‫دراسة العالقة بين الفطريات المعزولة من الثمار وبكتيريا الشعاعيات‬

‫عالية المري‬

‫مقرر تقنية الكائنات الدقيقة حدق ‪566‬‬

‫‪1‬‬
 ‫المحتويات‬
‫‪.............................................................................................................................................3‬األدوات‪:‬‬
‫‪.......................................................................................................................................4‬طريقة العمل‪:‬‬

‫‪..............................................................................4‬عزل الفطريات ‪1.‬‬

‫‪.............................................................................................................................4‬العزل االولي ‪:‬‬
‫‪................................................................................................................................5‬العزل الثاني‪:‬‬

‫‪...............................................................................6‬تنقية الفطريات ‪2.‬‬

‫‪ ( actinomycetes )............................6‬عزل وتنقية بكتيريا الشعاعيات ‪3.‬‬
‫‪..................................................7‬فحص العينات تحت المجهر الضوئي‪4. :‬‬
‫‪.......................................................7‬خطوات الفحص المجهري الضوئي وصبغ الشرائح المجهرية للفطريات‪:‬‬
‫‪........................................................8‬خطوات الفحص المجهري الضوئي وصبغ الشرائح المجهرية للبكتيريا ‪:‬‬

‫‪ 8‬صبغ العينات بصبغة غرام‪ :‬‬

‫‪.........................................................................9‬دراسة العالقة ما بين الفطريات المعزولة وبكتيريا الشعاعيات‪5.‬‬
‫‪.....................9‬فحص العالقة ما بين الفطريات المعزولة وبكتيريا الشعاعيات بواسطة المجهر االلكتروني الماسح والنافذ‪6.‬‬
‫‪...............................................................................................................................................9‬النتائج‪:‬‬
‫‪...........................................................................................................................................19‬المناقشة‪:‬‬
‫‪..........................................................................................................................................19‬المراجع‪:‬‬

‫‪2‬‬
 ‫الهدف من التجربة‪:‬‬

‫تغير هدف التجربة بالكامل‬

‫تستخدم الفطريات في العديد من العمليات الصناعية‪ ،‬مثل إنتاج اإلنزيمات ‪ ،‬والفيتامينات ‪ ،‬والسكريات المتعددة ‪ ،‬والكحول‬
‫المتعدد الهيدروجين ‪ ،‬واألصباغ ‪ ،‬والدهون ‪ ،‬والجليكوليبيدات والمضادات الحيوية ‪ ,‬يتم إنتاج بعض هذه المنتجات تجارًيا في‬
‫حين أن البعض اآلخر يحتمل أن تكون له قيمة في مجال التكنولوجيا الحيوية‪ .‬المستقلبات الثانوية الفطرية مهمة للغاية لصحتنا‬
‫وتغذيتنا ولها تأثير اقتصادي هائل‪ .‬باإلضافة إلى تسلسل تفاعالت التخمر المتعددة‪ ،‬تعد الفطريات مفيدة للغاية في تنفيذ عمليات‬
‫التحول األحيائي (‪)1‬‬

‫نستعرض في هذه التجربة عزل الفطريات من مصادر مختلفة من الثمار والحصول على عزالت فطرية نقية بهدف اجراء‬
‫الدراسات والتقنيات الحيوية عليها‬

‫األدوات‪:‬‬

‫مصادر مختلفة من الثمار (طماطم‪ ،‬فراولة‪ ،‬عنب‪ ،‬تين)‪.‬‬

‫أوساط غذائية للنمو مثل ‪.PDA‬‬

‫مواد مثبطة لنمو البكتيريا على األوساط الزراعية الفطرية مثل (‪.)rose Bengal‬‬

‫حضان فطريات بدرجة حرارة ‪ 25‬درجة مئوية‪.‬‬

‫أدوات تعقيم (ديتول‪ ،‬ورق ترشيح‪ ،‬ملقط‪ ،‬كحول‪ ،‬قطن‪ ،‬لهب)‪.‬‬

‫‪5‬مل من مركب هيبوكلوريت و‪ 95‬مل ماء مقطر‪.‬‬

‫ماء معقم وبيكر للتطهير السطحي للثمار‪.‬‬

‫طريقة العمل‪:‬‬

‫عزل الفطريات‬

‫العزل االولي ‪:‬‬

‫تحضير األوساط الغذائية‪.‬‬

‫‪-‬وزن ‪ 39‬جرام لكل لتر من الماء المقطر مع إضافة القليل من مادة ‪ rose bengal‬تركيز ‪ 0.005‬لكل لتر ‪ ,‬للحد من نمو‬
‫البكتيريا‬

‫‪3‬‬
 ‫‪-‬تعقيم الميديا على درجة ‪ 121‬لمدة ‪ 15‬دقيقة وتوزيعها على اطباق بتري حتى تتصلب‪.‬‬

‫‪-‬تعليم كل من االطباق بالبيانات التالية (اسم الميديا – مصدر العزل – التاريخ – اسم الباحث)‬

‫‪ -‬استخدام طبق يحتوي على بيئة ‪ PDA‬فقط الستخدامه (كنتيجة سلبية ) الشكل (‪)1‬‬

‫تحضير العينة‪.‬‬

‫تم احضار العينة وشملت (طماطم) ثم وضعها بمادة الهيبوكلوريت المخفف ‪ %/5‬الشكل (‪ )2‬وتم تحضيره بإضافة ‪ 5‬مل من‬
‫مادة الهيبوكلرويت الى ‪ 95‬مل من الماء المقطر في بيكر لتطهير العينات لمدة ‪ 5‬دقائق ثم غسلها عدة مرات بالماء المعقم‬
‫إلزالة آثار المادة المطهرة قبل تلقيحها على اطباق بتري‪ .‬والهدف من التعقيم السطحي التخلص من الميكروبات النامية على‬
‫السطح باإلضافة الى التخلص من البكتيريا‪.‬‬

‫‪)1‬‬ ‫الشكل (‬
‫نتيجة‬
‫سلبية‬
‫‪)2‬‬ ‫الشكل (‬
‫نموذج‬
‫لتتعقيم‬
‫الثمار‬
‫قبل العزل‬

‫تلقيح االطباق‪.‬‬

‫بعد التطهير السطحي للعينات‪ ،‬تم تجفيف الثمار بواسطة ورق ترشيح معقم وبواسطة ملقط معقم بالتلهيب الكحولي تم اخذ جزء‬
‫من البذور وتلقيحها في منتصف الوسط الغذائي المحضر سابقًا‬

‫تحضين االطباق‪.‬‬

‫‪4‬‬
 ‫تم تحضين االطباق في حضان فطري لمدة ‪ 7-5‬أيام في درجة ‪ 27‬درجة مئوية لتنقية العازالت الفطرية‪ .‬ثم ُسجلت النتائج‬

‫العزل الثاني‪:‬‬

‫تم اجراء خطوات العزل االولي باختالف نوع الثمار (فراولة – عنب – تين) للحصول على عزالت فطرية متنوعة‪.‬‬

‫تنقية الفطريات‬

‫بعد مرور ‪ 5‬أيام من تحضين الفطريات تم تحضير اطباق ‪ PDA‬معقمة يمكن أن يظهر لدينا أكثر من مستعمرة فطرية‪ ،‬لذلك‬
‫نقوم بتنقية هذه الفطريات عن طريق نقل جزء من المستعمرة الى منتصف الوسط الغذائي وتحضينها في حضان فطري على‬
‫درجة ‪ 25‬درجة مئوية من ‪ 7-5‬أيام تم تسجيل النتائج وفحصها في المجهر الضوئي للتعرف على نوع الفطر والتأكد من‬
‫نقاوته‪.‬‬

‫بعد االنتهاء من عملية العزل والحصول على المزرعة يتم تعريف الميكروبات المعزولة بشكل مبدئي من خالل الخصائص‬
‫المورفولوجية والخصائص المجهرية للمزرعة الميكروبية‪.‬‬

‫‪ ‬الخصائص المورفولوجية‪ :‬يتم فحص مزرعة الميكروب (على البيئة الصلبة) مورفولوجيًا وتسجل الخصائص‬
‫المورفولوجية المميزة مثل لون المزرعة ـ طبيعة نمو الميكروب على البيئة ـ كثافة النموـ شكل الحافة‪.‬‬

‫‪ ‬الخصائص المجهرية‪ :‬حيث تحضر شرائح من النمو الميكروبي ثم تفحص تحت المجهر ويتم تسجيل الخصائص المجهرية‬
‫للمزرعة (شكل الميكروب)‪.‬‬

‫عزل وتنقية بكتيريا الشعاعيات ( ‪) actinomycetes‬‬

‫األدوات‬

‫تربة من مناطق مختلفة وتم تسمية كل منطقة ب (‪ )1‬و (‪)2‬‬

‫اطباق ‪NA‬‬

‫ظروف تعقيم (لهب‪ ،‬ديتول)‬

‫ابر تلقيح‬

‫‪5‬‬
 ‫انابيب تحتوي على ماء مقطر معقم‬

‫طريقة التخفيف‪:‬‬

‫يتم تخفيف عينة التربة المراد عزل البكتيريا منها وذلك بوزن (‪1‬جرام) وتوضع في أنبوبة معقمة تحتوي على ( ‪9‬مل) ماء‬
‫مقطر وترج لمدة عشر دقائق تقريبًا ويكون التخفيف ‪1/10.‬‬

‫يترك األنبوب لعدة دقائق حتى يتم ترسيب حبيبات التربة الكبيرة‪.‬‬

‫يؤخذ (‪1‬مل) من هذا المحلول وينقل إلى أنبوبة تحتوي على (‪9‬مل) من الماء المقطر وترج جيدُا فيتكون التخفيف ‪, ..1/100‬‬
‫يتم تكرار نفس طريقة التخفيف إلى أن نحصل على عدد من التخفيفات ( ‪. )100000\1 , 10000\1 , 1000\1‬‬

‫تلقيح كل من تخفيف على اطباق ‪ NA‬وتكرر مرتين ‪.‬‬

‫تغطى األطباق ثم تحضن في الحاضنة عند درجة حرارة ‪35‬م‪ °‬لمدة ‪ 24‬ساعة‪.‬‬

‫تنقية المستعمرات البكتيرية‪.‬‬

‫طريقة العمل‪:‬‬

‫تعقيم السطح بالديتول وإشعال اللهب لتوفير ظروف التعقيم‪.‬‬

‫تحضير بيئة ‪NA‬‬

‫اختيار مستعمرة ذات خصائص واضحة بناء على الشكل الظاهري وذلك من خالل أخذ جزء من المستعمرة ومن ثم تلقيحها في‬
‫االطباق الجديدة بطريقة التخطيط للحصول على عزالت بكتيرية نقية ثم فحصها بالمجهر الضوئي للتأكد من نوعها‬

‫فحص العينات تحت المجهر الضوئي‪:‬‬

‫بعد االنتهاء من عملية العزل والتنقية والحصول على مزرعة نقية يتم تعريف الميكروبات المعزولة بواسطة الفحص المجهري‬

‫‪6‬‬
 ‫خطوات الفحص المجهري الضوئي وصبغ الشرائح المجهرية للفطريات‪:‬‬

‫تصبغ شريحة زجاجية معقمة تحتوي على قطرة من صبغة ‪ lactophenol blue‬ثم بواسطة ابرة التلقيح المعقمة بالتلهيب‬
‫الكحولي يؤخذ طرف من المزرعة وتمزج جيدًا بالصبغة مع المحافظة على خصائص الفطر في وسط الشريحة ثم تغطية‬
‫الشريحة بغطاء زجاجي وفحص الشرائح عند قوة ‪ 10‬لتحديد المجال ثم قوة ‪ 40‬لتحديد الصفات المجهرية للفطريات‬

‫خطوات الفحص المجهري الضوئي وصبغ الشرائح المجهرية للبكتيريا ‪:‬‬

‫تحضير شريحة زجاجية معقمة تحتوي على قطرة من صبغة الماء المقطر ثم بواسطة ابرة التلقيح المعقمة بالتلهيب الكحولي‬
‫يؤخذ طرف من المزرعة وتمزج جيدًا بالماء مع المحافظة على خصائص البكتيريا في وسط الشريحة ثم صبغ الشريحة بصبغة‬
‫غرام وفحص الشرائح عند قوة ‪ 10‬لتحديد المجال ثم قوة ‪ 100‬لتحديد الصفات المجهرية للبكتيريا‬

‫صبغ العينات بصبغة غرام‪:‬‬

‫تم أجراء خطوات صبغة غرام على العينة النقية للتأكد من نقاوة العينة ولمعرفة خصائص البكتيريا المعزولة مجهريًا‪.‬‬

‫تم تحضير شريحة زجاجية بالطريقة التالية‪:‬‬

‫أخذ عقدة بكتيرية بواسطة ابرة التلقيح وفردها في وسط الشريحة الزجاجية باالستعانة بقطرة ماء مقطر ثم تثبيت البكتيريا عن‬
‫طريق تمريرها خالل اللهب ‪ 3‬مرات‪ ،‬ترك لتجف تمامًا لبدء الصبغ‬

‫تضاف صبغة ‪ crystal violet‬وهي الصبغة االساسية (‪)primary stain‬‬

‫على شريحة عليها المحضرة مسبقًا وبتترك الصبغة مدة دقيقة واحدة‪ .‬بعد ذلك تغسل بمياه مقطرة إلزالة الصبغة‪.‬‬

‫اضافة االيودين(‪ ..)mordant iodine‬وتركه لمدة دقيقة ثم تغسل مرة أخرى‪.‬‬

‫إزالة االصباغ المتبقية بواسطة (‪ decolorizer )ethyl alcohol‬وتركها لمدة ‪ 10‬الى ‪ 30‬ثانية ثم تغسل مرة أخرى بماء‬
‫مقطر‪.‬‬

‫في الخطوة االخيرة تضاف صبغه ال ‪ safranine‬وهي عبارة عن صبغة تفريقيه ‪ counter stain‬وتركها لمدة ‪ 30‬ثانية‬
‫ثم تغسل وتترك الشريحة لتجف لفحصها بالمجهر الضوئي‬

‫‪.5‬دراسة العالقة ما بين الفطريات المعزولة وبكتيريا الشعاعيات‬

‫لدراسة العالقة مابين الفطريات والشعاعايات‬

‫تم تحضير ‪ 4‬اطباق من بيئة ‪ PDA‬على عدد الفطريات المعزولة من الثمار‬

‫تمم تقسم االطباق الى نصفين وبواسطة ابرة التلقيح تم تلقيح النصف األول من االطباق بواسطة بكتيريا الشعاعيات‬

‫‪7‬‬
 ‫والنصف االخر تم تلقيحه بواسطة قرص من الفطر المعزول ( طماطم ‪ ,‬تين ‪ ,‬فراولة )‬

‫‪ .6‬فحص العالقة ما بين الفطريات المعزولة وبكتيريا الشعاعيات بواسطة المجهر االلكتروني الماسح‬

‫تم تحضير معلق بكتيري في انابيب ابن دورف من الدوارق السابقة لفحصها بالمجهر االلكتروني الماسح في المختبر المركزي‬
‫وشملت العينات; عينة تحتوي على زيت نفطي صورة (‪ )10,11,12‬وعينة بال زيت نفطي صورة (‪ )13,14‬لمقارنة اختالف‬
‫النمو والشكل الظاهري للخلية البكتيرية عند اختالف ظروف التنمية‪.‬‬

‫طريقه معالجة العينة البكتيرية السائلة‪:‬‬

‫‪tupeeppendro‬خاص‬ ‫عند استالمنا لعينات سائلة البد من مزج محتوى العينة باستخدام ‪ vortex‬ثم نضع كل عينه في‬
‫فيه ونكتب عليه االسم‪.‬‬

‫التثبيت األول‪:‬‬

‫نأخذ العينات ونضعها في ‪ mini spine‬لمدة خمس دقائق ‪ 5min‬وسرعة ‪ rpm 14.5‬وبعد ذلك يتكون لنا رائق‬
‫‪ supernatent‬وراسب ‪.pellet‬‬

‫ممكن اعادتها مرتان وذلك باستخدام العينة مره اخرى حتى يظهر لنا ‪pellet‬واضحه‪.‬‬

‫نزيل الرائق ونضع المثبت األول ‪ %3,5‬جلوتر الدهيد لمدة ليلة كاملة‪( .‬نحفظ في الثالجة درجه حرارتها ‪.c 5‬‬

‫في اليوم الثاني‪:‬‬

‫مرحلة الغسيل‪:‬‬

‫نمزج العينة ثم نضعها في ‪ mini spin‬لمدة خمس دقائق ‪,5min‬وسرعة ‪ rpm 14.5‬نزيل الرائق ونضع‬

‫فوق ‪ pellet‬محلول الفوسفات المنظم ‪ PH = 7.2‬ثم نرج العينة وننتظر ربع ساعة ‪ min 15‬تكرر العملية ثالث مرات‪.‬‬

‫نمزج العينة ثم نضعها في ‪ mini spin‬لمدة خمس دقائق ‪,5min‬وسرعة ‪ rpm 14.5‬نزيل الرائق ونضع فوق ‪pellet‬‬
‫المثبت الثاني ‪ %1‬رابع اوكسيد االوزميوم ثم نرج العينة وننتظر لمدة ساعة‪.‬‬

‫نمزج العينة ثم نضعها في ‪ mini spin‬لمدة خمس دقائق ‪ 5min‬وسرعة ‪ rpm 14.5‬نزيل الرائق ونضع‬

‫فوق ‪ pellet‬محلول الفوسفات المنظم ‪ PH = 7.2‬ثم نرج العينة وننتظر ربع ساعة ‪ min 15‬تكرر العملية ثالث مرات‪.‬‬

‫مرحلة التجفيف‪:‬‬

‫‪8‬‬
 ‫نمزج العينة ثم نضعها في ‪ mini spin‬لمدة خمس دقائق ‪,5min‬وسرعة ‪ rpm 14.5‬نزيل الرائق ونضع فوق ‪pellet 50‬‬
‫‪ %‬غسول االيثانول ثم نرج وننتظر لمدة ربع ساعة‪.‬‬

‫نمزج العينة ثم نضعها في ‪ mini spin‬لمدة خمس دقائق ‪,5min‬وسرعة ‪ rpm 14.5‬نزيل الرائق ونضع فوق ‪pellet 60‬‬
‫‪ %‬غسول االيثانول ثم نرج وننتظر لمدة ربع ساعة‬

‫نمزج العينة ثم نضعها في ‪ mini spin‬لمدة خمس دقائق ‪,5min‬وسرعة ‪ rpm 14.5‬نزيل الرائق ونضع فوق ‪pellet 70‬‬
‫‪ %‬غسول االيثانول ثم نرج وننتظر لمدة ربع ساعة‬

‫تحفظ في الثالجة درجة حرارتها ‪( C 5‬في حال عدم وجود الوقت)‬

‫في اليوم الثالث‪:‬‬

‫نمزج العينة ثم نضعها في ‪ mini spin‬لمدة خمس دقائق ‪,5min‬وسرعة ‪ rpm 14.5‬نزيل الرائق ونضع فوق ‪pellet 80‬‬
‫‪ %‬غسول االيثانول ثم نرج وننتظر لمدة ربع ساعة‪.‬‬

‫نمزج العينة ثم نضعها في ‪ mini spin‬لمدة خمس دقائق ‪,5min‬وسرعة ‪ rpm 14.5‬نزيل الرائق ونضع فوق ‪pellet 90‬‬
‫‪ %‬غسول االيثانول ثم نرج وننتظر لمدة ربع ساعة‪.‬‬

‫نمزج العينة ثم نضعها في ‪ mini spin‬لمدة خمس دقائق ‪,5min‬وسرعة ‪ rpm 14.5‬نزيل الرائق ونضع فوق ‪pellet 100‬‬
‫‪ %‬غسول االيثانول ثم نرج وننتظر لمدة ربع ساعة‪( .‬تغسل مرتين)‬

‫تم التصوير على جهاز المجهر اإللكتروني (‪)quanta 250‬‬

‫حفظ المزارع الميكروبية‪:‬‬

‫بعد االنتهاء من التجربة يجب أن تحفظ الميكروبات حية وبصورة نقية طوال فترة الدراسة او لدراستها الحقًا‪ ،‬ومن طرق حفظ‬
‫الميكروبات هي نقل المستعمرات الى بيئة جديدة ومعقمة في أنبوبة اختبار (أنابيب األجار المائل ‪ )slant agar‬ويمكن حفظ‬
‫االنابيب في درجات حرارة منخفضة (في الثالجة) حيث أن الميكروبات تظل حية إذا ما وفرت لها درجات حرارة مناسبة‪،‬‬
‫كذلك جفاف المستعمرة ال يحدث إال بعد فترة طويلة‪.‬‬

‫‪9‬‬
 ‫النتائج‪:‬‬

‫عزل بذور الطماطم على‬ ‫الشكل (‪ )4‬نمو فطري من‬

‫بيئة ‪ PDA‬بعد مرور ‪ 5‬أيام من تحضين العينة وقبل تنقيتها‬

‫الشكل (‪ )5‬نمو فطري لعينة بذور الطماطم بعد تنقيتها على بيئة ‪ PDA‬بعد مرور ‪ 5‬أيام من تحضين العينة‬

‫(خيطية – النمو متوسط – بيضاء الصبغة)‬

‫‪10‬‬
 ‫الشكل (‪ )6‬الفحص المجهري للعزل الفطري شكل (‪ )5‬من بذور الطماطم بعد التنقية‬

‫الشكل (‪ )7‬نمو فطري من عزل بذور التين على بيئة ‪ PDA‬بعد مرور ‪ 3‬أيام من تحضين العينة وقبل تنقيتها‬

‫(خيطية – النمو ضعيف – خضراء الصبغة)‬

‫‪11‬‬
‫الشكل (‪ )8‬نمو فطري لعينة بذور التين بعد تنقيتها على بيئة ‪ PDA‬بعد مرور ‪ 5‬أيام من تحضين العينة‬

‫الشكل (‪ )9‬الفحص المجهري للعزل الفطري شكل (‪ )8‬من بذور التين بعد التنقية‬

‫‪12‬‬
‫الشكل (‪ )10‬نمو فطري من عزل بذور الفراولة على بيئة ‪ PDA‬بعد مرور ‪ 3‬أيام من تحضين العينة وقبل تنقيتها‬

‫(خيطية قطنية – النمو متوسط – خضراء فاتح الصبغة)‬

‫الشكل (‪ )11‬نمو فطري لعينة بذور الفراولة بعد تنقيتها على بيئة ‪ PDA‬بعد مرور ‪ 5‬أيام من تحضين العينة‬

‫‪13‬‬
‫الشكل (‪ )12‬الفحص المجهري للعزل الفطري شكل (‪ )11‬من بذور الفراولة بعد التنقية‬

‫‪14‬‬
‫الشكل (‪ )13‬نمو فطري لعينة معزولة من الهواء بعد تنقيتها على بيئة ‪ PDA‬بعد مرور ‪ 5‬أيام من تحضين العينة‬

‫الشكل (‪ )14‬الفحص المجهري للعزل الفطري شكل (‪ )13‬لعينة معزولة من الهواء بعد التنقية‬

‫‪15‬‬
‫الشكل (‪ )15‬نمو فطري لعينة معزولة من الهواء بعد تنقيتها على بيئة ‪ PDA‬بعد مرور ‪ 5‬أيام من تحضين العينة‬

‫‪16‬‬
 ‫الشكل (‪ )16‬الفحص المجهري للعزل الفطري شكل (‪ )15‬لعينة معزولة من الهواء بعد التنقية‬

‫الشكل (‪ )17‬نمو فطري من عزل بذور العنب على بيئة ‪ PDA‬بعد مرور ‪ 3‬أيام من تحضين العينة وقبل تنقيتها‬

‫(ال يوجد نمو واضح)‬

‫‪17‬‬
18
 ‫الشكل (‪ )19‬تنقية عزل بكتيريا االكتينومايسيتس من‬ ‫الشكل (‪ )18‬تنقية عزل بكتيريا االكتينومايسيتس من‬

‫التربة ‪2‬‬ ‫التربة ‪1‬‬

‫الشكل (‪ )21‬الفحص المجهري لعينة البكتيريا‬ ‫الشكل (‪ )20‬الفحص المجهري لعينة البكتيريا‬

‫(االكتينومايسيتس شكل (‪)19‬‬ ‫(االكتينومايسيتس شكل (‪)18‬‬

‫الشكل (‪ )22‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬على بيئة‬

‫‪PDA‬‬

‫‪19‬‬
‫الشكل (‪ )23‬العالقة مابين الفطريات‪ 4‬المعزولة من ثمار الطماطم وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬على‬

‫بيئة ‪PDA‬‬

‫الشكل (‪ )24‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار التين وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬على بيئة‬

‫‪PDA‬‬

‫‪20‬‬
‫الشكل (‪ )25‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬تحت‬

‫المجهر االلكتروني الماسح‬

‫الشكل (‪ )26‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬تحت‬

‫‪21‬‬
 ‫المجهر االلكتروني الماسح‬

‫الشكل (‪ )27‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬تحت‬

‫المجهر االلكتروني الماسح‬

‫الشكل (‪ )28‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬تحت‬

‫‪22‬‬
 ‫المجهر االلكتروني الماسح‬

‫الشكل (‪ )29‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬تحت‬

‫المجهر االلكتروني الماسح‬

‫‪23‬‬
‫الشكل (‪ )30‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬تحت‬

‫المجهر االلكتروني الماسح‬

‫الشكل (‪ )31‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬تحت‬

‫المجهر االلكتروني الماسح‬

‫‪24‬‬
‫الشكل (‪ )32‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬تحت‬

‫المجهر االلكتروني الماسح‬

‫الشكل (‪ )33‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬تحت‬

‫‪25‬‬
 ‫المجهر االلكتروني الماسح‬

‫الشكل (‪ )34‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬تحت‬

‫المجهر االلكتروني الماسح‬

‫الشكل (‪ )35‬العالقة مابين الفطريات المعزولة من ثمار الفراولة وبكتيريا الشعاعيات (‪ )actinomycetes‬تحت‬

‫‪26‬‬
 ‫المجهر االلكتروني الماسح‬

‫المناقشة‪:‬‬

‫المناقشة بتكم فيها عن مكافحة مسببات االمراض للنبات بالشعاعيات‬

‫أوال أتكلم عن الشعاعات ك عامل مضاد‬
‫ثم عن امراض النباتات وخطورتها‬
‫ثم افسر النتائج‬

‫يسبب فطر ‪ Rhizoctonia solani and Sclerotium rolfsii‬العديد من االمراض الفطرية في الطماطم (‬

‫‪ )3‬من خالل الفحص المجهري والظاهري تم تعريف نوع الفطر المعزول من الطماطم مبدئيًا الشكل (‪ ) 6,5‬على‬

‫انه فطر ‪ Rhizoctonia solani‬بسبب تشابه خصائصه الظاهرية والمجهرية كما أوضحت الدراسات السابقة‬

‫بإنه تم تحديد ثمانية عشر نوًع ا تنتمي إلى ‪ 7‬أجناس فطرية ( ‪Alternaria ، Aspergillus ، Fusarium ،‬‬

‫‪ Mucor ، Penicillium ، Rhizopus‬و ‪ )Trichoderma‬تتواجد في الطماطم وقشور الطماطم حيث كانت‬

‫‪ Alternaria alternata‬األنواع الفطرية األكثر انتشارا‪ )2( .‬لذلك ستجرى المزيد من الدراسات األخرى‬

‫للتعرف على نوع الفطر المعزول إلجراء الدراسات والتنقية الحيوية بين األنواع المعزولة‪ .‬في الشكل (‪ ) 8,9‬يرجع‬

‫نوع الفطر الى جنس ‪ Alternaria alternata‬من خالل التعرف على المظهر المجهري للفطر حيث تم اإلبالغ‬

‫في الدراسات السابقة عن إصابات ثمار التين بفطر ) ‪ Alternaria alternate (4‬في الشكل ( ‪ )16-10‬سيتم‬

‫التعرف على نوع الفطر بعد اجراء الدراسات التعريفية األخرى ‪.‬‬

‫المراجع‪:‬‬

‫‪1. Adrio, J. L., & Demain, A. L. (2003, September). Fungal biotechnology.‬‬

‫‪Retrieved from https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12898399‬‬

‫‪27‬‬
2. Determination of Fungi Associated with Tomatoes (Lycopersicum

esculentum M.) and Tomato Pastes. (n.d.). Retrieved from

https://scialert.net/fulltextmobile/?doi=ppj.2005.146.149

3. De Curtis, F., Lima, G., Vitullo, D. and De Cicco, V. (2019). Biocontrol of

Rhizoctonia solani and Sclerotium rolfsii on tomato by delivering

antagonistic bacteria through a drip irrigation system.

4. https://pubag.nal.usda.gov/catalog/5492015

28