Bioethanol - Oprensning og bestemmelse af alkoholprocent

Formål
At oprense og bestemme alkoholprocenten i gæringerne foretaget i øvelsen ”Bioethanol - gæring som
funktion af sucrosekoncentrationen”.

Baggrund
Se afsnit om oprensning af bioethanol i Bioteknologi A bind 1 side 129.

Materialer (fælles)
 Standard ethanol opløsninger (0%, 5%, 10% og 15%)
 Pyknometer + vægt

Materialer (pr. gruppe)

 Varmekappe
 250 mL rundbundet kolbe
 Destillationsudstyr: T-rør, termometer, svalerør
 100 mL målekolbe
 100 mL fuldpipette + sugebold

Fremgangsmåde

Fremstille standardkurve for alkoholprocent

1. Fyld derefter pyknometeret til randen med demineraliseret vand (stuetemperatur), og påsæt
proppen.
o Kontroller, at der ikke er luftbobler i pyknometeret. Kanalen i proppen skal være helt fyldt
med væske.

2. Tør pyknometeret af udvendigt. Lige inden vejningen tørres dråben på proppens overside af, og
man vejer pyknometeret med indhold.
o Lad være med at gå med pyknometeret i hånden i længere tid inden vejningen. Det gælder
om at undgå at opvarme væsken. Overvej – hvorfor må væsken ikke blive opvarmet?

3. Hermed har vi vejet pyknometeret med en "opløsning", som indeholder 0,0 vol% ethanol.

4. Derefter vejes pyknometeret med de tre andre standardopløsninger.

o Inden vejningen skylles pyknometeret med lidt af den pågældende væske.
o Hæld skyllevæsken ud, fyld pyknometeret, sæt prop i, tør af og vej. Overvej – hvorfor skal
der skylles sådan? Så der ikke er nogle fejlkilder som kommer udefra, der kunne jo have
været noget i pyknometeret som ville påvirke vores forsøg.

5. Måleresultaterne indsættes i skema under resultatafsnittet. Massen af jeres destillat bestemmes på

samme måde og indføres i skemaet.
Destillering
1. Til destillationen skal der afmåles præcis 100,0 mL filtreret opløsning fra gæringen med en
fuldpipette, som derefter hældes over i destillationskolben. Der tilsættes pimpsten. Der destilleres
over i en 100 mL målekolbe.
2. Start destillationen. Når destillationstemperaturen når ca. 97 oC, antager vi at alt ethanol er
destilleret over, og destillationen kan afbrydes.

3. Overfør al destillatet til en 100 mL målekolbe

4. Målekolben fyldes næsten til stregen med demineraliseret vand, hvorefter den stilles til
temperering, evt. til næste kemitime. Når temperaturen er 20 ℃, fyldes op til mærket med
demineraliseret vand. Husk omrystning. Overvej – hvorfor er det vigtig at den er stuetemperatur og
ikke stadig varm fra destilleringen?

Man har nu ethanolen fra gæringen i præcis samme volumen, som man startede med, men man har en
opløsning, som kun indeholder ethanol og vand.

5. Opløsningens masse bestemmes ved hjælp af det samme pyknometer, som man brugte til at
fremstille standardkurven.

Resultater
124 pyknometer

c ethanol volumen % m pyknometer med indhold (g)

0 84,50

5 84,15

10 83,86

15 83,58

m pyknometer med destillat fragæring ( g )

83,81
Efterbehandling

1. Bestem ethanolindholdet ved hjælp af standardkurven (først skal standardkurven laves, en

passende matematisk model findes og dernæst skal ethanolindholdet fra gæringen bestemmes ud
fra den matematiske model).

Variablerne sættes ind i funktionen og funktionen løses mht. x

83,81=−0,06100· x +84,4 8 (Funktionen er løst med ”solve” på Nspire)
x = 10,98%
Det vil sige, at ethanol indholdet af fra gæringen er bestemt til 10,98%

2. Saml klassens data, afbild c ethanol volumen % som funktion af m sucrose og analysér resultaterne.

- På grafen ser man, at der fra 0-5% alkoholprocent sker en stigning.

- Den mest naturlige forklaring på, at grafen aftager, er at gærcellerne kommer til at lide af
pladsmangel eller næringsforholdende er dårlige.
- Hvis sukkerindholdet stiger, så slår man mikroorganismer ihjel, da vandet vil trække ud af
organismerne.

3. Diskutér fejlkilder og usikkerheder.

- For at få et mere sikkert resultat, så skal der gentages. Der skal være flere ”modeller”. I stedet
for, at der kun var 1 kolbe med 5g tilsat sucrose, så skal der f.eks. i stedet være 10.
 - Det ville også være interessant at se, hvad der ville ske efter 50g tilsat sucrose. Ville grafen
aftage yderligere, eller ville den være stabil? Hvis der blev tilsat flere gram af sucrose, så kunne
det evt. resultere i at sucrose indholdet vil være for højt, og så vil gæringen slet ikke komme i
gang, da det ikke vil være muligt, hvis sucrose indholdet er for højt.

Konklusion

Fejlkilder
- En usikkerhed er om der kommer en lille mængde vand med over i når man destillerer ethanolen
- Når vi skal rense pyknometeret med de givende ethanol %, så kan der være små mængder andre
procenter, som sidder tilbage.
- En fejlkilde kan også være, at når vi har fået vores destilleret gæring og så derefter skal hælde det i
et nyt målebæger på 100ml, så er der en stor chance for, at der er mere destilleret gæring i vores
første kolbe. Dette vil kunne efterlade os med en mindre mængde af vores destilleret gæring. Dette
kan måske påvirke vores endelige resultat.
- Når vi skulle måle mpyknometeret med indhold, så kan vi have stillet pyknometeret et forkert sted. Det
vil kunne resultere i, at vægten kan blive ændret. Hvis den står for meget i siden af vægten, så kan
det ændre vores endelige vægt af massen. (Vi satte pyknometeret så tæt på midten som muligt).
- Temperaturen af vores destilleret gæring kunne have været for høj, da vi blandede det sammen
med vores destillerede vand. Dette kan også påvirke resultatet.

Note
- Densitet afhænger af temperaturen, hvilket gør, at vi ikke må holde på pyknometeret med vores
hænder i for lang tid, da det kan opvarme den. Hvilket vil resultere i, at det vil ændre på densiteten
af vores masse.