Cours 2 : Biocell - LE NOYAU ET LES TRANSPORTS NUCLEO-CYTOPLASMIQUES

Le noyau forme un compartiment volumineux (3 à 10 % du diamètre soit 20 à 25 % du volume cellulaire total selon les cellules),
présent dans toutes les cellules eucaryotes sauf les hématies. Il peut être présent en un seul ou plusieurs exemplaires par cellule
(cas des cellules musculaires striées squelettiques qui sont polynucléées).
Le noyau est le compartiment délimité par l’enveloppe nucléaire qui sépare le nucléoplasme du cytoplasme.

Fig1 : Schéma d’un noyau d’une cellule eucaryote.

Le nucléoplasme renferme :
– L’information génétique compactée sous forme de chromatine (chaque chromosome y occupe une place défi nie).
– La matrice nucléaire ou nucléosquelette qui comprend la lamina nucléaire : couche protéique de 0,2 µm d’épaisseur située au
contact de la membrane nucléaire interne. Les lamines font partie de la famille des filaments intermédiaires.
– Un ou plusieurs nucléoles.
L’ENVELOPPE NUCLEAIRE : est composée d’une double membrane (une membrane externe et une membrane interne)
dont les deux faces sont en contact avec des filaments intermédiaires :
- La membrane externe est associée à des ribosomes et est en continuité avec les membranes du réticulum endoplasmique. Elle est
en contact avec la corbeille périnucléaire.
- La membrane interne est associée à une formation intranucléaire superficielle d’aspect fibreux : la lamina nucléaire.

Fig2 :Cytosquelette nuléaire (lamine)

Structure des pores nucléaires :

Un pore nucléaire est structure complexe en « panier de basket » et de symétrie d’ordre 8 car la périphérie du pore est bordée
par une structure cylindrique, l’annulus, organisée suivant une symétrie octogonale (8 sous unités annulaires).
Sur la face hyaloplasmique du complexe, le pore est en relation avec des microfilaments (du cytosquelette), perpendiculaires à la
surface de l’enveloppe; Au sein du pore, on retrouve deux grands anneaux de taille identique ancrés sur les deux faces (diamètre :
120 nm). Chacun des deux anneaux est relié au transporteur central par 8 bras radiaires.
- Sur la face nucléoplasmique, un troisième anneau de diamètre inférieur est situé dans le nucléoplasme. Il est relié à l’anneau de la
face nucléoplasmique par des microfilaments organisés en cage. La lamina nucléaire est interrompue au niveau du pore.

Fig3 : Vue de profil d’un pore nucléaire (schéma globale et coupe transversale)

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Les échanges nucléo-cytoplasmiques :

Fig5 : Le transport différentiel des molécules

Les échanges se déroulent dans les deux sens :

• Du cytosol vers le nucléoplasme = Import. • Du nucléoplasme vers le cytosol = Export.

Fig6 : Echanges nuléocytoplasmiques

Transport des molécules de PM < 40 kDa

Cela concerne les nucléotides, les ions et les petites protéines. Ces molécules traversent les pores par diffusion, sans
consommation d’énergie. Elles empruntent les canaux latéraux.
Transport des molécules de PM > 40 kDa
Ces molécules empruntent le transporteur central et leur transport consomme de l’énergie. Le transport se fait en quatre
étapes successives :
Étape 1 : Dans le compartiment de départ, la molécule à transporter (= cargo) s’associe à deux types de protéines spécialisées
pour former un complexe d’importation ou d’exportation.
• Les complexes d’importation sont formés d’importine Ran.
Les protéines importées portent une séquence signal NLS (Nuclear Localization Signal).
• Les complexes d’exportation sont formés d’exportine et de la protéine Ran. Les protéines exportées portent une séquence
signal NES (Nuclear Exportation Signal).
Étape 2 : Les importines et les exportines des complexes interagissent avec les nucléoporines pour faciliter le transport.
Étape 3 : Dans le compartiment d’arrivée, le complexe se dissocie et libère la molécule transportée.
Étape 4 : Les importines et les exportines retournent dans le compartiment de départ en empruntant le transporteur central.
Remarque : Ran est une protéine G monomérique qui présente une activité
GTPasique faible. Cette activité est fortement stimulée par Ran GAPGAP est exclusivement cytoplasmique, en conséquence
Ran-GDP est cytosolique. Ran-GAP est localisé au niveau du complexe de désassemblage qui situé sur les filaments cytosoliques
Accrochés au grand anneau cytosolique des pores nucléaires.
L’échange de GDP par GTP est stimulé par RanGEF. RanGEF est exclusivement nucléaire, en conséquence, Ran-GTP est
localisé dans le noyau.

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Fig7 :02 voies des transports nucléo-cytoplasmiques. Fig8 :Cycle de protein G monomérique

Fig9 : Formation du complexe d’import ou D’export. Fig10 : Importation des protéines portant la séquence
NLS

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L'importation de protéines nucléaires à travers le CPN concentre des protéines spécifiques

dans le noyau. La cellule obtient l'énergie dont elle a il a besoin de ce processus à travers l'hydrolyse du GTP
par le monomère GTPase Ran. Ran se trouve à la fois dans le cytosol et le noyau, et il est nécessaire
à la fois pour l'importation et l'exportation nucléaires. Deux protéines régulatrices spécifiques de Ran
déclenchent la conversion entre les deux états: une protéine cytosolique activant la GTPase (GAP)
déclenche l'hydrolysase du GTP et convertit ainsi le Ran-GTP en Ran-GDP, et un facteur d’échange de
guanine nucléaire (GEF) favorise l'échange de GDP pour le GTP et convertit ainsi Ran-GDP à Ran-GTP.
Parce que Ran-GAP est situé dans le cytosol et Ran-GEF et dans le noyau, le cytosol contient
principalement Ran-GDP, et le noyau contient principalement Ran-GTP (Fig9)

-Etude de cas des cellules T

- Le désassemblage de l'enveloppe nucléaire au cours de la mitose :

Les lamines nucléaires, située du côté nucléaire de la membrane nucléaire interne, est un réseau de sous-
unités protéiques interconnectées appelées lamines nucléaires. Les lamines sont une classe spéciale de
protéines de filaments intermédiaires qui polymérisent en un réseau bidimensionnel (Figure 2).
Les lamines nucléaires donnent une forme et stabilité à l'enveloppe nucléaire à laquelle elle est ancrée
par la fixation à la fois aux CPN et les protéines membranaires intégrales de la membrane nucléaire
intérieur.

Les lamines interagissent également directement avec la chromatine, qui elle-même interagit avec les
protéines membranaires intégrales de la membrane nucléaire interne. Ensemble avec les lamines, ces
protéines membranaires internes fournissent des liens structurels entre l'ADN et l'enveloppe nucléaire.

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Quand un noyau se désassemble pendant la mitose, la lamine nucléaire se dépolymerise. Le désassemblage

est au moins en partie une conséquence de la phosphorylation directe des lamines nucléaires par la
protéine kinase dépendante de la cycline Cdk qui est activée au début de la mitose. En même temps, les
protéines de la membrane nucléaire interne sont phosphorylées et les CPN se désassemblent et se dispersent
dans le cytosol. Au cours de ce processus, certaines protéines de CPN se lient aux récepteurs d'importation
nucléaire, qui jouent un rôle important dans le réassemblage des CPN à la fin de la mitose.

Summary
The nuclear envelope consists of an inner and an outer nuclear membrane. The outer membrane is continuous with
the ER membrane, and the space between it and the inner membrane is continuous with the ER lumen. RNA
molecules, which are made in the nucleus, and ribosomal subunits, which are assembled there, are exported to the
cytosol; in contrast, all the proteins that function in the nucleus are synthesized in the cytosol and are then imported.
The extensive traffic of materials between the nucleus and cytosol occurs through nuclear pore complexes (NPCs),
which provide a direct passageway across the nuclear envelope. Small molecules diffuse passively through the NPCs,
but large macromolecules have to be actively transported.
Proteins containing nuclear localization signals are actively transported inward through NPCs, while RNA
molecules and newly made ribosomal subunits contain nuclear export signals, which direct their outward active
transport through NPCs. Some proteins, including the nuclear import and export receptors, continually shuttle
between the cytosol and nucleus. Ran-GTPase provides both the free energy and the directionality for nuclear
transport. Cells regulate the transport of nuclear proteins and RNA molecules
through the NPCs by controlling the access of these molecules to the transport machinery.
Because nuclear localization signals are not removed, nuclear proteins can be imported repeatedly, as is required
each time that the nucleus reassembles after mitosis.