【解説】

単孔類，有袋類ミルクオリゴ糖の
日本農芸化学会

種特異的進化と生存戦略
浦島 匡
●
化学と生物 

単 孔 類（カ モ ノ ハ シ， ハ リ モ グ ラ） や 有 袋 類（カ ン ガ ル ー， （β1-4）Glc）であるという先入観は，多くの哺乳動物の

ポ ッ サ ム， コ ア ラ な ど） の 乳 で は， 多 く の 有 胎 盤 類（ヒ ト， 乳の糖質を分析した事例によって覆りつつある (1∼9)．確
ウシなど）とは異なり，ミルクオリゴ糖の方がラクトースよ
かに，牛乳の中の糖質は専らラクトースであると断言で
りも優先的である．有胎盤類の乳仔がラクトースを主要なエ
きるほど，ラクトース以外の糖質の量は少ない (9, 10)．一
ネルギー源としているのに対し，単孔類や有袋類の乳仔はミ
ルクオリゴ糖をピノサートーシスかエンドサイトーシスで小 方で人乳を観察してみると，7％の糖質のうちの 80％を
腸細胞内に取り込み，リソソーム内のグリコシダーゼの働き ラクトースが，そして残りの 20％を 240 種類にも数えら
で単糖に分解し，エネルギー源とする．単孔類のシアル酸含 れるミルクオリゴ糖が占めている (11)．ミルクオリゴ糖
有ミルクオリゴ糖に付加する -ア セ チ ル ノ イ ラ ミ ン 酸 は， の大半はラクトース骨格を還元末端側に有し，それに
4 位 が -ア セ チ ル 化 し た 固 有 の 形 を し て い る が ， そ の こ と で
-アセチルグルコサミン，ガラクトース，フコース，
細菌の生産するノイラミニダーゼへの加水分解抵抗性を付与
-アセチルノイラミン酸などの単糖が付加した構造を
する．それには乳首がなくて皮膚の上に乳を分泌する単孔類
において，乳が細菌の増殖源にならないメカニズムが潜んで している (1∼9)．ヒトを含む哺乳動物の乳仔が母乳を摂取
いる．単孔類や有袋類の固有のミルクオリゴ糖には，それら した際，母乳の中のラクトースは小腸上皮微絨毛膜に存
の繁殖戦略や子育て戦略との密接なかかわりがある． 在するラクターゼの働きによって，グルコースとガラク
トースに分解される (6∼8, 12)．グルコースは吸収されて循
はじめに 環に入り，ガラクトースは肝臓でグルコースに変換され
てから循環する．つまりラクトースは多くの哺乳動物の
乳 に 含 ま れ る 糖 質 は 専 ら ラ ク ト ー ス（乳 糖，Gal 乳仔にとっては重要な栄養源になっている．一方でミル
クオリゴ糖はたとえばヒトの乳児の場合，大半は小腸で
Species Specific Evolution of Milk Oligosaccharides in 分解・吸収されないで大腸に到達し，
（1）ビフィズス菌
Monotremes and Marsupials: Relationship to Their Reproductive
Strategy
などの有用な腸内細菌の栄養源となってその増殖を促進
Tadasu URASHIMA, 帯広畜産大学大学院畜産学研究科 する，
（2）病原性微生物が腸管内に付着するのを防ぐな

化学と生物 Vol. 54, No. 3, 2016 159

 どの機能的役割を果たしている (1∼9)．
クマやアザラシ，ミンクなどの一部の例外を除き多く
の有胎盤類（胎盤をもち，妊娠期間が長くて胎盤の中で
仔を育てる哺乳類）の乳では主要な糖質はラクトースで
あるが，有胎盤類とは異なる固有の進化をたどった単孔
類や有袋類では，乳の中のラクトースの量は少なく，ミ
(1∼4, 7, 8)
ルクオリゴ糖の方が圧倒的に多い
オリゴ糖の化学構造も固有の特徴を有している
それは，哺乳類の共通祖先からの乳成分の進化と種の生
存戦略によって形成されたと考えられる．この解説の中
では，乳の糖質の生理的意義と進化を特に単孔類と有袋
類にフォーカスしながら，化学構造と絡めて考察してみ
たい．
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乳腺の進化とミルク糖質の発生
現存の哺乳類はキノドン類を共通祖先として進化をと
げ，祖先の原獣類よりまず約 1 億 9000 万年前に単孔類
が，ついで約 1 億 6000 万年前に有袋類と有胎盤類が相互
に分化したと推測されている (13, 14)．現存する単孔類は
●
ハリモグラとカモノハシの 2 種であり，それは卵生で
あって乳首をもたず，乳は乳嚢と言われる 2 つの皮膚領
域の小孔から皮膚の上に分泌される．これは哺乳類祖先
化学と生物 
から受け継いだ特徴であろう．乳を分泌する乳腺細胞の
集合体である乳腺は，アポクリン腺から進化したと予想
される (12, 15)．それは細胞内で合成された脂肪球が，乳
腺とアポクリン腺では共通して細胞外へと分泌される際
に細胞の頂上細胞膜を突き破り，細胞膜に由来する脂肪
球膜に包まれるような形で分泌される（アポクリン分泌
と命名される）事実に基づいている．本来水と油は交わ
らないものの代名詞のように言われるが，乳の中では水
と油が混じり合っているのは脂肪の粒子の周りを取り囲
むこのような脂肪球膜の存在のためである．乳タンパク
質は乳腺細胞の中で合成される成分（カゼイン，α-ラク
トアルブミン，β-ラクトグロブリンなど）と血液タンパ
ク質に由来する成分（免疫グロブリン，血清アルブミン
など）があるが，乳腺の進化の中で一部の血液成分を乳
腺細胞へと取り込む機構とともに，ほかの祖先タンパク
質から乳腺特異的発現タンパク質への遺伝子の変異が
あったであろうと予想される．たとえばカゼインは歯の
エナメル芽関連タンパク質を先祖成分とすると推定され
ている (16)．そのような仮説は，歯のエナメルタンパク
質とカゼインがどちらもカルシウムの運搬機能を担って
いるという事実に基づく．
泌乳期乳腺においてラクトースの合成は，ホエータン
160
パク質の一種である α-ラクトアルブミンと β4-ガラクト
シルトランスフェラーゼ I の共同作用によって，遊離の
グルコースをアクセプター，UDP-ガラクトースをド
ナーとして行われる．β4-ガラクトシルトランスフェ
ラーゼ I は乳腺以外の組織でも発現し，乳腺以外では複
合糖質の末端の -アセチルグルコサミンに対してガラ
．またミルク ク ト ー ス を 転 移 し， -ア セ チ ル ラ ク ト サ ミ ン（Gal
(1∼4, 7, 8)
． （β1-4）
GlcNAc）単位の合成を触媒している．乳腺での
α-ラクトアルブミンの働きは，β4-ガラクトシルトラン
スフェラーゼ I の基質特異性を糖鎖末端の -アセチルグ
ルコサミンから遊離のグルコースに変換する modifier で
ある (17)．α-ラクトアルブミンは，細菌の細胞壁を破壊し
て殺菌作用を司る酵素リゾチームと一次構造や三次構造
が類似している (18)．α-ラクトアルブミンは哺乳類の乳腺
のみに発現する“新しい”タンパク質であるから，哺乳
類以外に魚類や昆虫にも発現している“古い”タンパク
質であるリゾチームからの遺伝子変異によって獲得され
たことは疑いない．α-ラクトアルブミンの出現によっ
て，乳腺の中でラクトース単位の合成が開始された．
一方，ミルクオリゴ糖は還元末端にラクトース単位を
有しており，乳腺の中で生合成されたラクトースに対し
て各種の糖転移酵素が作用することで生合成される．つ
まり α-ラクトアルブミンの出現はミルクオリゴ糖の生合
成をも開始させた．α-ラクトアルブミンの出現は，約 3
億 1000 万年前という推定もある (19)．その当時哺乳類は
おろか恐竜さえも出現しておらず，祖先に乳腺様の組織
も存在しなかったであろう．特殊な皮膚腺から何かの成
分が分泌されていたのであろうか．
α-ラクトアルブミンの偶然の出現によってラクトース
単位の生合成は開始されるようになった．一方でスフィ
ンゴ糖脂質の還元末端側にラクトース単位が含まれるよ
うに，ラクトース単位は細胞内ゴルジ体で各種の糖転移
酵素のアクセプターになりうる．α-ラクトアルブミンの
発現量が低くてラクトースの生合成速度が遅い場合は，
生合成された遊離のラクトースは主に糖転移酵素のアク
セプターとして利用されていたであろう．哺乳類の共通
祖先で乳様の分泌物が原始的な乳腺または乳腺の先祖腺
において分泌されていた段階では，その分泌物の中にラ
クトースは少なくてミルクオリゴ糖のほうがはるかに優
先的であったと予想される (2, 7, 8)．それは卵生や乳首の
ない乳腺からの乳分泌など，哺乳類祖先の特徴を今日で
も残している単孔類の乳において，ラクトースよりもミ
ルクオリゴ糖のほうが圧倒的に多い事実からも推測され
る．今日有胎盤類の乳においては主要な糖質はラクトー
スであり，ラクトースは乳仔にとって重要な栄養源であ
化学と生物 Vol. 54, No. 3, 2016
 る．それは有胎盤類において α-ラクトアルブミンの発現
量が増加し，ラクトースの合成速度が速くなってその合
成がミルクオリゴ糖生合成の律速段階ではなくなったこ
と，また乳仔の小腸上皮にラクターゼが出現して，ラク
トースをグルコースとガラクトースに小腸細胞頂端膜
（刷子縁）上で加水分解できるようになってから初めて
(2, 7, 8)
可能になった ．では初期乳様分泌物において，優
先的なミルクオリゴ糖はどのような生理機能を果たして
いたのであろうか．人乳などでは構造的に分散したミル
クオリゴ糖は一定の濃度で存在し，デコイレセプターと
して乳仔の腸管に病原性細菌が付着するのを阻止すると
いう観察結果が多く報告されている (4, 6, 9)．哺乳類共通
祖先の原始的乳腺によって皮膚上に分泌された乳様分泌
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）はオーストラリア，ニューギニアに，長く
ちばしハリモグラ（ ）はニューギニア
のみに棲息する（オーストラリアでは 2 万年前に絶滅し
た）
．前述のように単孔類の乳腺は乳首をもたず，乳は
乳嚢といわれる 2 つの皮膚領域内の約 100 の散らばった
孔から分泌される．
カモノハシとハリモグラミルクオリゴ糖の研究は，
1973 年に Messer と Kerry によって開始された (20)．図 1
はハリモグラ（カンガルー島ならびにオーストラリア・

物は，皮膚の上に細菌などが増殖する栄養源とならな
い，病原性微生物が皮膚の上に付着するのを阻止する，
皮膚の上をなめるように分泌物を摂取した仔に対して感
染防御能を果たす，などの機能を有していたのではない
か (2, 7, 8)．それは単孔類の乳に含まれるミルクオリゴ糖
の観察に基づいて推測された．
●

単孔類ミルクオリゴ糖

現存する単孔類はカモノハシとハリモグラの 2 種であ
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り，ハリモグラはさらに長くちばしハリモグラと短くち
ばしハリモグラの 2 種に分類される．カモノハシ（ 図 1 ■ ハ リ モ グ ラ と カ モ ノ ハ シ の 乳 の 糖 質 画 分 の Sephadex
）はオーストラリア大陸の東側， G-15 カラムによるゲルろ過プロファイル

クイーンズランド北部からタスマニアにかけての川や湖 各フラクションのアリコートはヘキソース，フコース，シアル酸
に対して測定された． e は溶出容量， o はボイドボリュームを示
に棲息している．短くちばしハリモグラ（ す．図は文献（20）より引用した．

図 2 ■ 従来（文献（21∼24））構造決定されて
いたハリモグラとカモノハシのミルクオリ
ゴ糖

化学と生物 Vol. 54, No. 3, 2016 161

 ニューサウスウェールズ州で捕獲されたハリモグラから 博士が取り付けた GPS 発信器の信号を頼りに探し，巣
採 乳 し た） と カ モ ノ ハ シ の 乳 か ら 抽 出 し た 糖 質 の の地中から掘り起こして捕獲した．図 3 は GPS を頼りに
Sephadex G-15 カラムによるゲルクロマトグラムであ 泌乳個体を探しているところ，図 4 は捕獲した個体への
る．いずれの乳でもラクトースはごく少量しか含まれず オキシトシン静脈注入後に皮膚上の乳嚢から採乳してい
（最後に溶出した小さなピークがラクトース）
，ミルクオ るところである．ハリモグラは，乳首をもたない乳腺か
リゴ糖のほうが圧倒的に多い．ハリモグラではフコシル ら泌乳することが理解されるであろう．この際のフィー
ラクトースとシアリルラクトースが，カモノハシ乳では ルド調査によって回収されたものも含め，乳試料は，仔
ジフコシルラクトースが主要な糖質であった．ハリモグ の孵化後 39 日の初期乳，約 90 日の中期乳，約 150 日の
ラのミルクオリゴ糖は引き続いて，Messer(21)，Kamerling 後期乳が採集された．
(22) (23)
ら ，Jenkinsら に よ っ てFuc
（α1-2）
Gal
（β1-4）
Glc, Fuc 初期乳，中期乳，ならびに後期乳から抽出された糖質
（ α1-2）Gal（ β1-4）
［Fuc
（α1-3）］
Glc, Neu4,5Ac2（ α2-3）Gal 画分は，超高速液体クロマトグラフィーと連結した三重
（β1-4）
Glc
（4- -アセチル-3′-シアリルラクトース）が同定 極質量分析（UPLC-MS）によって分析した．一方，後
された．一方，カモノハシの中性オリゴ糖は，Jenkins 期乳から抽出した糖質画分は，BioGel P-2 によるゲルろ
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(23) (24)
ら ，ならびに Amano ら によって図 2 のように決定 過，グラファイトカーボンカラムを用いた中性オリゴ糖
された． の高速液体クロマトグラフィー（HPLC）による分離・
筆者は 2012 年 9 月にタスマニア島の州都ホバートの北 精製，ならびにプロトン核磁気共鳴スペクトル（1H-
方 50 km の フ ィ ー ル ド に お い て， タ ス マ ニ ア 大 学 の NMR）測定によって構造決定した (25)．初期乳，中期乳
Stewart Nicol 博士とともにハリモグラ・タスマニア亜 には圧倒的に優先的なオリゴ糖として 4-O-アセチル-3 ′-
種の捕獲と乳試料採集を行った．泌乳中の個体は Nicol シアリルラクトースが，後期乳ではそれとともに Gal
（ α1-3）
［Fuc
（α1-2）］Gal（ β1-4）
［Fuc
（α1-3）
］Glc（ Bペンタ
●

サッカ ラ イ ド）と Gal（α1-3）

［Fuc（α1-2）］Gal（β1-4）Glc
（B
テトラサッカイライド）が含まれていた．同時にマイ
ナー成分として Fuc（α1-2）Gal（β1-4）Glc（2 ′ フコシルラク
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トース）
，Fuc（α1-2）Gal（β1-4）
［Fuc（α1-3）］Glc（ジフコシ
ルラクトース），Gal（ β1-4）
［Fuc（α1-3）
］GlcNAc（ β1-3）
Gal（β1-4）Glc（ラクト-N-フコペンタオース III, LNFP-III）
が後期乳に，Neu4,5Ac2（α2-3）Gal（β1-4）
［Fuc（α1-3）］Glc
が初期乳，中期乳，後期乳に発見された．初期乳，中期
乳 に は Neu5Ac（α2-3）Gal（β（1-4）Glc（3 ′-シ ア リ ル ラ ク
トース）
，ジ-O-アセチル-3′-シアリルラクトースと 4-O-ア
図 3 ■ 2012 年 9 月タスマニアでのハリモグラフィールド調査 セチル-3′-シアリルラクトース硫酸が発見された．
GPS 発信器を取り付けたハリモグラを探しているところ．写真は ここで注目されるのは初期乳で圧倒的に優先的な 4-O-
タスマニア大学の Stewart Nicol 博士． アセチル-3 ′-シアリルラクトースである．単孔類の特に
初期乳は，哺乳類祖先の原始的な乳の特徴を残している
と予想されるので，哺乳類祖先の乳の糖質はラクトース
ではなくこのようなオリゴ糖を優先的に含んでいたと推
測される．N-アセチルノイラミン酸への 4-O-アセチル基
の付加の意義については，後に考察する．以前の Mess-
er らの研究において，カンガルー島ならびにオースト
ラリア大陸のハリモグラの乳で 2′フコシルラクトースが
優先的な糖質であり，B ペンタサッカイライドや B テト
ラサッカライドは発見されなかった (20∼23)．この違いは，
ハリモグラの亜種どうしでのミルクオリゴ糖の不均一性
を示している．ミルクオリゴ糖の非還元末端単位として
図 4 ■ タスマニアハリモグラから採乳しているところ B 抗原
（Gal
（α1-3）
［Fuc
（α1-2）
］Gal）
，A 抗原
（GalNAc
（α1-3）

162 化学と生物 Vol. 54, No. 3, 2016

 ［Fuc
（α1-2）
］Gal）ま た H 抗 原（Fuc
（α1-2）Gal） の 存 在 と ラクトースであるが，微量ながらラクト-N-ネオテトラ
不在による不均一性は，近縁種のクマのミルクオリゴ糖 オ ー ス（Gal（β1-4）GlcNAc（β1-3）Gal（β1-4）Glc） を コ ア
においても発見されている．ツキノワグマでは B 抗原を 骨格とする LNFP-III が発見されたことも注目される．
(26)
含むミルクオリゴ糖が ，ホッキョクグマでは A 抗原 カ モ ノ ハ シ ミ ル ク オ リ ゴ 糖 に 対 し て は，1984 年 に
(27)
また B 抗原を含むミルクオリゴ糖が ，エゾヒグマで 中性ミルクオリゴ糖の化学構造が Amano らによって
は H 抗原を含むオリゴ糖が (28) 発見されている．タスマ 報告 (24) されて以降研究報告はなかったが，最近筆者ら
ニアハリモグラの泌乳期乳腺では H 抗原を B 抗原に変換 が酸性オリゴ糖の化学構造を解析した (29)．カモノハシ
する α3 ガラクトシルトランスフェラーゼ活性が存在す 乳から抽出した糖質画分を BioGel P-2 カラムによるゲル
るのに対し，オーストラリア大陸やカンガルー島のハリ ろ過に供して，早く溶出したシアル酸を含む画分を，
モグラの乳腺ではこの酵素の活性が失われた可能性があ Amide-80 カラムを使用した順相系の HPLC に供して各
る．また大半のハリモグラミルクオリゴ糖のコア骨格は オリゴ糖の分離・精製を行った．分離された各ピークに
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図 5 ■ 構造決定されたカモノハシ酸性ミルクオリゴ
糖（文献（29） ）

化学と生物 Vol. 54, No. 3, 2016 163

 含まれるオリゴ糖は，1H-NMR とマトリックス支援レー ガラクトースだけであり，栄養効率は高くないであろ
ザー脱離イオン化質量分析（MALDI TOFMS）に供し う．ミルクオリゴ糖は母体の乳腺付近でも，授乳した乳
て構造決定した．決定された酸性オリゴ糖の構造は図 5 仔の腸管内でも感染防御因子として機能することが予想
に示した．オリゴ糖はラクトース，ラクト-N-ネオテト さ れ る． の 実 験 で 3 ′-シ ア リ ル ラ ク ト ー ス は，
ラオース，またラクト-N-ネオヘキサオース（Gal
（β1-4） や P1422 株の HT-29 細胞へ
GlcNAc（β1-3）
［Gal
（β1-4）GlcNAc
（β1-6）］Gal（β1-4）Glc） の侵入やロタウィルスの MA-104 細胞への感染を阻害す
を コ ア 骨 格 と し， ル イ ス x
（Gal
（β1-4）
［Fuc
（α1-3）
］ ることが観察されているので (33∼35)，単孔類の母体皮膚
GlcNAc）
， ル イ スy
（Fuc
（α1-2）
Gal
（β1-4）
［Fuc
（α1-3）］ や乳仔腸管でも病原性細菌やウィルスへの感染防御を果
GlcNAc），シアリルルイス （Neu4,5Ac2
（α2-3）
Gal
（β1-4） たしていることが想像できる．
［Fuc
（α1-3）
］GlcNAc）などの構造単位を有していた．こ 以上のような構造解析によって，ハリモグラにはラク
れらのコア骨格やルイス ，ルイス 単位は中性ミルク トースやラクト-N-ネオテトラオースをコア骨格とする
オリゴ糖にも発見されているので，酸性オリゴ糖は基本 ミルクオリゴ糖が，カモノハシにはラクトース，ラク
的に中性オリゴ糖と同じ構造単位をもちシアル酸が付加 ト-N-ネオテトラオース，ラクト-N-テトラオース，ラク
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したような構造であった．また，シアル酸を含むオリゴ
糖の大半が，4-O-アセチル化した N-アセチルノイラミン
酸（Neu4,5Ac2）を含んでいた．
ミルクオリゴ糖における O-アセチル化 N-アセチルノ
イラミン酸の存在は，ウシオリゴ糖の微量成分に示され
(30)
ている（完全構造は決定されていない） が，シアリル
オリゴ糖の大半が Neu4,5Ac2 を含むのは単孔類の固有
●
ト-N-ネオヘキサオースをコア骨格とするミルクオリゴ
糖が発見された．ラクトースコア以外のこれらのコア骨
格をもつオリゴ糖は，ヒトなどの有胎盤類でも発見され
ているが，有袋類には見つかっていない (2, 7, 8)．これら
の共通のコア骨格オリゴ糖が単孔類と有胎盤類で発見さ
れたという事実は，それらが共通祖先哺乳類の乳様分泌
物にすでに存在していた可能性を示唆している．

の特徴である．4-O-アセチルシアル酸を含むシアリルラ
クトースは，細菌が生産するシアリダーゼに対して加水
有袋類のミルクオリゴ糖
分解抵抗性を有している (31)．単孔類は前述のように乳
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首のない乳腺で，皮膚の上に乳を分泌する．それに細菌
が増殖しては母体にとっても仔にとっても不都合であ
る．シアル酸への O-アセチル基の付加は，ミルクオリ
ゴ糖が細菌増殖のための栄養源とならないような機能を
付与するものと予想される．一方で有袋類や有胎盤類で
の乳首の存在は，それ自体が感染防御に対してある程度
有効であり，シアル酸の O-アセチル化の必要性が失わ
れたのではないかと考えられる．
Stewart らは，ハリモグラやラットの乳仔の腸粘膜の
ホモゲネートとともに 4-O-アセチルシアリルラクトース
(32)
をインキュベートした ．ハリモグラのホモゲネート
では中間分解産物としてシアリルラクトースが，最終分
解産物として，ラクトース，シアル酸，グルコース，ガ
ラクトースが生成したが，ラットでは加水分解生成物が
(32)
えられたかった ．このことはハリモグラの乳仔が，
主要糖質の 4-O-アセチルシアリルラクトースを小腸内で
分解できることを示している．ハリモグラ乳仔はおそら
くピノサイトーシスのような単純な輸送方式で小腸細胞
内にそれを取り込み，リソソームで加水分解して栄養源
として利用していることが予想される．カモノハシでも
同様であると考えられるが，ミルクオリゴ糖を構成する
単糖の中で栄養源として利用できるのは，グルコースと
現 存 す る 有 袋 類 は 約 250 種 類 で あ り， 南 ア メ リ カ，
オーストラリア，ニューギニアに棲息する．妊娠期間が
20 日前後と短く 200 mg 未満の未熟な新生仔を出産し，
乳仔は授乳の一定期間を育仔嚢の中で発育する．有袋類
の一種カンガルーの袋の中には 4 つの乳首が存在する
が，そのうちの一つに仔が吸い付き，仔の付着した乳首
のみで泌乳が開始される，泌乳期の経過とともに乳首の
サイズは増加する．それはある泌乳時期に 2 つの異なる
乳首から異なる組成の乳を分泌するが，一方の小さな乳
首から分泌される新生仔用の乳でも，他方の大きな乳首
から分泌され，乳仔が袋の外側から授乳する乳でも，ラ
クトースはマイナーな成分にすぎない．有袋類の乳の糖
質分析は，従来薄層クロマトグラフィーによってアカク
ビワラビー (36)，イースタンクオール（フクロネコ）
(37)
，ブ
ラッシュテイルポッサム (38)，リングタイルポッサム (39)，
コアラ (40) およびグレーショートテイルオポッサム (41) な
どに対して行われた．一方でミルクオリゴ糖の構造解析
は，従来の Messer らによるタマーワラビー以外に，近
年筆者らによってアカカンガルー，コアラ，ブラッシュ
テイルポッサム，イースタンクオールに対して行われ
た．
タマーワラビーの中性オリゴ糖の構造解析は，1980 年

164 化学と生物 Vol. 54, No. 3, 2016

 の Messer ら (42) の研究によって開始され，Collinsら (43)， アカカンガルーの酸性ミルクオリゴ糖は Anrakuら (46)，
(44) (45)
Messer ら ，Bradbury ら の研究が続いた．この一 コアラ，ブラッシュテイルポッサム，イースタンクオー
連の研究によって，主要オリゴ糖系列として Gal
（β1-3） ル の ミ ル ク オ リ ゴ 糖 は そ れ ぞ れ Urashima ら (47∼49) に
(42)
Gal
（β1-4）
Glc（3 ′-ガ ラ ク ト シ ル ラクトース） ，Gal よって構造決定された．図 6 に泌乳中期のブラッシュテ
(43)
（β1-3）
Gal（β1-3）
Gal（β1-4）Glc ，Gal（β1-3）Gal（β1-3）Gal イルポッサム乳より抽出された糖質画分の BioGel P-2 に
（β1-3） Glc(43)，Gal（β1-3）
Gal（β1-4） Gal（β1-3）Gal（β1-3）Gal よるゲルクロマトグラムを示した (48)．BP-6 はラクトー
（β1-3）
Gal Glc(43) が，マイナーオリゴ糖系列として
（β1-4） スであるが，ラクトースは少量でラクトースよりも前に
Gal
（β1-3）
［GlcNAc
（β1-6）］Gal
（β1-4）Glc（ラ ク ト-N-ノ ボ 溶出するミルクオリゴ糖の方が優先的である．分離され
(44)
テ ト ラ オ ー ス） ，Gal
（β1-3）
［Gal
（β1-4）GlcNAc
（β1-6）］ た中性オリゴ糖ピークのうち複数のオリゴ糖を含む画分
(45)
Gal
（β1-4）
Glc（ラ ク ト-N-ノ ボ ペ ン タ オ ー ス I） ，Gal はグラファイトカーボンカラムによる HPLC によって，
（β1-3）
Gal（β1-3）
［Gal
（β1-4）GlcNAc
（β1-6）］Gal（β1-4）Glc 酸性オリゴ糖は Amide-80 カラムによる順相系 HPLC に
(45)
（ガラクトシルラクト-N-ノボペンタオース I） が決定さ よ っ て 各 オ リ ゴ 糖 の 分 離・ 精 製 を 行 い，1H-NMR と
れた． MALDI TOFMS に供して構造決定された (48)．構造決定
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されたブラッシュテイルポッサム中性ミルクオリゴ糖は
●
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図 6 ■ ブラッシュテイルポッサム乳より抽出した糖質画分の
BioGel P-2 カラムのよるゲルろ過プロファイル
各フラクションのアリコートは，490 nm でのフェノール硫酸法で
ヘキソースを，630 nm での過ヨー素酸レゾルシノール法でシアル 図 7 ■ 構造決定されたブラッシュテイルポッサムの中性ミルク
酸のモニターを行った．図は文献（48）より引用した オリゴ糖（文献（48） ）

図8 ■ 構造決定されたブラッシュテイル
ポッサムの酸性ミルクオリゴ糖（文献（48））

化学と生物 Vol. 54, No. 3, 2016 165

 図 7 に，酸性ミルクオリゴ糖は図 8 に示した．ブラッ
シュテイルポッサムの中性ミルクオリゴ糖の構造と組成
は，タマーワラビーの中性ミルクオリゴ糖と非常に近
い． 新 規 化 合 物 と し て Gal
（β1-3）
［Gal
（β1-4）GlcNAc
（β1-6）
］Gal
（β1-3）Gal
（β1-4）Glc（ガラクトシルラクト-N-
ノボペンタオース II）が発見されたが，これはタマーワ
ラビーのミルクオリゴ糖の未同定の画分の中にも含まれ
ていると予想される．酸性オリゴ糖は中性オリゴ糖と同
様のコア骨格に対して，N-アセチルノイラミン酸また非
還元末端ガラクトースの 3 位に硫酸基が付加している．
オリゴ糖の直鎖部分の末端ガラクトースには，Neu5Ac
がα
（2-3）結合のみで結合していることが注目される．
また，高度に硫酸基が付加していることも特徴的である
日本農芸化学会
が，ブラッシュテイルポッサム乳仔の脳などの成長に
とって，ミルクオリゴ糖由来の硫酸基が利用されている
●
化学と生物 
図 9 ■ イースタンクオールの写真（Jim Merchant 博士より提
供された）
166
かもしれない．一方，アカカンガルーの酸性ミルクオリ
ゴ糖は，ブラッシュテイルポッサムの酸性ミルクオリゴ
糖と構造と組成が極めて類似していた (46)．
イースタンクオールのミルクオリゴ糖に対しては，同
様の方法によって中性ならびに酸性オリゴ糖の分離・精
製，および構造解析が行われた (49)（図 9 はイースタンク
オール）．決定された化学構造は図 10 に示した．新規オ
リゴ糖として 2 単位の分枝型 N-アセチルラクトサミンを
含 む G a（
l β1-3）
［Gal（β1-4）GlcNAc（β1-6）］G a（
l β1-3）
［Gal
（β1-4）GlcNAc（β1-6）］Gal（β1-4）Glc（ラ ク ト-N-ノ ボ オ ク
タオース）とそのシアリル誘導体，ならびに Gal（β1-3）
［Gal（β1-3）Gal（β1-4）GlcNAc（β1-6）］Gal（β1-4）Glc（ラク
ト-N-ノボペンタオース III）が発見されたが，これらは
ほかの有袋類種のミルクオリゴ糖の未同定画分の中にも
含まれている可能性がある．他種の有袋類乳の糖質画分
は，優先種として直鎖の β（1-3）ガラクトシルラクトース
シリーズ，一方マイナーシリーズとして GlcNAc を含む
分枝オリゴ糖を含んでいたが，イースタンクオール乳の
糖質画分では，ラクト-N-ノボペンタオース I やラクト-N-
ノボオクタオースなどの分枝型オリゴ糖のほうが優先的
であった．タマーワラビーの泌乳期乳腺にはミルクオリ
ゴ糖の生合成にかかわる酵素として，グルコースや N-
アセチルグルコサミンにガラクトースを転移する β4-ガ
ラクトシルトランスフェラーゼ，ラクトースなどの非還
元末端にガラクトースを転移する β3-ガラクトシルトラ
ンスフェラーゼ，および 3 ′-ガラクトシルラクトースな
図 10 ■ 構造決定されたイースタンクオー
ルのミルクオリゴ糖（文献（49） ）
化学と生物 Vol. 54, No. 3, 2016
 図 11 ■ イースタンクオール中性ミルクオ
リゴ糖の予想される生合成経路
図は文献（49）より引用した．

どの非還元末端から 2 番目のガラクトースに N-アセチル セチルグルコサミニルトランスフェラーゼ，3′-ガラクト

日本農芸化学会

グルコサミンを転移する β6-N-アセチルグルコサミニル シルラクトースなどの非還元末端より 2 番目のガラク

(50, 51)
トランスフェラーゼの活性が発見されている ．同 トース残基の 6 位に N-アセチルグルコサミンを転移する
様の酵素系がイースタンクオールの泌乳期乳腺にも存在 β6-N-アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼのい
すると予想し，イースタンクオールの決定されたミルク ずれかの活性によって生合成される．これらの N-アセ
オリゴ糖の推定される生合成経路を図 11 に示した (49)． チルグルコサミニルトランスフェラーゼは哺乳類共通祖
イースタンクオールとほかの有袋類種のミルクオリゴ糖 先においては共通に存在していたが，各々の哺乳類系統
のパターンの違いは，イースタンクオールにおいて への進化過程で一部が失われたと予想される (8)．一方
●

β6-N-アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ活性 で，2 単位以上の β（1-3）ガラクトース残基が直鎖につな

が相対的に高いためであると予想された． がったミルクオリゴ糖は，有袋類でしか発見されていな
コアラの乳の糖質画分においては，ほかの有袋類種と い (8)．これは β3-ガラクトシルトランスフェラーゼの発
化学と生物 

同様のミルクオリゴ糖とともに，フコースを含む Gal 現量が，有袋類の泌乳期乳腺で著しく高まったことによ

（β1-3）
{Gal（β1-4）
［Fuc
（α1-3）］GlcNAc（β1-6）}Gal（β1-4） るものと考えられる (8)．
G l c お よ び N e u 5 A c（α2-3）G a（
l β1-3）{ G a（
l β1-4）
［Fuc 有胎盤類の乳仔では，母乳中のラクトースは小腸ラク
（α1-3）］
GlcNAc
（β1-6）}Gal
（β1-4）Glc が発見された (47)．こ ターゼ（中性 β-ガラクトシダーゼ）活性によってグル
れまでに分析された有袋類種の中でフコースを含むミル コースとガラクトースに加水分解され，吸収される．一
クオリゴ糖が発見されたのはコアラだけであり，注目さ 方で中性および酸性 β-ガラクトシダーゼに対する特異的
れる． な組織化学実験によって，タマーワラビー乳仔小腸上皮
有袋類のミルクオリゴ糖のコア骨格には，単孔類や一 微絨毛膜にラクターゼ活性が欠損していることが示され
部の有胎盤類のミルクオリゴ糖に共通のコア骨格として た (52, 53)．その一方で非常に強い酸性β-ガラクトシダーゼ
発見されるラクト-N-ネオテトラオースやラクト-N-ネオ 活性が，リソソームか超核液胞と予想される細胞内に存
ヘキサオースはなく，代わりにラクト-N-ノボペンタ 在している．酸性β-ガラクトシダーゼは，ラクトースしか
オース I をコア骨格とするオリゴ糖が発見された．後者 加水分解しない有胎盤類中性ラクターゼとは異なり，ラ
のタイプのミルクオリゴ糖は単孔類には見当たらない クトースもβ1-3ガラクトシドも切断する (52, 53)．また，β-ガ
が，ウシ，ウマ，ヤギ，ヒツジ，ラクダ，ブタ，フサオ ラクトシダーゼのほかに，N-アセチルグルコサミニダー
マキザルなどの一部の有胎盤類では，ラクト-N-ノボペ ゼ，α-L-フコシダーゼ，ノイラミニダーゼなどの酸性グリ
ンタオース I 自身とそのシアリル誘導体が発見されてい コシダーゼ活性が，タマーワラビー小腸に検出された (53)．
る (8)．ラクト-N-ネオテトラオース，ラクト-N-ネオヘキ この結果，タマーワラビーのミルクオリゴ糖は小腸微絨
サオースまたラクト-N-ノボペンタオース I は，ラクトー 毛膜で加水分解されず，それらが消化されるためには，
スのガラクトース残基の 3 位に N-アセチルグルコサミン まずピノサイトーシスかエンドサイトーシスにより細胞内
を転移する β3-N-アセチルグルコサミニルトランスフェ に取り込まれなければならないことを示している．おそ
ラ ー ゼ，GlcNAc
（β1-3）Gal
（β1-4）Glc の ガ ラ ク ト ー ス 残 らくこれらのオリゴ糖は，それからリソソームか超核液
基の 6 位に N-アセチルグルコサミンを転移する β6-N-ア 胞に入り，構成単糖に加水分解されるであろう．このよ

化学と生物 Vol. 54, No. 3, 2016 167

 うなミルクオリゴ糖の吸収・消化は，タマーワラビー以
外のほかの有袋類種の乳仔にもあてはまるであろう．
上の観察は有袋類では乳の中で優先的な糖質であるミ
ルクオリゴ糖が，有仔への重要な栄養源として利用され
ていることを示唆している．有袋類の乳は，タマーワラ
ビーでの観察結果のように最大で 14％もの糖質含量を
(54)
含んでいるが ，ラクトースよりも分子量の大きなオ
リゴ糖を高濃度に含むことによって乳の低浸透圧を維持
している．同重量濃度の溶液において 2 糖を溶解した溶
液の浸透圧が，単糖の溶液のそれの 2 倍であることから
も，低浸透圧維持のメカニズムが理解されるであろう．
浸透圧が高くない状態で高濃度の糖質を含む乳を摂取す
れば，乳仔は下痢をしないで高エネルギーを獲得するこ
日本農芸化学会
とができる．有袋類乳の高ガラクトシルオリゴ糖のガラ
クトースは，乳仔での循環過程でグルコースに変換さ
れ，エネルギーとして利用されているであろう．つまり
このような高ガラクトシルオリゴ糖の獲得が，非常に未
熟な状態で出産された有袋類乳仔の成長にとって重要な
生存戦略になっていった．
●
おわりに
筆者は恩師で友人の Michael Messer とともに 2002 年
化学と生物 
に 誌に
「ミルクオリゴ糖とラクトースの進化」というタイトル
で，乳の糖質の進化と単孔類，有袋類，有胎盤類の泌
乳・子育て戦略についての総説を出版した (2)．それから
10 年以上が経過し，それまでに研究されていなかった
カモノハシの酸性ミルクオリゴ糖や，タマーワラビー以
外の有袋類の中性ならびに酸性ミルクオリゴ糖の構造情
報 が 新 た に 蓄 積 さ れ た． そ れ は NMR や MALDI
TOFMS のような構造解析方法とともに，中性オリゴ糖
や酸性オリゴ糖の分離・精製技術の進歩によるところが
大きい．ハリモグラのみならず，カモノハシの酸性ミル
クオリゴ糖における 4-O-N-アセチルノイラミン酸の存在
や，有袋類と一部の有胎盤類ミルクオリゴ糖の共通コア
骨格としてのラクト-N-ノボペンタオース I の存在，有袋
類の酸性ミルクオリゴ糖における高濃度の硫酸基の存在
など，新たな知見が付け加わった．そのことで，特に単
孔類や有袋類の乳仔の子育て戦略，生存戦略はより詳細
に考察できるようになった．乳に含まれる糖質はラク
トースであるという単純なドグマはすでに過去のものと
なり，多様なミルクオリゴ糖の存在は哺乳類の多様な進
化と生存戦略とも密接に関連している．一方でミルクオ
リゴ糖研究は，動物園などの飼育下での単孔類や有袋類
168
の乳仔への人工調合乳の調整方法にもヒントを与えてい
る．たとえば，一部の乳業会社がヒトへの育児用調合乳
にプレバイオティクス素材として添加しているガラクト
オリゴ糖を，カンガルー用の調合乳に添加すれば，仔に
とっての重要な成長のための栄養源となるであろう．
謝辞：本文の中でも紹介した 2012 年 9 月にオーストラリア・タスマニア
島で行ったハリモグラのフィールドワークは，文部科学省グローバル
COE プログラムによる研究助成によって行われた．
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