"ItlF en hle{O, pmtellqnYlente -:dedlfen\lo\'Y\\\"O Q des b3 tubo0 ~ a~dar.

4'n1l dedi50luClOn

5. Anadl ( 0.05 m L de oce-taldehlda el +odcs to:stubos -p:{t)~0 que e\ oc~ de lelo es mu~ voltd. b. Medlr Lo. mwrbo.yclO Q 00 Ylh'l

lJ aaltar. 'MOYlierer

tubO
1

ltb'Eo(tx)roa

O
O-00"
O. O ~

2 .3
~

0.023
0051
{).\Ol.{
I

::;
G

'Prd'dJ ,..;T,.. ,."

BlbhOfjrclF.
o

.
eh

/
o

NanuQI de p~ahcQJ d~ / lotDratcno,P9"0 (3 oqumica~t(u::futOl,Leporlomeniode ~1YtC1C() )\Oloq.co.s ~COOYl de BlcqUth1\CCj Ij fcnrmaco198l0 .Hul'YrCI , Mores: Dro. 0hdo Flores ROjo) es ( G. ArcodLO Hernord'z Ce\-kan I ff-LB-' 6Y- 68.

FvtY\domevrtm ty1()\ec.ulare..s

tr1edLC\YW.
I

fenndo ux::oro
fXtS'
301-310.

b'2DdD I MCIl1()Ct1 mO-

dernO. UlIllversldacl de &1b:mo


o

2005

E>CtrClCCl~ ~ cuon+' flcciYt d' AnN d~ P eu-to~, E$E.Oufus coYYD UYlO fDxW1Ct ~tO. (jeteTh1I'r10i \o. lO\'Y'Q.SCI JoVl'r LSldon) LOpe2 Cn.Az (TestS de
lCLUArv1) 'XLg. 10-15.

XJ-/

2.0
--

7 t..
--:}f-/ -

l~

I O %-

<-f,

0:3 q

You might also like