Machine Translated by Google

Hóa thực vật 63 (2003) 335–341

www.elsevier.com/locate/phytochem

Phân lập theo hoạt động của các thành phần hóa học của Muntingia calabura
bằng cách sử dụng xét nghiệm cảm ứng quinone reductase

Bảo Ninh Sua , Park Eun Jung , Joseph Schunke Vigob, James G. Graham,
Fernando Cabiesesb, Harry HS Fonga , John M. Pezzutoa , A. Douglas Kinghorn,*
Chương trình hợp tác nghiên cứu trong khoa học dược phẩm và Khoa Hóa dược và Dược lý học,
Cao đẳng Dược, Đại học Illinois tại Chicago, Chicago, IL 60612, Hoa Kỳ bInstituto
Nacional de Medicina Tradicional (INMETRA), Minesterio de Salud, Jesus Maria, Lima, Peru

Nhận ngày 6 tháng 12 năm 2002; nhận được trong mẫu sửa đổi ngày 24 tháng 1 năm 2003

trừu tượng

Phân đoạn theo hướng dẫn hoạt động của dịch chiết lá Muntingia calabura hòa tan trong EtOAc được thu thập ở Peru, sử dụng xét nghiệm cảm ứng quinone

reductase in vitro với tế bào Hepa 1c1c7 (u gan chuột) nuôi cấy, dẫn đến phân lập flavanone với B- không được thế. vòng, (2R,3R)-7-methoxy-3,5,8-

trihydroxyflavanone (5), cũng như 24 hợp chất đã biết, chủ yếu là flavanone và flavon. Cấu trúc bao gồm hóa học lập thể tuyệt đối của hợp chất 5 được xác

định bằng phương pháp quang phổ (HRMS, 1D và 2D NMR và phổ CD). Trong số các chủng phân lập thu được, ngoài 5, (2S)-5-hydroxy-7-methoxy-flavanone, còn có

20 ,40 -dihydroxychalcone, 4,20 ,40 -trihydroxychalcone, 7-hydroxyisoflavone và 7,30 ,40 -trimethoxyisoflavone là được tìm thấy có khả năng gây ra hoạt
động của quinone reductase.

# 2003 Elsevier Science Ltd. Mọi quyền được bảo lưu.

Từ khóa: Muntingia calabura; Họ Elaeocarpaceae; (2R,3R)-trans-7-metoxy-3,5,8-trihydroxyflavanon; Xét nghiệm cảm ứng Quinone reductase

1. Giới thiệu
Việc tạo ra các enzyme chuyển hóa thuốc ở Giai đoạn 2
như quinone reductase (QR) được coi là một chiến lược hiệu
quả để đạt được sự bảo vệ chống lại tác động độc hại và ung
thư của nhiều chất gây ung thư ( Gerha¨user et al., 1997;
Talalay, 2000). Là một phần trong quá trình chúng tôi tiếp
tục tìm kiếm các tác nhân hóa học ngăn ngừa ung thư mới có
nguồn gốc từ thực vật (Pezzuto, 1997; Kinghorn và cộng sự,
1998; Pezzuto và cộng sự, 1999), lá của loài Muntingia
calabura L. (Elaeocarpa-ceae), được thu thập ở Peru, được
chọn để nghiên cứu chi tiết vì chiết xuất hòa tan EtOAc của
chúng tạo ra QR đáng kể với các tế bào Hepa 1c1c7 (hepa-
toma chuột) được nuôi cấy. Các bộ phận khác nhau của cây
này có một số công dụng làm thuốc được ghi nhận ở cả Đông
calabura
Nam Á và châu Mỹ nhiệt đới (Kaneda và cộng sự, 1991; Nshimo và cộng sự,
* Đồng tác giả. ĐT: +1-312-996-0914; fax: +1-312-996-
7107.
Địa chỉ email: kinghorn@uic.edu (AD Kinghorn).
1993). Rễ đã được sử dụng làm thuốc gây kinh nguyệt ở Việt
Nam và làm thuốc phá thai ở Malaysia. Ở Philippines, hoa
của loài này đã được sử dụng để điều trị chứng đau đầu và
làm thuốc chống khó tiêu, chống co thắt và ra mồ hôi. Nước
ép hoa của loài cây này được dùng làm thuốc an thần và
thuốc bổ ở Colombia (Perez-Arbelaez, 1975; Kaneda và cộng
sự, 1991).
Trong nghiên cứu trước đây của chúng tôi, một số
flavonoid và chalcone gây độc tế bào đã được phân lập từ
rễ (Kaneda và cộng sự, 1991) cũng như lá và thân (Nshimo
và cộng sự, 1993) của loài này được thu thập ở Philippines
và ở Thái Lan. . Các nghiên cứu về hóa chất thực vật khác
trên loại cây này đã dẫn đến việc phân lập flavon và axit
ellagic (Seetharaman, 1990). Các thành phần phe-nolic,
sesquiterpene và furanoid dễ bay hơi trong quả chín của M.
đã được phân tích bằng GC-MS (Wong và cộng sự,
1996). Bài báo này mô tả quá trình phân lập và làm sáng
tỏ cấu trúc của 24 hợp chất đã biết, (1–4, 6–14), và một
flavanone mới, (2R,3R)-7-methoxy-3,5,8-trihydroxyflavanone
(5) , thu được bằng cách sử dụng xét nghiệm cảm ứng QR để
theo dõi quá trình phân đoạn (Chang và cộng sự, 1997;
Dinkova-Kostova và Talalay, 2000). Các

0031-9422/03/$ - xem mặt trước # 2003 Elsevier Science Ltd. Mọi quyền được bảo lưu.
doi:10.1016/S0031-9422(03)00112-2
Machine Translated by Google

336 B.-N. Su và cộng sự. / Hóa thực vật 63 (2003) 335–341

các chủng phân lập đã được tinh chế từ M. calabura được phân lập riêng lẻ
được đánh giá về tác động của chúng lên cảm ứng QR.
2. Kết quả và thảo luận
Phân đoạn dịch chiết hòa tan được EtOAc của
lá của M. calabura với xét nghiệm cảm ứng QR dẫn đầu
đến việc tinh chế một flavanone mới, (2R,3R)-7-meth-oxy-3,5,8-
trihydroxyflavanone (5), cũng như 24 chất đã biết
hợp chất, (2S)-7-hydroxyflavanone (1) (Tanrisever et
cộng sự, 1987; Hsieh và cộng sự, 1998a), (2S)-5,7-dihydroxy-
(Ichino và cộng sự, 1988), 47.3 (c 5.48, MeOH) (Hsieh et al.
cộng sự, 1998) và 52 (c 0,188, MeOH) (Fukui và cộng sự, 1988)
đã được báo cáo về 5,7-dihydroxyflavanone (2), và
giá trị 1,6 (c 0,45, CHCl3) (Ichino và cộng sự, 1988),
45 (c 0,50, CHCl3) (Ha¨berlein và Tschiersch, 1994)
và +5 (c 0,05) (Gonza'lez et al., 1989) đã được báo cáo
đối với 5-hydroxy-7-methoxyflavanone (4). Giá trị của
58,5 (c 0,91, MeOH) và 57,5 (c 0,80, CHCl3) là
thu được cho các hợp chất 2 và 4 trong nghiên cứu này,
tương ứng. Hơn nữa, hỗn hợp đối hình
dạng 5-hydroxy-7-methoxyflavanone được phân lập
từ nguồn gốc của Renealmia nicolaioides trong thời gian gần đây của chúng tôi

flavanone (pinocembrin, 2) (Ichino và cộng sự, 1988; Hsieh và cộng sự.
cộng sự, 1998), (2R,3R)-3,5,7-trihydroxyflavanone (pino-
banksin, 3) (Kuroyanagi và cộng sự, 1982), (2S)-5-hydroxy-7-
methoxyflavanone (pinostrobin, 4) (Ichino và cộng sự, 1988;
Gonza'lez và cộng sự, 1989), 7-hydroxyflavone (Silva và cộng sự,
1994), 5,7-dihydroxyflavone (chrysin) (Yang và cộng sự,
3-methoxy-5,7,40
1996), (iso-kaemferide) (Wang -trihydroxyflavone
và cộng sự, 1989), 3,30
-dimethoxy-5,7,40 -
trihydroxyflavone (Wang và cộng sự, 1989), 8-methoxy-3,5,7-
trihydroxyflavone (6) (Karasartov và cộng sự, 1992), 3,8-
dimethoxy-5,7,40 -trihydroxyflavone (Roitman và
James, 1985), 3,5-dihydroxy-7,40 -dimethoxyflavone
(ermanin) (Echeverri và cộng sự, 1991), 3,5-dihydroxy-7,8-
dimethoxyflavone (gnaphaliin, 7) (Haensel và Ohlen-dorf,
1969), 5-hydroxy-3,7,8-trimethoxyflavone
(Proksch và cộng sự, 1982; Reinecke và Minter, 1994), 5.40 -
dihydroxy-3,7,8-trimethoxyflavone (8) (Bernhard và
Thiele, 1981), 5-hydroxy-3,7,8,40 -tetramethoxyflavone
công việc (Gu và cộng sự, 2002). Trong phổ CD của các hợp chất
1–4, hiệu ứng bông tiêu cực và tích cực tương ứng,
được quan sát thấy ở các vùng chuyển tiếp p!p* và n!p
(xem phần Thí nghiệm). Những quan sát này chỉ ra 2S
hóa học lập thể tuyệt đối cho flavanone 1, 2 và 4 và
Hóa học lập thể 2R,3R cho 3 (Gaffield, 1970).
Hợp chất 5 thu được ở dạng vô định hình màu vàng nhạt
23
bột, mp 226–228 C, [a]d +30,0 (c 0,25,
CHCl3+MeOH, 1:1). Công thức phân tử của
C16H14O6 được gán cho 5 dựa trên cơ sở proton
đỉnh ion phân tử tại m/z 303,0866 [M+H]+ (calc. for
H NMR
C16H15O6, 303.0869) trong HRCIMS của nó. số 1
Phổ của hợp chất 5 hiển thị tín hiệu của hai cặp methine tạo
ra oxy ở mức 5,17 (1H, d, J=11,1 HHz,
H-2) và 4,62 (1H, d, J=11,1 Hz, H-3), là
Bảng 1
1
Dữ liệu phổ H NMR của 5 và 13C và dữ liệu phổ DEPT NMR của

(9) (Pandey và cộng sự, 1984), 20,40 -dihydroxychalcone (10) 5–9a

(Tanrisever và cộng sự, 1987; Barrero và cộng sự, 1997), 4,20,40

5b 6b 7c 8 ngày 9 ngày

-tri -hydroxychalcone (isoliquiritigenin, 11) (Kitagawa và cộng sự,

Chức vụ
1993), 7-hydroxyisoflavone (12) (Nishiyama và cộng sự, H C C C C C

1993), 7,30,40 -trimethoxyisoflavone (cabreuvin, 13) 2 5,17, d (11,1) 82,9 d 146,5 giây 145,3 giây 149,3 giây 1493 giây
(Fonseca và cộng sự, 2000; Ohsaki và cộng sự, 1999), (2S)-50 - 4,62, d (11,1) 71,8 d 137,9 giây 136,3 giây 139,1 giây 139,3 giây

hydroxy-7,8,30,40 - tetramethoxyflavan (Kaneda và cộng sự, 3 198,3 giây 177,2 giây 175,8 giây 179,9 giây 179,9 giây

1991), 20,40 - dihydroxydihydrochalcone (14) (Jain và
Mehta, 1985), axit 3,4,5-trihydroxybenzoic, lupenon
(Dantanarayana và cộng sự, 1982), và axit 2a,3b-dihydroxy-
4 101,0 giây 104,0 giây 103,3 giây 105,9 giây 105,9 giây
155,2 giây 156,1 giây 156,4 giây 156,9 giây 156,6 giây
4a 5 6 6,26 giây 92,8 ngày 99,2 ngày 95,2 ngày 96,3 ngày 96,3 ngày
7 157,2 giây 157,5 giây 158,7 giây 158,7 giây 159,6 giây

olean-12-en-28-oic (Ikuta và cộng sự, 1995). Cấu trúc của các số 8 147,7 giây 128,4 giây 129,1 giây 129,8 giây 129,8 giây

hợp chất đã biết này được xác định bằng 8a 155,5 giây 156,4 giây 156,4 giây 158,2 giây 158,2 giây

1H
đo dữ liệu vật lý và quang phổ ([a]D, NMR, 13C NMR, DEPT,
2D NMR và MS) và bằng
so sánh số liệu thu được với số liệu đã công bố
các giá trị. Dữ liệu phổ 13C NMR của các hợp chất 6–9
137,3 giây 132,0 giây 130,9 giây 122,8 giây 123,8 giây
10 20 7,41-7,43, m 128,0 d 128,3 d 127,7 d 131,3 d 131,1 d
30 7,54-7,56, m 128,5 d 129,5 d 128,7 d 116,5 d 115,1 d
40 7,41-7,43, m 128,0 ngày 130,9 ngày 130,4 ngày 161,0 giây 162,9 giây
50 7,54-7,56, m 128,5 d 129,5 d 128,7 d 116,5 d 115,1 d

và 14 được chỉ định lần đầu tiên (Bảng 1 và 60 7,41-7,43, m 128,0 d 128,3 d 127,7 d 131,3 d 131,1 d

OH-5 11,59, s
Thực nghiệm).
OM 3,84 giây 56,1 q 61,8 q 61,6 q (8) 61,6 q (8) 61,6 q (8)
Một cuộc khảo sát tài liệu cho thấy hầu hết các flava-none
56,4 q (7) 60,2 q (3) 60,3 q (3)
được phân lập từ các nguồn tự nhiên cho đến nay đều có 2S
56,9 q (7) 56,9 q (7)
cấu hình tuyệt đối (Yoshikawa và cộng sự, 1998; Kur-oyanagi 55,9 q (40 )

và cộng sự, 1982), nhưng flavanone 2R cũng đã được

a Tất cả dữ liệu được chỉ định dựa trên phổ 2D NMR được quan sát
báo cáo (Hsieh và cộng sự, 1998b; Matsuda và cộng sự, 2002).
các mối tương quan.

Tuy nhiên, các giá trị góc quay quang học khác nhau đôi khi b
Trong DMSO-d6. c
được báo cáo cho cùng một flavanone. Ví dụ, Trong CDCl3.
d
giá trị quay cụ thể là 3,4 (c 0,5, MeOH) Trong axeton-d6.
Machine Translated by Google
B.-N. Su và cộng sự. / Hóa thực vật 63 (2003) 335–341
liên kết với nhau thành một nhóm đơn thơm hoặc olefin ở
H 6.26 (1H, s, H-6), nhóm methoxyl ở dH 3,84 (3H,
s, OMe-7) và bội số của một thay thế đơn
vòng thơm ở dH 7,54-7,56 (2H, m, H-30 và H-50 )
và 7,41–7,43 (3H, m, H-20 , H-40 và H-60 ). Cũng
được quan sát thấy là một nhóm đơn có thể trao đổi ở phía
dưới ở mức 11,59 (1H, s, OH-5), thường đặc trưng cho
OH-5 chelat của flavon và flavanone. Phân tích phổ Con-H NMR,
phù hợp với phổ 1
13C
NMR của hợp chất 5 cũng hiển thị hai
methine bị oxy hóa ở C 82,9 (C-2, d) và 71,8 (C-3,
d), nhóm methoxyl ở C 56.1 (OMe, q), tín hiệu của
hai vòng thơm (với một vòng thay thế đơn chất: 137.3, C-10
, s; C 128,5, C-30 , C-50 , d; C 128.0, C-20
40 , C-60 , d) và xeton liên hợp ở 198,3 (C-4, s).
C
Theo đó, điều này gợi ý rằng hợp chất 5 là hợp chất flava-
none có vòng B không được thế (Kuroyanagi và cộng sự,
1982; Ichino và cộng sự, 1988). Như vậy, ba nhóm hydroxyl
trong 5 có thể được suy ra từ công thức phân tử của
C16H14O6, vì chỉ có một nhóm methoxyl được thể hiện rõ ràng
trong cả 1 Phổ H và 13C NMR. Tại HMBC
phổ 5, nhóm proton hướng xuống của nhóm hydroxyl che-lat ở
mức 11,59 (OH-5) tương quan với
H 1997; Chang và cộng sự, 1997). Dữ liệu thu được cho hoạt động
methine thơm ở C 92,8 (C-6), và hai nguyên tử cacbon bậc bốn
ở C 155,2 (C-5) và 101,0 (C-4a),
chỉ ra hợp chất 5 là fla-vanon được thế 3,5,7,8. Vị trí của
nhóm methoxyl tại C-7 là
được chỉ định dựa trên mối tương quan NOESY được quan sát
từ 3,84 (OMe-7) đến 6,26 (H-6). khớp nối
H H
hằng số giữa H-2 và H-3 (11,1 Hz) cho thấy rằng
Vòng B và OH-3 được định hướng xuyên xích đạo (Gaf-field,
1970). Phổ CD của hợp chất 5 được hiển thị
337
hiệu ứng tiêu cực và tích cực của bông ở bước sóng 292 và 319 nm,
tương ứng, điều này cho thấy hóa học lập thể tuyệt đối của
C-2 là R (Gaffield, 1970). Theo đó,
hợp chất mới 5 có cấu trúc đặc trưng là
(2R,3R)-7-metoxy-3,5,8-trihydroxyflavanon.
H Kết quả của nghiên cứu này đã chỉ ra rằng flavonoid không
bị thay thế vòng B là thành phần chính
lá của M. calabura được thu thập ở Peru. Đây là trong
hoàn toàn trái ngược với nghiên cứu hóa thực vật trước đây được
thực hiện trong phòng thí nghiệm của chúng tôi trên rễ của M. calabura
được thu thập ở Philippines, nơi có mức độ thay thế cao
Flavan vòng B, flavon và biflavan được xác định đặc tính
C (Kaneda và cộng sự, 1991). Thực tế chỉ có một hợp chất
, C- (2S)-50 -hydroxy-7,8,30,40 -tetramethoxyflavan , được xác
định trong cả hai mẫu M.
calabura. Điều này có thể thể hiện sự khác biệt về mặt địa lý,
và/hoặc sự khác biệt trong sự tích lũy các chất chuyển hóa khác nhau
tại một địa điểm cụ thể.
Ngoại trừ lupenone (có khả năng hòa tan trong DMSO quá
thấp, dung môi
được sử dụng), tất cả các chủng phân lập thu được trong nghiên cứu hiện tại đều
được đánh giá về khả năng tạo ra QR (Gerha¨user và cộng sự,
các hợp chất được tóm tắt trong Bảng 2. Flava-none 5 mới cho
thấy hoạt động đáng kể (CD 15,8 mM) trong
Xét nghiệm cảm ứng QR. Tuy nhiên, trong số năm người bị cô lập
flavanones (1–5), hoạt tính cảm ứng QR mạnh nhất
được chứng minh bằng (2S)-5-hydroxy-7-methoxy-flavanone
(pinostrobin, 4). Giá trị CD của pinostrobin
(4, <0,56 mM) gần giống như của sulfor-aphane (0,43 mM), chất
kiểm soát dương tính được sử dụng trong
nghiên cứu này. Hơn nữa, chỉ số phòng ngừa hóa học
Machine Translated by Google
338 B.-N. Su và cộng sự. / Hóa thực vật 63 (2003) 335–341
ban 2
Hoạt tính tạo ra quinone reductase (QR) bởi các hợp chất 4–6 và 10–
13
hợp chất CDa IC50b
mg/ml mM mg/ml mM
4 <0,15 <0,56 >20 4,77 15,8 >74
5 >20 5,22 17,4 15,8 0,7 >66,2
6 2,9 >5 1,4 5,5 >5 1,7 5,7 52,7
10 >20 1,42 4,6 18,6 0,08 >20,8
11 0,43 1,95 >19,5
12 67,1
13 59,6
bị sunfuaphan hóa 11,0
Nồng độ cần thiết để tăng gấp đôi hoạt động cảm ứng QR; Bài kiểm tra
các hợp chất được coi là không hoạt động khi giá trị CD > 5
mg/ml.
b Nồng độ cần thiết để ức chế sự phát triển của tế bào ở mức
50%. c Chỉ số hóa học phòng ngừa (CI)=IC50/CD.
d Máy quang phổ Beckman DU-7. Phổ IR đã được chạy
Sulforaphane (Kennelly và cộng sự, 1997; Misico và cộng sự, 2002) đã được sử dụng
như chất kiểm soát dương tính.
Giá trị (CI) của flavanone này (4, >132) thậm chí còn cao hơn
hơn (25,0) của sulforaphane. Xét nghiệm sinh học tương tự
thu được kết quả cho dạng hỗn hợp racemic của
pinostrobin, ()-5-hydroxy-7-methoxyflavanone,
được phân lập từ rễ cây Renealmia nicolaioides ở
công việc gần đây của chúng tôi (Gu et al., 2002). Hợp chất 4 được phân lập
trong cuộc điều tra hiện tại đã được phát hiện là về mặt quang học
thuần túy bằng cách so sánh giá trị xoay cụ thể thu được
trong nghiên cứu này (57,5; c 0,80, CHCl3) với giá trị
được báo cáo về pinostrobin tổng hợp (48; c 1.0, CHCl3)
(Hodgett, 2001).
Trong số 12 flavon được phân lập từ M. calabura,
chỉ có hợp chất 6 được phát hiện là có hoạt tính nhẹ với
Giá trị CD là 17,4 mM. Hai chalcon (10 và 11) và
hai isoflavonoid (12 và 13) thể hiện mạnh hơn
Hoạt tính gây ra quinone reductase (Bảng 2), với CD
giá trị trong khoảng 2,9–5,7 mM. Hợp chất 10 ( 20,40 -
dihydroxychalcone) trước đây đã được phân lập từ
lá và thân cây M. calabura thu hái ở Thái Lan
bởi nhóm của chúng tôi và hợp chất này trước đây đã được tìm thấy
có khả năng gây độc tế bào đối với một nhóm nhỏ người và
dòng tế bào khối u ở chuột (Nshimo và cộng sự, 1993). Cái khác
chalcone, 4,20 ,40 -trihydroxychalcone (isoliquiritigenin,
11), gần đây đã được phân lập từ hạt Dipteryx
odorata (đậu Tonka) như một nguyên tắc tạo ra QR mạnh mẽ
(CD 3,8 mM) (Jang và cộng sự, trên báo chí), và sau đó tìm thấy
ức chế đáng kể tiền ung thư do chất gây ung thư gây ra
hình thành tổn thương (76% ở mức 10 mg/ml) trong xét nghiệm nuôi cấy
cơ quan động vật có vú ở chuột (Jang và cộng sự, trên báo chí). BẰNG
được trình bày trước đây, isoliquiritigenin (11) ngăn ngừa da
thúc đẩy khối u gây ra bởi 7-bromomethylbenz[a]an-thracene với
7,12-dimethylbenz[a]anthracene được bắt đầu
chuột (Yamamoto và cộng sự, 1991), ức chế azoxymethane
(AOM) gây ung thư đại tràng ở chuột và
Tiêu điểm mật mã bất thường ở ruột chuột do AOM gây ra cho-
mation (Baba và cộng sự, 2002), ngăn chặn sự di căn và
ngăn ngừa tình trạng giảm bạch cầu nghiêm trọng do 5-fluorouracil gây ra
trong mô hình di căn phổi của tế bào thận chuột
Cic ung thư biểu mô (Yamazaki và cộng sự, 2002). Theo đó, pinos-
trobin (4) và isoliquiritigenin (11) được coi là đáng đánh giá
thêm trong các xét nghiệm bổ sung.
>132 đến việc ngăn ngừa ung thư bằng hóa chất.
>4.2
3.0
>7.2
>3,5 3. Thực nghiệm
>11,8
13.0 3.1. Tổng quan
25,0
Điểm nóng chảy được xác định trên máy Fisher-Johns
thiết bị điểm nóng chảy và không được hiệu chỉnh. Quang học
các góc quay được đo bằng máy đo phân cực tự động Perkin-Elmer
241. Phổ UV thu được bằng
trên máy quang phổ FT-IR dòng ATI Mattson Genesis. Các phép đo
CD được thực hiện bằng cách sử dụng
Máy quang phổ CD JASCO-710. Dữ liệu phổ NMR
được ghi lại ở nhiệt độ phòng trên máy Bruker Avance
Máy quang phổ DPX-300, NCM-360 hoặc DRX-500 MHz
với tetramethylsilane (TMS) làm chất chuẩn nội. Chuỗi xung chuẩn
được sử dụng để đo
của phổ 2D NMR (1 H–1 H COSY, HMQC, HMBC,
và NOESY). FABMS được lấy trên VG7070E-HF
máy quang phổ khối trường khu vực và EIMS, CIMS, và
HRCIMS trên khối lĩnh vực Finnigan/MAT 90/95
máy quang phổ. CC được thực hiện bằng Si gel G (Merck,
70–230 hoặc 230–400 lưới). TLC phân tích được thực hiện
trên độ dày 250 mm Merck Si gel 60 nhôm F254
các tấm, trong khi TLC chuẩn bị được thực hiện trên 500 hoặc 1000 mm
độ dày (2020 cm) Tấm kính Merck Si gel 60 F254 .
3.2. Nguyên liệu thực vật
Lá của Muntingia calabura được thu thập (bộ sưu tập số 229)
dọc theo bờ sông, 10 040 S và
71 060 W, ở Colombiana, River Curanja, quận
Purus, tỉnh Purus, Peru, vào tháng 10 năm 1997.
việc thu thập được thực hiện ở độ cao 325 m so với mực nước biển. MỘT
mẫu chứng từ (P2856) đã được gửi tại
Trạm Dược điển của Đại học Illinois,
Downers Grove, IL, Hoa Kỳ.
3.3. Xét nghiệm cảm ứng Quinone reductase
Để đánh giá các chiết xuất thực vật, các phần phân đoạn và
các chủng phân lập thuần khiết làm chất cảm ứng QR, chuột nuôi cấy Hepa
Các tế bào 1c1c7 đã được sử dụng như mô tả trước đây (Chang et
cộng sự, 1997; Misico và cộng sự, 2002). Hoạt động của enzyme đã
được biểu thị bằng CD, nồng độ cần thiết để tăng gấp đôi
hoạt động cụ thể của QR. IC50 (ức chế nửa tối đa
nồng độ khả năng sống của tế bào) và CI (phòng ngừa hóa học
giá trị chỉ số, IC50/CD) cũng được xác định.
Machine Translated by Google
B.-N. Su và cộng sự. / Hóa thực vật 63 (2003) 335–341
3.4. Khai thác và cô lập
Lá khô và lá nghiền (1 kg) được chiết bằng cách ngâm với
MeOH (35 l) ở nhiệt độ phòng, mỗi lần hai ngày. Sau khi lọc
và làm bay hơi dung môi dưới áp suất giảm, dịch chiết metanol
thô gộp lại được tạo huyền phù trong H2O (500 ml) để thu
được dung dịch MeOH dạng nước (95%), sau đó được chia lần
lượt bằng ete dầu mỏ (3600 ml) và EtOAc (3700 ml), để thu
được chiết xuất ete dầu mỏ khô- (21 g), EtOAc- (52 g) và
chất chiết hòa tan trong H2O (56 g). Dịch chiết hòa tan được
EtOAc cho thấy hoạt tính cảm ứng quinone reductase đáng kể
(CD<2,5 mg/ml và IC50 >10 mg/ml).
Dịch chiết hòa tan EtOAc được tiến hành sắc ký cột gel Si
(955 cm, 1,2 kg 70–230 lưới Si gel) và rửa giải bằng hỗn hợp
gradient CHCl3– MeOH (từ 30:1 đến 1:1), thu được 12 phần (F01-
F12), được đánh giá trong xét nghiệm cảm ứng QR.
Giá trị CD (mg/ml) của F01–F12 lần lượt là 6,5, >10, <2,5,
<2,5, 6,5, >10, >10, >10, >10, >10, >10 và >10, và giá trị
IC50 của tất cả 12 phần này đều trên 20 mg/ml. Do đó, các
phần hoạt động mạnh nhất, F03 và F04, đã được chọn để tinh
chế chi tiết hơn.
Phần thứ ba (F03), được rửa giải bằng CHCl3–MeOH (30:1),
được phân đoạn trên cột gel Si tiếp theo (5,865 cm), với hỗn
hợp gradient của ete dầu mỏ–axeton (từ 8:1 đến 1:1) như hệ
dung môi, có sáu phần phụ (F0301-F0306). F0302 (rửa giải bằng
ete dầu mỏ–axeton, 6:1) được tinh chế thêm bằng cột gel Si
(2,045 cm), sử dụng CHCl3–MeOH (50:1), để tạo thành, theo
thứ tự phân cực, lupenone (30 mg), 2 (158 mg), 7-hydroxyflavone
(9 mg) và một phần phụ nữa, F030204. Sau đó, phần chiết phụ
này được tinh chế bằng TLC điều chế (2020 cm, 500 mmm), được
phát triển bằng ete dầu mỏ–axeton (5:1), thu được hợp chất
14 (12 mg, Rf=0,55) và 5,7-dihydroxyflavone (18 mg , Rf =
0,50). Phân đoạn F0303 (được rửa giải bằng ete dầu mỏ, 5:1)
sau đó được tách trên cột gel Si (3,865 cm) bằng n-hexane-
acetone (5:12:1), để thu được lượng bổ sung là 2 ( 78 mg),
và 5-hydroxy-3,7,8-trimethoxyflavone (26 mg), (2S)-50 -
hydroxy-7,8,30,40 -tetramethoxyflavan (48 mg) và hợp chất 3
(96 mg) ). Hợp chất 10 (25 mg) thu được dưới dạng bột vô
định hình màu vàng nhạt từ dung dịch n-hexan-EtOAc (2:1) có
phân đoạn phụ F0303 (rửa rửa bằng ete dầu mỏ-axeton, 5:1).
Quá trình tinh chế thêm rượu mẹ của phần phụ này được thực
hiện trên cột gel Si (2,045 cm), rửa giải bằng CHCl3– axeton
(10:1 đến 5:2) và thu được thêm một lượng hợp chất 10 (32
mg) và hợp chất 1 (62 mg), 4 (17 mg) và 13 (28 mg). Phân
đoạn F0305 (rửa giải bằng ete dầu hỏa, 2:1) được xử lý bằng
sắc ký cột gel Si (2,855 cm) và được tách bằng hỗn hợp
gradient CHCl3– MeOH (từ 30:1 đến
339
10:1), thu được hợp chất tinh khiết 3-methoxy-5,7,40 -
trihydroxyflavone (16 mg) và 11 (23 mg).
Phân đoạn F04, được rửa giải bằng CHCl3–MeOH (25:1), được
xử lý sắc ký cột Si gel (2,855 cm), sử dụng hỗn hợp ete dầu
mỏ–axeton có độ phân cực tăng dần (từ 8:1 đến 1:1) làm dung
môi, để thu được năm phân số phụ (F0401–F0405). Phân đoạn
F0402 (rửa giải bằng ete dầu hỏa, 4:1) được truyền qua cột
gel Si (2,045 cm), bằng cách rửa giải bằng n-hexane–EtOAc (từ
5:1 đến 2:1), và thu được 3,30 -dimethoxy-5,7,40
-trihydroxyflavone (11 mg) và axit 2a,3b-dihydroxyolean-12-
en-28-oic (8 mg), và một lượng bổ sung (2S)-50 -hydroxy- 7,8
,30,40 -tetra -methoxyflavan (21 mg). F0403 (được rửa giải
bằng ete dầu mỏ–axeton, 3:1) được tinh chế trên cột Sephadex
LH-20 (2,855 cm) và rửa giải bằng MeOH nguyên chất, thu được
các hợp chất 5 (18 mg), 3,5-dihy-droxy -7,40 -dimethoxyflavone
(96 mg) và 8 (27 mg), và hỗn hợp, F040304. Phân đoạn phụ này
(F040304) sau đó được tinh chế bằng TLC chuẩn bị (các lớp
1000 mm), được phát triển hai lần với CHCl3–MeOH (30:1), để
tạo ra các hợp chất tinh khiết 6 (8 mg; Rf=0,65) và 7 (15
mg; Rf= 0,63). F0404 (rửa giải bằng ete dầu mỏ-axeton, 2:1)
được tinh chế trên cột gel Si tiếp theo (2,855 cm) và được
tách bằng CHCl3–axeton (từ 4:1 đến 1:1), và lần lượt thu được
các hợp chất tinh khiết 12 ( 5 mg), 3,8-dimethoxy-5,7,40
-trihydroxyflavone (15 mg), 9 (158 mg) và axit 3,4,5-
trihydroxybenzoic (90 mg).
3.5. (2S)-7-Hydroxyflavanone (1)
23
[a]d 85,3 (c 1,2, MeOH); Dữ liệu phổ CD (MeOH; 20 C; ")
1
nm: 302 (18.054), 330 (+11.800); H (Tanrisever et al., 1987)
và 13C NMR (Hsieh et al., 1998) phù hợp với các giá trị tài
liệu.
3.6. (2S)-5,7-Dihydroxyflavanon (2)
[a]d 2358,5 (c 0,91, MeOH); Dữ liệu phổ CD (MeOH; 20 C; ")
1
nm: 287 (845.500), 328 (+222.375); H (Hsieh et al., 1998) và
13C NMR (Ichino et al., 1988) phù hợp với các giá trị tài
liệu.
3.7. (2R,3R)-3,5,7-Trihydroxyflavanon (3)
23
[a]d +9,0 (c 0,40, CHCl3+MeOH, 1:1); Quang phổ CD (MeOH;
20 C; ") nm: 291 (78.365), 320 (+26.738); H và 13C NMR
1
(Kuroyanagi et al., 1982)
dữ liệu phù hợp với các giá trị tài liệu.
3.8. (2S)-5-Hydroxy-7-metoxyflavanone (4)
23
[a]d 57,5 (c 0,80, CHCl3); Dữ liệu phổ CD (MeOH; 20 C;
1
") nm: 288 (283.540), 331 (+70.500); H (Ichino et al., 1988)
và 13C NMR (Gonza'lez et al., 1989) phù hợp với các giá trị
tài liệu .
Machine Translated by Google
340 B.-N. Su và cộng sự. / Hóa thực vật 63 (2003) 335–341
3.9. (2R,3R)-7-Methoxy-3,5,8-trihydroxyflavanon (5)
23
Bột vô định hình màu vàng nhạt, mp 226–228 C; [a]d
+30,0 (c 0,25, CHCl3+MeOH, 1:1); UV (MeOH) lmax max (phim)
290 (3,82), 321 (3,94) nm; IR 3327, cm1 : (log ")
1640, 1467, 1257, 1179, 1087; CD (MeOH; 20 C; ") nm: 292
(194.195), 319 (+60.949); EIMS m/z (rel. int.): 302 [M]
+ (45), 285 (3), 183 (100), 156 (16), 139 (19), 136 (21),
120 (5), 111 (9), 91 (16), 69 (9); HRCIMS m/z: 303,0866
[M+H]+ (tính toán cho C16H15O6, 303,0869);
1
Dữ liệu H NMR, xem Bảng 1.
3.10. 20,40 -Dihydroxydihydrochalcon (14)
1
Dữ liệu phổ H NMR (trong axeton-d6) phù hợp với các
giá trị tài liệu (Jain và Mehta, 1985) ; Dữ liệu 13C NMR
H 30,3 (Cb, t), 39,7 (Ca, t), 103,5 (C-3, d), 107,9
(C-5, d), 113,7 (C-1, s), 126,3 (C-40 , d), 128,4 (C-20
và C-60 d), 128,6 (C-30 và C-50 , d), 132,2 (C-6, d),
140,8 (C-10, s), 162,8 (C- 2,s), 165,1 (C-4,s), 203,7 (C¼O,s).
Sự nhìn nhận
Công việc này được hỗ trợ bởi Chương trình Dự án P01
CA48112 do Viện Ung thư Quốc gia, NIH, Bethesda, MD tài
trợ. Chúng tôi rất biết ơn Tiến sĩ. JA (Nghệ thuật)
Anderson, Trung tâm Tài nguyên Nghiên cứu, Đại học Illinois
ở Chicago và K. Fagerquist, Cơ sở Đo khối phổ, Khoa Hóa
học, Đại học Minnesota, Minneapolis, MN, về dữ liệu phổ
khối.
Người giới thiệu
Baba, M., Asano, R., Takigami, I., Takahashi, T., Ohmura, M., Okada, Y.,
Sugimoto, H., Arika, T., Nishino, H., Okuyama, T., 2002. Nghiên cứu hóa
trị ung thư bằng bài thuốc dân gian. XXV. Tác dụng ức chế của
isoliquiritigenin đối với sự hình thành mật mã bất thường ở đại tràng
chuột do azoxymethane gây ra và sự hình thành ung thư. Biol. Dược phẩm.
Bò đực. 25, 247–250.
Barrero, AF, Herrador, MM, Arteaga, P., Rodriguez-Garcia, I., Garcia-
Moreno, M., 1997. Các dẫn xuất Resorcinol và flavonoid của phân loài
Ononis natrix ramosissima. J. Nat. Sản phẩm. 60, 65–68.
Bernhard, HO, Thiele, K., 1981. Các flavonoid bổ sung từ
lá của Larrea tridentata. Planta Med. 41, 100–101.
Chang, LC, Gerha¨user, C., Song, L., Farnsworth, NR, Pezzuto, JM, Kinghorn,
AD, 1997. Phân lập theo hướng dẫn hoạt động của các thành phần cấu
thành của Tephrosia purpurea có khả năng tạo ra enzyme pha II , quinone
reductase. J. Nat. Sản phẩm. 60, 869–873.
Dantanarayana, AP, Kumar, NS, Muthukuda, PM, Wazeer, MIM, 1982. Dẫn xuất
lupane và độ dịch chuyển hóa học 13C NMR của một số lupanol từ
Pleurostylia opposita. Hóa thực vật 21, 2065–2068.
Dinkova-Kostova, AT, Talalay, P., 2000. Bằng chứng thuyết phục rằng quinone
reductase loại 1 (DT diaphorase) bảo vệ tế bào chống lại độc tính của
điện di và các dạng oxy phản ứng. Biol cấp tiến miễn phí. Med. 29, 231–
240.
Echeverri, F., Ardona, G., Torres, F., Pelaez, C., Quin˜ones, W., Ren-
teria, E., 1991. Ermanin: một loại flavonoid ngăn chặn côn trùng từ
nhựa Passi-flora foetida. Hóa thực vật 30, 153–155.
Fonseca, FN, Ferreira, AJS, Sartorelli, P., Lopes, NP, Floh, EIS, Handro,
W., Kato, MJ, 2000. Các dẫn xuất phenylpropanoid và biflavone ở các giai
đoạn khác biệt và phát triển của Araucaria angustifolia. Hóa thực vật
55, 575–580.
Fukui, H., Goto, K., Tabata, M., 1988. Hai flavanone kháng khuẩn từ lá
Glycyrrhiza glabra. Chem. Dược phẩm. Bò đực. 36, 4174–4176.
Gaffield, W., 1970. Lưỡng sắc tròn, phân tán quay quang học và cấu hình
tuyệt đối của flavanone, 3-hydroxyflavanone và glycosid của chúng. Xác
định độ chirality của aglycone trong các flavanone glyco-side. Tứ diện
26, 4093–4108.
Gerha¨user, C., You, M., Liu, J., Moriarty, RM, Hawthorne, M., Mehta, RG,
Moon, RC, Pezzuto, JM, 1997. Tiềm năng ngăn ngừa ung thư của
sulforamate, một cuốn tiểu thuyết chất tương tự của sulforaphane gây ra
các enzyme chuyển hóa thuốc giai đoạn 2. Ung thư Res. 57, 272–278.
Gonza'lez, AG, Aguiar, ZE, Luis, JG, Ravelo, AG, Va'zquez, JT, Domı'nguez,
XA, 1989. Flavonoid từ Salvia texana. Hóa thực vật 28, 2871–2872.
,
Gu , J.-Q. , Park , E.-J. , Vigo , JS , Graham , JG , Fong , HHS , Pez-
zuto , JM , Kinghorn , AD , 2002 nicolaioides có khả năng tạo ra enzyme
quinone giai đoạn II khử. J. Nat. Sản phẩm. 65, 1616–1620.
Ha¨berlein, H., Tschiersch, K.-P., 1994. Triterpenoids và flavonoid từ
Leptospermum scoparium. Hóa thực vật 35, 765–768.
Haensel, R., Ohlendorf, D., 1969. Flavones không được thay thế vòng B từ
Gnaphalium obtusifolium. Tứ diện Lett. 10, 431–432.
Hodgetts, KJ, 2001. Phương pháp tiếp cận 2 nhiễm sắc thể-4-one được thay
thế: tổng hợp (-)-pinostrobin. Tứ diện Lett. 42, 3763–3766.
Hsieh, HK, Lee, TH, Wang, JP, Wang, JJ, Lin, CN, 1998a.
Tổng hợp và tác dụng chống viêm của chalcone và các hợp chất liên quan.
Dược phẩm. Res. 15, 39–46.
Hsieh, YL, Fang, JM, Cheng, YS, 1998b. Terpenoid và flavo-noid từ
Pseudotsuga wilsoniana. Hóa thực vật 47, 845–850.
Ichino, K., Tanaka, H., Ito, K., 1988. Hai loại flavonoid mới từ lá của
Lindera umbellata var. lancea và L. ô. Tứ diện 44, 3251–3260.
Ikuta, A., Kamiya, K., Satake, T., Saiki, Y., 1995. Triterpenoids từ nuôi
cấy mô sẹo của loài Paeonia. Hóa thực vật 38, 1203–1207.
Jain, AC, Mehta, A., 1985. Một sự tổng hợp mới của homoisoflavanone (3-
benzyl-4-chromanones). Tứ diện 41, 5933–5937.
Jang, DS, Park, EJ, Hawthorne, ME, Vigo, JS, Graham, JG, Cabieses, F.,
Santarsiero, BD, Mesecar, AD, Fong, HHS, Mehta, RG, Pezzuto, JM,
Kinghorn, AD Tiềm năng ung thư thành phần phòng ngừa bệnh của hạt
Dipteryxodorata (đậu Tonka). J. Nat. Sản phẩm. (trên báo chí).
Kaneda, N., Pezzuto, JM, Soejarto, DD, Kinghorn, AD, Farnsworth, NR, 1991.
Chất chống ung thư thực vật, XLVIII. Các flavonoid gây độc tế bào mới
từ rễ cây Muntingia calabura. J. Nat Sản phẩm 54, 196–206.
Karasartov, BS, Kurkin, VA, Zapesochnaya, GG 1992. Coumar-in và flavonoid
của hoa Helichrysum italicum. Khim.
Arr. Kết hợp. 577–579.
Kennelly, EJ, Gerha¨user, C., Song, LL, Graham, JG, Beecher, CWW, Pezzuto,
JM, Kinghorn, AD, 1997. Cảm ứng qui-none reductase bằng withanolides
phân lập từ Physalis philadelphica (tomatillos). J. Agric. Hóa chất thực
phẩm. 45, 3771–3777.
Kinghorn, AD, Fong, HHS, Farnsworth, NR, Mehta, RG, Moon, RC, Moriarty,
RM, Pezzuto, JM, 1998. Các tác nhân hóa trị ngăn ngừa ung thư được phát
hiện bằng phân đoạn hướng dẫn hoạt động: đánh giá. Curr. Tổ chức Chem.
2, 597–612.
Kitagawa, I., Hori, K., Uchida, E., Chen, W.-Z., Yoshikawa, M., Ren, J.,
1993. Saponin và sapogenol. L. Về thành phần rễ của Glycyrrhiza uralensis
Fisher từ Tân Cương, Trung Quốc. hóa học
Machine Translated by Google
B.-N. Su và cộng sự. / Hóa thực vật 63 (2003) 335–341
cấu trúc cal của cam thảo-saponin L3 và isoliquiritin apioside.
Chem. Dược phẩm. Bò đực. 41, 1567–1572.
Nghiên cứu hóa học về thành phần của Poly-gonum nodosum , M. Kuroyanagi , Y.
Yamamoto , S. Fukushima , A. Ueno , T. Noro , T. Miyase , 1982 . Chem. Dược
phẩm. Bò đực. 30, 1602–1608.
Matsuda, H., Morikawa, T., Toguchida, I., Harima, S., Yoshikawa, M., 2002. Hoa
thuốc. VI. Cấu trúc lập thể tuyệt đối của hai glycoside flavanone mới và một
glycoside phenylbutanoid từ hoa của Chrysanthemum indicum L.: hoạt động ức
chế của chúng đối với aldose reductase của ống kính chuột. Chem. Dược phẩm.
Bò đực. 50, 972–975.
Misico , RI , Song , LL , Veleiro , AS , Cirigliano , AM , Tetta-manzi , MC ,
Burton , G , Bonetto , GM , Nicotra , VE , Silva , GL , Gil RR , Oberti ,
JC , Kinghorn , AD , Pezzuto , JM , 2002. Cảm ứng quinone reductase bằng
withanolides . J. Nat.
Sản phẩm. 65, 677–680.
Nishiyama, K., Esaki, S., Deguchi, I., Sugiyama, N., Kamiya, S., 1993. Tổng hợp
isoflavone và isoflavone glycoside và hoạt động ức chế của chúng đối với b-
galactosidase ở gan. Sinh học. Công nghệ sinh học.
Hóa sinh. 57, 107–114.
Nshimo, CM, Pezzuto, JM, Kinghorn, AD, Farnsworth, NR, 1993. Thành phần gây độc
tế bào của lá và thân cây Muntingia calabura được thu thập ở Thái Lan. Int.
J. Dược lý. 31, 77–81.
Ohsaki, A., Takashima, J., Chiba, N., Kawamura, M., 1999. Phân tích vi mô về
hợp chất kháng Helicobacter pylori mạnh có chọn lọc trong cây thuốc Brazil,
Myroxylon peruiferum và hoạt động của các chất tương tự. Bioorg. Med. Chem.
Lett. 9, 1109–1112.
Pandey, UC, Singhal, AK, Barua, NC, Sharma, RP, Baruha, JN, Watanabe, K.,
Kulanthaivel, P., Herz, W., 1984. Hóa học lập thể của axit strictic và các
furanoditerpen liên quan từ Conyza japonica và Grangea maderaspatana. Hóa
thực vật 23, 391–397.
Perez-Arbelaez, E., 1975. Plantas Medicinales y Venenosas de Colombia, Hernando
Salazar, Medellin, Colombia, tr. 192.
Pezzuto, JM, 1997. Các chất chống ung thư có nguồn gốc từ thực vật. Hóa sinh.
Phar-macol. 53, 121–133.
Pezzuto, JM, Song, LL, Lee, SK, Shamon, LA, Mata-Green-wood, E., Jang, M.,
Jeong, H.-J., Pisha, E., Mehta, RG, Kinghorn, AD Trong: Hostettmann, K.,
Gupta, MP, Marston, A. (Eds.), Hóa học, Sinh học và Đặc tính Dược lý của Cây
thuốc từ Châu Mỹ. Nhà xuất bản Học thuật Harwood, Amster-dam, trang 81–110.
341
Proksch, M., Proksch, P., Weissenboeck, G., Rodriguez, E., 1982.
Flavonoid từ nhựa lá của Adenostoma sparsifolium. Phytochem-istry 21, 1835–
1836.
Reinecke, MG, Minter, DE, 1994. Phân bổ NMR carbon cho gnaphaliin 7-methyl
ether. Magn. Cộng hưởng. Chem. 32, 788–789.
Roitman, JN, James, LF, 1985. Hóa học của các loại thực vật có độc tính.
Ete flavonol methyl có hàm lượng oxy hóa cao từ micro-cephala Gutierrezia.
Hóa thực vật 24, 835–848.
Seetharaman, TR, 1990. Polyphenol của Muntingia calabura. Liệu pháp thực vật
61, 374.
Silva, AMS, Cavaleiro, JAS, Tarrago, G., Marzin, C., 1994.
Tổng hợp và mô tả đặc tính phức hợp ruthenium (II) của 5-hydroxyflavone. J.
Hóa chất dị vòng. 31, 97–103.
Talalay, P., 2000. Bảo vệ hóa học chống lại bệnh ung thư bằng cách tạo ra
enzym pha 2. Yếu tố sinh học 12, 5–11.
Tanrisever, N., Fronczek, FR, Fischer, NH, Williamson, GB, 1987. Ceratiolin và
các flavonoid khác từ Ceratiola ericoides.
Hóa thực vật 26, 175–179.
Wang, Y., Hamburger, M., Gueho, J., Hostettmann, K., 1989. Các flavonoid chống
vi khuẩn từ Psiadia trinervia và các dẫn xuất methyl hóa và acetyl hóa của
chúng. Hóa thực vật 28, 2323–2327.
Wong, KC, Chee, SG, Er, CC, 1996. Thành phần dễ bay hơi của quả Muntingia
calabura LJ Essen. Dầu Res. 8, 423–426.
Yang, F., Li, X.-G., Wang, H.-Q., Yang, C.-R., 1996. Flavonoid glycoside từ
Colebrookea oppositifolia. Hóa thực vật 42, 867–869.
Yamamoto, S., Aizu, E., Jiang, H., Nakadate, T., Kyoto, I., Wang, JC, Kato, R.,
1991. Chất gây ung thư 12, 317–323.
Yamazaki, S., Morita, T., Endo, H., Hamamoto, T., Baba, M., Joichi, Y., Kaneko,
S., Okada, Y., Okuyama, T., Nishino, H., Tokue, A., 2002. Isoliquiritigenin
ngăn chặn sự di căn phổi của ung thư biểu mô tế bào thận ở chuột. Ung thư
Lett. 183 , 23–30 .
Yoshikawa, M., Shimada, H., Nishida, N., Li, Y., Toguchida, I., Yamahara, J.,
Matsuda, H., 1998. Nguyên tắc điều trị bệnh tiểu đường của thuốc tự nhiên.
II. Chất ức chế Aldose reductase và a-glucosidase từ y học tự nhiên Brazil,
lá của Myrcia multiflora DC.
(Myrtaceae): Cấu trúc của myrciacitrins I và II và myrciaphe-none A và B.
Chem. Dược phẩm. Bò đực. 46, 113–119.