Postupak pripreme uzorka u

biohemijskoj laboratoriji

Dr med Regina Ristić

10.05.2022, Novi Sad

Uputstva za pripremu pacijenata pre uzorkovanja i
uzorkovanje biološkog materijala (krv i uzorci drugog
biološkog materijala).

➢ dan pre uzimanja uzorka krvi potrebno je izbegavati

intenzivnu fizičku aktivnost i uzeti uobičajene obroke
hrane, ali ne premasne
➢ posle 18 sati uveče, dan pre odlaska u laboratoriju, ne
uzimati hranu, piti alkohol i pušiti
➢ ako se zna da neka farmakološki aktivna supstanca
(lekovi, alkohol, kofein, nikotin,sredstva zavisnosti,
oralni kontraceptivi) značajno utiče na koncentraciju
parametra koji se meri, treba, ako je moguće,
izbegavati najmanje dva dana pre uzimanja krvi
➢ ne ukidati lek kad se određuje koncentracija leka u
krvi
➢ budući da su preporučene vrednosti i referentni
intervali dobijeni uzimanjem uzoraka u vremenu
između 7 i 10 sati pre podne pre konzumiranja bilo
kakvog jela i pića, potrebno je pod istim uslovima
uzeti i uzorak od pacijenta
➢ parametri za koje je naročito važno da se određuju iz
uzorka uzetog natašte su: glukoza, gvožđe, lipidi i
alkalna fosfataza budući da su promene nastale
unosom hrane najveće upravo kod tih analiza
➢ parametri koji pokazuju značajne promene u
koncentraciji tokom dana su: bilirubin, neorganski
fosfat i trigliceridi
Najznačajnije i najčešće greške zbog nepridržavanja
uputstava za pravilnu pripremu
Činioci Delovanje

Ishrana i dodaci ishrani Povećani:

holesterol, trigliceridi, glukoza, gvožđe, ALP
Fizički napor Povećani:
CK, laktat, urat, ubrzanje fibrinolize

Stojeći stav
Povećani:
Položaj tela eritrociti, Le, Hb, proteini, kalcijum

I povećani i smanjeni:
Doba dana hormoni, gvožđe, bilirubin, elektroliti, leukociti

Kratkoročno:
Povećana glukoza, trigliceridi
Alkohol Dugoročno:
Povećani GGT, MCV, Smanjeni PV,Trc

Pušači:
Pušenje Povećani eritrociti, leukociti, karboksihemoglobin, CEA
Smanjeni imunoglobulin, B12
Uputstvo za pripremu pacijenta pre određivanja lipidnog
statusa:
➢ Dve nedelje pre uzimanja uzorka krvi uobičajeno se
hraniti i izbegavati promene u telesnoj težini
➢ 48 sati pre uzimanja uzorka krvi izbegavati intenzivnu
fizičku aktivnost i ne uzimati alkohol
➢ 24 sata pre uzimanja uzorka krvi uzimati uobičajene
obroke hrane ali ne premasne (izbegavati preterani
unos kalorija)
➢ 12 sati pre uzimanja uzorka krvi ne uzimati hranu, piti
alkohol, kafu i ne pušiti
➢ Određivanje holesterola ne treba raditii pre nego što
prođe 8 nedelja od: akutnog infarkta miokarda,
moždanog udara, hirurške operacije, traume,
sekundarne bolesti sa promenama u metabolizmu
lipida i akutne bakterijske ili virusne infekcije
Uputstvo za pripremu pacijenta pre određivanja gvožđa:

➢ 24-48 sati pre uzimanja uzorka krvi ne treba piti

sokove obogaćene vitaminima i energetska pića koja
pojačavaju tonus organizma

➢ krv od pacijenta uzeti ujutru između 7 i 10 sati

(standardizovano vreme) jer gvožđe ima značajnu
dnevnu varijaciju (i do 70%)
➢ Ako je pacijent pod terapijom preparatima gvožđa i/ili
multivitaminskim preparatima obogaćenim gvožđem,
kontrola gvožđa u serumu izvodi se najmanje:
➢ 7 do 10 dana posle peroralnog uzimanja preparata
gvožđa,
➢ tri dana posle davanja intravenoznih preparata,
➢ mesec dana posle intramuskularnog davanja gvožđa
➢ Koncentracije gvožđa u serumu su povećane kod
pacijenata koja su pod terapijom acetilsalicilne
kiseline, hloramfenikola, oralnih kontraceptiva,
multivitamina, hemoterapijskih agenasa (posebno
cisplatina i metotreksata)
➢ Određivanje gvožđa ne treba izvoditi u stanju akutne
bakterijske ili virusne infekcije. Stanja koja takođe
utiču na određivanje gvožđa su: trudnoća, menstrualni
ciklus, hormoni i hormonalna terapija i dr.
Uputstvo za pripremu pacijenta i provođenje testa oralne
tolerancije na glukozu-OGTT:
➢ test se izvodi ujutru između 7 i 8 sati, pošto je pacijent
bio natašte (8-14 sati), a tri dana pre toga na
uobičajenoj ishrani zasićenoj ugljenim hidratima
(hleb, pirinač, testenina, krompir) i bez ograničavanja
fizičke aktivnosti
➢ za vreme testa koji traje 2 sata, pacijent miruje, ne sme
da puši, jede, pije kafu ili druga pića
➢ test se ne izvodi ukoliko je vrednost glukoze u krvi >
10,0 mmol/L
Uputstvo za pripremu pacijenta za određivanje
postprandijalne koncentracije glukoze:
➢ za izvođenje testa pacijenti se primaju isključivo do
08.30 sati

➢ tri dana pre izvođenja testa pacijent mora biti na

ishrani zasićenoj ugljenim hidratima

➢ bolesniku se prvo uzorak krvi izvadi natašte. Posle

toga pacijentu se Tačno dva sata posle konzumiranja
uobičajenog doručka, ponovno uzorakuje krvi.

➢ test oralne podnošljivosti glukoze ne izvodi se ukoliko

je vrednost glukoze u krvi > 10,0 mmol/L
Uputstvo za pripremu pacijenta i uzimanje krvi za
određivanje amonijaka:
Priprema pacijenta
➢ ukoliko je pacijent pušač, 12 sati pre vađenja krvi
mora da se temeljno okupa i promeni odeću drugom
koja nije bila izložena duvanskom dimu, pa posle toga
ne sme da puši i boravi u prostoriji zagađenoj
duvanskim dimom ili isparenjima urina do vađenja
krvi (jedna cigareta povećava koncentraciju amonijaka
oko 10 µmol/L)
➢ to se odnosi i za nepušače koji borave u prostorijama
zagađenim duvanskim dimom
➢ u prostoriji u kojoj boravi pacijent ili osoblje koje vadi
krv, ne sme biti uzoraka urina bez poklopaca
➢ osoba koja vadi krv (preporučuje se da je nepušač)
mora dobro da opere ruke sapunom pre vađenja krvi
Uputstvo za pripremu pacijenata za određivanja polnih
hormona folikulostimulirajućeg (FSH), luteotropnog
(LH), estradiola (E2) i progesterona
Preporučeno vreme uzorkovanja krvi u toku
menstrualnog ciklusa:
➢ 3. – 5. dan menstrualnog ciklusa za određivanje FSH,
LH i E2

➢ 21. – 23. dan menstrualnog ciklusa za određivanje

PROGESTERONA

➢ u dogovoru s lekarom, ako je moguće, izbegavati

najmanje dva dana pre uzimanja krvi: steroide, lekove
za štitnjaču, ACTH, estrogen, gonadotropine.
➢ PROLAKTIN test se izvodi pre podne; preporučeno
vreme za uzimanje uzorka krvi je 3 - 4 sata posle
buđenja, pošto je pacijent bio 8 - 14 sati natašte i
mirovao minimalno 30 min pre uzorkovanja krvi

TESTOSTERON:
➢ Muškarci: rani jutarnji uzorak

➢ Žene: rani jutarnji uzorak u toku folikularne faze

menstrualnog ciklusa
Uputstvo za pripremu pacijenta pre određivanja
tumorskih markera
➢ Tumorski markeri se određuje natašte. Određivanje
PSA preporučuje se pre bilo kakve manipulacije
prostatom (npr. biopsija prostate, vožnja biciklom,
polna aktivnost i dr.) i najmanje 5 dana posle
digitorektalnog pregleda (DRP-a) zbog značajnog
uticaja na tačnost rezultata.
➢ Određivanje free PSA (fPSA) i odnosa (fPSA/tPSA)
radi se isključivo na preporuku specijaliste urologa.
➢ Ne treba određivati CA 125 i CA 15-3 kod
pacijentkinja koje imaju menstruaciju (odložiti za
sedam dana).
Uputstvo za određivanje gasnih analiza, acidobazne
ravnoteže, derivata hemoglobina (karboksihemoglobin,
methemoglobin, oksihemoglobin i dezoksihemoglobin) i
jonizovanog kalcijuma
➢ Uzorkovanje krvi za određivanje acidobazne
ravnoteže, sprovodi se pod anaerobnim uslovima da bi
se izbegla kontaminacija vazduhom.
➢ Najčešća vrsta uzorka za analizu je arterijska krv, ređe
uzorak mešane venske krvi iz plućne arterije ili uzorak
kapilarne krvi (mešavina krvi iz arteriola, venula i
kapilara).
Za gasnu analizu primarno se koriste uzorci arterijske
krvi, a uzorkuju ga osposobljeni laboratorijski tehničari
za to. Izvori grešaka koji utiču na tačnost rezultata su:
➢ mehurići vazduha u uzorku

➢ nedovoljan volumen krvi u špricu ili kapilari

➢ nedovoljno mešanje uzorka krvi s antikoagulansom

➢ duži vremenski period od uzimanja i dostave uzorka u

laboratoriju (treba odmah)
➢ Za određivanje jonizovanog kalcijuma krv se uzorkuje
u posebne špriceve ili kapilare koje sadrže
kalcijumom pre-tretirani heparin kako bi se izbegli
lažno sniženi rezultati.
➢ rezultat jonizovanog kalcijuma zavisi od pH vrednosti
krvi pacijenta
➢ odnos jonizovanog i vezanog kalcijuma zavisi od
koncentracije albumina.
➢ promene pH utiču na vezivanje kalcijuma za albumin
jer negativno naelektrisani aminokiselinski ostaci vežu
jonizovani kalcijum - prema tome je kod acidoze broj
negativno naelektrisanih veznih mesta smanjen pa je
koncentracija jonizovanog kalcijuma veća, a kod
alkaloze obratno
➢ kod zdravih pacijenata u opsegu referentnih vrednosti
pH i koncentracije albumina u krvi, koncentracija
ukupnog kalcijuma je u korelaciji sa koncentracijom
jonizovanog kalcijuma
Specifičan pristup pojedinim testovima hemostaze
➢ pacijentima koji su na oralnoj antikoagulantnoj terapiji
ne uzima se uzorak za analize: protein C, protein S,
lupus antikoagulans (LAC), rezistencija na aktivirani
protein C (APCR)
➢ pacijenti kojima se ispituje funkcija trombocita
(agregometrija), sedam dana pre izvođenja testa ne
treba da uzimaju Andol, Aspirin i druge nesteroidne
antiinflamatorne lekove (indometacin, ibuprofen)
zbog uticaja terapije na rezultate
➢ izuzetak su pacijenti kojima lekar izričito traži anlizu
zbogkontrole specifične terapije ili hitne preoperativne
obrade
Uputstvo za pripremu pacijenta pre i uzimanje mokraće
za kvalitativnu i kvantitativnu analizu
Uputstvo za pripremu pacijenta i uzimanje mokraće za
kvalitativnu analizu mokraće:
➢ uzorak koji se analizira je srednji mlaz prve jutarnje
mokraće posle noćnog sna, toalete genitalija, pre
doručka i drugih aktivnosti
➢ vreme od poslednjeg pražnjenja bešike treba biti
najmanje 4, a najviše 8 sati
➢ ostali uzorci su bilo koji dnevni uzorak mokraće uzeti
posle obavljene toalete genitalija (uzima se srednji
mlaz)
➢ analiza mokraće se ne preporučuje ženama
neposredno pre, za vreme i neposredno posle
menstruacije kao ni kod žena koje imaju vidljiv
vaginalni iscedak
➢ uzorak mokraće treba sakupljati u hemijski potpuno
čistu (sterilnu) posudu sa širokim grlom za
jednokratnu upotrebu i bez aditiva
➢ pregled uzorka mokraće treba da se uradi unutar 2 sata
(najkasnije 4 sata) po uzimanju uzorka, pošto je
uzorak doveden na sobnu temperaturu
➢ Za određivanje melanina, uzorak mokraće mora biti
sasvim svež i zaštićen od svetla. Preporučuje se
određivanje u tri uzastopna jutarnja uzorka
Uputstvo za pripremu pacijenta i uzimanje 24h - mokraće
za kvantitativnu analizu mokraće:

➢ mokraću sakupljati u suvu odgovarajuću hemijski

potpuno čistu i osušenu posudu koja se čuva na
hladnomi tamnom mestu (frižider)

➢ posude ne treba prati deterdžentom jer tragovi

deterdženta utiču na analizu.Preporučuje se plastična
boca u kojoj je bila obična voda (dobro isprati po
mogućstvu destilovanom vodom i osušiti)

➢ za vreme sakupljanja mokraće pacijent ne sme da

uzima diuretike, kafu i alkohol
Način skupljanja 24h- mokraće:
Mokraća se sakuplja posle noćnog sna, toalete genitalija,
pre doručka i drugih aktivnosti:
➢ ujutru, npr. u 6 sati se potpuno isprazni bešika (prva
jutarnja mokraća), a zatim se u posudu sakuplja sva
izmokrena mokraća u toku dana i noći, uključujući i
prvu jutarnju mokraću sledećeg jutra, takođe u 6 sati

➢ voditi računa da se mokraća ne zaprlja sa stolicom

(tokom defekacije se ne sme mokriti)

➢ celokupnu mokraću (po potrebi više posuda) isti dan

doneti u laboratoriju do 9:30 sati
Za određivanje klirensa kreatinina sakupiti 24-časovnu
mokraću, a potom ujutru natašte izvaditi krv.
➢ Potrebni su podaci o visini i težini pacijenta, a u
laboratoriji se izmeri količina mokraće.

➢ Ako pacijent ima kateter, onda svakako treba voditi

računa o tome da se vrećica katetera isprazni pre
početka sakupljanja mokraće.

➢ To znači da u 7 sati ujutru treba isprazniti vrećicu

katetera, mokraću baciti u WC, i u toku celog dana i
noći mokraću sakupljati u pripremljene posude.

➢ Sledeće jutro, u 7 sati isprazniti vrećicu katetera u

posudu u koju se sakuplja mokraća
➢ Za određivanje melanina, uzorak mokraće koja mora
biti sasvim svež i zaštićen od svetla. Preporučuje se
određivanje u tri uzastopna jutarnja uzorka.

➢ Uputstvo za sakupljanje 24-h mokraće za određivanje

ukupnih porfirina i porfirinskih prekursora (DALK,
PBG) - mokraća se sakuplja na isti način kao i za
klirens kreatinina uz obvezu čuvanja uzorka mokraće
u tamnim bocama i na hladnom (mokraća se može
čuvati i u prozirnim bocama, ali ih je onda potrebno
obložiti aluminijskom folijom da bi se sprečilo
izlaganje uzorka svetlu
Uputstvo za pripremu pacijenta i uzimanje stolice na
okultno krvarenje
Preporučuje se analiziranje tri uzastopne stoliceza tri
dana i to po dva uzorka sa različitih mesta iz svake
stolice.
Dijeta:
➢ 3 dana pre i tokom testiranja izbegavati crveno meso
(govedina, jagnjetina i jetra)
➢ 2 dana pre testa i dok je test u toku izbegavati: ren,
repu, karfiol, brokoli, tikvice, artičoke i pečurke, kao i
preparate gvožđa.
➢ tri dana pre i tokom testiranja, izbegavati vitamin C u
količini >250 mg/dan.
➢ Sedam dana pre i tokom testiranja, izbegavati
nesteroidne anti-inflamatorne lekove kao što je
ibuprofen, naproksen ili aspirin
Dodatni zahtevi:
➢ ne sprovoditi test tokom menstrualnog ciklusa, kod
krvarenja iz hemoroida, proliva i hematurije

➢ preporučuje se hrana bogata vlaknima kao što su hleb

od mekinja, integralne kaše, kuvano voće i povrće,
kokice, orašasti plodovi i dr.

➢ Ukoliko se izvodi IMUNOHEMIJSKI TEST nije

potreban poseban način ishrane pre uzimanja uzoraka,
jer test ne podležeinterferencijama.
Uputstvo za pripremu pacijenta za analizu sperme
(spermogram)
➢ pored neophodne apstinencije pacijenta, u trajanju od
3-5 dana, u ovom periodu treba smanjiti ili potpuno
isključiti pušenje i uzimanje alkohola

➢ uzorak sperme se daje neposredno u laboratoriji

➢ uzorak sperme može i da se donose u laboratoriju, ali

to treba da se učini u što kraćem vremenskom periodu,
do 30 minuta od ejakuliranja, i pomogućnosti u termos
posudi na temperaturi od 37°C

➢ za spermokulturu pacijent pre davanja uzorka sperme

treba da urinira
Hvala na pažnji!