Current Developments in

Biotechnology and Bioengineering :

Designer Microbial Cell Factories Swati
Joshi
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eering-designer-microbial-cell-factories-swati-joshi/
Current Developments in
Biotechnology and
Bioengineering

Designer Microbial Cell Factories:

Metabolic Engineering and
Applications

EDITED BY

Swati Joshi
ICMR-National Institute of Occupational Health, Ahmedabad, Gujarat,
India

Ashok Pandey
Centre for Innovation and Translational Research, CSIR-Indian Institute of
Toxicology Research, Lucknow, Uttar Pradesh, India

Ranjna Sirohi
Department of Chemical & Biological Engineering, Korea University,
Seoul, Republic of Korea
Centre for Energy and Environmental Sustainability, Lucknow, Uttar
Pradesh, India

Sung Hoon Park

School of Energy and Chemical Engineering, Ulsan National Institute of
Science and Technology, Ulsan, South Korea
Table of Contents

Cover image

Title page

Copyright

List of contributors

Preface

Section I: Metabolic Engineering of Cells: General

and Basics

Chapter 1. Metabolic engineering: tools for pathway rewiring and

value creation

Abstract

1.1 Introduction

1.2 Tools for metabolic engineering

 1.3 Value generation by metabolic engineering

1.4 Conclusions and perspectives

References

Chapter 2. Membrane transport as a target for metabolic engineering

Abstract

2.1 Introduction

2.2 Membrane transport proteins

2.3 Substrate uptake

2.4 Transport from and into organelles

2.5 Product export

2.6 Cellular robustness

2.7 Substrate channeling and membrane transport

2.8 Undesired transport processes

2.9 Conclusions and perspectives

References

Chapter 3. Analysis and modeling tools of metabolic flux

Abstract

3.1 Introduction

3.2 13C-metabolic flux analysis

 3.3 Constraint-based stoichiometric metabolic flux analysis

3.4 Conclusions and perspectives

References

Chapter 4. Equipped C1 chemical assimilation pathway in

engineering Escherichia coli

Abstract

4.1 Introduction

4.2 Approaches for the assessment of CO2 assimilation

capability

4.3 Physiological effect of RuBisCo system

4.4 Strategies to enhance the RuBisCo system

4.5 Transforming the heterotrophs to autotrophs

4.6 Prospective of RuBisCo-based chemical production

4.7 Conclusions and perspectives

References

Chapter 5. Microbial tolerance in metabolic engineering

Abstract

5.1 Introduction

5.2 Microbial stresses and responses

5.3 Strategies to improve microbial tolerance

 5.4 Challenges in developing and using tolerant strains

5.5 Conclusions and perspectives

References

Chapter 6. Application of proteomics and metabolomics in

microbiology research

Abstract

6.1 Introduction

6.2 Proteomics in microbiology

6.3 Metabolomics in microbiology

6.4 Conclusions and perspectives

References

Chapter 7. Approaches and tools of protein tailoring for metabolic

engineering

Abstract

7.1 Introduction

7.2 Approaches for the engineering of protein

7.3 Applications of protein engineering

7.4 Conclusions and perspectives

References
Chapter 8. Microbial metabolism of aromatic pollutants: High-
throughput OMICS and metabolic engineering for efficient
bioremediation

Abstract

8.1 Introduction

8.2 Aromatic compounds: impact and toxicity

8.3 Microbial metabolism of aromatic compounds/pollutants

8.4 High-throughput OMICS: insights into aromatics metabolism

8.5 Metabolic engineering for efficient aromatics biodegradation

8.6 Conclusions and perspectives

Acknowledgment

References

Chapter 9. Microbial consortium engineering for the improvement of

biochemicals production

Abstract

9.1 Introduction

9.2 Classification of microbial consortia

9.3 Construction of a microbial consortium

9.4 Applications of microbial consortium engineering

9.5 Recent synthetic microbial consortia and their applications

9.6 Challenges in microbial consortium engineering

 9.7 Conclusions and perspectives

Acknowledgment

References

Further reading

Section II: Metabolic Engineering of Cells:

Applications

Chapter 10. Metabolic engineering strategies for effective utilization

of cellulosic sugars to produce value-added products

Abstract

10.1 Introduction

10.2 Sustainable carbon sources for biorefineries

10.3 Microbial cell factories for carbon source coutilization and

production of value-added chemicals

10.4 Conclusions and perspectives

Acknowledgments

References

Chapter 11. Production of fine chemicals from renewable feedstocks

through the engineering of artificial enzyme cascades

Abstract
 11.1 Introduction

11.2 Advantages of enzyme cascades

11.3 Artificial enzyme cascades versus natural enzyme

cascades

11.4 Importance of fine chemicals production from renewable

feedstocks through artificial enzyme cascades

11.5 General principle of engineering of enzyme cascades

11.6 Examples of production of fine chemicals from bio-based L-

phenylalanine using artificial enzyme cascades

11.7 Examples of production of fine chemicals from renewable

feedstocks glucose and glycerol using artificial enzyme
cascades

11.8 Conclusions and perspectives

References

Chapter 12. Metabolic engineering of microorganisms for the

production of carotenoids, flavonoids, and functional
polysaccharides

Abstracts

12.1 Introduction

12.2 Metabolic engineering of plant natural products

12.3 Metabolic engineering of functional polysaccharides

12.4 Conclusions and perspectives

 References

Chapter 13. Bioengineering in microbial production of biobutanol

from renewable resources

Abstract

13.1 Introduction

13.2 Applications and production of butanol

13.3 Biological production of butanol

13.4 Metabolic pathways of biobutanol production

13.5 Enhancement of biobutanol production

13.6 Conclusions and perspectives

Acknowledgments

References

Chapter 14. Engineered microorganisms for bioremediation

Abstract

14.1 Introduction

14.2 Types of bioremediation

14.3 Genetically engineered organisms in bioremediation

14.4 Genetic engineering techniques

14.5 Bioremediation using GEMs

 14.6 Field applications of GEMs

14.7 Risk assessment of GEMs

14.8 Conclusions and perspectives

References

Chapter 15. Agricultural applications of engineered microbes

Abstract

15.1 Introduction

15.2 Agricultural applications of genetically modified microbes

15.3 Conclusions and perspectives

Acknowledgments

References

Chapter 16. Rhizosphere microbiome engineering

Abstract

16.1 Introduction

16.2 Plant-associated microbes/microbiome

16.3 Rhizosphere microbiome engineering

16.4 Emerging areas of research

16.5 Conclusions and perspectives

Acknowledgments
 References

Chapter 17. Genetically engineered microbes in micro-remediation

of metals from contaminated sites

Abstract

17.1 Introduction

17.2 Classification of bioremediation

17.3 Metal-contaminated sites: a problem

17.4 Genetically modified micro-organisms

17.5 Conclusions and perspectives

Acknowledgment

References

Chapter 18. Biofuel production from renewable feedstocks: Progress

through metabolic engineering

Abstract

18.1 Introduction

18.2 Heterologous genetic expression in plants to improve

feedstock properties

18.3 System metabolic engineering for biofuels production

18.4 Microbial production of biofuels from renewable feedstock

18.5 Challenges and techno-economic analysis of emerging

biofuels
 18.6 Conclusions and perspectives

Acknowledgments

References

Chapter 19. Synthetic biology and the regulatory roadmap for the
commercialization of designer microbes

Abstract

19.1 Introduction

19.2 Synthetic biology

19.3 Framework of synthetic biology

19.4 Tools in synthetic biology

19.5 Applications of synthetic biology

19.6 Legal aspect of designer microbes

19.7 Regulatory challenges for the commercialization of

designer microbes

19.8 Conclusions and perspectives

References

Index
Copyright
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The Boulevard, Langford Lane, Kidlington, Oxford OX5 1GB, United
Kingdom
50 Hampshire Street, 5th Floor, Cambridge, MA 02139, United States

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material herein.

ISBN: 978-0-323-88504-1

For Information on all Elsevier publications visit our website at

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Publisher: Susan Dennis

Acquisitions Editor: Katie Hammon
Editorial Project Manager: Howell Angelo M. De Ramos
Production Project Manager: R. Vijay Bharath
Cover Designer: Greg Harris

Typeset by MPS Limited, Chennai, India

List of contributors
Nagvanti Atoliya, Department of Microbiology, Barkatullah
University, Bhopal, Madhya Pradesh, India
Apekcha Bajpai, Department of Microbiology, Barkatullah
University, Bhopal, Madhya Pradesh, India
Neha Basotra, Department of Microbiology, Guru Nanak Dev
University, Amritsar, Punjab, India
Arvind Kumar Bhatt, Department of Biotechnology, Himachal
Pradesh University, Shimla, Himachal Pradesh, India
Bhupinder Singh Chadha, Department of Microbiology, Guru
Nanak Dev University, Amritsar, Punjab, India
Dhrubajyoti Chattopadhyay, Sister Nivedita University, Kolkata,
West Bengal, India
Han-Ju Chien, Institute of Molecular Biology, National Chung
Hsing University, Taichung, Taiwan
Aditi P. Dahake, School of Biochemical Engineering, Indian
Institute of Technology (BHU), Varanasi, Uttar Pradesh, India
Manali Das, School of Bioscience, Indian Institute of Technology
Kharagpur, Kharagpur, West Bengal, India
Tushar Dhamale, Department of Biosciences and Bioengineering,
Indian Institute of Technology Bombay, Powai, Mumbai, India
Abhishek S. Dhoble, School of Biochemical Engineering, Indian
Institute of Technology (BHU), Varanasi, Uttar Pradesh, India
Guocheng Du
Key Laboratory of Carbohydrate Chemistry and Biotechnology,
Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu, P.R.
China
Science Center for Future Foods, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu,
P.R. China
Abhrajyoti Ghosh, Department of Biochemistry, Bose Institute,
Kolkata, West Bengal, India
Amit Ghosh
School of Energy Science and Engineering, Indian Institute of
Technology Kharagpur, Kharagpur, West Bengal, India
P.K. Sinha Centre for Bioenergy and Renewables, Indian Institute of
Technology Kharagpur, Kharagpur, West Bengal, India
Anupama Ghosh, Division of Plant Biology, Bose Institute,
Kolkata, West Bengal, India
Mengyue Gong, School of Biotechnology, Jiangnan University,
Wuxi, Jiangsu, P.R. China
Swadha Gupta, School of Life Sciences, Central University of
Gujarat, Sector-30, Gandhinagar, Gujarat, India
Shyamalina Haldar, Department of Biochemistry, Asutosh
College, University of Calcutta, Kolkata, West Bengal, India
Philip Johnsen, Department of Biology, University of Waterloo,
Waterloo, ON, Canada
Swati Joshi, ICMR-National Institute of Occupational Health,
Ahmedabad, Gujarat, India
Amandeep Kaur, Department of Botany, Panjab University,
Chandigarh, Panjab, India
Alka Kumari, Division of Plant Biology, Bose Institute, Kolkata,
West Bengal, India
Cheng-Yu Kuo, Institute of Molecular Biology, National Chung
Hsing University, Taichung, Taiwan
Chien-Chen Lai
Institute of Molecular Biology, National Chung Hsing University,
Taichung, Taiwan
Advanced Plant Biotechnology Center, National Chung Hsing
University, Taichung, Taiwan
Graduate institute of Chinese Medical Science, China Medical
University, Taichung, Taiwan
Sung Kuk Lee, School of Energy and Chemical Engineering,
Ulsan National Institute of Science and Technology, Ulsan, Republic
of Korea
Hongbiao Li, College of Food Science and Technology, Nanjing
Agricultural University, Nanjing, Jiangsu, P.R. China
Si-Yu Li, Department of Chemical Engineering, National Chung
Hsing University, Taichung, Taiwan
Zhi Li, Department of Chemical and Biomolecular Engineering,
National University of Singapore, Singapore
Long Liu
Key Laboratory of Carbohydrate Chemistry and Biotechnology,
Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu, P.R.
China
Science Center for Future Foods, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu,
P.R. China
Yanfeng Liu
Key Laboratory of Carbohydrate Chemistry and Biotechnology,
Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu, P.R.
China
Science Center for Future Foods, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu,
P.R. China
Xueqin Lv
Key Laboratory of Carbohydrate Chemistry and Biotechnology,
Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu, P.R.
China
Science Center for Future Foods, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu,
P.R. China
Kesen Ma, Department of Biology, University of Waterloo,
Waterloo, ON, Canada
Madhu, Department of Botany, Panjab University, Chandigarh,
Panjab, India
Harshit Malhotra, Department of Biosciences and Bioengineering,
Indian Institute of Technology Bombay, Powai, Mumbai, India
Balaram Mohapatra, Department of Biosciences and
Bioengineering, Indian Institute of Technology Bombay, Powai,
Mumbai, India
Sangita Mondal, Department of Biochemistry, Bose Institute,
Kolkata, West Bengal, India
I-Son Ng, Department of Chemical Engineering, National Cheng
Kung University, Tainan, Taiwan
Thuan Phu Nguyen-Vo, School of Energy and Chemical
Engineering, Ulsan National Institute of Science and Technology,
Ulsan, Republic of Korea
Ashok Pandey, Centre for Innovation and Translational Research,
CSIR-Indian Institute of Toxicology Research, Lucknow, Uttar
Pradesh, India
Anju Pappachan, School of Life Sciences, Central University of
Gujarat, Sector-30, Gandhinagar, Gujarat, India
Sung Hoon Park, School of Energy and Chemical Engineering,
Ulsan National Institute of Science and Technology, Ulsan, Republic
of Korea
Pradipta Patra, School of Energy Science and Engineering, Indian
Institute of Technology Kharagpur, Kharagpur, West Bengal, India
Prashant S. Phale, Department of Biosciences and Bioengineering,
Indian Institute of Technology Bombay, Powai, Mumbai, India
Anil Prakash, Department of Microbiology, Barkatullah
University, Bhopal, Madhya Pradesh, India
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barruntado su propósito, por ser
aquella parte visitada muchas
veces de las Ninfas; á lo cual dixo
Siralvo desta suerte: Yendo por el
cerrado valle de los fresnos hacia
las fuentes del Obrego como dos
millas de allí, acabado el valle
entre dos antiguos allozares,
mana una fuente abundantíssima,
y á poco trecho se deja bajar por
la aspereza de unos riscos de
caída extraña, donde por
tortuosas sendas fácilmente
puede irse tras el agua, la cual en
el camino va cogiendo otras
cuarenta fuentes perenales que
juntas con extraño ruido van por
entre aquellas peñas
quebrantándose, y llegando á
topar el otro risco soberbias le
pretenden contrastar; mas
viéndose detenidas, llenas de
blanca espuma, tuercen por
aquella hondura cavernosa como
á buscar el centro de la tierra; á
pocos pasos en lo más estrecho
está una puente natural por
donde las aguas passando, casi
corridas de verse assí oprimir,
hacen doblado estruendo, y al fin
de la puente hay una angosta
senda que, dando vuelta á la
parte del risco, en aquella soledad
descubre al Mediodía un verde
pradecillo de muchas fuentes
pero de pocas plantas, y entre
ellas de viva piedra cavada está
la cueva del Mago Erión, albergue
ancho y obrado con suma
curiosidad. Este es el solo lugar
que os conviene, porque el
secreto dél es grande y el
apartamiento no es mucho. ¿Qué
podréis allá pedir que no halléis?
Todo está lleno de caza y de
frescura, y aunque es visitado
continuamente de las bellas
Ninfas, no es lugar común á todos
como el bosque del Pino, pues la
compañía de Erión seros ha muy
agradable. Éste sabe en los cielos
desde la más mínima estrella
hasta el mayor planeta su
movimiento y virtud; en los aires
sus calidades y en las aves dél y
alimañas de la tierra lo mismo; en
la mar tiene fuerza de enfrenar
sus olas y levantar tempestades
hasta poner sobre las aguas las
arenas: la división de las almas
irracionales y la virtud de la
inmortal con profundíssimo saber.
Pues llegando á los abismos las
tres Furias á su canto, Alecto
tiembla, Tesifón gime y Megera se
humilla; Plutón le obedece y los
dañados salen á la menor de sus
voces. Pues de las penas de
amor, sin hierba ni piedra, con
sólo su canto hace que ame el
amado ó aborrezca el aborrecido;
y si le viene la gana vuelto en
lobo se va á los montes, y hecho
águila á los aires, tornado pez
entra por las aguas, y convertido
en árbol se aparece en los
desiertos; no tiene Dios desde las
aguas del cielo á las ínfimas del
olvido cosa que no conozca por
nombre y naturaleza; no es de
condición áspera ni de trato
oculto; allí recibe á quien le busca
y remedia á quien le halla. Aquí
podemos irnos que en probarlo se
pierde poco, y yo sé que el ser
bien recebidos está cierto.
Cardenio, como de la ribera había
estado tanto tiempo ausente,
quedó admirado del gran saber
del nuevo Erión; pero Mendino,
que dél y de su estancia tenía
mucha noticia, aunque pudiera
desde el Mago Sincero estar
escarmentado, fácilmente dando
crédito á sus loores, determinó
que le buscassen el siguiente día
por poner aquél en cobro lo que
les importaba dexar, que fué
fácilmente hecho, y recogiéndose
á las cabañas de Mendino,
pusieron orden en la cena, que
fué de mucho gusto, y al fin della
no faltó quien se le acrecentasse,
porque vinieron Batto y Silvano,
pastores conocidíssimos, ambos
mozos y ambos de grande
habilidad, á buscar juez á ciertas
dudas que Batto sentía de versos
de Silvano; y el juicio de Siralvo
fué que si todos los poetas
fuessen calumniados, pocos
escaparían de algún objeto; y
colérico Silvano, en un momento
puso mil á Batto, y de razón en
razón se desafiaron á cantar en
presencia de aquellos pastores,
pero pareciéndoles la noche
blanda y el aire suave, se salieron
juntos á tomarle y oirlos á la
fresca fuente: donde sentados
sacaron la lira y el rabel, á cuyo
son assí cantó Silvano y assí fué
Batto respondiendo:

SILVANO
Dime que Dios te dé para un
pellico,
¿por qué traes tan mal
vestido, Batto,
presumiendo tu padre de tan
rico?

BATTO
Porque el pastor de mi
nobleza y trato
no ha menester buscarlo en el
apero,
que una cosa es el hombre y
otra el hato.
Mas dime, esse capote
dominguero
¿quién te le dió? ¿Quizá
porque cantasses
en tanto que comía el
compañero?
 SILVANO
Si á quien yo le canté tú le
bailasses,
yo sé, por más que de rico te
alabes,
si te diesse otro á ti, que le
tomasses.
Mas ¿por qué culpas tales y
tan graves
de Lisio traes sus rimas
desmandadas,
de lengua en lengua que
ninguna sabes?

BATTO
Calla y sabrás: ¿no ves
cuán aprobadas
del mundo son las mías y la
alteza
de mis líricas odas imitadas?
Tú tienes por tesoro tu
pobreza,
y si lo es, está tan escondido
que para descubrirle no hay
destreza.

SILVANO
Pastor liviano, ¿qué libro
has leído
que de ti pueda nadie hacer
caso,
si no estuviesse fuera de
sentido?
El franco Apolo fué contigo
escaso,
y por hacerte de sus
paniaguados,
no te echarán á palos del
Parnasso.

BATTO
Desso darán mis versos
levantados
el testimonio y de mi poesía
sin ser como los tuyos
acabados.
En diciendo fineza y
hidalguía,
regalo, gusto y
entretenimiento,
diosa, bizarro trato y gallardía.

SILVANO
¡Oh, qué donoso
desvanecimiento!
Dessos vocablos uso, Batto
mío,
porque son tiernos y me dan
contento,
Pero las partes por do yo los
guío,
son tan diversas todas y tan
buenas,
que ellas lo dicen, que yo no
porfío.

BATTO
 ¿Sabes lo que nos dicen?
Que van llenas
de muy bajas razones su
camino,
y si algunas se escapan son
ajenas,
Y no hurtáis, Silvano, del
latino,
del griego ó del francés ó del
romano,
sino de mí y del otro su
vecino.

SILVANO
Si tu trompa tomassen en la
mano,
que la de Lisio apenas lo
hiciste,
¿qué son harías, cabrerizo
hermano?
Para vaciarla el sueño no
perdiste,
para cambiarla sí, que no
hallaste
otro tanto metal como fundiste.

BATTO
¡Basta! que tú en la tuya
granjeaste
de crédito y honor ancho
tesoro;
mas dime si en mis Rimas
encontraste
La copla ajena entera sin
decoro,
ó espuelas barnizadas de
gineta,
con jaez carmesí y estribos de
oro.

SILVANO
Descubriréte á la primera
treta
tu lengua sin artículos, defeto
digno de castigar por nueva
seta.
Tu nombre es Piedra
toque y en efeto,
usando descubrir otros
metales,
el miserable tuyo te es
secreto.

BATTO
¡Oh tú, que con irónicas
señales,
cansas los sabios, frunces los
misérrimos,
viviendo por pensión de los
mortales!

SIRALVO
Pastores, dos poetas
celebérrimos
no han de tratarse assí, que
es caso ilícito
motejarse en lenguajes tan
acérrimos.
Ni á vosotros, amigos, os es
lícito,
ni á mi sufrirlo, y es razón
legítima,
que ande el juez en esto más
solícito.
La honra al bueno es cordial
epítima,
y los nobles conócense en la
plática,
dándose el uno por el otro en
vítima.
Aquí, donde la hierba es
aromática,
con el sonido de la fuente
harmónica,
al claro rayo de la luz
scenática,
Suene Silvano, nuestra lira
jónica,
Batto rosponda el rabelejo
dórico
y duerma el Jovio con su dota
Crónica.
Cada cual es poeta y es
histórico,
y cada cual es cómico y es
trágico,
y aun cada cual gramático y
retórico.
Pero dexado, en un cantar
selvático,
si aquí resuena Lúcida y
Tirrena,
más mueve un tierno son que
un canto mágico.
 SILVANO
En hora buena, pero con tal
pato
si pierde Batto, que esté llano
y cierto,
que por concierto deste
desafío,
ha de ser mío su rabel de
pino;
y si benino Apolo se le allana,
y en él se humana para que
me gane,
que yo me allane y sin desdén
ó ira
le dé mi lira de ciprés y
sándalos.

BATTO
No hagas más escándalos,
satírico,
ni presumas de lírico y
bucólico;
con algún melancólico lunático
te precias tú de plático en
poética;
que esté su lira ética y él ético,
que mi rabel poético odorífero
no entrará en tan pestífero
catálogo
ni en tal falso diálogo ni
cántico.

SIRALVO
 Si estilo nigromántico
bastasse
á poder sossegar vuestra
contienda,
tened por cierto que lo
procurasse,
O callad ambos ó tened la
rienda,
ó poned premios ó cantad sin
ellos,
pero ninguno en su cantar se
ofenda.

SILVANO
Dos chivos tengo, y huelgo
de ponellos,
para abreviar en el presente
caso,
contento de ganallos ó
perdellos.

BATTO
Pues yo tengo, Siralvo, un
rico vaso
que á mi opinión es de
ponerse dino
con las riquezas del soberbio
Crasso.
El pie de haya, el tapador de
pino,
de cedro el cuerpo y de
manera el arte,
que excede el precio del metal
más fino.
Dédalo le labró parte por
parte,
tallando en él del uno al otro
polo,
cuanto el cielo y el sol mira y
reparte.
Y cuando en tanta
hermosura violo,
fuese por Delfos, y passando
á Anfriso,
dióle al santo pastor el rubio
Apolo.
Y cuando al carro
trasponerse quiso
el retor de la luz, dejó el
ganado
y aqueste vaso con mayor
aviso,
Á las Ninfas del Tajo
encomendado;
y ellas después le dieron á
Silvana,
de quien mi padre fué pastor
preciado.
Ella á él y él á mí; mas si me
gana
Silvano, ahora quiero que le
lleve.

SIRALVO
Y yo juzgaros con entera
gana.
Batto á pagar y á no reñir
se atreve,
y tú, Silvano mío, bien te
acuerdas
que has prometido lo que aquí
se debe.
Pues fregad la resina por las
cerdas,
muestren las claras voces su
dulzura
al dulce son de las templadas
cuerdas.
Sentémonos ahora en la
verdura;
cantad ahora que se va
colmando
de flor el prado, el soto de
frescura.
Ahora están los árboles
mostrando,
como de nuevo, un año
fertilíssimo,
los ganados y gentes
alegrando.
Ahora viene el ancho río
puríssimo,
no le turban las nieves, que el
lozano
salce se ve en su seno
profundíssimo.
Descubrid vuestro ingenio
mano á mano,
cada cual cante con estilo
nuevo,
comience Batto, seguirá
Silvano,
diréis á veces, gozaráse Febo.

BATTO
¡Oh, rico cielo, cuya eterna
orden
es claro ejemplo del poder
divino,
haz que mis versos y tu honor
concorden!

SILVANO
Para que deste premio sea
yo dino
en mis enamorados
pensamientos,
muéstrame, Amor, la luz de tu
camino.

BATTO
Lleven los frescos y suaves
vientos
mis dulces versos á la cuarta
esfera,
pues ama el mismo Apolo mis
acentos.

SILVANO
Dichoso yo si Lúcida
estuviera
tras estos verdes ramos
escuchando,
y oyéndose nombrar me
respondiera.

BATTO
Pues no me canso de vivir
penando,
la que me está matando,
debría templar un poco de mi
pena.
Ablándate, dulcíssima
Tirrena,
que siendo en todo buena,
no es justo que te falte el ser
piadosa.

SILVANO
Pues cuando te me
muestras amorosa,
Lúcida mía hermosa,
muy humilde te soy, seime
benina.
Regala, diosa, esta ánima
mezquina,
que mi fineza es dina
de que tu gallardía me
entretenga.

BATTO
Si quiere Amor que mi vivir
sostenga,
de Tirrena me venga
el remedio, que es malo de
otra parte.
Mira que de mi pecho no se
parte,
Tirrena, por amarte,
un Etna fiero, un Mongibelo
ardiente.

SILVANO
 Si yo dijesse la que mi alma
siente,
cuando me hallo ausente,
de tu grande beldad, Lúcida
mía,
Etnas y Mongibelos helaría,
porque su llama es fría,
con la que abrasa el pecho de
Silvano.

BATTO
Cuando en mi corazón
metió la mano,
sin dejarme entendello,
robóme Amor la libertad con
ella,
dejando en lugar della
el duro yugo que me oprime el
cuello.

SILVANO
El duro yugo que me oprime
el cuello,
por blando le he tenido
llevado del dulzor de mi
deseo,
por quien de Amor me veo
menos pagado y más
agradecido.

BATTO
Menos pagado y más
agradecido,
Amor quiere que muera,
quiéralo él, que yo también lo
quiero,
y veráse, si muero,
cuánto mi fe, pastora, es
verdadera.

SILVANO
Cuánto mi fe, pastora, es
verdadera
es falsa mi esperanza,
porque mejor entrambas me
deshagan,
y aunque ellas no la hagan,
nunca mi corazón hará
mudanza.

BATTO
Tirrena mía, más blanca que
azucena,
más colorada que purpúrea
rosa,
más dura y más helada
que blanca y colorada;
si no te precias de aliviar mi
pena,
hazlo al menos de ser tan
poderosa,
que queriendo tus ojos
acabarme,
con ellos mismos puedas
remediarme.

SILVANO
 Lúcida mía, en cuya
hermosura
están juntas la vida con la
muerte,
el miedo y la esperanza,
tempestad y bonanza,
sin duda á aquél que de tu
Amor no cura
darás vida, esperanza y buena
suerte,
pues por amarte, Lúcida, me
han dado
la muerte el miedo y el
adverso hado.

BATTO
¿Di, quién, recién nacido
de un animal doméstico
preciado,
del todo está crecido,
de padre sensitivo fué
engendrado,
mas nació sin sentido
y en esto su natura ha
confirmado;
después, materna cura,
muda su sér, su nombre y su
figura?

SILVANO
Di tu, ¿quién en dulzura
nace, y en siendo della
dividida,
la llega su ventura
á otra cosa, que teniendo vida
muere ella y si procura
vivir, queda la otra apetecida,
haciendo su concierto,
del muerto vivo y del vivo
muerto?

BATTO
El canto se ha passado
querellándonos,
de aquellas inhumanas que,
ofendiéndonos,
quedan sin culpa con el mal
pagándonos.

SILVANO
Al principio pensé que,
defendiéndonos,
tan solos nuestros premios
procuráramos,
menos desseo y más passión
venciéndonos.

SIRALVO
Pastores, mucho más os
escucháramos,
aunque en razones no sabré
mostrároslo,
porque de oiros nunca nos
cansáramos.
Ponerme yo en mis Rimas á
loároslo,
por más que lo procure
desvelándome,
no será más possible que
premiároslo.

BATTO
Pues yo, Siralvo, pienso,
que premiándome,
saldrás de aquessa deuda
conociéndote,
y en tu saber y mi razón
fiándome.

SILVANO
Yo no pienso cansarte
persuadiéndote
á lo que tú, Siralvo mío,
obligástete,
y la justicia clara está
pidiéndote.

SIRALVO
Batto, de tal manera
señalástete,
de suerte tus cantares
compusístelos,
que de tu mano con tu loor
premiástete.
Y tú, Silvano, tanto
enriquecístelos
tus conceptos de amor, que
deste premio
como de cosa humilde
desviástelos.
Por esto sin gastar largo
proemio,