Pràctiques Laboratori d’instrumentació Departament de Biologia Fonamental i Ciències de la Salut

2015-16

PRÀCTICA 1

1.1. ASSAIG DE COLORACIÓ DE METALLS A LA FLAMA

Objectiu
Reconèixer la presència de determinats metalls pel color que apareix al exposar els seus
composts a la flama d’un encenedor.
Material

Encenedor d’alcohol Gradeta de tubs

Eppendorfs

Ansa de sembra Espàtula

Propipetes Pipetes de vidre

Reactius
- Sals de distints composts: clorurs de Na, K, Ca, Mn, Zn, sulfat de coure, nitrat
d’estronci, àcid bòric.

Procediment
- Preparar una dissolució saturada de cada sal en aigua bidestil·lada dins eppendorsfs.
- Introduir una vareta de vidre dins cada dissolució.
- Posar la vareta de vidre a la flama.
- Observar el color que produeixen els diferents metalls.

Qüestions
- Quins colors produeixen els diferents metalls? Completa la taula següent:

NaCl KCl CaCl2 MnCl2 ZnCl2 CuSO4 Sr(NO3)2 Àc. Bòric

Color

Pràctica 1 1/4
Pràctiques Laboratori d’instrumentació Departament de Biologia Fonamental i Ciències de la Salut
2015-16

1.2. OBTENIR L’ESPECTRE D’ABSORCIÓ DE LA RIBOFLAVINA I GLUCOSA

Objectiu
Utilitzar el colorímetre per determinar l’espectre d’absorció de la riboflavina i glucosa.

Material

Tubs corning 15 mL Pipetes automàtiques Gradeta de tubs

Tubs colorímetre Espàtula

Propipetes Pipetes de vidre

Balança Colorímetre

Reactius
- Glucosa 0.5 mM
- Riboflavina 0.05mM

Procediment
- Preparar una dissolució de cada molècula en aigua destil·lada dins tubs corning de 15
mL.
- Posar 3 mL de cada dissolució en un tub de colorímetre.
- Calibrar el colorímetre: ajustar la D.O a zero amb un tub d’aigua destil.lada, i a D.O
infinit amb un tub opac que impedeix el pas de la llum.
- Llegir l’absorbància de cada molècula a 340 nm.
- Per obtenir l’espectre d’absorció llegir les absorbàncies a diferents longituds d’ona, des
de 340nm fins a 600 nm. Fer la lectura de 10 en 10 nm per la riboflavina i de 20 en 20
nm per la glucosa.
-
Qüestions
- Indica el màxim d’absorció de cada molècula
- Fes la representació gràfica de l'espectre d'absorció de la riboflavina i de la glucosa.
- Explica la diferència que has observat.

Pràctica 1 2/4
Pràctiques Laboratori d’instrumentació Departament de Biologia Fonamental i Ciències de la Salut
2015-16

1.3. DETERMINAR L’ESPECTRE D’ABSORCIÓ DE LES DIFERENTS BIOMOLÈCULES

Objectiu
Utilitzar l’espectrofotòmetre per a determinar la capacitat d’absorció de les diferents
biomolècules.

Material

Tubs corning 15 mL Pipetes automàtiques Espàtula

Cubetes de quars Cubetes espectrofotòmetre Gradeta de tubs

Propipetes Pipetes de vidre

Balança Espectrofotòmetre

Reactius
- Glucosa 0.5 mM
- Riboflavina 0.05mM
- DNA de salmó 28,8μg/mL
- Albúmina 0.1%
- Alanina 0.05 M
- Fenilalanina 0.08 M

Pràctica 1 3/4
Pràctiques Laboratori d’instrumentació Departament de Biologia Fonamental i Ciències de la Salut
2015-16

Procediment
- Preparar una dissolució de cada molècula orgànica en aigua bidestil·lada dins tubs
corning.
- Posar 3 mL de cada dissolució en una cubeta d’espectrofotòmetre. En el cas de la
dissolució amb DNA i proteïna s’han d’utilitzar les cubetes de quars.
- Posar cada cubeta a l’espectrofotòmetre i fer l’espectre d’absorció:
- Glucosa i riboflavina des de 340 fins a 600nm.
- DNA, albúmina, alanina i fenilalanina des de 190 fins a 400nm.
- Determinar el màxim d’aborció per a cada molècula.

Qüestions
- Totes les molècules orgàniques tenen un màxim d’absorció? Per què?
- Indica el màxim d’absorció de les diferents molècules

Pràctica 1 4/4