‫בכל חלוקת תא‪ ,‬התא חייב להכפיל את הגנום שלו ברמה גבוהה‬

‫של דיוק‪.‬‬
‫כל גדיל דנ"א מהווה תבנית ‪ tamplate‬עבור הגדיל השני‪.‬‬
‫בתהליך השכפול מתקבלת מולקולת דנ"א המורכבת מגדיל‬
‫חדש‪+‬גדיל ישן‪.‬‬

‫תהליך השכפול‪:‬‬

‫תהליך השכפול מתחיל עם חלבונים ‪ initiator proteins‬אשר נקשרים לדנ"א‬

‫ומפרקים את קשרי המימן בין הבסיסים‪ .‬אף ע"פ שכל קשרי המימן ביחד מייצבים את‬
‫הדנ"א‪ ,‬כל קשר בנפרד הוא חלש יחסית‪ .‬לכן פירוק של קשרי מימן במקטע דנ"א קטן‬
‫לא דורש אנרגיה רבה ויכול להתרחש בעזרת חלבונים אלה בטמפרטורה נורמלית‪.‬‬

‫‪ -replication origins‬המיקומים בהם הדנ"א נפתח‬

‫לראשונה בתהליך הם בד"כ מסומנים ע"י רצף מסוים‬
‫נוקליאוטידים‪ .‬רצפים אלו מושכים את החלבונים המתחילים‬
‫ומדובר במקטעים אשר קלים יותר לפתיחה‪.‬‬
‫•קשרי ‪ A-T‬פחות עשירים בקשרי מימן מאשר קשרי ‪G-‬‬
‫‪ ,C‬לכן דנ"א אשר עשיר בקשרי ‪ A-T‬הוא קל יותר‬
‫לפתיחה‪ ,‬ואזורים עשירים בקשרי ‪ A-T‬בד"כ נמצאים ב‬
‫‪.replication origins‬‬
‫•בגנום האנושי יש בערך ‪ 10,000‬מקורות שכפול‪ .‬במצב‬
‫זה‪ ,‬בו השכפול מתרחש בו זמנית במספר מוקדים‪,‬‬
‫הדנ"א משוכפל יחסית במהירות‪.‬‬

‫לאחר ש ‪ initiator protein‬נקשר לדנ"א ב ‪ replication origin‬ופותח מקומית את‬

‫הדאבל הליקס‪ ,‬הוא מושך קבוצה של חלבונים אשר מבצעים את השכפול‪ .‬קבוצה זו‬
‫פועלת כ ‪ ,protein machine‬אשר כל חלבון בקבוצה זו מבצע תפקיד ספציפי‪.‬‬

‫‪ -Replication forks‬אזורים בהם ה ‪ replication machine‬מתקדמת לאורך הדנ"א‪-‬‬

‫פותחת את שני הגדילים של הדאבל הליקס‬
‫ומשתמשת בגדילים כתבנית ע"מ ליצור את הגדילי בת‪.‬‬
‫שני מזלגות שכפול נוצרים מכל מקור שכפול כאשר‬
‫הם מתקדמים הרחק מה ‪ origin‬בכיוונים מנוגדים‪,‬‬
‫ומבצעים ‪ unzipping‬לדנ"א תוך כדי התקדמות‪.‬‬
‫המזלגות זזים במהירות של ‪ 100‬נוקליאוטידים לשנייה בבני אדם‪.‬‬

‫‪ -DNA Polymerase‬מסנטז דנ"א חדש כאשר הוא משתמש באחד הגדילים הישנים‬
‫בתור תבנית‪ .‬אנזים זה מקטלז את ההוספה‬
‫של נוקליאוטידים לקצה ‪ 3‬של הדנ"א‬
‫הנבנה ע"י יצירת קשרים פוספו דיאסטרים‬
‫בין הקצה הזה לקצה ‪ -5‬פוספט של‬
‫הנוקליאוטיד הנכנס‪ .‬הניקולאיטודים‬
‫נכנסים בתחילה תגובה בעלי רמת אנרגיה‬
‫גבוהה עם ‪ 3‬פוספטים אשר מספקת את‬
‫האנרגיה לתגובה של הפולימריזציה‪.‬‬
 ‫הידרוליזה של קשר פופספו‪-‬אנהידרידי אחד מספק את האנרגיה לתגובת הדחיסה‬
‫המחברת בין הנוקליאוטידים תוך שחרור של ‪ . PPI‬האנזים מצמד את התגובות‪ PPi .‬עובר‬
‫הידרוליזה נוספת ל ‪ P‬כך שנוספת אנרגיה וגורמת לכך שתהליך הפלומריזציה הוא בלתי‬
‫הפיך‪ .‬הדנ"א פולימראז נשאר על תבנית הדנ"א וזז תוך כדי הבנייה‪.‬‬
‫לדנ"א פולימרז יש מנגנון בקרה ‪ ,proofreading‬כך שבממוצע יש טעות אחת ל ‪.107‬‬
‫לפני שהאנזים מצרף נוקליאוטיד לדנ"א הנבנה הוא בודק האם הנוקליאוטיד שהוסף אכן‬
‫מתאים לתבנית‪ -‬אם כן‪ ,‬הוא ממשיך בפולימריזציה‪ ,‬אם לא‪ -‬הוא מסיר את הנוקליאוטיד‬
‫ע"י חיתוך של הקשר הפוספודיאסטרי שהוא עשה‪ ,‬משחרר את הנוקליאוטיד ומנסה‬
‫בשנית‪.‬‬
‫דנ"א פולימרז מבצע פולימריזציה מ ‪ 5‬ל‪ 3-‬והסרה מ‪ 3-‬ל‪ .5-‬פעולות אלו מבוצעות ע"י‬
‫אזורים שונים באנזים‪.‬‬

‫הד‬
‫נ"א פולימרז יודע להוסיף נוקליאוטידים לרצף קיים ומובנה לתבנית‪.‬‬

‫‪ -Primase‬אנזים שיודע לבנות רצף של נוקליאוטידים‬

‫)בערך ‪ (10‬ליצירת שרשרת של ‪ RNA‬על התבנית של גדיל‬
‫הדנ"א ובכך ליצור ‪ prime‬עליו הדנ"א פולימרז יוכל להמשיך‬
‫ולבנות את גדיל הדנ"א החדש‪ .‬ב ‪leading RNA Primer‬‬
‫דרוש רק בהתחלת השכפול ב ‪ .replication origin‬אך ב‬
‫‪ lagging‬אשר נבנה בצורה מקוטעת יש צורך בפריימר‬
‫לאורך כל השכפול‪ .‬ישנה הוספה של פריימר‪ <-‬בנייה של‬
‫דנ"א‪ <-‬הוספה של פריימר‪ <-‬בנייה של דנ"א עד אשר הוא‬
‫מגיע לפריימר שלפניו‪ ,‬וכך הלאה‪.‬‬

‫ע"מ ליצור גדיל דנ"א רציף מהמקטעים ‪ Okazaki fragments‬יש צורך ב ‪ 3‬אנזימים‬
‫נוספים‪ .‬הם מסירים את הרנ"א פריימר‪ ,‬מחליפים אותו בדנ"א ומחברים בין מקטעי‬
‫הדנ"א‪.‬‬
‫‪ -Nuclease.1‬מפרק את הרנ"א פריימר‬
‫‪ -Repair polymerase.2‬סוג של דנ"א פולימרז‪ ,‬מחליף את הרנ"א בדנ"א תוך‬
‫שימוש במקטע אוקזאקי סמוכים בתור פריימר‬
‫‪ -DNA ligase.3‬מחבר את קצה ‪ 5‬פוספסט של מקטע דנ"א חדש אחד עם קצה ‪3‬‬
‫הידרוקסיל של הבא‪ .‬בתהליך של הליגאז יש צורך באנרגיה המגיעה מ ‪NADH‬או‬
‫‪ATP‬‬
‫‪.4‬‬
 ‫‪:The replication machine‬‬

‫‪-Helicase‬חלבון המשתמש באנרגיית הידרוליזה של ‪ ATP‬ע"מ לעשות ‪unzipping‬‬

‫לשני גדילי הדנ"א ע"מ לאפשר שכפול של הדנ"א וחשיפת התבנית‪.‬‬

‫‪ -Single-strand-binding-protein‬נאחז על הגדיל הבודד של הדנ"א אשר נחשף‬

‫ע"י ההליקאז ומונע ממנו מליצור קשרי בסיס מחודשים עם הגדיל השני‪.‬‬

‫‪ -Sliding clamp‬מחזיק את הדנ"א פולימרז מחובר חזק לתבנית הדנ"א‪ .‬על ה‬

‫‪ ,lagging strand‬הסליידניג קלמפ משחרר את הדנ"א פולימרז כל פעם שמקטע‬
‫אוקזאקי הושלם‪ .‬חלבון זה יוצר טבעת סביב הדנ"א הליקס ומתחבר לפולימרז וכך‬
‫מאפשר לו להחליק על התבנית תוך כדי שהוא מסנטז את הגדיל החדש‪.‬‬

‫רוב החלבונים המשתתפים בהליך השכפול מוחזקים ביחד ויוצרים קומפלקס מולטי אנזימי‬
‫אשר זז כיחידה אחת על הדנ"א‪ ,‬אשר מונע מהדנ"א להיות מסונטז על שני הגדילים‬
‫בצורה קורדנטיבית‪.‬‬

‫בקצוות הדנ"א יש רצף של נוקליאוטידים ‪ .telmoere‬רצפים אלו מושכים אנזים הנקרא‬

‫‪ telomerase‬לכרומוזום‪ .‬הטלומראז מוסיף עותקים רבים של אותו טלומאר של דנ"א‬
‫לקצוות הכרומוזום‪ ,‬וכך יוצר תבנית המאפשרת השלמת ה ‪ .lagging strand‬לטלומר יש‬
‫תפקיד נוסף‪ :‬בצירוף החזרות של הטלומרים יחד עם הרצף של הדנ"א התא מזהה כך‬
‫שמדובר בקצוות של כרומוזומים ולא בקטע שבור של כרומוזום שצריך לתקן )כמו‬
‫שלעיתים קורה(‪.‬‬

‫‪ Mutation‬נזק קבוע לדנ"א‪.‬‬

‫‪ DNA Mismatch Repair‬מערכת גיבוי לתיקון טעויות בשכפול הדנ"א‪ .‬מערכת זו‬
‫מתקנת ‪ 90%‬מהטעויות שמתרחשות בעת השכפול )בעת השכפול בממוצע יש טעות אחת‬
‫ל ‪ 107‬נוקליאוטידים( כך שלאחר התיקון בממוצע תהיה טעות אחת ל ‪ 109‬נוקליאוטידים‪.‬‬
‫כל פעם שיש טעות בשכפול נותר נוקליאוטיד שאינו מצומד‪ ,‬הקומפלקס של מערכת‬
‫התיקון מזהה את הנוקליאוטיד הנ"ל‪ ,‬מסיר את הגדיל החדש המעורב באי התאמה זו‬
‫ומסנטז מחדש‪.‬‬

‫הדנ"א עובר באופן תמידי התנגשויות תרמיות עם מולקולות אחרות‪ ,‬אלו לעיתים גוררים‬
‫שינויים כימיים במבנה הדנ"א‪ Depurination .‬נגרם כתוצאה מהתנגשויות אלה‪ ,‬יוצר‬
‫פגיעה בגדיל הדנ"א‪.‬‬
‫‪ Deamination‬אובדן ספונטני של קבוצת אמינו מ ‪ Cytocine‬וכך נוצר ‪ -Uracil‬בסיס‬
‫אחר‪.‬‬
‫חומרים אקטיביים מטבולים גם מגיבים עם הדנ"א ומשנים את הבסיסים כך שהתכונות‬
‫הכימיות של הקישור שלהם משתנות‪.‬‬

‫שלבים בתיקון הדנ"א‪:‬‬

‫‪.1‬הדנ"א הפגום מזוהה ומוסר ע"י נוקלאזות שונות אשר משחררים את הקשרים‬
‫הקוולנטים המקשרים בין הנוקליאוטידים הפגומים לבין הגדיל הנכון‪ .‬כך נשאר‬
‫מרווח ריק על גדיל אחד‪.‬‬
‫‪ Repair DNA polymerase.2‬נקשר לקצה ‪ 3‬של ההידרוקסיד של הגדיל‬
‫החתוך ומשלים את הרווח ע"י התבנית מהגדיל הנכון‪.‬‬
‫‪.3‬לאחר ההשלמה של הדנ"א דנ"א ליגאז מגיע ע"מ לחבר בין המקטע החדש‬
‫לשאר הגדיל )אותו אנזים שמחבר בין הלגינג בשכפול(‪.‬‬