UNIVERSITY OF

BUEA
ADVANCED SCHOOL OF TRANSLATORS AND INTERPRETERS
DEPARTMENT OF TRANSLATION

COURSE TITLE: SPECIALISED TRANSLATION IN TO ENGLISH I

COURSE CODE: TRA 605
PRESENTATION

GENETIC ENGINEERING

Group members

DOUMO NDONWOU NELLY AS15P017

HEU NYAMSI DESIRE AS14P031
NGOUNOU TAKAM CEDRIC AS14P061
NJING NGALA ERIC AS14P064
TANGUA NDOMO PATRICK JUNIOR AS14P074
WOJUNWO LONTSI MIREILLE AS14P083
YAKAN A MEMEE NASSARA AS15PO77

LECTURER

Mr LOSENJE THOMAS
January, 2016
CONTENTS

VII. REFERENCES.................................................................................................................................................3

INTRODUCTION..................................................................................................................................................4

What Is Genetic Engineering?............................................................................................................................4

THE PROCESS OF GENETIC ENGINEERING..........................................................................................................4

Step 1: Isolation of the gene of interest.........................................................................................................4

Step 2: Inserting gene into vector..................................................................................................................4

Step 3: inserting vector into host...................................................................................................................5

Step 4: Cloning the gene of interest...............................................................................................................5

II. TOOLS USED IN GENETIC ENGINEERING.........................................................................................................6

III. METHODS OR TECHNIQUES OF GENETIC ENGINEERING...............................................................................6

1. Bacteria or plasmid as gene carriers...........................................................................................................7

2. Mechanical methods..................................................................................................................................7

The gene cannon or Bioballistics/biolistics/gene gun method...................................................................7

Microinjection............................................................................................................................................7

3. Electro and chemical poration:...............................................................................................................8

In this method, pores are created in the membrane of the cell and genes can be transferred easily.
Special chemicals are used to make pores in the cell surface. Sometimes cells are exposed to weak
electric current, it also makes pores in the surface of the cells and genes can easily pass through these
pores...........................................................................................................................................................8

4. Viruses as gene carriers..............................................................................................................................8

APPLICATIONS OF GENETIC ENGINEERING.........................................................................................................8

Genetic Engineering in Agricultural Forensic and Environmental Biotechnology...........................................8

Genetic Engineering in Agriculture.................................................................................................................8

Genetic Engineering in environmental biotechnology...................................................................................9

ADVANTAGES AND DISADVANTAGES OF GENETIC ENGINEERING....................................................................10

The Top 3 Genetic Engineering Advantages to Humans...............................................................................10

1. The Capacity of Making Disease a part of History...................................................................................10

2
 Humans are considered to be prone in forming one disease and another. As per the disease, it may always
be the result of bad genes inherited from parents. Another reason may be attributed on genetic mutations
due to environmental mutagens that result for diseases such as Alzheimer’s, cystic fibrosis and heart
diseases. These mutations may make the body even more susceptible to infections..................................10

2. A Potential of Increasing the Life Span of People...................................................................................10

According to the studies of scientists, genetic engineering can increase the life span between one-hundred
to one-hundred fifty years. The technique is being applied on healthy individuals; changing his genome
which result to slowing down the process of aging......................................................................................10

3. Better and Highly-graded Pharmaceutical Products...............................................................................10

Genetic engineering acts as an aid for genetics. Thus, this results to better and Highly-Graded products
that can help humans fight their illnesses and diseases...............................................................................10

A. ADVANTAGES OF GENETIC ENGINEERING............................................................................................10

1. With genetic engineering, most of the diseases and illnesses can easily be prevented through
isolating the exact gene that causes them...............................................................................................10

4. Uncertain Effects That May be Brought by Genetically Modified Life Form.......................................11

One of the clear disadvantages of genetic engineering is that it may bring uncertain effects to the
environment and human health...............................................................................................................11

Genetic engineering is a revolutionary domain that has enhanced agriculture, medicine, research, etc., but
it also has some negative aspects that fuel fears about what scientists will do if they are not stopped......12

GLOSSARY.........................................................................................................................................................12

REFERENCES.....................................................................................................................................................14

CONCLUSION

VII. REFERENCES

3
 INTRODUCTION

What Is Genetic Engineering?

Genetic engineering is a set of technologies used to change the genetic makeup of cells, including the
transfer of genes within and across species boundaries to produce improved or novel organisms. The
techniques involve sophisticated manipulations of genetic material and other biologically important
chemicals.

Genes are the chemical blueprints that determine an organism's traits. Moving genes from one
organism to another transfers those traits. Through genetic engineering, organisms can be given
targeted combinations of new genes—and therefore new combinations of traits—that do not occur in
nature and, indeed, cannot be developed by natural means

THE PROCESS OF GENETIC ENGINEERING

Genetic engineering is done in four major steps:

Step 1: Isolation of the gene of interest

The first step involves choosing and isolating the gene that will be inserted into the genetically
modified organism. Gene of interest is isolated from the DNA molecule using the restriction
enzymes. The desired DNA is cleaved from the donating chromosome by the action of restriction
enzymes, which recognise and cut specific nucleotide segments, leaving a “sticky end” on both ends.

Usually the gene of interest will already be available as an element of a “library” of short sections of
the total genome of the donor strain or species. If this is the case the procedure followed is to
multiply the gene using the PCR reaction. If, however, the gene is to be taken from a genome not
previously investigated, a more complex procedure will be followed. The use of the technique of the
Polymerase Chain Reaction (PCR) enables the gene in both the cases noted above to be multiplied to
the level of several million copies needed

Step 2: Inserting gene into vector

After isolation, the gene of interest is inserted into a vector( molecule of DNA which is used to carry
a foreign gene into a host cell )usually a plasmid, for transfer to the receiving chromosome. Plasmids
are an ideal vector because they replicate easily inside host bacteria and readily accept and transfer
4
new genes. Plasmids are circular DNA molecules found in the cytoplasm of bacteria that bond with
the desired DNA fragment with the help of the joining enzyme, DNA ligase, to create the resulting
recombinant DNA.

Step 3: inserting vector into host

The new gene(s), called a transgene is delivered into cells of the recipient organism. This is called
transformation. The most common transformation technique uses a bacteria that naturally genetically
engineer plants with its own DNA. The transgene is inserted into the bacteria, which then delivers it
into cells of the organism being engineered. Another technique, called the gene gun method, shoots
microscopic gold particles coated with copies of the transgene into cells of the recipient organism.

Step 4: Cloning the gene of interest

When the host cell reproduces, the plasmids inside also reproduce, making multiple clones of their
DNA. Because the plasmid DNA contains the desired as well as unwanted DNA clones, the entire
product is referred to as a gene library. The desired gene is similar to one book in that library. When
many copies of the target gene have been generated, the gene is placed in a “construct” Once the
gene of interest has been ligated enzymatically into the construct, this whole complex is ligated into
bacterial plasmids, which act as “production vectors” and enable the gene to be replicated many
times within the bacterial cells.
Step 5: Extraction of desired gene product

To recover the desired DNA, the current technology is to screen unwanted cells from the mixture and
then use gel electrophoresis to separate the remaining genes by movement on an electric grid. Gel
electrophoresis uses a positively charged grid to attract the negatively charged DNA fragments,
thereby separating them by size, because the smaller ones will migrate the most. Radioactive or
fluorescent probes are added, which attract and bind with the desired DNA to produce visible bands.
Once isolated, the DNA is available for commercial use.

5
 II. TOOLS USED IN GENETIC ENGINEERING

Well ideally you only need basic horticultural and gardening knowledge, genetic manipulation has
been performed traditionally for hundreds of years by farmers and flower breeders. Their purpose
was breeding more aesthetically appealing flowers or better tasting, high yield, disease resistant
plants. You can make use of everyday stationary tools and items (scissors/blades/wax/polythene
covers/sheets) some cases you have to separate your stocks of plants to prevent unwanted
crossbreeding. presumably a green house of sorts to separate your plant varieties from wild ones you
also need to regulate the nutrients provided and fertilizers and pesticides given. So yeah again
knowledge of horticulture and simple tools would suffice.

 Digital gel photography systems for recording *and analysis of results of gel electrophoresis

 Thermocyclers for amplification of DNA using the polymerase chain reaction (PCR) 

 Horizontal gel boxes and power packs for separation of DNA and RNA molecules 

 Turbo-blotter for rapid preparation of Southern blots for DNA analysis 

 U.V. Cross linker for attaching DNA to nylon filters 

 SequiGene Vertical Gel Apparatus for sequencing DNA 

 Gene Pulser Electroporator for rapid transformation of genetically engineered bacteria 

 Bellco hybridization ovens for incubation of Southern blots with nucleotide probes 

 X-ray film processor for detection of autoradiographic and chemiluminescent signals 

 Luminometer for analysis of transient transfection with luciferase reporter genes 

 BioRad Smartspec spectrophotometers for measurement of DNA and RNA concentrations 

 Beckman centrifuges for fractionation of macromolecules

III. METHODS OR TECHNIQUES OF GENETIC ENGINEERING

Methods for gene insertion

Different means are used for carrying the desired gene into the hereditary substance. For plants, the
most common method is the use of a bacterium, AgrobacteriumTumefacsiens. This method is
however not usable for cereals. For those, insertion with the "gene cannon" or microinjection is used.
For animals, certain viruses are used. These methods will be described briefly below.

1. Bacteria or plasmid as gene carriers

6
The recipient cell is a microorganism (bacteria, yeast, fungi).A bacteria with the name
Agrobacterium Tumefasciens has the ability to induce a kind of benign tumor growth in the plant it
infects. This it achieves by inserting some genes into the DNA of the plant. In genetic engineering,
the gene that is to be inserted is hooked on to the bacterial DNA. Then the recipient cells are exposed
to the bacterium, so that they become infected by it. The bacterial DNA with the engineered gene is
then inserted into the DNA of the recipient.

2. Mechanical methods

The gene cannon or Bioballistics/biolistics/gene gun method

It uses very small golden beads as cannon balls. The desired gene is "glued" on to the surface of the
ball. Thereafter the ball is shot into the cell nucleus.

In this method, small silver particles are used to insert the genetic material into the recipient cell.
These silvers are coated with the genetic material and when released in the cell, genetic material
incorporates with the genes of the host cell. In one projectile method, shot gun is used to insert the
silvers into the host cell

Microinjection
It is a mechanical method A solution with the desired gene is injected into the cell. It is not necessary
that only plasmids and vectors should be used for the transfer of genes into the cells. There are
methods which are not dependent on plasmids and vectors. One of these methods is microinjection.
In this method, foreign gene is integrated into the cell by just injecting it into the recipient cell. When
large cell of plants and animals are concerned, then a fine glass needle is used. The injected genes
automatically enter into the nucleus where they incorporate with the host cell’s genetic material and
replicate. The receptor cell is an animal

3. Electro and chemical poration:

In this method, pores are created in the membrane of the cell and genes can be transferred easily.
Special chemicals are used to make pores in the cell surface. Sometimes cells are exposed to weak
electric current, it also makes pores in the surface of the cells and genes can easily pass through these
pores.
With micro-injection or electroporation, regeneration is difficult.

7
4. Viruses as gene carriers

Viruses are pieces of DNA and they can be used provided they are not pathogenic. Some are
encapsulated within a protein shell. Their DNA enters the cell at infection and goes to the cell
nucleus. There the virus DNA forces the cell to make many thousands of copies of the virus. The
viruses used for gene transfer are modified so that they will not induce virus copying in the cell.
They will introduce the desired DNA into the DNA of the recipient in similar manner as the
Bacterium tumefasciens. Along with it some virus genes also are inserted.

Microinjection (explained above)

APPLICATIONS OF GENETIC ENGINEERING

Genetic Engineering in Agricultural Forensic and Environmental Biotechnology

Genetic engineering has rapidly spread across the world, thereby making it difficult to generate an
exhaustive list of all possible applications, reason why we are going to focus mainly on three areas:
agricultural, forensic and environmental biotechnology.

Genetic Engineering in Agriculture

There are several ways in which genetic engineering may be used to benefit agriculture
and food production.
To begin with, there exist the production of vaccines and the application of methods for
transferring genes for commercially important traits such as; milk yield, butter fat and higher
proportion of lean meat likely to benefit animal husbandry. For example; the bovine growth hormone
produced through genetic engineering has been used since the late 1980’s to boost milk production
by the cow. Another example of using genetic engineering in animal husbandry include hormones
for faster growth rate in poultry, production of recombinant human proteins in the milk of livestock
etc.
In addition, genetic engineering has also played an important role in genetically modified
organisms (GMOs) especially in the US as it is even estimated that over 70% of US food contain
some ingredients from the GMOs. Genetic engineering is expected to dramatically alter the
conventional approaches of developing new strains of crops through breeding. The technology

8
allows transferring genes for nitrogen fixation, improving photosynthesis, resistance to pests,
pathogens and herbicides, and tolerance to frost, drought, increased salinity and improved nutritional
value and consumer acceptability. For example; the first genetically engineered potato was improved
for human consumption by the US government in 1995 and by Canada in 1996. This New leaf potato
developed by corporate giant Monsanto, carries a gene from the bacterium Bacillus thuringiensis.
This gene produces a toxic protein to the Colorado potato beetle, an insect which causes substantial
loss of the crop if left uncontrolled. The production of this protein by the potato plants equips them
with resistance to beetles, therefore alleviating crop loss, saving cost on pesticides and reducing the
risk of environment contamination. At least five transgenic (transgenics refers to those specific
engineering processes which remove genetic material from species of plant or animal and add it to a
different species) corn strains with resistance to herbicides or pathogenes have been developed and
commercially produce by US farmers by 2002.

Genetic Engineering in environmental biotechnology

DNA fingerprints from samples collected at the crime scene provide strong evidence in trials thus
help solving many violent crimes. DNA can easily be isolated from tissue left at a crime scene, a
splattering of blood, a hair sample or even skin left under a victim’s fingernails. Nowadays, a variety
of techniques can be used routinely to determine the probability of matching between sample DNA
and that of a suspect. DNA fingerprints are also useful in parenthood disputes, settling the disputes
over who owns the right to certain property, studying the genealogy of various species.
Moreover, genetic engineering can alter the metabolism of microorganisms, which enables them to
absorb and degrade waste/hazardous material from environment. The growth rate and metabolic
capabilities of micro organisms offer great potential for coping with some environmental problems.
Sewage plants can use engineered bacteria to degrade many organic compounds into non-toxic
substances. Microbes may be engineered to detoxify specific toxic wastes in waste dumps or oil
spills. Many bacteria can extract heavy metals (lead, copper, etc.) from their surroundings and
incorporate them into compounds that are recoverable, thus serving to clean these toxic heavy
metals from environment.

ADVANTAGES AND DISADVANTAGES OF GENETIC ENGINEERING

The Top 3 Genetic Engineering Advantages to Humans

1. The Capacity of Making Disease a part of History

9
Humans are considered to be prone in forming one disease and another. As per the disease, it may
always be the result of bad genes inherited from parents. Another reason may be attributed on
genetic mutations due to environmental mutagens that result for diseases such as Alzheimer’s, cystic
fibrosis and heart diseases. These mutations may make the body even more susceptible to infections.

2. A Potential of Increasing the Life Span of People

According to the studies of scientists, genetic engineering can increase the life span between one-
hundred to one-hundred fifty years. The technique is being applied on healthy individuals; changing
his genome which result to slowing down the process of aging.

3. Better and Highly-graded Pharmaceutical Products

Genetic engineering acts as an aid for genetics. Thus, this results to better and Highly-Graded
products that can help humans fight their illnesses and diseases.

A. ADVANTAGES OF GENETIC ENGINEERING

1. With genetic engineering, most of the diseases and illnesses can easily be prevented through
isolating the exact gene that causes them.

2. There are also infectious diseases that can be treated with the use of genetic engineering. This is
done by implanting the genes that are associated with antigen and antiviral proteins.

3. The most desirable traits of certain organisms can be pin pointed and integrated into other
organism’s DNA.

4. Genetic engineering has the ability to increase the genetic diversity as well as produce variant
alleles that can be implanted to other species. It is also possible to change the heredity of the wheat
plants and grow insulin.

B. DISADVANTAGES

The Top 4 Genetic Engineering Disadvantages

1. Unknown Consequences of Viral Genes in the Human Body

10
Considering that genetic engineering employs viral vector that carries functional gene inside the
human body; the consequences are still unknown. There are no clues as to where functional genes
are being placed. They may even substitute the important genes, instead of mutated genes. Thus, this
leads to another health condition or disease to human.

2. Genetic Diversity: Now a Thing of the Past

As defective genes are replaced with functional gene, then it is expected that genetic diversity will
now be a thing of the past. And if human beings will have identical genomes, the population as a
whole will be susceptible to virus or disease. This may lead to human extinction in the earth

3. It Borderlines on the Issues Pertaining on Morality

With many people who religiously believe in God, or who are born and baptized as Christians,
genetic engineering may not be acceptable. Somehow, people can be questioned of what gives them
the right to manipulate divine laws. It also questions the theory of Darwin, “the survival of the
fittest”.

4. Uncertain Effects That May be Brought by Genetically Modified Life Form

One of the clear disadvantages of genetic engineering is that it may bring uncertain effects to the
environment and human health.

1. There are scientists who believe that the existence of hereditarily modified genes can have an
irreversible effects and associated consequences.

2. Genetic engineering can hinder the moral issues particularly in religion. They also wonder if man
has the ability and right to influence the course and law of nature.

3. There are also professional scientists who manipulated the so called genetic sequence to obtain the
main purpose of human reproduction organs that are intended for health purposes.

4. The process of genetic engineering is quite tricky and risky process and you need to gather a wide
variety of information before attempting to engage in the process of genetic engineering.

CONCLUSION

11
Genetic engineering is a revolutionary domain that has enhanced agriculture, medicine, research,
etc., but it also has some negative aspects that fuel fears about what scientists will do if they are not
stopped.

GLOSSARY

FRENCH ENGLISH

ADN complémentaire,  ADNc , DNA complementary DNA

acides aminés aminated acid

ADN bi caténaire. double-strand DNA

ADN génomique DNA/ Genonic DNA

ADN ligase DNA ligase

ADN monocaténaire single -strand DNA.

AND récombiné recombinant DNA

angiogenèse angiogenesis

biolistique Bioballistics /biolistics gene/ gun

method

 biologie moléculaire Molecuolar Biology

brin d’ADN ADN strand

canon à gènes (biolistique) gene cannon

cassure de l’ADN break in DNA

cellule assistante cell helper

cellule donneuse donor cell

cellule hôte host cell

cellule receveuse recipient cell

12
cellule somatique somatic cell

cellules souches stem cell

chromatine chromatin

clivage de l’ADN DNA cleavage

clonage cloning

coronavirus coronavirus

cosmide cosmid

couper l’ADN cut DNA

division cellulaire cell division

électroporation ,électroperméabilisation electroporation

endonucléases endonuclease

enzyme de restriction restriction enzymes

enzyme de restriction restriction enzyme

enzymes de restrictions synthétiques synthetic restriction enzymes

eucaryote eukaryote

fusion de protoplaste protoplast fusion

gamète gamete

gène d’intérêt gene of interest

gene impliqués dans la transduction du signal pathway gene

gene marquée imprinted gene

génétiquement modifié genetically modified (GM).

génotype genotype

gliobastrome gliobastoma

hormone de croissance growth hormone

13
hybride somatique somatic hybrid cell

ingiénierie ds génomes genome engineering

isolement isolation

livre library

locus locus

lymphocytes T T lymphocyte

manipulation des gènes gene editing

méganucléase meganucleases

microinjection microinjection

mitose mitosis

modification des genomes genetic modification/genome

editing

noyau cellulaire cell nucleus

nucléase à doigt de zinc zinc finger nuclease

nucléotide nucleotide

OGM (organisme génétique modifié genetically modified organisms

palindromiques palindromic

phasemide phasemid

phénotype phenotype

picornavirus picornaviruses

Plantes génétiquement modifiées. genetically modified crops

plasmides plasmid

protoplaste protoplast

réaction en chaîne de la polymérase,  PCR amplification par la Polymerase Chain Reaction (PCR)
polymérase

14
recombianaison homologue Homologous recombination

recombinaison génétique Genetic recombination

Recombinaison homologue Homologous recombination (HR)

recombinaison méiotique meiotic recombination

recombinant  récombiné

rétrovirus retrovirus

séquençage sequencing

séquences d’’ADN DNA sequence

TALEN TALEN

transfert horizontal de gènes  horizontal gene transfer

transgène transgene

transposon /gene sauteur transposon/jumping gene

variation génétique genetic variation

virus à ARN RNA virus

15
 REFERENCES

http://www.clarkson.ed-u/biology/undergraduate/facilities/molecular.html

https://www.boundless.com/microbiology/textbooks/boundless-microbiology-textbook/microbial-
genetics-7/genetic-engineering-products-93/applications-of-genetic-engineering-498-6642/
http://www.hgalert.org/topics/hge/http://www.sciencegroup.org.uk/ifgene/germline.htm http://nyln.org/ge
netic-engineering-in-humans-pros-and-cons-list

http://www.sciencedaily.com/terms/somatic_cell_nuclear_transfer.htm

http://www.nature.com/nbt/journal/v17/n5/full/nbt0599_456.html

http://www.ingentaconnect.com/content/cog/or/2003/00000013/F0050006/or298

http://www.sciencedaily.com/terms/somatic_cell_nuclear_transfer.htm

http://www.nature.com/nature/journal/v419/n6907/full/nature01079.html

http://www.hhmi.org/biointeractive/somatic-cell-nuclear-transfer-animation

http://www.hhmi.org/biointeractive/somatic-cell-nuclear-transfer-animation

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3772789/

https://www.google.cm/?gws_rd=ssl#q=MITOCHONDRIAL+DNA+TRANSFER

http://www.genetics.org/content/178/1/47.full

http://ghr.nlm.nih.gov/handbook/basics/mtdna

https://www.asrm.org/uploadedFiles/ASRM_Content/News_and_Publications/Ethics_Committee_Reports_a
nd_Statements/cloning.pdf

16
ANNEXE : Texts on genetic engineering

Text 1 : Outils du génie génétique

Recombinaison homologue

Les premières tentatives de modification des génomes ont consisté à modifier des séquences
génétiques en utilisant uniquement la recombinaison homologue. Ce mécanisme de maintenance
naturel de l’ADN permet de réparer un brin d’ADN en utilisant comme modèle une séquence
homologue située sur un autre brin.

Il est possible d’induire des recombinaisons homologues entre l’ADN naturel d’une cellule et un brin
d’ADN exogène introduit par les chercheurs, en utilisant comme vecteur le génome modifié d’un
rétrovirus par exemple, Le phénomène de recombinaison est suffisamment souple pour qu’il soit
possible d‘introduire un certain niveau de changement (ajout, suppression ou modification d’un
portion d’ADN) au niveau de la zone d’homologie visée.

Dès les années 1980, Mario R. Capecchi et Oliver Smithies ont travaillé sur la recombinaison
homologue de l'ADN comme outil de « ciblage de gène », c’est-à-dire comme instrument
d’inactivation ou de modification de gènes précis. Avec la collaboration de Martin J. Evans, ils ont
mis au point un procédé permettant de modifier le génome de souris en modifiant l’ADN de cellules
souches embryonnaires murines en culture, et en injectant ces cellules souches modifiées dans des
embryons de souris. Les souris génétiquement modifiées ainsi générées permettent d’étudier des
maladies humaines en laboratoire. C’est aujourd’hui un outil couramment utilisé en recherche
médicale. Les travaux des trois chercheurs leur ont valu le Prix Nobel de médecine en 2007[4] .

Enzymes de restrictions

Les enzymes de restriction couramment utilisées en biologie moléculaire pour couper l’ADN
interagissent avec des séquences constituées de 1 à 10 nucléotides. Ces séquences, très courtes et
souvent palindromiques, sont généralement présentes à plusieurs endroits du génome (le génome
humain comprend 6,4 milliards de bases). Les enzymes de restriction sont donc susceptibles de
couper la molécule d’ADN à de multiples reprises.

Pour pratiquer une chirurgie des génomes précise et sûre, les scientifiques se sont donc tournés vers
des outils plus précis. L’ingénierie ciblée des génomes est rendue possible par l’utilisation
d’enzymes capables de reconnaître et d’interagir avec des séquences d’ADN suffisamment longues
17
pour n’exister, en toute probabilité, qu’en un exemplaire unique dans un génome donné.
L’intervention sur l’ADN se produit alors précisément au niveau de la séquence ciblée. Avec des
sites de reconnaissance de plus de 12 paires de bases, les méganucléases et les nucléases à doigts de
zinc répondent à ces critères de spécificité.

Une fois la coupure de l’ADN effectuée, les mécanismes naturels de réparation de l’ADN et la
recombinaison homologue permettent d’incorporer une séquence modifiée ou un gène nouveau.

Le succès de ces différentes étapes (reconnaissance, coupure, recombinaison) dépend de divers

facteurs, parmi lesquels l’efficacité du vecteur qui introduit l’enzyme dans la cellule, l’activité
enzymatique de coupure, les capacités cellulaires de recombinaison homologue et probablement
l’état de la chromatine au locus considéré.

Méganucléases

Article détaillé : méganucléase.

Découvertes à la fin des années 1980, les méganucléases sont des enzymes de la famille des
endonucléases qui présentent la caractéristique de reconnaître des séquences d’ADN de grande taille,
de 12 à 40 paires de bases [5]. Parmi ces méganucléases, les protéines du groupe LAGLIDADG, qui
doivent leur nom à une séquence d’acides aminés conservée, sont les plus nombreuses et les mieux
connues.

Ces enzymes ont été identifiées dès les années 1990 comme des outils prometteurs pour l’ingénierie
des génomes. Néanmoins, malgré leur diversité dans la nature, et même si chacune d’elles peut
présenter de petites variations de son site de reconnaissance de l’ADN, il existe trop peu de chances
de trouver la méganucléase adaptée à l’intervention sur une séquence d’ADN bien déterminée.
Chaque nouvelle cible d’ingénierie génomique nécessite ainsi une première phase d’ingénierie
protéique afin de produire une méganucléase sur mesure.

Nucléases à doigts de zinc

Article détaillé : nucléase à doigt de zinc.

Les nucléases à doigt de zinc sont des enzymes de restrictions synthétiques créées en fusionnant des
domaine à doigt de zinc avec des domaine de coupure de l'ADN. La combinaison de 6 à 8 doigts de
zinc dont les domaines de reconnaissance ont été caractérisés, il est possible d’obtenir des protéines
spécifiques de séquences d’une vingtaine de paires de bases. On peut ainsi contrôler l’expression
d’un gène spécifique. Il a été montré que cette stratégie permet de promouvoir un processus
d’angiogenèse chez l’animal. Il est également possible de fusionner la protéine ainsi construite avec
le domaine catalytique d’une endonucléase afin de provoquer une cassure ciblée de l’ADN et
d’utiliser ces protéines comme outils d’ingénierie des génomes.

Les nucléases à doigts de zinc sont des outils de recherche et développement qui ont déjà été utilisé
pour modifier des génomes variés, notamment par les laboratoires fédérés dans le Zinc Finger
Consortium. L’entreprise américaine Sangamo Biosciences utilise les nucléases à doigts de zinc pour
des travaux sur l’ingénierie génétique des cellules souches et la modification de cellules

18
immunitaires à des fins thérapeutiques,. Des lymphocytes T modifiés font actuellement l’objet
d’essais cliniques de phase I, portant sur le traitement d’un cancer du cerveau (le glioblastrome) et la
lutte contre le SIDA.

Text 2 :

Historique

Au début du XXe, la redécouverte des travaux de Mendel (1822-1888) et les travaux de Morgan
(1866-1945) sur des mouches permettent de comprendre que l'hérédité est due à la transmission de
particules appelés gènes, disposés de manière linéaire sur les chromosomes. Dans les années 1950,
est mise en évidence la nature chimique des gènes, ainsi que la structure moléculaire de l'ADN. En
1965, découverte des enzymes de restriction confirmée en 1973 par Paul Berg et ses collaborateurs.
Ces protéines capables de découper et recoller précisément l’ADN, donnent aux chercheurs les outils
qui leur manquaient pour établir une cartographie du génome. Elle ouvre aussi la voie à la
transgénèse, qui permet d'intervenir in vitro sur des portions d'ADN et donc des gènes. La
technologie de l'ADN recombinant permet l'insertion d'une portion d'ADN (un ou plusieurs gènes)
dans un autre ADN.

Chez certains organismes, les technologies mises au point pour introduire un gène dans la cellule
vivante restent cependant limitées par le caractère aléatoire de l’insertion de la nouvelle séquence
dans le génome. Positionné aléatoirement, le nouveau gène peut inactiver ou perturber le
fonctionnement de gènes tiers, ou même être à l’origine d’effets indésirables graves comme le
déclenchement d’un processus de cancérisation. Les technologies d'insertion non ciblées ne
permettent pas d’obtenir de reproductibilité de l’expérience : il n’y a pas de garantie que la nouvelle
séquence soit insérée toujours au même endroit.

Depuis la fin des années 1990, une nouvelle génération de technologies, capitalise sur des
connaissances et des technologies plus récentes, comme les méganucléases et les nucléases à doigts
de zinc. Elles permettent d’intervenir sur une zone spécifique de l’ADN afin d’accroître la précision
de la correction ou de l’insertion pratiquée, de prévenir ainsi les toxicités cellulaires et d’offrir une
reproductibilité fiable de l'intervention.

Ces nouvelles technologies d'ingénierie génomique, avec la génomique synthétique (conception de

génomes artificiels), figurent actuellement parmi les technologies les plus prometteuses en termes de
recherche biologique appliquée et d’innovation industrielle.

Text 3 :

Médicaments produits grâce au génie génétique

Les médicaments sont des substances qui atténuent les effets des maladies et, dans le meilleur des
cas, guérissent le patient. Il existe des médicaments qui sont composés de protéines fabriquées à
l'aide du génie génétique.
19
Pour cela, le gène spécifique humain est introduit dans un anneau d'ADN (plasmide). Ensuite on
transfère ce plasmide dans des bactéries. Grâce au gène humain, celles-ci produisent la protéine
humaine correspondante qui est alors isolée des bactéries, purifiée et finalement utilisée comme
médicament. Tu peux en apprendre plus à ce sujet dans le chapitre « Introduire un gène humain dans
une bactérie ».

En 1982, les Etats-Unis ont officiellement accepté le premier médicament produit par génie
génétique, il s'agit de l'insuline humaine utilisée pour le traitement du diabète. Entre-temps beaucoup
d'autres médicaments issus du génie génétique sont apparus, comme par exemple des médicaments
pour le traitement de l'anémie, de l'hémophilie A, de maladies pulmonaires et neurodégénératives, de
perturbations de croissance, de la polyarthrose (inflammation des articulations) et de bien d'autres
maux.

Plus de sécurité grâce au génie génétique

Quand on extrait les protéines utiles en médecine à partir d'humains ou d'animaux, il existe toujours
le risque qu'on transmette, en même temps que la protéine thérapeutique, des maladies au patient. Ce
risque n'existe pas si l'on produit des protéines par génie génétique.

Un exemple :

Dans le passé, on isolait l'hormone de croissance utilisée pour le traitement du nanisme d'une
certaine partie du cerveau de personnes décédées, le plus souvent à un âge avancé. Parmi les enfants
ainsi traités, quelques-uns ont développé une maladie grave du cerveau, qui leur a été transmise par
malchance en même temps que l'hormone. De nos jours, les enfants atteints de nanisme sont traités à
l'aide d'une hormone de croissance produite par des bactéries génétiquement modifiées. Le risque
d'attraper une maladie cérébrale à travers le médicament est ainsi exclu.

Des quantités suffisantes grâce au génie génétique

Il est difficile d'extraire les protéines utiles en médecine du sang ou des tissus d'humains ou
d'animaux. Il est par contre possible de produire ces protéines quasiment en quantité illimitée en
utilisant des cellules génétiquement modifiées.

Un exemple:

Linterféron alpha est un médicament utilisé pour le traitement de la jaunisse, du SIDA ainsi que de
certains cancers. Il faudrait environ 40'000 litres de sang humain pour obtenir un gramme
d'interféron alpha. De nos jours, l'interféron alpha est produit en quantité quasi illimitée dans des
bactéries génétiquement modifiées.

Moins d'effets secondaires grâce au génie génétique

Les protéines utiles en médecine qui proviennent d'animaux ne sont pas toujours identiques aux
protéines correspondantes produites par les humains. C'est pourquoi on produit les protéines utiles en
médecine dans des cellules mammifères dans lesquels le gène humain d'intérêt a été introduit. Les
protéines produites sont ainsi mieux tolérées par le patient.

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 Un médicament dans le lait animal, une vision futuriste

En Ecosse, les chercheurs ont réussi à élever une brebis génétiquement modifiée qui produit dans son
lait des quantités relativement grandes d'une certaine protéine humaine qui peut être utilisée pour le
traitement d'une affection grave au niveau des poumons. Cette brebis ne se distingue de ses
congénères que par le fait que son lait contienne la protéine thérapeutique. Le lait est alors récolté et
la protéine thérapeutique isolée des autres composantes du lait.

2000 de ces brebis transgéniques seraient suffisantes pour couvrir le besoin mondial en ce
médicament. On appelle cette manière de fabriquer un médicament «gene pharming».

Des médicaments produits à l'aide de plantes

Ces plantes génétiquement modifiées existent déjà dans les laboratoires des généticiens: elles
produisent des protéines humaines qu'on pourra peut-être employer un jour comme médicaments.

Un exemple:

En transférant deux gènes humains sur des plants de tabac, les chercheurs ont réussi à leur faire
produire une protéine nommée hémoglobine. Il existe également des espèces de maïs ou de soja
génétiquement modifiées qui produisent dans leurs graines des protéines sanguines ou des
anticorps utiles à la médecine.

Text 4 : Le génie génétique et les vaccins

Le système immunitaire
Tu as été infecté par un virus et tu es maintenant au lit souffrant d'un refroidissement. Dans de telles
situations, c'est au tour du système immunitaire de jouer. Celui-ci se compose d'une variété de globules
blancs qui sont répartis par le biais du sang dans le corps entier.
Le système immunitaire identifie les virus comme « corps étrangers » et produit des anticorps qui
s'accrochent alors à certaines protéines(antigènes) présentes à la surface des virus.
Les virus alors identifiés et figés par les anticorps sont mangés par des globules blancs spécialisés, les
macrophages (= grandes cellules mangeuses).

Vaccins
Le but d'un vaccin est de se protéger contre les agents pathogènes. Il existe deux sortes de vaccins :

o Vaccination active: on administre au patient des agents pathogènes qui ont été affaiblis ou tués.
Ceux-ci ne provoque pas de maladie mais, cependant, le système immunitaire produit les anticorps
correspondants à ces agents pathogènes.
o Vaccination passive: on administre directement au patient les anticorps contre l'agent
pathogène.
Ceci est valable pour les deux sortes de vaccins : grâce aux vaccins, le système immunitaire est préparé à
l'avance dans le cas d'une infection par l'agent pathogène vivant. Ainsi le développement de la maladie est
empêché.

Le génie génétique permet de produire des vaccins

Depuis 1983, des vaccins sont également produits dans des bactéries ou des cellules supérieures
génétiquement modifiées. Il existe, à la surface des agents pathogènes, des protéines contre lesquelles le

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système immunitaire de la personne infectée forme des anticorps. Grâce au génie génétique, il est
possible d'introduire les gènes correspondants à ces protéines dans des bactéries ou des cellules
supérieures, qui vont alors produire ces protéines de surface. Elles sont utilisables comme vaccins. Le
vaccin contre le virus de l'hépatite B (jaunisse), par exemple, a été fabriqué de cette manière.
La manière dont sont génétiquement modifiées les cellules et comment les protéines produites sont isolées
sont expliquées au chapitre « introduire un gène humain dans une bactérie ».

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