Professional Documents
Culture Documents
Experiment 6
Experiment 6
Lab (6)
Antimicrobial Susceptibility Testing
Tube (Broth) Dilution Method
Objectives:
To determine the MIC (Minimum Inhibitory Concentration) and MBC
(Minimal Bactericidal Concentration) of antibiotics against certain
microorganisms.
MIC and MBC الهدف من التجربة نحدد قيمة كل من
Introduction:
MIC: the lowest concentration of antimicrobial agent required to stop
the growth of certain microorganism.
أقل تر ز:MIC
كي من هذا المضاد ى
microorganism للبكتييا او ايstop growth لحت يعمل
Page | 1
Bacteriostatic Agents: inhibit the growth of bacteria at the normal
therapeutic concentrations. These agents exhibit both characters (-static
and –cidal) at different levels.
MIC,MBC مختلفة عن قيمة الE.Coli للMIC,MBC اله قيمةAmoxicllin عىل فرضا عنا مضاد حيوي
نفسه زstrain ثابتة للMIC,MBC ف قيمة الstaphylococci للantibiotic لنفس ال
يعت ثابتة لنوع
ي
البكتييا
MIC يعتي
الىل ر ى ز
احنا بنفضل نستخدم اليكي ي
ز
يعت يصي ز
يcidal للstatic منantibiotics ويتحول الtoxic رح يصيMIC لكن لو زدت تركي عىل
MBC
ز
killing يعملBactericidal يعت ز
يMBC يعت بدي اعالج بال
يMBC=MIC اذا كان
B.C يعتي
اذا كانوا متساوين ر
ز
stop growth يعملBacteriostatic يعت ى ز ز
يMIC يعت بدي اعالج بيكي
يMBC>MIC واذا كان
كي استخداما النو بخاف ارفع ى
الي ز
MIC كي زيادة عن وهذا اغلب الحاالت وال رB.S اذا كانوا مش متساوين يعتي
ر
Toxic ويصي الدوا عندي
Page | 2
نحك عن الجدول
ي تعالوا
b-Tetracycline
c-Erythromycin
d-Gentamicin
من الجدولB.S يعتي
هذا الدوا ر
Page | 3
Why are MIC & MBC required to be checked?
كانMIC و الMBC= 30
ز
2025 وف عام
ي
MIC , MBI = 50 صاروا
كانت تموت عىل تر ز2024 البكتييا زف
صارت تموت عىل تر ز2025 الكن بال30 كي
لهيك صار عنا50 كي ي
Resistance
Page | 4
نستنتج انو
ز
معي من البكتييا وتختلف من نوع لنوع اخر من البكتييا ثابتة لنوعMIC,MBC*قيمة ال
Septrin ,Gentamycin
turbid
شط دائما معكر اذا كان مش معكر هون عنا مشكلة يا اما انو ما ز يف بكتييا او انا حطيت مضاد حيوي بالغلط
بالتيست تيوب التاسع
ى
الىل عندي
بباف التست تيوب ي
عشان اقدر اقارنه ي
ز
جزئي الثمانية الباقيات نحط فيهم ونقسم التجربة اىل
(Serial dilution)
Page | 5
والجزء ز
الثان من التجربة نضيف بكتييا عىل 9تست تيوب
ي
)(Second dilution
bacteria Antibiotic
Control #9 T.T
الجزء االول
من التجربة
1ml broth
بإستخدام Pipette
Page | 6
ز
الثان للثالث وهكذا صار عنا نسحب من المضاد للتست تيوب االول و من التست تيوب االول اىل ز
الثان ومن ي
ي
النهان بعد اضافة المضاد الحيوي
ي 2مل بكل تست تيوب هذا ال الحجم
ى
لحت نوصل لل تست تيوب الثامن نحسب 1مل ونحطهم بال sink
عشوان فمثال لو ما سحبت كي يكون متناسق مش كي ماحيكون متناسق به الحالة وشط انو ى
الي ز النو ى
الي ز
ي ي
C1V1=C2V2
C1*V1=C2*V2
#1T.T
هي المعادلة رح تستخدمها من هون لنهاية
التجربة C1:conc of stock solution C1=2048
C2=1024
#2T.T
C1*V1=C2*V2
التست تيوب ز
الثان ز
مي ستكو ايوا بالزبط االول ي
1024*1=C2*2
C2=512
ز
الثان بساوي ز
الىل ستكو ي
وهكذا تركي التست تيوب الثالث ي
Page | 7
#3T.T
C2=256
بدي اكد عليكم انو التست تيوب التاسع ممنوع نضيف عليه مضاد حيوي
اوكيه اوكيه
ز
يعت كم ضل بالتست تيوب ؟1مل بالزبط
ي
Page | 8
ناخذ 1مل من البكتييا
#1 T.T
تر ز
كيه كم كان 1024
بعد اضافة البكتييا هل رح يختلف عنا ى
الي ز
كي ؟ اكيد
C1*V1=C2*V2
ى
الي ز
كي قبل اضافة البكتييا C1:
النهان بعد ما نضيف 1مل من البكتييا وكم صار التوتل فوليوم 2مل V2:
ي الحجم
C1*V1=C2*V2
1024*1=C2*2
C2=512
و هيك ى
حت نكملهم
اوكيه احنا بعد ما ضفنا سواء كان بالبارت االول من التجربة لما ضفنا 1مل من الدوا
Page | 9
ز
يعت البكتييا ماتت
يClear
نحك عنهم لتحت
ي رح
Interpretation of Result:
After incubation: Compare each AB dilution test tube with the control
test tube; to decided whether it is turbid (T) or clear (C)
To determine the MBC, the first 2 to 4 clear test tubes are subcultured
on agar plates (using the surface inoculation technique). This will dilute
the antibiotic to levels below the MIC, and if there were still surviving
bacteria; growth on the plate would be seen as colonies
results نيج لموضوع ال
ر ي
Turbid (T) اوclear(C) يا اما
ز
(T) يعت ماااا ماتت البكتييا
ي
Page | 10
Result T,C C C C C C T T T
ز
يعت ماتت البكتييا )(Cوالمضاد اشتغل
ي
MIC ,MBCطيب كيف نحدد؟
ز
يعطيت MIC: clear اقل تر ز
كي بعد اضافة البكتييا
ي
ز
يعطيت Clear مي اقل تر ز
كي ز
ي
عالجدول من 32-16
MICممكن تكون 30اه ممكن طب 20اكيد .طب 16مستحييل ال 16مش داخله وناخذها كانسبة
ز
ثان يوم عشان نشوف النتائج
طيب اذا رحنا ي
وطلعوا معنا كلهم Turbid
MIC>512
Gentamycin
MIC>128
بال Septrin
بال Gentamycin
MIC<1اقل او تساوي
الىل يكونوا
نزرع من 4-2تست تيوب ي
Clear
Page | 11
بجيب Four agarوبزرعهم
وتعرف MBCبانها
ز
يعطيت MBC :Zero colony اقل تر ز
كي
ي
ز
اعطان ما طبقناها بالالب هما زرعوا وشافوا انو 256اقل تر ز
كي
ي
Zero colony
256-128
يعتي B.S
الدوا تبعنا ر
يكون Cidal
اكي من MICو ازرعهم طب كيف نحدد ال MBCعن طريق اجيب ال تست تيوب الىل تر ز
كيهم ر ي
Page | 12
تست تيوب4-2 ازرع من
ز
No colony يعطيت اقل تر ز
كي
ي
وهكذا10...7 ممكن يكون6- 16 وهون الجواب هو
MBC>MIC
B.S تعتي
الىل رح ناخذها ر
ه االدوية ي
بالتاىل ي
ي و
Example:
1.An antimicrobial susceptibility testing – the tube (broth) dilution
method was performed as following:
Page | 13
ز
للدوايي نعت
بالريبورت بدنا ر ي
ى
الي ز
كي قبل اضافة البكتييا
ى
والي ز
كي بعد اضافة البكتييا
ن
موفقي يا رب و هللا يسهل عليكم كل صعب لهون هيك خلصنا تجربتنا و
Page | 14