Translated from English to Vietnamese - www.onlinedoctranslator.

com

Những tiến bộ của RSC

PMỘT
MỖI

Hydrogel dựa trên polysacarit kháng khuẩn ổn định làm

Trích dẫn điều này:Tư vấn RSC,2020,10,17280
chất kết dính mô để chữa lành vết thương†
Tiểu Xuân Đường,bụngXinyi Gu,bụngYaling Wang,cTiểu Lý Trần,bụngTuyệt Linh *bụng
và Yumin Yang*bụng

Nhận vào ngày 3 tháng 3 năm 2020 Được
chấp nhận vào ngày 28 tháng 4 năm 2020
DOI: 10.1039/d0ra02017f
rsc.li/rsc-advances
Sự bám dính vào bề mặt của các mô sinh học, ẩm, năng động rất quan trọng trong nhiều lĩnh vực. Hiện nay, chất
kết dính mô thường được sử dụng trong thực hành lâm sàng vẫn chưa đạt mức lý tưởng, thể hiện khả năng tương
thích mô kém hoặc độ bám dính mô yếu. Ở đây, chúng tôi đã thiết kế các hydrogel tương thích sinh học bao gồm
polysacarit với polyacrylamide và cho thấy khả năng tương thích tế bào đầy hứa hẹn, hoạt tính kháng khuẩn và độ
bám dính mô tuyệt vời. Hydrogel gốc Alginate/chitosan liên kết chéo cộng hóa trị với bề mặt mô để đạt được độ
bám dính mô đáng ngưỡng mộ. Ngoài ra, các tính chất cơ học của hydrogel được tăng cường đáng kể khi bổ sung
polyacrylamide, giúp tăng cường độ bám dính của chúng một cách hiệp lực. Điều quan trọng là, hydrogel thể hiện
khả năng tương thích sinh học tốt và hoạt tính kháng khuẩn hợp lý giúp thúc đẩy quá trình phục hồi vết thương
trong quá trình sử dụng làm băng vết thương. Những kết quả này cho thấy hiệu quả của chất kết dính mô được
phát triển cho các ứng dụng trong lĩnh vực y sinh, cũng như mở rộng khả năng sử dụng hydrogel trong kỹ thuật
mô.

Giới thiệu
Độ bám dính vào các bề mặt ẩm ướt và năng động (bao gồm cả
mô sinh học) rất quan trọng trong nhiều lĩnh vực,1và chất kết dính
có thể liên kết mạnh với mô sinh học có nhiều ứng dụng tiềm
năng, bao gồm sửa chữa mô,2,3Vận chuyển ma túy,4,5và trong các
thiết bị y sinh.6,7 Trong số này, việc sửa chữa các mô, bao gồm cả
da,số 8sụn,9và các cơ quan nội tạng,10là một vấn đề cực kỳ phổ biến
và cấp bách tại phòng khám. Mặc dù chỉ khâu và ghim đã được sử
dụng rộng rãi để kết nối lại các vết mổ nhằm phục hồi cấu trúc và
chức năng của mô, nhưng việc xỏ mô để đặt chỉ khâu và ghim có
thể làm tổn thương thêm vùng vết thương xung quanh và làm
tăng nguy cơ nhiễm trùng. Do đó, vật liệu dính mô đã thu hút sự
chú ý như là giải pháp thay thế cho việc bịt kín và kết nối lại các mô
hoặc để kết hợp các thiết bị cấy ghép vào mô dựa trên tính linh
hoạt và dễ ứng dụng của chúng.11Loại keo siêu dính cyanoacrylate
thường được sử dụng là chất kết dính mô mạnh nhất hiện đang
được sử dụng;12
tuy nhiên, nó gây độc tế bào và thể hiện khả năng tương thích mô học kém.13
Ngoài ra, chất kết dính lấy cảm hứng từ trai14bám dính yếu vào các
mô, vì độ bám dính của chúng chủ yếu dựa vào các tương tác vật
lý tương đối yếu. Chất kết dính mô lý tưởng phải được thiết kế
Phòng thí nghiệm trọng điểm về tái tạo thần kinh, Trung tâm đồng đổi mới tái tạo thần
Một
có ái lực tế bào tuyệt vời để cho phép các tế bào và mô bám dính,
từ đó thúc đẩy quá trình tái tạo mô sau khi cấy ghép. Hơn nữa,
chất kết dính mô cần thể hiện các đặc tính cơ học và độ bám dính
mô tốt để tạo điều kiện thuận lợi cho việc sử dụng.
-xation với/đến các mô xung quanh trong quá trình phẫu thuật.15
Hydrogel là một loại polymer ưa nước, có khả năng trương nở
trong nước, liên kết chéo cao với cấu trúc tương tự như cấu trúc
của ma trận ngoại bào tự nhiên và có khả năng giải quyết hiệu quả
vấn đề tương thích sinh học.16,17Hydrogel đã được nghiên cứu rộng
rãi và chứng minh tiềm năng lớn như vật liệu tương thích sinh học
trong nhiều ứng dụng điều trị.18Những vật liệu này có thể được
chia thành vật liệu tự nhiên và tổng hợp.19Các polyme có trong tự
nhiên như chitosan,20alginate,21axit hyaluronic,22collagen,23và
gelatin,24có khả năng phân hủy sinh học và thường được chức
năng hóa trước bằng cách sử dụng integrins để thúc đẩy sự kết
dính của tế bào.25Tuy nhiên, do khả năng sinh miễn dịch tiềm tàng
và sự khác biệt giữa các lô nên việc sử dụng các vật liệu này bị hạn
chế.26Ngược lại, các polyme tổng hợp, chẳng hạn như
poly(ethylene glycol), polyacrylamide, poly(vinyl Alcohol) và
poly(methyl methacrylate), thường thể hiện các tính chất cơ học
tốt hơn và khả năng miễn dịch thấp hơn so với các vật liệu tự
nhiên nhưng thiếu chức năng sinh học và cần xử lý sinh hóa trước.
ĐẾN trong cơ thể sốngứng dụng.27Vì vậy, hydrogel lai bao gồm
Ưu điểm của cả polyme tự nhiên và tổng hợp đều mang lại cơ hội
lớn nhất để sửa chữa các khiếm khuyết mô và đẩy nhanh quá trình

kinh tỉnh Giang Tô, Đại học Nam Thông, Nam Thông, 226001, PR Trung Quốc. E-mail:
yangym@ntu.edu.cn ; jl2016@ntu.edu.cn
b Trung tâm Y học Lâm sàng Giang Tô về Kỹ thuật Mô và Sửa chữa Chấn thương Thần kinh, Đại
học Nam Thông, Nam Thông, 226001, PR Trung Quốc
cTrường Dược, Đại học Nam Thông, Nam Thông, 226001, PR Trung Quốc
†Thông tin bổ sung điện tử (ESI) có sẵn. 10.1039/d0ra02017f Nhìn thấy
lành vết thương.28–30
Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã thiết kế một loạt băng vết
thương dựa trên hydrogel bao gồm natri alginate, chitosan và
polyacrylamide và có các đặc tính cơ học tốt có khả năng
DOI: hỗ trợ chuyển động năng động của mô, mô mạnh mẽ

17280 |Tư vấn RSC,2020,10,17280–17287 Tạp chí này được © Hiệp hội Hóa học Hoàng gia 2020
Giấy
bám dính vào mô ướt hoặc giàn giáo để băng bó các khuyết tật mô, đồng
thời hứa hẹn khả năng tương thích tế bào và hoạt động kháng khuẩn để
thúc đẩy quá trình lành vết thương. Chúng tôi đề xuất rằng những chất kết có đường kính 22 mm và độ sâu 5 mm được thử nghiệm ở tốc độ
dính này có thể được sử dụng rộng rãi trong nhiều ứng dụng y sinh, bao
gồm cả chất kết dính mô và băng vết thương cũng như để sửa chữa mô.
Thực nghiệm
Tổng hợp hydrogel
Để tạo ra hydrogel alginate/chitosan (SC), 2% natri alginate (Aladdin,
Thượng Hải, Trung Quốc) và 2% chitosan (Công ty TNHH Công nghiệp
Sinh học Nam Thông Xingchen, Nam Thông, Trung Quốc) (w/v) là
-đầu tiên hòa tan trong dung dịch đệm MES (Sigma-Aldrich, St. Louis,
dung dịch sạch. Dung dịch tiền chất (10 mL) được trộn với 0,12 g 1-etyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide (EDC), 0,12 gN-máy
hydroxysuccinimide (NHS) và để gel bên trong khuôn kín ở nhiệt độ
polyacrylamide (SCM) (SCM4, SCM8 và SCM12), 2% natri alginate và 2% chitosan được hòa tan với 4%, 8% hoặc với
(w/v), tương ứng. Thêm 2% (w/v)N,N0-methylenebis(arylamid) (MBAA; Sigma-Aldrich) (12tôiL),N,N,N0,N0
-tetramethylethylenediamine được ủ trong cùng điều kiện với da và được thử nghiệm kết các sợi thần kinh chitosan
(TEMED; Sigma-Aldrich) (2.7tôiL), amoni persulphate 0,27 M
(APS; Sigma-Aldrich) (75tôiL) và 0,75M CaSO4(Sigma-Aldrich)
(64tôiL) là ống tiêm được trộn với dung dịch tiền chất chứa
natri alginate/chitosan/4% acrylamide, cùng với EDC và NHS,
để tạo ra hydrogel SCM4 chẳng hạn. Hydrogel natri alginate
(SA) được điều chế bằng cách trộn dung dịch natri alginate 2%
(w/v) với 0,75 M CaSO4.
Đặc tính hoạt động vật lý và hóa học của hydrogel
Quang phổ hồng ngoại biến đổi Fourier (FTIR).Chúng tôi đã
thực hiện phân tích FTIR của hydrogel bằng máy quang phổ
Nicolet iS50 FTIR (Thermo Fisher Scienti-c, Waltham, MA, USA)
trong phạm vi 4500 cm-1đến 400 cm-1. Các mẫu được thử
nghiệm ở dạng đĩa KBr ở nhiệt độ phòng.
Kính hiển vi điện tử quét (SEM).Hình thái hydrogel được đặc
trưng bởi SEM sử dụng S-3400N II (Hitachi, Tokyo, Nhật Bản) ở
điện áp gia tốc 30 kV. Trước khi phân tích, hydrogel được đông
khô và bề mặt được phủ một lớp vàng mỏng. Đường kính lỗ
rỗng được tính toán bằng phần mềm ImageJ (Viện Y tế Quốc
gia, Bethesda, MD, Hoa Kỳ).
Đánh giá độ xốp của hydrogel.Các hydrogel tổng hợp khác
nhau được đông khô và ngâm trong etanol khan với thể tích
đã biết (V.1). Sau đó, hỗn hợp được chân không ở mức 0,08 kPa
và thể tích hydrogel và ethanol được tưới bằng ethanol được
ghi lại làV.2và sau khi loại bỏ hydrogel, thể tích cuối cùng được
ghi lại làV.3. Độ xốp được tính toán như sau:P¼ (V.1-V.3)/(V.2-V.3)
- 100%.
Đánh giá cơ học. Độ bền kéo/độ bền nén
các phép đo được thực hiện bằng máy kiểm tra phổ điện tử (UTM;
TFW-58; Shanghai Tuofeng Instrument Technology Co. Ltd.,
Thượng Hải, Trung Quốc). Mẫu hydrogel được chế tạo thành dạng
hình trụ đặc có đường kính 6 mm và đường kính 5 cm.
Tạp chí này được © Hiệp hội Hóa học Hoàng gia 2020
Những tiến bộ của RSC
chiều dài và được thử nghiệm trên hệ thống QMESYS với đồ gá kéo
ở tốc độ kéo dài 5 mm tối thiểu-1. Đối với thử nghiệm nén, các mẫu
dịch chuyển tối thiểu 5 mm.-1. Tất cả các thử nghiệm về tính chất
vật lý được thực hiện trong phòng với điều kiện được kiểm soát
chặt chẽ (độ ẩm 80% và 27 C) để tránh bị khô.
Độ bám dính của mô và các hạt thần kinh chitosan.Các phép đo
ứng suất kéo Lapshear của hydrogel được thực hiện bằng UTM
(TFW-58; Shanghai Tuofeng Instrument Technology Co. Ltd.). Da
lợn được cắt thành các phần hình chữ nhật (5,0 - 2,0 cm), mỡ thừa
được loại bỏ trước khi chuyển sang PBS để kiểm tra ngay trong khi
các mô vẫn còn ẩm. Dung dịch tiền gel được bôi vào giữa hai
miếng MO,daUSA)
lợn và mẫu
(pH được
5,0) để đông
và khuấy quacứng
đêm trong
cho 10
đếnphút
khi ởthu
37 được
C
trong điều kiện ẩm. Chúng tôi đã sử dụng
kiểm tra độ bền
kéophòng
với cảm biến
qua tải trọng
đêm. Để tạo10ra
kNhydrogel
và các mẫu được cố định giữa hai
alginate/chitosan/
kẹp -lm với tốc độ kéo là 0,5 mm tối thiểu -1 . Đối 12%việc phân loại
acrylamide
dây thần kinh chitosan,
một quá trình tương tự đã được thực hiện
để liên
(đường kính trong 1,0 mm và
đường kính ngoài 2 mm) với dây thần kinh tọa của chuột. Tương
tự, các mẫu được bảo quản trong môi trường ẩm ướt trước khi sử
dụng, với diện tích chồng lên nhau ởP -1mm - 50mm. Các mẫu đã
được
sử dụng tốc độ 0,5 mm tối thiểu-1.
Trong ống nghiệm/trong cơ thể sốngđánh giá sinh học
Độc tính tế bào.Độc tính tế bào của hydrogel được đánh giá bằng xét
nghiệm 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT)
(Công nghệ sinh học Beyotime, Bắc Kinh, Trung Quốc). Chuột
-broblasts (L929; Ngân hàng Tế bào của Viện Hàn lâm Khoa học Trung
Quốc, Bắc Kinh, Trung Quốc) được gieo vào đĩa 96 giếng với 8000 tế
bào mỗi giếng và ủ trong 4 giờ đến 6 giờ ở 37 C dưới 5% CO2. Môi
trường hoàn chỉnh bao gồm môi trường Eagle đã được sửa đổi của
Dulbecco (Gibco, Gaithersburg, MD, USA) chứa 10% huyết thanh bò
bào thai (Gibco) đã được loại bỏ và 100tôiChiết xuất hydrogel L đã được
thêm vào từng giếng. A-er ủ trong 1, 2 hoặc 3 ngày với môi trường
chiết được làm mới hàng ngày, môi trường được thay thế bằng 100tôiL
môi trường tươi hoàn chỉnh và được đánh giá bởi MTT. Đối với mỗi
công thức hydrogel, -5 mẫu nuôi cấy độc lập đã được chuẩn bị và các
mẫu có khả năng sống tương đối của tế bào <70% được coi là gây độc
tế bào.
Thử nghiệm gắn kết tế bào.Ô L929 (1 - 105tế bào trên mỗi
hydrogel) được gieo vào hydrogel được phủ lên các lớp phủ và
nhuộm bằng thuốc thử rhodamine phalloidin (Abcam, Cambridge,
UK) và Hoechst 33342 (Thermo Fisher Scienti-c) sau 24 giờ gieo
hạt. Trước khi nhuộm, các tế bào được pha trong 4% (v/v)
paraformaldehyde trong 20 phút, được thấm trong 0,1% (w/v)
Triton X-100 (Sigma-Aldrich) trong 5 phút, sau đó được chặn bằng
huyết thanh bò 1% albumin (Sigma-Aldrich) trong 60 phút. Actin
-laments được nhuộm bằng thuốc thử rhodamine phalloidin
(1:1000) trong 60 phút và hạt nhân được nhuộm bằng Hoechst
33342 (1:20) trong 5 phút. Các hình ảnh được kiểm tra bằng kính
hiển vi huỳnh quang (ZEISS-AX10; Carl Zeiss AG, Oberkochen, Đức).
Đóng gói tế bào.Tế bào L929 được bọc trong hydrogel với mật
độ 1 - 106tế bào trên mỗi mL và kính hiển vi quét laser đồng tiêu
(Leica, Wetzlar, Đức) đã được sử dụng để quan sát trực tiếp/
Tư vấn RSC,2020,10,17280–17287 |17281
Những tiến bộ của RSC
nhuộm chết (bộ kit khả năng sống sót/độc tế bào CHẾT; Probes
phân tử, Eugene, OR, USA) của tế bào vào ngày 1, 2 và 3.
Xét nghiệm kháng khuẩn cho hydrogel.Hydrogel được
ngâm và rửa bằng ddH đã khử trùng2O trong 24 giờ để loại bỏ
vi khuẩn. Dịch huyền phù vi khuẩn (10tôiL) trong PBS đã tiệt
trùng (106CFU mL-1) được trải lên từng bề mặt hydrogel trong
đĩa nuôi cấy 48 giếng và ủ trong 4 giờ ở 37 C. Sau khi ủ, tất cả
vi khuẩn còn sống sót trong mỗi giếng được hòa lại với 1 mL
PBS đã khử trùng và ủ trong 16 giờ ở 37 C. CFU được xác định
trên đĩa Petri. Các thử nghiệm được lặp lại ba lần cho mỗi
nhóm.
trong cơ thể sốngphân hủy và phân tích mô học của
hydrogel.trong cơ thể sốngsự phân hủy và mô học của
hydrogel được đánh giá dưới da theo tiêu chuẩn quốc tế (ISO/
10993) và quốc gia (GB/T1688). Thỏ trắng New Zealand cái
trưởng thành (2,5–3,0 kg) được sử dụng đểtrong cơ thể sống
học. Tất cả các thủ tục trên động vật được thực hiện theo
Hướng dẫn chăm sóc và sử dụng động vật thí nghiệm của Đại
học Nam Thông và được Ủy ban đạo đức động vật của Đại học
Nam Thông phê duyệt. Mẫu hydrogel được cắt thành các ống
trụ 10 - 3 mm và cấy vào vùng giữa lưng của thỏ. Vào các
khoảng thời gian được chỉ định (tuần 1, 2, 4, 8 và 12), thỏ được
hiến tế và các mẫu được xử lý để phân tích mô học và nghiên
cứu phân hủy sâu hơn.
Nhuộm huỳnh quang miễn dịch được thực hiện để đánh giá
các phản ứng trong đạn bằng cách kiểm tra biểu hiện của
CD11b và CD68. Brie-y, các phần được ủ với kháng thể đơn
dòng kháng CD11b của thỏ (kháng thể chính, 1:400, Abcam,
21865-1-AP, Proteintech, USA) và kháng thể đơn dòng kháng
chuột CD68 (kháng thể chính, 1:400 , Abcam, 21865-1-AP,
Proteintech, USA) với tỷ lệ thể tích 1: 1 qua đêm ở 4 C. Sau đó,
các mẫu được xử lý bằng IgG (H + L) của dê affinipure liên hợp
Cy3 (kháng thể thứ cấp, 1:400, Abcam, 21865-1-AP,
Proteintech, USA) và AlexaFluor 488- kháng chuột kháng chuột
affinipure dê liên hợp IgG (H + L) (kháng thể thứ cấp, 1:400,
Abcam, 21865-1-AP, Proteintech, USA) kháng thể thứ cấp.
Hoechst 33342 (1:20; Thermo Fisher Scienti-c, USA) đã được sử
dụng để nhuộm hạt nhân.
trong cơ thể sốnglàm lành vết thương
Xây dựng mô hình chấn thươngChuột đực Sprague-Dawley
(200 g) được gây mê và tạo vết thương tròn dày (đường kính 2
cm) trên lưng mỗi con chuột. Sau đó, vết thương được xử lý
bằngtại chỗhình thành hydrogel SCM4, SA dựa trên băng vết
thương thương mại (kiểm soát dương tính) và nước muối
(kiểm soát âm tính). Sau khi điều trị, những con chuột được
nhốt riêng trong lồng trong 7 ngày. Các vết thương được
khám và chụp ảnh vào các ngày 0, 1, 4 và 7.
Phân tích mô học.Vào ngày 1, 4 và 7, chuột được truyền
dung dịch paraformaldehyde 4% và lấy mẫu vết thương. Độ
dốc của mô được khử nước và được cắt đông lạnh, sau đó là
nhuộm hematoxylin và eosin (H&E).
Phân tích dữ liệu.Tất cả các kết quả thử nghiệm được phân tích
bằng Origin 8.0 (OriginLab, Northampton, MA, USA), Image Tool
17282 |Tư vấn RSC,2020,10,17280–17287
Giấy
(https://en.bio-so-.net/) so-ware và Graphpad Prism 5.0 (GraphPad
So-ware, San Diego, CA, USA). Các kết quả được biểu thị bằng độ
lệch chuẩn trung bình (SD) và sự khác biệt giữa hai nhóm được
phân tích bởi một Học sinh hai đuôi, không ghép đôi.t Bài kiểm tra.
MỘTp <0,05 được coi là có ý nghĩa.
kết quả và thảo luận
Chế tạo hydrogel và đặc tính
Chúng tôi đã thiết kế băng hydrogel bằng cách tối ưu hóa thành
phần của chitosan, alginate và polyacrylamide, đồng thời tổng hợp
hydrogel SCM bằng cách trộn dung dịch chitosan, alginate và
acrylamide với các chất liên kết ngang (Hình 1a). Các ion canxi hóa
trị hai, Brie-y hình thành liên kết với axit alginic chuỗi bên và liên
kết ngang acrylamide với sự có mặt của MBAA, TEMED và APS. Độ
bám dính mô của hydrogel là do sự hình thành các liên kết amide,
được tạo điều kiện bởi EDC và NHS, giữa mô và chitosan/alginate
trong nền. Hình 1b cho thấy bằng chứng cho thấy tính đồng nhất
của hydrogel sau khi xử lý, cho thấy đặc tính -t-to-hình dạng của
nó.
Để xác định thành phần hydrogel, chúng tôi đã mô tả cấu trúc hóa
học của chúng bằng phân tích FTIR. Hình 1d thể hiện 1040 cm-1
và 1420 cm-1là các đỉnh đặc trưng của –OH và –COOH (ion
cacboxylat) của natri alginate,31tương ứng. Ngoài ra, chúng tôi
quan sát thấy đỉnh ở 3201 cm-1đặc tính của polyacrylamit32
hydrua-NH2và không có đỉnh ở 890 cm-1đối với monome
acrylamit ]CH2trong quang phổ của
Hình 1 Đặc tính của hydrogel. (a) Sơ đồ minh họa của
Hydrogel SCM, bao gồm chitosan, alginate và polyacrylamide, tạo
thành độ bám dính mạnh mẽ với vùng da bị thương. (b) Hình ảnh trực
quan của hydrogel với các cấu trúc 3D khác nhau. (c) Ảnh SEM của
hydrogel. (d) Phổ FTIR của hydrogel. (e) Độ bền nén và (f) độ bền kéo
của hydrogel. (g) Ảnh chụp các hình dạng ban đầu, uốn cong, nén, kéo
dài, xoắn và thắt nút của hydrogel. Dữ liệu đại diện cho SD trung bình
của ba thí nghiệm độc lập. *p <0,05;
* *p <0,01; ***p <0,001so vớihydrogel SA.
Tạp chí này được © Hiệp hội Hóa học Hoàng gia 2020
Giấy Những tiến bộ của RSC

hydrogel tổng hợp, khẳng định sự trùng hợp của acryl-polyacrylamide đã làm tăng đáng kể lượng monome amit có khả năng
nén. Hơn nữa, chúng tôi quan sát thấy đỉnh ở 2881 cm-1 cường độ của hydrogel (SCM12 cao hơn > 300 lần so với SA).
đại diện cho đỉnh hấp thụ rung động co lại của chitosan-CH2và Ngoài ra, thống kê độ bền kéo cho thấy hàm lượng
đỉnh cao dao động từ 1700 cm-1đến 1600 cm-1 polyacrylamide tăng dẫn đến độ bền kéo tăng cao, với các giá
đại diện cho các đỉnh dao động co rút của amit I (C]O) và II (rung trị đối với gel SA, SC, SCM4, SCM8 và SCM12 được xác định ở
động N-Hbending) đối với chitosan, polyacrylamide và amit được tương ứng là 17,3 kPa, 17,6 kPa, 26,0 kPa, 30,0 kPa và 79,7
hình thành bằng cách ngưng tụ các nhóm amino và carboxyl. kPa. Đáng chú ý, độ bền kéo của hydrogel SCM đều cao hơn so
Những kết quả này cho thấy sự trùng hợp thành công của từng với hydrogel được chế tạo dựa trên liên kết hydro (1,66 0,47
hydrogel chứa các thành phần tương ứng của nó. kPa),38và giá trị của hydrogel SCM8 và SCM12 vượt xa giá trị
Để theo dõi quá trình tạo gel hydrogel, chúng tôi đã thực của hydrogel lai chứa cả liên kết ngang cộng hóa trị và ion (29
hiện các thí nghiệm lưu biến quét thời gian động. Trong vòng kPa).30,39Lý tưởng nhất là độ bền kéo của băng hydrogel phải
100 giây,G0của hydrogel đều vượt quá giới hạnG00, dẫn đến sự phù hợp với độ bền của các mô bên dưới và lân cận để đảm
hình thành hydrogel nhanh chóng (Hình S1†),đáp ứng yêu cầu bảo tính toàn vẹn của chúng và đảm bảo an toàn cho vết
về thời gian cho quá trình pha trộn và tiêm dùng cho lâm sàng. thương cho đến khi lành.40,41
33CácG0hydrogel SCM tăng đáng kể cùng với hàm lượng đại Những kết quả này minh họa rằng hydrogel SCM thể hiện các
phân tử ngày càng tăng, bao gồm chitosan và polyacrylamide, đặc tính cơ học mong muốn trong phạm vi mô đun Young của
biểu thị một mạng lưới có cấu trúc mạnh mẽ duy trì hình dạng mô người (1–100 kPa).40
ba chiều (3D) của nó.
Sau đó, chúng tôi sử dụng SEM để đánh giá cấu trúc hiển vi
của hydrogel. Hình 1c cho thấy tất cả hydrogel đều có cấu trúc Độ bám dính mô của hydrogel
xốp, rất quan trọng để sử dụng hydrogel làm vật liệu sinh học, Sự kết dính mô mạnh mẽ là điều cần thiết chotại chỗhydrogel trong
đặc biệt là chất bịt kín, vì nó tạo điều kiện cho sự hấp thụ chất quá trình liên kết mô để chống lại lực cơ học trong quá trình chuyển
tiết ra từ vết thương và tăng nồng độ của hồng cầu và mảng động năng động.42Sau đó chúng tôi đã nghiên cứu độ bám dính của
để tăng cường hoạt động đông máu.34 hydrogel với các mô sinh học. Như được hiển thị trong Hình 2a,
Tuy nhiên, vì các chất dịch mô có thể dễ dàng xâm nhập và làm hydrogel có khả năng bám dính mô mạnh mẽ với các mô (bao gồm da,
phồng hydrogel, độ xốp quá mức của hydrogel có thể khiến gan và dây thần kinh) hoặc giàn giáo chitosan. Hình S6†và 2b cho thấy
thể tích hydrogel giãn nở quá mức để ép các mô hoặc cơ quan hydrogel liên kết bền vững với một miếng da lợn ướt, thậm chí có thể
bình thường xung quanh, gây ra tổn thương cục bộ. Chúng tôi bị uốn cong, biến dạng, ngâm trong nước và kéo dãn, cho thấy tiềm
thấy rằng số lượng lỗ chân lông tăng lên và kích thước lỗ chân năng đáng kể chotrong cơ thể sốngcác ứng dụng.
lông giảm cùng với sự gia tăng nồng độ rắn (chitosan và Chúng tôi đã đánh giá độ bám dính của hydrogel bằng UTM và
polyacrylamide) của hydrogel (Hình S2).†),do nồng độ polymer theo khả năng liên kết với da lợn (Hình 2d) và độ bám dính của dây
cao hơn dẫn đến mật độ liên kết chéo tăng lên với cấu trúc bên thần kinh bằng ống dẫn chitosan (Hình 2c và e). Các
trong dày đặc hơn. Điều quan trọng là đường kính lỗ rỗng của
hydrogel SC/SCM4/SCM8 dao động từ 100tôim đến 200tôim,
thích hợp cho việc gắn, di chuyển, tăng sinh và sản xuất ma
trận ngoại bào.35 Đặc tính xốp và trương nở của hydrogel đóng
vai trò chính trong việc tái tạo mô.36Như được hiển thị trong
Hình S3 và S4,†tăng hàm lượng phân tử làm giảm độ xốp và
tốc độ trương nở của hydrogel. Do độ ẩm bề mặt ảnh hưởng
đáng kể đến khả năng tương thích sinh học của vật liệu sinh
học tiếp xúc với mô, nên chúng tôi đã xác định góc tiếp xúc (q)
của hydrogel, nhận thấy rằng tất cả đều <90 và giảm nhẹ cùng
với hàm lượng acrylamide tăng lên, cho thấy rằng hydrogel thể
hiện tính ưa nước tốt (Hình. S5†).37

Hiệu suất cơ học của hydrogel

Việc áp dụng chất kết dính vào mô đòi hỏi khả năng thích ứng
với chuyển động động; do đó, hydrogel được thiết kế đòi hỏi
các đặc tính cơ học cụ thể, bao gồm khả năng co giãn, nén và
phục hồi cũng như độ ổn định cơ học. Hình 1g thể hiện các đặc
tính cơ học linh hoạt của hydrogel ở nhiều hình dạng khác
nhau.
Chúng tôi đã thực hiện các thử nghiệm nén và kéo để đánh
giá các tính chất cơ học của hydrogel (Hình 1e và f). Thống kê
về cường độ nén cho thấy việc bổ sung
Hình 2 Đánh giá độ bám dính mô của hydrogel. ( a ) Các bức ảnh về sự bám
dính của hydrogel vào giàn giáo gan, dây thần kinh hoặc chitosan. (b) Các
bức ảnh về sự bám dính của hydrogel vào da lợn khi ngâm dưới nước kéo
dài. (c) Hình ảnh hydrogel để ghép dây thần kinh. (d) Độ bền liên kết của
hydrogel liên kết với da lợn. (e) Độ bền liên kết của hydrogel được sử dụng
để ghép dây thần kinh. Dữ liệu đại diện cho SD trung bình của ba thí nghiệm
độc lập. *p <0,05; **p <0,01; ***p <0,001so với
hydrogel SA.

Tạp chí này được © Hiệp hội Hóa học Hoàng gia 2020 Tư vấn RSC,2020,10,17280–17287 |17283
Những tiến bộ của RSC
kết quả thống kê cho thấy cường độ bám dính của hydrogel SC
mạnh gấp đôi so với hydrogel SA, cho thấy rằng việc bổ sung
chitosan đã tăng cường cường độ bám dính của hydrogel do
sự hình thành liên kết cộng hóa trị giữa hydrogel và mô hoặc
ống dẫn chitosan. Ngoài ra, chúng tôi nhận thấy rằng độ bền
kết dính bị ảnh hưởng bởi sự vỡ hydrogel trong quá trình thử
nghiệm cũng như việc tách hydrogel khỏi mô hoặc ống dẫn
chitosan. Do đó, hàm lượng polyacrylamide tăng lên đã cải
thiện độ bền kéo của hydrogel, dẫn đến độ bền kết dính được
tăng cường. Cụ thể, độ bám dính của hydrogel SCM12 với da
lợn đạt 20 kPa và độ bám dính thần kinh với chitosan là 56 kPa,
cao hơn lần lượt 5 và 6 lần so với SA hydrogel.
Trong ống nghiệmĐánh giá độc tính tế bào và kháng khuẩn của hydrogel
Khả năng của vật liệu sinh học cho phép tế bào tồn tại và phát triển là nền
tảng cho việc sửa chữa và tái tạo mô.43Để đánh giá khả năng tương thích
sinh học của hydrogel với L929 -broblasts, chúng tôi đã thực hiện xét
nghiệm MTT để đánh giá khả năng sống sót và tăng sinh của tế bào theo
phương pháp nhuộm huỳnh quang. Kết quả cho thấy không có hydrogel
nào gây độc tế bào (khả năng sống của tế bào: >95%) và các tế bào biểu
hiện sự tăng sinh bình thường trên tất cả các hydrogel đến mức tương
đương với các biện pháp kiểm soát trên các đĩa trống (Hình 3a và S7†).Hình
3b cho thấy kiểu khuếch tán của các tế bào L929 được gieo trên các chất
nền hydrogel khác nhau. Các tế bào trên tất cả các hydrogel cho thấy sự lan
rộng đồng đều và hiển thị hình thái giống trục chính
Hình 3 Đánh giá củatrong ống nghiệmđộc tế bào và hoạt động kháng khuẩn. (Một)
Khả năng tồn tại của nguyên bào sợi L929 nuôi cấy trên hydrogel trong 3 ngày
theo xét nghiệm MTT. ( b ) F-actin và nhuộm hạt nhân của tế bào L929 được gieo
trên hydrogel sau 24 giờ. Thanh tỷ lệ: 20tôim. ( c ) nhuộm SỐNG/CHẾT các tế bào
L929 sau khi đóng gói trong hydrogel trong 1, 2 và 3 ngày. Thanh tỷ lệ: 200tôim.
(d) Đánh giá CFU thu được từ huyền phù vi khuẩn của
E coli-VàS. vàng-hydrogel đóng gói. (e) Tỷ lệ giảm trongE coli-VàS. vàng-
vi khuẩn đóng gói. Dữ liệu đại diện cho SD trung bình của ba thí
nghiệm độc lập. ***p < 0,001so vớiSA.
17284 |Tư vấn RSC,2020,10,17280–17287
Giấy
a-er ủ trong 1 ngày. Dựa trên cấu trúc lỗ rỗng, tỷ lệ trương nở phù hợp
và các đặc tính cơ học thuận lợi, chúng tôi đã chọn hydrogel SCM4 cho
các thí nghiệm tiếp theo liên quan đến việc nhúng và đánh giá L929
-broblasts (Hình 3c). Các kết quả thử nghiệm cho thấy khả năng sống
sót, tăng trưởng và tăng sinh tế bào đầy đủ ở cả SCM4 và hydrogel đối
chứng trong 3 ngày, cho thấy rằng hydrogel SCM4 giữ được tính toàn
vẹn cấu trúc tốt và cho phép nhúng tế bào một cách hiệu quả cũng
như hỗ trợ sự phát triển của tế bào bình thường, cần thiết để sử dụng
làm mô hình 3D ma trận văn hóa. Những điều trên chỉ ra rằng
hydrogel SCM thể hiện khả năng tương thích tế bào tốt và là ứng cử
viên đầy triển vọng để sử dụng làm băng vết thương.
Để bảo vệ vết thương khỏi nhiễm trùng do vi khuẩn bên
ngoài, vật liệu sinh học cũng phải có đặc tính kháng khuẩn.44
Vì vậy, chúng tôi đã đánh giá hoạt tính kháng khuẩn bề mặt
của tất cả các hydrogel khi có mặtEscherichia coli (vi khuẩn
gram âm) vàStaphylococcus aureus (vi khuẩn gram dương).
Như được hiển thị trong Hình 3d và e, hydrogel SA cho thấy tác
dụng kháng khuẩn yếu (20–25%) trên cả hai loài, trong khi các
nhóm hydrogel chứa chitosan (SC, SCM4, SCM8 và SCM12) đã
tiêu diệt 80% vi khuẩn.E colia-er ủ, với tác dụng kìm khuẩn tốt
hơn đáng kể so với SA hydrogel (p <0,001). Ngoài ra, hydrogel
chứa chitosan có tỷ lệ diệt khuẩn là
> 90% choS. vàng,thể hiện đặc tính kháng khuẩn vốn có tuyệt
vời. Những kết quả này cho thấy rằng việc bổ sung chitosan
vào hydrogel làm tăng đáng kể tác dụng kháng khuẩn của
chúng đối vớiE coliVàS. vàng,có thể do các nhóm amino tích
điện dương của chitosan làm tổn thương thành vi khuẩnthông
quatương tác tĩnh điện với tế bào chất, dẫn đến giải phóng các
chất -uid nội bào.45Hơn nữa, có thể là tế bào phức tạp củaE coli
dẫn đến hoạt tính kháng khuẩn của hydrogel chứa chitosan
thấp hơn một chút.46Những kết quả này chỉ ra rằng hydrogel
chứa chitosan thể hiện hoạt tính kháng khuẩn tốt và có hiệu
quả tiềm tàng đối vớitrong cơ thể sốngcác ứng dụng.
trong cơ thể sốngsuy thoái và tương thích sinh học
Để tái tạo hiệu quả các mô bị tổn thương, chất kết dính mô cần mô
phỏng hiệu quả các đặc tính tự nhiên của mô cụ thể.9Để đánh giá
trong cơ thể sốngkhả năng tương thích sinh học và khả năng phân
hủy sinh học của hydrogel SCM, SCM4 được cấy dưới da giữa của
thỏ, với hydrogel SA không gây miễn dịch được sử dụng làm đối
chứng.21Như được hiển thị trong Hình 4a, thể tích hydrogel giảm
dần cùng với thời gian cấy ghép kéo dài và chúng tôi quan sát thấy
không có phản ứng bất lợi nào, chẳng hạn như mẩn đỏ và hình
thành mụn mủ, xung quanh vị trí cấy ghép. Trước đây, chúng tôi
đã chứng minh rằng giàn giáo chitosan có thể bị phân hủy dưới
tác dụng của enzymein vivo (ví dụ lysozyme), và tốc độ phân hủy
có thể được tăng tốc bằng cách sử dụng chitosan có trọng lượng
phân tử thấp hơn.47Hydrogel alginate liên kết ngang có thể bị hòa
tan chậm thông qua trao đổi ion canxi và gây mất khối lượng.48
Trong tài liệu này, chúng tôi đã sử dụng chitosan có trọng lượng
phân tử thấp (90 kDa) để tạo ra hydrogel lai, giúp hydrogel phân
hủy sinh học nhanh hơntrong cơ thể sống.Chúng tôi thấy rằng
hydrogel đã bị phân hủy gần 50% sau 12 tuần, do sự phân hủy của
chitosan và
Tạp chí này được © Hiệp hội Hóa học Hoàng gia 2020
Giấy
Hình 4Đánh giá củatrong cơ thể sốngphân hủy và tương thích sinh học.
( a ) Hình ảnh hydrogel SA và SCM4 sau cấy ghép vào khoang dưới da
của thỏ ở các thời điểm khác nhau lên đến 12 tuần. (b) Tốc độ phân hủy
của hydrogeltrong cơ thể sống. (c) Nhuộm hóa mô miễn dịch tìm
CD11b và CD68 sau phẫu thuật 1, 2, 4, 8 và 12 tuần (đỏ: CD11b; xanh
lục: CD68; xanh lam: Hoechst 33342). Thanh tỷ lệ: 200tôim. Dữ liệu đại
diện cho SD trung bình của ba thí nghiệm độc lập.
sự phân ly của các chuỗi riêng lẻ trong hydrogel, cho thấy khả năng
phân hủy sinh học tích cực của hydrogel SCM4 và cho thấy tính phù
hợp của nó như một loại băng mô, do sự phân hủy chậm của vật liệu
sinh học có thể thúc đẩy sự phát triển của tế bào và thay thế mô cấy
bằng mô mới tự thân (Hình 4b).49Ngoài ra, chúng tôi đã đánh giátrong
cơ thể sốngkhả năng tương thích sinh học bằng phương pháp nhuộm
hóa mô miễn dịch huỳnh quang sử dụng đại thực bào (CD68) và bạch
cầu trung tính (CD11b) để mô tả các phản ứng miễn dịch tại chỗ. Hình
4c cho thấy hiện tượng kích ứng cấp tính sớm chỉ xuất hiện sau 1 đến 2
tuần sau khi cấy cả hydrogel SCM4 và SA; tuy nhiên, không có thêm tế
bào nào được quan sát thấy trong đạn sau 4 tuần ở cả hai nhóm.
Những kết quả này cho thấy hydrogel SCM4 thể hiện tốttrong cơ thể
sống khả năng phân hủy và tương thích sinh học, qua đó cho thấy khả
năng phù hợp của nó đối vớitrong cơ thể sốngcác ứng dụng.
trong cơ thể sốnglàm lành vết thương
Sau đó, chúng tôi đã đánh giá hydrogel bằng mô hình khiếm khuyết da
có độ dày đầy đủ để chứng minh hiệu quả chữa lành vết thương tiềm
tàng của hydrogel SCM4. Như được hiển thị trong Hình S8,† Hydrogel
SCM4 có thể bám dính chắc chắn vào các vị trí khiếm khuyết trên da
trên mô hình đóng vết thương ở chuột. Hình 5a cho thấy vết thương
Tạp chí này được © Hiệp hội Hóa học Hoàng gia 2020
Những tiến bộ của RSC
Hình 5Đánh giá hiệu quả điều trị của hydrogel SCM4. (a) Vết thương ở
ngày 0, 1, 4 và 7. (b) Tốc độ lành vết thương theo các phương pháp
điều trị khác nhau. ( c ) nhuộm H&E (ngày 1, 4 và 7) của phần mô chứa
hydrogel trong mô hình vết thương trên da chuột (đường chấm màu
đen biểu thị giao diện của da và hydrogel; mũi tên màu vàng biểu thị
các tế bào phát triển thành hydrogel). Thanh tỷ lệ: 200tôim. Dữ liệu đại
diện cho SD trung bình của ba thí nghiệm độc lập. *p <0,05;
* *p <0,01; ***p <0,001so vớiđiều khiển.
sự co lại của các nhóm SCM4, SA và nước muối lần lượt vào các
ngày 0, 1, 4 và 7. Đúng như dự đoán, khả năng phục hồi vết
thương của nhóm sử dụng hydrogel SCM4 đã được cải thiện so với
nhóm đối chứng (Hình 5a và b), trong đó hydrogel SCM4 thể hiện
các hoạt động phục hồi vết thương và tái tạo da tuyệt vời ở ngày
thứ 1 và thứ 4. đối với nhóm chứng và nhóm SA. Hoạt động này
được cho là do hoạt tính kháng khuẩn và cầm máu của chitosan,50
cũng như môi trường ẩm ướt của vết thương do băng hydrogel
cung cấp. Hơn nữa, như trong Hình 5c, hình ảnh nhuộm H&E khi
nghiên cứu giao diện cho thấy hydrogel duy trì tính toàn vẹn cấu
trúc và vẫn bám dính vào vị trí khiếm khuyết và mô xung quanh
trong quá trìnhtrong cơ thể sốngthử nghiệm chữa lành vết
thương. Giao diện chặt chẽ và liền mạch giữa hydrogel SCM4 và
mô xung quanh, do khả năng bám dính mạnh mẽ với mô da, đã
thúc đẩy quá trình di chuyển tế bào vào hydrogel SCM4 từ mô
nhanh hơn so với quan sát thấy trong nhóm SA (Hình 5c). Sau 4
ngày, chúng tôi đã quan sát thấy sự di chuyển của tế bào vào
hydrogel trong nhóm SA, với quá trình thẩm thấu và hợp nhất mô
hoàn toàn trong hydrogel vào ngày thứ 7. Những kết quả này cho
thấy rằngtại chỗHydrogel SCM4 sở hữu khả năng tích hợp mô và
kết hợp hình dạng tuyệt vời, cho phép nó bắt chước các đặc tính
của mô chủ. Hơn nữa, không cần bổ sung -xation và hydrogel thể
hiện khả năng chịu đựng tốt trong điều trị sau phẫu thuật, qua đó
chứng tỏ hiệu quả trong việc sửa chữa vết thương.
Kết luận
Tóm lại, chúng tôi đã phát triển một loại hydrogel liên kết mô mới
dựa trên sự kết hợp của chitosan, alginate và polyacrylamide.
Những hydrogel này đạt được sự tạo gel nhanh chóng và độ bám
dính mô tuyệt vời với mô ướt để thúc đẩy quá trình sửa chữa mô,
Tư vấn RSC,2020,10,17280–17287 |17285
Những tiến bộ của RSC
cũng như các đặc tính cơ học, tương thích sinh học và kháng
khuẩn tốt, từ đó đáp ứng các yêu cầu chính cho chất kết dính mô
hiện đại. Chúng tôi tin rằng những chất kết dính mô này sẽ mở
rộng tác động của việc sử dụng hydrogel trong kỹ thuật mô và có
tiềm năng lớn để sử dụng trong băng vết thương, phẫu thuật cấy
ghép và sửa chữa mô.
Xung đột lợi ích
Không có xung đột để tuyên bố.
Sự nhìn nhận
Xiaoxuan Tang và Xinyi Gu đã đóng góp như nhau cho tác phẩm
này. Nghiên cứu này được hỗ trợ tài chính bởi Chương trình
nghiên cứu và phát triển trọng điểm quốc gia của Trung Quốc (Dự
án số: 2018YFC1105603, 2017YFA0701304 và 2016YFC1101603),
Quỹ khoa học quốc gia Trung Quốc (Dự án số: 31830028,
81671823, 21702112) và Trung tâm y tế trọng điểm tỉnh Giang Tô.
Ghi chú và tài liệu tham khảo
1 J. Li, AD Celiz, J. Yang, Q. Yang, I. Wamala, W. Whyte,
BR Seo, NV Vasilyev, JJ Vlassak, Z. Suo và
DJ Mooney,Khoa học,2017,357,378–381.
2 S. Du-o, SL Thibeault, WH Li, Hz Shu và
GD Prestwich,mô Eng.,2006,12,2171–2180.
3 B. Sharma, S. Fermanian, M. Gibson, S. Unterman,
DA Herzka, B. Cascio, J. Coburn, AY Hui, N. Marcus,
GE Gold và JH Elisseeff,Khoa học. Dịch. Med.,2013,5, 167ra6.
4 Ông Prausnitz và R. Langer,Nat. Công nghệ sinh học.,2008,26,
1261–1268.
5 JY Li và DJ Mooney,Nat. Linh mục Mater.,2016,1,16071. 6 ET
Roche, R. Wohlfarth, JTB Overvelde, NV Vasilyev,
FA Pigula, DJ Mooney, K. Bertoldi và CJ Walsh,Khuyến cáo.
Mẹ ơi.,2014,26,1200–1206.
7 R. Feiner, L. Engel, S. Fleischer, M. Malki, I. Gal, A. Shapira,
Y. Shacham-Diamand và T. Dvir,Nat. Mẹ ơi.,2016,15,679–
685.
8 J. Qu, X. Zhao, YP Liang, TL Zhang, PX Ma và
BL Quách,Vật liệu sinh học,2018,183,185–199.
9 FF Chu, Y. Hong, Hz Zhang, L. Yang, J. Li, DM Jiang,
V. Bunpetch, YJ Hu, HW Ouyang và SF Zhang,Vật liệu ứng
dụng ngày nay,2018,13,32–44.
10 S. Liang, YY Zhang, HB Wang, ZY Xu, JR Chen, R. Bao,
Bởi Tan, YL Cui, GW Fan, WX Wang, W. Wang và
WG Lưu,Khuyến cáo. Mẹ ơi.,2018,30,1704235.
11 N. Annabi, YN Zhang, A. Assmann, ES Sani, G. Cheng,
QUẢNG CÁO Lassaletta, A. Vegh, B. Dehghani, GU Ruiz-Esparza,
XC Wang, S. Gangadharan, AS Weiss và 35 SM Lien, LY Ko và TJ Huang,Vật liệu sinh học Acta.,2009,5,
A. Khademhosseini,Khoa học. Dịch. Med.,2017,9,eaai7466.
12 KA Vakalopoulos, ZQ Wu, L. Kroese, GJ Kleinrensink,
J. Jeekel, R. Vendamme, D. Dodou và JF Lange,Ann. Phẫu
thuật.,2015,261,323–331.
17286 |Tư vấn RSC,2020,10,17280–17287
Giấy
13 Y. Hong, FF Chu, YJ Hua, Hz Zhang, CY Ni,
DH Pan, YQ Zhang, DM Jiang, L. Yang, QN Lin,
YW Zou, DS Yu, DE Arnot, XH Zou, LY Zhu,
SF Zhang và HW Âu Dương,Nat. Cộng đồng.,2019,10,2060.
14 DG Barrett, GG Bushnell và PB Messersmith,Khuyến cáo.
Y tế Mater.,2013,2,745–755.
15 L. Han, LW Yan, KF Wang, LM Fang, HP Zhang,
YH Tang, YH Ding, LT Weng, JL Xu, J. Weng,
YJ Liu, FZ Ren và X. Lu,NPG Châu Á Mater.,2017,9,e372.
16 H. Kamata, X. Li, UI Chung và T. Sakai,Khuyến cáo. Chăm sóc sức khỏe
Mẹ ơi.,2015,4,2360–2374.
17 BR Freedman và DJ Mooney,Khuyến cáo. Mẹ ơi.,2019,31,
1806695.
18 SJ Buwalda, KWM Boere, PJ Dijkstra, J. Feijen,
T. Vermonden và CHÚNG TÔI Hennink,J. Phát hành có kiểm soát,
2014,190,254–273.
19 JM Zhu và RE Marchant,Chuyên gia Rev. Med. Thiết bị,2011,
số 8,607–626.
20 BB Ding, HC Gao, JH Song, YY Li, LN Zhang,
XD Cao, M. Xu và J. Cai,Ứng dụng ACS Mẹ ơi. Giao diện,
2016,số 8,19739–19746.
21 KY Lee và DJ Mooney,Ăn xin. Polym. Khoa học.,2012,37,106–
126.
22 IL Kim, RL Mauck và JA Burdick,Vật liệu sinh học,2011,
32,8771–8782.
23 X. Zhang, YH Yang, JR Yao, ZZ Shao và X. Chen,ACS
Hóa học bền vững. Anh.,2014,2,1318–1324.
24 NC Cheng, WJ Lin, TY Ling và TH Young,Acta
Biomat.,2017,51,258–267.
25 ZT Bao, CH Xian, QJ Yuan, GT Liu và J. Wu,Khuyến cáo.
Y tế Mater.,2019,số 8,1900670.
26 R. Dimatteo, NJ Darling và T. Segura,Khuyến cáo. Vận chuyển ma túy
Mục sư,2018,127,167–184.
27 DA Gyles, LD Castro, JOC Silva và RM Ribeiro-
Costa,Euro. Polym. J.,2017,88,373–392.
28 JL Drury và DJ Mooney,Vật liệu sinh học,2003,24,4337–
4351.
29 M. Braun, M. Menges, F. Opoku và AM Smith,J. Exp.
Biol.,2013,216,1475–1483.
30 JY Sun, XH Zhao, WRK Illeperuma, O. Chaudhuri,
KH Oh, DJ Mooney, JJ Vlassak và ZG Suo,Thiên nhiên, 2012,
489,133–136.
31 D. Leal, B. Matsuhiro, M. Rossi và F. Caruso,Cacbohydrat.
Độ phân giải,2008,343,308–316.
32 DR Biswal và RP Singh,Cacbohydrat. Polym.,2004,57,
379–387.
33 I. Kim, JS Choi, S. Lee, HJ Byeon, ES Lee, BS Shin,
HG Choi, KC Lee và YS Youn,J. Phát hành có kiểm soát, 2015,
214,30–39.
34 Y. Bu, L. Zhang, J. Liu, L. Zhang, T. Li, H. Shen, X. Wang,
F. Yang, P. Tang và D. Wu,Ứng dụng ACS Mẹ ơi. Giao diện,
2016,số 8,12674–12683.
670–679.
36 N. Annabi, JW Nichol, X. Zhong, CD Ji, S. Koshy,
A. Khademhosseini và F. Dehghani,Công nghệ mô, Phần B,
2010,16,371–383.
Tạp chí này được © Hiệp hội Hóa học Hoàng gia 2020
Giấy
37 KL Menzies và L. Jones,Tối ưu. Vis. Khoa học.,2010,87,387–
399.
38 I. Jeon, JX Cui, WRK Illeperuma, J. Aizenberg và
JJ Vlassak,Khuyến cáo. Mẹ ơi.,2016,28,4678–4683.
39 P. Wang, GH Deng, LY Zhou, ZY Li và YM Chen,ACS
Macro Lett.,2017,6,881–886.
40 Y. Yu, H. Yuk, GA Parada, Y. Wu, XY Liu, CS Nabzdyk,
K. Youcef-Toumi, JF Zang và XH Zhao,Khuyến cáo. Mẹ ơi.,
2019,31,1807101.
41 C. Ghobril và MW Grinstaff,Chem. Sóc. Mục sư,2015,44,
1820–1835.
42 L. Gao, YL Chu, JL Peng, C. Xu, Q. Xu, M. Xing và
J. Chang,NPG Châu Á Mater.,2019,11,66.
43 XM Tôn, Q. Lang, HB Zhang, LY Cheng, Y. Zhang,
GQ Pan, X. Zhao, HL Yang, YG Zhang, HA Santos và WG Cui,
Khuyến cáo. Chức năng. Mẹ ơi.,2017,27,1604617.
Tạp chí này được © Hiệp hội Hóa học Hoàng gia 2020
Những tiến bộ của RSC
44 SQ Li, SJ Dong, WG Xu, SC Tú, LS Yan, CW Zhao,
JX Đinh và XS Chen,Khuyến cáo. Khoa học.,2018,5,1700527.
45 X. Zhao, P. Li, BL Guo và PX Ma,Vật liệu sinh học Acta.,2015,
26,236–248.
46 CQ Qin, Q. Xiao, HR Li, M. Fang, Y. Liu, XY Chen và
Q.Lí,Int. J. Biol. Macromol.,2004,34,121–126.
47 J. Li, XX Tang, P. Zhu, YH Zhao, J. Ling và YM Yang,J.
Sinh vật học. mô Eng.,2018,số 8,1725–1734.
48 JL Drury và DJ Mooney,Vật liệu sinh học,2003,24,4337–
4351.
49 YN Zhang, RK Avery, Q. Vallmajo-Martin, A. Assmann,
A. Vegh, A. Memia, BD Olsen, N. Annabi và
A. Khademhosseini,Khuyến cáo. Chức năng. Mẹ ơi.,2015,25,4814–4826.
50 H. Ueno, T. Mori và T. Fujinaga,Khuyến cáo. Rev. giao thuốc,
2001,52,105–115.
Tư vấn RSC,2020,10,17280–17287 |17287