Antibacterial Resistance

DR ANCE ROSLINA.,M.KES
BAGIAN MIKROBIOLOGI FK-UMSU
2019
Morfology bacteria
The Action of Antimicrobial Drugs
1. Antimicrobials generally act either by directly killing microorganisms
(bactericidal) or by inhibiting their growth (bacteriostatic).
2. Some agents, such as penicillin, inhibit cell wall synthesis in bacteria.
3. Other agents, such as chloramphenicol, tetracyclines, and streptomycin, inhibit protein
synthesis by acting on 70S ribosomes.
4. Antifungal agents target plasma membranes.
5. Some agents inhibit nucleic acid synthesis.
6. Agents such as sulfanilamide act as antimetabolites by competitively inhibiting enzyme
activity.
Site of antimicrobial
A Survey of Commonly Used Antimicrobial Drugs

Antibacterial Antibiotics: Inhibitors of Cell Wall Synthesis

 All penicillins contain a ß-lactam ring.
 Natural penicillins produced by Penicillium are effective against gram-positive cocci and
spirochetes.
 Penicillinases (ß-lactamases) are bacterial enzymes that destroy natural penicillins.
 Semisynthetic penicillins are made in the laboratory by adding different side chains onto
the ß-lactam ring made by the fungus.
 Semisynthetic penicillins are resistant to penicillinases and have a broader spectrum of
activity than natural penicillins.
 Carbapenems are broad-spectrum antibiotics that inhibit cell wall synthesis.
 The monobactam aztreonam affects only gram-negative bacteria.
 Cephalosporins inhibit cell wall synthesis and are used against penicillin-
resistant strains.
 Polypeptides such as bacitracin inhibit cell wall synthesis primarily in gram-
positive bacteria.
 Vancomycin inhibits cell wall synthesis and may be used to kill penicillinase-
producing staphylococci.
RESISTENSI BAKTERI

 suatu sifat tidak terganggunya kehidupan bakteri.

Cara terjadinya resisten;

1.Resistensi non genetik

2.Resistensi genetik
 Penyebab terjadinya resistensi

Non genetik
 hampir semua obat AB bekerja dengan baik pada masa
pembelahan sel bakteri sehingga bakteri yang tidak aktif
membelah pada umumnya resisten terhadap obat
 kuman mempunyai gen yang menyebabkan kuman tersebut
resisten terhadap AB tertentu.
Mis; kuman Gram negatif sejak semula resisten terhadap
Penisillin G
Genetik:
 resistensi dapat terjadi akibat adanya perubahan gen dalam sel
kuman
 kuman yang semula sensitif terhadap AB menjadi resisten
adanya mutasi pada kromosom kuman atau kuman memperoleh
gen yang menyebabkan terjadinya resistensi dari luar sel kuman
 Resistensi kromosomal
 Resistensi ekstrakromosomal (plasmid)
 Materi genetik dan plasmid dapat dipindahkan atau berpindah melalui
berbagai mekanisme, sebagai berikut:
 Transduksi:

Penularan dengan perantaraan bakteriophage

 Transformasi:

 Potongan-potongan DNA dari sel kuman resisten yang lisis

menembus membran dan dinding sel kuman yang sensitif  Bahan
genetik akan menyatu dengan DNA kuman yang sensitif
 Konjugasi:

 Transfer unilateral dari materi genetik antara bakteri sejenis

maupun dengan jenis lain
2.1.Secara alamiah; bakteri mempunyai gen yang menyebabkan bakteri
tersebut resisten terhadap AB tertentu.
Mis; kuman Gram negatif sejak semula resisten terhadap Penisillin G

2.2.Secara didapat; bakteri yang semula sensitif terhadap AB menjadi

resisten adanya mutasi pada kromosom bakteri atau bakteri
memperoleh gen yang menyebabkan terjadinya resistensi dari luar sel
kuman
Mutasi Spontan;
bakteri akan resisten dan terus mengadakan replikasi
membentuk strain yang resisten. AB bertindak sebagai
selecting agent.

Mutasi akibat induksi AB;

untuk mencegah terjadinya hal ini dianjurkan pemberian
AB kombinasi
Resistensi bakteri terjadi akibat masuknya gen penyebab resistensi
kedalam sitoplasma bakteri yang sensitif.

Struktur ekstra kromosom ada 2 macam yaitu episom (faktor R)

dan plasmid.
1. Plasmid:
 mengandung satu atau lebih unit r (gen yang menyebabkan
bakteri resisten terhadap AB tertentu
 ditularkan kepada bakteri lain yang masih sensitif terhadap AB
dengan jalan konjugasi, transduksi dan transformasi.
 Bakteri yang mengandung plasmid R belum tentu
merupakan bakteri yang dapat menimbulkan penyakit
2. Episom (faktor r)
 mengandung beberapa unit r dan RTF (resistance transfer
factor),
 RTF dapat menyebabkan pili dari permukaan bakteri yang
sensitif.
 duplikat faktor R dari bakteri yang resisten dipindahkan
kedalam sitoplasma bakteri yang sensitif bakteri yang
semula sensitif sekarang mengandung faktor r dalam
sitoplasmanya bakteri menjadi resisten= Konyugasi
Transduksi

penularan dengan perantaraan bakteriophage,

bila bakteriofaga menginfeksi bakteri resisten yang
mengandung plasmidmasuk kedalam bakteriophage.
bakteriopghage kemudian menginfeksi bakteri yang
sensitif, plasmid dari bakteriophage akan masuk kedalam
sitoplasma bakteri yang sensitif kuman menjadi resisten
Transformasi
 potongan-potongan DNA dari sel bakteri resisten yang
lisis dapat menembus membran dan dinding sel bakteri
yang sensitif.
 Bahan genetik akan menyatu dengan DNA bakteri yang
sensitif  bakteri menjadi resisten
 Mechanisms of Resistance
The basic mechanisms by which a microorganism can resist an antimicrobial agent
are
(1) to alter the receptor for the drug (the molecule on which it exerts its effect);
(mengubah reseptor)
(2) to decrease the amount of drug that reaches the receptor by altering entry or
increasing removal of the drug; (mengurangi jumlah obat yg sampai ke
reseptor)
(3) to destroy or inactivate the drug; (menghancurkan obat)
(4) to develop resistant metabolic pathways. Bacteria can possess one or all of
these mechanisms simultaneously. (membuat jalur resisten)
Mechanisms of bacterial resistance
1. Enzymatic destruction or inactivation of the drug
 β-Lactam Resistance
 the ß-lactam ring, which is the target for ß-lactamase enzymes that selectively hydrolyze
 PBP menghambat perubahan reseptor untuk β-laktam
 PBP2a staphylococcal yang resisten terhadap methicillin resisten
terhadap semua penisilin, sefalosporin, dan karbapenem.
 Vancomycin Resistance
 mengubah struktur rantai cincin D-Ala-D-Ala normal di jalur perakitan
peptidoglikan.  rantai samping yang berubah (D-Ala-D-Lac) tidak
mengikat vankomisin
 Enterococci
2. Prevention of penetration to the target site within the microbe
 Gram-negative bacteria are relatively more resistant to antibiotics
because of the nature of their cell wall, which restricts absorption of
many molecules to movements through openings called porins
 Some bacterial mutants modify the porin opening so that antibiotics
are unable to enter the periplasmic space
3. Altereration of the drug’s target site
 The synthesis of proteins involves the movement of a ribosome along a
strand of messenger RNA
 Several antibiotics, especially those of the aminoglycoside, tetracycline
and macrolide groups, utilize a mode of action that inhibits protein
synthesis at this site.
 Minor modifications at this site can neutralize the effects of antibiotics
without significantly affecting cellular function.
4. Rapid efflux (ejection) of the antibiotic
 Certain proteins in the plasma membranes of gram-negative bacteria act
as pumps that expel antibiotics, preventing them from reaching an
effective concentration.
 This mechanism was originally observed with tetracycline antibiotics, but
it confers resistance among practically all major classes of antibiotics.
 Bacteria normally have many such efflux pumps to eliminate toxic
substances.
5. Variation of mechanisms of resistance
 Microbe could become resistant to trimethoprim by
synthesizing very large amounts of the enzyme againts
which the drug is targeted.
 Macrolide-lincomycin Resistance
 Resistensimacrolide-lincomycin pada isolat klinis staphylococci dan
streptococci
 dimediasi plasmid, dan resistansi dikodekan pada transposon
 disebabkan oleh metilasi dua nukleotida adenin pada komponen 23S dari RNA
50S.
 Rifampin Resistance
 Bersifat sitotoksis terhadap sel tubuh hospes
 Rifampisin;
berikatan dengan polimerase RNAmenghambat sintesa
RNA dan DNA oleh enzim polimerase.
 Sulfonamide-trimethoprim Resistance
Resistensi plasmid dan transposon yang dimediasi ini disebabkan oleh
adanya reduktase dihydrofolat  mengurangi afinitas untuk
trimetoprim.

 Quinolone Resistance
 mutasi
pada subunit DNA gyrase A atau B, mengurangi permeabilitas
membran luar pada sel gram negatif
 fluoroquinolonesdikaitkan dengan mutasi kromosom substitusi
asam amino di subunit A DNA gyrase.
Antimycobacterial Antibiotics
 Isoniazid (INH) and ethambutol inhibit cell wall synthesis in
mycobacteria.

Inhibitors of Protein Synthesis

 Chloramphenicol, aminoglycosides, tetracyclines, glycylcyclines,
macrolides, streptogramins, oxazolidinones, and pleuromutilins inhibit
protein synthesis at 70S ribosomes.
Injury to the Plasma Membrane
 Lipopeptides polymyxin B and bacitracin cause damage to plasma membranes.

Inhibitors of Nucleic Acid (DNA/RNA) Synthesis

 Rifamycin inhibits mRNA synthesis; it is used to treat tuberculosis.
 Quinolones and fluoroquinolones inhibit DNA gyrase for treating urinary tract infections.

Competitive Inhibitors of the Synthesis of Essential Metabolites

 Sulfonamides competitively inhibit folic acid synthesis.
 TMP-SMZ competitively inhibits dihydrofolic acid synthesis.
Antifungal Drugs plasma membranes.
 Polyenes, such as nystatin and amphotericin B, combine with plasma
membrane sterols and are fungicidal.
 Azoles and allylamines interfere with sterol synthesis and are used to
treat cutaneous and systemic mycoses.
 Echinocandins interfere with fungal cell wall synthesis.
 The antifungal agent flucytosine is an antimetabolite of cytosine.
 Griseofulvin interferes with eukaryotic cell division and is used
primarily to treat skin infections caused by fungi.
Antiviral Drugs
 Nucleoside and nucleotide analogs, such as acyclovir and zidovudine,
inhibit DNA or RNA synthesis.
 Inhibitors of viral enzymes are used to treat influenza and HIV
infection.
 Alpha interferons inhibit the spread of viruses to new cells.
 Entry inhibitors and fusion inhibitors bind to HIV attachment and
receptor sites.
Resistensi Oral Anti Tuberkulosis
(OAT)
Resistensi OAT:
 instrinsik
 dapatan.

Resistensi instrinsik  struktur dinding sel yang sangat hidrofobik

dan impermeable serta adanya ekspresi protein tertentu yang
menurunkan kerja obat.

Resistensi dapatan  adanya mutasi pada gen-gen tertentu yang

berperan dalam kerja OAT.
Molekuler Resistensi OAT:
 Resistensi terhadap rifampisin terjadi akibat mutasi pada gen
rpoB,
 Resistensi isoniazid pada gen katG dan ahpC,
 Resistensi pirazinamid pada gen pncA,
 Resistensi etambutol pada gen embB,
 Resistensi streptomisin pada rpsL dan rrs
 Resistensi fluorokuinolon pada gen gyrA dan gyrB
kategori-kategori bakteri resisten

1. Multidrug-resistant (MDR)
 resistensi bakteri terbadap paling tidak satu agen antibiotik
dari tiga atau lebih kategori agen antibiotik.
Contoh; Resistensi OAT resistensi terhadap
rifampisin dan isoniazid dengan atau tanpa resistensi terhadap
OAT lain
2 Extensively drug-resistant (XDR)
  resistensi bakteri terhadap paling tidak satu agen antibiotik
dari semua kategori agen antibiotik kecuali satu atau dua
kategori yang masih sensitif.
Contoh; resistensi terhadap OAT lini kedua seperti golongan
fluorokuinolon
3. Pan drug-resistant (PDR)
 resistensistensi bakteri  terhadap semua agen antibiotik dari semua
kategori.
INDIKASI KLINIK SIFAT RESISTENSI

1. Penggunaan AB sesuai indikasi dan dosis yang tepat

2. Membatasi penggunaan AB spektrum luas, karena
mempercepat terjadinya resistensi
3. Untuk penggunaan AB dirumah sakit sebaiknya
dibatasi untuk AB tertentu saja
4. Aplikasi AM khususnya AB, pada dunia peternakan
mungkin perlu dipertimbangkan untung ruginya.
Effects of Combinations of drugs

Synergism Antagonism
 Treatment of bacterial endocarditis,  Simultaneous use of penicillin
penicillin and streptomycin are much and tetracycline is often less
more effective when taken together than effective than whens either
when either drugs is taken alone drugs is used alone
 Damage to bacterial cell walls by
penicillin makes it easier streptomycin to
enter
Tests the guide chemotherapy

 1. Disk Diffusion methode; Kirby –Bauer test

 2. Broth Dilution tests
The disk-diffusion method

 each disk contains a different chemo

therapeutic agent,
which diffuses into the surrounding
agar.
 The clear zones indicate inhibition
of growth of the microorganism
swabbed onto the agar surface.
The e test (for epsilometer)

 The plastic strip, which is placed on

an agar surface inoculated with test
bacteria
 The MIC in µg/ml is clearly shown
 a gradient diffusion
method that determines antibiotic
sensitivity and estimates minimal
inhibitory concentration (MIC).
Reflected light is used to measure zones from back of plate
Dilution Susceptibility Testing Method
Area of synergistic
inhibition, clear
Disk with antibiotic
aztreonam

Disk with antibiotic

amoxicillin-clavulanic
acid Area of growth,
cloudy
TERIMA KASIH