MICROBIOLOGIA

GENERAL
Diversidad Celular Microbiana
 Procariota Vs. Eucariota
MICROORGANISMOS Y MICROBIOLOGÍA 3

Pared celular

Membrana

UNIDAD 1
citoplasmática

John Bozzola and

M.T. Madigan
Nucleoide

Citoplasma
Bacteria
Plásmido

Ribosomas

H. König and
K.O. Stetter
(a) Procariota
Archaea
Pared celular
Membrana
citoplasmática
Mitocondria
Membrana
nuclear
Núcleo

Ribosomas

Retículo
endoplasmático

S.F. Conti and T.D. Brock

Citoplasma
Aparato
de Golgi

Eukarya
(b) Eucariota

Figura 1.2 Estructura de una célula microbiana. (a) (Izquierda) Esquema de una célula procariota. (Derecha) Micrografía electrónica de Heliobacterium
modesticaldum (Bacteria, la célula tiene un diámetro aproximado de 1 μm) y Thermoproteus neutrophilus (Archaea, célula con un diámetro aproximado de
0,5 μm). (b) (Izquierda) Esquema de una célula eucariota. (Derecha) Micrografía electrónica de una célula de Saccharomyces cerevisiae (Eukarya, célula con un
diámetro aproximado de 8 μm).
 How does scotophobotaxis differ from phototaxis?
gella or cilia—structures that confer motility—and a cell wall is
present in many, such as the fungi and algae.
Eukaryotic cell membranes contain sterols. These molecules,
V • eukaryotic Microbial Cells absent from all but a few prokaryotic cells, lend structural strength
to the eukaryotic cell, something especially important to those

C ompared with prokaryotic cells, microbial eukaryotes typi-

cally have structurally more complex and much larger cells.
We complete our study of microbial cell structure and function
eukaryotes that lack a cell wall, such as the protozoa or animal cells.

The nucleus
The nucleus contains the chromosomes of the eukaryotic cell.

La célula Eucariota
with a consideration of structure/function issues in microbial
eukaryotes, common models for the study of eukaryotic biology. DNA within the nucleus is wound around basic (positively charged)
Microbial eukaryotes include the fungi, the algae, and the proteins called histones, which tightly pack the negatively

Microtubules Mitochondrion
Smooth endoplasmic reticulum

Rough endoplasmic
reticulum
Flagellum

Cytoplasmic
membrane

Mitochondrion Ribosomes

Microfilaments

Lysosome
Golgi complex

CHAPTER 2 • M i c r o b i a l C e l l S t r u c t u r e a n d F u n c t i o n 101

Chloroplast
Double-stranded DNA

UNIT 1
Nucleus
Nuclear envelope Nucleus Nuclear
Nucleosome
Histone H1 core
pores

Nuclear pores Nucleolus Vacuole

Lipid
vacuole

Figure 2.45 Cutaway schematic of a microbial eukaryote. Although all eukaryotic cells contain a nucleus, Mitochondria

not all organelles and other structures shown are present in all microbial eukaryotes. Not shown is the cell wall,

E. Guth, T. Hashimoto, and S.F. Conti

found in fungi, algae, plants, and a few protists.

Core histones

(a) (b)

Figure 2.46 The nucleus and dNA packaging in eukaryotes. (a) Electron micrograph of a yeast cell
prepared in such a way as to reveal a surface view of the nucleus. The cell is about 8 μm wide. (b) Packaging of
DNA around histone proteins to form a nucleosome. Nucleosomes are arranged along the DNA strand like beads
on a string and aggregate to form chromosomes during the process of mitosis (see Figure 2.47).

charged DNA to form nucleosomes (Figure 2.46) and from them, two genetic states: haploid or diploid. Diploid cells have two cop-
chromosomes. The nucleus is enclosed by a pair of membranes, ies of each chromosome whereas haploid cells have only one. For
each with its own function, separated by a space. The innermost example, the brewer’s yeast Saccharomyces cerevisiae can exist in
membrane is a simple sac while the outermost membrane is in the haploid state (16 chromosomes) as well as in the diploid
many places continuous with the endoplasmic reticulum. The state (32 chromosomes). However, regardless of its genetic state,
Ribosoma procariota Vs. eucariota
38 LOS FUNDAMENTOS DE LA MICROBIOLOGÍA

Glicerol ácidos grasos de la membrana citoplasmática tienen normal-

mente de 14 a 20 átomos de carbono.
O H
La membrana citoplasmática tiene solamente de 8 a 10 nm
C O C H
de ancho, pero se puede ver en el microscopio electrónico de
Membrana celular y su rol
H3C O
C O C H transmisión en forma de dos líneas oscuras separadas por una
H 3C O línea clara (Figura 2.14c). Esta membrana unitaria, como se la
H C O P O– denomina (porque cada capa de fosfolípidos forma la mitad de
Ácidos grasos

Fosfato
H O
CH2
biológico.
la «unidad»), está formada por una bicapa fosfolipídica con pro-
teínas embebidas en ella (Figura 2.15). Aunque en las represen-
CH2 taciones la membrana parece rígida, en realidad tiene cierta
Etanolamina
+
NH3 fluidez, con una consistencia que recuerda a la de un aceite
(a)
poco viscoso. Así pues, las proteínas embebidas en la mem-
brana tienen libertad de movimiento. Las membranas citoplas-
Región máticas de algunas bacterias tienen unas moléculas similares
hidrófila a78los Uesteroles,
N I T 1 • T h ellamadas hopanoides,
FoUNdATIo N S o F M I C r o b que
I o l o gles
y confieren rigidez.

Los esteroles son moléculas rígidas y planas que aportan resis-

Functions of the cytoplasmic membrane
Ácidos Región
grasos hidrófoba
tencia a las membranas de la célula eucariota, y los hopanoides
cumplen una función parecida en Bacteria. + +++ + + + + + + + + + + + ++ +
+ – – – – – – – – – – – – – – –– +
UNIT 1

+ –– – +
Región + –– – +
–
hidrófila Proteínas de membrana + –
+
++
–– – – – – – – – – – – – ––
– +
+
+
(b) El contenido proteico de la membrana Solutes
citoplasmática es bas- +++ + + + + + + + + + + ++ +
– OH–
Glicerol-fosfatos tante elevado. Las proteínas+ Hde +
membrana tienen, normal-
Ácidos mente, una superficie
(a) Permeability barrier: hidrófoba en(b) las regiones
Protein anchor: que atraviesan (c) Energy conservation:
G. Wagner

Prevents leakage and functions as a Site of proteins that participate in Site of generation and dissipation of the
grasos la membrana, y una
gateway for transport superficie
of nutrients into, hidrófila en bioenergetics,
transport, las regiones en con-
and chemotaxis proton motive force
and wastes out of, the cell
tacto con el medio y el citoplasma (Figuras 2.14 y 2.15). La
(c)
superficie exterior
Figure 2.7 The major functions deof thela cytoplasmic
membrana membrane.citoplasmática está
Although physically weak, en con-
the cytoplasmic
membrane controls at least three critically important cellular functions: preventing leakage, anchoring proteins,
Figura 2.14 Bicapa fosfolipídica de la membrana. (a) Estructura del tacto con el
and conserving energy. medio, y en las bacterias gramnegativas interac-
fosfolípido fosfatidiletanolamina. (b) Arquitectura general de la bicapa de la ciona con diversas proteínas que se unen a sustratos o procesan
membrana; las esferas azules representan el glicerol con fosfato u otros grupos moléculas más This
surface (Figure 2.7c). grandes para transportarlas
charge separation creates an energized al interior de la
2.4 bacterial Cell Walls: Peptidoglycan
state of the membrane called the proton motive force, analogous to
hidrófilos. (c) Micrografía electrónica de transmisión de una membrana. El área célula (proteínas periplasmáticas,
the potential energy present in a charged battery. Dissipation of Sección 2.11). La
Thesuperficie
cytoplasm of prokaryotic cells maintains a high concentra-
tion of dissolved solutes that creates significant osmotic pressure—
interior clara es la región hidrófoba de la membrana modelo de la parte b. interior
the proton de la membrana
motive force can be coupled citoplasmática está en contacto
to several energy-requiring con el
about 2 atm (203 kPa); this is about the same as the pressure in an
reactions, such as transport, cell locomotion, and the biosynthesis
of ATP. In eukaryotic microbial cells, although transport across the automobile tire. To withstand these pressures and prevent burst-
cytoplasmic membrane is just as necessary as it is in prokaryotic ing—a process called cell lysis—most cells of Bacteria and Archaea
cells, energy conservation takes place in the membrane systems of have a layer outside the cytoplasmic membrane called the cell wall.
 hidrófila Proteínas de membrana
(b) El contenido proteico de la membrana citoplasmática es bas-
Glicerol-fosfatos tante elevado. Las proteínas de membrana tienen, normal-
Ácidos mente, una superficie hidrófoba en las regiones que atraviesan

G. Wagner
grasos la membrana, y una superficie hidrófila en las regiones en con-
tacto con el medio y el citoplasma (Figuras 2.14 y 2.15). La
(c)
superficie exterior de la membrana citoplasmática está en con-
Figura 2.14 Bicapa fosfolipídica de la membrana. (a) Estructura del tacto con el medio, y en las bacterias gramnegativas interac-
fosfolípido fosfatidiletanolamina. (b) Arquitectura general de la bicapa de la ciona con diversas proteínas que se unen a sustratos o procesan

Membrana celular
membrana; las esferas azules representan el glicerol con fosfato u otros grupos moléculas más grandes para transportarlas al interior de la
hidrófilos. (c) Micrografía electrónica de transmisión de una membrana. El área célula (proteínas periplasmáticas, Sección 2.11). La superficie
interior clara es la región hidrófoba de la membrana modelo de la parte b. interior de la membrana citoplasmática está en contacto con el

Exterior

Fosfolípidos

Grupos
hidrófilos
6-8 nm
Grupos
hidrófobos
42 LOS FUNDAMENTOS DE LA MICROBIOLOGÍA

Exterior Interior
Transporte simple:
Impulsado por la Ex
energía de la fuerza
Interior H+
protonmotriz
H+

Proteínas
Sustancia
integrales transportada
de membrana Molécula
de fosfolípido

Translocación de grupo: P
Modificación química Int
Figura 2.15 Estructura de la membrana citoplasmática. La superficie interior (Interior) está en contacto con el citoplasma, y la superficie exterior (Exterior)
de la sustancia
está en contacto con el medio. Los fosfolípidos componen la matriz de la membrana citoplasmática con proteínas embebidas o asociadas a la superficie. La
R~ P
arquitectura general de la membrana citoplasmática es similar en procariotas y eucariotas, aunque existen diferencias químicas.
transportada impulsada
por el fosfoenolpiruvato

1
2 Figur
tipos d
están f
Transportador ABC: 3 agrega
Con proteínas de unión ATP ADP + Pi
periplasmática; de tres
la energía proviene Los dis
del ATP repres

Figura 2.20 Las tres clases de sistemas de transporte. Obsérvese

que los transportadores simples y el sistema ABC transportan sustancias sin para
modificarlas químicamente, mientras que la translocación de grupo provoca comp
una modificación química (en este caso la fosforilación) de la sustancia La
transportada. Las tres proteínas del sistema ABC están marcadas como 1, 2 y 3. aspec
 Estructura Bacteriana

Plasma
Capsule Ribosomes Cell wall membrane

Plásmido
Nucleoid

Fimbriae Chromosome Inclusion Flagellum

(DNA)

Figure 3.6 Structure of a Bacterial Cell.

 ESTRUCTUR

Norbert Pfennig
Clasificación de la morfología celular bacteriana Coco

Norbert Pfennig
Bacilo

Norbert Pfennig
Espirilo

E. Canale-Parola
Espiroqueta

Norbert Pfennig
Pedúnculo Hifa
Bacterias gemantes y con apéndices

T. D. Brock
Bacterias filamentosas

Figura 2.11 Morfologías celulares. Junto a cada dibujo hay una micrografía
por contraste de fases en la que se muestra la morfología. Coco (diámetro celular
en la micrografía: 1,5 μm); bacilo (1 μm); espirilo (1 μm); espiroqueta (0,25 μm);
gemadora (1,2 μm); filamentosa (0,8 μm). Todas las micrografías son de especies
de Bacteria. No todas estas morfologías se conocen en Archaea.
 Estructuras de recubrimiento celular bacteriano.
3.4 There Are Two Main Types of Bacterial Cell Walls 51

is;
CHAPTER 2 • M i c r o b i a l C e l l S t r u c t u r e a n d F u n c t i o n 79
The typical Gram-positive cell envelope
, it
hat
res Peptidoglycan
an Plasma membrane
ugs
Gram-positive Gram-negative
Outer
membrane
Peptidoglycan
on
jor
Protein
re.
ve Cytoplasmic membrane
en
he Cell wall
eld
ed Outer membrane
Protein
ac-
ria The typical Gram-negative cell envelope
is-
hat Cell
wall
m-
Outer membrane
cal

Leon J. Lebeau
ck Peptidoglycan
he Plasma membrane
of
wo (a) (b)
by

te- Peptidoglycan Cytoplasmic Cytoplasmic Peptidoglycan Outer

m- Periplasmic membrane membrane membrane
ma space
his
cu-
©Egbert Hoiczyk

Figure 3.16 Cell Envelopes of Typical Gram-Positive and Gram-

Negative Bacteria. Cell envelopes consist of the plasma membrane and (c) (d)
any layers (e.g., cell wall) exterior to it. For simplicity, we show only the plasma
es- membrane and cell wall. Staphylococcus aureus (top) has a typical Gram-
uc- positive cell wall that consists primarily of peptidoglycan. Myxococcus
an xanthus (bottom) has a typical Gram-negative cell wall consisting of a thin
he layer of peptidoglycan, an outer membrane, and the periplasmic space.
ne
 Diferencias

• GRAM POSITIVA • GRAM NEGATIVA

1. Es mas ancha. 1. 10% de la estructura es peptidoglicano.

2. El 90% esta constituida por peptidoglicano. 2. Capa adicional de Lipopolisacáridos

3. 10% acido teicoico. 3. PORINAS

4. ZONA PERIPLASMATICA
30 LOS FUNDAMENTOS DE LA MICROBIOLOGÍA Tinción Gram
30 LOS FUNDAMENTOS DE LA MICROBIOLOGÍA
1. Preparación de un frotis Procedimiento Resultado
1. Preparación de un frotis 1. Verter cristal violeta Procedimiento Resultado
durante 1 minuto en
1. Verter cristal violeta
el frotis fijado por calor
durante 1 minuto en
el frotis fijado por calor
Extender una fina capa del Secar al aire Todas las células
cultivo sobre el portaobjetos moradas
Extender una fina capa del Secar al aire Todas las células
cultivo sobre el portaobjetos 2. Añadir solución moradas
de yodo durante
2. Fijación mediante calor y tinción 2. Añadir solución
1 minuto
de yodo durante
2. Fijación mediante calor y tinción
1 minuto
Todas las células siguen
siendo moradas
Todas las células siguen
3. Decolorar brevemente siendo moradas
con alcohol (unos
20 segundos) 3. Decolorar brevemente
con alcohol (unos
Pasar el portaobjetos Verter colorante en el 20 segundos)
por una llama para portaobjetos: enjuagar Las células grampositivas
fijar por calor Pasar el portaobjetos Verter colorante en el
y secar son moradas; las
por una llama para portaobjetos: enjuagar Las células grampositivas
3. Microscopía fijar por calor y secar gramnegativas, incoloras
son moradas; las
3. Microscopía gramnegativas, incoloras
4. Realizar tinción de G–
contraste con
safranina durante 4. Realizar tinción de G–
G+
1 a 2 minutos contraste con
100× safranina durante G+
Portaobjetos Aceite 1 a 2 minutos
Las células grampositivas
Portaobjetos
100×
Aceite (G+) son moradas; las
gramnegativas (G–) sonLas células grampositivas
Depositar una gota de aceite rosa (G+) son moradas; las
en el portaobjetos; examinar (a) gramnegativas (G–) son
Depositar
con un objetivo de 100 aumentos una gota de aceite rosa
en el portaobjetos; examinar (a)
con un objetivo de 100 aumentos
Figura 2.3 Tinción de células para su observación microscópica.

c., Eugene, Oregon

Los colorantes mejoran el contraste
Figura 2.3 entre lasde
Tinción células y supara
células entorno. Centro:
su observación microscópica.
las mismas células que en la inserción de la Figura 2.1 pero teñidas con un

ene, Oregon
Los colorantes mejoran el contraste entre las células y su entorno. Centro:
colorante básico. las mismas células que en la inserción de la Figura 2.1 pero teñidas con un
Diversidad Celular
Microbiana: Estructuras de
superficie y resistencia.
Flagelos en bacterias
Estructura del flagelo bacteriano
Flagelos en bacterias
Fimbrias y pilli
 Formas de resistencia de bacterias
Capsula Vs. Esporas

Esporas
Capsula
Esporas de resistencia
Mecanismos de Protección Microbiano: Biofilm
 Factores de Virulencia y Patogenicidad:
Cápsula-Biofilm

(a) Micrografía de cápsulas alrededor de células bacterianas. (b) Los anticuerpos normalmente funcionan uniéndose a antígenos, moléculas en la superficie de bacterias patógenas. Luego, los
fagocitos se unen al anticuerpo, iniciando la fagocitosis. (c) Algunas bacterias también producen proteasas, factores de virulencia que descomponen los anticuerpos del huésped para evadir la
fagocitosis (créditos: CDC).
Factores de Virulencia y Patogenicidad:
Cápsula-Biofilm
Factores de Virulencia y Patogenicidad:
Esporas-toxinas (Ántrax)
Factores de Virulencia y Patogenicidad:
Esporas-toxinas (Ántrax)
Factores de Virulencia y Patogenicidad:
Esporas-toxinas (Ántrax)
Preguntas?