Linearna regresiona i

korelaciona analiza

Definicije
Regresiona analiza opisuje prirodu zavisnosti
izmeu varijabli
Linearna regresiona analiza opisuje prirodu
zavisnosti pomou jednaine prave

Korelaciona analiza opisuje stepen zavisnosti

izmeu varijabli

Linearna regresiona analiza

y
promena u y
b - nagib
promena u x
a - odseak

y= a + bx

x nezavisna varijabla
y zavisna varijabla
a odseak na y-osi
b nagib prave

Korelaciona analiza
Stepen zavisnosti se izraava koeficijentom
korelacije (r)
Vrednosti r se kreu od -1 do +1
potpuna
negativna
korelacija

nema
korelacije

potpuna
pozitivna
korelacija

+1

-1
poveanje stepena
negativne korelacije

poveanje stepena
pozitivne korelacije

Primena regresione i korelacione

analize
Izraunavanje jednaine standardne krive
Procena tanosti metoda i poreenje metoda
Procena tanosti metoda na osnovu metode
standardnog dodatka recovery

Standardna kriva
y

b - nagib

a - odseak

promena u
apsorbanciji

promena u
koncentraciji

A=a+bc

y= a + bx

x koncentracija (c)
y apsorbancija (A)
a odseak na skali
apsorbancije
b nagib standardne krive

Izraunavanje jednaine standardne

krive
stepen zavisnosti izmeu apsorbancije i

koncentracije rastvora mora biti 0,99

(r0,99)
odseak a treba da bude jednak nuli (a=0)
Da

li je r 0,99?

Da li je a jednako nuli i
ako nije da li se znaajno
razlikuje od nule?

Zato se ispituje odseak a?

Po definiciji odseka regresione prave, a
predstavlja apsorbanciju rastvora kad je
koncentracija jednaka nuli??
Kad je koncentracija
jednaka nuli i
apsorbancija mora
biti nula!!

Hipoteza (t-test)
H0: a=0
Ha: a0

Primer 1
Izraunati jednainu
standardne krive za
hemoglobin i protumaiti
dobijeni izvetaj.
Izraunati koncentraciju
hemoglobina ako je
apsorbancija jednaka 0,375

g/L

50

0,134

75

0,200

100

0,272

125

0,340

150

0,406

175

0,482

200

0,543

Primer 1 (Excel)
Tools

Data Analysis

Regression

Input Y range (oznaiti sve vrednosti Y tj. apsorbancije)

Input X range (oznaiti sve vrednosti X tj. koncentracije)
Oznaiti Labels
Oznaiti Confidence Level
Oznaiti Output Range (postaviti kursor na polje u sheet-u
gde treba da se pojavi izvetaj)
OK

Primer 1 (Excel)

adresa polja u
sheet-u gde
treba da se
pojavi izvetaj

Primer 1 izvetaj Excel

koeficijent
korelacije r

nagib b

odseak a

P vrednost za odseak a

Primer 1 - izvetaj
Multiple R = koef. korelacije r = 0,9998
Zadovoljava kriterijum r0,99 da bi standardna
kriva mogla da se koristi za predvianje nepoznate
koncentracije
Intercept = odseak na osi apsorbancije, a = -0,0042
P-value uz Intercept = nivo znaajnosti P koji odgovara
odseku a je 0,225
Odseak a nije znaajno razliit od nule
X variable = nagib standardne krive, b = 0,00275

Jednaina standardne krive glasi: y = 0,00275 x 0,0042

Primer 1
A=0,375
x = (0,375 + 0,0042)/0,00275
x = 138 g/L (koncentracija hemoglobina)

Primer 2
Izraunati jednainu
standardne krive za
odreivanje koncentracije
magnezijuma, a zatim iz
nje preraunati
koncentraciju rastvora
ija je A = 0,25

mmol/L

2,5

0,105

5,0

0,202

7,5

0,319

10,0

0,422

12,5

0,515

15,0

0,624

17,5

0,750

Primer 2 izvetaj Excel

koeficijent
korelacije r

nagib b

odseak a

P vrednost za odseak a

Primer 2 - izvetaj
r (multiple R) je 0,9994
zadovoljava kriterijum r0,99
a (intercept) je -0,0054; nivo znaajnosti P za
odseak (P value) je 0,505
odseak nije znaajno razliit od nule
b (konc) je 0,0425

Jednaina standardne krive glasi: y = 0,0425 x 0,0054

A=0,25

x=(0,25+0,0054)/0,0425
x=6,01 mmol/L (koncentracija magnezijuma)

Poreenje metoda
kada elimo da neku metodu zamenimo drugom, mora
se proveriti kakvo je slaganje rezultata koji se
dobijaju ovim metodama
metodom 1 se odredi koncentracija u seriji
standarda
metodom 2 se odredi koncentracija u istoj seriji
standarda
izraunavaju se odreeni parametri kojima se
procenjuje slaganje koncentracija dobijenim
dvema metodama
y= a + bx

x koncentracija dobijena metodom 1

y koncentracija dobijena metodom 2
a odseak (sistematska greka)
b nagib (procentualna greka)

Izraunavanje kod poreenja metoda

stepen slaganja izmeu rezultata dve metode mora
biti 0,9 (r0,9)
odseak a (sistematska greka) treba da bude jednak
nuli (a=0)
nagib b (procentualna greka) treba da bude jednaka 1
(b=1)
da li je r 0,9?

da li je a jednako nuli i ako

nije, da li se znaajno razlikuje
od nule?
da li je b jednako 1 i ako nije,
da li se znaajno razlikuje od 1?

Zato se ispituje odseak a?

Ako je a0 (npr. a=1) tada jednaina postaje: y = 1 + bx
Primer: ako smo metodom 1 izmerili koncentraciju 1 mol/L, tada
e metodom 2 biti izmereno y = 1 + b1
ako smo metodom 1 izmerili koncentraciju 2 mol/L, tada
e metodom 2 biti izmereno y = 1 + b2
Zakljuak: metoda 2 daje za 1 mol/L vee rezultate u odnosu na
metodu 1
Kada je a0, postoji
sistematska greka
metode 2 u odnosu na
metodu 1

Hipoteza (t-test)
H0: a=0
Ha: a0

Zato se ispituje nagib b?

Ako je b1 (npr. b=0,5) tada jednaina postaje: y = a + 0,5 x
Primer: ako smo metodom 1 izmerili koncentraciju 1 mol/L, tada e
metodom 2 biti izmereno y = a + 0,51
ako smo metodom 1 izmerili koncentraciju 2 mol/L, tada e
metodom 2 biti izmereno y = a + 0,52
Zakljuak: metoda 2 daje 0,5 puta manje (50% manje) rezultate u
odnosu na metodu 1
Kad je b1, postoji
procentualna greka
metode 2 u odnosu na
metodu 1

Hipoteza (t-test)
H0: b=1
Ha: b1

Primer 1

Koncentracija kalcijuma
je odreena u seriji
standardnih rastvora
pomou 2 razliite metode.
Pokazati da li postoji
razlika u vrednostima
dobijenim ovim metodama.

Metoda 1

Metoda 2

52

54

108

110

156

158

202

208

248

252

306

308

356

359

401

406

Primer 1 (Excel)
Tools, Data Analysis, Regression
Input Y range (oznaiti sve vrednosti Y tj. vrednosti
koncentracija za metodu 2) npr. vrednosti za metodu koja se
ispituje
Input X range (oznaiti sve vrednosti X tj. vrednosti
koncentracija za metodu 1) npr. vrednosti za referentnu
metodu
Oznaiti Labels
Oznaiti Confidence Level
Oznaiti Output Range (postaviti kursor na polje u sheet-u
gde treba da se pojavi izvetaj)
OK

Primer 1 izvetaj Excel

koeficijent
korelacije r
P vrednost za odseak a
Excel ne daje tanu P
vrednost za b. Izraunati
tb i uporediti sa ttab!!

odseak a
(sistematska greka)

nagib b (procentualna
greka)

Sb standardna
greka za b

Primer 1 - izvetaj
r (Multiple R) je 0,999
zadovoljava kriterijum r0,9

a (Intercept) je 1,9825
P vrednost za odseak a je 0,156
nema sistematske greke
b (metoda 1) je 1,005544
= 0,05
=N2=82=6
N broj parova x i y
dvostrani test

tb ttab;
ttab = 2,447

H0 se prihvata; H0:b=1
nema procentualne
greke

Postoji slaganje rezultata koji su dobijeni ovim metodama

Primer 2

U uzorcima kapilarne krvi

odreena je glukoza GODPAP metodom i novim testreagensom koji se ispituje.
Pokazati da li postoji
razlika u vrednostima
dobijenim ovim metodama.

GOD-PAP

Novi test

4,4

5,6

5,8

6,3

3,8

4,7

17,3

14,7

19,7

18,7

6,5

6,9

5,2

6,6

7,0

7,3

Primer 2 izvetaj Excel

koeficijent
korelacije r
P vrednost za odseak a

odseak a
(sistematska greka)

nagib b (procentualna
greka)

Sb standardna
greka za b

Primer 2 - izvetaj
r = 0,992
zadovoljava kriterijum
a = 1,7985
P = 0,0056 0,05
postoji sistematska greka
b = 0,809351

ttab(0,05; 6) = 2,447

moe se uzeti
apsolutna vrednost
t = 4,672

tb > ttab postoji procentualna greka

Metoda sa novim test-reagensom pokazuje pozitivnu sistematsku i
procentualnu greku u odnosu na GOD-PAP metodu

Recovery test
koristi

se za procenu tanosti metoda

izvodi se tako to se u
uzorak biolokog materijala
dodaju standardni rastvori
odreenih koncentracija i
potom se metodom ija se
tanost utvruje, odreuje
sadraj eljenog
konstituenta
dobijene koncentracije (y)
se uporeuju sa dodatim
koncentracijama (x)

Izraunavanje kod recovery testa

stepen slaganja izmeu dodatih i dobijenih
koncentracija mora biti 0,9 (r0,9)
nagib b treba da bude jednak 1 (b=1)
Da

li je r 0,9?

Da li je b jednako 1 i ako
nije da li se znaajno
razlikuje od 1?

Zato se ispituje nagib b?

Ako je b1 (npr. b=0,5) tada jednaina postaje: y = a + 0,5 x
Primer: ako smo dodali koncentraciju 1 mol/L, tada e se dobiti
y = a + 0,51
ako smo dodali koncentraciju 2 mol/L, tada e se dobiti
y = a + 0,52
Zakljuak: dobijena koncentracija e biti 0,5 puta manja (50% manja)
u odnosu na dodatu koncentraciju. Recovery e tada biti 50%

Kad je b=1, recovery

je 100% i odredili smo
ono to smo dodali

Hipoteza (t-test)
H0: b=1
Ha: b1

Primer 1
Za ocenu tanosti metode za
odreivanje magnezijuma sa
metiltimol-plavim u serumski
"pool" su dodavani standardni
rastvori magnezijuma
razliite koncentracije.
Pokazati kakva je tanost ove
metode.

dodato

dobijeno

0,81

0,3

1,05

0,7

1,38

1,1

1,93

1,5

2,19

1,9

2,75

Primer 1 (Excel)
Tools, Data Analysis, Regression
Input Y range (oznaiti sve vrednosti Y tj. dobijene
koncentracije)
Input X range (oznaiti sve vrednosti X tj. dodate
koncentracije)
Oznaiti Labels
Oznaiti Confidence Level
Oznaiti Output Range (postaviti kursor na polje u sheet-u
gde treba da se pojavi izvetaj)
OK

Primer 1 izvetaj Excel

koeficijent
korelacije r

Excel ne daje tanu P

vrednost za b.
Izraunati tb i
uporediti sa ttab!!

odseak a

nagib b (procentualna
greka)

Sb standardna
greka za b

Primer 1 - izvetaj
r (Multiple R) je 0,995
zadovoljava kriterijum r0,9

b (dodato) je 1,0146326
= 0,05
=N2=62=4
N broj parova x i y
dvostrani test

ttab = 2,776

tb ttab;
H0 se prihvata; H0:b=1
Recovery je 100%

Primer 2
U jedan serumski pool dodata
je urea u razliitim
koncentracijama, a zatim je
odreen njen sadraj
metodom sa pH-osetljivim
indikatorom. Pokazati kakvo
je slaganje izmeu dodatih i
dobijenih koncentracija.

dodato

dobijeno

7,3

11

14,9

12

19,7

16

22,9

20

26,8

24

30,2

28

35,3

32

38,4

Primer 2 izvetaj Excel

koeficijent
korelacije r

odseak a

nagib b (procentualna
greka)

Sb standardna
greka za b

Primer 2 - izvetaj
r = 0,999
zadovoljava kriterijum
b = 0,9791667
moe se uzeti
apsolutna vrednost
t = 1,506
ttab(0,05; 9) = 2,262
tb > ttab Recovery je 100%