‫سيراميد ‪ ،‬أحد أبسط فئات الشحميات السفينغولية ‪،‬‬

‫تضم فعلًيا عدًد ا كبيًر ا من العناصر غير المتجانسة ‪ ،‬حتى اآلن‬

‫من الناحية الهيكلية ‪ ،‬يتم إنتاج الجزيئات وثيقة الصلة جًد ا‬

‫الثدييات من خالل ستة تركيبات سيراميد متميزة‬

‫يبدو أن ملفات تعريف تعبير األنسجة مرتبطة بـ‬

‫تكوين سلسلة األسيل من سيراميد محددة‬

‫مناديل (‪ .)1،2‬إلى جانب دورها المركزي كسالئف فورية للدهون السفينغولية األكثر تعقيًد ا ‪ ،‬تشير عدة سطور من األدلة‬

‫إلى دور السيراميدات في األنشطة الخلوية‬

‫وشالالت اإلشارات‬

‫المستويات المحلية للسيراميد‬

‫في الخاليا بشكل كبير (على سبيل المثال ‪ ،‬عن طريق تنشيط‬

‫)‪ .)sphingomyelinases (7،8‬نظًر ا لكونه شديد الكراهية للماء ‪ ،‬فإن السيراميد يظهر قابلية ذوبان منخفضة للغاية‬

‫في الوسط المائي‬

‫مثل العصارة الخلوية ‪ ،‬وبالتالي من المتوقع أن‬

‫تمارس تأثيرها على مستوى األغشية‪ .‬تعرض العديد من أنواع السيراميد ذات الصلة بيولوجًيا درجات حرارة انتقالية‬

‫عالية في الطور مقارنة بفئات الدهون الغشائية األخرى ‪،‬‬

 ‫مما يجعلها جزيئات صلبة لها تأثيرات كبيرة على الخصائص الفيزيائية لألغشية ثنائية الطبقة‪.‬‬

‫هذه تتراوح من السلوك الديناميكي الحراري المتغير‬

‫(‪ ، )9،10‬لتأثيرات كبيرة على الترتيب الجزيئي و‬

‫التوزيع الجانبي (‪ )19-11‬وكذلك الطبوغرافي‬

‫تنظيم األغشية‬

‫غالًبا ما يكون ناتًج ا عن الفصل الذاتي للسيراميد في المجاالت الجانبية عالية الترتيب في الطبقات الثنائية ‪ ،‬وميلهم إلى‬

‫إحداث سلبي‬

‫انحناء الغشاء‪ .‬وبالتالي يؤثر السيراميد على الجسم‬

‫حالة طبقات الدهون الثنائية ‪ ،‬جنًبا إلى جنب مع االقتراح الذي‬

‫يمكن أن تؤثر الحالة الفيزيائية للغشاء على الحالة الفيزيولوجية للخلية (‪ ، )27 ، 26‬التي تحدث ظاهرة الغشاء‬

‫بواسطة السيراميد أصبحت أيًض ا موضوًع ا للدراسة المكثفة‪.‬‬

‫تمت دراسة السيراميد من كال النوعين البيولوجي و‬

‫البيوكيميائية ‪ ،‬وكذلك من وجهة نظر بيوفيزيائية ‪،‬‬

‫لفهم الخصائص الجزيئية للسيراميد‬

‫تؤثر على وظائفهم في مقصورات خلوية متميزة ‪،‬‬

‫ربما تؤثر على فسيولوجيا الخليةبشكل عام ‪ ،‬يتكون السيراميد من ‪ aminediol‬طويل السلسلة‬
 ‫(سفينجويد) قاعدة يكون فيها جزء أسيل دهني أميد (‪- )N‬‬

‫مرتبط‪ .‬يعرض السيراميد الطبيعي تبايًن ا واسًع ا في‬

‫طول سالسل أسيل المرتبطة بـ ‪ ، N‬مع زيادة مستمرة‬

‫مستويات التنويع الناجم عن عدم التشبع والهيدروكسيل والتفرع التي قد تحدث في مواقع مختلفة من‬

‫السلسلة ‪ N‬المرتبطة (‪ .)28‬باإلضافة إلى ذلك ‪ ،‬تحدث اختالفات في التركيب الكيميائي أيًض ا في قاعدة السلسلة الطويلة‬

‫السفينجويدية‬

‫سيراميد (‪ .)29،30‬بهدف مقارنة التأثير‬

‫من الجوانب الهيكلية المختارة على خصائص الطبقة الثنائية للسيراميد ‪ ،‬تستكشف هذه الدراسة مجموعة من الجوانب‬

‫البيولوجية ذات الصلة‬

‫سيراميد في مخاليط مع دهون غشاء شائعة أخرى‪.‬‬

‫على الرغم من أن سلسلة أسيل السيراميد المرتبطة بـ ‪ N‬قد تختلف في‬

‫من ‪ 14‬إلى ‪ 26‬أو حتى ‪ 36‬ذرة كربون كما في‬

‫سيراميد الجلد تركز هذه الدراسة على بعض األنواع الجزيئية األكثر انتشاًر ا في الثدييات ‪ ،‬وهي‬

‫المشبعة ‪ -C16‬و ‪ -C18‬و ‪ C24-ceramides‬أيًض ا‬

‫مثل األنواع األحادية غير المشبعة ‪ -C18: 1D9c‬و ‪C24: 1D15c‬‬

‫(‪ ، )31،33-35‬وكلها تحتوي على الثدييات األكثر انتشاًر ا‬

 ‫سفينغوزين (‪ )1D4t :18‬قاعدة طويلة السلسلة‪ .‬باإلضافة إلى ذلك ‪ ،‬اثنان‬

‫تمت دراسة األنواع الهيدروكسيلية للثدييات من سيراميد‪ - C18 (2OH) :‬سيراميد ‪( ،‬أي ‪20[ ،‬‬

‫‪ - ]R‬أيزومر سيراميد أ‪-‬هيدروكسيل مع قاعدة سفينجوزين طويلة السلسلة ‪،‬‬

‫و ‪-C16‬فيتوسيراميد مع [‪40‬‬

‫‪ - ]R‬هيدروكسي سفينجانين‬

‫قاعدة طويلة السلسلة ‪31،33،34،36،3(7‬‬

‫أيضا بيولوجيا‬

‫المستقلب الفعال سيراميد ‪ 1-‬فوسفات (‪( )38،39‬أي‬

‫منتج لنشاط سيراميد كيناز ‪ ،‬وسيراميد‬

‫تحتوي على قاعدة سفينجاديين طويلة السلسلة غير مشبعة‬

‫[‪ ، ]2D4t، 14c :18‬والتي توجد في بالزما اإلنسان والشريان األورطي‬

‫(‪ ))40،41‬في هذه الدراسة‪ .‬لمقارنة التأثير‬

‫من الرابطة المزدوجة غير المألوفة إلى حد ما في قاعدة السلسلة الطويلة من سفينجاديين مع رابطة ثنائية رابطة الدول‬

‫المستقلة عند عمق طبقة ثنائية مماثلة في سلسلة ‪ ، N-acyl‬سيراميد مع‬

‫تم تضمين سلسلة أسيل غير مشبعة ‪ C18: 1D12c‬في‬

‫الدراسة ‪ ،‬على الرغم من أن مثل هذه األنواع الجزيئية لم يتم اإلبالغ عنها ‪ ،‬وفًق ا ألفضل ما لدينا من معلومات‬
 ‫أنواع سيراميد الثدييات‪ .‬وصف كامل لملف‬

‫سلسلة ‪ -N‬أسيل ومكونات قاعدة سفينجويد لكل من‬

‫سيراميد مدرجة في الجدول ‪ ، 1‬والتركيبات الكيميائية‬

‫من سيراميد موضحة في المخطط ‪ S1‬في الدعم‬

‫مواد‬

‫سلوك المرحلة واختالطها وخصائصها ثنائية الطبقة‬

‫من سيراميد مع هياكل مختلفة كانت سابقا‬

‫تمت دراستها كمكونات نقية أو (بشكل رئيسي) في مخاليط ثنائية‬

‫مع السفينجوميلين (‪ )SM‬أو الفوسفاتيديل كولين (الكمبيوتر)‬

‫باستخدام ‪ DSC‬و ‪ NMR‬وكذلك التألق والطبقة األحادية‬

‫التقنيات (‪ .)50-9،14،42‬هذه الدراسة ‪ ،‬ومع ذلك ‪ ،‬تركز على‬

‫جمع بيانات قابلة للمقارنة لمجموعة متنوعة من السيراميد‬

‫األنواع الجزيئية في طبقات ثنائية مختلطة مختلفة مع‬

‫بالميتويل سفينجوميلين (‪-1 ، )PSM‬بالميتويل‪-2-‬أوليويل‪-‬سنجليسيرو ‪-3-‬فوسفوكولين (‪ ، )POPC‬والكوليسترول‪.‬‬

‫‪DSC‬‬

‫جنبا إلى جنب مع مختلف األساليب القائمة على األسفار كان‬

‫ُت طبق للكشف عن االختالفات في قابلية االمتزاج للسيراميد مع ‪ PSM‬والفصل الجانبي في طبقات ثنائية من البوليمرات‬

‫العضوية الثابتة‪ .‬تباين الخواص الفلورية وكثافة الوقت‬

‫اضمحالل حمض الباريناريك العابر (‪ ، )tPA‬مسبار غشائي‬

‫التي تنقسم بسهولة إلى مرحلة مرتبة (عالية) مثل المراحل الغنية بالسيراميد في طبقات الدهون الثنائية (‪-15،17،51‬‬

‫‪ ، )53‬كانت‬

‫يقاس لتحديد الثبات الحراري ودرجة‬

‫سلسلة التعبئة الجانبية ضمن المجاالت الغنية بالسيراميد‪.‬‬

‫عالوة على ذلك ‪ ،‬حيث تظهر العديد من األدلة أن السيراميد والكوليسترول لهما تأثيرات متبادلة على كل منهما‬

‫التوزيع الجانبي الغشائي اآلخر (‪ ، )59-18،51،53‬ثنائي الطبقة‬

‫قابلية الذوبان (‪ ، )60،61‬واالنجذاب (‪ ، )62‬تمت دراستها أيًض ا هي تأثير الكوليسترول على الثبات الحراري للنطاقات‬

‫الغنية بالسيراميد وباستخدام التبريد الفلوري‬

‫النهج الذي يستخدم نظير ستيرول فلوري (‪ ، )63‬استبعاد الكوليسترول من هذه المجاالت أو دمجه فيها‪.‬‬

‫تكشف نتائجنا أن أكبر االختالفات داخل‬

‫سيراميد ‪ ،‬من حيث تفاعالت سيراميد ‪ PSM -‬و‬

‫تشكيل المجاالت الغنية بالسيراميد (‪ )PSM /‬في الملوثات العضوية الثابتة‬

 ‫الطبقات الثنائية ‪ ،‬نشأت من وجود وموقع نسبي‬

‫روابط رابطة الدول المستقلة المزدوجة في سالسل أسيل سيراميد‪ .‬اقل بكثير‬

‫لوحظ تباين فيما يتعلق بطول سلسلة ‪( N-acyl‬المشبعة) أو وجود هيدروكسيل إضافي‬

‫في المنطقة البينية‪ .‬في الختام ‪ ،‬بناًء على نتائجنا‬

‫يبدو أن عدم التشبع يسبب المزيد من الدراماتيكية‬

‫تعتمد بدرجة كبيرة على الموضع ‪ ،‬وتغيرات في الطبقة الثنائية الفيزيائية‬

‫الخصائص ‪ ،‬في حين أن االختالفات في طول سلسلة ‪N-acyl‬‬

‫أو وجود الهيدروكسيل السطحي يوفر فقط تعديالت دقيقة في تفاعالت السيراميد مع الدهون الغشائية األخرى‬

‫المواد واألساليب‬

‫‪POPC ، N-stearoyl-D-erythro-sphingosine (C18-cer) ، N-oleoyl-D-erythrosphingosine‬‬

‫‪(C18: 1D9c-cer) ، N- (20‬‬

‫(‪hydroxy) -stearoyl-D-erythro-sphingosine (C18: 0 (2OH) -cer) ، N-lignoceroyl-D-- )R‬‬

‫)‪، erythro-sphingosine (C24-cer‬‬

‫تم شراء و )‪N-nervonoyl-D-erythro-sphingosine (C24: 1D15c-cer‬‬

‫من )‪ Avanti Polar Lipids (Alabaster ، AL‬؛ )‪N-palmitoyl-D-erythro-sphingosine (C16-cer‬‬

‫و )‪ N-palmitoyl-D-erythro-phytosphingosine (C16-phytocer‬من ‪Larodan Fine Chemicals‬‬

‫(مالمو ‪ ،‬السويد) ؛ والكولسترول‬

‫من سيجما ‪ /‬الدريتش (سانت لويس ‪ ،‬ميزوري)‪ .‬تم تنقية ‪ PSM‬من صفار البيض‬

‫‪ SM‬مع كروماتوغرافيا سائلة تحضيرية عكسية عالية األداء (‪ )HPLC‬كما هو موضح سابًقا (‪ ، )64‬تم تحديدها بشكل‬

‫إيجابي بواسطة الكتلة‬

‫قياس الطيف على ‪( Bruker Daltonics Ion Trap ESI-MS‬بريمن ‪ ،‬ألمانيا) ‪،‬‬

‫وتم التحقق من النقاوة بواسطة ‪ HPLC‬التحليلي ذو المرحلة العكسية من ‪( Merck / Hitachi LaChrome‬عمود‬

‫‪ Supelco Discovery 125 4.6‬مم ‪ C18‬بحجم جسيم ‪ 5‬مم ‪.)Bellefonte ، PA ،‬‬

‫تم تصنيع سيراميد ‪ 1-‬فوسفات (سير ‪-1-‬ف) من سفينجوزين ‪.1-‬‬

‫الفوسفات (‪ )Avanti Polar Lipids‬عن طريق أسيل مع أنهيدريد بالميتيك‬

‫(سيجما الدريش) وفق بروتوكول موصوف في (‪ .)65‬المنتج‬

‫تم عزله بواسطة ‪ HPLC‬كما هو موضح في (‪ ، )64‬مع ‪ ٪1‬إضافية‬

‫‪ NH4OH‬في الميثانول ‪ .eluent‬تم تحديد المنتج بشكل إيجابي بواسطة‬

‫تم التحقق من مطياف الكتلة ونقاوته بواسطة ‪ HPLC‬التحليلي‪ .‬تم تصنيع ‪N-12Z-octadecenoyl-D-erythro-‬‬

‫)‪ sphingosine (C18: 1D12c-cer‬من‬

‫‪ octadecenoic acid (Larodan Fine Chemicals)- )Z( 12‬و ‪D-erythro-sphingosine (Sigma‬‬

‫)‪ Aldrich‬و ‪N-stearoyl-D-erythro-sphinga-4E، 14Z-diene‬‬

‫(‪ )C18-sphingadiene-cer‬من حامض دهني (‪ )Sigma Aldrich‬و ‪D-erythrosphinga-4E ، 14Z-‬‬

‫)‪ diene (Avanti Polar Lipids‬وفًق ا لبروتوكول‬

‫الموصوفة في (‪ .)65‬تم عزل المنتجات بواسطة ‪ HPLC‬كما هو موضح في‬

‫(‪ ، )64‬تم تحديدها بشكل إيجابي بواسطة مطياف الكتلة ‪ ،‬وتم التحقق من نقائها‬

‫بواسطة ‪ HPLC‬التحليلي‪ .‬تم إذابة الدهون على النحو التالي‪ POPC :‬و‬

‫‪ C16-cer‬في الميثانول ‪ Cer-1-P ،‬في الميثانول‪ :‬ماء (‪ 1 :100‬من حيث الحجم) ‪،‬‬

‫‪ C16-phyto-cer‬في الكوليوفورم‪ :‬الميثانول (‪ 1 :1‬من حيث الحجم) ‪ ،‬و ‪ ، PSM‬والكوليسترول ‪ ،‬وجميع نظائر‬

‫السيراميد األخرى في الهكسان ‪ -‬األيزوبروبانول (‪ 2 :3‬بواسطة‬

‫الصوت)‬

‫تم تصنيع ‪ tPA‬من ميثيل لينولينات (‪ )Sigma Aldrich‬كما هو موصوف‬

‫في (‪ ، )66‬معزولة بواسطة ‪ ، HPLC‬وتم تحديدها بشكل إيجابي بواسطة مطياف الكتلة‪.‬‬

‫تم التحقق من نقاء ‪ tPA‬بواسطة ‪ HPLC‬التحليلي واالمتصاص واالنبعاثات‬

‫األطياف (مطابقة لألطياف المنشورة)‪ .‬تم تخزين ‪ tPA‬جاًف ا تحت األرجون عند‬
 ‫‪ 87‬درجة مئوية حتى يذوب في ميثانول مطهر باألرجون ويستخدم في غضون أسبوع‪.‬‬

‫تم تصنيع الكوليستا ‪ Trien-3-beta-ol (CTL)- )11( 5،7،9‬وتنقيته‬

‫تم وصفه سابًقا بواسطة ‪ Fischer‬وزمالؤه (‪ ، )67‬تم تخزينه جاًف ا تحت األرجون‬

‫عند ‪ 87‬درجة مئوية حتى يذوب في اإليثانول ويستخدم في غضون ‪ 10‬أيام‪-1 .‬بالميتويل ‪2-‬‬

‫تم شراء )‪stearoyl- (7-doxyl) -sn-glycero-3-phosphocholine (7SLPC‬‬

‫من ‪ ، Avanti Polar Lipids‬المخزنة جافة تحت األرجون عند ‪ 87‬درجة مئوية حتى تذوب‬

‫في الميثانول ويستخدم في غضون ‪ 5‬أشهر‪.‬‬

‫تمت تنقية المياه المستخدمة في تحضير العينة عن طريق التناضح العكسي‬

‫متبوًع ا بالمرور عبر نظام تنقية المياه )‪ UF-Plus (Millipore ، Billerica ، MA‬إلنتاج منتج بمقاومة نهائية تبلغ‬

‫‪18.2‬‬ ‫‪Mucm‬‬
‫‪DSC‬‬
‫تم تحضير الحويصالت متعددة الطبقات (‪ 1‬مم) لـ ‪ DSC‬عن طريق خلط متساوي المولي‬

‫كميات من ‪ PSM‬ونظائر السيراميد ‪ ،‬وتبخر المذيب تحت تيار من النيتروجين‪ .‬إلزالة أي مذيب متبقي ‪ ،‬تم استخدام‬

‫األفالم الدهنية‬

‫ثم تبقى تحت التفريغ لمدة ‪ 1‬ساعة‪ .‬تم ترطيب أغشية الدهون الجافة بماء ‪ MQ‬المنظف باألرجون في حمام مائي عند‬

‫‪ 95‬درجة مئوية لمدة ساعة واحدة ‪ ،‬تليها خمس دورات من‬

 ‫تجميد الذوبان بين النيتروجين السائل وحمام مائي ‪ 95‬درجة مئوية ‪ ،‬متناثرة‬

‫مع خلط دوامة قوي حتى يتم الحصول على مستحضرات متجانسة وبراق‪ .‬ثم تم تبريد العينات إلى‬

‫درجة حرارة الغرفة وتفريغها من الغاز لمدة ‪ 5‬دقائق باستخدام أداة ‪ThermoVac‬‬

‫(‪ ، MicroCal‬نورثامبتون ‪ ،‬ماساتشوستس) قبل التحميل في ‪ .DSC‬ما مجموعه ‪12‬‬

‫عمليات مسح التدفئة والتبريد المتتالية (‪ 90-1‬درجة مئوية) تعمل بدرجة حرارة ‪ 1‬م ‪ /‬دقيقة‬

‫تم تسجيل تدرج درجة الحرارة باستخدام أداة ‪ VP-DSC‬عالية الحساسية (‪ )MicroCal‬لعينتين متكررتين بشكل‬

‫مستقل‪ .‬المقدمة‬

‫تم اختيار مخططات الحرارة من دورات التسخين األخيرة‬

‫‪DSC‬‬

‫تباين مضان ثابت الحالة‬

‫حويصالت متعددة الطبقات (‬
‫‪ 50-37.5‬ملي دهون كلية ؛‬
‫‪ 75‬إلى ‪ 100‬نانومول دهون‬
‫كلية‬
‫لكل ‪ 2‬مل ماء) لقياسات‬
‫تباين التألق‬
 ‫عن طريق خلط الدهون‬
‫بالنسب المولية المرغوبة‬
‫(‪ POPC / XCer ، 60/15‬؛‬
‫‪POPC / PSM / XCer ،‬‬
‫‪ 60/15/15‬؛ ‪POPC / PSM /‬‬
‫‪XCer / Chol،‬‬
‫‪ )60/15/15/10‬و‬
‫تبخير المذيب تحت تيار‬
‫من النيتروجين‪ .‬كان‬
‫المذيب المتبقي‬
‫تمت إزالته تحت التفريغ‬
‫لمدة ‪ 1‬ساعة‪ .‬تم بعد ذلك‬
‫ترطيب أغشية الدهون‬
‫الجافة‬
‫مع ماء ‪ MQ‬مطهر باألرجون‬
‫في حمام مائي عند ‪90‬‬
 ‫درجة مئوية لمدة ‪60‬‬
‫دقيقة‪ .‬أخيرا‪،‬‬
‫كانت العينات مختلطة‬
‫ودوامة صوتية لمدة ‪5‬‬
‫دقائق في جهاز صوت حمام‬
‫مائي (‪FinnSonic M3 Bath‬‬
‫‪Sonicator ، FinnSonic‬‬
‫‪ ، Oy ، Lahti‬فنلندا) في‬
‫‪ 80‬ج‪ .‬مباشرة بعد‬
‫صوتنة ‪ ،‬تمت إضافة ‪tPA‬‬
‫من مركز‬
‫محلول مخزون الميثانول‬
‫إلى تركيز مسبار نهائي‬
‫قدره ‪ 1‬مول‪ .٪‬إضافة‬
 ‫تم التحريك المستمر وال‬
‫يزيد حجمه عن ‪ ٪0.2‬من‬
‫الميثانول‬
‫تمت إضافته إلى أي عينة‪.‬‬
‫تم تبريد العينات إلى‬
‫درجة حرارة الغرفة قبل‬
‫قياسات التألق‪.‬‬
‫تم إجراء قياسات الحالة‬
‫المستقرة في الكوارتز‬
‫األكواخ الموجودة على‬
‫مقياس الطيف الضوئي‬
‫‪( QuantaMaster PTI‬تقنية‬
‫الفوتون‬
‫‪International ،‬‬
‫‪)Lawrenceville ، NJ‬‬
‫تعمل بتنسيق ‪ .T‬العينات‬
 ‫تحت التحريك المستمر‬
‫وكانت درجة الحرارة في‬
‫العينات‬
‫يتحكم فيها عنصر بلتيير‬
‫مع مسبار درجة حرارة‬
‫مغمور في‬
‫عينة‪ .‬تم فحص انبعاث‬
‫مضان ‪ tPA‬بشكل مستمر في‬
‫‪ 405‬نانومتر (إثارة ‪305‬‬
‫نانومتر) أثناء تسخين‬
‫العينات بمعدل ‪ 2‬درجة‬
‫مئوية ‪/‬‬
‫دقيقة‪ .‬تم تحديد تباين‬
‫الحالة المستقرة ‪، r ،‬‬
‫كما هو موضح في (‪، )68‬‬
 ‫عن طريق تحويل انبعاث‬
‫التألق إلى قيم تباين‬
‫الخواص مع‬
‫برنامج ‪PTI Felix32‬‬
‫قياسات مضان تحسم الوقت‬
‫حويصالت متعددة الطبقات (‬
‫‪ 90-75‬ملي دهون كلية ‪،‬‬
‫‪ 150‬إلى ‪ 180‬نانومول‬
‫دهون كلية لكل منهما‬
‫‪ 2‬مل ماء) لقياسات عمر‬
‫التألق لـ ‪ tPA‬عن طريق‬
‫خلط الدهون بالنسب‬
‫المولية المرغوبة (‬
‫‪POPC / XCer ، 60/15 ،‬‬
‫‪/ POPC‬‬
‫‪ PSM / XCer‬أو ‪60/15/15‬‬
‫أو ‪POPC / PSM / XCer /‬‬
‫‪.)Chol 60/15/15/10‬‬
‫المذيب‬
‫تمت إزالته تحت تيار من‬
‫النيتروجين‪ .‬ثم كانت‬
‫األفالم الدهنية الجافة‬
‫رطب بماء ‪ MQ‬المطهر‬
‫باألرجون في حمام مائي‬
‫عند ‪ 90‬درجة مئوية‬
‫‪ 60‬دقيقة ‪ ،‬تليها صوتنة‬
‫لمدة ‪ 5‬دقائق عند ‪80‬‬
‫درجة مئوية‪ .‬مباشرة بعد‬
‫صوتنة ‪ ،‬تمت إضافة ‪1‬‬
‫جزيء جرامي‪2( tPA ٪‬‬
‫نانومول ‪ )tPA‬من ميثانول‬
‫مركز‬
‫حل األسهم‪ .‬تم تبريد‬
‫العينات إلى درجة حرارة‬
‫الغرفة من قبل‬
‫تسجيل تسوس األسفار لـ‬
‫‪ tPA‬عند ‪ 430‬نانومتر‬
‫(متحمس بـ ‪ 298‬نانومتر‬
‫مصدر ليزر ‪ )LED‬عند ‪23‬‬
‫درجة مئوية و ‪ 10‬درجات‬
‫مئوية مع مقياس طيف‬
‫فلووتايم ‪ 200‬مع وحدة عد‬
‫فوتون مفردة مرتبطة‬
‫بالوقت ‪PicoHarp 300E‬‬
‫(‪ ، PicoQuant‬برلين ‪،‬‬
‫ألمانيا)‪ .‬تم التحكم في‬
 ‫درجة الحرارة بواسطة‬
‫بلتيير‬
‫العنصر والعينات تحت‬
‫التحريك المستمر‪ .‬كانت‬
‫البيانات‬
‫تم تحليلها باستخدام‬
‫برنامج ‪ FluoFit Pro‬الذي‬
‫تم الحصول عليه من‬
‫‪ .PicoQuant‬ال‬
‫تم الحصول على نوبات‬
‫االضمحالل من خالل إعادة‬
‫تطور تكرارية غير خطية‬
‫للمربعات الصغرى‬
‫طريقة ‪ ،‬على أساس‬
‫خوارزمية ‪Levenberg-‬‬
‫‪ .Marquardt‬مبرر‬
 ‫تم تقييم عدد األس من ‪c2‬‬
‫المخفض وعشوائي‬
‫توزيع المخلفات الموزونة‬

‫مقايسة إخماد اإلسفار‬

‫تم إجراء قياسات التبريد‬
‫اإلسفار عن طريق تحضير‬
‫اثنين‬
‫عينات (‪ 50‬ملي دهن‬
‫إجمالي) لكل خليط دهني‪:‬‬
‫العينة ‪ F‬الموجودة في‬
‫باإلضافة إلى الدهون‬
‫المرغوبة التي تحتوي على‬
‫كل من دهن تقطير (‪)7SLPC‬‬
‫ودهن مراسل األسفار (‪)CTL‬‬
‫‪ ،‬وعينة ‪ ، F0‬التي تحتوي‬
‫فقط على الدهون المرغوبة‬
‫والمراسل الدهني ‪.CTL‬‬
‫التكوين‬
‫من عينات ‪ F‬كانت ‪POPC /‬‬
‫‪7SLPC / PSM / XCer /‬‬
‫‪/ Chol / CTL ، 30/30/15‬‬
‫‪ 15/9/1‬بالمول ‪ ،‬وتكوين‬
‫عينات ‪F0 POPC / PSM /‬‬
‫‪/ XCer‬‬
‫‪Chol / CTL ،‬‬
‫‪ 60/15/15/9/1‬بواسطة‬
‫‪ .mol‬بعد خلط الدهون ‪،‬‬
‫كان المذيب‬
 ‫تمت إزالته تحت تيار من‬
‫النيتروجين متبوًعا بفراغ‬
‫لمدة ‪ 60‬دقيقة‪ .‬ال‬
‫تم بعد ذلك تخزين أغشية‬
‫الدهون الجافة تحت‬
‫األرجون عند ‪ 20‬درجة‬
‫مئوية حتى يتم ترطيبها‬
‫في وقت واحد مع ماء ‪MQ‬‬
‫المطهر باألرجون عند ‪65‬‬
‫درجة مئوية لمدة ‪30‬‬
‫دقيقة‪ .‬العينات‬
‫ثم تم صوتنة في حمام‬
‫مائي عند ‪ 65‬درجة مئوية‬
‫لمدة ‪ 5‬دقائق ثم تبريدها‬
 ‫لدرجة حرارة الغرفة قبل‬
‫القياسات‪ .‬انبعاث‬
‫الفلورة‬
‫تم تسجيل ‪ CTL‬عند ‪390‬‬
‫نانومتر (اإلثارة ‪324‬‬
‫نانومتر) بشكل مستمر مع‬
‫مقياس الطيف الضوئي‬
‫‪، QuantaMaster PTI‬‬
‫أثناء تسخين العينات تحت‬
‫التقليب المستمر من ‪10‬‬
‫إلى ‪ 65‬درجة مئوية بمعدل‬
‫‪ 5‬درجات مئوية ‪ /‬دقيقة‬
‫يتم التحكم فيها بواسطة‬
‫بلتيير‬
 ‫جزء‪ .‬تم حساب التبريد‬
‫الفلوري باستخدام ‪PTI‬‬
‫‪Felix32‬‬
‫برنامج وتم اإلبالغ عنه‬
‫كنسبة ‪ F / F0‬التي تشير‬
‫إلى جزء التألق غير‬
‫المروي عند درجة حرارة‬
‫معينة (‪.)63‬‬
‫تعتمد الطريقة على‬
‫التبريد االصطدام بين ‪CTL‬‬
‫و ‪، 7SLPC‬‬
‫التي تعرض تقسيًما جانبًيا‬
‫مختلًفا في طبقات ثنائية‬
‫حيث تكون غنية بالستيرول‬
‫المجاالت والتعايش‬
‫الجماعي المضطرب (‪.)POPC‬‬
 ‫وهكذا ‪ ،‬في درجات حرارة‬
‫منخفضة ‪،‬‬
‫الجزيئات مفصولة ماديا ‪،‬‬
‫ولكن كما هي درجة‬
‫الحرارة‬
‫زادت النطاقات الغنية‬
‫بالستيرول وأصبحت الحًقا‬
‫أكثر اضطراًب ا ‪ ،‬مما يؤدي‬
‫إلى زيادة قابلية إخماد‬
‫‪ ، CTL‬مما يسمح‬
‫الكشف عن ذوبان المجاالت‬
‫الغنية بالستيرول بفعل‬
‫درجة الحرارة‪ .‬ومع ذلك ‪،‬‬
‫فإن عدم وجود مجال ذوبان‬
‫قابل لالكتشاف (أي‬
‫التبريد الفعال‬
 ‫من مضان ‪ CTL‬طوال فترة‬
‫درجة الحرارة قيد‬
‫الدراسة) في الطبقات‬
‫الثنائية التي تتعايش‬
‫فيها النطاقات الغنية‬
‫بالسيراميد عالية‬
‫الترتيب مع الكتلة‬
‫المضطربة تشير إلى عدم‬
‫قدرة ‪ CTL‬على االنقسام‬
‫إلى‬
‫المجاالت الغنية‬
‫بالسيراميد (‪ .)55،63‬على‬
‫الرغم من أن المبلغ‬
‫اإلجمالي ‪7SLPC‬‬
 ‫مرتفع نوًعا ما ‪ ،‬يبدو‬
‫أنه يتصرف بشكل مشابه لـ‬
‫‪ POPC‬في مرحلة السوائل ‪،‬‬
‫بسبب ذوبان المجال في‬
‫طبقات ثنائية معقدة تم‬
‫اإلبالغ عنها بواسطة ‪SLPC‬‬
‫و ‪DSC‬‬
‫درجات حرارة انصهار‬
‫نهائية مماثلة‬

‫تائج ومناقشة‬
‫الخصائص الحرارية لثنائي‬
‫السيراميد ‪PSM /‬‬
‫مخاليط‬
‫تم توجيه الجزء األول من‬
‫هذه الدراسة إلى تحديد‬
‫تأثير الهيكل على تفاعالت‬
‫سيراميد مع‬
‫‪ .PSM‬سلوك الطور للخالئط‬
‫الثنائية سيراميد ‪PSM /‬‬
‫(‪ )1 :1‬تمت دراستها‬
‫باستخدام ‪( DSC‬الشكل ‪.)1‬‬
‫بشكل عام ‪ ،‬يمكن أن يكون‬
‫ذكر أنه ال يوجد فصل واضح‬
‫بين اثنين من‬
‫السفينغوليبيدات‬
‫إلى مكونات نقية ‪ ،‬ولكن‬
‫تفاعلت جميع أنواع‬
‫جزيئات السيراميد بشكل‬
‫إيجابي مع ‪ ، PSM‬وعرضها‬
‫أكثر أو أقل تعقيًد ا من‬
‫انتقاالت الطور من الجل‬
 ‫إلى السائل الناشئة عن‬
‫العديد من التركيبات‬
‫المكونة‪ .‬المنتصف‬
‫درجات الحرارة (‪)Tm‬‬
‫للتحوالت الرئيسية من‬
‫الجل إلى السائل لـ‬
‫يتم سرد القمم الماصة‬
‫للحرارة الواسعة في ‪F‬‬
‫تأثير طول سلسلة ‪N-acyl‬‬
‫المشبعة‬
‫انتقال ذوبان الخليط‬
‫الثنائي ‪، PSM / C16-cer‬‬
‫مع امتصاص الحرارة‬
‫الرئيسي أعلى بقليل من‬
‫‪ 70‬درجة مئوية (الشكل ‪)1‬‬
‫‪،‬‬
 ‫يتفق جيًد ا مع التقارير‬
‫السابقة لهذا الخليط (‬
‫‪-63،69‬‬
‫‪ .)72‬مما يعكس وجود‬
‫العديد من التراكيب‬
‫المكونة ‪ ،‬كان انتقال‬
‫الذوبان هذا في السابق‬
‫مفكًكا‬
‫إلى مكونين يختلفان في‬
‫النسب النسبية لكل منهما‬
‫الشحوم السفينغولية (‬
‫‪ .)69‬إدخال عدم تطابق‬
‫السلسلة مع‬
‫سيراميد عن طريق زيادة‬
‫طول سلسلة ‪ N-acyl‬من‬
‫يعطي ‪ C16‬إلى ‪ C18‬أو ‪C24‬‬
‫اختالًفا بسيًطا جًد ا في ‪Tm‬‬
‫‪of‬‬
‫السيراميد كمكونات نقية‬
‫(تتراوح من ‪ 91‬درجة‬
‫مئوية إلى‬
‫‪ 93‬ج (‪ .))9،45‬وبالمثل ‪،‬‬
‫االختالف في طول سلسلة ‪N-‬‬
‫‪acyl‬‬
‫أدى إلى اختالفات طفيفة‬
‫إلى حد ما في ‪ Tm‬الرئيسي‬
‫عندما‬
‫تم خلط سيراميد مع ‪PSM‬‬
‫(الشكل ‪ .)1‬أقل قليال‬
‫لوحظ ‪ Tm‬في وجود ‪C18-cer‬‬
‫و ‪C24-cer‬‬
 ‫مقارنة بـ ‪C16-cer‬‬
‫(الشكل ‪ ، )1‬على الرغم‬
‫من عرض ‪C16-cer‬‬
‫أقل ‪ Tm‬من هذه السيراميد‬
‫كمكون نقي‪ .‬ومع ذلك ‪،‬‬
‫يبدو أن زيادة درجة عدم‬
‫تناسق السلسلة‬
‫تؤدي إلى زيادة تعقيد‬
‫االنتقال‬
‫(توسيع ذروة االنتقال)‬
‫ربما كان هذا نتيجة لعدم‬
‫تطابق أكبر مع المواد‬
‫الكارهة للماء مما أدى‬
‫إلى انخفاض التعبئة‬
‫الجزيئية ودرجة أقل من‬
‫التفاعالت ‪ ،‬والتي‬
 ‫لوحظ في دراسات أحادية‬
‫الطبقة باستخدام ثنائي‬
‫مختلف‬
‫مخاليط من ‪ SMs‬و‬
‫‪ ceramides‬بسلسلة ‪N-acyl‬‬
‫مختلفة‬
‫أطوال (‪ .)46‬االنتقال‬
‫معقدة وواسعة بشكل خاص‬
‫تم تسجيله لخليط ‪C24-cer‬‬
‫‪ / PSM‬على األرجح أيًضا‬
‫ُي عزى جزئًيا إلى سلسلة‬
‫التداخل‪ .‬أثير‬
‫الهيدروكسيل البيني‬
‫ومجموعة رأس الفوسفات‬
‫بشكل عام ‪ ،‬تظهر ‪ SMs‬و‬
‫‪ ceramides‬المحتوية على‬
 ‫العمود الفقري‬
‫للفيتوسفينجوزين درجات‬
‫حرارة انتقال أعلى من‬
‫الهالم إلى السائل‬
‫(كمكونات نقية) من‬
‫الشحوم السفينجولية‬
‫المماثلة‬
‫مع العمود الفقري‬
‫سفينغوزين (‪ .)47.73‬على‬
‫سبيل المثال ‪-C18 ،‬‬
‫يذوب النبات النباتي عند‬
‫‪ 110‬درجة مئوية (‪، )48‬‬
‫بينما يذوب ‪ C18-cer‬عند‬
‫‪ 91-93‬ج (‪ .)9،45‬تعزى‬
‫هذه المالحظة إلى‬
 ‫تعزيز قدرة الترابط ‪H‬‬
‫بسبب ‪-C4‬‬
‫يا للعمود الفقري‬
‫فيتوسفينجوزين‪ .‬ومع‬
‫ذلك ‪ ،‬وفقا‬
‫بالنسبة لكل من الدراسات‬
‫أحادية الطبقة (‪)74‬‬
‫واألشعة تحت الحمراء (‪)47‬‬
‫‪ ،‬فإن سالسل‬
‫فيتوسفينجوزين أقل‬
‫إحكاًم ا من سالسل‬
‫السفينجوزين‪.‬‬
‫يفسر هذا على األرجح‬
‫المالحظة الواردة في‬
‫الشكل ‪ ، 1‬والتي فيها‬
‫يعرض خليط ‪C16-phyto-cer‬‬
‫‪ / PSM‬درجة حرارة انتقال‬
‫أقل بمقدار ‪ 4‬درجات‬
‫مئوية تقريًبا بالنسبة‬
‫لمزيج ‪.C16-cer / PSM‬‬
‫وهكذا ‪ ،‬يبدو أنه عند‬
‫خلط ‪ C16-phyto-cer‬مع‬
‫‪ PSM‬التأثير المزعزع‬
‫لالستقرار لتعبئة سلسلة‬
‫فضفاضة‬
‫يصبح ‪ C16-phyto-cer‬أكثر‬
‫وضوًحا من تأثير التثبيت‬
‫لقدرة الترابط ‪.H‬‬
‫على غرار الهيدروكسيل في‬
‫‪ ، phytosphingosine‬تم‬
‫اإلبالغ عن ‪a-‬‬
 ‫)‪hydroxylation (C2-OH‬‬
‫لسلسلة ‪N-acyl‬‬
‫يسبب زيادة في ‪ Tm‬من ‪SM‬‬
‫النقي بالنسبة إلى‬
‫‪ SM‬غير هيدروكسيل (‪.)75‬‬
‫يعمل الهيدروكسيل أيًضا‬
‫على استقرار التعبئة‬
‫الجزيئية للسيراميد‬
‫بالنسبة لها‬
‫نظائرها غير‬
‫الهيدروكسيلية (‪ .)76‬ومع‬
‫ذلك ‪ ،‬في هذه الدراسة ‪،‬‬
‫كان ‪ Tm‬للخالئط الثنائية‬
‫مع ‪ PSM‬متساوًي ا تقريًبا‬
‫(<‪ C 1‬فرق) لكل من ‪C18‬‬
‫‪ (2OH) -cer‬والسلسلة‬
‫مكافئ ‪( C18-cer‬الشكل ‪)1‬‬
‫‪ ،‬مشيًرا إلى أنه في‬
‫ثنائي‬
‫خليط من سيراميد ‪a-‬‬
‫‪ hydroxylated‬و ‪SM‬‬
‫‪، nonhydroxylated‬‬
‫استقرار التفاعالت بين‬
‫الجزيئات بواسطة‬
‫لم يعد الهيدروكسيل‬
‫واضًحا‪ .‬ومن المثير‬
‫لالهتمام‪،‬‬
‫في كل من ‪ phytoSM‬و‬
‫‪ ، phytoceramide‬مقدمة‬
‫من‬
‫يسبب ‪a-hydroxylation‬‬
‫انخفاًضا واضًحا في ‪ Tm‬و‬
 ‫زعزعة استقرار التفاعالت‬
‫المتسلسلة (‪، 48 ، 47‬‬
‫‪ ، )73‬ربما‬
‫بسبب إضعاف رابطة أميد ‪H‬‬
‫)‪ (47‬مًعا‬
‫مع عائق معقمة مقترح‬
‫لتعبئة سلسلة األسيل‬
‫(‪ )48‬الناجم عن‬
‫الهيدروكسيل‪ .‬هذه‬
‫المالحظات‬
‫تشير إلى أن الخصائص‬
‫الفيزيائية المحددة‬
‫بوساطة أ‬
‫التفاصيل الهيكلية ‪ ،‬مثل‬
‫التثبيت الناجم عن‬
‫الهيدروكسيل للتفاعالت‬
 ‫البينية للشحميات‬
‫السفينغولية مع‬
‫العمود الفقري‬
‫السفينجوزين ‪ ،‬ال ينتقل‬
‫بالضرورة على هذا النحو‬
‫إلى أنواع أخرى من‬
‫سفينجوليبيد ‪ ،‬أو إلى‬
‫خليط من عدة أنواع‬
‫سفينجوليبيد‬
‫بسبب مجموعة الفوسفات‬
‫عالية القطبية ‪Cer-1-P ،‬‬
‫يعرض خصائص بيوفيزيائية‬
‫مختلفة جًد ا عن هؤالء‬
‫من سيراميد‪ .‬على عكس‬
‫سيراميد ‪ ،‬التركيب‬
‫الجزيئي‬
 ‫من ‪ Cer-1-P‬يسمح لها‬
‫بتكوين طبقات ثنائية في‬
‫وسط مائي عندما‬
‫الحاضر كمكون نقي (‪.)49‬‬
‫‪ Cer-1-P‬في حالته النقية‬
‫يعرض أيًضا انتقااًل أقل‬
‫بكثير من الجل إلى‬
‫السائل‬
‫درجة الحرارة (~ ‪ 65‬درجة‬
‫مئوية (‪ ))49‬بالنسبة إلى‬
‫السلسلة المتطابقة‬
‫‪ 90 ~( C16-cer‬درجة‬
‫مئوية (‪ .))77.78‬هذا هو‬
‫نتيجة ل‬
‫تنافر مجموعة الرأس داخل‬
‫‪ ، Cer-1-P‬وما يليها‬
 ‫تخفيض في سلسلة التعبئة‬
‫الجانبية‪ .‬وبالتالي ‪ ،‬لم‬
‫يكن من غير المتوقع أن‬
‫يكون ‪ Tm‬للخليط الثنائي‬
‫‪ PSM‬مع ‪ Cer1-P‬أقل بكثير‬
‫من مكافئ السلسلة‬
‫‪ ، C16-cer‬يعرض أيًضا‬
‫ذروة انتقال أوسع تشير‬
‫مرحلة االنتقال المعقدة‬
‫للجل وضعف االمتزاج مع‬
‫‪PSM‬‬
‫(رسم بياني ‪ .)1‬ومن‬
‫المثير لالهتمام ‪ ،‬انصهار‬
‫نهاية المرحلة الرئيسية‬
‫انتقال خليط ‪Cer-1-P /‬‬
‫‪ ، PSM‬والذي لم يحدث‬
‫عرض أي فصل ظاهر لـ ‪PSM‬‬
‫و ‪ Cer-1-P‬إلى‬
‫المكونات النقية ‪ ،‬ظهرت‬
‫تقريًبا عند درجة حرارة‬
‫متساوية‬
‫مثل االنتقال لـ ‪Cer-1-P‬‬
‫النقي‬
‫تأثير سلسلة ‪ N-acyl‬غير‬
‫المشبعة وقاعدة السلسلة‬
‫الطويلة‬
‫روابط رابطة الدول‬
‫المستقلة المزدوجة في‬
‫سالسل أسيل الدهنية تربك‬
‫السلسلة‬
 ‫التعبئة ‪ ،‬مما يقلل من‬
‫ترتيب السلسلة وبالتالي‬
‫أيًضا‬
‫درجة حرارة انتقال‬
‫الدهون من الجل إلى‬
‫السائل بطريقة تعتمد على‬
‫الموضع (‪ .)79‬وبالتالي ‪،‬‬
‫فليس من المستغرب ذلك‬
‫كال ‪ C18: 1D9c-cer‬و ‪C24:‬‬
‫‪ 1D15c-cer‬في مخاليط‬
‫ثنائية‬
‫مع عرض ‪ PSM‬أقل من ‪Tm: s‬‬
‫من نظيراتها المشبعة‬
‫(الشكل ‪ .)1‬تم إحداث‬
‫انخفاض أكبر في ‪Tm‬‬
‫بواسطة الرابطة المزدوجة‬
‫في ‪C18: 1D9c-cer (~ 23‬‬
‫درجة مئوية أقل من‬
‫‪ )C18-cer‬من ‪C24: 1D15c-‬‬
‫‪ cer (~ 9‬درجة مئوية أقل‬
‫من ‪-C24‬‬
‫‪ ، )cer‬والذي يعكس‬
‫التأثير المعتمد على‬
‫الموضع لعدم تشبع رابطة‬
‫الدول المستقلة على‬
‫تعبئة السلسلة‪ .‬في كل من‬
‫‪ C18: 1D9c-cer‬و‬
‫‪ ، C24: 1D15c-cer‬تزيد‬
‫الرابطة المزدوجة رابطة‬
‫الدول المستقلة من‬
‫الجانب‬
‫متطلبات الفضاء للجزيئات‬
‫‪ ،‬ولكن التأثير واضح‬
‫كثر وضوحا في ‪C18: 1D9c-‬‬
‫‪ cer‬حيث الرابطة‬
‫المزدوجة‬
‫يقع في المنطقة الوسطى‬
‫من سلسلة ‪ ، N-acyl‬مثل‬
‫على عكس الرابطة‬
‫المزدوجة في ‪C24: 1D15c-‬‬
‫‪ ، cer‬وهو‬
‫تقع بالقرب من قلب غشاء‬
‫مسعور ‪ ،‬بجانب‬
‫النهاية البعيدة للقاعدة‬
‫السفينجويدية حيث‬
‫االضطراب‬
 ‫في سلسلة التعبئة أقل‬
‫دراماتيكية (‪ .)74‬وفًقا‬
‫لذلك ‪ ،‬فإن‬
‫رابطة ‪ cis-double‬في‬
‫‪ C18: 1D12c-cer‬تسبب‬
‫أيًضا في حدوث انخفاض‬
‫في ‪ Tm‬للخليط الثنائي‬
‫بالنسبة لـ ‪، C18-cer‬‬
‫ولكن‬
‫كان حجم هذا التأثير‬
‫أصغر إلى حد ما من ل‬
‫‪ .C18: 1D9c-cer‬إجماًال ‪،‬‬
‫تحوالت المخاليط الثنائية‬
‫من ‪ PSM‬مع السيراميدات‬
‫التي تحتوي على ‪N-acyl‬‬
‫غير المشبع‬
‫بدت السالسل أكثر تعاوًنا‬
‫من التحوالت‬
‫للمخاليط المحتوية على‬
‫سيراميد مشبع أو‬
‫هيدروكسيل ‪ ،‬مما يشير‬
‫إلى زيادة قابلية‬
‫االمتزاج لألولى‬
‫ومن المثير لالهتمام ‪،‬‬
‫مقارنًة بـ ‪C18-cer‬‬
‫المشبع ‪ ،‬أن الرابطة‬
‫المزدوجة في قاعدة‬
‫السفينجويد لـ ‪C18-‬‬
‫‪sphingadiene-cer‬‬
‫يبدو أنه يحث على تخفيض‬
‫أكبر في ‪ Tm‬للثنائي‬
 ‫خليط من الرابطة‬
‫المزدوجة رابطة الدول‬
‫المستقلة في عمق الطبقة‬
‫الثنائية المقابل تقريًبا‬
‫في ‪( C18: 1D12c-cer‬راجع‬
‫المخطط‬
‫‪ S1‬للتركيبات‬
‫الكيميائية)‪ .‬عالوة على‬
‫ذلك ‪ ،‬الذوبان‬
‫كان انتقال خليط ‪C18-‬‬
‫‪sphingadiene-cer / PSM‬‬
‫من الواضح أنها أقل‬
‫تعاوًنا من انتقال‬
‫‪ :C18‬خليط ‪1D12c-cer /‬‬
‫‪ .PSM‬هذه النتائج تشير‬
‫إلى ذلك‬
‫أدى عدم التشبع في سلسلة‬
‫‪ N-acyl‬إلى اضطراب‬
‫تفاعالت السيراميد ‪PSM /‬‬
‫بدرجة أقل من عدم التشبع‬
‫في قاعدة السفينجويد ‪،‬‬
‫مما يشير إلى اختالف‬
‫بين سالسل هيدروكربون‬
‫السيراميد في تفاعلها مع‬
‫‪ ، PSM‬ربما بسبب‬
‫التأثيرات المختلفة لـ‬
‫الروابط المزدوجة على‬
‫المنطقة البينية‬
‫للسيراميد‪.‬‬
‫من المرجح أن تحفز‬
‫الرابطة المزدوجة رابطة‬
‫الدول المستقلة في قاعدة‬
‫السفينجويد‬
‫اضطراب التوجه حول‬
‫الرابطة المزدوجة‬
‫العابرة لـ ‪، C4‬‬
‫وهو عامل مهم في تعزيز‬
‫التعبئة القريبة‬
‫من سالسل سيراميد أسيل (‬
‫‪ ، )74،80‬وقد تم اقتراحه‬
‫كدور في استقرار‬
‫الجزيئات‬
‫شبكة روابط ‪ H‬داخل‬
‫سيراميد‬
‫خواص السيراميد في طبقات‬
‫ثنائية من البوليمرات‬
‫العضوية الثابتة السائلة‬
 ‫بعد ذلك ‪ ،‬درسنا خصائص‬
‫السيراميد في ثنائي‬
‫مخاليط مع ‪ ، POPC‬مخاليط‬
‫ثالثية مع ‪ POPC‬و‬
‫‪ ، PSM‬وكذلك في الخالئط‬
‫الرباعية مع ‪POPC ،‬‬
‫‪، PSM‬‬
‫والكولسترول‪ .‬تم تحديد‬
‫التكوين واالستقرار‬
‫الحراري للنطاقات الغنية‬
‫بالسيراميد (‪ )PSM /‬في‬
‫الملوثات العضوية‬
‫الثابتة من‬
‫تباين ‪ tPA‬في الطبقات‬
‫الثنائية كدالة لـ‬
 ‫زيادة درجة الحرارة‬
‫(الشكل ‪ .)S1‬في ‪POPC‬‬
‫‪bilayers‬‬
‫تحتوي على ‪( C16-cer‬في‬
‫الجزء المولي المستخدم‬
‫في هذه الدراسة) ‪،‬‬
‫ومن المعروف أن سيراميد‬
‫يفصل أفقيًا في مرتبة‬
‫عالية‬
‫المجاالت الغنية‬
‫بالسيراميد التي تتعايش‬
‫مع فقراء السيراميد‬
‫مرحلة السوائل الغنية‬
‫بالـ )‪ .POPC (16‬في مثل‬
‫هذه الطبقات الثنائية ‪،‬‬
‫يفضل تقسيم ‪ tPA‬إلى‬
 ‫الطور المرتب الغني‬
‫بالسيراميد‬
‫(‪ ، )15،17،51،53‬وفي عرض‬
‫نطاق درجات الحرارة‬
‫المنخفضة‬
‫قيم تباين عالية تدل على‬
‫ارتفاع الجزيئية‬
‫طلب‪ .‬عند زيادة درجة‬
‫الحرارة ‪ ،‬ينخفض تباين‬
‫الخواص مع ذوبان المجاالت‬
‫‪ ،‬حتى تصل في النهاية‬
‫إلى نقطة ما‬
‫حيث تتساوى مع القيم‬
‫النموذجية لثنائيات‬
‫السوائل‬
 ‫(األشكال ‪ .)S1 – S3‬في‬
‫هذه الدراسة ‪ ،‬نشير إلى‬
‫الذوبان النهائي لـ‬
‫المجاالت المرتبة (على‬
‫النحو المحدد بواسطة‬
‫قياسات تباين ‪، )tPA‬‬
‫وسرد درجات الحرارة‬
‫للتركيبات المختلفة في‬
‫الجدول ‪2‬‬
‫باإلضافة إلى تباين‬
‫الحالة المستقرة ‪ ،‬قمنا‬
‫أيًضا بالقياس‬
‫يتالشى التألق الذي تم‬
‫حله بمرور الوقت لـ ‪tPA‬‬
‫في هذه الخالئط لمواصلة‬
 ‫استكشاف خصائص المجاالت‬
‫المتكونة‬
‫بواسطة سيراميد‪ .‬عمر‬
‫الحالة المثارة لـ ‪tPA‬‬
‫حساس لترتيب التعبئة في‬
‫محيطه ‪ ،‬وأصبح‬
‫أطول بشكل ملحوظ في‬
‫المراحل المرتبة مقارنة‬
‫بمراحل السوائل‬
‫(‪ .)15،51،82،83‬لذلك ‪،‬‬
‫توفر فترات حياة ‪tPA‬‬
‫وسيلة حساسة الستنتاج‬
‫التغايرات في درجة‬
‫سلسلة التعبئة الجانبية‬
‫داخل أغشية ثنائية‬
‫الطبقة ‪ ،‬على وجه الخصوص‬
 ‫في سياق المراحل الغنية‬
‫بالسيراميد‪ .‬ومع ذلك ‪،‬‬
‫ينبغي للمرء‬
‫ضع في اعتبارك أن مكونات‬
‫عمر ‪ tPA‬تعتمد على‬
‫التقسيم الجانبي لـ ‪tPA‬‬
‫في بيئات مختلفة ‪ ،‬و‬
‫يمكن أن يختلف سلوك‬
‫التقسيم هذا حسب تكوين‬
‫تختلف الطبقات الثنائية‪.‬‬
‫من غير المجدي تحديد‬
‫معامالت التقسيم لـ ‪tPA‬‬
‫في جميع المراحل‬
‫والتركيبات الممكنة‬
‫مستخدم؛ لذلك ‪ ،‬بيانات‬
‫عمر ‪ tPA‬ألنظمة مختلفة‬
 ‫ينبغي مقارنتها ببعض‬
‫الحذر‪ .‬متوسط عمر التألق‬
‫‪ ،‬والذي يتم حسابه بناًء‬
‫على كسور‬
‫مساهمات جميع مكونات‬
‫العمر الموجودة في‬
‫نظام معين ‪ ،‬جنًبا إلى‬
‫جنب مع المكونات األطول‬
‫عمًرا‬
‫ُت عزى إلى المراحل األكثر‬
‫ترتيًبا (أي مجاالت‬
‫‪ )ceramiderich‬الموجودة‬
‫في الطبقات الثنائية ‪،‬‬
‫في التين‪2 .‬‬
 ‫و ‪ ، 3‬في حين يتم سرد‬
‫جميع مكونات االنحالل‬
‫الفردية‬
‫في الجداول من ‪ S1‬إلى ‪S4‬‬
‫سيراميدات مشبعة في‬
‫طبقات ثنائية من البولي‬
‫إيثيلين تيرفثاالت‬
‫على الرغم من أن عرض‬
‫‪ -C16‬و ‪ -C18‬و ‪C24-cer‬‬
‫المشبع قليل‬
‫االختالف في ‪ Tm‬كمكونات‬
‫نقية (تتراوح من ‪ 91‬درجة‬
‫مئوية‬
‫إلى ‪ 93‬درجة مئوية (‬
‫‪ ، ))9،45‬وفي مخاليط‬
‫ثنائية مع ‪( PSM‬تتراوح‬
 ‫من ‪ 72.2‬إلى ‪ 73.8‬درجة‬
‫مئوية ‪ ،‬الشكل ‪ ، )1‬لوحظ‬
‫زيادة درجات حرارة‬
‫انصهار المجال في طبقات‬
‫ثنائية من الملوثات‬
‫العضوية الثابتة‬
‫فيما يتعلق بطول سلسلة‬
‫‪( N-acyl‬الجدول ‪، 2‬‬
‫الخالئط الثنائية)‪.‬‬
‫تتماشى هذه المالحظة مع‬
‫النتائج التي تم اإلبالغ‬
‫عنها سابًقا للخالئط‬
‫المماثلة مع الملوثات‬
‫العضوية الثابتة (‪.)14‬‬
‫هويف‬