TRIGLYCERIDES -LQ

Triglycerides-LQ
GPO-POD. Liquid

Quantitative determination of triglycerides 4. Mix and incubate for 5 min at 37ºC or 10 min at 15-25ºC.
IVD 5. Read the absorbance (A) of the samples and standard, against the
Store at 2-8ºC Blank. The colour is stable for at least 30 minutes.
PRINCIPLE OF THE METHOD
CALCULATIONS
Sample triglycerides incubated with lipoproteinlipase (LPL), liberate
glycerol and free fatty acids. Glycerol is converted to glycerol-3- (A) Sample  (A)Blank
x Standard conc.= mg/dL triglycerides in the sample
phosphate (G3P) and adenosine-5-diphosphate (ADP) by glycerol (A) S tandard  (A)Blank
kinase and ATP. Glycerol-3-phosphate (G3P) is then converted by
glycerol phosphate dehydrogenase (GPO) to dihydroxyacetone Conversion factor: mg/dL x 0,0113= mmol/L.
phosphate (DAP) and hydrogen peroxide (H2O2). QUALITY CONTROL
In the last reaction, hydrogen peroxide (H2O2) reacts with 4- Control Sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
aminophenazone (4-AP) and p-chlorophenol in presence of SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and 1002210).
peroxidase (POD) to give a red colored dye: If control values are found outside the defined range, check the instrument,
LPL reagent and calibration material.
Triglycerides + H2O  Glycerol + free fatty acids Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
Gly cerol kinase actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
Glycerol + ATP 
 G3P+ ADP
GPO REFERENCE VALUES
G3P + O2 
 DAP + H2O2
Men 40 – 160 mg/dL
POD
H2O2 + 4-AP + p-Chlorophenol   Quinone + H2O Women 35 – 135 mg/dL
The intensity of the color formed is proportional to the triglycerides
concentration in the sample1,2,3. These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its
own reference range.
CLINICAL SIGNIFICANCE
Triglycerides are fats that provide energy for the cell. PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Like cholesterol, they are delivered to the body’s cells by lipoproteins Measuring range: From detection limit 0,000 mg/dL to linearity limit 1600
in the blood. A diet with a lot of saturated fats or carbohydrates will mg/dL.
raise the triglyceride levels. The increases in serum triglycerides are If the concentration is greater than linearity limit dilute 1/2 the sample with
relatively non-specific. For example liver dysfunction resulting from ClNa 9 g/L and multiply the result by 2.
hepatitis, extra hepatic biliary obstruction or cirrhosis, diabetes Precision:
mellitus is associated with the increase3,6,7. Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should Mean (mg/dL) 109 224 111 224
integrate clinical and other laboratory data. SD 0,64 1,01 3,74 7,90
CV (%) 0,58 0,45 3,38 3,52
REAGENTS Sensitivity: 1 mg/dL = 0,0013 (A).
GOOD pH 6.3 50 mmol/L Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
p-Chlorophenol 2 mmol/L
systematic differences when compared with other commercial reagent (x).
Lipoprotein lipase (LPL) 150000 U/L
Glycerol kinase (GK) 500 U/L The results obtained using 50 samples were the following:
R (Note 2) Correlation coefficient (r): 0,99810.
Glycerol-3-oxidasa (GPO) 3500 U/L
Peroxidase (POD) 440 U/L Regression equation: y= 0,9178x - 0,5426
4 – Aminophenazone (4-AP) 0,1 mmol/L The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
ATP 0,1 mmol/L INTERFERENCES
TRIGLYCERIDES CAL Aqueous primary standard 200 mg/dL
No interferences were observed with bilirubin < 170 mol/L,
PREPARATION
hemoglobin < 10 g/L2.
Reagent and standard provided are ready to use. A list of drugs and other interfering substances with cholesterol
determination has been reported 4,5.
STORAGE AND STABILITY
All the components of the kit are stable until the expiration date on the NOTES
label when stored tightly closed at 2-8ºC, protected from light and 1. TRIGLYCERIDES CAL: Proceed carefully with this product because
contaminations prevented during their use. due its nature it can get contaminated easily.
Do not use reagents over the expiration date. 2. LCF (Lipid Clearing Factor) is integrated in the reagent.
Signs of reagent deterioration: 3. Calibration with the aqueous Standard may cause a systematic error in
- Presence of particles and turbidity. automatic procedures. In these cases, it is recommended to use a
- Blank absorbance (A) at 505 nm > 0,26. serum Calibrator.
4. Use clean disposable pipette tips for its dispensation.
ADDITIONAL EQUIPMENT 5. SPINREACT has instruction sheets for several automatic
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 505 nm. analyzers.
- Matched cuvettes 1,0 cm light path.
- General laboratory equipment. BIBLIOGRAPHY
1. Buccolo G et al. Quantitative determination of serum triglycerides by use of
SAMPLES enzimes. Clin Chem 1973; 19 (5): 476-482.
Serum or plasma1. 2. Fossati P et al. Clin. Chem 1982; 28(10): 2077-2080.
Stability of the sample: 5 days at 2-8ºC . 3. Kaplan A et al. Tryglycerides. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto.
Princeton 1984; 437 and Lipids 1194-1206.
PROCEDURE 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
1. Assay conditions: 6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 505 nm (490-550) 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm light path
Temperature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37ºC / 15-25ºC PACKAGING
2. Adjust the instrument to zero with distilled water. Ref: 41030 R:1 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
3. Pipette into a cuvette: Ref. 41031 R:2 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
Ref. 41032 Cont. R:1 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL
Blank Standard Sample Ref. 41033 . R:1 x 500 mL, CAL: 1 x 5 mL
R (mL) 1,0 1,0 1,0 Ref. 41034 R:1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL
Standard(Note 1,3,4) (L) -- 10 --
Sample (L) -- -- 10
BSIS49-I 01/10/14 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com
 TRIGLYCERIDES -LQ

Triglicéridos-LQ
GPO-POD. Líquido
Determinación cuantitativa de triglicéridos 5. Leer la absorbancia (A) del patrón y la muestra, frente al Blanco de
IVD reactivo. El color es estable como mínimo 30 minutos.

Conservar a 2-8ºC CÁLCULOS

(A) Muestra  (A)Blanco x Conc. Patrón = mg/dL de triglicéridos en la muestra
PRINCIPIO DEL MÉTODO (A) Patrón  (A)Blanco
Los triglicéridos incubados con lipoproteinlipasa (LPL) liberan glicerol y
Factor de conversión: mg/dL x 0,0113 = mmol/L.
ácidos grasos libres. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato
deshidrogenasa (GPO) y ATP en presencia de glicerol quinasa (GK) para CONTROL DE CALIDAD
producir glicerol-3-fosfato (G3P) y adenosina-5-difosfato (ADP). El G3P Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
es entonces convertido a dihidroxiacetona fosfato (DAP) y peróxido de SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
hidrogeno (H2O2) por GPO. Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
Al final, el peróxido de hidrogeno (H2O2) reacciona con 4-aminofenazona revisar el instrumento, el reactivo y el material de calibración.
(4-AF) y p-clorofenol, reacción catalizada por la peroxidasa (POD) dando Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
una coloración roja: correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
LPL
Triglicéridos + H2O  Glicerol + Ácidos grasos libres VALORES DE REFERENCIA
Glicerol quinasa
Glicerol + ATP  G3P+ ADP Hombres: 40 – 160 mg/dL
GPO Mujeres: 35 – 135 mg/dL
G3P + O2   DAP + H2O2
POD Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
H2O2 + 4-AF + p-Clorofenol   Quinona + H2O
establezca sus propios valores de referencia.
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de
triglicéridos presentes en la muestra ensayada1,2,3. CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
Rango de medida: Desde el límite de detección 0,000 mg/dL hasta el límite de
SIGNIFICADO CLÍNICO linealidad 1600 mg/dL.
Los triglicéridos son grasas que suministran energía a la célula. Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/2 con
Al igual que el colesterol, son transportados a las células del organismo ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
por las lipoproteínas en la sangre. Precisión:
Una dieta alta en grasas saturadas o carbohidratos puede elevar los
niveles de triglicéridos. Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
Su aumento es relativamente inespecífico. Diversas dolencias, como Media (mg/dL) 109 224 111 224
ciertas disfunciones hepáticas (cirrosis, hepatitis, obstrucción biliar) o SD 0,64 1,01 3,74 7,91
diabetes mellitus, pueden estar asociadas con su elevación3,6,7,. CV (%) 0,58 0,45 3,38 3,52
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos Sensibilidad analítica: 1 mg/dL = 0,0013 (A).
clínicos y de laboratorio. Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas
significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
REACTIVOS
Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
GOOD pH 6.3 50 mmol/L Coeficiente de correlación (r): 0,99810.
p-Clorofenol 2 mmol/L Ecuación de la recta de regresión: y= 0,9178x – 0,5426
Lipoproteína lipasa (LPL) 150000U/L Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
Glicerol quinasa (GK) 500 U/L
R (Nota 2)
Glicerol-3-oxidasa (GPO) 3500 U/L INTERFERENCIAS
Peroxidasa (POD) 440 U/L No se han observado interferencias con bilirrubina < 170 mol/L, hemoglobin <
4 - Aminofenazona (4-AF) 0,1 mmol/L 10 g/L2.
ATP 0,1 mmol/L Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
TRIGLYCERIDES CAL Patrón primario acuoso 200mg/dL determinación de los trigliceridos4,5.
PREPARACIÓN NOTAS
El reactivo y el patrón están listos para su uso. 1. TRIGLYCERIDES CAL: Debido a la naturaleza del producto, es
aconsejable tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD facilidad.
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad 2. LCF(Lipid Clearing Factor) está integrado en el reactivo.
indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien 3. La calibración con el Patrón acuoso puede dar lugar a errores sistemáticos
cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. en métodos automáticos. En este caso, se recomienda utilizar calibradores
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. séricos.
Deterioro de los reactivos 4. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensación.
- Presencia de partículas y turbidez. 5. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de
- Absorbancia (A) del blanco a 505 nm  0,26. este reactivo en distintos analizadores.
BIBLIOGRAFÍA
MATERIAL ADICIONAL
1. Buccolo G et al. Quantitative determination of serum triglycerides by use of
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 505 nm.
enzimes. Clin Chem 1973; 19 (5): 476-482.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
2. Fossati P et al. Clin. Chem 1982; 28(10): 2077-2080.
- Equipamiento habitual de laboratorio.
3. Kaplan A et al. Tryglycerides. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Toronto. Princeton 1984; 437 and Lipids 1194-1206.
MUESTRAS
4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
Suero y plasma1.
1995.
Estabilidad de la muestra: 5 días a 2-8ºC.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
PROCEDIMIENTO 6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
1. Condiciones del ensayo: 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . 505 (490-550) nm
PRESENTACIÓN
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm paso de luz
Ref: 41030 R:1 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37ºC / 15-25ºC
Ref. 41031 R:2 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
Ref. 41032 Cont. R:1 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL
3. Pipetear en una cubeta:
Ref. 41033 . R:1 x 500 mL, CAL: 1 x 5 mL
Ref. 41034 R:1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL
Blanco Patrón Muestra
R (mL) 1,0 1,0 1,0
Patrón (Nota1,3,4) (L) -- 10 --
Muestra (L) -- -- 10
4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC o 10 min. a 15-25ºC.

BSIS49-E 01/10/14 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com