CTO. BIOLOGIA Temario: - Carioteca o Envoltura Nuclear - Los Acidos Nucleicos: Caracteristicas generales y subtipos - ELADN y La Gromatina: proteinas nucleares, tipos de cromatina, niveles #@ Compactacion. El Cariotipo - Duplitacién de} ADN: Caracteristicas, enzimas y proteinas ~Agentes mutagénicos fisicos, quimicos y biolégicos ~ Reparacion del ADN: lesiones y arreglos en una hebra y ambas hebras - Célula caricerosa WGEMA |EDUCATIVA MEDICA DE AVANZADA 2020INTRODUCCION Una de las caracteristicas mas importantes en la génesis de las células eucariotas es la aparicién del nucleo. De hecho, el nombre eucariota significa *niicleo verdadero". ‘A diferencia de las procariotas, las eucariotas tienen una envoltura nuclear que protege al ADN de la accién de cualquier elemento que pueda dafiarlo, y asi finalmente mutarlo. Ya veremos que una mutacién es un cambio Ieversible en la secuencia de nuclestidos del ADN. El nicleo es en si un lugar donde el ADN se encuentra protegido por una envoltura compleja llamada Envoltura Nuclear o Cerioteca. Esta envoltura, formada por una doble membrana altamente elaborades (llamades membrana nuclear intema y externa), separa y protege al ADN haciendo que sea muy complicado ingresar al nticleo Y dafiarlo. Esto marca una diferencia con los procariontes que tienen el ADN suelto en el citoplasma. Finalmente, diremos que el nicleo esta formado por 4 grandes elementos: » La envoltura nuclear 0 Carioteca » La cromatina » El Citoesqueleto nuclear > La Matriz nuclear LA ENVOLTURA NUCLEAR La envoltura nuclear 0 Carioteca es una GOBISTEMBFENA biolégica eoneéntrice que toman contacto entre si a nivel de os complejostdepore; y que se llaman Membrana Nuclear Extema y Membrana Nuclear Interna, Entre ambas membranas hay una eawidad llamada umensdeteGartoteea, que ya veremos que sexcontinusconehtumer> dei REG La membrana nuclear Exteme es idéntica en su morfologia con la membrana:debREG, por lo que tiene ‘exactamente el mismo tipo de BrOtEITES" os bosorras tachonades y sus dos funciones claves: Sintesiscieproteiness Finalmente, la membrana nuclear externa se noveitosdticas y ! continu conta membranardelREG, pér lo que el La Membrana nuclear fFEFF por su lado, ‘eswisar ya que nostieneribosomas"adherdes. Sin embargo, en su-cara nuclear: o-care:interna’se-une a parte del citoesqueleto nucieariamado La wémine Nuolest. Esta Lamina Nuclear @s una eoberturande filamentos=intermedios cispuesios en treS"CEDaS (lamadas eapegsheiiyG). Los flamentos intermedios ‘son los Laminofilamentos 0 Filamentos de lat mina (NeeISEP (ambos nombres se usan para definir a lo ‘Mismo). Y sus funciones son: | > Darie la formanpresisa al.niicleo de cada c&- lula, > Permitir la deformaciénemecanica del niicleo ssin que se rompa. = < > Permitir la unlorrdenlerHeterseromatini’a I= SrVoltare NUCIESr, dando la clasica imagen de! NCES TTEMESICE? 3 Esta lamina nuclear recubre toda la cara nuclear de la membrana nuclear interna, excepto en las regiones donde estan los poros nucleares, Va veremos en el proceso de division celular que cuando se fosforlan las proteinas ‘de la lémina nuclear, esta tiende a desensamblarse, permitiendo que so fragmente la envoltura nuclear.LOS POROS NUCLEARES Toda molécula que quiera salir o entrar al nticleo, debe pasar por un lugar altamente especializado en la. Carioteca que Fegula'selectivamentee! pasajea través de elias, Los poros nucleares son quienes peamiennsivjo desde:el:niicleoshaciacel-citopiasma y desde éste hacia el nticleo, existiendo alrededor de 3000 a 4000 poros en Un nicleo normal. En cada poro nuclear, un conjunto de proteinas forman un cllindro hueco llamado Compiejoxdel Pore, encargado de requlanebpasaje. Morfolégicamente, dicho Complejo del Poro esté formado por: > @:Golumnas:proteicas: Atraviesan de lado a lado al poro, se disponen formando la pared-delssompiejo como una suerte de barri, y en sus extremos se forman los anillossdelponse > Proteinas-de Anolaje: Fijan a cada columna proteica ala.Gariotecs > Proteinas:Radiales: hacen deda:cara:intema de las columnas proteicas y sewpeoyasianhaciala,cavidad del pporo. Actiign como esfinter, por tener la capacidad de aconansecelaais. » Fibrillas proteicas: Son proteinas fibrilares que nacen de los:enillos:extemo.eintemo y se proyectan hacia e! liosobyshacia.el.nuicleo. Aquellas que se proyectan hacia el niicleo se unen por sus extremos y forman la Jaule Nuclear. INGRESO AL NUCLEO En la mitologta griega, Caronte era el berquero del Hades, el encargado de guiarlas sombras errantes de los sifuntos recientes de un lado a otro del rio Aquerente si tenian un Sbolo para pager el vial. Paratraseando un poco 2 la historia de los dioses griegos, toda proteina que quiera pasar del citosol al nicleo, deberd unirse a Caronte, y tener a mano el ébolo. , Pues bien, todas las proteinas que estan presentes en el nicleo (AON*pONMERSSES, ARNpolimerasasn1as histonas, cic.) sonssintetizadassenselsitesol. Pera poder ingresar al nicleo, presentan un peptido"sefil llamado Nk. (por Nuclear Signal Localization o Sefial de Localizacién Nuclear). Este peptide sefial es reconocido por una proteinascitasdlicasiiamadasmponting. Esta proteina reconoce al péptido seal NSL. Una vez unida a la proteina recien sintetizada, la Importinarpermite-que-seppiegueslayproteina y lartrensportathaciasunsporo:nuciear, donde Se uniré una proteinadliamada-Ran.GiRase, quien degradaun GTP para forzar le’epertura del poro; pasando de 9 nm a25nm y permifir que la proteina ingrese al niicleo. om ' EGRESO DEL NUCLEO ‘Muchas proteinas permanecen en €l niicleo, pero otras son sacadas al citosol para ser degradadas. Para poder salir, previamente se las debe etiquetar con una secuenciadesaminodeides especifica llamada Seftalsde: ExportaciémNuclearo’NES (por Nuclear Export Signal). Esta secuencia especifica es reconocida por unas proteinas llamadas Exportinas; encargadas de llevar hacia el complejo de poro a la proteina.Hay una proteina que es clave para que las moléculas pasen por el complejo de poro hacia ambos Tados. Es la proteina Ran, que dependiendo de su | luni6n a GTP o GDP promueve el movimiento hacia un [ado u otro. El ciclo es el siguiente: 4. Cuando Ran esta unido a GDP en citosol, y aumenta Ia concentracin de Ran-GDP en citosol, se produce el ingreso del mismo al niicleo, y con ella se promueve el ingreso de Jas proteinas hacia el interior nuclear. 2, Amedida que va ingresando Ran-GDP al niicleo, Comienza a aumentar su concentracién en ese ‘compartimento. $.La proteina Ran-GEF se encarga de cambiar el GDP por GTP, aumentando ahora la Concentracién de Ran-GTP en el niicleo. 4. Este aumento de Ran-GTPpromueve la salida de esta molécula hacia aftlera, permitiendo que salgan elementos nucleeres al citosol. 8. Ya en citosol, Ran-GTP es hidrolizado por Ran-GAP (una GTPasa) pasando a Ran-GDP, aumentando la Concentracién citosélica de la misma, y cerrando asi el ciclo, LOS ACIDOS NUCLEICOS Los acidos nucleicos son las moléculas que tienen la informacién que hace que funcione una célula como ‘edo. El mas famoso de los acidos nucleicos por lejos es el ADN 0 Acido Desoxiribonucleico, y seguramente ya eslds al tanto que el ADN es la biblioteca que contiene al cddigo genético. Otro acido nucleico de importancia clave es el ARN o Acido nibonucleico, que ya veremos mas adelante su funcién clave dentro del proceso de production de proteinas. i) CONDICIONES PARA SER UN ACIDO NUCLEICO Todo Acido nucleico, independiente de si es ADN 0 ARN, es un polimerollineal bastantelargo de una molécula llamada Nucleotide, por medio.de uniones*fesfodiéster. A diferencia de las proteinas, que son pollmeros lineales de aminoacidos, los acidos nucleicos son bastante mas complejos que éstos, fundamentalmente porque el monémero de los acidos nucleicos es el nuclestido, que ya Veremos que es una estructura formada por tres moléculas (pentosa, base nitrogenada y fosfato). Como son lineales, presentan dosvextremos, llamados extremo:Siy-extremo:6" Los acidos nucleicos pueden ser de eadlenesimiple (monocatenarios) o de doble cadena (bicatenarios): [os ARN estan formados mayortariamente por una ‘eadena’sola, pero el ADN esté formado mayorilariamente por una doble cadena’de nuclestidos.Ya hemos dicho que los nucleétidas son {os monémeros de fos Acidos nucleicos, y que estan formados por DNA RNA 3 components. En efecto, todo nucledtido esta formado por: > tepentosa: es un azticar (0 hidrato de carbono) de 5 car- © @\ I Adenina \e= bbonos. Puede ser Rilbosaxo:Desoxiribosa, dependien- do de si es la pentosa del ARN o ADN respectivamente. » Woasenkrogenade: Hay Stpesestnts ce basesnivo. OX 5 pas : “or ‘genadas, agrupadas en dos grupos SS » Bases puricas? Adenina y Guanina > Bases:Pirimidicas: Citosina, Timina y Uracilo > ddaminaioamnas DR citar De todo lo antedicho, podemos decir que existen 5 pos detrnoe do nudeese, operdcnse al ipoae tose [@) = ritrogenada que contenga. Enionces av » ELADN esté formado por nuclestides de Adenina, de Ch | tiraina Uracito tosina, de Timina y de Guanina » EIARN est4 formado por nucleétidos de Adenina, de Citosina, de Uracilo y de Guanina » La pentosa del ADN es la Desoxiribosa, mientras que la del ARN es la Ribosa, Las bases nitrogenadas ‘se unen por medio de unionescomplementarias. Asi, la Gitosinarseune@ta’Guanina por medio deSuniones uentes-deshidrégeno, la Adenina se une'a ta Timina-o'al Uracilo'con’2 puentes de Hidrégeno, depencienca de si es un desoxinucleétido o un ribonuclestido, > La unién de los nucleétidos entre si para formar al Acido nucleico es del tipo unién Fosfodiéster. Giessen ta Chae] oH Gi Rear Niicleo y mitocondrias CIEE Gitosina y Timina rie ‘Adenina y Guanina one) ‘Desoxiribosa Seer) Des a5" irra Informacién genética Se define como sentido biolégico allaformaenquese =~, een a las moléculas. El ADN solamente se puede leer de 3° hacia 5’, 0 sea que su sentido bioléaico es 3'- 5”. Por su lado, los ARN tienen un sentido biolégico inverso, es decir 5” - 3’. NUCLEOTIDOS VS. NUCLEOSIDOS La asociacién de una base nitrogenada, por ejemplo adenina, con una pentosa, sin el fosfato, conforma un Nucledsido. En este caso, el Nucleésido se llama Adenosina (adenina + ribosa)Bie canes sry ourucacn ie Vee. coves es WGEMA Si a un Nucleésido le sumamos el grupo fosfato, se forma el Nucleétido, Ejemplos de ellos son el AME (Adenosina Mono Fostatc) ADP (Adenosina Di Fosfato) y elBP (Adenosina Tri Fosfato). El APP} aparte de ser usado ‘como componente para armandcidosmnucleicos, también es usado paradepasitany:transferinEnergie:Quimica, Los otros nuclestides (UTP, CTP, GTP y TTP) también pueden ser utilizados para depositar y transferir energia quimica (Sobre todo el GTP), pero la fuente principal de energia es el ATP. EL ADN o ACIDO DESOXIRRIBONUCLEICO En 1953, Watson y Crick describieron al ADN e hicieron fa publicacién que cambié la biologia celular. Para hacerlo, se basaron en los estudios eae previamente realizados por la Dra. Rosalind Franklin. Seguin esta publicacion, & e1ADN presenta las siguientes ‘Son dos moiéculas de ADN helicoldales con giro a la-dereche (dextrégiro), que | ‘componen una doblerhétice; - Ambas cadenas sonwantiparaletas, por [o que sussuniones=o%s6isslquen sb direceiones"opuestas. Esto significa que, si leemos de izquierda a derecha, 4 8 tuna hebra empieza en 3'enla izquierda,y la otra empieza en’ ena izquierda: sc Las basesnitrogenadaseestan ubicadas en ebinteriondelahélios, we ‘Ambas cadenas se hallan unidas entre si por uniones puentessdeshidrégeno 2 = Ss traves de sus bases nirogenadas dela siguiente manera: Adenina seune con | ~e Timina (A-T son dos puentes de hidrogeno), Citosina con Guanina (C-G son "ass . tres puentes de hidrogeno). ay Mes ‘Ahora bien. La funcién del ADN es contener a los genes. Un gen es un segmento de ADN con sentido biolégico, con la informacién para generar un producto funcionante, ésto es transcribir un ARN, y si éste es un ARN mensajero una proteina, Ya veremos mas adelante cmo esta conformado un gen. Por ahora, solamente diremos {ue el ADN contiene a os genes, de ahi que se dice que el ADN es la Biblioteca Génica &CUANTO MIDE EL ADN? Las 46 moléculas de ADN que hay dentro del ntcleo tienen forma fibniar, es decir son fibras alargadas, y Por tal no son circulares como lo es el ADN bacteriano. Si juntésemos todas las moléculas de ADN que hay dentro del nticleo por sus extremos, y armasemos una gran fibra de ADN, la medida seria de nada més y nada menos que de alrededor de 2 metros de longitud. Imagen que para que 2 metros de una molécula pueda entrar perfectamente dentro de un niicleo, cuyo tamafio promedio es de 2 a 6 micrones de diametro, requiere que se disponga de formas muy precisas. En efecto, ya veremos mas adelante que el ADN se dispone en forma de fibras bien definidas, que le Permiten acomodarse correctamente. A esa disposicién especifica se la llama Niveles de CompactaciénCARACTERISTICAS DEL ADN EIADN puede ser separado en sus dos hebras si sé losomete ala accién de una temperatura especifica oa {a acolén de un pH alcalino. A este proceso de separado de hebras del ADN se lo llama DESNATURALIZACION DEL. ‘ADN. Como hay tres uniones puente de hidrégeno entre Citosina y Guanine, y solamente 2 entre Adenina y Timina, la temperatura de separado o PUNTO DE FISION depende de la relacion @GMAT, es decir, cuantas uniones CG y cuantas AT hay en una molécula de ADN. Asimismo, se ha demostrado perfectamente que cuando se comienza @ enfrier lentamente las hebras desnaturalizadas 0 separadas, éstas comienzan lentamente a unirse de manera complementaria y ordenada, volviendo a formar finalmente la molécula completa de ADN. A este proceso se lo llama Templado 0 Renaturalizacion, La desnaturalizacién implica el separado de las dos hebras de ADN por medio del uso de temperatura o pH alcalino, mientras que el templado o Renaturalizacién implica la unin de dos hebras separadas de ADN al disminuir la temperatura o bajar el pH. ADN Y CROMATINA EI ADN nuclear no se encuentra suetto en el nticleo, sino que presenta una [ntimasasceiaciorerproteinas presentes en el nucleo, marcando una segunda diferencia con el ADN bacteriano, que se encuentra sin union a Proteinas (por eso se {o llama al ADN bacteriano como “ADN desnudo’), lasasociacionsespecifica"del/ADN'CON proteinas se llama cromatina, LAS PROTEINAS NUCLEARES Como ya dijimos, el ADN se asocia a proteinas especificas para formar la cromatina, Existen dos grandes grupos proteicos > Wasehistonas: Son las histonas‘#¥P (hay 6 subtipos) y las ‘HIStORES Rucleosémieas (H2A, H2B, H3 Y Ha, que forman al nucleosoma) > kas:proteinasmochistonleas: Se divicen erréeidas (con funcién mayoritariamente éREIFIHES, como las ADN polimerasas) y basicas4eon fumeiénestructurakorde:soporte:como la PCNA o las SSB de la duplicacién del ‘ADN). LOS TIPOS DE CROMATINA En Biologia Celular e Histologia se habla de lo mismo pero definido de otra manera, un poco mas elaborada y mas precisa. Agul definimos que la cromatina laxa se llama Eucromatina (y es la cromatina ranseripcionalimente Un cilindro proteico: Compuesto por 2 pares de las histo- nas Nucleosémicas (2 H2A, 2 H2B, 2 H3 y 2 H4) que con- forman asi UN OCTAMERO de forma cilindrica, y de 10 nm de diametro. » Un segmento de ADN: Que se enrolla sobre este cilindro y da 2 vueltas (0 como dicen muchos libros, 1.8 weltas), Cada wuelta equivale a 83 pares de niiclestidos u 83 pb, por lo que el ADN que esté en el Nucleosoma tiene 146 ares de nucleétidos (recordar que da 1.8 vueltas),Los nucleosomas se encuentran separados por segmentos de ADN llamados MDNYESPACIABORES, que tienen una longitud que va de los 20 allos 50 pares de nuclestidos o pb. Esta conformacién clasica, la de nucleosomas unides por ADN Espaciador, hace que se llame a esta fibra como configuracién en cuentas de collar. En rigor de la verdad, esta disposicién del ADN, que coresponde al menor nivel de compactacién de la cromatina, no se la suele encontrar en la célula cuando se hacen lsis Celulares que mantienen el ADN. La forma que se encuentra en estos casos es la de fibras de 30 nm, que describimos a continuacion. Esto significa que las fioras de 10 nanometros podemos obtenertas en laboratorio haciendo técnicas especiales, FIBRAS DE 30 MANOMETROS Estas fibras correspenden al segundo Ap WISI RII. 20m hivel de compactacin de Ia cromatina. La Unidad de estas fibrassse-llamarSoleneide, El Solenoide es una estructura syesegroma hnelicoidah que surge del enrollamiento de los ‘tem ucleosomas sobre si mismos. Cada vuelta del solenoide contiene @ 6 nucleosomas y genera una estructura de 30 nm de diametro, Permite ‘compactar a la cromatina de 40 veces. Para formar una fibra de 30 nanémetros, 5 necesario que SESUNaMESHIStOnE HMOs ‘aucleosomas; Esta unién se consigue cuando 2 Is histone Ht'sea hipoacetla o se la dosaceti. Este mecanismo de remocién de los acatilo de las Histonas se consigue por accién de las Ahora, cuando queremos que la histona H1 se separe, es necesario agregarle grupos acetilo a esta proteina. Para ello, se vale de las. enzimas que se encargan de acetilar a la Histona H1. Cuando la H1 se separa, es fécil pasar a las fibras de 10 ‘nm, por lo que la cromatina esta completamente descondensada 0 relajada. Como ves, jugar con la acetilacién de las histonas permite compactar © descompactar al ADN,FIBRAS DE 300 MANOMETROS Estas fbras corresponden altercer nivel de compactacién dela cromatina. La unidad de estas fibras se llaman Sezosro:bueles: las fibras de 30 nm se enrollan, naciendo de unmejesformadomporproteinasnothisténices llamadas ‘BiBleinas.Scafiold. Dicho de otra manera, en las fbras de 300 nanometros, la eromatina se compacta formando lazos ‘ybucles de tamafio variable, y lo hacen apoyados sobre una barra proteica llamada proteina Scaffold. Da esta forma Igcromatina puede compactarse 4000 veces. ueTR Scar Una caracteristica muy importante, es que en el loop de todos los lazos y bucles (zona donde el ADN fhace la vuelta del azo o bucle, hay una secuencia de alrededor de 100 pb altamente conservada llamada ARS (Autonomously Replicating Sequences), muy importante porque en su interior se encuentra el OR u Origen de Replicacién en Eucariontes. Los OR! son los puntos donde:se-comienzaslareiplicasionrdelADN. Ya hablaremos mas farde de los Origenes De Replicacién y los ORI en la duplicacién del ADN. CROMATIDE Corresponde al maximo nivel de compactacién de la cromatina, y miden 700 manémetros de didmetro. Recorda que dos cromatides forman a un cromosoma metafasico, que obviamente mide 1400 manémetros de didmetro, ADN = CROMOSOMAS Existen 2 tipos de células en nuestro cuerpo: las células somiticas y las células germinativas, Para hacértelo simple, las células germinativas son un grupo muy pequefio de células ubicadas en un individuo ya nacido en testiculos y ovarios, y son encargadas de producir a los espermatazoides y al ovocito Il La inmensa mayoria de las Células del cuerpo son las células somaticas. Podemos agregar asimismo que las células germinativas (excepto las Gonias) son aquellas que hacen Meiosis, mientras que las somaticas hacen mitosis. Los espermatozoides y los ovocitos II son células Haploides, es decir que tienen 23 cromosomas en Su interior. Cuando se produce la fecundacién, ambos provesn sus 23 cromosomas a la nueva célula generada llamada Célula Huevo 0 Zigoto (0 cigoto). Esta nueva célula tendrd entonces 46 cromosomas, 23 provistos por el espermatozoide de papa y 23 cromosomas provistos por el ovocito de mama, Por eso se dice cue tenemos 23 pares de cromosomas, donde cada componente del par es provisto uno por el pacre y otro porla madre. De estos 23 pares, 22 son iguales en varones y mujeres (los pares cromosémicos 1 a 22 llamado cromosomas Autosémicos). El par Testante comprende los cromosomas sexuales: XX en la mujer y XY en el varén. De las miitiples divisiones mitéticas y diferenciaciones que sutra ta célula huevo o cigoto se formara un individuo, después de 9 mesas de gestacién. Y como todas las células de ese neonato provienen de una misma Célula Huevo 0 Zigoto, todas las células del cuerpo tienen la misma informacién genética, pues se generaron por mmiiltiples mitosis y diferenciacién. ANATOMIA DE UN CROMOSOMA Un cromosoma es una estructura tipicamente visible al microscopio éptico. Se trata de unos bastoncillos que corresponden al maximo nivel de compactacién de la cromatina, porlo podriamos decir entonces que un cromosoma 8s una molécula de ADN sper compactada.El clésico cromosoma que nosotros conocemos es el cromosoma metafasico, que consta de dos crométicas hemmanas, producto de la duplicacién del ADN durante la fase S. Por todo lo antedicho, ese cromosoma tiene 2 moléculas de ADN, que se separaran en anafase, Cuando evaluamos la forma de un cromosoma, verids que esta formado por dos cromatides, y cada de elles Por 2 brazos, uno llamado brazo p (por petit) 0 brazo corto, y el otro brazo q 0 brazo largo (el origen de del nombre .es variado, algunos dicen que es porque es la continuacién de p en el diccionario, y otros porque es por queue, ue es cola en francés). El centro del cromosoma se llama centrémero, y los extremos de cada brazo se llaman telémeros. LAS PROTEINAS CENTROMERICAS A nivel del centrémero, el ADN que lo constituye se asocia a proteinas especffices, llemadas proteinas centroméricas. Ellas son: NOMBRE err Cree CENP-D TIPOS DE CROMOSOMAS Como hablamos dicho previamente, las células del cuerpo son de dos tipos: las células somaticas y las células germinativas. Las células somaticas tienen 46 moléculas de ADN, y por tal motivo se dice entonces que tienen 46 cromosomas, mientras que las células germinatives solamente tienen 23 cromosomas. Sin embargo, los cromosomas tisnen 3 formas distintas que pueden adquirir dependiendo de la posicién del centrémero: pueden ser. » Metacéntricos: donde el brazo p es précticamente igual en tamario que el brazo q y por ende el centrémero std ubicado mas o menos en el centro; » Submetacéntricos: donde el brazo p es menor que el brazo g y el centrémero esta ubicado mas cerca del extremo del brazo p; » Acrocéntricos: donde el brazo pes muy pequefo y el centromero esté muy cerca del extremo del brazo py ‘muestra un satélite unido al brazo p por una constriccion secundaria, XK Kes h A Nino ie Meath i 1c Teed ‘Los distintos ipes de cromosomas, De izqulerda a derecha: Metacéntrico, submetacénitico, acrocéntrco y telocéntrico. Ala derecha, cariotipo humano normal Un sistema de clasificacién intemacional llamado SINCH (Sistema Intemacionel de Nomenclatura en Citogenética Humana) clasifica a los cromosomas en 7 grupos, dependiendo del tipo de cromosoma que sea.eBlaceenency (Cromosomas 1.23173 son grandes y Metacéniticos y el 2 Submetacentnico Grup Cromosomas 4 y 5. Son Submetacéntricos menores que el 2y parecidos en tamario Grupo Gripe | Cromosomas 21 y 22, y el cromosoma Y. Son Acrocéntricos Gon Satelites y NORs*, excepto el Y, = que no tiene satelite ni NORs*, y cuyo brazo corto es mas notorio. NOR significa Organizadores Nucleolares EL CARIOTIPO: POSANDO PARA UNA FOTO EI carlotipo es un esquema, foto o dibujo de los cromosomas en metafase ordenados de acuerdo a su morfologia (metacéntricos, submetacéntricos y acrocéntricos) y tamafio, que estén caracterizados y representan 2 todos los individuos de una especie. El cariotipo humano tiene 46 cromosomas (23 pares porque somos diploides 0 2n) en el niicleo de cada célula, organizados en 22 pares autosémicos y 4 par sexual (hombre XY y mujer XX), PLOIDIA, EUPLOIDIA, DIPLOIDIA Y HAPLOIDIA Aca tenemos que ser claros,para evitar confusiones a futuro, Ploidia es el nimero de juegos completes de cromosomas en una célula biolégica. En el ser humano, las células somaticas que componen el cuerpo son diploides (con dos juegos completos de cromosomas. una serie derivada de cada uno de los padres), pero las células germinativas (ovocitos y espermatozoides) son haploides. La haploidla es un estado de la célula en el cual su nticleo no tiene dotacién cromosémica doble, es deci, tiene s6lo un juego de cromosomes. La diploidia es un estado de la célula en el cual su nUicleo tiene dotacién cromosémica doble, es decir, tiene 2 juegos de cromosomas. En el ser human, la euploidia es el numero de cromosomas de una oélula miltipo de 23, Por eso las células haploides y diploides son en si células euploides. Ya veremos mas adelante que en las poliploidias (donde las células tienen por ejemplo 69 cromosomas) también son euploidias (porque 69 es miltiplo de 23) LA DUPLICACION O REPLICACION DEL ADN La duplicacién o Replicacién del ADN es un proceso por medio del cual se obtienen, a partir de una molécula de ADN, dos moléculas hijas de ADN idénticas entre si. Su importancia radica en que las células eucaridticas transfieren su informacién genética a las células hjas por medio de la divisién celular, de tal manera que ambas células hijas obtengan EXACTAMENTE la misma informacion genética, El comienzo de la replicacién marca el fin de la fase G1 y comienzo de la fase S. Esta fase (llamada S 0 Sintética) se caracteriza por sintetizar ADN e histonas. El fin de la sintesis de ambas moléculas (ADN e histonas) marca el fin de la fase S y comienzo de la fase G2. CARACTERISTICAS DE LA DUPLICACION DEL ADN » ES SEMICONSERVATIVA: Esto significd que al final de la duplicacion cada molécula hija tendra una hebra criginal y una hebra recientemente sintetizada, De esta manera, al final de la mitosis, cada célula hija recibir& una hebra original de la madre y una recientemente sintetizada para CADA MOLECULA DE ADN, Dicho de otra manera, lo que se va a hacer es separar a las hebras de ADN, y a cada una se le va a sintetizar (demanera bastante completa) su complementaria, de Manera que cada una de las 2 moléculas hijas de ‘ADN tendran una hebra original y su complementa- "ia sintetizada, » ES ASIMETRICA: Como el ADN se lee de 3’ a 5", y existen dos cacienas antiparalelas, aquella cadena que va hacia el extremo 5” se sintetizara de manera continua, mientras que la otra cadena la que “avan- za’ hacia el extremo 3’, lo deberd hacer por me- dio del uso de fragmentos llamados Fragmentos de Okazaki, » ES BIDIRECCIONAL: Esto es asi, porque desde cada origen de replicacion, la sintesis de ADN se hace hacia ambos extremos de la molécula, y de ahi la bidireccionalidad, El ADN se puede sintetizar tanto de 3° a 5" (sintesis continua) como de 5’ a 3°, por medio del uso de los fragmentos de Okazaki (sinte- sis discontinua). Es conveniente aclarar aqui que fa sintesis no arranca desde los extremos de la molé- cula de ADN sino en miltiples sectores muy defini- dos llamados Origenes de Replicacion. » ES ASINCRONICA: Porque cada uno de los origenes de replicacién generan burbujas de replicacién, que son segmentos separados de ADN. La aparicién de tas burbujas se da en momentos distintos, nunca al mismo tiempo. De alll que se habla del asincronismo de la duplicacién, ya que las burbujas no aparecen al mismo tiempo. Otro motivo de la asincronia es que fa cadena continua adelantada (la que avanza hacia 5'de |a hebra original) se comienza a sintetizar primero por lo que se llama adelantada, y la cadena discon. tinua lo hace en forma mas tardfa, porlo que se la llama cadena retrasada, PASOS DE LA REPLICACION ELADN comienza @ dupligarse cuando aparece ol primer ORIGEN DE REPLICACION. En el ADN, hemos dicho, existen miltipl ‘que Varian en su secuencia entre un origen y otro, Si embargo, todos los origenes una secuencia central de 10 pb. Esta secuencia central es ret Origen de Replicacién (ORC por Origin Recognition Complex).1Los Origenes de Replicacién, al abrirse considerablementte (separando asi a las hebras de ADN) forman Burbujas de Replicacién. Su tamario aumenta a medida que se van separando las hebras, y la sintesis avanza hacia cada uno de los extremes de la hebra. Y acd es donde se explicaila Bidireccionalidad de la Replicacién del ADN. LAS CADENAS DE SINTESIS Y LAS HORQUILLAS DE REPLICACION Cada frente de avance de una burbuja de Replicacién se llama Horquilla de Replicacién, y tiene una hebra que avanza fiecia 5° y una hacia 3°. La hebra que avanza fhacia 5'lo va a hacer sintetizando de forma continua, y conforma la llamada Cadena Continua. La hebra enfrentada, que avanza hacia 3°, lo hace en forma discontinua, porque el ADN no se puade leer hacia 3" (recorda el sentido biolégico del ADN), y para hacerlo se vale de una estrategia que veremos mas adelante, y que usa a los Fragmentos de Okazaki _ De esta manefa, uno define que cada burbuja de replicacion std formada por dos horquillas de replicacion, de forma de letra Y, y cuyos dos brazos representan a las cadenas, de ADN ya separadas, y el tronco a la doble hélice en vias de separacién. Entonces, solo resta definir que cada origen de replicacién esta conformada por dos horquillas de replicacién, y tal cual se muestra en el esquema, desde un punto la duplicacién comienza hacia sentidos opuestos, uno hacia 3° de la hebra a la que est duplicando, y otra hacia 5” de la misma hebra. De esta manera, comprendemos que una misma hebra es sintetizada hacia 3” y hacia 5’, dependiendo de la horquilla de replicacion en la que se encuentre. Es conveniente definir que el segmento de ADN que se sintetiza a partir de un origen de replicacién se lama Replicon. Replicén Replicén Replicon Replicén searseperaciérrdetashebrasdeAON se da por medio dela accién de la salmerHelease [a cual va separando alas hebras entre'las'bases'complementatias. Raraevitar que vuelvan das, unas proteinasdcidasiliamadas:SSB (Single Strand Binding proteins) se unen a cada hebra evitando esi su ad®ple. Al unirse, sin embargo, dejan libres las bases de las cadenas, y permiten que se pueda sintetizar la copia complementaria, Estas proteinas SSB también se las llama Proteinas Desestabilizadoras de la Hélice.Dos enzimas, la Topoisomerase | y Topoisomerasa Il (también llamada Girasa), actian impidiendo el superenrollamiento que se produce al desenrollar las hebras de ADN, disminuyendo asi la tension torsional que Se produce en la doble hélice del ADN al separarse sus dos cadenas por la accién de la Helicase. Esto se produce Porque la forma en que gira y se dispone en el espacio la iholécula de ADN hace que al intentar separarlas, se roduzca un superenrollamiento cada vez mayor a medida que se va abriendo. Para evitarlo, ambas enzimas actlian en tres pasos consecutivos: 4. Cortan al ADN en seamentos especificos 2. Permiten su desenrollamiento, 3. Luego las unen nuevamente, o sea que tienen actividad ligasa (porque fo unen, 0 sea forman uniones fostodiéster) por lo que tienen actividad nucleasa (0 sea que cortan al ADN), Entonces, veamos un resumen de las enzimas y proteinas que acttian hasta ahora: » Helicasa: Enzima que rompe las uniones puente de Hidrégeno que unen a ambas hebras de ADN, y permite el sepatado de las mismas; » SSB: sigla de Single Strand DNA Binding, son proteinas que se unen a las hebras de ADN recién separadas Por la Helicasa, y que impiden que se unan nuevamente; » Topolsomerasa I: Enzima que corta una sola hebra de ADN, y que la vuelve a unir luego de permitir su des- enrollamiento. Por ello se define que tiene una funcién doble, ya que primero es Nucleasa cortando una sola hebra de ADN, y luego Ligasa al unir a la hebra cortada. » Topoisomerasa Il: También llamada Ligasa. Enzima que corta ambas hebras de ADN, y que la vuelve a unir luego de permitir su desenrollamiento. Por ello se define que tiene una funcién doble, ya que primero es Nucleasa cortando a las 2 hebras de ADN, y luego Ligasa al unir a las hebras corladas, LAS ADN POLIMERASAS. ELADN es sintetizado por un grupo de enzimas llamadas ADN Polimerasas. Las células eucariotas tienen 4 tipos de ADN Polimerasas: ' » Alfa 0 A: Encargada de sintelizar todos los cebadores o primers. Esto lo consiguen porque presentan una subunidad llamada Primasa, que es la encargada de sintetizar la parte de ARN del cebador, » Delta o D: Encargada de sintetizar todas las cadenas continuas » Epsilon o E: Encargada de sintetizar todas las cadenas discontinuas, y de sintetizer el ADN correspondiente al hueco dejado por los cebadores o primers » Gamma o G: Se encuentra en el interior de las mitocondiias y se la que duplica el ADN mitocondrial. ‘Todas las enzimas ADN polimerasas, por encima de sus funciones, tienen caracteristicas distintivas que las agrupan, a saber. » Leen al ADN en sentido 3' a5? » Sintelizan al ADN en sentido 5 a3° » Leen la secuencia de bases de la hebra, agregan su nucledtido complementario, y producen los enlaces fos- fodiéster » No pueden sintetizar de nove al ADN, o sea que no pueden sintetizar de cero, » Para poder sintetzar, necesitan un fragmento de ADN que tenga un extremo 3' libre, Este fragmento es el llamado Cebador, » Tienen un mecanismo de reparacién del ADN llamado Doble Lectura o Lectura de Prueba. Este mecanismo have que a enzima, aparte de sintetizar, es capaz de reconocer si se confundié en la secuencia complemen taria, y al reconocer el error, puede repararlo, removiendo el nuclestido erréneo y colocando el nucledtido correcto. Este mecanismo no lo tiene la ADN Polimerasa Gamma,SINTESIS DE LA CADENA CONTINUA La cadena continua se sintetiza, una vez empezado sin interrupciones 0 cortes 0 segmentos, De ahi su nombre. También se la lama ADELANTADA pues es la primera en empezar la sintesis en la horcuilla, diferenciandose de la enfrentada dentro de la misma horcuilla que se llama RETRASADA por comenzar luego de que la adelantada haya comenzado, La retrasada se sintetiza a través de los fragmentos de Okazaki. La cadena que se sintetiza de manera continua es aquella que se lee de 3° a 5’. Y que se sintetiza, entonces de 5" a3". Es decir la cadena original se lee de 3° a5’. yla cadena que se sintetiza complementaria a ella se sintetiza de 5° @ 3°. Los pasos son los siguientes: 4. Sintesis del Primer: El Primer o Cebador es un segmento corto de ARN de 10 nuclestidos de longitud ‘complementario al ADN, con un fragmento corto de ADN en 3”. Este eebador es sintetizado por una enzima llamada ADN Polimerasa A o Alfa, que tiene una subunidad Primasa (esa subunidad, como sintetiza ARN, tiene actividad ARN polimerasa); 2. Agregado de desoxirribonuclestidos: A continuacién del primer comienzanaagregarse desoxiribonuclestidos (ATP. dTTP dGTP, dCTP) complementarios 2 los nuclestidos dela cadena madre. Esta funcién es producida or la enzima ADN Polimerasa D o Delta, que va agregando a los nucledtides en el extremo 3° de la cadena que se esté sintetizando. Esto continua hasta llegar al extremo del replicon. 2COMO ESTA FORMADO EL PRIMER 0 CEBADOR? El primer 0 cebador es una secuencia de & nuclestidos de ARN y a continuacién 2 a 5 nuclestidos de ADN. Es fundamental que termine en un 3' de ADN, asi la ADN Polimerasa Delta puede continuar con la sintesis. Es sintetizada por la enzima ADN Polimerasa Alfa, que presenta una subunidad Primasa. La enzima ADN Polimerasa Delta o D es una enzima de naturaleze cida. Por eso, es comprensible que se tienda a separar de la hebra del ADN quejestd leyendo para sintetizar su hebra complementaria, Ello no ocurre pues existe un anillo protefco que liga @ la ADN Polimerasa D a la hebra, impidiendo su separacién, y permitiendo ast la sintesis de manera continua de la cadena adelantada de ADN. Este anillo proteico, llamado Proteina Deslizante o PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) esté compuesta por 3 subunidades que al ensamblarse forman un anillo deslizante que permiten que se mueva pero impiden su deslizamiento. SINTESIS DE LA CADENA DISCONTINUA 1, La cadena discontinua se sintetiza, una vez empezado con interrupciones 0 cortes 0 con la formacién de segmentos o fragmentos lamados Fragmentos de Okazaki. De ahi su nombre. También se la llama RETRASADA pues debe esperar a que fa molécula de ADN se abra y la ADN Polimerasa D sintetice la cadena continua, diferenciandose de la enfrentada dentro dela misma horquilla que se llama ADELANTADA or comenzar primero. La retrasada se sintetiza a través de los fragmentos de Okazaki2, La cadena que se sintetiza de manera discontinua es aquella que se lee de 5’ a 3°. Y que se sintetiza, entonces de 3" a. Es decir, la cadena original se lee de 5° a3", y la cadena que se sintetiza complementaria a ella se sintetiza de 3° a 5”. Los pasos son los siguientes: 8. Sintesis de un cebador. Este cebador no se ubica en el extremo inicial del replicén, sino que lo hace a 200 nucleétidos hacia 3’. De esta manera queda un segmento de ADN expuesto entre el extremo del replicén y el Primer 0 Cebador, es sintetizado por la ADN polimerasa Alfa o A; 4. Sintesis del segmento de ADN existente entre el extremo del replicdn y el cebador. Esto lo hace la enzima ADN Polimerasa Epsilon 0 &. Esta enzima lo hace arrancando desde el cebador y hacia el extremo del replicén, De esta manera, termina leyendo al ADN de 3’ a5”. El Fragmento de ADN sintetizado es llamado Fragmento de Okazaki, La ADN Polimerasa Alfa no tiene enillo proteico PCNA, por lo que luego de un tiempo se separa de la cadena madre de ADN, y sintetiza asi al fragmento de Okazaki 5, Una vez terminado de sintetizar el segmento de ADN interpuesto entre el primer cebador y el exiremo 5° de la horquila, un segundo primer es sintetizado a 200 nuclestidos hacia 3°, quedando ahora un espacio entre ol primer cebador y el segundo recién sintetizado. 6, Nueva sintesis de un fragmento de Okazaki entre los des cebadores. 7. Y asi continua hasta llegar al replicén contiguo, DESTINO DE LOS CEBADORES Todos los cebadores o primers son fragmentos complementarios de ARN, y como tal no pueden estar en fa molécula nueva de ADN. Por esto, deben ser removidos. Este trabajo lo lleva la ADN Polimerasa Beta o ADN Polimerasa B. Los pasos del reemplazo son los siguientes: 1. Remocién de los cebadores por parte de una Nucleasa reparadiora 2, Sintesis para rellenar el espacio libre por parte de la ADN Polimerasa Epsilon 3, Acci6n de la ADN Ligasa para unir todos los fragmentos separados de las distintas partes de ADN sintetizado de manera discontinua, : ENZIMAS Y PROTEINAS PRESENTES EN LA SINTESIS DE ADN 4) ENZIMAS » Helicasa: Enzima que rompe las uniones puente de Hidrageno que unen a ambas hebras de ADN, y permite el separado de las mismas; > Topoisomerasa |: Enzima que corta una sola hebra de ADN, y Que la vuelve a unir luego de permitirsu desenrollamiento. Por ello se define que tiene una funcién doble, ya que primero es Nucleasa cortando una sola hebra de ADN, y luego Ligasa al Uni @ la hebra cortada, » Topoisomerasa Il: También llamada Ligasa. Enzima que corta ambas hebras de ADN, y que la vuelve a unir luego de permitir su desenrollamiento. Al igual que la Topoisomerasa, tiene la Goble funcién de Nucleasa (corta ambas hebras en este caso) y Ligasa (las une); » ADN Polimerasa Alfa: Sintetiza el primer o cebador, que es un fragmento de ARN complementario con ADN al final: > ADN Polimerasa Delta: Sintetiza la cadena continua de ADN; » ADN Polimerasa Epsilon: Sintetiza el ADN de los fragmentos de Okazaki; > Nucleasa reparadora: Remueve a todos los cebadores; » ADN Ligasa: Une todos los segmantos sintetizados por todas las ADN Polimerasas.2) PROTEINAS __ > SSB: sigla de Single Strand DNA Bin- . ding, son proteinas que se unen a 7 Cadena retrasada 2 las hebras de ADN recién separadas ‘Cebador de RNA por la Helicasa, y que impiden que > ___ seunan nuevamente: ~ > PENA: Anillo proteico que se une ala ‘ADN Polimerasa Delta e impide su separacin del ADN molde o patrén. ADN TELOMERICO Ena cadena discontinua a nivel del telomero se produce Un evento muy significativo para el envejecimiento celular. Al llegar al extremo del telémero, la ADN Polimerasa Epsilon no puede sintetizar el segmento de ADN que queda luego de la emocién del primer 0 cebador removide por Ia nucleasa reparadora. De esta manera, queda un hhueco que debe cubrirse pues quedarfa acortado el tel6mero, Para evitar el acortamiento prematuro en cada ciclo celular, un complejo multienzimatico llamado TELOMERASA sintetiza el segmento faltante y Iuego la ADN Polimerasa Delta sintetiza la hebra continua complementaria a la discontinua recién sintetizada porla Telomerasa, Es conveniente aclarar que existe un juego entre fo que no se sintetiza inicialmente por la ADN Polimerasa Epsilon y lo que recupera la Telomerasa, de tal manera que siempre, al final, el Telomero se acorta en cada ciclo lun poco. Esto es importante pues se ha demostrado una relacién muy fuerte entre el acortamiento del telémero y el envejecimiento celular. COMENTARIO FINAL: DE ROBERTIS Y LAS DIFERENCIAS Probablemente veas que hay ADN Polimerasas nuevas, que felta la ADN Polimerasa Beta, que la Primasa es una enzima que acta sola. Eso es porque te ensefiaron en el CBC sequin De Robertis. Lamentablemente De Robertis se desactualiz6, y nunca se preocuparon en acttalizarfo. Ojo, no lo digo yo, eh? Los libros actualizados como Cooper 6ta y 7ma edicién, Alberts Sta y Sta edicién, y Lodish Sta edicion (por nombrar algunos actualizados y que figuran en la bibliografia de las cétedras) dan la informacion que yo les puse. A continuacién les pongo las diferencias groseras que hay entre De Robertis (desactualizado) para contrastarla con el resio, De esta manera, segtin De Robertis (16ta edicién, que es la ultima): » La Primasa es una enzima separada que acta sola » El Primer 0 Cebador es solo un fragmento de ARN > La ADN Polimerasa Alfa sintetiza los fragmentos de Okazaki » No existe la ADN Polimerasa Epsiion » La ADN Polimerasa Beta sinteliza los huecos dejados por los cebadores removidosLOS AGENTES MUTAGENICOS Una pregunta obligada que nos surge es: {Cémo es que se producen las mutaciones? Las mutaciones Pueden ser espontaneas 0 inducidas por agentes mutégenos o mutagénicos. En biologia, un mutégeno es un agente fisico, quimico 0 biolégico que altera o cambia la informacién genética (usualmente ADN) de un organismo y ello incrementa la frecuencia de mutaciones por encima del nivel natural. Cuando numerosas mutaciones causan el cancer adquieren a denominacién de carcinégenos. No todas las mutaciones son causadas por mutagenos, Hay “mutaciones esponténeas”, llamadas asi debido a errores en la reparacién y la recombinacién del ADN. Los mutagenos se clasifican, entonces como: » Fisicos: Son las radiaciones ionizantes y las no ionizantes. > Quimicos légicos CARACTERISTICAS DE LAS RADIACIONES IONIZANTES » Aumentan la tasa de mutacién de forma directamente proporcional a la in- tensidad de la ionizacién > Se mide en Roentgen, Rad, Gray o Sievert. » Produce iones cargados eléctricamente que alteran a las bases del ADN > La exposicién a la radiaciOn es acumulativa » La exposicién crénica induce a mutaciones somaticas » La radiacion aguda afecta a células sométicas de alta tasa mitética (he- mopoyéticas, epitelios de revestimiento), y no afecta a las de baja tasa mit6tica (espermatogonias troncales). » El mecanismo de accién es indirecto al inducir cambios premutacionales > Producen fracturas de las cadenas dobles y simples, tautomerizacién de bases e inactivacién de enzimas, La gran mayorla de las alteraciones son deleciones CARACTERISTICAS DE LAS RADIACIONES NO IONIZANTES » El cldsico ejemplo es la luz Ultravioleta (luz UV) » No forman jones cargados eléctricaments, sino que producen ‘atomos inestebles al mover electrones de orbitales intemos ieneeeee hacia otros mas exteros, + roa nnee cones ent prnidnascsractniny EK AE B® ve que dan lugar a dimeros incapaces de aparearse + Promueven una sustitucién de bases Ree ee: a ew CARACTERISTICAS DE LOS MUTAGENOS ‘sr evvuas uuu Quimicos : NOIONZANTE. + » Las sustancias alquilantes son potentes agentes premutagénicos > Algunas sustancias quimicas tienen actividad mutagénica y carcinogénica > Hay sustancias quimicas inocuas que se vuelven mutagenicos y carcinogénicos al detoxificarse en higado. » Asi, por ejemplo: 5 —bromouracila: sustituye una base del AON durante fa repicacién, produciendo aparea- misntos erréneos; Colorantes de Acridina: causan mutaciones en el marco de lectura; Acido Nitroso: con- Vierte @ la citosina en uracio al quitarle un grupo amino MUTACION DIRIGIDA POR METODOS DE INGENIERIA GENETICA Hoy dia es posible insertar seg secuencia de un gen mutado, podemos, copias de un gen mutado. Luego, por teemplazo de un gen sano. En reelidad, lun gen sano en células mutadas), asi mentos de ADN dentro del genoma. Entonces, si conocemos y tenemos la pormedio de PCR (Reaccién en Cadena dela polimerasa), obtener multiples Tedio de Reemplazo Génico Dirigido podemos insertar un gen mutado en , lo que se busca es, en un futuro, poder conseguir el efecto inverso (insertar como también inactivar a genes que se quiera estudiar.QUE SON LOS PUNTOS CALIENTES O HOTSPOTS? Ciertas secuencias de nucleétidos son especialmente sensibles a sufrir mutaciones, por lo que se denominan Puntos Calientes Mutacionales. Ya hemos hablado de las islas CpG y su ubicacién en gran cantidad en las regiones promatoras de los genes. Se ha visto que, en este doblete, se dan mutaciones del tipo de transiciones de Citosina timing y de guanina a adenina, y que este tipo de mutacién se da a una tasa 25 veces superior a cualquier otra mutacin que afecte a un solo nuclestido, De ahi que se dice que las isias CpG son puntos calientes mutacionales. LOS TIPOS DE LESIONES Cuando #1 ADN se daffa, se pueden producir distintos tipos de lesiones, que van a esiar en relacién directa al problema que lo generé. Ellos son: » Missmatch de la ADN Pollmerasa: Cuando la ADN Polimerasa comete un error, y no lo reconoce durante la Doble Lectura, se establece un missmatch 0 base errénea en la Secuencia. > Apurinizacién o Despurinacién: Cuando por algiin motivo se degrada la unién glucosidica entre la pentosa y una base pirica, queda el nuciéotido sin su base ‘correspondiente. > Desaminacién: Fundamentalmente la Citosina, que al perder su grupo amino, se transforma en Uracilo > Metilacidn de la O guanina: cuando la oxiguanina se metila, dalugar a la metilguanina, El problema se da _* Porque la oxiguanina se une complementariamente ala citosina, pero la metiiguanina lo hace a la Timi- na. > Dimeros de Pirimidinas: Se da cuando dos Timinas contiguas se unen entre si de forma covalente, impi- iendo su unién complementaria con las bases en- frentadas (adeninas enfrentadas}. Este problema se da fundamentalmente por accién de los rayos UV. » Inserciones de ADN: Agregado de nucledtidos. > Deleciones: Pértida de Nuclestidos Luz uv REPARACION DEL ADN ELADN es una molécula estable, gracias a que esté formada por una doble hebra o cadena. Y que sea estable es fundamental para poder cumplir su funcién, que es la de ser el lugar donde se almacenan los genes. Sin embargo, constantemente el ADN se ve expuesto a agentes que producen algin dafio o mutacién, de algtn uclestido en la secuencia, Para que te des una idea de las lesiones a las que se ve expuesto el ADN, aca van dos ejemplos ilustrativos: » EI ADN de cada célula pierde por dia alrededor de 5000 bases piiricas (proceso llamado despurinacién), de- jando a nucleétidos de fa cadena sin su base nitrogenada, situacién conocida como sitio AP. Diariamente, alrededor de 100 citosinas por célula se desaminan (pierde un grupo amino) transformandose en Uracilo » Asimismo, #1 ADN se ve expuesto diariamente a radiaciones UV, y puede verse expuesto a radiaciones joni Zantes 0 a productos quimicos ambientales que cambian su secuencia de Nucleétidos. Todos estos dafios deben ser corregidos de alguna manera, para evitar que queden petmanentes en el ADN, y constituyan una mutacién, éCUALES LAIMPORTANCIADE EVITAR QUEEL DANO QUEDEPERMANENTE? Bueno, Io importante acd es que cuando el ADN se daria, puede afectar a un gen, haciendo que se altere la expresién del mismo. Que se altere significa que podria producir poco, no producir nada, producir una proteina nueva (que puede no servir para nada o encontrar una nueva funcién en la célula), 0 producir exceso de proteinas. Y acd lo que importa es que os genes siempre produicen una cantidad exacta, que es la que se necesita para funcionar correctamente, por lo que, cualquier variacién en la produccién de esa proteina lleva imemediablemente a algin problemaEntonces, para evitar lo antedicho, la célula eucarionte tiene un gran juego de enzimas encargadas de reparar el ADN. Para ello, existen varios mecanismos reparadores que evitan que el ADN finalmente quede dafiado. Volviendo a los mecanismos de reparacién del ADN, los sistemias de reparacién se valoran segun tres grandes variables: » Si el mecanismo repara una hebra dafiada o cuando estén ambas dafiadas » El tipo de dafio que se dio » El momento del ciclo calular en ol que se da la reparacién. ‘Segiin la hebra que reparan, se pueden clasificar en: 4, Reparan una sola hebra a. Doble Lectura (en fase S) b, Nucleasa reparadora (en fase S) ¢. Sintesis Transiesién (Fase S) d.Reparacién directa o inversion directa del dafio al ADN (Postreplicativo) e. Reparacién acoplada a la Transcripci6n (Postrreplic: f. Reparacién No Complementaria (Postrreplicativo) 0 Missmatch repair o REMA 9g. REBA (todo el ciclo) REN (todo el ciclo) Reparan ambas hebras a, Recombinacién homéloga (Postrreplicativo) b.Recombinacién no homéloga o unién de extremos no homélogos (Postrreplicativo) LA DOBLE LECTURA DE LAS ADN POLIMERASAS Esta actividad es también llamada LECTURA —* x . DEPRUEBAo PROOFREADING, LasADN Polimerasas 4 ° Afa, Delta y Epsilon son capaces de reconocer un error, ca " al insertar equivocadamente a un nucleétido. Cuando Poe | esto sucede, detiene la sintesis, retrocede, y a partir de bier se seomoda la Una actividad llamada Actividad Exonucleotidica ase correcta 5, e coria el nucledtido erréneo e inserta el correcto, x, Dik. Ty, . NUCLEASA REPARADORA " fe La misma nucleasa que remueve los cebadores (Proofreading) es capaz de reconocer un error en la secuencia de ‘nucleotides que escapé al control de la ADN Polimerasa. Esta enzima remueve ol o los nuclestidos equivocados. Luego, la ADN Polimerasa Epsilon sintetiza el segmento faltante, y finalmentela ADN Ligasalos une alos segmentos.REMA — REPARACION POR MAL APAREAMIENTO En bacterias se llama Missmatch repair, o sea reparacién por mal apareamiento, Cooperlo llama Reparacién No Complementaria. Se da cuando la ADN Polimerasa no reconocié un error en la polimerizacién. Fue estudiado ampliamente en bacterias (procariontes), y esta representado por ol sistema MutS, MutL y Muth. En eucariontes no se conoce con precision. Las andlogas de MutS y Mutl se llaman MSH y MLH. MSH Feconoceria la base errénea que genera el mal apareamiento, y MLH corta la hebra cerca del mismatch. Y luego tunas endonucleasas y helicasas actiian para remover el ADN entre el corte hasta la base errénea. Finalmente, una Polimerasa reparadora rellena el hueco correctamente. REPARACION POR ESCISION DE BASES - REBA REBA es una sigla que significa Reparacién por Escision de Base. Une Vez terminada la replicacién, puede darse que en el ADN aparezca Uracilos en lugar de Citosinas. Este mecenismo se produce por dos mecanismos: Error esponténeo de la enzima ADN Polimerasa que acomoda uracilo en jugar de citosina ‘Una desaminacion de la citosina. Sabemos que dicha base es privativa del ARN, porlo que su apariciOn en el ADN es anémala. Su remocion 8s llevada a cabo por una enzima llamada ADN GLICOSILASA, que corta la unién entre la desoxirribosa y la base nitrogenada, y remueve asi a la base anémala, dejando al nucleétido sin su base. De igual forma, otra ADN GLICOSILASA remueve las hipoxentinas suraidas al deseminarse las adeninas, ‘Coma consecuencia de todo lo explicado, quedan nucleétidos sin su correspondiente base nitrogenada, Estos sitios se los reconoce como SITIOS AP (por APurinicos 0 APirimidicos), que son removidos de la cadena or una enzima llamada AP ENDONUCLEASA que corta los extremos del sitio AP. Finalmente, la ADN Polimerasa Sintetiza el nuclestido correcto, la ADN Ligasa une los extremos separados. REPARACION POR ESCISION NUCLEOTIDICA - REN La radiacién UV produce generalmente 1a formacién de Dimeros de Pirimidinas, siendo la timina la mas frecuente de aparecer. En ella, dos nuclestidos vecinos de Timina se unen entre si de forma covalente, impiciendo a unién complementaria con la cadena enfrentada. La reparacién comienza cuando el dimero es reconocido por una proteinas llamadas proteinas XP. Luego dos enzimas NUCLEASAS cortan un segmento de 24 a 32 nucleétidos, en donde se encuentra el dimero de Timina, mientras que la ADN Helicasa separa a dicho segmento. Finalmente la ADN Polimerasa sintetiza el segmento faltante, y la Ligasa une los exiremos separados. SINTESIS DE TRANSLESION Este es un sistema para tratar al ADN dafiado en la horquilla de replicacién, es decir, durante la sintesis de DN en a fase S. Elmecanismo es simple. Cuando aparece unalesién en el ADN, las ADN Polimerasas Replicativas (record que son las que sintetizan el ADN en la fase S, 0 sea la Alfa, Delta y Epsilon) se detienen al reconocer Giertas lesiones que no pueden corregir. En este momento, la célula activa a unas ADN polimerasas mas permisivas. Esta polimerasa permisiva es capaz de sintetizar usando como molde ADN dafiado, Esto garantiza la continuidad de la replicacion, aunque con la potencialidad de aumentar la mutagénesis. El motivo es que estas polimerasas permisivas no poseen actividad de doble lectura, por lo que pueden sintetizar a través de un punto de ADN datiado, y luego de la replicacién se podra corregir el error. INVERSION DIRECTA DEL ADN DANADO Hay un grupo de lesiones donde no es necesario remover nucledtidos durante la reparacién, como en este caso. Pero se da solamente para los cimeros de pirimidina, y los residuos de guanina alquilada que se modiicaron or agregados de grupos met.IGEM El mecanismo mas extensamente usado para tratar a los dimeros de Pirimidina es la Fotorreactivacion. Se ve en bacterias, plantas y algunos animales eucariontes, pero en mamiferos placentarios este mecanismo no existe. En si, la fotorreactivacién usa la luz visible para romper las uniones covalentes entre las pirimiainas contiguas Otro mecanismo, presente en humanos, es la reparacién directa al dafio producido por agentes alquilantes (sustancias capaces de transferir grupos metilo y etilo a bases nitrogenadas, como la metilacion de la guanina, formando metiiquanina. Lo llamativo es que la guanina hace union complementaria con citosina, pero la metilguanina lohace con Timina. La enzima encargada de hacer esta reparacion directa, es decir sacarle el metilo a la metilguanina Para que vuelva a ser guanina, se lama o-metiquanina metitransferasa, que transfiere el grupo metilo de la ‘metilguanina a una cisteina (aminoacid) de la enzima, REPARACION ACOPLADA A LA TRANSCRIPGCION Es un mecanismo de reparacién que actia selectivamente sobre genes que se transcriben activamente, 0 ‘sea que estén todo el tiempo sintetizando ARN. Cuando la ARN Polimerasa (que es la enzima que transcribe los ARN) reconoce una lesién, se detiene. Una vez detenida, es reconocida por dos proteinas, llamadas CSA y CSB. Una vez unidos a la zona de ADN daiado, Teolutan otras proteinas (XPA, RPA y TFIIH) que permitizn atraer a las proteinas XP (las del sistema REN), y se produce una reparacién por escisién de nuclestidos como la descripta previamente. REPARAGION DE EXTREMOS NO HOMOLOGOS También llamada Unién de Extremos No Homélogos. En este caso, se produce un corte en ambas hebras dando extremos romos, es decir se corta ambas hebras en la misma posicién, En este caso, los extremes son reconocidos por unas proteinas llamadas KU70 y KU8O. Una vez reconocidos, acida una enzima llamada ADN — PK (una quinasa) que activa a una enzima llamada Ariemis. Esta enzima ¢ Gncarga de recortar los extremos separados para que puedan unirse nuevamente. O sea, en esta técnica siempre hay pérdida de ADN. Finalmente una enzima ligasa une los extremos separados. REPARACION POR RECOMBINACION HOMOLOGA Es un macanismo que solamente puede hacerse en G2, porque necesita a las dos cromatides hermanas ara actuar. En ellas, cuando en una eromatide se cortan ambas hebras, se usara la otra como mode LA CELULA CANCEROSA Por definicién, una célula cancerosa es aquella célula que perdié los mecanismos reguladores propios de una célula normal, Es decir, es una célula que ya no es normal (porque no se puede controlar) y por ende ‘es une Célula descontrolada, Y se caracteriza por una proliferacién continua y descontrolada, que termrinan Invadience {ejidos y érganos sanos, y finalmente se diseminan por todo el cuerpo por medio de las llamadas metastasis, Cualquier célula del cuerpo es susceptible de suffr un dao en el ADN que derive en una célula cancerosa, Por lo que hay un listado muy variado de tipos de céncer (alrededor de 100 distintos). Pero siempre hay ue ver al tipo de comportamiento que tienen. Cuando hablamos de tumor, queremos decir que se trata de una proliferacion anormal de células, De hecho, tumor significa bulto o masa, Pero los tumores pueden tener dos comportamleniceDe esta manera, pueden ser: > Tumor Benigno: permanece en el telido de donde proviene la célula que mutd, 0 sea que no hay invasién a tejidos vecinos ni diseminacién por sangre de células cancerosas » Tumor Maligno: Invade tejidos vecinos y se disemina por sangre por medio de metastasis. A estos son los que se los llama cancer CARACTERISTICAS DE LA CELULA CANCERIGENA Las oélulas cancerigenas tienen distintos comportamientos que las hacen Unicas, Ahora, cuando se estudia el total de células, se vio que, enire todas, hay ciertos comportamientos habiluales que, si bien no necesariamente tienen a todos al mismo tiempo, cada célula tumoral coincide en tener varias de estas caracteristicas: » Inhibicién de la proliferacion dependiente de densidad » Crecimiento en ausencia de Factores de Crecimiento » Estimulacién autécrina del crecimiento » Disminucién de las Cadherinas > Secrecién de proteasas de la MEC » Secrecién de factores angiogénicos » Inactivacién de la apoptosis » Sobreproduccién de Telomerasas Para poder explicar cada una de estas caracteristicas, es necesario en cada item contar como es el proceso normal, par asi comprender el problema que se genera, INHIBICION DE LA PROLIFERAGION DEPENDIENTE DE DENSIDAD Aca hay dos cosas que se tiene en cuenta cuando se habla de a 2. < este proceso, Para poder comprender este fenémeno, debemos tenet) memati Z : en claro que’ » En una célula normal, se produce una proliferacién celular de- finida, dependiente de la cantidad de factor de crecimiento (que esta regulado en un cuerpo sano). Ese nimero de células ‘esta definido genéticamente. Dicho de otra manera, las células ssanas proliferan hasta alcanzar un nimero de células (0 una densidad celular) definida por la cantidad de Factores de Creci- miento presentes en el medio. Una vez inhibida, la célula entra. “aviesdsaine en GO y detiene su proliferacién. En el céncer, se pierde esta inhibicién, y las células siguen proliferando de manera descontrolada. Como no puede entrar en GO, la célula sigue ciclando y, por ende, sigue dividiéndo- se. Recordé que, sia célula no entra en GO, y por ende queda en G1, se sigue moviendo por el ciclo celular Pasando por S, G2 finalmente division. » Sisse tienen células migrantes en cult\vo (por ejemplo, fibroblastos), se mueven hasta tomar contacto con otra Célula migrante, momento en que embas células se detienen, y al final se obtiene una monocapa de células en el cultivo, En la célula cancerosa, se pierde la inhibicién por contacto, y las células siguen moviéndose, prolferanco de tal forma que se forman varias capas de células descontroladas CRECIMIENTO EN AUSENCIA DE FACTORES DE CRECIMIENTO En una célula sana, la prolferacién celular se da cuando un receptor para Factor de Crecimiento es estimulado Por un Factor de Crecimiento. Esta estimulacién produce la activacién de proteinas sefializadoras intracelulares, {as cuales van a hacer una cascada de activaciones (es decir, una activa a otra, que a su vez activa a otra) y que terminan activando genes de protefnas reguladoras de la proliferacién celular. Enlas células cancerosas, se produce una activacién intracelular de proteinas sefializadoras en ausencia de Factores de Crecimiento. De esta manera, si alguna de estas proteinas de la cascada se activa, se activan los genes. de proteinas reguladoras de la proliferacién celular.ESTIMULACION AUTOCRINA DEL CRECIMIENTO En condiciones normales, una célula produce factores de Crecimiento, S pare estimular a otra céiula a que prolifere (lamade célula Diana o Target). Esta Hs Célula diana o target presenta al receptor para el Factor de Crecimiento producido. OH Ciertas células cancerosas son capaces de producir de forma anémala, e “] grandes cantidades de Factores de Crecimiento, y receptores para ese Factor. i De esta manera, produce al Factor y se estimula a si misma. Este mecanismo se ( llama estimulacién autdcrina, porque justamente, como dijimos previamente, se * fo 2 5 : Hoo eaee estimula a si misma. DISMINUCION DE LAS CADHERINAS Las cadherinas son proteinas mediadoras de la Adhesién celular. Es decir, permite que dos células estén Unidas entre si por medio de uniones adhesivas. Es una gran familia, que se nuclean en dos grandes grupos: » Clasicas: representadas por la Cadherina-E (presente en epitelios), Cadherina-N (presente en tejido nervioso) y Cadherina-P (presente en tejido placentario). Forman tas zonula adherens. » No clésicas: Desmogleinas y Desmocolinas que forman los desmosomas macula adherens. En les células cancerosas, como se pierden las uniones intercelulares, las células pueden seperarse, y tengan la habilidad de poder migrar. Como no tiene uniones a las células vecinas, la célula cancerosa puede ‘comenzer e! proceso de migracién sin restricciones por anciaje a otra célula, y dar comienzo a las metastasis. SECRECION DE PROTEASAS DE LA MEC Este mecanismo permite que las células cancerosas puedan degradar la MEC de tejides adyacentes sanos, y de esta manera invadir a estos tejidos, SECRECION DE FACTORES ANGIOGENICOS Las células cancerosas son cepaces de producir factores angiogénicos, es decir, hormonas que estimulan la formacién de vasos sanguineos. Lo que hacen es estimular a capilares que estan cerca de ellas para que creen vasos sanguineos que las nutran (las células cancerosas son grandes consumidoras de nutrientes y oxigeno). Estos vasos, Sanguineos habituaimente terminan metiéndose dentro de la masa tumoral, haciendo que esté ricamente vascularizado. Estos vasos neoformado van a permitir @ futuro hacer metastasis, que son células cancerosas que se diseminan en el cuerpo por medio de la circulacién sanguinea. INACTIVACION DE LA APOPTOSIS Una de las caracteristicas de las células cancerosas es que tienen inhibido la posibilidad de hacer apoptosis, impidiendo de esta manera que se active la muerte celular programada. El mecanismo de accién es por medio de la ‘mutacién de genes reguiadores de la apoptosis. La forma de hacerlo puede ser de dos formas: + Mutan @ un gen antiapoptético para que sobreexprese la proteina: Es el caso del gen Bcl-2. Cuando este ‘gen muta, se produce Un exceso de esta proteina, que ya dijimos que tiene efecto antiapoptatico, » Mutan a un gen proapoptético, haciendo que no produzca la proteina: Es el caso del gen p53, que pro- duce la proteina p53 de efecto proapoptético. Al no producir la proteina, o produciria de forma que no haga nada (pierde su funcién), no se puede entrar a la apoptosis. SOBREPRODUCCION DE TELOMERASAS Los telomeros corresponden a los extremos de los cromosomas, y que en cada duplicacién del ADN se van ‘acortando, dando lugar a la senescencia celular y posterior muerte. Las células cancerosas sobreproducen la enzima Telomerasa para que siempre mantenga intactos a los telomeros, y as! no se acortan en cada divisién celular, haciendo que puedan dividirse de manera indefinida,LOS GENES CRITICOS Cuando se habla de la genética del cancer, existen tres grupos de genes considerados criticos, porque la ‘mutacién de ellos es condicién para la formacién del céncer. LOS PROTOONCOGENES Como ya hablamos hablado previamente, los protooncogenes Son genes sanos que regulan la proliferacién Celular. Ejemplos de ellos pueden ser los genes de los Factores de Crecimiento, 0 os genes de los receptores para los Factores de Crecimiento Cuando los protooncogenes mutan, pasan a llamarse Oncogenes. Estos oncogenes tienen una caracteristica: 8 una mutacin Dominante con ganancia de Funcién Simple. 2Qué significa esto? Vayamos por partes: » Que sea Dominante significa que con un solo alelo mutado es suficiente para manifestar sintomas de la enfer- medad » Que sea una mutacién de Ganancia De Funcién Simple significa que la mutacién genera una sobreexpresién del producto génico, o sea que se produce de mas, en exceso, levando a sobreestimulacién, Un oncogen muy conecido y nombrado siempre es el oncogen Ras. que proviene del protooncogen Ras. El Protooncogen Ras es una familia de enzimas GTPasas que transmiten sefiales desde la membrana plasmética hacia 6 interior celular, participando en la sefalizacién de la mitosis. Una mutacién en este gen lleva a una alteracion de {a regulacién y sefializacién de la mitosis. 2QUE SON LOS RETROVIRUS ONCOGENICOS? Existen ciertos virus llamado retrovirus. Estos virus tienen dos cosas claves: ARN y una enzima llamada Transcriptesa Reversa. Esa enzima toma los ARN virales y los transforma en ADN, y luego los inserta en el ADN de la célula ala que infecta, 0 sea el ADN nuclear. Ese ADN viral creado por la enzima es un oncogen, por fo que, cuando se inserta en el ADN de la célula Infectada, Ie inserta ese oncogen, y ahora la célula comienza a funcionar de manera alterada, LOS GENES SUPRESORES DE TUMORES Son genes encargados de detener el ciclo celular, y por ende inhibiendo la proliferacion celular. Recordé que, Si se detiene el ciclo, la célula (obviamente) no puede ciclar, o sea no puede moverse a lo la'go del ciclo. © SEEEEAA, no puede dividirse 0 proliferar. Ejemplos de estos genes son: > Gen p53, > Gen Rb > INK4 y PTEN (en Cancer de Pulmén, préstata y melanoma) » BRA‘ y BRCA2 (en Cancer de mama hereditaria) Cuando estos genes mutan, tiene comportamiento recesivo, y su mutacién es de pérdida de funcién. .Qué significa esto? Vayamos por partes: » Que sea Recesivo significa que necesita la mutacién de los dos alelos para manifestar sintomas de afectacién génica » Que sea una Mutacién De Pérdida De Funcion significa que o bien se produce una proteina que no tiene efecto alguno (y se degrada en proteasomas) o bien no se produce directamente ninguna proteina,Entonces, cuando estos genes mutan, no pueden detener el ciclo, porlo que la eélula cicia, es decir que se va.a mover en el ciclo... O SEEEEAA se va a poder dividir sin restriccién alguna. DESARROLLO DEL CANCER . Un dato muy importante a tener en cuenta es que el cancer esta formado por clones celulares, o sea que se trata de la proliferacion anémala de una sola célula cancerosa, El segundo dato importante a tener en cuenta es que esa Célula patente cancerosa se desarrollé luego de mutiples etapas de desarrollo celular. er Es decir, para llegar a esa célula, previamente se dieron varias etapas fundamentales. De hecho, una tedrica actual del cdncer plantea que la Progresie primer célula modificada se da en los primeros afios de vida, y que luego. de miitiples etapas (que pueden durar afios), se da una célula cancerosa que comienza a proliferar para la edad de 30 a 50 afios. Como veras, estas etapas pueden durar muchos afios. En el desarrollo del céncer se dan tres eventos claves, tres pasos que son los que determinan que se dé una célula cancerosa: » Iniciacién Del Tumor: es el primer paso. Se da cuando, debido a alguna lesién en el ADN, se produce una célula que comience a proliferar de manera anémala, » Progresién Del Tumor: A medida que la célula prolifera, se van dando mutaciones adicionales, dando lugar a subpoblaciones celulares (con cistintas mutaciones). Estas mutaciones pueden dar Ventajas o desventajas a las células que lo tienen. Por ejem- plo, si la mutacién genera que consuma mejor el oxigeno que la Célula de al lado, se constituye una ventaja, » Seleccion Clonal: Una sola de estas subpoblaciones va a preva- lecer sobre el resto, haciendo que las otras mueran, y solamente. queda ella, Esta célula es la célula cancerosa, que dara lugar al cancer. LOS VIRUS TUMORALES | Existen miltiples virus con capacidad oncogénica, esto es, ca- paces de lesionar el ADN de tal forma que den lugar a una célula cance- rigena. Dichos virus son: > Hepatitis By C @} >HPV > Poliomavirus de Células de Merkel y SV-40 > Epstein-Barr virus Poblacion » Herpesvirus asociados a sarcoma de Kaposi vane ‘de cetuias Tmerates 36 cracrnentc sms rape aa4) ELADN 2) Es un polimero bicatenario de desoxinucledtides bb) Es un polimero bicatenario de nucleésidos ©) Sus hebras son paralelas y complementarias 4d) Es.un polimero de bases nitrogenadas 2) La duplicacién del ADN 2) Dura 3 hs aproximadamente: b) Es semiconservativa y asimétrica ©) Es biconservativa y simétvica 4) Es sincrénica y unidireccional 3) Los Acidos nucieicos 2) Son solamente el ADN y EIARN b) Son polimeros de nuclestidos mediante uniones glucosidicas o fosfodigster ) Son todos bicatenarios 1d) Son todos monocatenarios enfrentados 4) Con respecto ala cromatina a) La eucromatina se ubica en los telomeros b)La Heterocromatina constitutva se puede sintetizar en ciertas células c) Un ejemplo de heterocromatina facultativa es el cromosoma X en la mujer 4) Todas son incorrectas 5) Con respecto alos acidos nucleicos * 8) Un nuclestido estd formado por glucosa, una base nitrogenada y un grupo fosfato b)Les bases itrogenades presenten uniones puertes de hidrdgeno complementarias c)Se unen por uniones glucosidicas entre las glucosas 4) Los ADN tienen ribosa como pentosa 6) EIADN nuclear a) Esunahebra monocatenaria que almacena genes en su interior b)Selee de3'a5'ydes'az ©) Contiene al juego completo de genes nucleares d)Esté asociado a proteins solo cuando hace mitosis 7) La cadena discontinua es sintetizada por a) LaADN polimerasa Delta b) La ADN polimerasa Alfa ¢) LaADN polimerasa Epsilon ¢) La Helicasa 8) Cual de las siguientes no es caracteristica de la célula tumoral a) Inhibicion de la proliferacion dependiente de densidad b)Crecimiento en ausencia de Factores de Crecimiento ©) Estimuacién paracrina y endécrina delcrecimiento 4) Disminucién de las Cadherinas PREGUNTAS DE REPASO 9) Respecto de los mecanismos de arreglo del ADN a) REBA permite arreglar dimeros de timina b)La sintesis translesién permite arreglar en la horquilla de replicacién ) REN permite arreglar los sitios AP 4) En lainversién directa del ADN dafiado se invierte luna Secuencia alterada para evitar mutaciones 10) Con respecto ala cromatina ‘2) Las histonas son proteinas dcidas b) Las PCNA y SSB son proteinas acidas ¢) Las enzimas nucleares son proteinas acidas : 4) ELADN es una proteina acida 11) Respecto de los mecanismos de arreglo ‘a)La recombinacién homéloga puede arreglar el dario de una hebra o de ambas, b) En la reparacin de extremos no homélogos se pierde ADN de una hebra que se recupera con tuna polimerasa reparadora ©) La doble lectura las hacen todas las enzimas polimerasas d) REMAes una sistema de arreglo también llamado Mismatch Repair 42) Con respecto a la cromatina (marque la inco- recta) a)Las fibras de 10 nm tienen configuracin en cuentas de collar b) Un cromatosoma es un nucleosoma con la histona H1 unida ) Un solencide esta formado por 6 nucleosomas sin la histona H1 4) Las fibras de 300 nanémetros corresponden a niveles de compactacién alta de la cromatina, RESPUESTAS an O@NODAONA ov0B00000>uF