See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.

net/publication/324889057

Pemanfaatan Tepung Cacing Tanah (Lumbricus rubellus) sebagai Agensia

Anti-Pullorum dalam Imbuhan Pakan Ayam Broiler

Article · March 2009

CITATIONS READS

10 1,447

4 authors:

Ema Damayanti Ahmad Sofyan

Indonesian Institute of Sciences National Research and Innovation Agency (BRIN)
70 PUBLICATIONS   226 CITATIONS    65 PUBLICATIONS   291 CITATIONS   

SEE PROFILE SEE PROFILE

Hardi Julendra Tri Untari

Indonesian Institute of Sciences Universitas Gadjah Mada
38 PUBLICATIONS   189 CITATIONS    22 PUBLICATIONS   56 CITATIONS   

SEE PROFILE SEE PROFILE

Some of the authors of this publication are also working on these related projects:

IN-VITRO, IN-VIVO STUDIES THE ADHERENCE ABILITY OF INTESTINAL MUCOSA OF LACTIC ACID BACTERIA AND YEAST CONCORTIA OF BROILER CHICKEN View project

Characterization of Lactobacillus plantarum AKK30 View project

All content following this page was uploaded by Ema Damayanti on 02 May 2018.

The user has requested enhancement of the downloaded file.

 DAMAYANTI et al. Pemanfaatan tepung cacing tanah Lumbricus rubellus sebagai agensia anti-pullorum dalam imbuhan pakan

Pemanfaatan Tepung Cacing Tanah (Lumbricus rubellus) sebagai Agensia

Anti-Pullorum dalam Imbuhan Pakan Ayam Broiler
EMA DAMAYANTI1, AHMAD SOFYAN1, HARDI JULENDRA1 dan TRI UNTARI2

1
Balai Pengembangan Proses dan Teknologi Kimia (BPPTK) - LIPI
Jl. Jogja - Wonosari Km. 31, Gading, Playen, Gunungkidul, Yogyakarta, 55861
E-mail: ema.damayanti@lipi.go.id
2
Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta

(Diterima dewan redaksi 14 Maret 2009)

ABSTRACT

DAMAYANTI, E., A. SOFYAN, H. JULENDRA and T. UNTARI. 2009. The use of earthworm meal (Lumbricus rubellus) as anti-
pullorum agent in feed additive of broiler chicken. JITV 14(2): 83-89.
The aim of this research was to study the use of earthworm meal (TCT) L. rubellus as anti pullorum agent in poultry feed
additive (IP). The antibacterial activity of TCT against Salmonella pullorum was examined using diffusion agar method at each
of the following concentrations: 0, 25, 50, 75 and 100% (w/v) in 100 µL DMSO. In vivo test was conducted using 80 broiler
chicken and were infected by S. pullorum with treatments of: IP0: IP contained 0% TCT, IP1: IP contained 25% TCT, IP2: IP
contained 50% TCT, IP3: IP contained 75% TCT and IP4: IP contained 100% TCT. Each treatment was replicated 4 times with
4 chicks each. Feed additive was periodically fed to broiler during 7 days before and 10 days after infection. Anti-pullorum
activities were evaluated using serology test, isolation and biochemical identification of S. pullorum. The results showed that
75% TCT was optimum to inhibit S. pullorum in vitro. The isolation and identification of S. pullorum results showed that 0 out
of 8 (0%) broilers treated with IP4 was not infected by S. pullorum whereas 1 out of 2 (50%) broilers treated with IP0 were
infected by S. pullorum. The reduction of S. pullorum prevalence as followed by increasing TCT in feed additive. In conclusion,
TCT as poultry feed additive could inhibit S. pullorum infection.
Key words: Earthworm Meal, Feed Additive, S. Pullorum

ABSTRAK

DAMAYANTI, E., A. SOFYAN, H. JULENDRA dan T. UNTARI. 2009. Pemanfaatan tepung cacing tanah Lumbricus rubellus sebagai
agensia anti-pullorum dalam imbuhan pakan ayam broiler. JITV 14(2): 83-89.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pemanfaatan tepung cacing tanah (TCT) L. rubellus sebagai agensia anti-pullorum
dalam imbuhan pakan (IP) unggas. Aktifitas antibakteri TCT secara in vitro terhadap Salmonella pullorum diuji dengan
menggunakan metode difusi agar pada taraf: 0, 25, 50, 75 dan 100% (b/v) dalam 100µL DMSO, sedangkan uji in vivo TCT
dalam imbuhan pakan dilakukan pada 80 ekor ayam broiler yang diinfeksi bakteri S. pullorum dalam suatu rancangan yang
terdiri atas 5 perlakuan dan 4 ulangan, masing-masing ulangan berisi 4 ekor. Perlakuan yang dicobakan yaitu IP0: IP
mengandung 0% TCT, IP1: IP mengandung 25% TCT dan IP2: IP mengandung 50%TCT, IP3: IP mengandung 75% TCT, IP4:
IP mengandung 100% TCT. Pemberian imbuhan pakan secara periodik (setiap 3 hari) dilakukan selama 7 hari sebelum infeksi
hingga 10 hari setelah infeksi dengan S. pullorum. Kemampuan TCT sebagai anti-pullorum diuji secara serologis yang
dilanjutkan dengan isolasi dan identifikasi S. pullorum secara biokimia. Hasil penelitian menunjukkan, bahwa secara in vitro
taraf 75% TCT optimum menghambat S. pullorum. Hasil isolasi dan identifikasi, menunjukkan bahwa pada ayam yang diberi
perlakuan IP4 tidak ditemukan (0%) ayam yang terinfeksi S. pullorum sedangkan pada perlakuan IP0 ada 50% ayam yang
terinfeksi S. pullorum. Prevalensi S. pullorum juga menunjukkan pola penurunan sebanding dengan peningkatan penggunaan
TCT dalam imbuhan pakan. Disimpulkan bahwa penggunaan TCT dalam imbuhan pakan unggas dapat mencegah terjadinya
infeksi bakteri S. pullorum.
Kata kunci: Tepung Cacing Tanah, Imbuhan Pakan, S. pullorum

PENDAHULUAN kurang dengan tingkat mortalitas antara 20–80%

Penyakit pullorum merupakan penyakit unggas yang
disebabkan oleh infeksi bakteri Salmonella pullorum.
Penyakit pullorum dapat menyebabkan kematian jika
menyerang unggas muda pada umur 3 minggu atau
(PORTER, 1998; PURNOMO, 2004). S. pullorum adalah
bakteri Gram negatif yang dapat menekan sistem
kekebalan tubuh unggas (immuno-suppression) dan
dapat menyebabkan kematian ayam pedaging sampai
80-100% (SHIVAPRASAD, 2003; MCMULLIN, 2004).

83
 JITV Vol. 14 No. 2 Th. 2009: 83-89
Gejala klinis infeksi S. pullorum pada unggas ditandai
dengan adanya ekskreta yang bewarna putih (berak
kapur), dehidrasi dan unggas terlihat lemas. Penyakit
ini juga sangat merugikan peternak ayam petelur karena
dapat menyebabkan penurunan produksi telur dan
kematian. Telur yang dihasilkan dapat terkontaminasi
dan menjadi media transmisi bagi bakteri patogen ini
(PORTER, 1998; SHIVAPRASAD, 2000).
Pemberian antibiotik untuk mengatasi infeksi
bakteri patogen mulai dihindari karena efek negatif
yang ditimbulkan. Penggunaan antibiotik pada pakan
terbukti dapat menyebabkan resistensi bakteri patogen
(KHACHATRYAN et al., 2006) dan berpeluang terjadinya
transmisi materi bakteri patogen dari unggas ke
manusia (VAN DEN BOGAARD et al., 2001). Pada abad
21 ini, isu keamanan daging dan unggas menjadi
perhatian masyarakat, khususnya yang terkait dengan
cara penanganan mikroba patogen yang memungkinkan
terjadinya meningkatnya virulensi dan menurunnya
dosis infeksi akibat penggunaan antibiotik (SOFOS,
2008).
Penggunaan imbuhan pakan dari bahan alami
merupakan cara alternatif untuk mencegah penyakit dan
meningkatkan performa ternak. Tepung cacing tanah
(Lumbricus rubellus) merupakan salah satu bahan alami
yang berpotensi untuk dijadikan imbuhan pakan.
Beberapa jenis cacing tanah telah dilaporkan
mempunyai senyawa bioaktif dan terbukti dapat
menghambat bakteri patogen. Zat-zat aktif itu antara
lain berupa gliko-lipoprotein G-90 dan fetidin dari
cacing Eisenia foetida (Annelida, Lumbricidae) (LIU et
al., 2004; POPOVIC et al., 2005), lysozyme dari E. fetida
andrei (SALZET et al., 2006), hestidin dari cacing Nereis
diversicolor (TASIEMSKI et al., 2006) dan cacing tanah
Dendrobaena veneta (KALAC et al., 2002).
Selain memiliki daya hambat terhadap bakteri
patogen, tepung cacing tanah L. rubellus juga banyak
mengandung protein, yaitu 65,63% dari bahan kering
(BK) (DAMAYANTI et al., 2008) dan mengandung asam
amino prolin sekitar 15% dari 62 asam amino (CHO et
al., 1998). Penggunaan tepung cacing tanah sebagai
imbuhan pakan diharapkan dapat menghambat penyakit
akibat infeksi bakteri patogen khususnya S. pullorum
yang merupakan penyebab penyakit pullorum pada
unggas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
kemampuan tepung cacing tanah L. rubellus sebagai
imbuhan pakan dalam menghambat pertumbuhan
bakteri S. pullorum pada ayam broiler.
MATERI DAN METODE
Penelitian tentang pemanfaatan tepung cacing tanah
(TCT) (L. rubellus) sebagai agensia anti-pullorum
dalam imbuhan pakan dilakukan uji in vivo pada ayam
broiler di Fakultas Kedokteran Hewan (FKH)
84
Universitas Gadjah Mada (UGM) Yogyakarta pada
bulan Desember 2007 - Januari 2008. Uji pendahuluan
secara in vitro untuk mengetahui daya hambat TCT
terhadap bakteri patogen S. pullorum dilakukan di
Laboratorium Mikrobiologi, Balai Pengembangan
Proses dan Teknologi Kimia (BPPTK) – LIPI
Yogyakarta pada bulan Oktober – Nopember 2007.
Pembuatan tepung cacing tanah (TCT)
Cacing tanah (Lumbricus rubellus) yang digunakan
dalam penelitian ini berumur ± 3 bulan, diperoleh dari
peternak cacing di Yogyakarta. Tepung cacing tanah
dibuat dengan metode yang dimodifikasi dari EDWARDS
(1985) dan MIHARA et al. (1991). Cacing tanah
dibersihkan dari media tumbuhnya dan kotoran lain
yang menempel, kemudian dicuci dengan air mengalir.
Cacing yang telah bersih disimpan dalam lemari
pendingin pada suhu + 40C selama + 12 jam.
Selanjutnya cacing tanah dicampur dengan larutan asam
format (80%) sebanyak 3 ml per 100 g bobot cacing dan
dihaluskan hingga menjadi pasta. Pasta kemudian
dikeringkan dalam oven pada suhu 50 - 700C selama 4-
6 jam. Setelah kering digiling dengan ukuran partikel ±
40 mesh kemudian diambil sampelnya.
Uji aktivitas antibakteri
Isolat bakteri S. pullorum diperoleh dari
Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran
Hewan UGM, Yogyakarta. Aktivitas antibakteri TCT
dilakukan terhadap S. pullorum dengan metode difusi
agar (agar well) dengan parameter diameter zona
hambat (SCHLEGEL dan SCHMIDT, 1994). Taraf TCT
yang diuji cobakan adalah 0, 25, 50, 75, dan 100% (b/v)
yang dipersiapkan secara berturut-turut dengan 0, 25,
50, 75 dan 100 mg TCT dalam 100 µL
dimethylsulfoxide (DMSO). Setiap perlakuan dilakukan
ulangan sebanyak 2 kali. Inokulum S. pullorum dalam
media Nutrient Broth (NB) berumur 1 x 24 jam
(jumlah sel 107 - 108 cfu/ml) sebanyak 200 µL
diinokulasikan ke dalam cawan yang berisi 30 ml media
Nutrient Agar (NA) yang masih cair. Setelah NA
memadat, dibuat sumuran menggunakan bor gabus
steril berdiameter 9 mm, kemudian dimasukkan TCT
sampel ke dalam sumuran. Selanjutnya diinkubasi pada
suhu 370C selama 2 x 24 jam. Aktivitas antibakteri TCT
terhadap S. pullorum diketahui dari zona jernih yang
terbentuk di sekitar sumuran yang diukur pada jam ke
24 dan 48 setelah inkubasi menggunakan jangka
sorong. Nilai diameter zona hambat TCT (mm)
diperoleh dari nilai diameter zona jernih yang terbentuk
(mm) dikurangi diameter sumuran (mm).
 DAMAYANTI et al. Pemanfaatan tepung cacing tanah Lumbricus rubellus sebagai agensia anti-pullorum dalam imbuhan pakan

Uji coba pakan ke ayam Isolasi dan identifikasi S. pullorum

Penelitian menggunakan 80 ekor ayam Broiler strain
Isolasi dan identifikasi S. pullorum secara biokimia
Cobb umur 14 hari, dibagi dalam 5 kelompok
mengacu pada metode dalam SEELEY et al. (2001).
percobaan yaitu:
Isolasi dilakukan dengan cara swab dari bagian kloaka
IP0 = Imbuhan pakan mengandung 0% TCT (kontrol)
ayam menggunakan cutton bud steril, kemudian sampel
IP1 = Imbuhan pakan mengandung 25% TCT
langsung diinokulasikan ke dalam media cair kaldu
IP2 = Imbuhan pakan mengandung 50% TCT
selenit (selenite cycteine broth) dan dilanjutkan dengan
IP3 = Imbuhan pakan mengandung 75% TCT
plating pada media selektif brilliant green agar (BGA).
IP4 = Imbuhan pakan mengandung 100% TCT
Inkubasi dilakukan selama 2 x 24 jam pada suhu 370C.
Masing-masing kelompok percobaan dibagi menjadi
Koloni yang diduga Salmonella adalah berwarna merah,
4 ulangan yang masing-masing berisi 4 ekor. Ayam
kemudian dimurnikan lagi dalam media salmonella
dipelihara dari umur 1 hari (DOC) sampai umur 35 hari
shigela (SS) Agar. Biakan yang sudah murni
dan diberi perlakuan mulai umur 14 hari. Infeksi S.
selanjutnya diuji secara biokimia yang terdiri dari uji
pullorum terhadap ayam broiler dilakukan dengan
triple sugar iron (TSI) (tegak dan miring), pepton,
metode peroral dosis infeksi 108 cfu/ml/ekor.
voges-proskauer (VP), methyl red (MR), citrate, urease,
Imbuhan pakan yang digunakan dalam penelitian ini
glukosa, sukrosa, laktosa. Sampel yang positif
dibuat dengan formula yang terdiri atas tepung cacing
ditemukan S. pullorum dihitung dan dibandingkan
tanah (TCT) dan bahan pengisi (filler). Formula
dengan jumlah sampel.
imbuhan pakan dibuat dengan kandungan TCT yang
berbeda yaitu 0, 25, 50, 75 dan 100% (b/v). Komposisi
nutrien imbuhan pakan pada berbagai perlakuan Analisis Data
ditampilkan pada Tabel 1. Pakan dan air minum
diberikan ad libitum, sedangkan pemberian imbuhan Data diameter zona hambat TCT terhadap S.
pakan dilakukan sebelum dan sesudah infeksi S. pullorum dari uji aktivitas antibakteri secara in vitro dan
pullorum sebanyak 2,5 - 5 g per ekor yang disesuaikan data hasil uji serologis dianalisis secara deskriptif,
dengan bobot hidup ayam. Pemberian imbuhan pakan sedangkan data yang diperoleh dari isolasi dan
dilakukan secara periodik 7 hari sebelum infeksi hingga identifikasi S. pullorum dianalisis regresi linier
10 hari setelah infeksi dengan interval waktu pemberian sederhana untuk menghitung prevalensi S. pullorum
3 hari. pada tiap perlakuan.

Uji serologis HASIL DAN PEMBAHASAN

Uji serologis anti-pullorum menggunakan metode Aktivitas Antibakteri

uji penggumpalan secara cepat (rapid whole blood plate
agglutination test) dengan parameter terjadinya
penggumpalan atau tidak (GAST, 1997). Uji serologis
dilakukan dalam 3 tahapan, yaitu 1) 1 minggu sebelum
infeksi S. pullorum, 2) 1 minggu setelah infeksi dan 3) 2
minggu setelah infeksi.
Hasil uji in-vitro menunjukkan bahwa tepung cacing
tanah (TCT) dari L. rubellus menghambat pertumbuhan
bakteri S. pullorum berdasarkan zona hambat yang
terbentuk selama 2 x 24 jam pengamatan (Tabel 2).

Tabel 1. Komposisi nutrien (%) imbuhan pakan pada berbagai perlakuan

Parameter IP0 IP1 IP2 IP3 IP4

………………..……….……… % BK ………………..……….………
Bahan kering 92,63 89,61 89,94 88,54 88,57
Kadar abu 12,18 13,44 8,39 6,46 5,81
Protein 20,66 26,05 38,39 48,39 63,06
Lemak 4,98 11,15 11,38 15,01 18,49
Serat kasar 12,21 3,28 7,09 3,52 0,19

IP0: imbuhan pakan mengandung 0% TCT

IP1: imbuhan pakan mengandung 25% TCT
IP2: imbuhan pakan mengandung 50% TCT
IP3: imbuhan pakan mengandung 75% TCT
IP4: imbuhan pakan mengandung 100% TCT

85
 JITV Vol. 14 No. 2 Th. 2009: 83-89
Tabel 2. Rataan diameter zona hambat tepung cacing tanah terhadap S. pullorum (mm)
Waktu pengamatan
24 jam
48 jam
Rata-rata
Tepung cacing tanah (TCT) pada taraf 25% telah
memberikan efek penghambatan terhadap S. pullorum
dan cenderung meningkat sebanding peningkatan
konsentrasi hingga taraf TCT 75%. Diameter zona
hambat tertinggi didapatkan pada taraf TCT 75%,
diikuti taraf TCT 50, 25, 100 dan 0% yaitu 12,90; 5,55;
5,14; 1,10 dan 0,32 mm.
Dari tingkat kandungan 0 – 75% TCT, makin tinggi
persentase TCT, makin tinggi daya hambatnya, setelah
itu menurun pada tingkat 100%. Daya hambat optimum
terhadap pertumbuhan S. pullorum adalah taraf 75%.
Berdasarkan analisis regresi dapat diketahui, TCT pada
taraf 75% optimum menghambat pertumbuhan (Gambar
1). JULENDRA dan SOFYAN (2007) juga melaporkan
bahwa TCT L. rubellus pada taraf 75% optimum
menghambat S. pullorum dan pada taraf 50% optimum
menghambat Escherichia coli. CHO et al. (1998)
melaporkan bahwa dalam 1 gram cacing tanah L.
rubellus terdapat 1 µg senyawa bioaktif Lumbricin I.
Dengan demikian, pada taraf TCT yang lebih tinggi
akan mengandung lebih banyak senyawa bioaktif
Lumbricin I. HANDAYANI (2007) juga melaporkan
bahwa ekstrak cacing tanah yang diperoleh dengan cara
merebus dalam air pada taraf 0, 20, 40, 60, 80 dan
100% mempunyai daya hambat terhadap S. thypi yang
besarnya sebanding dengan peningkatan konsentrasi
ekstrak cacing.
Pada penelitian ini, TCT pada taraf 100% cenderung
mengalami penurunan daya hambat. Hal ini disebabkan
pada taraf 100%, TCT yang terlarut dalam DMSO
(pelarut polar) cenderung lebih pekat dan diduga sulit
masuk ke dalam sel sehingga daya hambatnya menurun.
PELCZAR dan CHAN (1986) menyebutkan bahwa
masuknya zat-zat ke dalam sel melalui membran sel
dibantu oleh adanya pelarut.
Aktivitas antibakteri yang dimiliki TCT L. rubellus
berasal dari Lumbricin I yang merupakan senyawa
antibakteri yang berhasil diisolasi dan dikarakterisasi
dari cacing tanah L. rubellus (CHO et al., 1998; SALZET
et al., 2006). CHO et al. (1998) menyatakan bahwa hasil
uji in vitro menunjukkan Lumbricin I mempunyai
aktivitas antimikroba berspektrum luas, yaitu
menghambat bakteri Gram positif, bakteri Gram negatif
dan fungi. Mekanisme penghambatan Lumbricin I
86
Taraf TCT (Perlakuan)
IP0 IP1 IP2 IP3 IP4
0,00 1,40 5,50 13,00 6,65
0,65 0,80 5,60 12,80 3,63
0,32 1,10 5,55 12,90 5,14
terhadap mikroba sampai saat ini belum diketahui
secara pasti. Beberapa jenis peptida antimikroba yang
sejenis dengan Lumbricin antara lain apidaecins,
bactenecins dan antimikroba ‘PR-39’. Mekanisme
penghambatan bactenecins terhadap bakteri dengan
cara meningkatkan permeabilitas membran sehingga
kehilangan metabolit sel dan PR-39 diketahui mampu
menghambat sintesis protein dan DNA dalam sel.
Uji serologis
Hasil dari 3 kali uji serologis dari serum darah ayam
broiler yang diinfeksi S. pullorum negatif (Tabel 3),
yang mengindikasikan bahwa ayam broiler yang
digunakan pada penelitian ini bebas dari S. pullorum
sebelum diinfeksi.
Pemberian pakan yang mengandung TCT dilakukan
7 hari sebelum infeksi hingga 10 hari setelah infeksi.
Hasil uji serologis yang negatif pada semua ayam
perlakuan yang diinfeksi dengan S. pullorum baik yang
diberi imbuhan pakan mengandung TCT maupun yang
tidak mengandung TCT, belum tentu menunjukkan
bahwa TCT tidak berpengaruh terhadap infeksi S.
pullorum. Hal ini dapat disebabkan oleh waktu
pengambilan sampel yang belum cukup untuk
terbentuknya antibodi pada ayam pasca infeksi. Hasil
penelitian GAST (1997) menunjukkan bahwa uji
serologis terhadap ayam yang diinfeksi S. pullorum
menghasilkan persentase sampel ayam positif yang
mempunyai antibodi lebih tinggi terjadi pada
pengambilan sampel minggu ke 5–6 pasca infeksi
dibandingkan pengambilan sampel pada minggu ke 1–
2 pasca infeksi. Hal ini menunjukkan bahwa penentuan
waktu pengambilan sampel pasca infeksi menjadi faktor
yang penting. GAST (1997) juga melaporkan bahwa
frekuensi terdeteksinya serum antibodi S. pullorum
akan lebih tinggi jika menggunakan tube tests daripada
plate tests dan ada korelasi antara hasil uji antibodi
serologi dengan isolasi S. pullorum dari organ internal.
Dengan demikian untuk mengetahui pengaruh
pemberian TCT terhadap infeksi S. pullorum secara in
vivo dilakukan uji lanjutan dengan cara melakukan
isolasi dan identifikasi S. pullorum dari sampel ayam
percobaan.
 DAMAYANTI et al. Pemanfaatan tepung cacing tanah Lumbricus rubellus sebagai agensia anti-pullorum dalam imbuhan pakan

Y=-3E-0,5X3 + 0,045X2-0,0895X+0,5261
Diameter zona hambat (mm) 5

4 R2= 0,9827

0 25 50 75 100

Taraf TCT (%)

Gambar 1. Pola hubungan taraf penggunan TCT terhadap penghambatan S. pullorum secara in vitro

Tabel 3. Hasil uji serologis ayam broiler yang diinfeksi S. pullorum

Hasil uji serologis (ekor)

Perlakuan Jumlah ayam (ekor) Jumlah sampel (ekor)
1 minggu 1 minggu 2 minggu
sebelum infeksi setelah infeksi setelah infeksi
IP0 10 3 - - -
IP1 16 8 - - -
IP2 16 8 - - -
IP3 16 8 - - -
IP4 16 8 - - -

Isolasi dan identifikasi S. pullorum Tabel 4. Hasil uji biokimia isolat S. pullorum yang diisolasi
dari ayam broiler
Isolasi dan identifikasi S. pullorum dilakukan dari
Uji Reaksi
sampel kloaka ayam menggunakan metode swab. Isolat
murni yang diduga Salmonella dari media selektif Triple sugar iron (TSI) tegak kuning, terbentuk gas (+)
selanjutnya dikonfirmasi dengan uji biokimia (Tabel 4). Triple sugar iron (TSI) miring Merah (+)
Hasil uji biokimia dengan media TSI tegak didapatkan Pepton -
reaksi berwarna kuning sedangkan pada media TSI
Voges-proskauer (VP) -
miring berwarna merah. Hal ini menunjukkan isolat
yang didapat tersebut hanya memfermentasi glukosa Methyl red (MR) +
dalam media TSI. Reaksi positif dalam uji MR, sitrat Sitrat +
dan glukosa menunjukkan bahwa isolat tersebut mampu Urea -
memetabolisme sumber karbon sitrat, memfermentasi
Glukosa +
campuran asam, butanediol dan glukosa, sesuai dengan
karakteristik biokimia bakteri Gram negatif S. pullorum Sukrosa -
(SEELEY et al., 2001). Laktosa -
(+) : tejadi reaksi, (-): tidak terjadi reaksi

87
 JITV Vol. 14 No. 2 Th. 2009: 83-89

55

50
Prevalensi S. pullorum (%)

45

40

35

30

25

20

15

10

0
0 25 50 75 100
% TCT dalam Imbuhan Pakan

Gambar 2. Prevalensi S. pullorum pada ayam broiler yang diberi imbuhan pakan mengandung TCT

Pada perlakuan IP0 (imbuhan pakan mengandung
0% TCT) dari 2 sampel ayam ditemukan 1 positif S.
pullorum, pada perlakuan IP1 (imbuhan pakan
mengandung 25% TCT) dari 8 sampel ayam ditemukan
1 positif terinfeksi S. pullorum, sedangkan pada
perlakuan IP4 (imbuhan pakan mengandung 100%
TCT) dari 8 sampel ayam semua negatif S. pullorum.
Hasil analisis regresi menunjukkan, prevalensi S.
pullorum dari sampel ayam broiler pada perlakuan IP0,
IP1, IP2, IP3 dan IP4 berturut-turut adalah 50; 12,5; 6, 3
dan 0%. Peningkatan taraf TCT dalam imbuhan pakan
sebanding dengan penurunan prevalensi S. pullorum
dari sampel ayam broiler (Gambar 2.). Berdasarkan hal
tersebut, pemberian TCT memiliki respon positif
terhadap penurunan jumlah ayam yang positif terinfeksi
S. pullorum.
Mekanisme TCT L. rubellus dalam menghambat
infeksi bakteri S. pullorum diduga karena terjadinya
peningkatan kekebalan pada tubuh ayam. Indikator
peningkatan kekebalan (immunity) adalah persentase
jumlah ayam yang positif terinfeksi S. pullorum.
Kemampuan TCT dalam meningkatkan imunitas
terhadap pullorum juga sesuai dengan laporan LIU et al.
(2004) bahwa cacing tanah L. rubellus dapat
menstimulasi sistem kekebalan. SALZET et al. (2006)
menyatakan bahwa secara alamiah cacing tanah L.
rubellus yang termasuk golongan Annelida mempunyai
kekebalan alami yang berperan utama sebagai
pertahanan pertama terhadap mikroba yang salah
satunya berasal dari peptida atau protein yang bersifat
antimikroba. Annelida mengembangkan sistem
kekebalan seluler terhadap patogen meliputi fagositosis,
enkapsulasi dan sitotoksitas, dan kekebalan humoral
berdasarkan sifat antimikroba, hemolitik dan
pembekuan dari cairan tubuhnya.
KESIMPULAN
Tepung cacing tanah Lumbricus rubellus secara in
vitro dapat menghambat pertumbuhan Salmonella
pullorum. Taraf tepung cacing tanah yang optimum
dalam menghambat S. pullorum adalah 75% (b/v)
dalam 100 µL DMSO. Penggunaan tepung cacing tanah
sebanyak 25 – 100% (b/v) dalam imbuhan pakan dapat
menghambat infeksi S. pullorum sehingga diharapkan
akan mengurangi resiko munculnya penyakit pullorum
pada ayam broiler.
UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis mengucapkan terimakasih kepada Bapak
Drh. M. Haryadi Wibowo, M.P. (Fakultas Kedokteran

88
 DAMAYANTI et al. Pemanfaatan tepung cacing tanah Lumbricus rubellus sebagai agensia anti-pullorum dalam imbuhan pakan
Hewan UGM) yang telah membantu pelaksanaan
penelitian ini.
DAFTAR PUSTAKA
CHO, J.H., C.B. PARK, Y.G. YOON and S.C. KIM. 1998.
Lumbricin I, a novel proline-rich antimicrobial peptide
from the earthworm: purification, cDNA cloning and
molecular characterization. Biochim. Biophys. Acta.
1408: 67-76.
DAMAYANTI, E., H. JULENDRA dan A. SOFYAN. 2008. Aktivitas
antibakteri tepung cacing tanah (Lumbricus rubellus)
dengan metode pembuatan yang berbeda terhadap
Escherichia coli. Prosiding Seminar Nasional Pangan.
Yogyakarta, 17 Januari 2008. Yogyakarta. hlm. 54–60.
EDWARDS, C.A. 1985. Production of feed protein from animal
waste by earthworms. Phil. Trans. R. Soc. Lond. B 310:
299–307.
GAST, R.K. 1997. Detecting infections of chickens with recent
Salmonella pullorum isolates using standard serological
methods. Poult. Sci. 76: 17-23.
HANDAYANI, L. 2007. Pengaruh Ekstrak Cacing Tanah
(Lumbricus rubellus) terhadap Pertumbuhan Bakteri
Salmonella typhi dengan Metode Sumuran. Skripsi.
Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta.
JULENDRA, H. dan A. SOFYAN. 2007. Uji in-vitro
penghambatan aktivitas Escherichia coli dengan tepung
cacing tanah (Lumbricus rubellus). Med. Petern. 30: 41-
47.
KALAC, Y., A. KIMIRAN, G. ULAKOGLU and A. COTUK. 2002.
The role of opsonin in phagocytosis by coelomocytes of
earthworm Dendrobaena veneta. J. Cell Mol. Biol. 1: 7–
14.
KHACHATRYAN, A.R., T.E. BESSER, D.D. HANCOCK and D.R.
CALL. 2006. Use of a nonmedicated dietary supplement
correlates with increased prevalence of streptomycin-
sulfa-tetracycline-resistant Escherichia coli on a dairy
farm. Appl. Environ. Microbiol. 72: 4583-4588.
LIU, Y-Q., Z-J. SUN, C. WANG, S-J. LI and Y-Z. LIU. 2004.
Purification of a novel antibacterial short peptide in
earthworm Eisenia foetida. Acta Biochim. Biophys. Sin.
36: 297–302.
MCMULLIN, P. 2004. A Pocket Guide to Poultry Health and
Disease. 5M Enterprises Limited. Sheffield.
View publication stats
MIHARA, H., H. SUMI, T. YONETA, H. MIZUMOTO, R. IKEDA, M.
SEIKI and M. MARUYAMA. 1991. A novel fibrinolityc
enzyme extracted from the earthworm, Lumbricus
rubellus. Japan J. Physiol. 41: 461–472.
PELCZAR, M.J. dan E.C.S. CHAN. 1986. Dasar-dasar
Mikrobiologi I. Hadioetomo, R.S., T. Imas, S.S.
Tjitrosomo dan S.L. Angka (Penerjemah). Universitas
Indonesia (UI) Press, Jakarta.
POPOVIC, M., M. GRDISA and T.M. HRZENJAK. 2005.
Glycolipoprotein G-90 obtained from the earthworm
Eisenia foetida exerts antibacterial activity. Veterinarski
Arhiv. 75: 119–128.
PORTER, R.E. 1998. Bacterial enteritides of poultry. Poult. Sci.
77: 1159-1165.
PURNOMO, J.S. 2004. Variasi tipe antigen Salmonella pullorum
yang ditemukan di Indonesia dan penyebaran serotipe
Salmonella pada ternak. Wartazoa 14: 143-159.
SALZET, M., A. TASIEMSKI and E. COOPER. 2006. Innate
immunity in Lophotrochozoans: The Annelids. Curr.
Pharm. Des. 12: 1–8.
SCHLEGEL, H.G. dan K. SCHMIDT. 1994. Mikrobiologi Umum.
R.M.T. Baskoro (Penerjemah). Universitas Gadjah
Mada (UGM) Press, Yogyakarta.
SEELEY, H.W., P.J. VAN DEMARK and J.J. LEE. 2001. Microbes
in Action: A Laboratory Manual of Microbiology 4th
Edition. W.H. Freeman and Company, New York.
SHIVAPRASAD, H.L. 2003. Pullorum Disease and Fowl
Typhoid. in: Disease of Poultry. SAIF, Y.M. (Ed). 11th
Edition. Iowa State Press, Ames, Iowa.
SHIVAPRASAD, H.L. 2000. Fowl typhoid and pullorum disease.
Rev. Sci. Tech. 19: 405-424.
SOFOS, J.N. 2008. Challenges to meat safety in the 21st
century. Meat Sci. 78: 3–13.
TASIEMSKI, A., D. SCHIKORSKI, F. LE MARREC-CROQ, C.P-V.
CAMP, C. BOIDIN-WICHLACZ and P.E. SAUTIERE. 2006.
Hestidin: A novel antimicrobial peptide containing
bromotryptophan constitutively expressed in the NK
cells-like of the marine annelid, Nereis diversicolor.
Dev. Comp. Immunol. 31: 749-762.
VAN DEN BOGAARD, A.E., N. LONDON, C. DRIESSEN and E.E.
STOBBERINGH. 2001. Antibiotic resistance of faecal
Escherichia coli in poultry, poultry farmers and poultry
slaughterers. J. Antimicrob. Chemoter. 47: 767-771.
89