‫‪n‬‬ ‫العوامل التى تؤثر على النشاط اإلنزيم ومعدل التفاعل اإلنزيمى‬

‫‪n‬‬ ‫بما أن اإلنزيمات ذات طبيعة بروتينية فإنها تكون حساسة بدرجة غير عادية للتأثيرات المغيرة لبيئتها‬
‫‪ :-‬الذاتية حيث تؤثر على المركز النشط لإلنزيم وتؤثر بالتالىعلى تكوين المعقد اإلنزيمى‬
‫‪n‬‬ ‫‪ :-‬ت‪11‬ركيز مادة لا‪11‬تفاعل ‪1-‬‬
‫‪n‬‬ ‫كما هو معروف أن تكوين المعقد اإلنزيمى يسبق التحوالت التى تحدث فى مادة التفاعل وبما أن حجم‬
‫جزئ اإلنزيم أكبر بكثير من حجم مادة التفاعل فإن‬
‫‪E‬‬
‫‪n‬‬ ‫المراكز النشطة لإلنزيم ال تشغل بالكامل عند إستخدام التركيزات‬
‫‪1‬‬
‫‪V‬‬ ‫السرعة القصوى‬ ‫‪max‬‬
‫المنخفضة لمادة التفاعل حيث تقل نسبة إرتباط مادة التفاعل‬
‫‪ V 0‬سرعةالتفاعل اإلبتدائية‬

‫‪E‬‬ ‫بالمركز النشط لسطح اإلنزيم و ينعكس ذلك سلبيا ً على الكفاءة أوالسرعة‬
‫‪2‬‬
‫‪V /2‬‬ ‫‪max‬‬
‫القصوي لهذا اإلنزيم( ‪ )Vmax‬لكن عند زيادة تركيزمادة التفاعل‬
‫فإن عدد الجزيئات الموجودة بجوار المركز النشط تزداد وبذلك‬
‫تزداد فرصة إتصاله به‪ ،‬وعند تثبيت تركيز اإلنزيم فإن‬
‫‪n‬‬ ‫تركيز مادة التفاعل يترتب عليه زيادة فى معدل تحفيز‬
‫‪Km Km‬ث‪11‬ا ب‪11‬تميكيلس‬ ‫‪1‬‬ ‫‪2‬‬
‫‪n‬‬ ‫اإلنزيم للتفاعل إلى أن يصل المركز النشط إلى درجة‬
‫تركيز مادة التفاعل‪s‬‬ ‫‪n‬‬ ‫التشبع وعندها يعمل اإلنزيم بكفاءته القصوى‬
‫‪n‬‬ ‫ى‬
‫ومهما زاد ت‪11‬ركيز مادة ا‪11‬لتفاعل ف‪111‬ليسل‪1‬ه‪1‬ا أ‪1‬ىت‪11‬أثير علىمع‪1‬دل أو )ل‪11‬كنمع‪ 1‬ت‪11‬ثبيتج‪1‬ميع‪ 1‬ا‪11‬لع‪1‬وا‪1‬مل ا‪11‬ألخر (‬
‫س‪11‬رعة ا‪11‬لتفاعل وهذا ما ي‪11‬وضحه‪ 1‬ا‪11‬لشكل ا‪11‬لجانبىوا‪11‬لمع‪1‬ادلة ا‪11‬لتا‪11‬لية ت‪11‬وضح مدىعالقة س‪11‬رعة ا‪11‬لتفاعل مع‪1‬‬
‫‪K1‬‬
‫‪K2‬‬
‫‪ :-‬ت‪11‬ركيز مادة ا‪11‬لتفاعل‬
‫‪n‬‬ ‫‪E+ S‬‬ ‫‪ES‬‬ ‫‪E+P‬‬
‫‪K-1‬‬

‫‪n‬‬
 ‫السرعة القصوى (تركيز مادة التفاعل)‬ ‫‪‬‬

‫سرعة التفاعل اإلبتدائية =‬ ‫‪‬‬

‫ثابت ميكالس ‪( +‬تركيز مادة التفاعل)‬ ‫‪‬‬

‫)‪Vmax (S‬‬ ‫‪‬‬

‫‪= V0‬‬ ‫‪‬‬

‫)‪Km + (S‬‬ ‫‪‬‬

‫‪‬‬

‫‪ Km‬ت‪11‬عنىا‪11‬لكبيرة ق‪11‬ابلية منخفضة ل‪11‬إلنزيم‪ 1‬ل‪11‬إلرتباط ي‪11‬مادة ا‪11‬لتفاعل‬ ‫‪‬‬

‫‪ Km‬ا‪11‬لصغيرة ت‪11‬عنىق‪11‬ابلية مرتفع‪1‬ة ل‪11‬إلنزيم‪ 1‬ل‪11‬إلرتباط ي‪11‬مادة ا‪11‬لتفاعل‬ ‫‪‬‬

 ‫‪ -2‬تركيز اإلنزيم ‪-:‬‬ ‫‪‬‬

‫لدراسة تأثير تركيز اإلنزيم على سرعة التفاعل البد من الحفاظ على تركيز مادة التفاعل ثابتة وعالية‬ ‫‪‬‬
‫بحيث ال تؤثر بدورها على سرعة التفاعل أى تكون متوفرة بحيث يصل اإلنزيم لدرجة اإلشباع وبذلك فإن‬
‫عدد جزيئات اإلنزيم هى وحدها التى تحدد سرعة التفاعل ويوضح الشكل الجانبى هذه العالقة‬
‫ويمكن أن نستخدم هذه العالقة لقياس تركيز اإلنزيم‬ ‫‪‬‬

‫فى السوائل الحيوية وذلك بمقارنة سرعة التفاعل‬ ‫‪‬‬

‫فى عينة مجهولة التركيز مع سرعة التفاعل الناتجة‬ ‫‪‬‬

‫من عينات من اإلنزيم نفسه معروفة التركيز فإذا‬ ‫‪‬‬

‫سرعة التفاعل‬

‫وجد مثالً أن سرعة التفاعل بإستخدام ‪ 1‬مليليتر‬ ‫‪‬‬

‫من بالزما الدم للشخص الطبيعى كمصدر لإلنزيم‬ ‫‪‬‬

‫تصل إلى ‪ 20‬ميكرومول ‪ /‬لتر فى الدقيقة ثم تبين‬ ‫‪‬‬

‫أن سرعة التفاعل نفسه تتضاعف بإسخدام كمية‬ ‫‪‬‬

‫تركيز اإلنزيم‬ ‫البالزما نفسها من شخص مريض أمكننا القول بان‬ ‫‪‬‬

‫بالزما الدم للشخص المريض تحوى من اإلنزيم ضعفى‬ ‫‪‬‬

‫ما تحويه بالزما الدم للشخص الطبييعى وكثيراً ما تكون هذه المعلومات كافية لتقدير كمية اإلنزيم فى مثل‬ ‫‪‬‬

‫هذه الحاالت ‪0‬‬

 ‫‪ - 3‬درجة الحرارة ‪-:‬‬ ‫‪‬‬

‫بسبب الطبيعة البروتينية لإلنزيم فهو حساس للتغيرات الحرارية كما أن نشاطها متحدد فى مجال‬ ‫‪‬‬
‫ضيق من درجة الحرارة ويكون معدل التفاعل مساويا ً صفراً من الوجهة العلمية عند درجة الصفر‬
‫المئوى ويزداد هذا المعدل بزيادة ثابتة بزيادة درجة الحرارة ويشترك عامالن فى هذه الظاهرة ‪-:‬‬
‫‪ -1‬زيادة الطاقة الحركية الذاتية لكل من اإلنزيم ومادة التفاعل‬ ‫‪‬‬

‫‪ -2‬زيادة فرصة التصادم بين اإلنزيم ومادة التفاعل كنتيجة لزيادة معدل اإلثارة برفع درجة الحرارة‬ ‫‪‬‬

‫وكما ذكرنا سابقا ً أن التركيب الجزيئ لمعقد اإلنزيم‬ ‫‪‬‬

‫المحتوى على العديد من الروابط الهيدروجينية يشكل‬ ‫‪‬‬

‫عامالً أساسيا ً فى نشاط اإلنزيم ورفع درجة حرارة‬ ‫‪‬‬

‫معدل التفاعل‬

‫اإلنزيم تشد هذه الروابط وقد تكسرها فى النهاية‬ ‫‪‬‬

‫وبزيادة درجة الحرارة تتفكك الروابط األخرى لذلك‬ ‫‪‬‬

‫ال يستطيع أن يحتفظ اإلنزيم بتركيبه متكامالً ويفقد‬ ‫‪‬‬

‫‪60‬‬ ‫‪40‬‬ ‫‪20‬‬ ‫‪0‬‬ ‫قوته الحافزية بالكامل ويبدأ هذا الفقد عند حوالى ‪30‬‬ ‫‪‬‬

‫درجة الحرارة‬ ‫درجة مئوية ويصبح كامالً عندما تقترب درجة الحرارة‬ ‫‪‬‬

‫من ‪ 60‬درجة مئوية وهذا ما يوضحه الشكل التالى‬ ‫‪‬‬

 ‫‪ -4‬تركيز أيون الهيدروجين‪-:‬‬ ‫‪‬‬

‫إن تركيز أيون الهيدروجين فى وسط التفاعل يؤثر على فعالية اإلنزيم وفى العادة يكون األس‬ ‫‪‬‬
‫الهيدروجينى معتدالً لكى تتم اإلنزيمات عملها ويتم التفاعل بالسرعة القصوى‪ ،‬واإلرتفاع‬
‫واإلنخفاض الشديدين فى األس الهيدروجينى يخفض من فعالية اإلنزيم ويقلل من سرعة‬
‫التفاعل اإلنزيمى ألن المجموعات األيونية الموجودة فى بروتينات اإلنزيم قد تكتسب أو تفقد‬
‫شحنات تبعا ً لتركيز أيون الهيدروجين وخاصة إذا كانت هذه المجموعات المتأينة تشكل جزءاً‬
‫هاما ً من المركز النشط لإلنزيم أو من مادة التفاعل حيث ان الحالة األيونية لمادة التفاعل‬
‫عامالً مهما ً لحدوث التفاعل وهذه المجموعات الفعالة قد تكون مشحونة أو غير مشحونة‬
‫بشحنات كهربائية تبعا ً لقيم األس الهيدروجينى فمثالً ‪-:‬‬
‫أ‪ -‬مجموعة األمين ‪ NH2 -‬فقد تصبح ‪ NH+3 -‬عندما يكون األس الهيدروجينى منخفض ‪0‬‬ ‫‪‬‬

‫ب – مجموعة السلفهيدريل (‪)SH -‬وقد تصبح (‪)S-‬عنداألس الهيدروجينى العالى‪.‬‬ ‫‪‬‬

‫تريبسين‬
‫بيبسين‬ ‫أرجينيز‬ ‫كما ان اإلنخفاض واإلرتفاع فى التركيز الهيدروجينى‬ ‫‪‬‬
‫‪100‬‬

‫يؤثران على إرتباط البروتينات التزاوجية فمثالً عند‬ ‫‪‬‬

‫‪80‬‬

‫الرقم الهيدروجينى الحامضى ينفصالن الجزء البروتينى‬ ‫‪‬‬

‫النشاط اإلنزيمى‬
‫‪60‬‬

‫والغير بروتينى إلنزيم البيروكسيديز ويصبحان غير‬ ‫‪‬‬

‫‪40‬‬

‫فعالين والشكل التالى يوضح هذا التأثير‬ ‫‪‬‬

‫‪20‬‬

‫‪‬‬
‫‪0‬‬

‫‪10‬‬ ‫‪8‬‬ ‫‪6‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪0‬‬

‫األس الهيدروجينى‬
 ‫المثبطات ‪Inhibitors-:‬‬ ‫‪‬‬

‫بماأن اإلنزيمات هي بروتينات تملك مجاميع فعالة مختلفة كما أن‬ ‫‪‬‬
‫لها القدرة على التفاعل مع مركبات أخرى غير مادة التفاعل مما يؤدى‬
‫إلى تغيرفى تركيب اإلنزيم الالزم لنشاطه التحليلى أو الحفزى وبذلك‬
‫يقل النشاط اإلنزيمى أو يتوقف بالكامل وهذه المركبات التى تثبط عمل‬
‫اإلنزيم نوعين‪-:‬‬
‫‪ -1‬مثبطات تنافسية ‪-: Competitive inhibitors‬‬ ‫‪‬‬

‫وهى تنافس المواد المتفاعلة أو المرافقات اإلنزيمية للوصول إلى‬ ‫‪‬‬

‫المواقع الفعالة على سطح بروتين اإلنزيم بسبب تشابه صيغها‬
‫التركيبية مع الصيغ التركيبية للمواد المتفاعلة لذا فإن المعقد المتكون‬
‫غير قابل لإلنعكاس وغير نشط وبذلك ال تتكون نواتج التفاعل ويمكن‬
‫التغلب على ذلك بزيادة تركيز مادة التفاعل حتى تشغل جميع مراكز‬
‫اإلنزيم النشطة بها ومن األمثلة المعروفة‪-:‬‬
‫‪‬‬
 ‫تثبيط المثبط حمض المالونيك المشابه لحمض السكسنيك إلنزيم‬ ‫‪‬‬

‫ديهيدروجينيز حمض السكسنيك (الذى يحفز تحويل حمض‬

‫السكسنيك ألى حمض الفيوماريك ) حيث يحتل المثبط المركز النشط‬
‫لإلنزيم بدالً من حمض السكسنيك ويكن التغلب على هذا التثبيط‬
‫بزيادة تركيز مادة التفاعل حمض السكسنيك‪0‬‬
‫‪O‬‬ ‫‪‬‬

‫‪-O‬‬ ‫‪O‬‬ ‫‪O CH2-C-O‬‬ ‫‪‬‬

‫‪O-C-CH2-C-O-‬‬ ‫‪-O-C-CH2- ‬‬

‫المالونات المثبط التنافسي‬ ‫السكسينات مادة التفاعل‬ ‫‪‬‬

‫الموقع النشط‬ ‫السكسينات ديهيدروجينيز‬ ‫‪‬‬

‫‪ -2‬مثبطات التنافسية ‪Competitive inhibitors‬‬
‫‪:-Non‬‬
‫وهذه تتحد مع بروتين اإلنز‪1‬يم وفى مواقع غير‪ 1‬المواقع‬ ‫‪‬‬

‫الفعالة والنشطة وبذلك تثبط فعالية اإلنزيم وال يمكن‬

‫الحصول على سر‪1‬عة التفاعل القصوى ‪ Vmax‬مهما‬
‫زاد ت كمية مادة التفاعل‬ ‫‪‬‬
‫مادة التفاعل‬ ‫‪‬‬

‫مثبط ال تنافسى‬ ‫‪‬‬

 ‫وهذا التثبيط مهم فى تنظيم عمل اإلنزيمات فكثيراً ما تعمل‬
‫المادة الناتجة من سلسلة من التفاعالت اإلنزيمية مثبطا ً‬
‫ألحد اإلنزيمات فى بداية السلسلة فتحد بذلك من إستمر‪1‬ار‬
‫التفاعالت المؤدية إلنتاج تلك المادة‪0‬‬
‫‪ V 0‬سرعةالتفاعل اإلبتدائية‬

‫‪ V 0‬سرعةالتفاعل اإلبتدائية‬
‫مع المثبط التنافسى‬
‫‪Vmax /2‬‬ ‫مع المثبط الغيرتنافسى‬

‫‪ Km‬ث‪11‬ا ب‪11‬تميكيلسال‪ 1‬ي‪11‬تغير ف‪111‬ىوجود ا‪11‬لمثبا‪11‬لغير‬

‫‪ Km‬ث‪11‬ا ب‪11‬تميكيلسي‪11‬زداد ف‪111‬ىوجود ا‪11‬لمثبط‬
‫ت‪11‬ناف‪1‬سى‬
‫تركيز مادة التفاعل‪s‬‬
‫تركيز مادة التفاعل‪s‬‬
‫كما أن المواد السامة تثبط فعالية اإلنزيمات وكذلك األحماض والقواعد القوية‬ ‫‪‬‬

‫والتركيز العالى من االيوريا ‪0‬‬

‫أما أيونات العناصر الغذائية فتعمل على تنشيط عمل اإلنزيمات وزيادة سرعة‬ ‫‪‬‬

‫التفاعل اإلنزيمى ولكن زيادة تركيز هذه األيونات عن الحد المناسب يؤدى إلى‬
‫تثبيط فعالية اإلنزيمات‪0‬‬