Textbook Optics Photonics and Laser Technology Paulo A Ribeiro Ebook All Chapter PDF

Optics Photonics and Laser
Technology Paulo A. Ribeiro

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Optics Photonics and Laser Technology 2017 Paulo

Ribeiro
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Photoptics 2014 Proceedings of the 2nd International

Conference on Photonics Optics and Laser Technology
Revised Selected Papers 1st Edition Paulo A. Ribeiro
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the-2nd-international-conference-on-photonics-optics-and-laser-
technology-revised-selected-papers-1st-edition-paulo-a-ribeiro/
Photonics rules of thumb : optics, electro-optics,

fiber optics, and lasers Third Edition Edward Friedman
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electro-optics-fiber-optics-and-lasers-third-edition-edward-
friedman/
Modern Optics and Photonics of Nano- And Microsystems

First Edition Yu N Kulchin
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The Physics and Technology of Laser Resonators First
Edition Hall
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laser-resonators-first-edition-hall/
Fiber Optics Physics and Technology 2nd Edition Fedor

Mitschke (Auth.)
https://textbookfull.com/product/fiber-optics-physics-and-
technology-2nd-edition-fedor-mitschke-auth/
Laser Technology Applications in Adhesion and Related

Areas 1st Edition K. L. Mittal
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in-adhesion-and-related-areas-1st-edition-k-l-mittal/
Fundamentals of Photonics 3rd Edition Bahaa E. A. Saleh
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edition-bahaa-e-a-saleh/
Advances in Laser Materials Processing Technology

Research and Applications 2nd Edition J. R. Lawrence
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processing-technology-research-and-applications-2nd-edition-j-r-
lawrence/
Springer Series in Optical Sciences 218
Paulo A. Ribeiro · Maria Raposo Editors
Optics,
Photonics
and Laser
Technology
Springer Series in Optical Sciences
Volume 218
Founded by
H. K. V. Lotsch
Editor-in-chief
William T. Rhodes, Florida Atlantic University, Boca Raton, FL, USA
Series editors
Ali Adibi, School of Electrical and Computer Engineering, Georgia Institute of
Technology, Atlanta, GA, USA
Toshimitsu Asakura, Hokkai-Gakuen University, Sapporo, Hokkaido, Japan
Theodor W. Hänsch, Max-Planck-Institut für Quantenoptik, Garching, Bayern,
Germany
Ferenc Krausz, Garching, Bayern, Germany
Barry R. Masters, Cambridge, MA, USA
Katsumi Midorikawa, Laser Technology Laboratory, RIKEN Advanced Science
Institute, Saitama, Japan
Bo A. J. Monemar, Department of Physics and Measurement Technology,
Linköping University, Linköping, Sweden
Herbert Venghaus, Ostseebad Binz, Germany
Horst Weber, Berlin, Germany
Harald Weinfurter, München, Germany
Springer Series in Optical Sciences is led by Editor-in-Chief William T. Rhodes,
Georgia Institute of Technology, USA, and provides an expanding selection of
research monographs in all major areas of optics:
- lasers and quantum optics

- ultrafast phenomena
- optical spectroscopy techniques
- optoelectronics
- information optics
- applied laser technology
- industrial applications and
- other topics of contemporary interest.
With this broad coverage of topics the series is useful to research scientists and
engineers who need up-to-date reference books.
More information about this series at http://www.springer.com/series/624

Paulo A. Ribeiro Maria Raposo
•
Editors
Optics, Photonics and Laser

Technology
123
Editors
Paulo A. Ribeiro Maria Raposo
Faculdade de Ciências e Tecnologia Faculdade de Ciências e Tecnologia
Universidade Nova de Lisboa Universidade Nova de Lisboa
Caparica, Portugal Caparica, Portugal
ISSN 0342-4111 ISSN 1556-1534 (electronic)

Springer Series in Optical Sciences
ISBN 978-3-319-98547-3 ISBN 978-3-319-98548-0 (eBook)
https://doi.org/10.1007/978-3-319-98548-0
Library of Congress Control Number: 2018950932
© Springer Nature Switzerland AG 2018

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jurisdictional claims in published maps and institutional affiliations.
This Springer imprint is published by the registered company Springer Nature Switzerland AG
The registered company address is: Gewerbestrasse 11, 6330 Cham, Switzerland
Preface
The present book includes reviews on selected relevant scientific themes inspired
on papers presented at the 4th International Conference on Photonics, Optics and
Laser Technology (PHOTOPTICS 2016), held in Rome, Italy, from 27 to 29
February 2016. The event received 98 paper submissions from 29 countries, which
have been selected by the chairs, based on a set criteria items that include the
assessment and comments provided by the program committee members, the ses-
sion chairs’ assessment and also the program chairs’ global view of all contribu-
tions selected to be included in the technical program. Under this compliance, this
book covers both theoretical and practical aspects within Optics, Photonics and
Laser Technologies’ main tracks, with the chapter contents contributing to the
understanding of current research trends. The book contents, spread through eleven
chapters, cover imaging and microscopy—techniques and apparatus, with contri-
butions as the status quo of waveguide evanescent fluorescence and scattering
microscopy, micro-lenslet arrays’ characterization through holographic interfer-
ometer microscopy, performance of segmented reflecting telescopes; optical com-
munications where estimation of the OSNR penalty as a result of in-band crosstalk
is outlined; laser safety, where high accuracy laser pointer assessment is addressed;
biomedical developments and applications including contributions as mitigation of
speckle noise in optical coherence tomograms toward dynamics of blood perfusion
and tissue oxygenation, tissue’s conservation assessment via coherent hemody-
namic spectroscopy and, finally, the field of photonic materials and devices gathers
the contributions, CMOS-based photomultiplier devices, photochromic materials
toward energy harvesting and novel photo-thermo-refractive for photonic, plas-
monic, fluidic and luminescent devices.
We thank all the authors for their contributions and also to the reviewers who
have helped ensuring the quality of this publication.
Caparica, Portugal Maria Raposo

Paulo A. Ribeiro
v
Organization
Conference Chair
Paulo A. Ribeiro, CEFITEC/FCT/UNL, Portugal
Program Chair
Maria Raposo, CEFITEC, FCT/UNL, Portugal
Program Committee
Jean–Luc Adam, Université de Rennes 1—CNRS, France
Kamal E. Alameh, Edith Cowan University, Australia
Marcio Alencar, Universidade Federal de Sergipe, Brazil
Augusto A. Iribarren Alfonso, Instituto de Ciencia y Tecnología de Materiales,
Universidad de La Habana, Cuba
Tatiana Alieva, Universidad Complutense de Madrid, Spain
Hakan Altan, Terahertz Research Laboratory, Physics Department, METU, Turkey
António Amorim, Departamento de Física da Faculdade de Ciências da
Universidade de Lisboa, Portugal
Alexander Argyros, Institute of Photonics and Optical Science, University of
Sydney, Australia
Andrea Armani, University of Southern California, USA
Jhon Fredy Martinez Avila, Universidade Federal de Sergipe, Brazil
Morten Bache, Technical University of Denmark, Denmark
Vanderlei Salvador Bagnato, Instituto de Física de São Carlos/Universidade de São
Paulo, Brazil
Francesco Baldini, Istituto di Fisica Applicata “Nello Carrara,” Italy
Pedro Barquinha, Departamento de Ciência dos Materiais, Faculdade de Ciências e
Tecnologia, Universidade Nova de Lisboa, Portugal
Almut Beige, University of Leeds, UK
Alessandro Bettini, Università di Padova, Italy
vii
viii Organization
Wojtek J. Bock, Université du Quebec Outaouais, Canada

Antonella Bogoni, Scuola Superiore Sant’Anna-TeCIP, Italy
Svetlana V. Boriskina, Massachusetts Institute of Technology, USA
Ekaterina Borisova, Institute of Electronics—Bulgarian Academy of Sciences,
Bulgaria
Sophie Bouchoule, CNRS, France
Özdal Boyraz, University of California, Irvine, USA
Remy Braive, Laboratory for Photonics and Nanostructures/CNRS, France
Giovanni Breglio, Università degli Studi di Napoli Federico II, Italy
Mark L. Brongersma, Stanford University, USA
Tom Brown, University of St Andrews, UK
Alexandre Cabral, Laboratory of Optics, Lasers and Systems (LOLS), Faculdade de
Ciências da Universidade de Lisboa, Portugal
Patrice Camy, CIMAP Laboratory, France
John Canning, University of Technology Sydney, Australia
Adolfo Cartaxo, Instituto de Telecomunicações, Instituto Superior Técnico,
Portugal
Maurizio Casalino, IMM, Italian National Research Council (CNR), Italy
Eric Cassan, Institut d’Electronique Fondamentale (UMR 8622), Université
Paris-Sud, Orsay, France
Calvin C. K. Chan, The Chinese University of Hong Kong, Hong Kong
Zhao Changming, Beijing Institute of Technology, China
Sima Chaotan, Huazhong University of Science and Technology, China
Pavel Cheben, National Research Council Canada, Canada
Xianfeng Chen, Shanghai Jiao Tong University, China
Dominique Chiaroni, Alcatel-Lucent Bell Labs France, France
Vladimir G. Chigrinov, Hong Kong University of Science and Technology, Hong
Kong
João Coelho, Faculdade de Ciências da Universidade de Lisboa, Portugal
Lorenzo Colace, University of Rome “Roma Tre,” Italy
Olinda Conde, University of Lisbon, Laser Surface Processing Laboratory, Portugal
Francesco Della Corte, Mediterranea University of Reggio Calabria, Italy
François Courvoisier, FEMTO-ST CNRS, Université de Franche-Comté, France
Rinaldo Cubeddu, Politecnico di Milano, Italy
Andrea Cusano, University of Sannio, Italy
Daoxin Dai, Zhejiang University, China
Judith Dawes, Macquarie University, Australia
Antonio Delgado, Friedrich-Alexander University Erlangen-Nuremberg, Germany
Yujie J. Ding, Lehigh University, USA
Ivan Divliansky, Laboratory at the College of Optics and Photonics—CREOL at
UCF, USA
Alexandre Dmitriev, Chalmers University of Technology, Sweden
John F. Donegan, Trinity College, Ireland
Abdulhakem Youssef Elezzabi, University of Alberta, Canada
Sergio Fantini, Tufts University, USA
Organization ix
Robert Ferguson, National Physical Laboratory, UK

Paulo Torrão Fiadeiro, Universidade da Beira Interior, Portugal
José Figueiredo, Universidade do Algarve, Portugal
Luca Fiorani, Researcher at ENEA—Professor at “Lumsa,” “Roma Tre,” and “Tor
Vergata” Universities, Italy
Orlando Frazão, INESC Porto, Portugal
Alberto Garcia, Instituto de Física dos Materiais da Universidade do Porto, Spain
Ivana Gasulla, Polytechnic University of Valencia, Spain
Sanka Gateva, Institute of Electronics, Bulgaria
Malte Gather, University of St. Andrews, UK
Marco Gianinetto, Politecnico di Milano, Italy
John Girkin, Department of Physics, Biophysical Sciences Institute, Durham
University, UK
Guillaume Gomard, Light Technology Institute, Germany
Yandong Gong, Institute for Infocomm Research, Singapore
Giuseppe Grosso, Universita’ di Pisa, Italy
Norbert Grote, Fraunhofer Heinrich Hertz Institute, Germany
Mircea D. Guina, Tampere University of Technology, Finland
Young-Geun Han, Hanyang University, Korea, Republic of
Joseph W. Haus, University of Dayton, USA
Rosa Ana Perez Herrera, Universidad Publica de Navarra, Spain
Daniel Hill, Universitat de Valencia, Spain
Peter Horak, University of Southampton, UK
Iwao Hosako, National Institute of Information and Communications Technology,
Japan
Silvia Soria Huguet, IFAC-N. Carrara Institute of Applied Physics/C.N.R., Italy
Nicolae Hurduc, Gheorghe Asachi Technical University of Iasi, Romania
Baldemar Ibarra-Escamilla, Instituto Nacional de Astrofísica, Optica y Electrónica,
Mexico
Jichai Jeong, Korea University, Korea, Republic of
Phil Jones, Optical Tweezers Group, Department of Physics and Astronomy,
University College London, UK
José Joatan Rodrigues Jr., Universidade Federal de Sergipe, Brazil
Yoshiaki Kanamori, Tohoku University, Japan
Fumihiko Kannari, Keio University, Japan
Pentti Karioja, VTT Technical Research Centre of Finland, Finland
Christian Karnutsch, Karlsruhe University of Applied Sciences, Faculty of
Electrical Engineering and Information Technology, Germany
Miroslaw A. Karpierz, Faculty of Physics, Warsaw University of Technology,
Poland
Henryk Kasprzak, Wroclaw University of Technology, Poland
Chulhong Kim, POSTECH, Republic of Korea
Young-Jin Kim, Nanyang Technological University, Singapore
Alper Kiraz, Koç University, Turkey
Stefan Kirstein, Humboldt-Universitaet zu Berlin, Germany
x Organization
Stanislaw Klosowicz, Military University of Technology, Faculty of Advanced

Technologies and Chemistry Warsaw, Poland
Lyubomir Kovachev, Institute of Electronics, Bulgarian Academy of Sciences,
Bulgaria
Tomasz Kozacki, Warsaw University of Technology (WUT), Institute of
Micromechanics and Photonics (IMiF), Institute of Microelectronics and
Optoelectronics (IMiO), Poland
Shoichi Kubodera, Soka University, Japan
Jesper Lægsgaard, Technical University of Denmark, Denmark
Matthieu Lancry, Universite de Paris-Sud, France
Eric Larkins, University of Nottingham, UK
Emma Lazzeri, Scuola Superiore Sant’Anna-TeCIP, Italy
Wei Lee, National Chiao Tung University, Taiwan
Milton S. F. Lima, Instituto de Estudos Avancados, Brazil
Paulo Limão-Vieira, CEFITEC/FCT/UNL, Portugal
Madalena Lira, Departamento de Física da Universidade do Minho, Portugal
Longin Lisetski, National Academy of Sciences of Ukraine, Ukraine
Ai-Qun Liu, Nanyang Technological University, Singapore
Yu-Lung Lo, National Cheng Kung University, Taiwan
Yan-qing Lu, Nanjing University, China
Mohd Adzir Mahdi, Universiti Putra Malaysia, Malaysia
Hervé Maillotte, Institut FEMTO-ST, France
Boris A. Malomed, Tel Aviv University, Israel
Edwin A. Marengo, Northeastern University, USA
Alexandre Marletta, Universidade Federal de Uberlândia, Brazil
Manuel Marques, FCUP, Portugal
Cicero Martelli, Federal University of Technology—Parana, Brazil
Nicolas Martin, FEMTO-ST, France
Francisco Medina, University of Seville, Spain
Andrea Melloni, Politecnico di Milano, Italy
Cleber Mendonça, IFSC/USP, Brazil
Jurgen Michel, Massachusetts Institute of Technology, USA
Paulo Miranda, Instituto de Física de São Carlos, Universidade de São Paulo, Brazil
Arnan Mitchell, RMIT University, Australia
Makoto Naruse, National Institute of Information and Communications
Technology, Japan
Vasant Natarajan, Indian Institute of Science, India
Phyllis R. Nelson, California State Polytechnic University, Pomona, USA
An Nguyen, Infinera, USA
André Nicolet, Institut Fresnel, AIX Marseille Université, CNRS, France
Krassimir Panajotov, Free University of Brussels, Belgium
Jisha Chandroth Pannian, Centro de Física da Universidade do Porto, Portugal
Seoung-Hwan Park, Catholic University of Daegu, Korea, Republic of
YongKeun Park, Department of Physics, KAIST, Korea, Republic of
Lorenzo Pavesi, University of Trento, Italy
Organization xi
Gang-Ding Peng, University of New South Wales, Australia

Alfons Penzkofer, Universität Regensburg, Germany
Luís Pereira, Faculdade de Ciências e Tecnologia, Universidade Nova de Lisboa,
Portugal
Romain Peretti, Swiss Federal Institute of Technology in Zurich (ETHZ),
Switzerland
Francisco Pérez-Ocón, Universidad de Granada, Spain
Klaus Petermann, Technische Universität Berlin, Germany
Angela Piegari, ENEA, Italy
Armando Pinto, Instituto de Telecomunicações—University of Aveiro, Portugal
João Pinto, Aveiro University, Portugal
Sandro Rao, University Mediterranea of Reggio Calabria, Italy
Maria Raposo, CEFITEC, FCT/UNL, Portugal
Alessandro Restelli, Joint Quantum Institute, USA
Paulo A. Ribeiro, CEFITEC/FCT/UNL, Portugal
Mauricio Rico, Centro de Láseres de Pulsados (CLPU), Spain
Giancarlo C. Righini, Enrico Fermi Centre & IFAC CNR, Italy
Alessandro Rizzi, Università di Milano, Italy
Murilo Romero, University of Sao Paulo, Brazil
Luis Roso, Centro de Laseres Pulsados, CLPU, Spain
Luigi L. Rovati, Università di Modena e Reggio Emilia, Italy
Svilen Sabchevski, Institute of Electronics, Bulgarian Academy of Sciences,
Bulgaria
Manuel Pereira dos Santos, Centro de Física e Investigação Tecnológica, Faculdade
de Ciências e Tecnologia, Universidade Nova de Lisboa, Portugal
Christian Seassal, CNRS, University of Lyon, France
Wei Shi, Tianjin University, China
Ronaldo Silva, Federal University of Sergipe, Brazil
Susana Silva, INESC TEC, Portugal
Feng Song, Nankai University, China
Viorica Stancalie, National Institute for Laser, Plasma and Radiation Physics,
Romania
Slawomir Sujecki, University of Nottingham, UK
Xiao Wei Sun, Nanyang Technological University, Singapore
João Manuel R. S. Tavares, FEUP—Faculdade de Engenharia da Universidade do
Porto, Portugal
Ladislav Tichy, IMC ASCR, Czech Republic
Swee Chuan Tjin, Nanyang Technological University, Singapore
José Roberto Tozoni, Universidade Federal de Uberlandia, Brazil
Din-Ping Tsai, National Taiwan University, Taiwan
Kevin Tsia, The University of Hong Kong, Hong Kong
Graham A. Turnbull, University of St. Andrews, UK
Eszter Udvary, Optical and Microwave Telecommunication Laboratory, Budapest
University of Technology and Economics (BME), Hungary
M. Selim Ünlü, Boston University, USA
xii Organization
Carlos M. S. Vicente, Instituto de Telecomunicações and CICECO—Aveiro,

Portugal
Wanjun Wang, Louisiana State University, USA
Zinan Wang, University of Electronic Science and Technology, China
James Wilkinson, Faculty of Physical and Applied Sciences University of
Southampton, UK
Lech Wosinski, KTH—Royal Institute of Technology, Sweden
Jingshown Wu, Networked Communications Program (NCP), Taiwan
Kaikai Xu, University of Electronic Science and Technology of China (UESTC),
China
Minghong Yang, Wuhan University of Technology, China
Anna Zawadzka, Institute of Physics, Faculty of Physics, Astronomy and
Informatics Nicolaus Copernicus University, Poland
He-Ping Zeng, East China Normal University, China
Lin Zhang, Aston University, UK
Additional Reviewers
Alex Araujo, Instituto Federal de Mato Grosso do Sul, Brazil
Invited Speakers
Giancarlo C. Righini, Enrico Fermi Centre & IFAC CNR, Italy
Andrea Cusano, University of Sannio, Italy
Manuel Filipe Costa, Universidade do Minho, Portugal
Contents
1 Waveguide Evanescent Field Fluorescence and Scattering

Microscopy: The Status Quo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..... 1
Silvia Mittler
1.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
1.2 Brief History . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3
1.3 Experimental . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4
1.3.1 Waveguides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4
1.3.2 Cell Culture . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
1.3.3 Bacterial Culture . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6
1.3.4 Microscopic Analysis: WEFF and WEFS . . . . . . . . . . . 7
1.4 TIRF/TIR Versus WEFF/WEFS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
1.5 Multimode Waveguide Use to Static Distance Mapping . . . . . . 10
1.6 Cell Plasma Membranes Dynamic Solubilisation Studies . . . . . . 12
1.7 Time Response of Osteoblasts to Trypsin . . . . . . . . . . . . . . . . . 14
1.8 Bacteria Sterilization . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15
1.9 Cell Granularity and Adhesions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
1.10 Imaging with WEFF/WEFS Microscopy . . . . . . . . . . . . . . . . . 18
1.11 All-Polymer-Waveguide-Chips . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
1.12 Conclusions and Outlook . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21
References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
2 Characterization of Micro-lenslet Array Using Digital
Holographic Interferometric Microscope . . . . . . . . . . . . . . . ...... 25
Varun Kumar and Chandra Shakher
2.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
2.2 Experimental Setup and Theory . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
2.3 Experimental Results . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34
2.3.1 Reconstruction of USAF Resolution Test Chart . . . . . . 34
2.3.2 Results of Testing of Micro-lenslet Array . . . . . . . . . . 36
xiii
xiv Contents
2.4 Discussion and Conclusions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41

References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43
3 Estimation of the OSNR Penalty Due to In-Band Crosstalk on the
Performance of Virtual Carrier-Assisted Metropolitan OFDM
Systems . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 47
Bruno R. Pinheiro, João L. Rebola and Adolfo V. T. Cartaxo
3.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48
3.2 Literature Review . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49
3.3 MORFEUS Network . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 52
3.3.1 Network Model . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 52
3.3.2 Monte Carlo Simulation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 53
3.4 Results and Discussion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 56
3.4.1 Effect of the VBPR on the In-Band Crosstalk
Tolerance . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 57
3.4.2 Same Modulation Format Order . . . . . . . . . . . . . . . . . 58
3.4.3 Different Modulation Format Orders . . . . . . . . . . . . . . 59
3.4.4 In-Band Crosstalk Tolerance Dependence on VBG . . . 61
3.5 Conclusions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 65
4 High Accuracy Laser Power Measurement for Laser Pointers
Safety Assessment . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ........... 67
Kanokwan Nontapot and Narat Rujirat
4.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ........... 67
4.1.1 Related Studies of Laser Pointer Safety
Assessments . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 69
4.1.2 Laser Class and Safety . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 70
4.1.3 Laser Class . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 70
4.2 Laser Pointer Technology . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 72
4.3 Experimental Assembly . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 73
4.3.1 Optical Bench . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 73
4.3.2 Laser Power Detector . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 73
4.3.3 Bandpass Filter . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 75
4.4 Measurement Procedure . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 76
4.5 Measurement Models and Results . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 76
4.6 Conclusions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 78
References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 81
5 Photonic, Plasmonic, Fluidic, and Luminescent Devices Based on
New Polyfunctional Photo-Thermo-Refractive Glass . . . . . . . . . . . . 83
N. Nikonorov, V. Aseev, V. Dubrovin, A. Ignatiev, S. Ivanov,
Y. Sgibnev and A. Sidorov
5.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 83
Contents xv
5.2 Holographic Optical Elements . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87

5.2.1 Volume Bragg Gratings for Laser Diodes . . . . . . . . . . 87
5.2.2 Imaging Holograms for Collimator Sight . . . . . . . . . . . 90
5.3 Optical Amplifiers and Lasers Based on PTR Glass . . . . . . . . . 93
5.3.1 Optical Amplifiers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 93
5.3.2 Distributed-Feedback/Distributed Bragg Reflector
Lasers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .... 95
5.4 Optical Waveguides in PTR Glasses . . . . . . . . . . . . . . . . .... 97
5.5 Photoetchable PTR Glass for Microfluidic, MEMS and
MOEMS Devices . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100
5.6 Phosphors Based on PTR Glass for LEDs and Down-
Converters for Solar Cells . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 102
5.7 PTR Glass for Optical Information Storage . . . . . . . . . . . . . . . 103
5.8 Sensors Based on PTR Glasses . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 105
5.8.1 Luminescent Thermo-sensors . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 105
5.8.2 Plasmonic Sensors . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107
5.9 Conclusions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 109
References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 109
6 Mitigation of Speckle Noise in Optical Coherence Tomograms . . . . 115
Saba Adabi, Anne Clayton, Silvia Conforto, Ali Hojjat,
Adrian G. Podoleanu and Mohammadreza Nasiriavanaki
6.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 115
6.1.1 Optical Coherence Tomography . . . . . . . . . . . . . . . . . 119
6.1.2 Speckle Reduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 119
6.2 Intelligent Speckle Reduction Method . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 122
6.2.1 Artificial Neural Network . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 122
6.2.2 Speckle Reduction Method . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 123
6.2.3 Experimental Results and Discussion . . . . . . . . . . . . . . 126
6.3 Conclusions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 129
References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 132
7 Characterization of the Performance of a 7-Mirror Segmented
Reflecting Telescope via the Angular Spectrum Method . . . . . . . . . 137
Mary Angelie Alagao, Mary Ann Go, Maricor Soriano
and Giovanni Tapang
7.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 138
7.2 Methods and Procedures . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 139
7.2.1 Calculation of the PSF . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 140
7.2.2 Angular Spectrum of the Segmented Mirrors . . . . . . . . 141
7.2.3 Simulations of Aberrations . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 144
7.2.4 Wavefront Correction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 145
xvi Contents
7.3 Results and Discussion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 146

7.4 Conclusion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 156
References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 156
8 CMOS Silicon Photomultiplier Development . . . . . . . . . . . . . . . . . . 159
N. D’Ascenzo, V. Saveliev and Q. Xie
8.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 159
8.2 The CMOS Silicon Photomultiplier Technology Design . . . . . . 162
8.3 Mathematical Modelling of the CMOS Silicon
Photomultiplier . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 163
8.3.1 Physics Processes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 164
8.3.2 Modeling of the Sensor Avalanche Breakdown
Structure . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 168
8.3.3 Analysis of the Electric Field and Breakdown
Conditions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 170
8.4 Development of the Avalanche Breakdown Micro-cells . . . . . . . 171
8.5 Avalanche Breakdown Structure with STI Guard Ring . . . . . . . 172
8.5.1 Avalanche Breakdown Structure with Virtual Guard
Ring . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 172
8.5.2 Analysis of the Current-Voltage Characteristics
of Avalanche Breakdown Structures . . . . . . . . . . . . . . 174
8.6 Experimental Investigations . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 176
8.6.1 Current-Voltage Characteristics . . . . . . . . . . . . . . . . . . 176
8.6.2 Optical and Gain Characteristics . . . . . . . . . . . . . . . . . 178
8.7 Conclusions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 180
References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 180
9 Coherent Hemodynamics Spectroscopy: A New Technique to
Characterize the Dynamics of Blood Perfusion and Oxygenation
in Tissue . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 183
Sergio Fantini, Kristen T. Tgavalekos, Xuan Zang
and Angelo Sassaroli
9.1 Hemodynamic-Based Neuroimaging Techniques . . . . . . . . . . . . 184
9.2 Coherent Hemodynamics Spectroscopy for the Quantitative
Assessment of Cerebral Hemodynamics . . . . . . . . . . . . . . . . . . 186
9.2.1 Notation for the Tissue Concentrations of Oxy- and
Deoxy-Hemoglobin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 186
9.2.2 Time Domain Representation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 187
9.2.3 Frequency Domain Representation . . . . . . . . . . . . . . . 188
9.2.4 A Hemodynamic Model to Relate Hemoglobin
Concentrations to Physiological Quantities . . . . . . . . . . 190
9.2.5 Coherent Hemodynamics Spectroscopy (CHS) . . . . . . . 194
9.3 Hybrid Method Based on Two-Layer Diffusion Theory and the
Modified Beer-Lambert Law to Study Cerebral Hemodynamic
Oscillations . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 195
Contents xvii
9.3.1 Diffusion Theory for a Two-Layered Cylindrical

Medium . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .......... . . . . 196
9.3.2 mBLL for Measuring Hemodynamic Oscillations . . . . . 198
9.4 Experimental Methods . . . . . . . . . . . . . . . . . .......... . . . . 199
9.5 Results . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .......... . . . . 200
9.6 Discussion and Conclusions . . . . . . . . . . . . .......... . . . . 202
References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .......... . . . . 204
10 Study of Endogenous Fluorescence as a Function of Tissues’
Conservation Using Spectral and Lifetime Measurements on
Tumor or Epileptic Cortex Excision . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 209
F. Poulon, M. Zanello, A. Ibrahim, P. Varlet, B. Devaux
and D. Abi Haidar
10.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 210
10.2 Experimental Section . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 212
10.2.1 Optical Assembly . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 212
10.2.2 Samples . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 214
10.3 Results . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 215
10.3.1 Spectral Emission . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 215
10.3.2 Lifetime Measurements . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 217
10.4 Discussions and Conclusions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 219
References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 221
11 Photochromic Materials Towards Energy Harvesting . . . . . . . . . . . 223
Gonçalo Magalhães-Mota, Pedro Farinha, Susana Sério,
Paulo A. Ribeiro and Maria Raposo
11.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 224
11.2 Energy Harvesting Electrets . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 224
11.3 The Photochromic Electret . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 226
11.4 Photoelectret Production Details . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 232
11.5 Birefringence Induction by Visible Light in Azobenzene
Containing Materials . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 234
11.6 Conclusions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 239
References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 239
Author Index . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 243
Subject Index. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 245
Contributors
D. Abi Haidar IMNC Laboratory, UMR 8165, CNRS/IN2P3, Paris-Saclay

University, Orsay, Paris, France; Paris Diderot University, Paris, France
Saba Adabi Department of Biomedical Engineering, Wayne State University,
Detroit, USA; Department of Applied Electronics, Roma Tre University, Rome,
Italy
V. Aseev Department of Optical Information Technologies and Materials, ITMO
University, Saint Petersburg, Russia
Adolfo V. T. Cartaxo Optical Communications and Photonics, Instituto de
Telecomunicações, Lisbon, Portugal; Instituto Universitário de Lisboa
(ISCTE-IUL), Lisbon, Portugal
Anne Clayton Department of Biomedical Engineering, Wayne State University,
Detroit, USA
Silvia Conforto Department of Applied Electronics, Roma Tre University, Rome,
Italy
N. D’Ascenzo Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, China
B. Devaux Department of Neurosurgery, Sainte Anne Hospital, Paris, France
V. Dubrovin Department of Optical Information Technologies and Materials,
ITMO University, Saint Petersburg, Russia
Sergio Fantini Department of Biomedical Engineering, Tufts University,
Medford, MA, USA
Pedro Farinha CEFITEC, Departamento de Física, Faculdade de Ciências e
Tecnologia, Universidade Nova de Lisboa, Caparica, Portugal
Ali Hojjat School of Physical Sciences, University of Kent, Canterbury, UK
A. Ibrahim IMNC Laboratory, UMR 8165, CNRS/IN2P3, Paris-Saclay
University, Orsay, Paris, France
xix
xx Contributors
A. Ignatiev Department of Optical Information Technologies and Materials,

S. Ivanov Department of Optical Information Technologies and Materials, ITMO
Varun Kumar Laser Applications and Holography Laboratory, Instrument
Design Development Centre, Indian Institute of Technology Delhi, New Delhi,
India
Gonçalo Magalhães-Mota CEFITEC, Departamento de Física, Faculdade de
Ciências e Tecnologia, Universidade Nova de Lisboa, Caparica, Portugal
Silvia Mittler Department of Physics and Astronomy, The University of Western
Ontario, London, ON, Canada
Mohammadreza Nasiriavanaki Department of Biomedical Engineering, Wayne
State University, Detroit, USA
N. Nikonorov Department of Optical Information Technologies and Materials,
Kanokwan Nontapot National Institute of Metrology, Pathum Thani, Thailand
Bruno R. Pinheiro Optical Communications and Photonics, Instituto de
Adrian G. Podoleanu Applied Optics Group, University of Kent, Canterbury, UK
F. Poulon IMNC Laboratory, UMR 8165, CNRS/IN2P3, Paris-Saclay University,
Orsay, Paris, France
Narat Rujirat National Institute of Metrology, Pathum Thani, Thailand
Maria Raposo CEFITEC, Departamento de Física, Faculdade de Ciências e
João L. Rebola Optical Communications and Photonics, Instituto de
Paulo A. Ribeiro CEFITEC, Departamento de Física, Faculdade de Ciências e
Angelo Sassaroli Department of Biomedical Engineering, Tufts University,
Medford, MA, USA
V. Saveliev Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, China
Susana Sério CEFITEC, Departamento de Física, Faculdade de Ciências e
Contributors xxi
Y. Sgibnev Department of Optical Information Technologies and Materials, ITMO

Chandra Shakher Laser Applications and Holography Laboratory, Instrument
Design Development Centre, Indian Institute of Technology Delhi, New Delhi,
India
A. Sidorov Department of Optical Information Technologies and Materials, ITMO
Maricor Soriano National Institute of Physics, University of the Philippines,
Diliman, Quezon City, Philippines
Giovanni Tapang National Institute of Physics, University of the Philippines,
Diliman, Quezon City, Philippines
Kristen T. Tgavalekos Department of Biomedical Engineering, Tufts University,
Medford, MA, USA
P. Varlet Department of Neuropathology, Sainte Anne Hospital, Paris, France
Q. Xie Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, China
M. Zanello IMNC Laboratory, UMR 8165, CNRS/IN2P3, Paris-Saclay
University, Orsay, Paris, France; Department of Neurosurgery, Sainte Anne
Hospital, Paris, France
Xuan Zang Department of Biomedical Engineering, Tufts University, Medford,
MA, USA
Chapter 1
Waveguide Evanescent Field
Fluorescence and Scattering Microscopy:
The Status Quo
Silvia Mittler
Abstract In the last few years Waveguide Evanescent Field Fluorescence (WEFF)
and Scattering (WEFS) microscopy were developed which are alternatives to TIR and
TIRF microscopy. Both technologies implement a slab waveguide-microscopy chip
with a coupling grating. The technologies are described and compared to TIR and
TIRF microscopy. The advantages of the waveguide method are clearly addressed.
A brief history of the technology’s development and similar activities in the field
are discussed. Application examples from both WEF microscopies follow: static
distance mapping with a multimode waveguide, dynamic solubilisation studies of
cell plasma membranes and the kinetic response of osteoblasts to trypsin (WEFF);
bacteria sterilization as well as cell adhesion and granularity studies (WEFS). The
combination of both methods is discussed and found not suitable. In order to mass
fabricate the necessary waveguide chips with the grating an all-polymer-waveguide
chip was developed. This should allow to bring the new microscopy methods to the
interested scientific community.
1.1 Introduction
With the aim of developing new medical devices with direct tissue contact, drug
delivery vehicles, and tissue engineering scaffolds, there has been increasing interest
in recent years in the interactions of cells with both synthetic and natural bioma-
terials [1, 2]. In particular, the study of the contact regions between a cell and its
substratum is of considerable interest as its investigation delivers inter alia infor-
mation about the cytocompatibility of the substratum—the affinity of cells towards
that particular surface. Promotion or inhibition of cell adhesion to synthetic and nat-
ural biomaterials is often crucial to the proper function of a particular device. Some
information concerning these interactions, e.g. the lateral location and the density of
S. Mittler (B)
Department of Physics and Astronomy, The University
of Western Ontario, London, ON, Canada
e-mail: smittler@uwo.ca
© Springer Nature Switzerland AG 2018 1

P. A. Ribeiro and M. Raposo (eds.), Optics, Photonics and Laser Technology, Springer
Series in Optical Sciences 218, https://doi.org/10.1007/978-3-319-98548-0_1
2 S. Mittler
the adhesion sites, as well as their relationship to the actin stress fiber system, part
of the cell’s cytoskeleton, can be inferred from fluorescence microscopy of immuno-
labeled molecules involved in adhesion; typically, vinculin, a protein located within
the multi-protein complex that anchors the adhesion to the cytoskeleton inside the
cell [3]. These methods only deliver signals from the focus volume and no informa-
tion about adhesion distances to the substratum. However, a direct and quantitative
method to address the distance to the substratum is highly attractive. To address
this need, different microscopic techniques based on electron microscopy [4] and
optical means such as evanescent fields and interference techniques have been devel-
oped. Total internal reflection fluorescence (TIRF) [3, 5], surface plasmon resonance
microscopy (SPRM) [6], interference fluorescence microscopy (IRM) [7], fluores-
cence interference contrast (FLIC) microscopy [8] and combinations thereof [3, 9]
have been used to visualize and quantify these contacts. The contacts themselves had
been discovered by interference reflection microscopy (IRM) in the 1970s [10].
Bacteria, on the other hand, are the most metabolically diverse group of organisms
found in all natural environments including air, water and soil. Bacteria commonly
occur with food sources and are also found within and on our bodies. However,
concerns exist over contamination of food, water, and air by pathogenic bacteria
[11] that can enter our bodies through ingestion, inhalation, cuts or lacerations [12].
Therefore, there is an increasing interest in bacterial contamination and the need
for anti-bacterial surfaces not only for application in the food industry but also for
medical and hygienic purposes [13]. Over two million hospital-acquired cases of
infection are reported annually in the USA, which lead to approximately 100,000
deaths annually and added nearly $5 billion to U.S. healthcare costs [14, 15]. Contam-
ination of medical devices (e.g., catheters and implants) has been attributed to 45%
of these infections [16]. Bacterial contamination of any surface typically begins with
the initial adhesion of only a few cells that can then develop into a more structurally
cohesive biofilm in less than 24 h when provided with suitable nutrient conditions
sustaining metabolism and cell division [17]. Therefore, a better understanding of
bacterial adhesion to surfaces is important for technical surface development and
in biomedical applications. However, the precise measurement of bacterial adhe-
sion to surfaces are difficult and time consuming because bacterial cells typically
occur on the micrometer-scale and their adhesion forces are generally low‚ typi-
cally 0.1–100 nN [18]. Recent studies on the detection of bacteria on surfaces have
focused on similar imaging systems as with cells such as optical [19] and fluorescent
microscopy [20] to image the bacteria themselves or luminescence measurement of
the presence of cells by ATP (adenosine triphosphate) detection systems [21] Sur-
face Plasmon Resonance (SPR) sensors [22], Nucleic Acid Detection [23], Optical
Waveguide Lightmode Spectroscopy (short: waveguide spectroscopy) [24], Optical
Leaky Waveguide Sensors [25], and Evanescent Mode Fiber Optic Sensors [26] have
also been applied in order to detect biochemical toxins as signatures of bacteria.
In conclusion, it is important to have methods available which are able to inves-
tigate interfaces between a technical surface and a bacterium or cell.
In recent years, Total Internal Reflection Fluorescent (TIRF) microscopy has been
demonstrated to be an effective method for studying cell-substrate interactions that
1 Waveguide Evanescent Field Fluorescence … 3
occur at surfaces and interfaces. Using TIRF microscopy, the behavior of various
types of cells [27, 28] and bacteria [29, 30] near surfaces has been characterized.
Total Internal Reflection (TIR) Microscopy utilizes the basic technology of TIRF
without any fluorescence dyes present in the sample by creating an optical contrast
due to scattering [31]. Recent studies have also demonstrated the use of TIR for
imaging microbial adhesion.
This paper will give a brief history and literature overview as well as a review on
biophysical applications of WEFF and WEFS microscopy on cells and bacteria and a
short outlook on current developments on mass producible all-polymer-waveguide-
chips to offer the methods to a broader user base.
1.2 Brief History
The waveguide evanescent field scattering (WEFS) technique was developed by

Thoma et al. in 1997 [32, 33] for ultrathin technical structures on surfaces using
conventional ion exchanged waveguides. Thoma et al. investigated the influence of
the polarization direction of the mode and the mode number on the achieved scattering
image contrast. It was found that with increasing mode number the contrast increased.
TE modes depicted a better contrast than TM modes. Immersion of the samples in an
aqueous solution decreased the contrast as the refractive index difference between
scattering centers and the surrounding medium decreased.
Before the first cells were imaged evanescently with a waveguide, a series of
approaches were made to combine established microscopy methods with a conven-
tional waveguide and waveguide spectroscopy to on-line monitor e.g. adhesion and
proliferation of cultured cells [34–36] These attempts suffered from the small penetra-
tion depth of the evanescent fields into the cells of the used conventional waveguides.
Therefore, Horvath et al. [37] proposed in 2005 reverse symmetry waveguides which
provided deeper penetrating evanescent fields in these combination technologies.
The first waveguide evanescent field fluorescence (WEFF) experiment with com-
mercial mono-mode glass waveguides (designed for sensing on coupling gratings)
on cells was shown by Grandin et al. [38]. Vinculin staining was carried out on fixed
human fibroblast cells. The coupling was carried out via a coupling grating located
within the sample area. The image suffered from substantial artefacts and was very
noisy in form of stripes. The grating position in the field of view, lead to too many
scattered photons and to resonantly out-coupled light.
WEFF microscopy with ion exchanged mono- or multi-mode glass waveguides
and stained cell’s plasma membranes was developed by Hassanzadeh et al. [39] in
2008 as a straightforward alternative to TIRF microscopy for imaging ultrathin films
and cell-substrate interaction. The mode coupling was achieved via a grating coupler
outside the imaging area. The image quality was increasing, but artefacts due to
scattered light were still seen in the images and are not completely avaoidable. TIRF
images share the same issues [40]. Hassanzadeh et al. have then shown applications
of WEFF microscopy with static and dynamic investigations [39, 41, 42]. They were
4 S. Mittler
the first who used a multi-mode waveguides with mode selective grating coupling to
determine distances of cell adhesions to the waveguide surface [43].
A year later, 2009, Agnarsson et al. [44] presented a symmetric waveguide struc-
ture for WEFF microscopy where the cladding material is index-matched to the
sample solution (aqueous media). The optical chips were fabricated from polymers
involving standard cleanroom technologies such as spin-coating, photolithography
and dry etching (core: polymethylmethacrylate (PMMA) and substrate: amorphous
perfluorinated optical polymer (Cytop)). Agnarsson et al. coupled via end-fire cou-
pling mode-insensitive into a mono-mode waveguide. MCF7 breast cancer cells
immune-stained with monoclonal antibody against the transmembrane adhesion pro-
tein E-cadherin (HECD-1) and Alexa Fluor 546 Goat Anti Mouse IgG1 fluorescent
secondary antibody. Very clear WEFF images were obtained with some minor scat-
tering artefacts. Agnarsson et al. were combining WEFF microscopy on the mono-
mode polymer symmetric waveguide structures with waveguide spectroscopy and
channel waveguide operation (directional couplers, ring resonators, Mach-Zehnder
interferometers, etc.) for sensing application and on-chip control of illumination with
sub-millisecond control [45–48].
In 2014, Nahar et al. [49] implemented WEFS microscopy for bacteria studies
and started to investigate cultured ostoeblasts with WEFS microscopy.
Agnarsson et al. [50] picked up WEFS microscopy in 2015 for label-free sensing
of gold nanoparticles (AuNPs), vesicles and living cells, and compared it with WEFF
results, all on symmetric polymer waveguide structures.
The focus of the following sections will be the WEFF and WEFS studies of the
author’s group.
1.3 Experimental
1.3.1 Waveguides
Home-made, glass waveguides on fused silica (step-index slab waveguides) or ion

exchanged waveguides with holographic coupling gratings will be addressed here
[41, 51]. The waveguides were reusable various times after thorough cleaning. Clean-
ing procedure consisted sonification in 70% ethanol for 20 min followed by blow-dry
with nitrogen gas. To remove organic material, the dried samples were cleaned with
Nano-Strip (KMG Chemicals Inc., Fremont, CA, USA) at 80 °C for 5 min. After
Nano-Strip application, the substrates were extensively rinsed in Milli-Q water and
blown dry again [52]. However, with each cleaning cycle the waveguides became
thinner and needed characterization before every new experiment.
The samples were designed in a way that the coupling grating is always kept
outside the sample area and should not be altered during the experiment to keep the
coupling conditions and therefore, the coupling efficiency, constant, Fig. 1.1. This is
important because the mode coupling conditions change when material is adsorbed
Fig. 1.1 General WEFF-

and WEFS chip design: the
coupling grating is located
outside the sample area
or desorbed at the grating position [53]. In addition, out-coupled photons from the
grating produces artefacts in the WEFF and WEFS images. Any periodic structures
should be avoided in the sample area due to undesired interference effects.
1.3.2 Cell Culture
The cell culture was according with [52] will be transcribed here. Osteoblastic cell
line MC3T3-E1 (subclone 4, ATTC Catalog 3 CRL-2593) culture was carried out
in flasks. Three hours UV light exposure was used to sterilize cleaned waveg-
uides. Growth medium was prepared from 17.8 ml α-minimum essential medium
1X (MEM; Gibco), 2 mL fetal bovine serum (FBS; Gibco) and 0.2 mL antibiotic-
antimycotic solution 100X (Anti-Anti; Gibco). First the medium was aspirated from
the cell culture flask. Dulbecco’s phosphate-buffered saline 1X (PBS; Gibco) was
added to wash the cell layer and aspirated subsequently. To detach the osteoblasts
from the vessel, wall, 5 ml trypsin-EDTA (0.05%, Gibco) was added and incubated at
37 °C for 5 min. The cell culture was checked by phase-contrast microscopy in order
to confirm cells release into the suspension. Trypsin neutralization was carried out
by adding 9 mL growth medium. The resulting cell suspension was then diluted in
growth medium to 10,000 cells per mL. The waveguides were placed in a Petri dish
and 1 mL cell suspension was deposited per surface. Samples were then incubated
for 24 h at 37 °C, 100% humidity and 5% CO2 .
After incubation the waveguides were removed from the growth medium and
excess medium was drawn. Each waveguide was then rinsed three times in PBS. For
fixing waveguides with cells on top, were placed in a 4% paraformaldehyde solution
in PBS for 10 min at room temperature. Subsequently, samples were rinsed three
times with PBS. Desiccation was prevented, by keeping the samples in PBS until
further treatment. A 1.5 mg DiO in 1 mL dimethyl sulfoxide (DMSO) solution was
prepared and heated to 37 °C for 5 min. This solution was then sedimented for 5 min
at 2000 rpm in order to separate solid residues. The staining solution was achieved
6 S. Mittler
by taking of 10 μL of this solution and dissolving it in 1 mL of growth medium. A

volume of 200 μL this solution was then pipetted onto the corner of each waveguide,
which where gently agitated until complete cell coverage by the solution. These
samples were left for 20 min in the solution to guarantee the incorporation of the
dye. Afterwards, the staining solution was drained and PBS was used to wash the
waveguides. For the removal of all unbound dye, the samples were immersed in PBS
for 10 min and drained again. The wash cycle was repeated two more times. The
waveguides were stored in PBS until performing WEFF microscopy. This procedure
delivers fixed cells, cells that are “frozen” in their habitus [52, 54–56] with the dye
situated in the plasma membrane of the cells.
1.3.3 Bacterial Culture
The bacterial culture has been previous described [52] will be transcribed here for
consistency.
Nitrobacter sp. 263 was cultured on R2A (Difco™) plates at room temperature
(approximately 23 °C) for two weeks. For each colonization experiment, bacteria
from one R2A plate were removed and suspended in 1 ml of filter-sterilized (0.45 μm
pore-size) distilled deionized water to produce an aqueous bacterial suspension (with
106 bacteria/ml). A distinct R2B stock solution (i.e., broth/liquid culture medium)
was prepared by dissolving R2A in sterile, distilled, deionized water and filtering to
remove the agar constituent keeping the dissolved nutrients for bacterial growth.
Attachment of the bacteria to the waveguide surface was attained by placing a
50 μl aliquot of the bacterial suspension on waveguide top for 1 h at 37 °C. After
bacteria attachment, the waveguide was rinsed with sterile, distilled water and placed
in a sterile Petri dish with 20 ml of R2A and after incubated for 24 h at 37° to allow
bacteria to grow. These samples were not agitated. After 24 h incubation, bright
field microscopy was used to examine the waveguides in looking for microcolonies
formation. Images were taken of live cells in growth medium. WEFS microscopy
was then used to analyse the samples. Sterilization experiments of were undertaken.
For this separate bacteria suspensions of 10 ml (with 106 bacteria/ml) were placed
in a sterile, open glass dish and exposed, in a low pressure collimate beam appara-
tus (LPCB) [52, 57, 58] to doses of 2, 4, 8, 14, 20 and 30 mJ/cm2 [52, 58]. This
sterilization by UV photon was chosen mainly for its ability to disrupt and dimerize
neighboring DNA bases (thymine dimerization) that hinders bacterial growth but not
viability [52, 59, 60]. The ‘sterilized’ bacterial suspensions, obtained for the different
dose exposures, were used in colonization experiments identical to those described
above.
Before the first and second colonization assays, separate 1 mL aliquots of all
bacterial suspensions were stained using BacLightTM (Invitrogen) Live-Dead stain
and examined using fluorescence microscopy in order to confirm that the cells were
viable.
1.3.4 Microscopic Analysis: WEFF and WEFS
An inverted microscope from Zeiss, Oberkochen, Germany, with the waveguide

located on the sample stage was used for the WEFF and WEFS microscope assem-
blies consisted of an inverted microscope (Figs. 1.2 and 1.3). The specimen was
placed on the waveguide’s top. An argon ion laser (35 LAP 341-200, CVI Melles
Griot) working at λ 488 nm with a tuneable output power in the 7–126 mW range
or a 0.5 mW, 543.8 nm HeNe laser from Research Electro-Optics, were used as light
sources in WEFF and WEFS assemblies, respectively. The laser power was reduced
by placing a neutral density filter directly behind the laser, avoiding overexposure
and bleaching. The beam diameter was controlled by means of an iris aperture. A
coupling grating located on the waveguide was used to couple the laser beam in the
waveguide to a chosen mode. For the case of WEFF microscopy, undesired excita-
tion wavelength was blocked via a long pass filter with a 490 nm cut-off wavelength
(3RD490LP, Omega Optics, Brattleboro, VT), placed between the objective and the
camera. The out-coupled intensity at the waveguide end was measured by a large
active area photodiode (FDS1010, Thorlabs, Newton, NY) for determining the cou-
pling efficiency when required. A cooled CCD-camera (Pursuit—XS 1.4 Diagnostic
Instruments Inc., Sterling Heights, MI, USA), controlled with SPOT 5 Basic (Spot
Image Solutions, Sterling Heights, MI, USA) was used for imaging. Bright field
microscopy images of the samples were also obtained with the same field of view
objective-lens as in the WEFF/WEFS microscopy images and processed through
Image Pro Express software facilities (Media Cybernetics, Rockville, MD).
The laser beam coupling can be from below the waveguide chip in parallel to the
objective lens as depicted in Fig. 1.2. This has the advantage that all beam steering
can be done on the optical table. The disadvantage is the close proximity to the
objective lens which restricts the available coupling angle substantially and forbids
backward coupling.
In the alternative design the coupling is carried out from the top (Fig. 1.3). The
advantage here is a restriction less coupling angle. The disadvantages are the possible
Fig. 1.2 Schematic of WEFF microscope with coupling through the waveguide chip from below:
Ap—apertures, F1—neutral density filter, M—mirrors, WG—waveguide and PD—photo diode.
For WEFS microscopy a HeNe laser was used and the LP filter omitted [52]
8 S. Mittler
Fig. 1.3 Schematic of a WEFS microscope with coupling into the waveguide from above:
Ap—apertures, M—mirrors, WG—waveguide and PD—photo diode. For WEFS microscopy a
HeNe laser was used and the LP filter omitted. Optical elements Ap1 to M4 are mounted on the
table
reflections and scattered photons from the objective lens, and some of the beam
steering needs to be carried out above the optical table making the system more
prone to vibration issues.
1.4 TIRF/TIR Versus WEFF/WEFS
Both TIRF/TIR and WEFF/WEFS microscopies assemblies, employ sample illu-

mination trough evanescent fields at the substrate surface which are coming from
total internal reflection. In more recent TIRF/TIR microscopes a laser beam is opto-
mechanically guided within the microscope and the objective lens, allowing a laser
beam to undergo total internal reflection at a the high refractive index substrate carry-
ing the specimen and is placed above the objective lens. Specially designed objective
lenses having high magnification and numerical aperture objectives together with
built-in optical path control are required for microscope construction. All angles
above critical angle of TIR can be theoretically achieved in this way, allowing the
possibility to achieve different penetrations depths by using different angles. This
feature can even be used to measure distances from the substrate surface [61]. From
the practical point of view, the microscopes are set to particular angles, for achiev-
ing both high quality TIRF/TIR imaging and high quality epi-fluorescence or bright
field.
Besides, manual operation of a TIRF/TIR microscope can readily give rise to the
evanescent mode loss and consequently to a full specimen exposure to the laser beam
and sample damage.
Reviewing the literature in particular with respect to the use of TIRF microscopy
for distance measurements it can be seen that, besides Burmeister’s excellent work
by the middle of the 1990s [62], during the development stage of TIRF microscopy,
very little has been published on exploring different penetration depths.
In regard to TIR microscopy is performed identically but excluding the dye

from the samples and the necessary filter sets. Scattered photons instead of fluo-
rescence photons are collected. Bright field images are taken for comparison since
epi-fluorescence is not realizable. It should be pointed out that few distance work
involving TIR microscopy have been reported so far [29]. This is not surprising
since the scattering intensities are difficult to analyze because all refractive index
fluctuations present in the evanescent field contribute to the signal and these are not
necessarily controllable, in particular with living cultures producing extracellular
matrix in the case of cells or extracellular polymeric substance (EPS) when imaging
live bacteria.
In WEFF/WEFS microscopies, the waveguide modes resonances dictate the avail-
able evanescent fields and penetration depths. Thus the number of options is limited
by the number of modes propagating in the waveguide. In TIRF and TIR micro-
scopies, the evanescent field penetration depth of the is limited to ~200 nm, whereas
a waveguide can yield penetrations depths from below 100 nm to over a μm, by
refractive index tuning and thickness architecture of both core and cladding layers
[44]. Extended illumination area over macroscopic dimensions can also be achieved
from planar waveguides which is only limited by the attenuation of the propagating
waveguide mode.
In addition, as the beam in WEFF/WEFS cannot escape from the waveguide;
the WEFF and WEFS microscopies carry the intrinsic safety mechanism of sample
overexposure and damage.
Well characterized waveguides where the evanescent fields and penetration depths
are well known can be used for quantitative measurements [43].
WEFF and WEFS microscopies do not seek for state-of-the-art microscopes or
objective lenses assemblies. Their technologies can be based on a few simple acces-
sories and attachments to standard inverted microscopes. It is therefore straightfor-
ward to image the specimen in any magnification and field of view available due
to standard long distance objective lenses by just turning the objective lens revolver
without the necessity of beam stirring. Due to the evanescent field formation being
taken care of by the substrate and completely independent from the entire micro-
scope, different field of views or magnifications still deal with the same illumination
conditions allowing direct comparison of images or measurements after changing
magnification and field of view.
By enhancing the image acquisition integration time, epi-fluorescence images
can be obtained. This is due to waveguide slightly scattering, which provides 3D
excitation or scattering photons to the specimen.
Comparing TIRF and WEFF images of the same samples identical image infor-
mation can be observed [40]. Both are diffraction limited, in such a way that lateral
resolution is dependent on the working laser wavelength and highest magnification
lens and its numerical aperture (NA) supported by the microscope used. Resolution in
the z-direction (normal to the substrate) is about 7 nm for both types of microscopes.
For WEFF and WEFS microscopies wide use it is necessary to have easy access to
and supply of inexpensive waveguide substrates. Thus, it is necessary to implement
a mass producible waveguide-chip.
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die an einer überlieferten Religionsausübung festhalten, der selbst
unser nüchterner Verstand nur schwer die Berechtigung absprechen
kann. Bevor es Mittag war, erreichten wir die Karawanserei, die
halbwegs nach Jericho und zwar an der Stelle liegt, wo der Legende
nach der barmherzige Samariter den unter die Mörder Gefallenen
fand. Ich ging hinein, um geschützt vor dem kalten Wind zu
frühstücken. Drei deutsche Handlungsreisende schrieben
Ansichtspostkarten im Gastzimmer und handelten mit dem Wirt um
imitierte Beduinenmesser. Ich saß und horchte auf ihr Geschwätz —
es waren die letzten Worte, die ich auf Wochen hinaus in einer
europäischen Sprache hören sollte, aber ich fand keine Ursache, der
Zivilisation nachzutrauern, die ich hinter mir ließ. Ostwärts von der
Karawanserei senkt sich der Weg und kreuzt ein trocknes Flußbett,
das mancher Greueltat zum Schauplatz gedient hat. An den Ufern
verborgen, pflegten die Beduinen den vorüberziehenden Pilgern
aufzulauern, sie auszuplündern und zu morden. Denn noch vor 15
Jahren war die Straße ebenso wenig vom Auge des Gesetzes
behütet, wie jetzt das Ostjordanland; im letzten Jahrzehnt hat sich
die öffentliche Sicherheit ein paar Meilen weiter ostwärts
ausgedehnt. Endlich erreichten wir den Gipfel des letzten Hügels
und blickten in das Tal des Jordans, auf das Tote Meer und die
verschleierten moabitischen Berge im Hintergrund — die Grenze der
Wüste. Zu unsern Füßen Jericho, ein unromantischer Haufen
baufälliger Gasthäuser und Hütten, in denen die einzigen Araber
hausen, die der Tourist zu Gesicht bekommt, ein Mischgesindel von
Beduinen und Negersklaven. Ich ließ mein Pferd bei den
Maultiertreibern oben am Hang, — »Der Herr schenke Ihnen
Gedeihen!« — »Gelobt sei Gott!« — »Wenn es Eurer Exzellenz gut
geht, sind wir zufrieden!« — und lief bergab in das Dorf. Aber
Jericho genügte mir nicht für diesen herrlichen ersten Reisetag; ich
sehnte mich danach, Touristen, Hotels und Ansichtspostkarten hinter
mir zu lassen. Zwei weitere Stunden würden uns an das Jordanufer
bringen, und dort, an der hölzernen Brücke, die West und Ost
verbindet, konnten wir an einem geschützten Platz zwischen den
Erdhügeln, im Dickicht von Rohr und Tamarisken unsre Zelte
aufschlagen. Ein kurzer Halt, um Futter für die Pferde und Maultiere
zu kaufen, und weiter ging es über den schmalen Streifen Ackerland,
der Jericho umgibt, dem Ghor, dem Tale des Jordan, zu.
Kloster Kurutul oberhalb Jerichos.
Ist die Straße nach Jericho schon öde genug, so bietet das
Jordantal einen Anblick fast unheimlicher Unwirtlichkeit. Hätten die
Propheten des Alten Testamentes ihren Fluch über diese Gegend
geschleudert, ebenso wie sie es über Babylon oder Tyrus taten, es
könnte keinen besseren Beweis für die Wahrheit ihrer
Prophezeiungen geben; aber sie schwiegen, und unsre
Einbildungskraft muß auf die Flammen von Sodom und Gomorrha
zurückgreifen, auf jenes legendenhafte Strafgericht, das in unsrer
eignen Kindheit ebenso spukte, wie es in den Kindheitstagen der
semitischen Rasse gespukt hat. Eine schwere, schwüle Atmosphäre
lastete über diesem tiefstgelegenen Teile der Erdoberfläche; über
unsern Häuptern, oben auf den Gipfeln der Hügel, wo der Mensch
die freie Gottesluft atmet, raste der Wind dahin, im Tale aber war
alles leb- und bewegungslos wie in der Tiefe des Meeres. Wir
bahnten uns einen Weg durch das niedrige Buschwerk des dornigen
Sidrbaumes, des Christusdornes, aus dessen Zweigen angeblich
Christi Dornenkrone geflochten war. Man kennt zwei Arten des
Christusdorns, die Araber nennen sie Zakūm und Dōm. Aus dem
Zakūm ziehen sie ein medizinisches Öl, der Dōm aber trägt kleine,
dem Holzapfel ähnelnde Früchte, die zur Zeit der Reife eine
rötlichbraune, einladende Farbe aufweisen. Sie sind das wahre
Abbild des Toten Meeres, verlockend anzusehen, auf den Lippen
aber eine sandige Bitterkeit zurücklassend. Das Sidrgestrüpp lichtete
sich und blieb hinter uns; wir befanden uns auf einer trocknen
Schlammdecke, die nichts Grünes trägt. Sie ist von gelber Farbe und
hier und da mit grauweißem, giftigem Salze bestreut, dessen
Lebensfeindlichkeit sich dem Auge ganz unbewußt von selbst
aufdrängt. Während wir so dahinritten, überfiel uns plötzlich ein
schwerer Regenschauer. Die Maultiertreiber schauten besorgt drein,
selbst Michaïls Gesicht zog sich lang: lagen doch vor uns die
Schlammhänge von Genesis, die Pferd und Maultier nur bei
vollständiger Trockenheit überschreiten können. Der Regen währte
zwar nur sehr wenige Minuten, genügte aber, um den harten
Schlamm in der Ebene in eine butterähnliche Masse zu verwandeln.
Die Pferde versanken darin bis zu den Fesseln, und mein Hund Kurt
winselte, als er seine Pfoten aus dem gelben Leime zog. So kamen
wir an die Schlammhänge, die größte Seltsamkeit dieses
unwirtlichen Landes. Eine Viertelmeile westwärts vom Jordan — auf
dem Ostufer des Stromes ist dieser Streifen viel schmäler —
verwandelte sich die platte Ebene plötzlich in eine Kette steiler,
durch tiefe Einschnitte getrennter Schlammbänke. Sie sind nicht
hoch, höchstens 30 bis 40 Fuß, aber die Gipfel sind so spitz, die
Seiten so steil abfallend, daß der Reisende sich seinen Weg über
und um dieselben mit der größten Sorgfalt bahnen muß. Der Regen
hatte die Abhänge glatt wie Glas gemacht; selbst für den Fußgänger
war es fast unmöglich, sich aufrecht zu halten. Mein Pferd stürzte,
als ich es darüber führte, da wir uns aber glücklicherweise auf einem
kleinen Grat befanden, gelang es dem Tiere, sich durch die
erstaunlichsten gymnastischen Anstrengungen wieder
emporzuarbeiten. Ich schickte ein Stoßgebet zum Himmel, als meine
kleine Karawane aus dem Bereich der Schlammhänge war; bei
anhaltendem Regen wären wir möglicherweise zu stundenlangem
Warten verurteilt worden, denn wenn der Reiter in eine der
schlammigen Vertiefungen stürzt, muß er darin warten, bis der
Boden wieder trocken ist.
Zug durch das Ghor.
Am Flußufer war Leben. Der Boden war mit jungem Gras und
gelben Gänseblümchen bedeckt, das rostfarbene Gezweig der
Tamarisken zeigte die ersten Spuren des Frühlings. Ich sprengte auf
die große Brücke mit dem Balkendach und den Seiten aus
Gitterwerk zu — auf dieses Tor zur Wüste, das dem Reisenden
einen tiefen Eindruck hinterläßt. Da lag der freie, mit kurzem Gras
bewachsene, von den Schlammbänken begrenzte große Platz, den
ich so gut in der Erinnerung hatte, und — dem Himmel sei Dank —
er war leer. Wir hatten Ursache zur Besorgnis in dieser Hinsicht
gehabt. Die türkische Regierung zog in dieser Zeit alle verfügbaren
Truppen zusammen, um den Aufstand in Jemen zu unterdrücken.
Die Regimenter des südlichen Syriens zogen über die Brücke nach
'Ammān, von wo sie mit der Bahn auf der Mekkalinie bis zu der
damaligen Endstation Ma'ān, in der Nahe von Petra, befördert
wurden. Von Ma'ān aus führte sie ein schrecklicher Marsch durch
eine Sandwüste an die Spitze des Golfes von 'Akaba. Viel hundert
Mann, viel tausend Kamele kamen um, ehe das Ziel erreicht war,
denn auf dem ganzen Wege gibt es (so sagen die Araber) nur drei
Brunnen, von denen der eine ungefähr zwei Meilen abseits der
Heerstraße liegt und allen denen unauffindbar ist, die nicht mit dem
Lande vertraut sind.
Jordanbrücke.
Wir errichteten unsere Zelte, pflöckten die Pferde an und

entzündeten ein mächtiges Feuer aus Weiden- und Tamariskenholz.
Es war eine ruhige, trübe Nacht, auf den Bergen regnete es, — bei
uns nicht. Die jährliche Regenmenge beläuft sich auf nur wenige Zoll
im Jordantal. Wir waren nicht allein. Die türkische Regierung erhebt
nämlich von allen Brückenpassanten einen kleinen Zoll und hat zu
diesem Zweck einen Wächter dort stationiert. Er wohnt in einer
Lattenhütte neben dem Brückentor, und zwei oder drei zerlumpte
Araber aus el Ghor teilen seine Einsamkeit. Einer derselben, ein
grauhaariger Neger, sammelte Feuerholz für uns und durfte zur
Belohnung die Nacht bei uns verbringen. Er war eine vergnügte
Seele, dieser Mabūk. Unbekümmert darum, daß ihn die Natur mit
einer außergewöhnlich häßlichen Mißgestalt bedacht hatte, tanzte er
munter um das Lagerfeuer. Er erzählte gern von den Soldaten, den
armen Burschen, die schon auf ihrer ersten Tagereise zerlumpt, mit
zerfetzten Schuhen, dazu halb verhungert bei der Brücke ankamen.
Am selben Morgen war ein Tābūr (900 Mann) durchgezogen, andere
wurden morgen erwartet — wir hatten sie gerade verfehlt.
»Mascha'llah!« sagte Michaïl, »Euer Exzellenz haben Glück. Erst
entrinnen Sie den Schlammhängen und nun den Redīfs.« — »Gelobt
sei Gott!« murmelte Mabūk, und von dem Tage galt es für besiegelt,
daß ich unter einem glücklichen Stern reiste. Mabūk brachte uns
auch die erste Kunde aus der Wüste. Unaufhörlich sprach er von Ibn
er Raschīd, dem jungen Häuptling der Schammār, dem sein
mächtiger Onkel Mohammed einen so unsicheren Landbesitz in
Zentral-Arabien als Erbe hinterlassen. Zwei Jahre lang hatte ich
nichts von Nedjd gehört — und was machte Ibn Sa'oud, der
Beherrscher von Rīad und Ibn er Raschīds Nebenbuhler? Wie stand
der Krieg zwischen ihnen? Mabūk hatte allerlei gehört, es hieß, Ibn
er Raschīd sei in die Enge getrieben; vielleicht zogen die Redīfs gar
nach Nedjd und nicht nach Jemen, — wer weiß? Hatten wir auch
schon gehört, daß die 'Ajārmeh einen Scheich der Suchūr ermordet
hatten, gerade als der Stamm aus dem östlichen Weideland
zurückkehrte? So lief das übliche Gespräch; die Themen der Wüste
— blutige Fehde und Kameldiebstahl — alle wurden sie erörtert, ich
hätte vor Freude weinen mögen, als ich ihnen wieder lauschte. Ein
wahres Babel von arabischen Dialekten herrschte an diesem Abend
um mein Feuer: Michaïl sprach das gewöhnlich klingende, jeder
Vornehmheit entbehrende Jerusalemisch, Habīb drückte sich,
außerordentlich schnellsprechend, im Dialekt des Libanon aus, und
Mohammed hatte den langgezogenen, monoton beirutischen Akzent,
während die Lippen des Negers ein der schönen, kraftvollen
Beduinensprache ähnelndes Idiom formulierten. Selbst den Männern
fiel die Verschiedenartigkeit der Dialekte auf, und sie wandten sich
an mich mit der Frage, welches der richtige sei. Ich konnte nur
erwidern: »Das weiß Gott allein, denn er ist allwissend!« eine
Antwort, die mit Lachen aufgenommen wurde, obgleich ich gestehen
muß, daß ich sie nur zaghaft äußerte.
Kloster Mar Saba in der Wüste von Judäa.
Grau und windstill brach der Morgen herein. Vom Augenblick

meines Erwachens an bis zum Aufbruch waren 1½ Stunden für
Vorbereitungen festgesetzt; manchmal kamen wir zehn Minuten
früher fort, manchmal leider auch später. Die Wartezeit verplauderte
ich mit dem Brückenwärter, einem Jerusalemer Kind. Er vertraute
meinem mitleidigen Ohr all seine Kümmernisse, die Streiche, die ihm
die Ottomanische Regierung zu spielen pflegte, und die Schwere
des Daseins in den heißen Sommermonaten. Und dann das Gehalt!
ein reines Nichts! Sein Einkommen war jedoch größer, als er
einzugestehen beliebte, denn ich entdeckte in der Folge, daß er für
jedes meiner sieben Tiere drei statt zwei Piaster gefordert hatte. Es
ist sehr leicht, sich gut mit den Orientalen zu stellen, und wenn sie
ein Entgelt für ihre Freundschaft verlangen, so ist es gewöhnlich
sehr bescheiden. Wir überschritten den Rubikon für drei Piaster pro
Kopf und schlugen den nordwärts nach Salt führenden Weg ein. Der
südliche geht nach Mādeba in Moab, der mittlere aber nach
Heschbān, wo der schurkische Sultan ibn 'Ali id Diāb ul 'Adwān, der
große Scheich aller Belkaaraber, wohnt. Die Ostseite des
Jordantales ist viel fruchtbarer als das Westufer. Liefern doch die
schönen Höhen von Ajlun Wasser genug, um die ganze Ebene in
einen Garten zu verwandeln, aber das kostbare Naß wird nicht
aufgespeichert, und die Araber vom Stamme 'Adwān begnügen sich
damit, ein wenig Korn zu erbauen. Noch war die Zeit des Blühens
nicht gekommen. Ende März aber ist das Ghor ein einziger Teppich
aus den verschiedenartigsten lieblichen Blüten, die alle freilich nur
einen Monat lang die sengende Hitze des Tales ertragen können, ja,
dieser einzige Monat sieht die Pflanzen knospen, blühen und reifen
Samen tragen. Ein armseliger Araber zeigte uns den Weg. Er war
gekommen, um sich den Redīfs zuzugesellen, da ein wohlhabender
Einwohner von Salt ihn gegen ein Entgelt von 50 Lire als
Ersatzmann gedungen hatte. Aber er kam zu spät; als er die Brücke
erreichte, war sein Regiment schon vor zwei Tagen durchmarschiert.
Es tat ihm leid, denn gern wäre er dem Krieg entgegengezogen, —
überdies mußte er auch wahrscheinlich die 50 Lire zurückerstatten
— aber seine Tochter würde sich freuen, denn sie hatte beim
Abschied geweint. Er stand still, um seinen Lederpantoffel aus dem
Schlamm zu ziehen.
»Nächstes Jahr,« sprach er, nachdem er mich wieder eingeholt,
»werde ich, so Gott will, nach Amerika gehen.«
Verwundert betrachtete ich die halbnackte Gestalt, die bloßen
Füße in den zerrissenen Schuhen, den zerlumpten, von den
Schultern gleitenden Rock, den Wüstenturban aus einem Tuch und
Schnüren von Kamelshaar hergestellt.
»Kannst du Englisch?« fragte ich.
»Nein,« erwiderte er gelassen, »aber ich werde dann das
Reisegeld erspart haben. Hier ist bei Gott kein Vorwärtskommen
möglich.«
Ich fragte, was er in den Vereinigten Staaten zu tun gedenke.
»Handeln,« lautete die Antwort, »und wenn ich 200 Lire
zusammen habe, komme ich wieder.«
Dieselbe Geschichte kann man durch ganz Syrien hören.
Hunderte wandern alljährlich aus und finden, wohin sie auch
kommen, mitleidige Landsleute, die ihnen eine helfende Hand
reichen. Sie bieten billige Waren auf den Straßen feil, schlafen unter
Brücken und leben von einer Kost, die kein freier Bürger auch nur
eines Blickes würdigen würde, und kehren, haben sie ihre 200 Lire
erworben, in die Heimat zurück, reiche Leute in den Augen ihres
Dorfes. Im Ostjordanland sind die Auswanderungsgelüste nicht so
groß, aber als ich einst im Gebirge von Haurān einen Drusen nach
dem Weg fragte, gab er mir im reinsten Yankeeenglisch Bescheid.
Ich hielt mein Pferd an, hörte seine Geschichte und fragte
schließlich, ob er wieder nach Amerika wolle. Er wandte sich um
nach den Steinhütten seines Dorfes, das knietief in Schlamm und
schmelzendem Schnee eingebettet lag, »Gibt's nicht!« erwiderte er,
und als ich schon weiterritt, klang noch ein fröhliches »Mein Lebtag
nicht!« hinter mir her.
Die Klagemauer in Jerusalem.
Ein zweistündiger Ritt brachte uns an das Gebirge, das wir durch
ein gewundenes Tal betraten. Mein Freund nannte es Wād el
Hassanīyyeh, nach dem Stamme gleiches Namens. Es war voll
Anemonen, weißem Ginster (rattam nennen ihn die Araber),
Cyclamen, Hyazinthen und wilden Mandelbäumen. Für nutzlose
Pflanzen, mögen sie noch so schön sein, hat der Araber keine
Namen, sie heißen alle haschīsch, Gras, während das kleinste
Gewächs, das von irgend welchem Nutzen ist, in seiner Sprache
bekannt und bezeichnet ist. Der Weg, ein bloßer Saumpfad, stieg
allmählich bergan. Gerade, ehe wir in die Nebelschicht eintraten, die
den Gipfel des Berges einhüllte, sahen wir unter uns, nach Süden
hin, das Tote Meer wie eine riesige Milchglasscheibe unter dem
bleiernen Himmel daliegen. Bei richtigem Gebirgswetter, einem
feuchten, dahinjagenden Nebel, erreichten wir gegen 4 Uhr Salt.
Dank dem Regen, der in der vergangenen Nacht über uns
weggezogen und hier niedergefallen war, hatte sich die ganze
Umgebung des Dorfes in einen Sumpf verwandelt. In der Hoffnung
auf ein trockneres Unterkommen zögerte ich, die Zelte aufschlagen
zu lassen. Es war mein erstes Bemühen, die Wohnung Habīb
Effendi Fāris' ausfindig zu machen, um dessentwillen ich nach Salt
gekommen war, obgleich ich ihn nicht kannte. Auf seiner Hilfe allein
beruhte die Möglichkeit, meine Reise fortzusetzen. Ich hatte nur
insofern Anrecht auf seinen Beistand, als er mit der Tochter eines
eingebornen Priesters in Haifa, eines würdigen alten Mannes und
guten Freundes von mir, verheiratet war. Urfa am Euphrat war der
Stammplatz der Familie, aber Abu Namrūd hatte lange in Salt gelebt
und kannte die Wüste. Die Stunden, in denen er mich Grammatik
lehren sollte, verbrachten wir größtenteils damit, den Erzählungen
der Araber und seines Sohnes Namrūd zu lauschen, der mit Habīb
Fāris zusammen arbeitete, und dessen Name jedem Belkaaraber
bekannt war.
Juden aus Buchara.
»Wenn Sie je in die Wüste wollen, so müssen Sie zu Namrūd

gehen,« sagte Abu Namrūd. Und darum war ich jetzt hier.
Nach kurzem Fragen fand ich die Wohnung Habīb Fāris'. Ich
wurde freundlich aufgenommen; Habīb war ausgegangen, Namrūd
auswärts (verließ mich mein guter Stern?), aber wollte ich nicht
hereinkommen und ausruhen? Das Haus war klein und voller Kinder,
und noch erwog ich bei mir die Frage, ob nicht der feuchte Erdboden
draußen eine bessere Ruhestatt darbieten möchte, als plötzlich ein
schöner, alter, ganz arabisch gekleideter Mann erschien mit der
Erklärung, daß er und kein anderer mich beherbergen würde, mein
Pferd am Zügel nahm und mich mit sich führte. Das Tier wurde in der
Karawanserei eingestellt, ich stieg eine hohe, schlüpfrige Treppe
hinauf und betrat einen steingepflasterten Hof. Jūsef Effendi eilte
voraus und öffnete die Tür seines Gastzimmers. Fußboden und
Diwan waren mit dicken Teppichen belegt, die Fenster blitzten, wenn
sie auch viele zerbrochene Scheiben aufwiesen, eine europäische
Chiffonniere stand an der Wand: ich sah mich in meinen
Erwartungen weit übertroffen. Einen Augenblick später war ich ganz
heimisch, trank Jūsefs Kaffee und aß meinen eignen Kuchen dazu.
Abessinische Priester.
Jūsef Effendi Sukkar (Friede sei mit ihm!) ist Christ und einer der
reichsten Bewohner von Salt. Er ist ein sehr lakonischer Mann, sucht
aber als Wirt seinesgleichen. Er tischte mir ein ausgezeichnetes
Abendessen auf, dessen Reste Michaïl vorgesetzt wurden, nachdem
ich mich gütlich getan hatte. So sorgte er zwar für meine leiblichen
Bedürfnisse, konnte oder wollte aber nichts tun, um meine
Besorgnisse bezüglich der Weiterreise zu zerstreuen.
Glücklicherweise erschienen in diesem Augenblick Habīb Fāris und
seine Schwägerin Pauline, eine alte Bekannte von mir, sowie
mehrere andere Personen, die sich alle die Ehre geben wollten, den
Abend mit mir zu verplaudern. (»Behüte, die Ehre ist ganz auf
meiner Seite!«) Wir ließen uns nieder zu Kaffee, dem bitteren,
schwarzen Kaffee der Araber, der jeden Nektar übertrifft. Die Tasse
wird dir gereicht mit einem »Geruhe anzunehmen!«, leer gibst du sie
zurück und murmelst dabei »Langes Leben dir!« Während du trinkst,
ruft dir eins zu »Gesundheit!«, und du erwiderst »Deinem Herzen!«
Als die Tassen ein- oder zweimal herumgegeben und alle
erforderlichen Höflichkeitsbezeigungen ausgetauscht waren, brachte
ich die Rede auf das Geschäftliche. Wie konnte ich das drusische
Gebirge erreichen? Die Regierung würde mir wahrscheinlich die
Erlaubnis verweigern, bei 'Ammān stand ein Militärposten am
Eingang zur Wüste, und in Bosra kannte man mich, denn dort war
ich ihnen vor fünf Jahren durch die Finger geschlüpft, ein
Kunststück, das mir zum zweitenmal schwerlich gelingen würde.
Habīb dachte nach, und schließlich schmiedeten wir einen Plan. Er
wollte mich am andern Morgen nach Tneib, am Rande der Wüste,
schicken, wo seine Kornfelder lagen, und wo ich Namrūd finden
würde. Der mochte einen der großen Stämme benachrichtigen, unter
dessen Schutz und Geleit konnte ich dann völlig sicher in die Berge
reisen. Jūsefs zwei Söhnchen hörten mit erstaunten Augen zu und
brachten mir am Schlusse der Unterhaltung ein Stück Zeitung mit
einer Karte von Amerika. Darauf zeigte ich ihnen meine Landkarten
und erzählte ihnen, wie groß und schön die Welt sei, bis die
Gesellschaft gegen zehn Uhr aufbrach, und mein Wirt Decken für
meine Lagerstatt auszubreiten begann. Erst jetzt bekam ich meine
Wirtin zu sehen. Sie war eine außerordentlich schöne Frau, groß
und bleich, mit einem ovalen Gesicht und großen, sternengleichen
Augen. Sie trug sich arabisch: ein enges, dunkelblaues Gewand
schlug beim Gehen um ihre bloßen Knöchel, ein dunkelblauer
Schleier war mit einem roten Tuch um die Stirn befestigt und fiel lang
über ihren Rücken hinunter, bis fast auf die Erde. Nach der Weise
der Beduinenfrauen waren ihr auf Kinn und Hals zierliche Muster in
Indigofarbe tätowiert. Sie brachte Wasser und goß es mir über die
Hände; ihre große, stattliche Gestalt bewegte sich schweigend im
Zimmer und verschwand, nachdem alle Obliegenheiten erfüllt waren,
ebenso ruhig wieder, wie sie gekommen. Ich sah sie nicht noch
einmal. »Sie trat herein und grüßte mich,« sprach jener Dichter, der
in Mekka gefangen lag, »dann erhob sie sich, um Abschied zu
nehmen, und als sie meinen Blicken entschwand, folgte ihr meine
Seele.« Niemand darf Jūsefs Weib sehen. Obgleich er ein Christ ist,
hält er sie doch in strengerer Abgeschlossenheit, als die
Muselmänner ihre Frauen, — und vielleicht tut er recht daran.
An meine Fenster schlug der Regen; während ich mich auf mein
Lager streckte, klang mir Michaïls Ausruf in den Ohren:
»Mascha'llah! Ew. Exzellenz haben Glück!«
Zweites Kapitel.
Salt ist eine wohlhabende Gemeinde von über 10000
Einwohnern, die zur Hälfte Christen sind. Es liegt in einer reichen,
um ihrer Trauben und Pfirsiche willen bekannten Gegend; schon im
14. Jahrhundert tut der Geograph Abu'l Fīda seiner Gärten
Erwähnung. Auf dem Hügel liegt über den dichtgedrängten Dächern
ein zerfallenes Kastell, welcher Zeit entstammend, weiß ich nicht.
Die Bewohner glauben an ein sehr hohes Alter der Stadt, ja die
Christen behaupten, in Salt sei eine der ersten Gläubigengemeinden
gewesen; es geht sogar die Sage, daß Christus selbst hier das
Evangelium gepredigt habe. Obgleich die Aprikosenbäume noch
nichts weiter als ihre kahlen Zweige zeigten, trug doch das ganze Tal
den Stempel freundlicher Wohlhabenheit, als ich mit Habīb Fāris
durchritt, der sein Pferd bestiegen hatte, um mich auf den rechten
Weg zu bringen. Er hatte auch seinen Anteil an den Weinbergen und
Aprikosengärten und schmunzelte geschmeichelt, als ich mich
lobend über sie aussprach. Wer hätte auch an einem solchen
Morgen nicht schmunzeln sollen? Die Sonne schien, blitzender Frost
lag auf der Erde, und die Luft zeigte jene durchsichtige Klarheit, die
nur an hellen Wintertagen nach einem Regen zu beobachten ist.
Aber es war nicht nur ein allgemeines Gefühl des Wohlwollens, dem
meine anerkennenden Worte entsprangen: die Bewohner von Salt
und Mādeba sind ein kluges, fleißiges Völkchen, das jedes Lob
verdient. In den fünf Jahren, wo ich die Gegend nicht besucht, hatten
sie die Grenze des Ackerlandes um die Breite eines zweistündigen
Rittes nach Osten hin vorgeschoben und den Wert des Bodens so
unbestreitbar bewiesen, daß nach der Eröffnung der Haddjbahn der
Sultan einen großen, im Süden bis Ma'ān reichenden Landstrich für
sich reserviert hat, den er in eine Königliche Farm umzuwandeln
gedenkt. Er und seine Pächter werden Reichtümer ernten, denn
wenn auch nur ein mäßig guter Regent, so ist der Sultan doch ein
vorzüglicher Landwirt.
Eine halbe Stunde hinter Salt verabschiedete sich Habīb und
überließ mich der Obhut seines Knechtes Jūsef, eines kräftigen
Menschen, der mit seiner Holzkeule (Gunwā nennen sie die Araber)
über der Schulter neben mir dahinschritt. Wir zogen durch die
weiten, baumlosen, unbewohnten, ja fast unbebauten Täler, die die
Belkaebene umgeben, und vorbei an der Öffnung des Wādi Sīr,
durch welches man, immer durch die schönsten Eichenwälder
reitend, bis in das Jordantal hinabgelangen kann. Auch die Berge
würden hier Bäume tragen, wenn die Kohlenbrenner sie nur
wachsen ließen — wir fanden manches Eichen- und
Schwarzdorndickicht auf unserm Wege —, aber ich möchte gar
nichts geändert haben an dem herrlichen Ostjordanland. Zwei
Menschenalter später wird es im Schmucke der Kornfelder stehen
und mit Dörfern übersät sein; die Wasser des Wādi Sīr werden
Mühlräder treiben, und man wird selbst Chausseen bauen, aber —
dem Himmel sei Dank — ich werde das alles nicht sehen müssen.
Solang ich lebe, wird das Hochland bleiben, als was es Omar
Khayyām besingt: »Verstreuten Grüns ein schmales Band, trennt es
die Wüste von dem Ackerland.« Öde und menschenleer wird es
auch ferner sein; nur hie und da wird ein einzelner Hirt, auf die
langläufige Flinte gelehnt, mitten in seiner Herde stehen, und wenn
ich den Reitersmann, der so selten nur sein Roß durch die Berge
lenkt, frage, woher er kommt, wird er noch immer antworten: »Möge
dir die Welt noch Raum genug bieten! Von den Arabern komme ich.«
Ein Adwānaraber als
Feldhüter.
Und hin zu den Arabern führte uns unsere Reise. In der Wüste
gibt es weder Beduinen — alle Zeltbewohner heißen Araber (mit
einem kräftigen Rollen des Gutturallautes) — noch auch Zelte,
sondern nur Häuser, manchmal auch »Haarhäuser«, wenn eine
nähere Bestimmung nötig ist, sonst schlechthin »Häuser«, eine
Bezeichnung, die nur die äußerste Verachtung alles dessen erfinden
konnte, was zu einem Haus gehört; denn mit einem solchen haben
diese Zelte nichts gemeinsam als höchstens das Dach aus
schwarzen Ziegenhaaren. Man kann Araber sein, auch wenn man
zwischen Mauern wohnt. Die Leute von Salt zählen samt den
Abādeh, den Da'dja und den Hassaniyyeh und mehreren anderen
die große Schar der 'Adwān bildenden Arabern, zu den
Belkastämmen. Zwei mächtige Stämme streiten um die
Oberherrschaft in der Syrischen Wüste, die Beni Sachr und die
'Anazeh. Es besteht eine traditionelle, jetzt freilich durch
bedauerliche Vorkommnisse getrübte Freundschaft zwischen den
Suchūr und den Belkaarabern, und wahrscheinlich deshalb wurde
mir hier erzählt, daß die 'Anazeh zwar die an Zahl überlegenere, an
Mut aber die bei weitem untergeordnetere der beiden Parteien sei.
Mit einem Sohne Talāl ul Fāiz', des Beherrschers aller Beni Sachr,
verknüpft mich sozusagen eine Grußbekanntschaft. Vor fünf Jahren,
aber einen Monat später, also gerade zu der Zeit, wo der ganze
Stamm die heißen östlichen Weideländer verläßt und jordanwärts
zieht, stieß ich gerade in dieser Gegend auf ihn. In Begleitung eines
zirkassischen Polizeisoldaten ritt ich von Mādeba nach Mschitta —
es war, ehe die Deutschen die mit Steinbildwerk versehene Fassade
von dem prächtigen Gebäude ablösten. Als wir die mit den Herden
und schwarzen Zelten der Suchūr bedeckte Ebene kreuzten, kamen
drei bis an die Zähne bewaffnete Reiter mit finsteren Brauen und
drohenden Mienen auf uns zu, um uns den Weg abzuschneiden.
Aus der Ferne schon riefen sie uns ihren Gruß zu, wandten aber um
und ritten langsam zurück, sobald sie des Soldaten ansichtig
wurden. Der Zirkassier lachte: »Das war Scheich Fāiz,« sagte er,
»Talāls Sohn. Wie die Schafe, wāllah! Wie die Schafe laufen sie,
wenn sie einen von uns erblicken!« Ich kenne die 'Anazeh nicht, da
ihre Winterwohnplätze mehr nach dem Euphrat zu liegen, aber
unbeschadet meiner sonstigen Hochachtung für die Suchūr, glaube
ich, daß jene, ihre Nebenbuhler, die wahren Aristokraten der Wüste
sind. Ihr Herrscherhaus, die Beni Scha'alān, trägt den stolzesten
Namen, und ihre Pferde sind die besten in ganz Arabien; sogar die
Schammār, Ibn er Raschīds Leute, kaufen sie gern, um ihre eigne
Zucht damit aufzubessern.
Lager in der Nähe des Toten Meeres.
Aus dem tief eingeschnittenen, das Jordantal überragenden

Gebirge kamen wir in ein flaches Hügelland, in dem zahlreiche
verfallene Plätze liegen. Eine Viertelstunde vor den an der Quelle
des Wādi Sīr befindlichen Ruinen stießen wir auf eine ansehnliche
Menge Mauerwerk und eine Zisterne, welche die Araber Birket Umm
el 'Amūd (Brunnen der Mutter der Säule) nennen. Jūsef berichtete,
daß dieser Name von einer Säule herrühre, die früher inmitten des
Wassers gestanden; ein Araber schoß nach ihr und zerstörte sie,
und nun liegen ihre Trümmer auf dem Grunde der Zisterne. Der
Hügel (oder Tell, um ihm dem heimischen Namen zu geben) von
Amēreh ist ganz mit Ruinen bedeckt, und weiterhin, in Jadūdeh,
findet man Felsengräber und Sarkophage am Rande der Brunnen.
Der ganze Saum der Wüste ist mit ähnlichen Zeugen einer
vergangenen Bevölkerung übersät; wir finden Dörfer aus dem 5. und
6. Jahrhundert, der Zeit, wo Mādeba eine reiche, blühende
Christenstadt war, ja einige entstammen zweifellos einer noch
früheren, vielleicht vorrömischen Periode.
In Jadūdeh hat ein Christ aus Salt, der größte Kornproduzent der
Gegend, seinen Wohnsitz aufgeschlagen; er bewohnt ein einfaches
Landhaus auf der Spitze des Hügels. Man rechnet ihn zu den
energischen Bahnbrechern, die bemüht sind, die Grenzen der Kultur
immer weiter hinauszuschieben. Bei Jadūdeh verließen wir das
Hügelland und betraten die endlose, mit spärlichem Grün
bewachsene Ebene. Hie und da ein kegeliger Hügel oder ein
niedriger Höhenzug, dann wieder weite, unbegrenzte Ebene.
Ruhevoll dem Auge und doch nie monoton liegt sie, in die magische
Glut des winterlichen Sonnenuntergangs getaucht; auf den sanft
gewölbten Erhöhungen rastet noch das Licht, die leichten
Bodensenkungen bergen schon die Schatten der Nacht, und über
dem allen breitet sich der weite Himmelsdom aus, der Wüste und
Meer gleichermaßen überwölbt. Die erste größere Erhebung ist der
Tneib. Wir erreichten ihn nach einem neunstündigen Marsch um ½6
Uhr, gerade als die Sonne sank, und schlugen unsere Zelte an der
südlichen Berglehne auf. Der ganze Abhang war voller Ruinen:
niedrige Mauern aus rohbehauenen Steinen ohne Mörtel, in Felsen
gehauene Zisternen, deren einige ursprünglich jedenfalls weniger zu
Wasser- als zu Kornbehältern benutzt worden, welchem Zweck sie
auch jetzt noch dienen. Namrūd war zum Besuch eines
benachbarten Landwirtes geritten, einer seiner Männer aber eilte
sofort, ihn von meiner Ankunft zu benachrichtigen, und gegen 10 Uhr
abends erschien er im Glanze der frostblitzenden Sterne mit vielen
Freudenbezeigungen und der Versicherung, daß meine Wünsche
leicht zu erfüllen seien. So legte ich mich zur Ruhe, eingehüllt in das
kalte Schweigen der Wüste, und erwachte am andern Morgen zu
einem Tage voll Sonnenschein und guter Aussichten.

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Library of Congress Control Number: 2018950932

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Caparica, Portugal Maria Raposo

Wojtek J. Bock, Université du Quebec Outaouais, Canada

Robert Ferguson, National Physical Laboratory, UK

Stanislaw Klosowicz, Military University of Technology, Faculty of Advanced

Gang-Ding Peng, University of New South Wales, Australia

Carlos M. S. Vicente, Instituto de Telecomunicações and CICECO—Aveiro,

1 Waveguide Evanescent Field Fluorescence and Scattering

2.4 Discussion and Conclusions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41

5.2 Holographic Optical Elements . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87

7.3 Results and Discussion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 146

9.3.1 Diffusion Theory for a Two-Layered Cylindrical

D. Abi Haidar IMNC Laboratory, UMR 8165, CNRS/IN2P3, Paris-Saclay

A. Ignatiev Department of Optical Information Technologies and Materials,

Y. Sgibnev Department of Optical Information Technologies and Materials, ITMO

© Springer Nature Switzerland AG 2018 1

1.2 Brief History

The waveguide evanescent field scattering (WEFS) technique was developed by

Home-made, glass waveguides on fused silica (step-index slab waveguides) or ion

Fig. 1.1 General WEFF-

1.3.2 Cell Culture

by taking of 10 μL of this solution and dissolving it in 1 mL of growth medium. A

1.3.3 Bacterial Culture

1.3.4 Microscopic Analysis: WEFF and WEFS

An inverted microscope from Zeiss, Oberkochen, Germany, with the waveguide

1.4 TIRF/TIR Versus WEFF/WEFS

Both TIRF/TIR and WEFF/WEFS microscopies assemblies, employ sample illu-

In regard to TIR microscopy is performed identically but excluding the dye

Kloster Kurutul oberhalb Jerichos.

Wir errichteten unsere Zelte, pflöckten die Pferde an und

Grau und windstill brach der Morgen herein. Vom Augenblick

Juden aus Buchara.

»Wenn Sie je in die Wüste wollen, so müssen Sie zu Namrūd

Aus dem tief eingeschnittenen, das Jordantal überragenden

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