12/20/2019 17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng pipet

Tiếng Việt Giới thiệu (/gioi-thieu.html)

Liên hệ (/lien-he.html)
Đăng ký (/user/signup)
Đăng nhập (/user/login)

(/)

  HOTLINE 247

04 6662 6362

  HÀ NỘI

0968 378 899

  HỒ CHÍ MINH

01289 777 888

Tìm kiếm hãng, công ty, sản phẩm, bài viết  

Sự kiện (/event) Video (/video) Tuyển dụng (/tuyen-dung)

(http://www.kimteco.vn/website/index.aspx)
(http://www.biomedia.vn/review/tabio.html)

17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng
pipet
Thích Chia sẻ 463 người thích nội dung này. Hãy là người đầu tiên trong số
bạn bè của bạn.

BioMedia Kỹ năng sử dụng pipet là rất quan trọng đối với các nhà nghiên cứu sinh học
phân tử, nếu không có kỹ năng tốt, các thí nghiệm của bạn sẽ khó có thể lặp
lại, các dung dịch stock sẽ không chính xác và các phân tích sẽ gặp những lỗi lớn và trở
nên vô nghĩa. Khả năng chính xác của pipet không chỉ phụ thuộc vào dụng cụ mà còn
phụ thuộc vào bạn, cần phải bảo dưỡng cho pipet của mình, thực hành tốt các kỹ thuật
và có sự hiểu biết nhất định về công việc đang làm. Nhưng may mắn thay, bạn không
cần phải quá lo về điều đó, bài viết dưới đây sẽ giúp bạn cải thiện điều này, và một khi
bạn đã nắm được những quy tắc này, bạn sẽ cải thiện được độ chính xác của pipet như
mong muốn.

BIẾT VỀ HOẠT ĐỘNG CỦA PIPET

biomedia.vn/review/17-dieu-can-luu-y-giup-nang-cao-tinh-chinh-xac-khi-su-dung-pipet.html 1/11
12/20/2019 17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng pipet

Cấu tạo chung của pipet

1. Hầu hết chúng ta đều sử dụng pipet thông thường (Air

Displacement Pipette)

Một pipet thông thường có cơ chế hoạt động hơi giống một xy-
lanh, ngoại trừ việc có một khoảng trống không khí giữa piston
và mẫu. Khoảng không khí này sẽ giúp ngăn piston không
chạm vào dung dịch. Việc giữ cho dung dịch và pipet ngăn cách
nhau như vậy là tốt nhưng nó cũng khiến pipet có một vài giới
hạn.

Nhiệt độ và áp suất có thể ảnh hưởng đến thể tích của cột
không khí, và sẽ ảnh hưởng đến độ chính xác của pipet. Cũng
như các dung môi dễ bay hơi có thể bị bay hơi vào cột không
khí và dẫn đến các thể tích khi đẩy ra có thể thiếu chính xác
hoặc bị ít đi. Cột dẫn khí của pipet đó cũng sẽ bị nhiễm bởi các dung dịch khi hút. Nếu như bạn
phải làm việc với các chất ăn mòn hoặc các vật liệu sinh học nguy hiểm thì điều này thực sự là
một vấn đề.

2. Có thể sử dụng loại pipet khác (tùy thuộc vào ứng dụng của bạn)

Hầu hết các thông tin trong bài viết này đều liên quan đến pipet thông thường, tuy nhiên trong
một hoàn cảnh nào đó thì một pipet piston (positive displacement pipette) sẽ là một lựa chọn tối
ưu hơn. Pipet piston hoạt động như xy lanh, nhưng chúng không có cột không khí- khác với pipet
thông thường. Điều này khiến chúng trở nên chính xác hơn khi hút các dung môi dễ bay hơi. Việc
thiếu cột không khí cũng làm giảm khả năng bị nhiễm khi hút các chất ăn mòn hay vật liệu sinh
học, do đó pipet này sẽ thích hợp hơn khi hút các dung dịch này.

biomedia.vn/review/17-dieu-can-luu-y-giup-nang-cao-tinh-chinh-xac-khi-su-dung-pipet.html 2/11
12/20/2019 17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng pipet

Những chiếc pipet loại này cũng khá đắt do thân pipet và đầu
tip được nối liền với nhau và sẽ bỏ cả hai sau khi hút xong.
Nếu muốn tiết kiệm hơn, bạn có thể sử dụng pipet thông
thường với đầu tip có lớp chắn, mặc dù nó sẽ mang đến một
vài các vấn đề khác.

BẢO DƯỠNG PIPET

3. Pipet cần được bảo trì 6-12 tháng một lần

Dịch vụ bảo trì pipet bao gồm việc hiệu chuẩn lại, tra dầu mỡ
cho các bộ phận và thay thế các phần bị mòn hoặc các bộ
phận khác. Bạn có thể gửi pipet tới các công ty để bảo dưỡng
pipet.

4. Kiểm tra pipet thường xuyên để xem các thương tổn

5. Nên lau pipet với cồn 70% trước khi sử dụng

6. Sử dụng giá treo pipet khi không sử dụng

Luôn treo pipet thẳng đứng trên giá để nước / khí ngưng tụ có thể chảy ra, tránh các dung dịch
ăn mòn bị chảy ngược lại vào bên trong pipet gây phá hủy pipet.

7. Không bao giờ dốc ngược pipet đang cắm đầu tip mà có dịch bên trong

Sẽ không gì có thể ngăn chặn việc dung dịch chảy ngược vào trong thân pipet, gây ra nhiễm
hoặc làm hỏng pipet.

8. Lựa chọn đúng đầu tip để tăng độ chính xác và độ lặp lại

Đầu tip và pipet không khít với nhau có thể làm giảm độ chính xác của kết quả pipet

Khuyến cáo: nên sử dụng pipet và đầu tip của cùng hệ thống. Thường xuyên kiểm tra phần đầu
pipet xem còn khít với đầu tip không.

KỸ THUẬT THỰC HÀNH PIPET TỐT

9. Đảm bảo rằng bạn biết cách sử dụng pipet đúng

Về cơ bản, bạn có thể xem các hướng dẫn sử dụng pipet của các hãng tương ứng với loại pipet
bạn sử dụng. Cần nhớ các quy tắc quan trọng nhất sau đây:

Tính thống nhất (nhất quán) khi hút:

+ Sử dụng pipet nhịp nhàng.

+ Áp lực lên piton phải đồng đều.

biomedia.vn/review/17-dieu-can-luu-y-giup-nang-cao-tinh-chinh-xac-khi-su-dung-pipet.html 3/11
12/20/2019 17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng pipet

+ Tốc độ và êm ái.

+ Giữ pipet thẳng đứng, tạo một góc 90o so với mặt phẳng chất lỏng khi hút.

+ Chỉ nhúng pipet nhẹ nhàng, vừa phải khi hút dung dịch.

Thời gian chờ cho pipet thể tích nhỏ:

+ Vẫn ngâm đầu tip trong dung dịch và đợi ít nhất 1 giây sau khi hút mẫu lên.

+ Sau đó từ từ rút đầu tip ra khỏi dung dịch.

+ Điều này rất quan trọng đối với mẫu lượng lớn (thể tích mẫu lớn) và những mẫu
nhớt cao.

Xả mẫu: Có 3 kỹ thuật xả:

biomedia.vn/review/17-dieu-can-luu-y-giup-nang-cao-tinh-chinh-xac-khi-su-dung-pipet.html 4/11
12/20/2019 17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng pipet

+ Xả bên cạnh ống (1).

+ Xả bên trên bề mặt dung dịch đã có

sẵn trong ống (2).

+ Xả trong dung dịch (3).

Cần lưu ý:

+ Tạm dừng trước khi xả với mẫu có độ

nhớt.

+ Nếu xả trong dung dịch, cần giữ piston

ở vị trí stop thứ 2 cho đến khi đầu tip
được nhấc ra khỏi dung dịch. Tránh làm mẫu bị hút ngược vào pipet.

10. Kiểm tra độ chính xác của pipet

Kiểm tra độ chính xác của pipet bằng cách hút 100 µl nước và cân, khối lượng của giọt bạn hút
nên trong khoảng 0.1g. Sau đó hãy lặp lại 10 lần hút như vậy và ghi lại các kết quả khối lượng
bạn cân được. Nếu như độ biến thiên (sự thay đổi) giữa các lần trong khoảng hơn ±0.5% thì
hoặc là bạn cần căn chỉnh lại pipet hoặc bạn nên thực hành kỹ thuật pipet nhiều hơn.

MỘT SỐ MẸO GIÚP LÀM TĂNG ĐỘ CHÍNH XÁC CHO PIPET

11. Rửa trước đầu tip

Rửa trước đầu tip đảm bảo cho tất cả các phần phía trong
được tiếp xúc với dung dịch. Bạn sẽ thực hiện việc này
bằng cách hút mẫu vào đầu tip và sau đó xả ngược lại
hoặc xả ra cốc thải để tráng rửa đầu tip, cách này sẽ giúp
tăng sự chính xác cho quá trình thao tác với pipet. Lời
khuyên là chỉ nên sử dụng cách này với những thể tích lớn
hơn 10 µl.

12. Kỹ thuật pipet ngược

Kỹ thuật này được sử dụng khi hút các dung dịch nhớt (mẫu máu,..) hoặc dung môi dễ bay hơi.
Kỹ thuật này cũng giúp cho việc hút các thể tích siêu nhỏ như 0.5 µl hoặc ít hơn.

Kỹ thuật pipet ngược bắt đầu bằng việc ấn plunger xuống vị trí dừng thứ 2, do đó sẽ bao gồm
thêm một lượng thể tích dư trong quá trình hút mẫu, mà không bao gồm trong lúc xả cuối.

biomedia.vn/review/17-dieu-can-luu-y-giup-nang-cao-tinh-chinh-xac-khi-su-dung-pipet.html 5/11
12/20/2019 17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng pipet

13. Xem xét nhiệt độ môi trường xung quanh

Những người hoặc công ty thường căn chỉnh pipet ở nhiệt độ phòng, do đó nếu bạn sử dụng pipet
ở một nhiệt độ nào khác (ví dụ như trong phòng lạnh) thì có thể bạn sẽ không hút được thể tích
chính xác.

14. Xem xét nhiệt độ mẫu

Trong một bài báo mới đăng gần đây trên Nature Methods
(http://www.nature.com/app_notes/nmeth/2007/071109/full/nmeth1086.html),
Millet và Barthlen đã quan sát được một hiện tượng kỳ lạ như sau: Khi lặp lại nhiều lần hút mẫu
nhiệt độ lạnh, thể tích dung dịch ở lần xả đầu tiên luôn luôn lớn hơn thể tích đã hút, nhưng ở các
lần hút sau đó với cùng đầu tip như vậy thì lại cho thể tích chính xác. Điều này cũng đúng khi họ
thực hiện trên các mẫu có nhiệt độ nóng, ngoại trừ rằng ở lần xả đầu tiên thì thể tích lại nhỏ hơn
thể tích đã hút. Vì vậy họ đã đưa ra giải pháp rất đơn giản, xả lại lần hút đầu tiên vào ống chứa
dung dịch và bắt đầu hút từ lần thứ hai.

15. Sử dụng pipet phù hợp với thể tích

Độ chính xác của pipet sẽ giảm khi thể tích xả gần với thể tích nhỏ nhất mà pipet có thể chịu
được. Ví dụ nếu như bạn muốn hút xả 15 µl, thì việc sử dụng pipet 1 ml là lựa chọn cực kỳ tệ,
pipet 200 µl cũng không tốt lắm, khi đó lý tưởng nhất là sử dụng pipet 20 µl.

Dải thể tích quy định: 10-100% thể tích pipet.

Dải thể tích khuyên dùng:

+ Thông thường 35-100% thể tích quy định.

+ Dưới 35% thì phụ thuộc vào kỹ thuật cao.

Nếu sử dụng thể tích dưới 10% của pipet có thể ảnh hưởng tới độ chính xác hơn 3%.

biomedia.vn/review/17-dieu-can-luu-y-giup-nang-cao-tinh-chinh-xac-khi-su-dung-pipet.html 6/11
12/20/2019 17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng pipet

16. Sử dụng thể tích lớn nhất có thể

Sử dụng pipet với thể tích lớn bao giờ cũng cho kết quả chính xác hơn thể tích nhỏ. Việc hút
chính xác một lượng nhỏ là điều không hề dễ dàng và có thể có những sai số thống kê trong kết
quả của bạn. Để giải quyết vấn đề này, bạn có thể pha loãng dung dịch stock ra khoảng 10 lần
và sử dụng một pipet thể tích lớn hơn để hút dung dịch.

17. Cài đặt pipet

Điều chỉnh quá 1/3 vòng so với thể tích mình mong muốn.

Sau đó điều chỉnh ngược lại về thể tích cần.

Thao tác như thế với các thể tích khác nhau, với các lần khác nhau.

Thực hiện thao tác này có thể làm giảm ảnh hưởng tới 0.5%.

TỔNG QUAN CÁC LỖI THƯỜNG GẶP TRONG PIPET

Lỗi nhỏ là quan trọng đối với những kỹ thuật hiệu chuẩn; với người dùng nên hạn chế lỗi trung
bình và lỗi lớn.

Nguồn:

1. "17 Ways to Stop Pipetting Errors From Ruining Your Experiments", Bite size bio.

2. http://www.ctump.edu.vn

Lược dịch và tổng hợp: Biomedia Việt Nam

biomedia.vn/review/17-dieu-can-luu-y-giup-nang-cao-tinh-chinh-xac-khi-su-dung-pipet.html 7/11
12/20/2019 17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng pipet

Thích Chia sẻ 463 người thích nội dung này. Hãy là người đầu tiên trong số
bạn bè của bạn.

(http://www.kimteco.vn)

BioMedia Việt Nam

15.859 lượt thích

Đã thích Liên hệ với chúng tôi

Bạn và 22 người bạn khác thích nội dung này

 Sản phẩm - Công nghệ mới

Hệ thống thử nghiệm hoạt tính và độc tính tế bào NK

(/product/he-thong-thu-nghiem-hoat-tinh-va-doc-tinh-te-bao-
nk.html)

(/product/he-
thong-thu-
nghiem-hoat-
tinh-va-doc-
tinh-te-bao-
nk.html)

Máy giải trình tự gen điện di mao quản 3500 (/product/may-giai-

trinh-tu-gen-dien-di-mao-quan-3500.html)

(/product/may-
giai-trinh-tu-
gen-dien-di-
mao-quan-
3500.html)

Máy điện di mao quản phân tích đoạn DNA/RNA Fragment

Analyser (/product/may-dien-di-mao-quan-phan-tich-doan-
dnarna-fragment-analyser.html)

(/product/may-
dien-di-mao-
quan-phan-tich-
doan-dnarna-
fragment-
analyser.html)

Máy PCR Gradient 96 giếng (/product/may-pcr-gradient-96-

gieng.html)

biomedia.vn/review/17-dieu-can-luu-y-giup-nang-cao-tinh-chinh-xac-khi-su-dung-pipet.html 8/11
12/20/2019 17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng pipet

(/product/may-
pcr-gradient-96-
gieng.html)

Máy Realtime PCR 7500 (/product/may-realtime-pcr-7500.html)

(/product/may-
realtime-pcr-
7500.html)

Quy trình Thụ tinh trong ống nghiệ…

nghiệ…

biomedia.vn/review/17-dieu-can-luu-y-giup-nang-cao-tinh-chinh-xac-khi-su-dung-pipet.html 9/11
12/20/2019 17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng pipet

 

NEWSLETTER Nhập email đăng ký nhận tin từ Bio Meida

 ĐĂNG KÝ

      

(/)

Công ty truyền thông uy tín trong lĩnh vực Công nghệ sinh học - Xét nghiệm y tế - Thực phẩm - Dược phẩm -
Hóa học - Môi trường…

GIỚI THIỆU VỀ BIOMEDIA

 Tầm nhìn, sứ mệnh (/tam-nhin-su-menh.html)

 Đội ngũ nhân sự (/doi-ngu-nhan-su.html)

 Đánh giá của chuyên gia (/danh-gia-cua-chuyen-gia.html)

 Thiện nguyện (/thien-nguyen.html)

DANH MỤC

 Công nghệ sinh học (/review/cong-nghe-sinh-hoc)

 Xét nghiệm y tế (/review/xet-nghiem-y-te)

 Dược phẩm & thực phẩm (/review/duoc-pham-thuc-pham)

 Thiết bị cơ bản (/review/thiet-bi-co-ban)

 Hóa chất - Vật tư (/review/hoa-chat-vat-tu)

LIÊN HỆ

biomedia.vn/review/17-dieu-can-luu-y-giup-nang-cao-tinh-chinh-xac-khi-su-dung-pipet.html 10/11
12/20/2019 17 điều cần lưu ý giúp nâng cao tính chính xác khi sử dụng pipet

Tòa nhà 200 Nguyễn Xiển

Thanh Xuân, Hà Nội


 04 6662 6362

 info@biomedia.vn (https://mail.google.com/mail/?view=cm&fs=1&tf=1&to=info@biomedia.vn )

© 2015. Bản quyền thuộc về Biomedia Vietnam Group (http://biomedia.vn)

Sự kiện Video Tạp chí BioMedia Chat với BioMedia

biomedia.vn/review/17-dieu-can-luu-y-giup-nang-cao-tinh-chinh-xac-khi-su-dung-pipet.html 11/11