A Sejtbiológia Alapjai

A sejtbiolgia alapjai
Plfia Zsolt
Dr. Kristf Zoltn
XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/
rta Plfia Zsolt s Dr. Kristf Zoltn
szerkesztette:
Plfia Zsolt
Szerzi jog 2013 ELTE TTK Biolgiai Intzet
Minden jog fenntartva.
Tartalom
1. Bevezets .................................................................................................................................. 1
2. A sejtek molekuli ...................................................................................................................... 2
Funkcis csoportok ................................................................................................................ 2
A sznhidrtok ...................................................................................................................... 4
Monoszacharidok ........................................................................................................... 4
Monoszacharid szrmazkok ............................................................................................ 6
Oligoszacharidok ........................................................................................................... 7
Poliszacharidok ............................................................................................................. 8
Glikokonjugtumok ........................................................................................................ 9
Lipidek ............................................................................................................................... 10
Az sszetett, hidrolizlhat lipidek ................................................................................... 10
Egyszer, nem hidrolizlhat lipidek ................................................................................ 14
A fehrjk ........................................................................................................................... 16
A nukleinsavak .................................................................................................................... 20
Nhny szervetlen vegylet szerkezeti s sszegkplete ............................................................... 22
3. Az eukarita sejtek felptse ...................................................................................................... 25
4. A sejtmembrn szerkezete s mkdse ......................................................................................... 28
Membrnszerkezet ................................................................................................................ 28
A membrn fluiditsa s szervezdse ...................................................................................... 30
Transzportfolyamatok ........................................................................................................... 31
5. Sejtmag ................................................................................................................................... 34
A magvacska ....................................................................................................................... 36
A lamina ............................................................................................................................. 38
A magprus komplex ............................................................................................................ 38
Transzport a sejtmag s citoplazma kztt ................................................................................. 39
6. Gnkifejezds; A riboszmk szerkezete s mkdse .................................................................... 42
Transzkripci Az trs ....................................................................................................... 42
Az RNS feldolgozsa ............................................................................................................ 43
A transzlci, a riboszmk szerkezete, mkdse ...................................................................... 44
7. Az endoplazmatikus retikulum ..................................................................................................... 46
Durvafelszn endoplazmatikus retikulum (DER) ....................................................................... 46
Simafelszn endoplazmatikus retikulum (SER) ......................................................................... 48
8. A Golgi-kszlk ...................................................................................................................... 51
A Golgi-kszlk felptse .................................................................................................... 51
A Golgi-kszlk mkdse ................................................................................................... 52
A vezikulris transzport ......................................................................................................... 54
9. A szekrcis appartus ............................................................................................................... 56
10. Az endoszomlislizoszomlis kompartimentum ........................................................................... 59
Az endocitzis ..................................................................................................................... 59
A lizoszomlis kompartimentum ............................................................................................. 60
Extralizoszomlis proteindegradci ........................................................................................ 62
11. A nvnyi sejtek vakuolris rendszere ......................................................................................... 64
A vakulum feladatai ............................................................................................................ 64
Turgor ........................................................................................................................ 64
Trfogatnvels ........................................................................................................... 64
Homeosztzis .............................................................................................................. 64
Vdelem a patognek s nvnyevk ellen ........................................................................ 65
Toxikus anyagok felhalmozsa, elklntse ...................................................................... 65
Sznanyagok felhalmozsa ............................................................................................. 65
Raktroz feladat ......................................................................................................... 65
Ltikus feladat .............................................................................................................. 65
A ltikus s a fehrjeraktroz vakulum ................................................................................... 66
Lipidraktrozs .................................................................................................................... 68
12. A mikrotestek ......................................................................................................................... 70
A peroxiszmk ................................................................................................................... 70
iii
Glioxiszma ........................................................................................................................ 71
Levl peroxiszma ............................................................................................................... 71
Glikoszma ......................................................................................................................... 71
Hidrogenoszma .................................................................................................................. 72
13. A mitokondriumok .................................................................................................................. 73
A mitokondrium felptse ..................................................................................................... 73
A mitokondrium mkdse .................................................................................................... 74
A mitokondriumok osztdsa .................................................................................................. 75
Eredete ............................................................................................................................... 76
14. A plasztiszok s a fotoszintzis .................................................................................................. 77
Kloroplasztisz ...................................................................................................................... 77
A plasztiszok egyb tpusai .................................................................................................... 78
Proplasztisz ................................................................................................................. 79
Kromoplasztisz ............................................................................................................ 79
Leukoplasztisz ............................................................................................................. 80
Amiloplasztisz ............................................................................................................. 80
Etioplasztisz ................................................................................................................ 80
Gerontoplasztisz ........................................................................................................... 80
A plasztiszok (s mitokondriumok) eredete, endoszimbita elmlet ................................................ 81
Mai endoszimbionta pldk .................................................................................................... 83
Plasztiszmag gntranszfer ..................................................................................................... 83
Fehrje transzport a plasztiszba (targeting) ................................................................................ 84
Fotoszintzis ....................................................................................................................... 85
A fotoszintzis fnyszakasza .......................................................................................... 86
Ciklikus fotofoszforilci ............................................................................................... 90
Calvin-ciklus ............................................................................................................... 90
C4-es sznasszmilcis t ............................................................................................... 90
Fotorespircis komplex ................................................................................................ 92
15. A sejtvz ............................................................................................................................... 94
A mikrotubulris vz ............................................................................................................. 94
A mikrotubulusok ......................................................................................................... 94
A sejtkzpont .............................................................................................................. 96
A csillk s ostorok ...................................................................................................... 96
Az aktinvz ......................................................................................................................... 97
Motorfehrjk ...................................................................................................................... 98
Az intermedier filamentumok ................................................................................................. 98
16. Sejt-sejt, sejt-ECM kapcsolatok, jeltvitel ................................................................................... 100
A sejtkapcsol molekulk s szerkezetek f tpusai ................................................................... 100
Occludin s Claudin .................................................................................................... 100
Cadherinek ................................................................................................................ 101
Az integrinek ............................................................................................................. 102
Immunglobulinszer adhzis molekulk ........................................................................ 102
Szelektinek ................................................................................................................ 103
Jeltvitel receptorokkal ........................................................................................................ 103
Jeltvitel: sejtek kztti kommunikci rskapcsolatokon keresztl .............................................. 106
17. A nvnyi sejtfal ................................................................................................................... 108
A sejtfal kpzdse ............................................................................................................. 108
A sejtfalat felpt anyagok .................................................................................................. 109
Cellulz .................................................................................................................... 109
Kallz ...................................................................................................................... 111
Keresztkt gliknok vagy hemicellulzok ...................................................................... 111
Pektin ....................................................................................................................... 113
Fehrjk .................................................................................................................... 114
Inkrusztl s adkrusztl anyagok ................................................................................ 115
A sejtfal szerkezete ............................................................................................................. 116
A sejtfal megnylsa ................................................................................................... 116
A pollenfal szerkezete, kialakulsa ................................................................................. 116
Apoplasztikus s szimplasztikus szllts ................................................................................. 117
iv
Az endodermisz szerepe a sejt apoplasztikus-szimplasztikus szlltsnak tvltsban ............ 118

Plazmodezmk ........................................................................................................... 118
Sejtfal-sejtmembrn kapcsolat ............................................................................................... 120
A sejtfal szerepe a sejt vdelmben ........................................................................................ 120
18. A sejtciklus s a sejtosztds .................................................................................................... 122
A sejtciklus ....................................................................................................................... 122
Nemzedkvltakozs, nvnyi s llati letciklus ...................................................................... 126
A sejtosztds .................................................................................................................... 126
Mitzis ..................................................................................................................... 126
Meizis ..................................................................................................................... 129
19. A sejtpusztuls ...................................................................................................................... 132
A nekrzis ......................................................................................................................... 132
A programozott sejthall ...................................................................................................... 132
20. A sejtek vizsglatnak mdszertani alapjai ................................................................................. 136
Fnymikroszkpia .............................................................................................................. 136
Fziskontraszt mikroszkpia ......................................................................................... 137
Fluoreszcens mikroszkpia ........................................................................................... 137
Fnymikroszkpos mikrotechnika .................................................................................. 138
Elektronmikroszkpia .......................................................................................................... 140
Elektronmikroszkpos mikrotechnika ............................................................................. 143
Kriotechnika .............................................................................................................. 146
Az elektronmikroszkpos kp rtelmezse Mtermkek .................................................. 146
Fagyasztva trs, fagyasztva marats, replikakszts ................................................................ 148
A citokmiai mdszerek alapjai ............................................................................................. 150
Enzimcitokmia ......................................................................................................... 151
Immuncitokmia ......................................................................................................... 153
Autoradiogrfia .................................................................................................................. 155
A sejtalkotk centrifuglis leptssel trtn elklntse Sejtfrakcionls ................................. 157
Homogenizls ........................................................................................................... 157
Centrifugls ............................................................................................................. 159
A. Animcik ............................................................................................................................ 165
1. fejezet - Bevezets
Az ismert letformk sejtes szervezdsek. Az evolci sorn kt alapvet sejtszervezdsi tpus alakult ki: a
prokarita s az eukarita sejt. E kt sejttpus felptse s mkdse sok tekintetben klnbzik, de a legalapvetbb
anyagcserefolyamatok nagyfok, a kzs eredetre utal hasonlsgot mutat. Az eukarita sejtekbl alakultak ki
a soksejt szervezetek melyeknek szervezdsi s mkdsi alapegysge a sejt. Egyedfejldsk sorn szmos
klnbz sejttpus jn ltre, melyek egymssal egyttmkdve s egymsra hatva hozzk ltre a szervezetket
felpt szveteket, szerveket.
A sejtek felptsnek s mkdsnek megrtse, a megszerzett ismeretek alkalmazsa a biolgia szmos terletn
alapvet fontossg. A pro- s eukarita egysejt vagy soksejt szervezetek (illetve a bellk szrmaz sejtek)
vizsglatval tbb tudomnyterlet is foglalkozik. Ezek egyike a sejtbiolgia (citolgia) a biolgiai tudomnyok
szertegaz terlete, amely a sejtek szerkezetvel, mkdsnek jelensgeivel s szablyozsval, fiziolgiai
tulajdonsgaival, a sejtek felptsben rszt vev sejtszervecskkkel, a sejt s krnyezete klcsnhatsaival, a
sejtek interakciival s kommunikcijval, a sejtciklussal, sejtek osztdsval, differencildsval, a
sejtpusztulssal stb. foglalkozik. Kutatsi mdszereinek tbbsge molekulris biolgiai s genetikai vizsglat. A
sejtbiolgia szmos ponton kapcsoldik a genetikai, a biokmiai, a molekulris biolgiai, az immunolgiai, a
fejldstani tudomnyterletekhez.
A biolgia alapkpzsben ezrt fontos alapoz trgy a sejtek legfontosabb tulajdonsgait s mkdst trgyal
sejtbiolgiai kurzus. Ismeretanyagt tbb felsbbves kurzus is felhasznlja. E knyv jellemzen a soksejt eukarita
sejtek felptsvel, szerkezeti elemeivel s azok mkdsi alapjaival foglalkozik. A fejezetek tbbsge az egyes
sejtorganellumokat trgyalja.
A sejtalkotkkal s a sejt alapvet mkdsvel foglalkoz anyagrszeket mintegy keretbe foglalja a sejtek
makromolekulival, illetve a legalapvetbb sejtbiolgiai vizsglati mdszerekkel foglalkoz kt fejezet.
A biolgiai kutatsokban s ebbl fakadan az oktatsban is ma mr megkerlhetetlen a molekulris szemllet
alkalmazsa, klnsen igaz ez a sejtbiolgia klnbz terleteire. Ezrt mg a sejtbiolgia alapszint
tanulmnyozshoz/tanulshoz, az ismeretek eredmnyes feldolgozshoz nlklzhetetlenek a szervetlen s
szerveskmiai alapismeretek. A sejtek makromolekulival foglalkoz fejezet a teljessg ignye nlkl ad leltrszer
ttekintst a knyv anyagban elfordul makromolekulk s monomerjeik, alkotelemeik szerkezetrl. Nem
helyettesti a biolguskpzsben szksges s elvrhat kmiai mveltsget, de segt felidzni azt.
A mdszertani blokk azokat a legfontosabb (klasszikus) vizsglati eljrsokat ismerteti rviden, amelyek valamely
sejtorganellum vagy jelensg lersnl emltsre kerlnek s hozzjrulnak az j ismeretek megrtshez. Fontosnak
tartjuk, hogy a sejtek, sejtszervecskk szerkezetnek tanulmnyozsban nlklzhetetlen s a sejtalkotk elfordul
elektronmikroszkpos felvtelek, fnykpek rtelmezshez, a fotkon.
2. fejezet - A sejtek molekuli

A sejteket felpt molekulkat szervetlen s szerves vegyletekre oszthatjuk. Kzttk a hatrvonal nem les, a
velk kapcsolatos termszettudomnyos ismeretek gyarapodsa mellett defincijuk tbbszr is vltozott.
Szerves vegyleteknek alapveten a szntartalm molekulkat tekintjk, melyek a sznen kvl legnagyobb
mennyisgben hidrogn-, nitrogn- s oxignatomokat tartalmazhatnak.
Ebben a fejezetben a teljessg ignye nlkl tekintjk t a sejtek felptsben s mkdsben alapvet s ezrt
a tananyag elsajttshoz megismerend legfontosabb szerves vegyletcsoportokat s azok jellegzetes molekulit.
A felsorolt vegyletek rszletes ismertetsvel a kmiai s biokmiai kurzusok foglalkoznak.
Funkcis csoportok
A szerves vegyletek jellemz kmiai reakciit meghatroz, egymshoz s a molekula egyb rszhez kovalensen
kapcsold atomok egyttest funkcis csoportnak nevezzk. Egy molekula kt vagy akr tbbfle funkcis
csoportot is tartalmazhat. Az egyes funkcis csoportok kmiai viselkedst a csoportot tartalmaz molekula mrete
nem vagy csak kismrtkben, de a molekulban lv tovbbi funkcis csoportok akr jelentsen is befolysolhatjk.
A funkcis csoportokat atomi sszettelk, kmiai tulajdonsgaik, a csoportot tartalmaz molekula sznlncnak
sajtossgai, valamint az azonos funkcis csoportok szma alapjn is lehet csoportostani. A funkcis csoport
sznatomjhoz csatlakoz els sznatomot alfa, a msodikat bta, a harmadikat gamma sznatomnak stb. nevezzk.
a lnc utols sznatomja kapja az omega jelzst.
A leggyakrabban elfordul funkcis csoportok kztt szmos oxigntartalm tallhat.
Az egy vagy tbb hidroxilcsoportot tartalmaz szerves vegyletek az alkoholok s a fenolok. Az alkoholokban a
hidroxilcsoportok nylt vagy nem aroms gyrt kpez teltett sznhidrognlnchoz csatlakoznak. Ha a
hidroxilcsoport kzvetlenl aroms gyrre kapcsoldik (R = aroms gyr) fenolokrl beszlnk.
A hidroxilcsoportot tartalmaz szerves vegyletek ltalnostott kplete. Az R lehet nylt vagy nem aroms
gyrt kpez teltett sznhidrognlnc (alkoholok), vagy aroms gyr (fenolok).
Az alkoholok szrmazkai a kt alkohol kondenzcis (vzkilpses) reakcijban ltrejv terek. (A kznyelvben
hasznlatos ter sz a dietil-tert jelli.)
Az terkts ltalnostott szerkezeti kplete. R1 s R2 lehet azonos vagy klnbz szhidrogncsoport.

A szerves molekulkban egy sznatom s a hozz ketts ktssel kapocsld oxignatom kpezi a
karbonilcsoportot. A karbonilvegyletek kz sorolhatak (a teljessg ignye nlkl) az aldehidek, a ketonok, a
karbonsavak, az szterek, savanhidridek is. A karbonilcsoportot lnckzi pozciban tartalmazzk a ketonok, a
sznlnc vgn pedig az aldehidek. A karbonilcsoporthoz kapcsold sznlnc egyarnt tartalmazhat alifs s/vagy
aroms elemeket. A legegyszerbb, egy sznatomos, karbonilcsoportot tartalmaz vegylet a formaldehid (H2C=O).
Aldehid (bal oldalt) s keton (jobbra) funkcis csoport ltalnostott szerkezeti kplete.
Ugyanazon (lncvgi) sznatomra kapcsold karbonilcsoportbl s hidroxilcsoportbl ll a karboxilcsoport,
amely sszetett funkcis csoport. A karboxilcsoportot tartalmaz vegyletek vizes kzegben proton leadsra
kpesek, vagyis savas jellegek. Az egy karboxilcsoportot tartalmaz nylt lnc, teltett karbonsavak
A sejtek molekuli
(monokarbonsav) homolg sort alkotnak. Egy sznatomot tartalmaz a hangyasav, az ecetsav kt, a propionsav
hrom, a vajsav 4 sznatomos. A teltett monokarbonsavak homolg sornak nagyobb sznatomszm tagjait
zsrsavaknak nevezzk.
Karboxilcsoport (pirossal jellve) a karbonsavak ltalnostott szerkezeti kpletben.
Kt sznatomos karbonsav az ecetsav szerkezeti kplete.
Kt sznatomos karbonsav, az ecetsav ionja az acett-ion (balra) s a szintn ersen reakcikpes formja az acetilgyk (jobbra).
Alkoholok (vagy fenolok) s savak kondenzcis reakcijbl keletkeznek az szterek. A sav reakcipartner lehet
karbonsav vagy svnyi sav, ez alapjn a reakcitermk karbonsavszter vagy szervetlen sav (pl. foszforsav,
knsav, saltromsav) sztere. Az szterek ltalban hajlamosak hidrolzisre.
Az szterkts (pirossal jellve) ltalnostott szerkezeti kplete.

A karbonsavszrmazkok msik nagy csoportjt alkotjk a kt szerves sav kondenzcis reakcijbl keletkez
savanhidridek.
A savanhidridek ltalnostott szerkezeti kplete. R1 s R2 jellhet azonos vagy klnbz sznlncokat.

A szerves peroxidokban peroxid funkcis csoport tallhat. Ha a peroxidcsoport egyik oldaln hidrogn helyezkedik
el, akkor szerves hidroperoxidrl (ez nem azonos a hidrognperoxiddal!) beszlnk. Igen ersen reakcikpes
funkcis csoport, mivel az OO kts knnyen felszakad, s szabad gykk keletkeznek.
A peroxidcsoport (pirossal jellve) ltalnostott szerkezeti kplete. R1 s R2 lehet azonos, vagy R2 lehet hidrogn
(hidroperoxid!).
A funkcis csoportok kztt igen fontos a kn- s a nitrogn- tartalmak szerepe is. Ilyenek pldul az
aminocsoportok, a tiolok, a szulfidok s diszulfidok stb.
A sejtek molekuli
A bzikus tulajdonsg aminok nitrognt tartalmaznak a funkcis csoportjukban. A sznlnc komponens tartalmazhat
aroms s nylt sznlnc elemeket is. A nitrognhez karbonil funkcis csoporttal (C=O) kapcsold sznlnc
vegyletek az amidok.
Az aminok (balra) s az amidok (jobbra) ltalnostott szerkezeti kplete.

A funkcis csoportjukban knatomot tartalmaz szerves molekulk a knorganikus vegyletek. A kntartalm
funkcis csoportok igen vltozatosak. Itt az alkoholok, az terek s a peroxidok analgjait, azaz a tiolokat, a
szulfidokat s a diszulfidokat sorakoztajuk fel.
Balrl jobbra haladva a tiol, a szulfid s a diszulfid funkcis csoportok (pirossal jellve).
Nhny plda a funkciscsoportokra:
A glicerin, a glicerinaldehid s a glicerinsav szerkezeti kplete.
A piroszlsav (ionja a piruvt) s a tejsav (ionja a laktt) szerkezeti kplete.
Acetil-koenzim-A (az S a koenzim-A lncvgi SH csoportjt jelli, amelyhez tioszter ktst kialaktva kapcsoldik
az acetil gyk).
A sznhidrtok
A sznhidrtok vagy szacharidok a termszetben legnagyobb mennyisgben elfordul szerves, karbonilcsoportot
tartalmaz polihidroxi-oxovegyletek, karbonilcsoportot s hidroxilcsoportokat tartalmaznak.
Monoszacharidok
A molekulaszerkezet sszetettsge alapjn a sznhidrtok legegyszerbb kpviseli az egyszer cukrok vagy
monoszacharidok. A karbonilcsoport sznlncon belli helyzete szerint lehetnek polihidroxi-aldehidek (aldzok)
vagy polihidroxi-ketonok (ketzok). sszegkpletk CnH2nOn, ahol n leggyakrabban 3 (trizok), 4 (tetrzok), 5
(pentzok) vagy 6 (hexzok). A trizok (pl. D-glicerinaldehid, dihidroxi-aceton) fontos szerepet jtszanak a
sznhidrtok lebontsban s szintzisben.
A sejtek molekuli
A karbonilcsoporton kvl a sznhidrtok sznatomjai egy-egy hidroxilcsoportot hordoznak. A nylt lnc alak
tbb n. aszimmetriacentrumot tartalmazhat. A hidroxilcsoportok trllsnak kombincija klnbzteti meg
egymstl az azonos sznatomszm monoszacharidokat (pl. a hexzok kztt a glkz, galaktz, mannz stb.).
Az egymssal tkrszimmetrikus molekulk egy adott cukor D s L optikai izomerjei (pl. D- s L-glkz). A
termszetben elfordul monoszacharidok tbbsge D-vltozat.
A monoszacharidok vizes oldatban gyr alakot vesznek fel, intramolekulris n. ciklo-flacetl kts jn ltre a
karbonilcsoport s egy hidroxilcsoport kztt. A hattag gyrt piranznak, az ttagt furanznak nevezik (ezek
a gyrs formk a legstabilabbak). A gyr zrdsakor az eredetileg a karbonilcsoportot hordoz sznatomon
kialakul n. glikozidos hidroxilcsoport trllsa ktfle lehet, ezrt - s - sztereoizomerek jnnek ltre.
A leggyakoribb hexoaldz, a glkz nemcsak monoszacharidknt, de diszacharidokban s poliszacharidokban is
elterjedt, szrmazkai szmos vegylet kialaktsban rszt vesznek. Kzponti szerepet jtszik a sejtek
energiaforgalmban, szerkezeti funkcij molekulk kialaktsban.
A D-glkz (szlcukor) nylt lnc, valamint - s - (gyrs) alakja.
A D-glkz - s - (gyrs) alakja.
A D-galaktz s D-mannz (szintn hexoaldzok) -piranzgyrs szerkezeti kplete.
Egy hexoketz, a D-fruktz (gymlcscukor) furanzgyrs alakja.
A sejtek molekuli
t sznatomos furanzgyrs cukrok a D-ribz (balra) s a 2-dezoxi-D-ribz (jobbra). Elbbi a ribonukleotidok

s a ribonukleinsavak, utbbi a DNS (dezoxiribonukleinsav) alkoteleme. A furanzgyrk glikozidos
hidroxilcsoportja a szerves bzisok nitrognatomjhoz kapcsoldik (N-glikozid).
Monoszacharid szrmazkok
A monoszacharidok szrmazkai kzl kiemelkedek a foszft-szterek, melyek egyarnt fontos szerepet tltenek
be a sznhidrtok felptsben s lebontsban, a fotoszintzis sorn a CO2 megktsben: a sznhidrt anyagcsere
intermedier termkei.
A cukrok szulft-szterei poliszacharidok (pl. kondroitin) felptsben vesznek rszt.
Az aminocukrok esetben a gyr alak molekula egyik alkoholos (nem glikozidos) hidroxilcsoportja van
aminocsoportra cserlve. A D-glkzamin proteogliknok alkoteleme, az N-acetil-D-glkzamin a kitin monomerje,
-1,4 ktsekkel alkot hossz lncokat.
Hexzamin a D-glkzamin (balra) s szrmazka, az N-acetil-D-glkzamin szerkezeti kplete.

Ha egy monoszacharid glikozidos hidroxilcsoportja kondenzcis reakci sorn kapcsoldik egy msik
hidroxilcsoportot tartalmaz molekula OH csoportjval, n. O-glikozid keletkezik. Ha a glikozidos hidroxilcsoport
a reakcipartner amino- vagy iminocsoportjval alkot vzkilpssel hoz ltre CN ktst (nukleozid), N-glikozid
jn ltre.
Redukcis s oxidcis reakciiban tovbbi szrmazkok keletkezhetnek.
Megfelel krlmnyek kztt a nyltlnc, azaz karbonilcsoportot tartalmaz aldzok s ketzok redukcijuk
sorn alkoholokk alakulnak. A kialakul cukoralkoholok szintn nyltlncak (pl. a glicerin).
A glicerin egy hromrtk alkohol, szmos anyagcserefolyamat kztes termke.

A monoszacharidok klnbz mrtk oxidcijval alakulnak ki (tbbek kzt) a uronsavak. A reakci sorn a
lncvgi hidroxilcsoport oxidldik, a molekula gyrs szerkezete megmarad. Az uronsavak pldul poliszacharidok
(pektin) monomerjei lehetnek.
A sejtek molekuli
Oligoszacharidok
A sznhidrtok glikozidos hidroxilcsoportja kondenzcis reakciban, kovalens (ter-) ktssel kapcsoldhat egy
msik sznhidrt molekula glikozidos vagy alkoholos (nem glikozidos) hidroxilcsoportjhoz. A kialakul kts
glikozidkts, a ltrejv j molekulk glikozid tpus vegyletek. Kt monoszacharid kapcsoldsval jnnek
ltre a diszacharidok, hromval a triszacharidok stb. Nem nagyszm (nhnyszor tz) egysg kapcsoldsval
kialakul vegyleteket soroljuk az oligoszacharidok kz.
A diszacharidok kialaktsban rsztvev monomerek lehetnek egyformk vagy klnbzek. A diszacharidokat
alkot kt molekula kztti kts tbbflekppen is megvalsulhat (a ktsben rszt vev sznatomok szmozsval
jelljk). Vzben jl olddnak, szmos anyagcserefolyamatban szerepet jtszanak.
A szacharz vagy rpacukor egy -D-glkopiranz s egy -D-fruktofuranz molekulbl pl fel, 12 glikozidos
ktssel.
A maltz egy -D-glkopiranz s egy -D-glkopiranz molekulbl ll, -glikozidos 14 ktsben. A kemnyt
hidrolzistermke.
A cellobiz kt -D-glkzbl -14 ktssel pl fel. Szerkezete a glikozidos hidroxilcsoportok trllsban tr

el a maltztl. A cellulz rszleges hidrolzisvel llthat el.
A laktz 1-4 ktssel egymshoz kapcsold -D-glkzbl s -D-galaktzbl pl fel. Emlsk anyatejben
fordul el, felszvdsakor hidrolizl, alkotelemeit a mj veszi fel s glkzz alaktja.
A sejtek molekuli
Az oligoszacharidok szerepe igen vltozatos. Rszt vesznek a sejtek felleti molekulris mintzatnak
kialaktsban, a sejt felismersi s szablyozsi folyamatokban. Kpviselit megtalljuk a sejtkztti trben is.
Az oligoszacharidok kztt szmos molekula sszetett fehrjk (pl. glikoproteinek) s lipidek (glikolipidek)
komponensei. Rendkvli vltozatossgot mutatnak, melynek alapja a klnbz monoszacharidok nagy szma,
a monomer egysgek szmnak s kapcsoldsi lehetsgeinek bsge.
Poliszacharidok
A poliszacharidok (gliknok) monoszacharidokbl s/vagy monoszacharid szrmazkokbl vzkilpses reakciban
(kondenzci) keletkez glikozidos ktseket tartalmaznak. Makromolekulk, molekulatmegk nagy, akr tbb
szz vagy ezer monoszacharidbl plnek fel. Jellemzik a polimerizcis fok (felptskben rszt vev monomer
egysgek szma), a kmiai sszettel, a polimerben kialakul ktstpusok (pl. hidrognhd) minsge.
Osztlyozsukra lehetsget ad sszettelk (azonos vagy klnbz monomerek alkotjk) s architektrjuk (a
polimerlnc szerkezetnek) vizsglata.
Homogliknok
Az azonos monomerekbl felpl poliszacharidok a homogliknok.
A cellulz a nvnyi sejtfal f alkoteleme. Lineris molekula, nhny szztl tbb ezer D-glkz -1,4 glikozidos
ktssel trtn sszekapcsoldsval szintetizldik. Ha az egyes cellulz szlak rendezetten egyms mellett
helyezkednek el, kzttk hidrognhd ktsrendszer alakulhat ki. Bomlstermke a cellobiz.
A kemnyt a nvnyi sejtek tartalk tpanyaga, poliszacharid keverk, kb. 1 rsz amilzbl s 4 rsz
amilopektinbl ll. Az amilz tlag 3001000 D-glkz monomerbl felpl -1,4 glikozidos ktssel el nem
gaz, heliklis lefuts lncc kapcsold poliszacharid. Az amilopektin tbb ezer D-glkzbl felpl -1,4
lncot alkot, amelyen azonban 24-36 monomerenknt -1,6 kts elgazsok vannak.
Balra az amilz el nem gaz, heliklis lnca, jobbra az amilopektin lthat.

A glkogn az llatok s a gombk tartalk tpanyaga. Az amilopektinhez hasonl elgaz lncbl ll, de molekulja
tbb elgazst tartalmaz: az -1,6 kts elgazsok kztt tlag 812 D-glkz monomer tallhat.
A glikogn elgaz lncnak rszlete.

A kitin egyenes lnc, N-acetil-D-glkzaminbl -1,4 ktsekkel szervezd polimer. A rovarok s gombk
vzanyaga.
A pektinek -1,4 ktsrendszer, D-galakturonsavakbl ll, egyenes lnc polimerek.
A sejtek molekuli
Heterogliknok
Az eltr monomerekbl felpl poliszacharidok a heterogliknok. Jellegzetes kpviselik a glkzaminogliknok
(GAG), melyek ismtld diszacharid egysgekbl plnek fel, s hossz, el nem gaz poliszacharid lncokat
kpeznek. A diszacharid egysgek kt klnbz monoszacharidbl llnak, melyek gyakran mdosult aminocukrok.
Pldul a hialuront D-glkuronsav s N-acetil-D-glkzamin diszacharid egysgekbl ltrejv egyenes lnc.
A diszacharidban a D-glkuronsavhoz -1,3 ktssel kapcsoldik az N-acetil-D-glkzamin, a diszaxharid egysgek
-1,4 ktssel kapcsoldnak. A hialuronsav az llati szervezetek sejtkztti llomnynak fontos sszetevje, igen
hossz, akr tbb tzezer diszacharid egysgbl ll, a glkuronsav karboxilcsoportja miatt savas jelleg molekula.
A GAG vegyletcsoportba tartozik az llati szervezetekben a hialuront mellett a heparin, heparn-szulft, kondroitinszulft, keratn-szulft, dermatn-szulft. Megtallhatk az zleti folyadkban, porc-, n- s csontszvetben, a
szaru anyagban, a bazlis membrnokban stb. Tbbsgkben szulftcsoport szteresti az egyik vagy mindkt
monoszacharid valamely funkcis csoportjt. A nvnyekben elfordul GAG pl. a xiloglkn vagy a
glkuronoarabinoxiln.
Glikokonjugtumok
Az oligoszacharidokhoz, lipidekhez, peptidekhez s proteinekhez kovalensen ktssel kapcsold gliknok a
glikokonjugtumok. Szmos biolgiailag aktv makromolekula tartozik ebbe a csoportba. Rszt vesznek a sejt-sejt
kapcsolatokban, a sejtfelismersben, a sejt-sejtkztti mtrix klcsnhatsokban, a sejtek differencildsi
folyamataiban stb.
A peptidoglikn (ms nven murein) a bakterilis (a Bacteria csoportra jellemz) sejtfal anyaga. Az N-acetilglkzamin s az N-acetil-muraminsav monoszacharidok -1,4 glikozidos ktssel egyenes, el nem gaz lncokat
kpeznek. A lncok egymssal prhuzamosan futnak, kzttk az N-acetil-muraminsav egysgekhez kapcsold
rvid, 45 aminosavbl ll oligopeptid lncok teremtenek lehetsget az aminocukor lncok kztti keresztktsek
kialaktsra. Az oligopeptidek sszettele s kapcsoldsuk specilis, fajra jellemz. A cukorlncok lemezekbe
rendezdnek s tbbrteg kristlyrcsszer struktrba szervezdve alaktjk ki a 880 nm vastag bakterilis
sejtfalat.
A peptidoglikn egy rtegnek felptse (Escherichia coli). (NAG = N-acetil-glkzamin, NAM = N-acetilmuraminsav)
A proteogliknok ersen glikozillt membrn- vagy mtrixfehrjk, jelents szerepet jtszanak az llati sejtkztti
mtrix tulajdonsgainak kialaktsban. A molekula alapjt egyes plazmamembrn- vagy extracellulris fehrjk
adjk, amelyekhez kovalens ktssel kapcsoldik szmos glkzaminoglikn. Utbbi komponensek negatv tlts
funkcis csoportjai miatt a proteoglikn is negatv tlts lesz, ezrt jelents mennyisg kationt s vz molekult
kpes megktni. A proteogliknok tulajdonsgait alapveten a GAG komponensek mennyisge s sszettele
hatrozza meg.
A glikoproteinek olyan fehrjk, melyekhez glikozidos ktssel egy vagy tbb oligoszacharid oldallnc kapcsoldik
(glikozilci). N-kapcsolt az oligoszacharid, ha az aszparaginsav nitrogntartalm oldallncn az NH2 funkcis
csoportra ktdik (N-glikozilci). Az O-kapcsolt oligoszacharid ltalban a fehrje szerin vagy treonin aminosav
hidroxilcsoportjra ktdik (O-glikozilci). Fejlett oligoszacharid oldallncokkal rendelkeznek a sejtfelszni
A sejtek molekuli
glikoproteinek. Van kzttk enzim, struktraalkot, hormon, receptor, transzport stb. molekula. Szerepk
szertegaz.
A glikolipidekben az oligoszacharid komponensek lipidmolekulra (pl. ceramidokra) ktdnek fel kovalens
ktssel. Szerepet jtszanak tbbek kzt a sejt-sejt kapcsolatokban, receptor funkcikban.
Lipidek
Vzben s polros oldszerekben gyakorlatilag nem oldd (hidrofb) vegyletek, amelyek apolros oldszerekkel
oldhatk. Az egyes ide sorolt vegyletcsoportok kmiai szerkezete vltozatos s egymstl jellegzetes eltrseket
mutat. Egyetlen kzs tulajdonsguk az oldhatsguk.
A lipideket osztlyozhatjuk az l szervezetekben betlttt funkcijuk szerint vagy kmiai szerkezetk szerint.
Funkcijuk szerint tpanayag- s energiaraktroz, struktraalkot s specilis funkcij lipideket, kmiai
tulajdonsgaik alapjn a hidrolizlhat (sszetett) s a nem hidrolizlhat (egyszer) lipideket klnbztetjk meg.
Az egyszer lipidek kz sorolhatk pl. a terpnek, karotinoidok, szteroidok, egyes vitaminok, az sszetett lipidek
kpviseli a neutrlis zsrok, olajok, viaszok, a foszfo- s glikolipidek.
A lipidek osztlyozsa az l szervezetekben betlttt funkcijuk szerint.
Az sszetett, hidrolizlhat lipidek

A zsrsavak
Szmos sszetett lipid ptelemei, sok anagcserefolyamat kztes termkei. Sok lipidvegylet tartalmaz
zsrsav(ak)at, melyek felptse alapveten befolysolja a lipidmolekulk tulajdonsgait. A zsrsavak ltalban
hosszabb (430 sznatombl ll), teltett vagy teltetlen alifs sznlnc, lncvgi karboxilcsoportot tartlamaz
monokarbonsavak. A molekula vzt kevs kivteltl eltekintve el nem gaz, nylt sznlnc kpezi.
ltalnostott kpletk: CH3(CH2)nCOOH. A karboxilcsoportot kvet sznatom az , a lnc utols sznatomja
az jellst kapja.
A zsrsav ltalnostott szerkezeti kplete.

A termszetben megtallhat zsrsavak szintzisk sajtossgai miatt ltalban pros szm sznatombl llnak.
A teltett zsrsavak nem tartalmaznak ketts ktst, ezrt sznlncuk egyenes. Leggyakoribb kpviseljk a
palmitinsav s a sztearinsav.
A palmitinsav (C16) szerkezeti kplete.
10
A sejtek molekuli
A sztearinsav (C18) szerkezeti kplete.

A teltetlen zsrsavak egy vagy tbb szn-szn ketts ktst tartalmaznak. Elbbi esetben a ketts kts ltalban
a sznlnc 9. s 10. sznatomja kztt alakul ki, tbb ketts kts elfordulsakor azok hrom sznatomnyi
tvolsgra kvetik egymst (pl. linolsav). Jellegzetes kpviseli az olajsav, linolsav, linolnsav, arachidonsav. A
termszetben elfordul teltetlen zsrsavakban a ketts ktsek jellemzen cisz-konfigurcijak, a termszetben
elfordul transz-konfigurci ritka. A klnbz lelmiszerekben elfordul transz ketts ktst tartalmaz, n.
transz-zsrsavak tbbsge mestersges eredet, a tbbszrs teltetlen ktseket tartalmaz olajok rszleges teltse
sorn jnnek ltre. A ketts ktsek korltozzk a lnc sznatomok krli mozgst, a cisz-konfigurci a lnc
erteljes, mg a transz-konfigurcij kisebb mrtk megtrst eredmnyezi.
Cisz- (bal oldalon) s transz-konfigurcij ketts kts. A cisz-konfigurcij ketts ktsben a kt pillratom
hidrognatomja a sznlnc azonos, a transz-konfigurcijban a lnc ellenttes oldaln van.
Az olajsav szerkezeti kplete. A kk szmok a sznlnc sznatomjainak szmozst mutatjk. A zld jellsek a
(cisz-konfigurcij) teltetlen kts helyt jellik (ezek szerint az olajsav -9 zsrsav).
A linolsav szerkezeti kplete (a ketts ktsek cisz-konfigurcijak!).

Azokat a tbbszrsen teltetlen zsrsavakat, amelyek szintzisre az llati szervezetek nem kpesek s ezrt azokat
a tpllkkal kell felvennik, esszencilis zsrsavaknak nevezzk.. (Az emberi szervezet szmra pl. a linolsav s
a linolnsav esszencilis zsrsav.)
A zsrsavak tbbsge nem fordul el szabad formban az l szervezetekben, jellemzen alkoholos hidroxilcsoporttal
rendelkez vegylethez kapcsoldnak, azok hidroxilcsoportjt acilezve. Azaz a zsrsavak ltalban sszetett
(hidrolzissel rszekre bonthat) vegyletekben tallhatk.
Hossz lnc zsrsavak (C14-C36) s alkoholok (C16-C30) szterei a viaszok (nvnyi vagy llati s nem svnyi
viaszok!). Olvadspontjuk magasabb a neutrlis zsroknl (45C feletti), halmazllapotuk szilrd, hidrofb
vegyletek. Kmiai szerkezetk s biolgiai funkcijuk igen vltozatos.
11
A sejtek molekuli
A zsrsavak glicerinnel alkotott szterei az acil-gliceridek, melyek az szterest zsrsavak szmtl fggen
lehetnek mono-, di- s trigliceridek.
Neutrlis zsrok
A triglicerideket nevezzk neutrlis zsroknak, melyek tartalk tpanyagknt vagy energiaraktrknt funkcionlnak.
A zsrsavakban a sznatomok reduklt llapotban vannak, gy oxidcijukkor a sznhidrtok oxidcijhoz kpest
kb. ktszer nagyobb energia nyerhet.
Az llati szervezetben tallhat zsrok ltalban egyenes lnc teltett zsrsavakat, valamint 16 ketts ktst
tartalmaz teltetlen zsrsavakat tartalmaznak (leggyakrabban a palmitinsav, sztearinsav s olajsav). Az egyenes
lnc teltett zsrsavak szorosan illeszkedhetnek egymshoz. A teltetlen zsrsavak s a ketts ktsek szmarnynak
nvekedse cskkenti a rendezettsget, gy a zsr olvadspontjt. A szobahmrskleten folykony neutrlis zsrokat
olajoknak nevezzk. A nvnyekben a neutrlis zsrok (olajok) sszettele vltozatosabb, mivel a bennk tallhat
zsrsavlncok tartalmazhatnak hrmas szn-szn ktst, a karboxilcsporton kvl ms funkcionlis csoportokat, s
3 vagy 5 tag gyrket is.
A glicerin (glicerol) szerkezeti kpletnek ktfle brzolsi mdja.
A neutrlis zsr (triglicerid = triacil-glicerol) ltalnostott szerkezeti kplete.
Membrnalkot lipidek
A biolgiai membrnok fontos alkotelemei. Polros molekularszletet tartalmaz, ezrt amfipatikus (ketts
oldhatsgi tulajdonsgokat mutat) vegyletek. Kmiai szerkezetket alapjn tbbfle csoportostsuk is lehetsges,
attl fggen, hogy az sszetett molekulk mely komponenst emeljk ki. Ide sorolhatak a glicero-foszfolipidek,
a szfingolipidek, a glicero-glikolipidek, az ter-lipidek, a koleszterin, stb.
Glicero-foszfolipidek
A glicerin kt zsrsavval s egy foszforsavval kpzett trisztere a foszfatidsav. A foszforsav a glicerin harmadik
sznatomjn lv hidroxilcsoportot szteresti. A foszfatidokban a foszforsavhoz tovbbi molekulk
kapcsoldhatnak, szintn szterktssel. Elnevezsk a foszforsavhoz kapcsold molekula alapjn trtnik:
foszfatidil-kolin (lecitin), foszfatidil-etanolamin (kefalin), foszfatidil-szerin, foszfatidil-inozitol stb. A klnbz
foszfatidokban a glicerint szterest kt zsrsav (a sznlnc hosszban s a ketts ktsek szmban megnyilvnul)
kombincii nagy vltozatossgot biztostanak. A klnbz szervezetekben, st azok klnbz szveteiben a
foszfatidok kmiai sszettele eltr, s fajra, szvetekre jellemz.
A foszfatidsav szerkezeti kplete. A glicerin-vz pirossal jellve.
12
A sejtek molekuli
A foszfatidil-kolin szerkezeti kplete.
A foszfatidil-etanolamin szerkezeti kplete.
A foszfatidil-inozitol szerkezeti kplete.
ter-lipidek
A glicero-foszfolipidek sajtos csoportjt kpezik az n. ter lipidek, amelyekben a glicerinhez nem szter-, hanem
terktssel kapcsold hossz sznlnc (alkil vagy enol) komponensek tallhatk. A legtbb llnyben csak
nyomokban tallhatk meg, de egyes str szervezetekben rszarnyuk jelents. Egyes szvetekben, mint a
szvizomban s az idegrostok velhvelyben jelents mennyisgben van jelen, s bizonyos daganatos
elvltozsokban megemelkedett szintjk mutathat ki. Klnleges vltozatai megtallhatk az Archaea
sejthrtyjban.
Szfingolipidek
Hossz sznlnc szfingoid (aminoalkoholok; pl.: szfingozin) vzat s ahoz amid ktssel kapcsold, hossz
sznlnc zsrsavat tartalmaz vegyletcsoport a ceramidok. Vltozatossgukat a klnbz szfingoid s
zsrsavmolekulk kombincii adjk. A zsrsav hosszabb sznlnc, mint a glicerolipidekben (C26-ig, egyes
esetekben mg ennl is tbb) ltalban teltett vagy egyszeresen teltetlen.
A szfingozin szerkezeti kplete.
13
A sejtek molekuli
A ceramidok ltalnostott szerkezeti kplete. A zsrsav komponens pirossal jellt.

A szfingoid alkotrsz hidroxilcsoportjt tovbbi molekulk szteresthetik, pl. foszft-szterek, mint (a glicerofoszfolipidekhez hasonlan) a foszforil-kolin, foszforil-etanolamin, foszforil-inozitol. Ezek alkotjk a szfingofoszfolipideket. Jelentsebb koncentrciban a sejthrtya kls lemezben s membrnok mikrodomnjeiben,
szmos kpviseljk jeltviteli tvonalakban szerepelnek. Jellegzetes kpviseljk a szfingomielin, amely ceramidbl
s foszforilkolinbl ll, mely llati szervezetekbl ismert, egyes szvetekben a lipidek 1050%-t adja.
A szfingomielin szerkezeti kplete. A ceramid zsrsav komponense pirossal, a foszforil rsz zlddel jellt.
A ceramid molekulk a hozzjuk kapcsold mono- vagy oligoszacharidokkal alkotjk a glikosszfingo-glikolipideket
(a glikolipidek egyik csoportja). Jellegzetes kpviselik a cerebrozidok, amelyekben a ceramidhoz monoszacharid
molekula (galaktz vagy glkz) kapcsoldik (-glikozidos ktssel). Az idegsejtek membrnjnak fontos
komponensei. A gangliozidokban a ceramidhoz 26 cukoregysgbl ll oligoszacharid lnc kapcsoldik.
Glicero-glikolipidek
Ms nven glikosil-diacil-glicerol, melyben a glicerin egyes s kettes pozcij hidroxilcsoportjt zsrsav molekulk
szterestik, a harmadik hidroxilcsoport -acetil ktssel mono- vagy diszacharidhoz (ltalban galaktzhoz)
kapcsoldik. Az llati szervezetekben a glicero-glikolipidekben ltalban egy teltett s egy egyszeresen teltetlen
16, 18 sznatomszm zsrsav. Nvnyekben szerepk jelents, a kloroplasztiszban a fotoszintetizl membrnokban
a glicerolipidek -t teszik ki. Magasabbrend nvnyekben a zsrsav rsz csaknem kizrlag tbbszrsen
teltetlen zsrsavakbl (tbbnyire linolnsavbl) ll. Az eukaritkban jellemzen az egyes pozciban C16 vagy
C18 szrsavak, de a kettes pozciban kizrlag C18 zsrsavak tallhatk. A prokaritkban az egyes pozciban
ltalban C18, de a kettes pozciban csak C16 zsrsavak vannak.
Egyszer, nem hidrolizlhat lipidek

Eikozanoidok
A C20, tbbszrsen teltetlen zsrsavak (pl. arachidonsav) oxidlt szrmazkai. Kmiai szerkezetket tekintve
megklnbztetjk a leukotrineket s a gyrt tartalmaz prosztanoidokat (prosztaglandinok, prosztaciklinek,
tromboxnok). Biolgiai szerepk szertegaz: gyulladsos folyamatok, immunmkds, allergis reakcik stb.
Terpenoidok
A (C5H8)n sszegkplet, izoprn egysgekbl levezethet vegyleteket a terpnek, szrmazkaik a terpenoidok.
A kt izoprn egysgbl jnnek ltre a mono-, ngybl a di-, hatbl a triterpenoidok stb. Tbbsgben nvnyi
eredet vegyletek.
14
A sejtek molekuli
Az izoprn szerkezeti kplete.

Az izoprn egysgek szmnak s kapcsoldsuk variciival igen nagyszm terpenoid vegylet hozhat ltre.
Lehetnek nylt lncak s tartalmazhatnak gyrket. Sokflesgknek megfelelen szmos anyagcserefolyamatban
szerepet jtszanak. Terpn szrmazkok a pldul a gibberelinek, a juvenilis hormon (elbbi nvnyi, utbbi
zeltlbabk elfordul hormon), ubiquinon (ms nven koenzim-Q; a mitokondrilis elektrontranszport rendszer
rsze), K-vitamin, stb.
Nyolc izoprnegysgbl llnak a C40-es tetraterpnek, a karotinoidok. Alapvegyletk a cisz-fitoen, melybl
dehidrognezssel alakul ki a likopin (paradicsomban), a lnc kt vgnek gyrv zrdsval a karotinok,
oxignatomok beplsvel pedig a xantofillek. Tbb tagjuk sznes vegylet, nhnyuk a fotoszintetizl
pigmentrendszerekben is megtallhat, antioxidns hatsak.
A cisz-fitoen szerkezeti kplete.

A -karotin az A-vitamin prekurzora (elanyaga), mely a molekula ketthasadsval alakul ki. Az A-vitamin a
rodopszin felptsben vesz rszt.
A -karotin szerkezeti kplete.
Szternvzas vegyletek
Ugyancsak az izoprn szrmazkok kz sorolhat vegyletek. Triterpn ciklizlsval jnnek ltre az llatokban
s gombkban, valamint a nvnyekben a szteroidok bioszintzisnek kiindulsi vegyletei. A lehetsges
legegyszerbb szternvzas vegylet a gonn, melyben a 17-es sznatomra hidrognatom kapcsoldik.
A szternvz. A gyrket az ABC betivel, a sznatomokat szmokkal jellik. R a 17 sznatomra kapcsold

oldallnc.
A legtbb szteroid molekulban a 10-es s 13-as sznatomon egy-egy metilcsoport tallhat, s a 17-es sznatomhoz
alkil lnc kapcsoldik. A szteroidok vltozatossgt a metilcsoportok szma, az alkil lnc szerkezete s egyb, a
gyrkre kapcsold funkcionlis csoportok adjk. A szteroid hormonok fontos szerepet tltenek be a szervezetben
lejtszd folyamatok szablyozsban. Pldul a rovarokban az ekdiszteron (vedlsi hormon), gerincesekben a
nemi hormonok, a kortikoszteroidok (mellkvesekreg ltal termelt szteriodok), andrognek stb., nvnyekben a
fitoszteroidok, gombkban az ergoszterolok.
A hrmas sznatomon hidroxilcsoportot hordoz szteroidok a szterolok. Utbbiak kpviselje a koleszterin (ms
nven koleszterol) is, amely fontos membrn komponens, a D-vitamin szintzis s az epesavak szintzisnek
prekurzora, szmos ms szteroid biogenezisnek kiindulsi molekulja.
15
A sejtek molekuli
A koleszterin szerkezeti kplete. A polros molekularszletet a hidroxilcsoport kpviseli.
A fehrjk
A termszetben elfordul fehrjk 20 ltalnosan elfordul fehrjealkot aminosavbl (mint monomerekbl)
felpl lineris polimerek, makromolekulk. Az aminosavak kzponti -sznatomjhoz tetraderes
elrendezdsben kapcsoldik egy amino- s egy karboxilcsoport, tovbb egy hidrogn atom, valamint klnbz
tulajdonsgokkal rendelkez n. oldallnc. Vannak apolros, azaz hidrofb (Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Met, Phe,
Trp), polros, de tltst nem hordoz (Ser, Thr, Asn, Gln, Cys, Tyr), bzikus (Lys, Arg, His) s savas (Asp, Glu)
oldallnc aminosavak. Hrom aminosav aroms oldallnccal rendelkezik (Phe, Trp, Tyr). Az apolros prolin
(Pro) oldallnca sajt aminocsoportjval kpez gyrt (iminosavat). (Az aminosavakat nevk hrombets
rvidtsvel, illetve az bc nagybetivel jellik.)
Az aminosavak ltalnostott szerkezeti kplete az alfa helyzet sznatom megjellsvel.

Az aminosavak -sznatomja aszimmetris, optikailag aktvak, izomerprjaik a D- s L-aminosavak. Az l
szervezetekben elfordul fehrjk kevs kivteltl eltekintve -L-aminosavakbl llnak. A glicin, melynek
oldallnca csupn egy hidrognatom, nem mutat optikai izomrit.
Az aminosavak vzkilpses reakciban, az amino- s karbonsavcsoportjaik kztt kialakul peptidktst ltrehozva
kapcsoldnak. A peptidkts transz-lls, planris jelleg, a ktstengely mentn trtn rotci gtolt.
A peptidkts (piros sznnel jellve). Kt aminosavbl dipeptid, hrombl tripeptid, sokbl oligo-, illetve polipeptid
kpzdik.
A peptidktsek s az -sznatomjok vltakoz sorozata hozza ltre a polipeptid gerinct. A peptidlnc aminosav
sorrendje, az aminosav szekvencia alkotja a fehrjk elsdleges szerkezett. Az aminosavak oldallncai a
peptidgerinchez viszonytott helyzetk s az egyms kztti klcsnhatsok rvn jrulnak hozz a fehrjkre
jellemz trszerkezet kialaktshoz. A vltozatos oldallncok a fehrjeszintzis alatt vagy azt kveten funkcis
csoportjaikon keresztl szmos ko- s poszt-transzlcis mdostson eshetnek t. A fehrjelncban periodikusan
rendezett szerkezetek jnnek ltre: -hlix s a -red (-redztt lemez), melyeket szablytalan (random coil)
vagy szablyos (-hurok) szakaszok ktnek ssze. Ezek kpezik a fehrjk msodlagos szerkezett. A msodlagos
szerkezeti elemek s tovbbi klcsnhatsok (hidrognhd, elektrosztatikus s hidrofb kterk, diszulfid-hidak)
ltal a peptidlnc egymstl tvol es elemei egymshoz kzel kerlve globulris (3D) formt alaktanak ki. Ez a
harmadlagos szerkezet vagy a fehrje natv konformcija. Tbb fehrje sszekapcsoldva, alegysgszerkezetet
(negyedleges szerkezeti szint) kpezhet.
Egy fehrjn bell klnbz funkcikat ellt nagyobb aminosavszekvencia rszek, struktrelemek n. domnek
kpzdhetnek. A klnbz szervezetekbl szrmaz, azonos funkcit betlt fehrjkben lev aminosavsorrend
16
A sejtek molekuli
hasonlsgbl a rokonsg fokra, az evolcis tvolsgra is lehet kvetkeztetni. A domnek

aminosavszekvenciiban mutatkoz aminosaveltrsek szma s a vizsglt fajok fejldstrtneti tvolsga kztt
egyenes arnyossg ll fenn.
Az sszetett (konjuglt) fehrjk tartalmaznak nem fehrje alkotelemeket is, pl. sznhidrt vagy lipid vagy
szervetlen (pl. fm-ion) komponenseket (gliko-, lipo-, foszfo-, metallo- stb. proteinek). A fehrjersz az apoprotein,
a kapcsold nem fehrje rsz a prosztetikus csoport.
Biolgiai aktivits alapjn megklnbztetnk szerkezeti fehrjket, tartalkfehrjket,
transzportfehrjket, kontraktilis fehrjket, immunfehrjket, hormonokat, toxinokat stb.
enzimeket,
Az aminosavak szerketi kpletei:
Alanin (Ala; A) oldallnca hidrofb
Arginin (Arg; R) oldallnca bzikus
Aszparagin (Asn; N) oldallnca hidrofil
Aszparaginsav (Asp; D) oldallnca savas
Cisztein (Cys; C) oldallnca hidrofb (SH csoportja diszulfidhidak kialaktsra alkalmas).
Fenil-alanin (Phe; F) oldallnca hidrofb
17
A sejtek molekuli
Glicin (Gly, G) hidrofil
Glutamin (Gln; Q) oldallnca hidrofil
Glutaminsav (Glu; E) oldallnca savas
Hisztidin (His, H) oldallnca bzikus
Izoleucin (Ile; I) oldallnca hidrofb
Leucin (Leu; L) oldallnca hidrofb
Lizin (Lys; K) oldallnca bzikus
Metionin (Met; M) oldallnca hidrofb
18
A sejtek molekuli
Prolin (Pro; P) oldallnca hidrofb
Szerin (Ser; S) oldallnca hidrofil
Tirozin (Tyr; Y) oldallnca hidrofb
Treonin (Thr; T) oldallnca hidrofil
Triptofn (Trp; W) oldallnca hidrofb
Valin (Val; V) oldallnca hidrofb
Az eukaritkban elfordul fehrjept aminosavak 21. tagja a szeln tartalm szelenocisztein (Sec; U), oldallnca
hidrofb. Cisztein-analg, az SH (tiol) csoport helyett SeH csoportot (szelenol) tartalmaz. Elfordulsa az l
szervezetekben ltalnos, nhny enzim specilis aminosava.
19
A sejtek molekuli
A pirrolizin (Pyl; O), melyben lizin oldallnchoz egy pirrolingyr kapcsoldik, a 22. fehrjept aminosavknt
nhny metanogn Archaea faj metntermel enzimjeiben tallhat meg.
A nukleinsavak
A nukleinsavak nukleotid monomerekbl felpl polimer lncok, makromolekulk, a genetikai imformci
hordozi s kzvetti. A nukleotidokat egy szerves (purin vagy pirimidin) bzis, egy pentz cukor s egy
foszftcsoport alkotja, a legjelentsebb termszetes szerves vegyletek kz tartoznak.
A nukleobzisok nitrogn tartalm, aroms heterociklusos szerves vegyletek. Kzlk az adenin s a guanin
purinbzisok, az uracil, a citozin s a timin pirimidinbzisok. A DNS-ben a citozin s a timin fordul el, az RNSben a timint az uracil helyettesti.
A purin szerkezeti kplete.
Purinbzisok: az adenin (balra) s a guanin (jobbra) szerkezeti kplete.
A pirimidin szerkezeti kplete.
Pirimidin bzisok: citozin, timin s uracil.

A nukleozidokban egy ribz- vagy dezoxiribz-cukorgyrhz -glikozidos ktssel kapcsoldik valamelyik
nukleobzis. A nukleozidok: citidin, uridin, adenozin, guanozin s timidin.
20
A sejtek molekuli
Az adenozin szerkezeti kplete.

A nukleozidokbl a cukor rsz 5. sznatomjt szterest foszftcsoporttal nukleozid-5-monofoszftok, a nukleotidok
alakulnak ki. A nukleotidok a DNS s RNS monomerjei, ezen kvl szmos fontos biomolekula alkot rszei; pl.:
koenzim-A, FAD (flavin-adenin-dinukleotid), NAD+ (nikotinamid-adenin-dinukleotid), ATP (adenozin-trifoszft).
A nukleozid-monofoszftok (pl. AMP) tovbbi foszftcsoportokkal trtn szterestsvel alakulnak ki, a
nagyenergij (kmiai) ktseket tartalmaz nukleozid-difoszftok (pl. ADP), majd nukleozid-trifoszftok (pl.
ATP). Ezek a molekulk alkalmasak energia raktrozsra s rszleges hidrolziskkel az energia szablyozott
felszabadtsra is.
Az adenozin-trifoszft (ATP) szerkezeti kplete az egyes alkotelemek feltntetsvel.
A ciklikus-adenozin-monofoszft (cAMP) szerkezeti kplete.

A nukleotidok a foszftcsoport s a cukormolekula 3. sznatomja kztt kialakul szterktssel kapcsoldnak
egaymshoz, kialaktva a foszftcsoport (5-cukor-3) foszftcsoport (5-cukor-3) foszftcsoport (5cukor-3) lncolatot. A nukleotidok, gy a di-, a tri-, az oligo- s a polinukleotidok lncok is orientltak.
A nukleinsavlnc szerkezete.
A ribonukleinsav (RNS) nukleotidjaiban ribz alkotja a cukor rszt. Az RNS klnbz vltozatai rszt vesznek
a genetikai informci kdolsban s dekdolsban, a gnexpressziban s annak szablyozsban, a
21
A sejtek molekuli
fehrjeszintzis kivitelezsben. Az RNS a DNS-nl nagysgrenddel kevesebb nukleotidbl ll, egyszeres lnc,
de hurkot kpezve, nmagval ketts hlix szakaszokat kpes kialaktani.
A ribz s a dezoxirobz szerkezeti kplete.

A dezoxiribonukleinsav (DNS) ketts szl heliklis struktrt kpez. A DNS kt szla ellenttesen (antiparallel)
orientldva kapcsoldik egymshoz. A kt szla egyms komplementere, bennk a nukleotidok nukleobzisai
prokat alkotnak (adenintimin, guanincitozin). A bzisprokat hidrognhd ktsek kapcsoljk ssze. A bzisok
sorrendje (bzisszekvencia) rejti a genetikai informcit.
Az adenin (balra) s a timin (jobbra) kt hidrognhd-ktssel kapcsoldva alkotnak bzisprt. R1 s R2 a DNS

lnc kapcsoldsi pontjt jellik.
A guanin (balra) s a citozin (jobbra) hrom hidrognhd-ktssel kapcsoldva alkotnak bzisprt. R1 s R2 a

DNS lnc kapcsoldsi pontjt jellik.
Nhny szervetlen vegylet szerkezeti s

sszegkplete
Az oxosavak olyan legalbb egy oxignt tartalmaz savak, melyekben az oxignen kvl legalbb egy msik kmiai
elem is tallhat, legalbb egy oxignatomhoz kapcsold hidrognatomot tartalmaznak, s vizes kzegben legalbb
egy (de lehet tbb is) proton leadsval iont (savmaradk-ion) kpeznek. Tbbsgben vzben oldhat anyagok,
a vizes oldatok pH-jt cskkentik, a kmhats cskkentse a protonleads eredmnye.
Az oxosavak ltalban sszetett ionok, ktsk erssge a molekula kzponti atomjnak (pl. knsavban a kn)
elektronegativitstl s a hozz kapcsold oxignatomok szmtl fgg. Az oxosavak kz tartozik a knsav,
a saltromsav, a foszforsav, tovbb a halogn-oxosavak, mint pldul a hipoklrossav, a klrossav, a klrsav, a
perklrsav, perjdsav stb.
knsav (H2SO4) s ktrtk anionja: a szulft-ion ([SO4]2)
22
A sejtek molekuli
knes-sav (H2SO3) s ktrtk anionja, a szulfit-ion ([SO3]2)
saltromsav (HNO3) s egyrtk anionja, a nitrt-ion ([NO3])
saltromos-sav (HNO2) s anionja, a nitrit-ion ([HNO2])
sznsav (H2CO3) s anionjai, a hidrognkarbont-ion ([HCO3]) s karbont-ion ([CO3]2)
(orto)foszforsav (H3PO4) s ionjai, a dihidrogn-foszft ([H2PO4]), a hidrognfoszft- ([HPO4]2) s a foszftion ([PO4]3)

Krdsek:
1. Csoportostsa elfordulsuk gyakorisga szerint az l szervezetek felptsben rszt vev kmiai elemeket!
2. Nevezze meg s jellemezze a makromolekulk fbb csoportjait!
3. Milyen szempontok szerint lehet csoportostani a sznhidrtokat?
4 .Milyen monomerekbl ll a cellulz, a kemnyt s a glikogn? Miben klnbznek egymstl ezek a
poliszacharidok?
5. Rajzolja fel az aminosavak ltalnostott kplett!
6. Csoportostsa az aminosavakat oldallncuk tulajdonsgai alapjn! Magyarzza meg, hogy az oldallncok
sajtossgai hogyan befolysolhatjk a fehrje szerkezett!
7. rja fel kt aminosav kondenzcis reakcijnak kmiai egyenlett, nevezze meg a kialakul kts tpust, majd
rja fel hidrolzist is!
8. Sorolja fel a fehrjk trszerkezeti szintjeit s azok fbb jellegzetessgeit!
9. Nevezze meg a nukleotidokat felpt molekulkat s rajzolja fel az AMP szerkezeti kplett!
23
A sejtek molekuli
10. Milyen kzs s milyen eltr alkotrszek azonosthatk az RNS s a DNS molekulk szerkezetben?
11. Nevezze meg a nukleinsavak felptsben rszt vev szerves bzisokat? Csoportostsa azokat kmiai szerkezetk
szerint, s jellje meg, hogy a nukleinsavakban alkotnak bzisprokat!
12. Milyen szempont szerint, milyen tulajdonsguk alapjn sorolunk vegyleteket a lipidek kz?
13. Vzolja fel a foszfolipid molekulk kmiai szerkezett! Nevezze meg, hogy a sejt mely struktrinak
felptsben vesznek rszt, s indokolja, hogy milyen tulajdonsgaik miatt alkalmasak biolgiai szerepk betltsre!
14. Rajzolja fel a szternvz szerkezeti kplett! Magyarzza meg, miben klnbznek a szternvzas vegyletek
egymstl!
15. Definilja a kvetkez sszetett vegyleteket s mondjon pldt elfordulsukra: peptidoglikn, proteoglikn,
glikoprotein, glikolipid, lipoprotein!
24
3. fejezet - Az eukarita sejtek

felptse
Az eukarita sejtek szemben a prokaritkkal legszembetlbb s taln legfontosabb tulajdonsga a
kompartimentalizci. A prokaritkban nem tallhat a plazmamembrntl fggetlen (azzal nem kontinuus)
membrnrendszer. Az eukarita sejtekben a plazmamembrn ltal hatrolt tr bels membrnrendszerekkel
elvlasztott, klnbz mret s funkcij terekre, sejtszervecskkre (sejtorganellumokra) tagoldik. Az azonos
funkcij terek, az azonos sejtszervecskk sszessge kompartimentumot alkot. A sejtorganellumok sajt
membrnjban s bels terben specilis folyamatok zajlanak, melyek szmra megfelel krlmnyek (pH,
koncentrciviszonyok stb.) alakulnak ki, tovbb megfelel komponensek llnak rendelkezsre: izollt s
optimalizlt reakciterek jnnek ltre.
A bels membrnok megjelense fontos lps volt a sejtek evolcijban. A membrnok nemcsak hatrol, de
nagy hordoz- s reakcifelletet kpeznek a fehrjk szmra. A tbb rszfolyamatbl ll bonyolult
anyagcserefolyamatok enzimrendszerei gyakran egyms mellett helyezkednek el, rgzlnek a membrnokhoz. A
membrnok klnbz reakcitereket vlasztanak el s ktnek ssze. A membrnok klnbz molekulkra
vonatkoz eltr permebilitsa s szmos membrnfehrje mkdsnek eredmnye, hogy a membrnok ltal
elvlasztott terek kztt jelents koncentrci s potencilklnbsgek alakulhatnak ki.
Az eukarita sejt legjellegzetesebb (definci szerinti) alkoteleme a mag (sejtmag, nukleusz, karion). A
plazmamembrn s a sejtmag kztti teret a citoplazma tlti ki. A citoplazma alapllomnya a citoszol, mely
tartalmazza a sejt organellumait s a sejtvzat. Hozzvetleg a sejt trfogatnak felt teszi ki.
Az eukarita sejtek tbbsge tartalmaz sejtmagot, amelyet a kt membrnbl ll maghrtya vesz krl. A
maghrtyn specilis szerkezet prusok helyezkednek el. Ez utbbiakon keresztl zajlik le a mag s a citoszol
kztti anyagramls. A magban helyezkedik legalbb egy magvacska (nukleolusz) a riboszomlis RNS (rRNS)
szintzisnek s a riboszmk sszeszerelsnek a helye. A mag alapllomnya fonalas szerkezet, DNS-t s
fehrjket tartalmaz kromatinllomny. A kromatinban jl megklnbztethet a vilgosabb, lazbb szerkezet
eukromatin s sttebb, nagyobb srsg heterokromatin llomny. A kromatinllomnyt a kromoszmk
alkotjk, melyek lineris DNS-t s az ahhoz ktd jellegzetes fehrjket, hisztonokat tartalmaznak. A sejtciklus
osztdst kvet fzisban minden egyes kromoszma egyetlen, igen hossz, lineris DNS-molekult tartalmaz,
melynek szerkezet fellazult, tbb-kevsb letekeredett, gy az egyedi kromoszmk nem klnthetk el. A
sejtciklus ksbbi fzisaiban a DNS megkettzdik (replikldik), a kromoszma kt rszbl, kt kromatidbl
ll. Mindkt kromtatidban egy-egy azonos bzisszekvencij DNS-molekula van. Az osztds sorn a kromoszmk
anyaga ersen kondenzldik, s ekkor plcikaszer testek formjban jl felismerhetk. A kt kromatida az
mitzis sorn sztvlik s elosztdik a lenysejtek kztt.
A maghrtya s a DNS hisztonokkal kpzett lland kapcsolata vdelmet nyjt a DNS-molekulk mechanikai
krosodsa ellen, biztostja az egydi DNS-molekulk kromoszmkba val csomagolst. Ez teszi lehetv
szlltsukat, pontos sztosztsukat a sejtosztds sorn. A sejtmag ma ismert szerkezete s a DNS hisztonokkal
kpzett lland kapcsolata, illetve a mai eukarita sejtek jelentsen megnvekedett DNS tartalma valsznleg az
evolcis sorn prhuzamosan alakult ki.
A transzkripci (a DNS bzisszekvenciinak trsa RNS-bzisszekvencikba) s a transzlci (az RNS irnytotta
fehrjeszintzis) trben sztvlik egymstl.
Az organellumokat hatrol membrnok azonos szerkezeti elv szerint plnek fel: Alapveten foszfolipid ketts
rtegbl s e kt rtegbe merl, vagy annak felsznhez kapcsold fehrjkbl llnak. sszettelkben, fehrjes lipidtartalmukban, valamint az egyes komponensek eloszlsban nagy eltrsek alakulhatnak ki, ez is hozzjrul
az egyes organellumok s funkciik klnbzsghez.
Az endoplazmatikus retikulum (ER)a legnagyobb kiterjeds bels membrnrendszer. A citoplazma jelents
rszt behlz lapos zskokbl (ciszternkbl) vagy csvekbl ll. Ciszternlis szerkezet a durva felszn
endoplazmatikus retikulum (DER; angolbl tvett rvidtssel RER rough endoplasmic reticulum). Felletn
riboszmk lnek, az exportra sznt fehrjk szintzist vgzi. Az elssorban tubulris szerkezet sima felszn
endoplazmatikus retikulum (SER smooth endoplasmic reticulum), a lipid- s sznhidrt-anyagcserben, a
25
Az eukarita sejtek felptse
biolgiailag aktv idegen szerves vegyletek (xenobiotikumok) feldolgozsban vesz rszt. Az endoplazmatikus
retikulumban szintetizldott fehrjk s membrnlipidek a Golgi-kszlk ciszterniban vlogatson s mdostson
esnek t. Az exportra vr fehrjk a Golgi-kszlkbl kpzd vladkszemcskben koncentrldnak, majd
exocitzissal rlnek ki a sejtbl. Az endocitotikus vakulk (endoszmk) terben a klvilgbl importlt
anyagok izolldnak. A bont enzimeket tartalmaz lizoszmk a sejt litikus organellumrendszert alkotjk: a
klvilgbl vagy a bels trbl felvett makromolekulkat kpesek lebontani.
Az egyes kompartimentumok membrnjai csak kevs kivtellel tudnak sszeolvadni, ezrt a sejtorganellumok
tartalma nem kerlhet t kzvetlenl az egyikbl a msikba. Ennek ellenre a kompartimentumok kztt hatrozott
anyagramls figyelhet meg, melynek ltalnos mdja a vezikulris transzport. Ennek sorn ltalban egyszeres
membrnnal hatrolt hlyagokban, vezikulkban, irnytott transzporttal s a szlltott anyag ms kompartimetumok
tartalmval val keveredse nlkl valsul meg az anyagszllts az egyik kompartimentumbl a msikba.
Klnleges az eredetk, gy specilis membrnok hatroljk a mitokondriumokat, a szntesteket, valamint a
peroxiszmkat. A mitokondriumok terben szintetizldik a sejt ATP-tartalmnak legnagyobb rsze, a zld
szntestekben zajlik a fotoszintzis, a peroxiszmkban oxidatv folyamatok bonyoldnak le.
3.1 tblzat Emls mjsejt felptsben rszt vev membrnrendszerek felszneinek arnya a sejt sszmembrnfelsznnek szzalkban. Egy emls mjsejt tlagos trfogata hozzvetlegesen 5000 m3, a teljes membrnfelszn
kb. 110 000 m2.
Az eukarita sejtekben a sejtalkotk nem vletlenszeren helyezkednek el, a sejtek tbbsgnek meghatrozott
alakja van. Mindezrt az sszetett felpts sejtvz (citoszkeleton) felels. A citoszkeleton mikrotubulusokbl,
mikrofilamentumokbl s az n. intermedier filamentumokbl, illetve ezek hlzatbl ll. A mikrotubulusok
s aktinfonalak minden eukarita sejtben megtallhatk, az intermedier filamentumok egyes komponensei
evolcisan j szerzemnyek, szvetspecifikus vltozataik csak a gerincesekben fordulnak el.
A mikrotubulris s aktinvzhoz mozgat molekulk, n. motorfehrjk kapcsoldnak. A vzrendszer meghatrozza
a sejt alakjt, lehetv teszi a sejt s a sejtalkotk mozgst, rgzti az egyes organellumok sejten belli helyt,
azaz rszt vesz a sejt bels rendezettsgnek fenntartsban, a sejten belli anyagramlsban. A vzrendszer elemei
sszessgkben nagy hordoz- s reakcifelletet adnak. Szmos fehrje ktdik hozzjuk, befolysolva e fehrjk
sejten belli elhelyezkedst, eloszlst.
A sejt osztdsa sorn a kromoszmk mozgatst, sztosztst a mikrotubulusokbl ll mitotikus kszlk
(magors) irnytja, mikrotubulusok hinyban az eukarita sejt nem kpes osztdni.
A citoplazmt, vagyis a sejt felsznt plazmamembrn bortja, amely egyrszt elvlasztja (vdi s izollja), a
sejtet a krnyezettl, msrszt ssze is kapcsolja a klvilggal. Kls felsznn glikoproteineket, s specilis
poliszacharidokat tartalmaz burok (sejtkpeny) kpzdik. A sejthrtya meghatroz komponensei kz tartoznak
a membrnfehrjk. A sejthrtya gazdag receptorfehrjkben, melyek nagy affinitssal kpesek megktni
ligandumaikat, a jeltviteli tvonalak kiindul pontjai. A membrnfehrjk egy heterogn csoportja
sejtadhzis/sejtkapcsol funkcit lt el, alapvet szerepe van a szveti struktrk kialaktsrt s fenntartsrt.
Az ionpumpk, ioncsatornk s transzporterek egyttesen hozzk ltre s tartjk fenn a klnbz ionok s
molekulk egyenltlen eloszlst a sejt belseje s a klvilg kztt, mely a sejt normlis mkdsnek alapfelttele.
3.2 tblzat Prokarita s eukarita sejtek nhny alapvet, ltalnostott tulajdonsgnak sszehasonltsa.
26
Az eukarita sejtek felptse
Krdsek:
1. Sorolja fel az eukarita s prokarita sejt felptse kztti legalapvetbb eltrseket!
2. Mi az elnye a kompartimentalizcinak?
3. Sorolja fel a fbb sejtalkotkat!
4. Nevezzen meg legalbb egy nem membrn hatrolta sejtalkott!
5. Mi a bels membrnrendszerek szerepe?
27
4. fejezet - A sejtmembrn szerkezete

s mkdse
Az eukarita sejteket bort plazmamembrn s a sejtalkotk bels membrnrendszereket alkot membrnjai
alapfelptse azonos. Az egyes kompartimentumok membrnjai s a sejthrtya eltr tulajdonsg tereket hatrolnak,
vlasztanak el s egyben ktnek ssze. A klnbz sejtorganellumok membrnjait vizsglva jellegzetes eltrsek
ismerhetk fel, szmos specifikus tulajdonsgot mutatnak, melyek a membrnok lipid- s fehrjesszettelnek
(elssorban ez utbbi) klnbzsgre vezethetk vissza. Mgis, a membrnok mkdsnek, felptsnek
alapelvei nagymrtkben hasonlak, ezrt legfontosabb tulajdonsgaik, legltalnosabb fukciik egyezek, ezrt
a biolgiai membrnok szerkezetnek s alapvet mkdsnek ismertetsre elegend a plazmamembrn
tulajdonsgait szemgyre venni.
Membrnszerkezet
A biolgiai membrnok 510 nm (az llati sejtek plazmamembrnja 10 nm) vastag, ketts rteg sejtalkotk. F
alkotelemeik a lipidek s a fehrjk. Szrazanyagtartalmnak 4075%-a lipid, nhny szzalk sznhidrt
(glikolipidek s glikoproteinek alkotelemeknt), a tbbi fehrje.
Egr mjsejtek egy rszlete. A piros nyilak mutatjk a kt szomszdos sejt egymsnak simul plazmamembrnjt,
jobbra s balra endoplazmatikus retikulum ciszternk lthatk..
Patkny mjsejt klnbz membrnjainak lipidsszettele.

A lipidek megkzeltleg fele foszfolipid, nagyjbl negyede koleszterin, kisebb rsze glikolipid s ms lipidek.
Az egyes lipidek rszarnya a sejtorganellumok, sejttpusok membrnjaiban igen szles skln vltoz. A
leggyakoribb foszfolipidek, a foszfatidil-kolin, a foszfatidil-etanolamin, a foszfatidil-szerin. A foszftidil-inozitol
ugyan kis mennyisgben szerepel a membrnokban, de fontos biolgiai funkcik ktdnek hozz. A foszfolipidek
a glikolipidek s a koleszterin is megnylt, plcika alak, ketts oldhatsgi tulajdonsgot mutat (amfipatikus)
molekulk. Polros feji rszbl s apolros, hossz lnc farki rszbl llnak. ezek az anyagok vizes kzegben
28
A sejtmembrn szerkezete s mkdse
hajlamosak micellkat alkotni vagy spontn ketts rtegbe rendezdni; ekkor hidrofil polros miolekularszkkel
a vizes fzissal teremtenek kapcsolatot, hidrfb apolros rszeikkel egyms fel fordulnak.
A biolgiai membrnok vzt foszfolipid kettsrteg kpezi. A kt rtegben a hidrofil feji rszek a vizes fzisok
fel, a hidrofb farki rszek pedig a membrn belseje, pontosabban a msik lipidrteg fel tekintenek. A membrn
kt lipidrtegben a molekulk ellenttesen orientldnak, gy a membrn belsejben kialakul egy hidrofb zna,
amit kt oldalrl egy-egy (a polros feji molekularszekbl ll) hidrofil sv zr le. Ez a hidrofb zna a vzben
oldd anyagok (cukrok, aminosavak stb.), makromolekulk, ionok szmra diffzis mozgssal tjrhatatlan,
(impermebilis), gy a membrn vlaszfalknt viselkedik.
Foszfatidil-kolin molekula modellje.
A koleszterin molekula trbeli modellje.

A tiszta, fehrjementes foszfolipidmembrnok teresztik a kis molekulatmeg (kb. 100 Da-ig) hidrofb vagy
polros molekulkat (pl. O2, N2, NO, CO, CO2, vz, etanol), de tjrhatatlanok nagyobb molekulk s minden
elektromosan tlttt anyag (ionok) szmra.
A plazmamembrn tjrhat a sokfle metabolit (aminosavak, cukrok stb.), st az ionok szmra is. Ennek oka a
membrn fehrjinek mkdsben keresend.
A plazmamembrn ozmiofil, ozmiofb ozmiofil hrmas megjelense a j minsg elektronmikroszkpos kpen

lthat.
A membrn fehrjetartalma szles hatrok kztt vltozik, tlagosan 50% krli. A velhvelyes idegrost
mielinhvelynek plazmamembrnjban alig 25%, de a mitokondrium bels membrnjban elrheti a 7080%-ot
is. A membrn fehrjit kt nagy csoportba sorolhatjuk a lipid kettsrteg molekulival ltestett kapcsolatuk
szerint. A perifris fehrjk a membrn kls vagy bels felsznn lokalizldnak, felletkn tbbsgben
29
hidrofil oldallncok tallhatk. A membrn sztbontsa nlkl levlaszthatk. Az integrns membrnfehrjk

tbb-kevsb bemerlnek a membrnba, gyakran t is rik azt (transzmembrnfehrjk), vagy kovalensen
ktdnek valamelyik membrnkomponenshez (lipidhorgony). gy csak a lipid kettsrteg megbontsval (pl.
detergenskezelssel) tvolthatk el.
A membrn fluiditsa s szervezdse

A biolgiai membrnok l, dinamikus struktrk, a membrnalkot molekulk a sajt tengelyk krl el tudnak
fordulni (rotci), a membrn skjban el is tudnak mozdulni (laterlis diffzi; lipidek esetben a diffzi sebessge
elrheti az 12 m/s-ot, a fehrjk ennl jval lassabban mozognak). A lipid molekulk membrn egyik rtegbl
a msikba trtn tfordulsa (flip-flop mechanizmus) gtolt, spontn igen ritkn fordul el. A zsrsavlncokkal
rendelkez lipid komponensek molekuln belli mozgst vgezhetnek: zsrsavlncaik elhajolhatnak. A membrn
kvzi folyadkknt viselkedik, fluiditst mutat.
A membrn fluiditsa a membrn bels rendezettsgtl, elssorban lipidsszetteltl, tovbb a krnyezet
hmrsklettl fgg. A teltett zsrsavlncot tartalmaz foszfolipid molekulk kztt ers klcsnhatsok alakulnak
ki, mg a teltetlen zsrsavlncok a ketts kts helyn kialakul elhajls miatt, ezt a szerkezetet fellaztjk: a
membrn rendezetlenebb, folykonyabb lesz. A merev szternvzzal rendelkez koleszterin, illetve a
membrnfehrjk arnynak nvekedse merevebb teszi a membrnokat.
Az lvilgban ltalnos jelensg, hogy a vltoz hmrsklet (poikilotherm) llatok alacsony hmrskleten
sok teltetlen zsrsavlncot tartalmaz foszfolipidet ptenek membrnjaikba, ezzel biztostva a normlis mkdshez
szksges fluiditst.
A membrn fluiditsa szmos transzportfolyamat elfelttele.
A membrnalkotk mozgst ms tnyezk is befolysoljk. A membrnba plt molekulk kztti gyenge
klcsnhatsok eredmnyekppen kb. 10100 nanomteres krzetben mikrorek (mikrodomnek) alakulhatnak
ki (mozaikossg), melyekben egyes membrn molekulk feldsulnak. Jellegzetes pldik a koleszterinben,
glikolipidekben s nhny specilis fehrjben gazdag lipid tutajok (lipid rafts). A lipid tutajokra jellemz,
hogy bennk jellemzen hosszabb zsrsavlnc lipidek koncentrldnak, ezrt ezen a terleten a membrn vastagsga
megn, st, ezen a terleten a membrn kt rtege egytt mozog. A fentiek miatt a lipid tutajokba csak specilis
fehrjk kpesek beplni.
Szmos membrnfehrje kapcsoldva a sejtvz valamely elemhez, helyhez rgzl. A szomszdos sejteket sszekt
kapcsolszerkezetek szintn gtolhatjk a membrnkomponensek szabad diffzijt. Polarizlt sejttpusokban (pl.
blhmsejt) a fluidits, ill. a molekulk szabad mozgst korltoz mechanizmusok, s az irnytott vezikulris
transzport egyttes hatsaknt a plazmamembrn klnbz terletein a membrnkomponensek, elssorban a
fehrjk, eloszlsa nem lesz egyenletes. Funkcionlisan eltr rek (membrndomnek) alakulnak ki (pl. a
blhmsejtekben a glkz felvtelt vgz fehrje csak az apiklis a bl rege fel nz plazmamembrnrgiban mutathat ki, mg szmos ms fehrje gy a Na+/K+-ATP-z csak a bazolaterlis membrnban). A
plazmamembrn ilyen jelleg polarizltsga a szveti ktelkben mkd sejtek tulajdonsga, egyben normlis
mkdsk szksges felttele.
A membrnkomponensek eloszlsa nemcsak a membrn skjban egyenetlen, ugyanis bizonyos komponensek a
membrn kt rtegben nem egyenl arnyban oszlanak meg. ltalnosan, hogy a kolintartalm lipidek
(foszfatidilkolin, szfingomyelin) s a glikolipidek a membrn kls rtegben, mg az amino-foszfatidok
(foszfatidilszerin, foszfatidiletanolamin) a bels, citoszol felli rtegben helyezkednek el.
30
A sejtek apiklis (lumenlis) felsznn a plazmamembrn extracellulris felsznn tallhat a glikoklix (nyl).
A sejthrtya kls, sejten kvli tr fel nz felsznn sznhidrtban gazdag rteg, a glikoklix (angol megnevezse:
external coat) tallhat. sszetevi a glikolipidek s glikoproteinek, melyek oligoszacharid oldallncaik a klvilg
fel nznek. Az oligoszacharid komponens ltalban kevesebb, mint 15 cukormolekulbl ll, gyakran elgaz,
rendkvl vltozatos sszettel. A sejt felsznn tallhatunk fehrjkhez kovalens ktssel kapcsold poliszacharid
lncokat is, n. proteogliknokat. Ezek fehrje komponensei vagy a glikozil-foszfatidil-inozitol (GPI) segtsgvel
horgonyzdnak a membrnhoz, vagy transzmembrn fehrjk. A glikoklix kzvetlenl membrnhoz kttt
elemeihez lazn ktd, a sejt ltal termelt tovbbi poliszacharidok, glikoproteinek s proteogliknok asszocildnak.
A plazmamembrn bels, citoplazma fel nz oldaln sznhidrtok nincsenek.
Jellegzetesen aszimmetrikus orientcijak a membrnba plt receptorfehrjk, melyek ligandumkt helyei a
kls krnyezet, mg az intracellulris folyamatokat beindt molekulaszakaszok a citoplazma fel nznek.
A (plazma)membrn fenti lerst Singer s Nicolson 1972-ben publiklt folykony mozaik membrn modellje
alapozta meg.
Transzportfolyamatok
A plazmamembrn kapcsolatot teremt a sejt krnyezetvel, gy a sejt mkdse szorosan sszefgg a membrnban
zajl folyamatokkal. A plazmamembrn hromfle feladatot lt el: anyagfelvtelt s -leadst, a sejten kvlrl
szrmaz ingerek felfogst, feldolgozst s tovbbtst, valamint sejt-sejt, ill. sejt-sejtkztti llomny
kztti kapcsolatok ltrehozst.
Egyszer diffzival (energiabefektetst nem ignyel) csak a mr megismert kis molekulj hidrofb vagy tlts
nlkli kis polros molekulk juthatnak t a membrnon. A diffzi irnyt s intenzitst a membrn kt oldala
kztti koncentrciviszonyok szabjk meg.
A biolgiai membrn szemipermeabilitsrt, nagyobb ligandumok transzportjrt tbbsgben igen specifikus
integrns membrnfehrjk felelsek. Szerkezetk s mkdsk alapjn hrom csoportba sorolhatk.
A csatornk hidrofil prusknt mkdnek, melyet a csatornafehrjk transzmembrn hlix szakaszai hoznak
ltre. Nagy sebessggel engednek t vizet s egyes ionokat egyik oldalrl a msikra, mivel nem alakul ki kts a
csatonafehrje s az thalad molekulk kztt. A mozgs irnyt a membrn kt oldaln fellp koncentrci-,
ill. tltsklnbsg (elektrokmiai potencilklnbsg) szabja meg. Egyes csatornk lehetnek llandan nyitott
llapotban, legtbbjk azonban csak valamilyen jel (pl. kmiai anyag, mechanikai hats vagy elektromos
feszltsgvltozs) hatsra nylik meg idlegesen, n. kapuzott csatornk. A kmiai szinapszis posztszinaptikus
membrnjban lv Na+- s K+-csatornk neurotranszmitter (pl. acetilkolin) hatsra nylnak ki.
A szlltfehrjk msik nagy csoportjt a transzporterek (ms elnevezssel: permezok, karrierek) alkotjk.
Reverzbilisen ktik a szlltand (cargo) anyagot, ami konformcivltozst idz el a karrier fehrjben, s ez
indtja el a transzportot. A transzportereket hrom csoportba sorolhatjuk. Az uniporterek egy molekult szlltanak
egy irnyba, mindig a nagyobb koncentrcij oldalrl az alacsonyabb koncentrci fel. Tipikus uniporter a
vrsvrtest membrnjban tallhat glkz-transzporter. A szimporterek (kotranszporterek) egyidejleg kt
31
anyagot szlltanak azonos irnyba. Az egyiket a koncentrcigradiensnek megfelelen (ez hajtja a folyamatot),
a msikat a koncentrcigradiens ellenben. Kotranszporttal valsul meg pl. blhmsejtek apiklis membrnjban
a glkz felvtele a Na+/glkz kotranszporter kzremkdsvel. Az antiporterek (kicserlk) is kt anyagot
mozgatnak, de ellenttes irnyba. Az egyik a koncentrcigradiensnek megfelelen, a msik a sajtjval ellenttesen
mozog. Tpuspldja a Na+/H+ (ntriumproton) antiporter, mely Na+-t hoz be kvlrl (a nagyobb koncentrcij
helyrl) a citoplazmba, s egyidejleg H+-t juttat ki a sejtbl. Ez az antiporter az intracellulris pH-t szablyoz
kr egyik fontos eleme.
A csatornk s a transzporterek kln energiabefektets nlkli, n. facilitlt diffzit (passszv transzportot)
valstanak meg.
A membrn transzportfehrjinak fehrjk harmadik csoportjt a pumpa-ATP-zok kpezik. ATP hidrolzisbl
nyert energia felhasznlsval az alacsony koncentrcij oldalrl a magas koncentrcij fel trtn, energetikailag
kedveztlen anyagszllts valsytanak meg. Mkdsk eredmnyeknt koncentrci-, ill. potencilklnbsget
alaktanak ki a membrn kt oldaln. Legismertebb kzlk a Na+/K+-ATP-z (ntrium-klium kicserl ATPz), mely egy molekula-ATP lebontsval tlagban 3 Na-iont lk ki a sejtbl s kt K-iont hoz be. Ionpumpa
szablyozza a sejt kalciumtartalmt (Ca++-ATP-z), protontranszlokl ATP-z (H+-ATP-z) teszi lehetv egyes
sejtekben a savszekrcit. Ebbe a csoportba tartoznak az gynevezett ABC-transzporterek (ABC = ATP binding
casette). Nagymret, integrns membrnfehrjk, ATP felhasznlsval szmos anyagot (pl. aminosavakat,
peptideket, toxikus vegyleteket) kpesek a plazmamembrnon tjuttatni. Jellegzetes kpviseljk az MDR
(multidrog-rezisztencia) -fehrje, mely gygyszereket, tbbek kztt a sejtburjnzs gtlsra hasznlt
citosztatikumokat tvolthat el a sejtekbl, vdve azokat a sejtkrost hatsoktl.
A pumpk, csatornk, transzporterek mkdse az ionok s ozmotikusan aktv molekulk mozgatsval lehetv
teszik a sejt trfogatnak s pH-jnak szablyozst. A sejtfelszn meghatrozott rszein lokalizldva, mkdsk
irnytott anyagramlst eredmnyez.
A pumpk ltal kialaktott s fenntartott knyes ionkoncentrci-aszimmetria pillanatszeren felborul, ha a csatornk
teresztkpessge megvltozik. A rendszer gyenge ingerre is gyors, ers vlaszt kpes adni. Ezt hasznlja fel a
sejt a kls ingerek felfogsra. Ennek kzismert pldja az idegsejt membrnjain inger hatsra kialakul akcis
potencil, mely gy jn ltre, hogy az inger helyn az ioncsatornk teresztkpessge hirtelen megn, Na-ionok
ramlanak be, ill. K-ionok ki, s a membrn depolarizldik.
Az ionpumpk a membrn kt oldala kztti koncentrciklnbsget ATP felhasznlsval lltjk el. Ez a
folyamat megfordthat: ha egy membrn kt oldaln egy adott anyagra nzve nagy koncentrciklnbsg alakul
ki s a membrnban kapu van, akkor a visszaramls sorn felszabadul energia ATP-szintzisre felhasznlhat.
Ezen az elven mkdik a mitokondriumokban az energia konzervlsa.
A makromolekulk szmra a plazmamembrn nem tjrhat, de ezek felvtele is lehetsges egy specilis folyamat,
az endocitzis tjn. Ilyenkor a plazmamembrnon kisebb-nagyobb betremkedsek jnnek ltre, majd ezek
lefzdnek, s gy a klvilg egy-egy darabja hlyagba, vakulba (endoszma) zrva a sejt belsejbe jut. E
folyamat fordtottja az exocitzis, melynek sorn a citoplazma bizonyos membrnnal hatrolt vezikulk vagy
granulumok, illetve vakulk a plazmamembrnhoz tapadnak, sszeolvadnak, membrnjuk ideiglenesen vagy
vglegesen bepl a plazmamembrnba, eredeti beltartalmuk pedig a klvilgba kerl.
Krdsek:
1. Sorolja fel a biolgiai membrnok molekulris komponenseit!
2. Magyarzza el a lipid kettsrteg felptst s jellemezze tulajdonsgait!
3. Milyen anyagok diffundlnak t a lipid rtegen, magyarzza meg, hogy mely tulajdonsguk teszi ezt lehetv?
4. Mi a biolgiai membrn fluiditsnak magyarzata! Hogyan mozoghatnak a molekulk a membrnban?
5. Mi biztostja a biolgiai membrnok szemipermeabilitst?
6. Csoportostsa a membrnfehrjket a membrnhoz val kapcsoldsuk s funkciik alapjn!
7. Csoportostsa a membrnok transzportfolyamatait energetikai szempontbl s mkdsk szerint!
32
8. Milyen mechanizmusok, struktrk jtszanak kzre a vzmolekulk membrnokon trtn tjutsban, milyen
krlmnyek befolysoljk a vztranszport irnyt s intenzitst?
9. Miben klnbznek az eukarita sejt organellumait hatrol membrnok?
10. A sejthrtyn milyen membrndomneket klnbztetnk meg, milyen mechanizmus gtolja sszettelk
kiegyenltdst?
11. Mi a sejtkpeny, milyen molekulk jtszanak szerepet kialaktsban, mi a funkcija?
12. Sorolja fel a transzmembrnon transzport lehetsges vltozatait, nevezze meg az aktv membrntranszportok
alaptpusait!
33
5. fejezet - Sejtmag
A sejtek DNS llomnya, a genom, a mitokondriumok s plasztiszok sajt DNS llomnytl eltekintve a sejtmagban
tallhat.
Sejtmag a sejtmagvacskval (srga), s a maghrtyhoz kapcsold ER-mal (kk)

A sejtmagban fnymikroszkpos DNS festssel is elklnthet egy ersebben festd n. heterokromatin s egy
kevsb festd eukromatin. A kt szablytalan eloszls rgi eltr festdse a DNS eltr koncentrcijval
magyarzhat. A vilgosabb eukromatikus rgiban a DNS kevsb kondenzlt llapotban van, ez a rsz teht a
mkd, despiralizlt DNS terlete. A heterokromatikus rgik ers festdse pedig a DNS szl ers
kondenzcijnak kvetkezmnye. A kondenzlt s letekeredett DNS szakaszok a sejt mkdse sorn vltoznak,
de legszembetnbb a sejtciklusnak megfelelen az osztdsra felkszl magban a DNS kromoszmkk
tmrlse, majd az osztdst kveten jbli dekondenzcija.
Heterokromatikus (stt) s eukromatikus (vilgos) rszek a sejtmagban
34
Sejtmag
Ersen heterokromatikus sejtmag, jl lthat nuklelusszal (TEM).
Apoptotikus sejtmagban a fragmentld kromatinllomny kondenzldik s a maghrtya alatt halmozdik

fel (TEM).
Az 1850-es vekben Gregor Mendel ltal vgzett ksrletek mutattak r elszr, hogy a tulajdonsgok (fenotpus)
genetikailag rkld formban (genotpus) vannak jelen a sejtekben. 1903-ban Walter Sutton s Theodor Boveri
citolgiai megfigyelsek alapjn lltotta fel az rklds kromoszmlis elmlett. A genom kromoszmkba
szervezdse, s annak mkdse a kutatsok egyik legfontosabb terlete, br mg tvol llunk a gnmkds
szervezdsnek teljes megrtstl. A genom mrete az llnyek klnbzcsoportjaiban nagy eltrseket mutat.
Br van nmi korrelci a fejlettsg s a genom mrete kztt, az egyes fajok kztt igen nagy eltrs tapasztalhat.
A haploid eukarita sejtek genommrete (C rtk) 1071011 bzispr kztt vltozik. Az ember a kzpmeznyben
tallhat mintegy 3x109 bzisprral. A nvnyi molekulris biolgia kedvenc ksrleti objektuma az Arabidopsis
mintegy 7x107 bzisprral kicsinek szmt. A legnagyobb ismert genommal (1011) a liliomflk rendelkeznek, de
a ktltek genomja is 50-szer nagyobb, mint az ember. Ezt a jelensget hvjuk C-rtk paradoxonnak. A gnek
sszehasonltsbl kiderlt, hogy a klnbsg alapja nem a mkd gnek szmban, hanem a korbban
rtelmetlennek tekintett repetitv szekvencikban keresend. A mkd gnek sem tekinthetk folyamatos DNS
szekvenciknak. Bennk kzbekeldtt, a gntermkben nem kifejezd szekvencik is tallhatk. Egy gn
tlagos mrete nagyjbl 1000 kilobzis, ami az Arabidopsis esetn a 15 000 gnt tekintve igen kismrtk
redundancit jelent. Hasonl okokbl vlt a genetikai kutatsok fontos alanyv a Drosophila s a Caenorhabditis
is. A nem kdol kzbekelt DNS szakaszai a gnnek az n. intronok, mg a kdol szakaszok az exonok. A gnek
5 irnyba es, nem kdol DNS szakai valsznleg a transzkripci regulcijban jtszanak szerepet, mg a 3
irny hasonl DNS szakaszok az trd mRNS mdostsban, a transzkripci meglltsban vesznek rszt, de
egyb szablyoz szerepk is lehet.
rRNS gn felptse.
35
Sejtmag
A gnek egy rsze nem csak egy kpiban van jelen, hanem repetitv szekvencik formjban tbbszrzdve. A
multiplikci nem mindig jelent teljes azonossgot, az ismtld szekvencik alkotta gncsaldok tagjai kztt
bizonyos fok eltrs is lehetsges. A tandem ismtld szekvencik alkotta gn klaszterek tagjai akr kln
szablyozs alatt is llhatnak. Jellemz, hogy az ilyen ismtld gnek nagy mennyisgben ellltand
gntermkeket kdolnak, mint pldul tartalkfehrjket, vagy a nvnyi Rubisco enzimet.
A magvacska
A sejtmag fnymikroszkppal is jl lthat rsze a magvacska, vagy nuklelusz. A nuklelusz elssorban a
riboszmlis RNS-ek szintzisnek a helye, de a riboszmk rszleges sszeszerelse is itt trtnik. Egy magban
tbb nuklelusz is lehet, szmuk sejttpusonknt is vltozik. A magvacsknak nincs membrnja. Az interfzisban
figyelhet csak meg, a profzis alatt lebomlik s a telofzisban jraszervezdik. A magvacska a kromoszmk n.
NOR, nuklelusz organizl rgija kr szervezdik, ugyanis ezek az rRNS tandem ismtld szekvencii.
A nuklelusz komponensei
A sejtmagvacska metszete (TEM).

A magvacsknak hrom szerkezeti elemt lehet elklnteni. Kvl tallhat granulris komponens (GC) melybe
gyazdik egy, vagy tbb kvlrl denz fibrillris komponenssel (DFC) burkolt fibrillris centrum (FC). A fibrillris
centrumban nincs RNS transzkripci, de inaktv DNS, klnbz fehrjk, enzimek kimutathatk. Maga a
transzkripci az FC perifrijn, illetve a denz fibrillris komponens terletn trtnik, s itt indul meg a keletkezett
pre-rRNS processzlsa. A kls granulris komponens (GC) terletn, mint arra a neve is utal elektronmikroszkpos
kpen nagyon sok szemcse figyelhet meg. Ezeknek a szemcsknek a mrete megfelel a riboszmk alegysgeinek.
A citoplazmbl a riboszmlis fehrjk a transzlcit kveten ugyanis visszaszlltdnak a sejtmagba, s a GC
terletn az ott lev rRNS-ekkel kialaktjk a riboszmk alegysgeit. Mivel a riboszmkat felpt egyik (5S)
rRNS nem a magvacska terletn szintetizldik, annak a nukleoplazmbl ide kell szlltdnia. A tbbi rRNS
szintzist a nukleluszban az rDNS szakaszokrl az RNS-polimerz I enzim vgzi, majd a pre-rRNS
feldarapoldsval (splicing) kialakulnak az eukaritkra jellemz 18S, 5,8S, s 28S rRNS-ek. A riboszmk
ezekbl az rRNS-ekbl s mintegy 30 klnbz fehrjbl plnek fel.
36
Sejtmag
A nuklelusz elektronmikroszkpos kpe nvnyi sejtben.

A DNS ketts hlix a sejtmagban meghatrozott szerkezetben helyezkedik el, ami biztostja az aktv szakaszokrl
trtn trdst s egyben a hossz (a humn DNS majdnem 2 m) DNS szl becsomagolst az 515 m-es
sejtmagba. A sejtosztds eltt, az S fzisban a DNS szlnak meg is kell duplzdnia, majd a sejtosztds sorn
szllthat kromoszmkk kell szervezdnie. A DNS szl kromoszmkk alakulsnak, kondenzcis szintjeinek
egymsra plst nevezzk a kromoszmk hierarchikus szervezdsnek. Kiindulva a DNS ketts hlixbl,
tekintsk t a csomagols egyes szintjeit a legkondenzltabb metafzisos kromoszma kialakulsig.
A DNS ketts hlix mintegy 2 nm tmrj, s a kromoszmk szmnak megfelelen tbb darabban helyezkedik
el a sejtmagban. A DNS hisztonfehrjkbl ll fehrjekomplexekre, n. nukleoszmkra tekeredik fel. Egy
nukleoszmn nagyjbl kt csavarulatot alkot, mintegy 166 bzisprnyi hosszban. Kt ilyen nukleoszmra
tekeredett szakasz kztt egy 20200 bzisprnyi tvezet, linker szakasz tallhat. A nukleoszmkat kt tetramer
fehrjekomplex alkotja, mindegyikben egy-egy H2A, H2b, H3, s H4 hisztonfehrje tallhat. A DNS szlat a
nukleoszmkon kvlrl a H1 hisztonfehrje stabilizlja. Az gy kialakult gyngyfzr szerkezet 11 nm tmrj.
Nukleoszmkra feltekeredett DNS szl

A nukleoszmlis fonal tovbb hajtogatdik, egy keresztmetszetben hatsugar n. szolenoid szerkezett, melynek
tmrje mr 30 nm. A hierarchia kvetkez lpcsje a szolenoidok hurokszer hajtogatdsa, amivel kialakul az
n. szupercoil amiben mr mintegy 700-szor annyi bzispr tallhat egysgnyi hosszban, mint a DNS szlban,
s tmrje mintegy 300 nm. A szupercoil tovbbi hajtogatdsval eljutunk a kromatidk szintjre, melyek kb
700 nm tmrjek. Az interfzisos sejtmagban a DNS kondenzcija a szolenoidbl ll szupercoil szinten van,
de ez teljes mrtkben meggtolja a transzkripcit. Az eukromatin aktv mkdshez ezt a struktrt fel kell
laztani, hogy a DNS az enzimek szmra hozzfrhet legyen. A szolenoid fellaztst a hisztonok acetillsval
vgzi a sejt, ekkor a szolenoidok fellazulnak, s a DNS gyngyfzr szerkezetet mutat. A transzkripcis faktorok
hatsra a DNS szl letekeredik a nukleoszmrol, s a transzkripci megindulhat. Ksrletileg bizonytjk, hogy
a mkd gnek DN-zzal knnyen emszthetv vlnak.
Elektronmikroszkpos vizsglatok azt mutatjk, hogy a hurokstruktra egy sokak ltal felttelezett magvzhoz
(nuclear scaffold, nuclear matrix) kapcsoldik a DNS AT gazdag SAR (scaffold associated region) vagy MAR
(matrix associated region) rgijnak segtsgvel. Br molekulris biolgiai s citokmiai adatok is szlnak a
magvz ltezse mellett, szerkezett nem ismerjk, s egyelre elg sokfle fehrje kerlt az azt felpt jelltek
kz (tbbek kztt laminok is). Az elektronmikroszkpos eredmnyek is szrmazhatnak fehrjk precipitcijbl.
37
Sejtmag
A kromoszma hierarchikus szervezdse
A lamina
A sejtmag bels felsznn intermedier filamentumokbl ll 30100 nm vastag rteg alakul ki. A lamina a
membrnhoz s a DNS llomnyhoz (elssorban a heterokromatinhoz) is kapcsoldik. A magprusok terletn a
lamina megszakad, de kimutattk kapcsoldst a prus komplexhez is. A lamint klnbz tpus lamin fehrjk
alkotjk, melyek az intermedier filamentumok kz tartoznak. A lamin fehrjk kzps rgija heliklis szerkezet,
vgei pedig globulrisak. A heliklis szakaszon a fehrjk egymsra csavarodva dimereket alkotnak, melyek
ellenttes polaritssal tetramerekk llnak ssze. A tetramerek vgeikkel sszekapcsoldva filamentumokat
kpeznek. A lamin fehrjken kt foszforilcis hely tallhat, mely fontos szablyozsi lehetsget biztost. A
laminok foszforillsa ugyanis a polimer sztesshez vezet, defoszforillsa pedig polimerizcihoz. Ez fontos
szablyoz folyamat a laminvz s ezzel a maghrtya sztszerelsben a mitzis sorn. A laminvz a nvnyekben
nem tallhat meg, itt ms, laminhoz hasonl szerkezet, de nagyobb mret fehrjk alkotnak a nukleris laminhoz
hasonl szerkezetet.
A magprus komplex
A sejtmaghrtyn a kt membrnt sszekapcsol prusok alakulnak ki sszekapcsolva a mag bels tert a
citoplazmval. A magprusok szma a sejt aktivitsnak fggvnye. A prusok nem egyszer lyukak a ketts
membrnon, hanem bonyolult szerkezet prus komplexek, melyek tbb mint 50 fle, sszefoglal nven
nukleoporinoknak nevezett fehrjbl plnek fel. A citoplazma s a mag felli membrnrszen a prust gyr
alakban elhelyezked fehrjk vezik, de a kzps rszen is kialakul egy hasonl gyr. A citoplazmatikus
gyrbl 8 filamentum nylik a citoplazmba, mg a msik oldali, nukleris gyrbl 8 merev rd s az ket
sszekapcsol fehrjk egy nukleris kosr elnevezs kpletet alaktanak ki.
38
Sejtmag
Magprus komplex hosszmetszeti rajza.

A magprusokon keresztl trtnik a nukleocitoplazmatikus transzport, enzimek, transzkripcis faktorok,
riboszmlis fehrjk importldnak a citoplazmbl a magba, s RNS-ek, riboszma alegysgek stb. exportldnak
a magbl a citoplazmba. Ennek a transzportnak a kivitelezst a prus komplex vgzi. A mag membrnjn tallhat
prusok szma a transzport folyamatok mrtknek megfelelen dinamikusan vltozik. A prus komplex szoros
kapcsolatban ll a membrn alatti laminval. A prusok az osztds prometafzisban sztesnek, s a telofzisban,
a magmembrn felplsvel jjszervezdnek.
Magprus (piros nyl) keresztmetszeti kpe TEM fotn.
Magprus (piros nyl) rintleges metszetnek kpe TEM fotn. A piros nyilak mutatjk a magprusok helyt.
Transzport a sejtmag s citoplazma kztt

A sejtmag membrnnal val elklnlse az eukarita sejtekben szksgess tette a kt kompartimentum kztti
anyagtranszportot. Mivel a maghrtyn csak kevs apolros anyag (pl. szteroidok) kpesek tolddni, az anyagok
dnt tbbsgnek a magmembrn prusain keresztl kell kzlekedni. Ez a transzport zmben aktv transzport,
csak az egszen kis (<2030 kD) fehrjk juthatnak be passzv transzporttal. A magprusokon igen aktv szllts
folyik, egy-egy prus komplexen percenknt tbb szz fehrje, RNS halad t, mghozz mindkt irnyban. A
39
Sejtmag
fehrjk sejtmagba trtn szlltsa egy szignlszakasznak, a nukleris lokalizcis szignlnak (NLS) a megltn,
vagy pontosabban exponltsgn mlik. Az NLS egy klnleges szignl szakasza a fehrjknek, mivel nem a C,
vagy az N terminlison tallhat, hanem a fehrjeszakasz bels rszn. Ennek az is a kvetkezmnye, hogy nem
vghat le a fehrjrl, rkre rajta marad, legfeljebb maszkolhat, hogy a receptorok ne frjenek hozz. Az NLS
szakasz mindssze 7 aminosavbl ll. Ma mr tbbfle import rendszerrl tudunk, de a legismertebb az NLS
szignlon alapul.
Az NLS szignlt felismeri egy receptor az importin-, majd ezt a receptorszubsztrt kapcsolatot az importin-.
Ezen a molekuln keresztl a komplex a magprus citoplazmba nyl fibrillumaihoz kapcsoldik, s ezen jut el
a tulajdonkppeni prushoz. A transzlokcihoz azonban szksg van tovbbi fehrjkre is. Ezek egyike a RanGTP/GDP, mely egy guanizin nukleotid kt fehrje, amelyik GTP-z aktivitssal rendelkezik. A korbbi
elkpzelssel ellenttben azonban nem a GTP hidrolzise az energiaforrsa a transzportnak, ehhez ATP szksges.
A Ran-GTP/GDP tulajdonkppen arrl ad informcit, hogy a transzlokland komplex a citoplazmban van-e,
vagy mr bejutott a magba. Az alcsony Ran-GTP szint a citoplazmai lokalizcit jelzi. A szubsztrt (cargo)
importin komplex tszlltdik a prus komplexen s bejut a magba. Ugyanez trtnik a Ran-GDP molekulkkal
is.
Fehrjeimport a sejtmagba.
A sejtmagban a Ran-GDP-hez egy ott lokalizld enzim csatlakozik, az RCC (RAN nukleotid kicserl faktor),
mely a Ran-GDP-t RAN-GTP-v alaktja. Ez hozzkapcsoldik az importin-cargo fehrje komlexhez, s ettl a
komplex disszocil. Az importin s a Ran-GTP visszajut a prusokon t a citoplazmba. A citoplazmban a RanGTP egy Ran-GAP (Ran-GTP-z aktivl protein) hozzkapcsoldsnak hatsra Ran-GDP-v alakul a GTP
hidrolzise rvn. A Ran-GDP levlik az importin molekulkrl majd a Ran-GDP visszajut a pruson t a sejtmagba.
Fehrje, illetve RNS export a sejtmagbl.
40
Sejtmag
A magbl a citoplazmba irnyul exportfolyamatok egy rszt az importin receptorhoz nagyon hasonl exportin
molekulk vgzik. k egy msik, az NLS-hez hasonl szignlt, a nukleris export szignlt (NES) ismerik fel, s
Ran-GTP-hez kapcsoldva exportljk a kttt fehrjt. A Ran teht GTP vagy GDP kttt llapota szerint vagy
a magban, vagy a citoplazmban tallhat, s GTP kttt formban a transzporter molekulval kapcsolatba lpve
induklja a transzlokcit a magpruson keresztl a citoplazmba.
Egy molekula, ha rajta lokalizcis szignl tallhat mindenkppen tszlltdik a megfelel kompartmentbe.
Vannak olyan szablyoz rendszerek, melyek a lokalizcis szignl elfedsvel, vagy szabadon hagysval
szablyozzk egy fehrje (pl. transzkripcis faktor) bejutst a sejtmagba. Ez trtnhet az NLS szakasz tnyleges
lefedsvel, vagy foszforilcijval is, ami az NLS inaktivldst eredmnyezi.
Az RNS molekulk fehrjkhez kapcsoldva szlltdnak, ezeken tallhat ugyanis az export szignl.
Krdsek:
1. Mi az eukromatin, s a heterokromatin?
1. Mi a NOR?
2. Milyen funkcija van a magvacsknak?
3. Mibl ll a nukleoszma?
4. Mire szolglnak a hiszton fehrjk?
5. Mi az intron s az exon?
6. Mi a neve a sejtmag membrn alatti vznak?
7. Hogyan jutnak t a sejtmag ketts membrnjn a nem lipidoldkony molekulk?
8. Hol tallhat az NLS, mit jelent a rvidts?
9. Milyen mdon rzkeli az importin transzport rendszer, hogy a citoplazmban, vagy a sejtmagban van?
41
6. fejezet - Gnkifejezds; A
riboszmk szerkezete s mkdse
Gnkifejezds az a soklpcss folyamat, melynek sorn a gnben rejl informci megjelenik valamilyen fehrjben
vagy RNS-ben, s ennek eredmnyeknt a sejt szerkezete/funkcija megvltozik.
A gnek egy rszt, az n. hztartsi gneket, melyek az alapvet anyagcsere-folyamatok enzimjeit, a membrnok,
a vz fehrjit, teht a minden sejtben kzsen elfordul fehrjket kdoljk, a sejtek llandan kifejezik. A
gnek egy msik jelents rsze szvetspecifikus fehrjk szintzist irnytja. Ezek, br gnjeik minden sejtben
jelen vannak, csak a rjuk jellemz szvetflesg sejtjeiben fejezdnek ki, mkdsk differencilt sejtpopulcik
kialakulst eredmnyezik. Vltozhat a gnexpresszi idben is: a szervezet fejldse sorn ms s ms gnek
kerlhetnek aktv vagy represszlt llapotba. A gnexpresszi pontosan s bonyolult mdon, tbb szinten
szablyozdik.
A gnexpresszi kulcslpse az trs (transzkripci), s ez egyben a legfontosabb szablyozsi pont is. Az trst
az elsdleges RNS-tirat feldolgozsa, mdostsa, majd az rett RNS transzportja kveti a maghrtya prusain
t a citoplazmba. A gnexpresszi tbb ponton befolysolhat. Nem vletlenszer, hogy a citoplazmba kerlt
sokfle mRNS kzl melyikrl, mikor s hnyszor trtnik transzlci, eloszlsuk, degradcijuk sebessge szintn
befolysolja a szintetizlt fehrjk mennyisgt, lokalizcijt.
Transzkripci Az trs
Az eukarita sejtekben az trst hromfle RNS-polimerz vgzi. Az RNS-Pol.I. a magvacskban lokalizldik
s a riboszomlis RNS-molekulkat szintetizlja. Az RNS-Pol.II. s RNS-Pol.III. a nukleoplazmban lokalizldik,
az elbbi a mRNS-ek elsdleges tiratait, az utbbi a tRNS-eket szintetizlja.
A Pol.II. spontn nem tud a DNS-szlhoz ktdni, ehhez szablyozfehrjk, a transzkripcis faktorok
szksgesek. Ezek egy rsze ltalnos jelleg, minden fehrjekdol gn trsban kzremkdnek (n. ltalnos
transzkripcis faktorok). Msik rszk specifikus szablyozfunkcit lt el, egy adott gn vagy gncsoport mkdst
befolysolja. A transzkripcis faktorok a gn regulcis rgijban lev bzisszekvencikat ismerik fel, s azokhoz
ktdnek. Ilyen szakasz a promoter, mely az ltalnos transzkripcis faktorok s a Pol.II. sszeszereldsnek a
helye. A promoter a starthely (a fehrjt kdol kezd szekvencia) eltt tallhat s igen gyakran egy jellegzetes
adenin-timin-bzisokbl ll sorozat, az n. TATA-boksz fordul el benne. Ez utbbit ismeri fel a TBP (TATAbox binding protein) nev fehrje, amelyhez ezutn tbb faktor s a Pol.II. is kapcsoldik. Az gy kialakult inicicis
komplex kb. 50 klnbz fehrjekomponensbl ll. Azon tl, hogy pontosan a starthely el helyezi a Pol.II-t,
egyes komponensei enzimaktivitssal is rendelkeznek. gy pl. ATP-z-aktivitssal, mely elsegti a DNS kt
szlnak az trshoz szksges sztnylst, hiszton-acetilz-aktivitssal, mely a nukleoszms szerkezet
fellazulst eredmnyezi az aktv gnben s kinzaktivitssal, mely a Pol.II-t foszforillja. A Pol.II. foszforillt
formjban vlik el az inicicis komplextl s kezdi meg az trst.
Az inicicis komplex kialakulsa szksges, de nem elgsges felttele az trsnak. Mivel ez mindentt kialakulhat,
ahol a promoter szerkezete lehetv teszi a bazlis transzkripcis faktorok sszeszerelst, nmagban nem
hatrozza meg, hogy melyik gn s mikor rdjon t. A transzkripci elindtshoz specifikus szablyozfaktorok
(specifikus transzkripcis faktorok) jelenlte is szksges. Ezek vltozatos szerkezet fehrjk, de kzs
tulajdonsguk, hogy DNS-kt s trst aktivl vagy gtl domnnel rendelkeznek. A DNS-kt rsz ismeri fel
a gn spcifikus szablyozszakaszait, az gynevezett enhancer szekvencikat, melyek a promotertl gyakran
igen messze tbb ezer bzisprnyi tvolsgban helyezkednek el. Ezt kveten az aktivl rsz kontaktusba
kerl ms kzvett fehrjkkel s ezek kzvettsvel az inicicis komplexszel, aminek hatsra a Pol.II. megkezdi
az trst. A promotertl messze bektd szablyozfaktorok a DNS hurkos szerkezete miatt kerlhetnek fizikai
kontaktusba a promoter kr szervezdtt faktorokkal. A specifikus szablyozfehrjk kztt nemcsak aktivtorok,
hanem represszorok is tallhatk.
A specifikus szablyozfaktorok aktivitst, lokalizcijt a sejtet r kls jelek, hatsok szablyozzk. Ilyen jel
lehet pl. valamilyen hormon. Mivel egy-egy gn szablyozrgijban tucatnyi kthely lehet specifikus aktivl
42
Gnkifejezds; A riboszmk szerkezete s mkdse
s gtl faktorok szmra, s ezek aktivitst szmtalan kls jel befolysolja, a lehetsges kombincik szma
is igen nagy.
A gnkifejezds szablyozsban jelents szerepe van a kromatinllomny szervezdsnek is. A mitotikus
kromoszmkban vagy a heterokromatinban nincs transzkripci, mert a szorosan feltekeredett DNS-molekulkon
a promoter rgik s a specifikus szablyozszekvencik nem hozzfrhetk a transzkripcis faktorok szmra.
A nukleoszms szerkezet maga is nehezti, ha nem is gtolja meg teljesen az trst. A transzkripci szablyozsnak
egy fontos tja a nukleoszmk hisztonjainak kmiai mdostsa, melyet specilis enzimek, pl. hisztonacetiltranszferzok, metiltranszferzok, dezacetilzok vgeznek. Aktv kromatinban a hisztonok acetilldsa
figyelhet meg, ami cskkenti pozitv tltsket, s gy kapcsolatuk a negatv tlts DNS-szlakkal fellazul. A
fellazult kromatinszerkezet nemcsak a hozzfrhetsget nveli, hanem a hurkok, hajtszer kitremkedsek
kpzdst is lehetv teszi, ami viszont felttele annak, hogy a tvoli szablyozrgikon megkttt transzkripcis
faktorok rintkezsbe kerljenek a promoteren sszeszerelt inicicis komplexszel. A hiszton dezacetills, metills
ltalban ellenttes hats: kompakt, heterokromatikus, az trst gtl kromatin szerkezet alakul ki. Az RNS-k
egy msik specilis csoportjnak, az gynevezett kis nemkdol antiszensz RNS-knek szintn jelents szerepe
van a gnexpresszi szablyozsban.
A DNS kmiai mdostsa is a transzkripci szablyozsnak egy fontos lehetsge. A sejtekben kimutathat
egy metill enzim, amely a DNS-molekulban elfordul citozinokat t tudja alaktani 5-metilcitozinn, ha azok
citozin-guanin (CG) szekvenciban fordulnak el. A DNS-metills a gnek inaktivldsval jr egytt.
A gnexpresszi specifikus aktivldsa vagy gtlsa mr az egyedfejlds korai szakaszaiban megfigyelhet.
Ennek egyik oka az, hogy a petesejt citoplazmjban a transzkripcis faktorok mRNS-einek, kvetkezskppen
fehrjetermkeiknek eloszlsa sem egyenletes, ezrt mr a barzdlds sorn eltr transzkripcisfaktor-kszlettel
br sejtek jnnek ltre, melyekben a gnkifejezds is eltr lesz. A fejlds ksbbi szakaszaiban a gnkifejezds
klnbsgei ersdnek, s kialakulnak a differencilt, valamilyen specilis funkci elltsra szakosodott sejtek.
A szomatikus sejtek differencilt llapotukat folyamatosan fenntartjk s az osztdsuk sorn utdsejtjeiknek is
tadjk (fibroblasztbl mindig fibroblaszt keletkezik, mjsejtbl mindig mjsejt stb.). Ezt a jelensget
sejtemlkezetnek is nevezik, s lnyege az, hogy a szomatikus sejtek utdaikra nemcsak gnkszletk (DNSmolekulik) teljes msolatt, hanem jellemz gnexpresszis mintzatukat is t tudjk rkteni.
A szlsejt DNS-nek metilcis mintzata (az 5-metilcitozin bzisok eloszlsa) szintn taddik az utdsejtnek,
s ez a gnek represszlt llapotban tartsnak egyik lehetsges mechanizmusa.
Az RNS feldolgozsa
A transzkripci termke hossz, ltalban tbb ezer bzisbl ll RNS-molekula, az n. elsdleges tirat formjban
jelenik meg a nukleoplazmban, s mr rviddel a szintzise utn megindul feldolgozsa. A feldolgozs egyik
fontos lpse a kivgs-sszeilleszts (splicing), melyet specilis RNS-bl s fehrjkbl ll rszecskk
(spliceosoma) katalizlnak. A fehrjekdol gnek mozaikos szerkezetek: az aminosavak sorrendjt meghatroz
bzisszekvencik (exonok) kz bekeldnek fehrjt nem kdol szakaszok, az intronok. Az elsdleges tirat
tartalmazza mind az exon-, mind az intronszekvencik teljes komplementer msolatt. A splicing sorn az intronok
kivgdnak, s a szomszdos exonok sszekapcsoldnak. gy egy ersen megrvidlt tirat jn ltre, a kivgott
intronok degradldnak. A feldolgozs sorn mdosul az tirat kt vge is, az 5 vgre metillt guanin, a 3 vgre
200300 adenilnukleotid (polyA) rakdik r. A vgmdosulsok a molekula stabilitst, transzportlhatsgt
szablyozzk. E folyamatok vgtermke az rett mRNS, amely azutn a citoplazmba ramlik. A kivgssszeilleszts kvetkeztben egy gnrl tbbfle mRNS is keletkezhet (ezek klnbzhetnek pl. abban, hogy egyes
exonok kimaradhatnak az egyik, vagy msik vltozatbl, vagy a sorrendjk megvltozhat az illeszts sorn). A
jelensget alternatv splicing-nek nevezik s azt eredmnyezi, hogy egy gn tbbfle (egyes esetekben tbb ezer)
fehrje vltozatot is kdolhat. Az alternativ splicing a differencilt llapot kialaktsnak s fenntartsnak fontos
mechanizmusa.
43
Az alternatv splicing.
A transzlci, a riboszmk szerkezete,

mkdse
Transzlcinak azt a folyamatot nevezzk, melynek sorn a mRNS bzissorrendjben rejl informci
felhasznlsval meghatrozott aminosav-sorrend fehrje szintetizldik. A transzlci a riboszmk felsznn
megy vgbe. A riboszmk kb. 2530 nm tmrj, megkzeltleg gmb alak rszecskk. Egy tlagos sejtben
tbb milli pldnyban fordulnak el, rszben szabadon a citoszolban, rszben az endoplazmatikus retikulum
membrnfehrjihez ktdve. Tmegk tbb mint felt RNS-ek (riboszomlis RNS-ek, rRNS), msik rszt
fehrjk alkotjk. Minden eukarita riboszma egy kisebb (40S) s egy nagyobb (60S) alegysgbl ll (a riboszmk
s alegysgeik centrifuglssal vlaszthatk el a tbbi sejtorganellumtl, az S rtk az lepeds sebessgt
jellemz mutat, arnyban ll a rszecske tmegvel). A prokaritk riboszmi hasonl szerkezetek, de kevesebb
RNS-t s fehrjt tartalmaznak, ezrt ssztmegk is kisebb.
A riboszma kpes az mRNS-hez ktdni, s rendelkezik kt kthellyel a tRNS-ek szmra is (n. A-aminoacilhely az aminosavakat szllt tRNS-ek, s P-peptidil-hely a nvekv peptidszlat hordoz tRNS szmra).
Bizonyos felttelek mellett a riboszma, nagyobbik alegysgn keresztl, az endoplazmatikus retikulum
membrnjaihoz is hozzktdhet.
A polipeptid bioszintzis alapfelttele, hogy a tRNS molekulk feltltdjenek a nekik megfelel (specifikus)
aminosavakkal, vagyis hogy ATP felhasznlsa mellett megszintetizldjanak az aminoacil-tRNS molekulk. A
szorosabb rtelemben vett transzlci hrom szakaszra bonthat folyamatsor, mely a lnckezd (inicicis)
komplex kialakulsval indul Ehhez a riboszmnak alegysgeire kell disszocildnia. A komplex az mRNS 5
vgnek kzelben elhelyezked AUG start kodon kr szervezdik s a kis alegysgbl, az els aminosavat (ez
metionin) hordoz tRNS-bl, az mRNS-bl, valamint a citoszolbl felvett fehrjkbl (inicicis faktorok) ll. Az
inicici msodik lpseknt a nagyobbik alegysg rktdik az inicicis komplexre: sszell a mkdkpes
riboszma. A lnchosszabbts (elongci) hromlpses folyamat, melynek sorn az jabb aminosav az Ahelyre belpve kapcsoldik az mRNS-hez, majd ltrejn a peptidkts az elz aminosav karboxi csoportjval,
s vgl a riboszma egy kodonnal thelyezdik (tovbb lp). A lnchosszabbts elongcis faktorokat ignyel
a citoszolbl. jabb s jabb aminosavak plnek be a peptidlncba, mikzben a riboszma vgighalad az mRNSen 53 irnyban. Egy-egy aminosavat az mRNS-en egy-egy bzishrmas (triplet) kdol, melyet az aminosavat
hordoz tRNS-en lev komplementer bzishrmas (antikodon) ismer fel. A nvekv lnc a nagyobbik alegysgben
a P-helyrl nyl csatornn (exit tunnel) keresztl toldik ki a riboszmbl A lnchosszabbts sorn a riboszma
elri az mRNS 3 vgnek kzelben elhelyezked stop kodont (UAG , UGA vagy UAA bzishrmas). Itt lell
a szintzis (terminci), a peptidlnc levlik a riboszmrl, mely kis s nagy alegysgre disszocil, s maga is
levlik a mRNS-rl.
A fehrjeszintzis egyike a legenergiaignyesebb folyamatoknak: minden egyes aminosav beptse 4 nagy energij
foszftkts (1 ATP, 3 GTP) hastsval jr. Egy tlagos mret (kb. 200400 aminosavbl ll) fehrje szintzise
eukarita riboszmkon kb. 1 perc alatt megy vgbe. A szintzis intenzitst a sejt gy fokozza, hogy egy-egy
mRNS-en egyidejleg tbb riboszma is vgez leolvasst, egyms utn haladva az 53 irnyba. Az egy mRNSre felfztt riboszmacsoportot poliriboszmnak (poliszmnak) nevezik. A poliszmk klnsen gyakoriak
intenzv fehrjeszintzist folytat sejtekben.
44
A riboszomlis RNS-ek szintzise s a riboszma-alegysgek sszeszerelse a magvacskban trtnik, innen

vndorolnak azutn a citoplazmba. Az rRNS-gnekre ltalban jellemz, hogy nagyszm kpiban (humn
diploid sejtekben pl. 400 pldnyban) vannak jelen. Szmos faj, gy pl. ktltek oocytiban az rRNS-gnek extrm
nagy szmban, 12 milli pldnyban jelennek meg a sejtmagban. Ez teszi lehetv, hogy a petesejt citoplazmjban
viszonylag rvid id alatt nagy mennyisg tartalk fehrje s riboszma halmozdjon fel.
Szmos olyan vegyletet ismernk, melyek a riboszmamkds akadlyozsn keresztl gtoljk a fehrjeszintzist.
gy pl. a sztreptomicin s szrmazkai gtoljk az inicicit s hibs leolvasst okoznak, a tetraciklin az aminoaciltRNS bektdst akadlyozza, a kloramfenikol a peptidkts kialakulst gtolja. Mivel hatsukkal szemben a
prokarita riboszmk rzkenyebbek, mint az eukarita riboszmk, alkalmazhatk bakterilis fehrjeszintzis
szelektv gtlsra s ezen keresztl a fertzs lekzdsre.
A transzlci szablyozsban nagy szerepe van az RNS- molekulk klnleges csoportjainak, a kis nemkdol
RNS-eknek. Ezek viszonylag rvid (2025 nukleotidbl ll) lncok. Tbb vltozatuk ismert, melyek kzs
tulajdosga, hogy bzisszekvencijuk komplementer valamilyen mRNS bzis-sorozatval, ezrt azt fel tudjk
ismerni s a bzis prosods szablyai szerint hozzktdnek. Hosszabb prekurzorok formjban rdnak t a
genom klnbz helyeirl, majd egy ribonuklez rvid, 2025 bzis hosszsg szakaszokra hastja ket, melyek
azutn specilis fehrjkhez ktdve gynevezett csendest komplexeket kpeznek. Az elnevezs arra utal, hogy
ezek hozzktdnek egyes mRNS-khez s gy megakasztjk azokrl az trst, vagy kivltjk az adott mRNS
degradcijt. A hats specifikus: csak azon mRNS-k transzlcijt gtoljk, melyekkel szemben a komplementarits
fennll.
Ahhoz, hogy a fehrjk funkcijukat teljesteni tudjk, a rendeltetsi helykre kell kerlnik. Mivel a sejt riboszmapopulcija egyidejleg tbb szz tbb ezer klnbz fehrjt szintetizl, ez csak akkor lehetsges, ha vlogatsi,
clbajuttatsi lpsek kvetik a szintzist. A szintzis sorn a fehrjkbe rvid aminosav-sorozatokbl ll vlogatsi
jelek plnek be, melyeket jelfog molekulk ms fehrjk ismernek fel, s a jeljelfog klcsnhats hatrozza
meg az adott fehrje lokalizcijt. Ha egy fehrjn semmifle vlogatsi jel nincs, a citoszolba kerl s ott is
marad (pl. vzfehrjk, glikolitikus enzimek). A citoszolba kerl fehrjk ms csoportjai vlogatsi jeleket
hordoznak, s ezek irnytsval a magba (NLS segtsgvel), a mitokondriumokba vagy a peroxiszmkba
transzlokldnak. A klvilg szmra kszl vladk- (szekrcis) fehrjk, valamint a vakuolris appartus
membrnfehrjinek sorst szintn specilis vlogatsi jelek determinljk. Ezek a fehrjk nem jutnak a citoszolba,
hanem mr szintzisk korai szakaszban az endoplazmatikus retikulum regrendszerbe lpnek, s innen
vndorolnak a vakuolris appartus klnbz tereibe, ill. a klvilgba.
Krdsek:
1. Definilja a genetikai appartus fogalmt!
2. Definilja a hztartsi gn fogalmt?
3. Milyen f lpsekbl ll a gnkifejezds?
4. A DNS-metilci milyen hatst gyakorol a gnek mkdsre?
5. Mi a klnbsg az elsdleges tirat s az rett mRNS kztt?
6. Vzolja fel a splicing s alternatv splicing folyamatt!
7. Milyen rszfolymatokbl ll a transzlci?
8. Milyen komponensek alkotjk az inicicis komplexet?
9. Milyen f lpsekbl ll az elongci?
10. Mi a terminci?
11. Milyen struktra a poliriboszma?
12. Mi a kis nemkdol RNS molekulk lehetsges szerepe?
45
7. fejezet - Az endoplazmatikus
retikulum
Az endoplazmatikus retikulum (ER) egymssal sszefgg lapos zskokbl, ciszternkbl, csvekbl ll, nagy
kiterjeds regrendszer, melyet kb. 6 nm vastagsg hrtya hatrol. Fejlettsge, kiterjedse sejttpustl, mkdsi
llapottl fggen vltozik. Szerkezet s mkds szempontjbl kt rszre vlaszthat: a durva felszn ER-re
(RER) s a sima felszn ER-re (SER). Az elhatrolds nem les, a kt rsz membrnjai tmennek egymsba s
regrendszerk kzs. A DER membrnjnak citoplazmatikus felsznn riboszmk tallhatk (errl kapta
elnevezst), a SER felsznn nem.
Az endoplazmatikus kompartimentumot ultracentrifuglsos mdszerekkel mikroszma frakciknt lehet
elklnteni a sejt egyb organellumaitl.
Durvafelszn endoplazmatikus retikulum (DER)

A DER nevt a membrnjainak citoszol fel nz oldaln riboszmk helyezkednek el, emiatt felszne szemcss,
rdes. A DER a nagy mennyisg vladkfehrjt termel sejtekben klnsen fejlett (pl. hasnylmirigy, mj,
neuronok), ezekben a sejtekben szmos, szorosan egyms mell rendezdtt ciszternbl ll, gyakran a sejtmag
krl helyezkedik el, membrnja folytonos a kls maghrtyval, lumene a perinukleris trrel.
DER ciszternk jellegzetes elrendezdse.
DER ciszternk fagyasztvatrses prepartumrl kszl fotn. A ciszternkon keresztbe futott a trs, gy
keresztmetszetben lthatk.
A DER f funkcija az integrns membrnfehrjk, a lizoszomlis s a vladkfehrjk szintzise, mdostsa,
vlogatsa s szlltsa. E fehrjket az klnbzteti meg a szabad riboszmkon szintetizldktl, hogy a mRNS
elejn, az inicitor (AUG metionin) kodon utn egy kb. 530 aminosavbl ll szakasz kdsorozat, az n.
szignlszekvencia helyezkedik el.
Az inicicis komplex kialakulsakor s az elongci els lpseinl a riboszma nincs a DER-hez ktve, azaz a
fehrjeszintzis szabad riboszmn indul meg. A leolvass sorn a szignlszekvencinak megfelel szignlpeptid
szakasz megszintetizldik s hamarosan megjelenik a riboszma felsznn.
Szignlpeptid van minden kttt riboszmn szintetizld fehrje N-terminlisn. A legtbb szignlpeptid egy
vagy tbb pozitv tlts aminosavval (rendszerint lizin) kezddik, nagyobb rszt apolros aminosavak (leucin,
valin, alanin) alkotjk. Az apolros aminosavlnc egyszer alfa-hlix szerkezet kialakulst teszi lehetv.
46
Az endoplazmatikus retikulum
Apolros aminosavlnc alkotta alfa-hlix trbeli modellje.

A szignlpeptidet egy specilis, hat fehrjbl s egy RNS-bl ll komplex, az SRP (szignlfelismer rszecske
= signal recognition particle / SRP ) felismeri, ktdik hozz s a riboszmhoz. Az SRPriboszma komplex
kialakulsa hatsra a fehrjeszintzis felfggesztdik. A ktsben lv SRP kapcsoldni kpes a DER
membrnjaiban tallhat SRP-receptorhoz (dokkol fehrjhez). A riboszmt, pontosabban annak nagyobbik
alegysgt a szintetizld fehrje DER membrnon val tjutst lehetv tev transzlokcis prust, a
transzlokont kialakt fehrjk ktik meg. Ezt kveten az SRP levlik s jabb szignlpeptid ktsre ksz
llapotban a citoszolba kerl (SRP-ciklus). Az SRPriboszma komplex kialakulsa, membrnhoz ktdse, majd
az SRP disszocicija nem spontn, hanem tbb molekula GTP lebontsval jr, energiaignyes folyamat (az
SRP s receptora is GTP, GDP kthelyekkel s GTPz aktivitssal rendelkezik).
Gnter Blobel (1936) nmet-amerikai biolgus; 1999-ben fiziolgiai s orvostudomnyi Nobel-djat kapott a
szignlelmlet megalkotsrt.
Az SRP levlst kveten a fehrje szintzise folytatdik. A szignlpeptid hidrofb szakasza a transzlokcis
komplexbe pl, s a hosszabbod peptidlnc a transzlokonon keresztl becsszik a DER regbe vagy bepl
annak membrnjba.
Az integrns membrnfehrjk mRNS-ei a szignlszekvencin kvl (membrndomnjaik szmtl fggen)
egy vagy tbb tovbbi, n. stop-transzfer s start-transzfer szekvencikat tartalmazhatnak. A stop-transzfer
szekvencinak megfelel peptidszakasz (membrn horgony) szintzis kzben elrve a transzlokont, meglltja a
peptidlnc tcsszst a RER regbe, kihorgonyozza a fehrjt a membrnba. A start-transzfer hatsra a citopazma
felli oldalon nvekv fehrjelnc hurkot kpezve jra kapcsoldik a transzlokonhoz, gy a start-transzfer
szekvencirl szintetizld peptidszakasz ismt kihorgonyzdik a membrnba, s a peptidlnc tovbbi rszei
jfent becssznak a transzlokonon a DER lumenbe.
A DER-en szintetizld fehrjk (pl. vladkfehrjk, lizoszomlis fehrjk) vlogatsa, elklntse a citoszol
fehrjitl a szintzis kezdetekor megtrtnik, az ehhez szksges jelet az mRNS (vagyis vgs soron az adott
fehrje gnje) tartalmazza, a jel azonostst az SRP s a DER membrnjaiban lev receptorfehrjk vgzik.
Mr a szintzis sorn megindul a DER regbe becssz fehrje tovbbi feldolgozsa, mdostsa (kotranszlcis
mdosts). A DER-membrn bels, lumen felli oldaln lokalizld szignlpeptidz eltvoltja a szignlpeptidszakaszt, mely a citoszolba kerlve proteaszmban degradldik.
Az oligoszacharid-transzferz meghatrozott mintzat, 2 N-acetil-glkozaminbl, 9 mannzbl s 3 glkzbl
ll oligoszacharid oldallncokat kapcsol a fehrjhez, az aszparagin aminosav aminocsoportjra ktve
(N-glikozilci). Br az oligoszacharid oldallncok talaktsa mr az DER-ben megkezddik (nhny
monoszacharid egysg vgdik le), az eredmny mgis egysges, nem specifikus glikozilcis mintzat kialakulsa.
Az oligoszacharid mintzat egyedi mdostsa a Golgi-kszlkben zajlik.
47
A DER regben trtnik a fehrjk korrekt trszerkezetnek (a peptidlnc feltekeredse, hajtogatdsa) kialaktsa
is, mely specilis fehrjk (dajkafehrjk vagy chaperonok, hsokkfehrjk) segtsgvel trtnik (a hsokk
elnevezs arra utal, hogy e fehrjk mennyisge a sejtben hkezels s ltalban stresszhats utn megn). A
fehrjk natv szerkezetnek kialaktsban szmos enzim vesz rszt. Ilyen pl. a protein diszulfid izomerz (PDI),
mely a szabad SH csoportokhoz ktdve diszulfidktseket alakt ki.
A megfelel trszerkezettel rendelkez fehrjk vezikulris transzporttal kerlnek a Golgi kszlkbe, ahol tovbbi
feldogolzsukra s vlogatsukra kerl sor. Az ER sajt lumenlis- s membrnfehrji ltalban a peptidlnc
C-terminlisn egy specilis, ngy aminosavbl ll, n. ER retencis (visszatart) szignlt tartalmaznak, amely
hatsra e fehrjk el sem hagyjk az ER terlett vagy a Golgi cisz oldalrl visszavlogatdnak.
A DER-ben mkdik egy minsgellenrz rendszer, az n. endoplazmatikus retikulum asszocilt degradcis
tvonal (ERAD). A hibs, rosszul hajtogatdott, retlen oligoszacharid oldallnc, szabad (diszulfid-hd
kialaktsban rszt nem vev) ciszteint tartalmaz, nem megfelel trszerkezet fehrjk transzlokcis pruson
keresztl visszaramlanak a citoplazmba ahol a proteaszmkban lebomlanak. Az ellenrz rendszer
enzimkszletben vannak dajkafehrjk is, amelyek nemcsak felismerik a fehrjk hibs szerkezeti elemeit, de
megprbljk azokat korriglni is. A vglegesen javthatatlan fehrjk egy specilis transzmembrn fehrjekomplex
kzvettsvel kerlnek ki a citoszolba. Itt egy enzimkomplex poliubikvitin jellssel ltja el a hibs fehrjket,
melyek vgl a proteaszmban bomlanak le.
Simafelszn endoplazmatikus retikulum (SER)

A SER a fehrjeszintzisben nem vesz rszt, mivel membrnjaibl hinyoznak a riboszmakt, dokkol s
transzlokon fehrjk. Mind a DER, mind a SER kzs funkcija viszont a membrnlipidek szintzise, tovbb
a citoszol Ca++-koncentrcijnak szablyozsa. Ez azrt lehetsges, mert regrendszerkben Ca++-kt fehrjk
lokalizldnak, membrnjaik pedig Ca++-pumpt (Ca++-ATP-zt), ill. Ca++-csatornkat tartalmaznak. A Ca-ionok
n. msodlagos hrvivknt fontos szerepet jtszanak szmos jeltviteli folyamatban.
A SER feltagold lapos zskokbl, de nagyobb rszt elgaz s sszeolvad labirintzus cshlzatbl ll. Nem
mutat a DER-hez hasonl rendezettsget. ltalban a DER-nl kisebb trfogat kompertimentum, azonban a SER
igen fejlett a szteroidhormonokat szintetizl (pl. mellkvesekreg), ill. xenobiotikumok (biolgiailag aktv idegen
anyagok, pl. gygyszerek) feldolgozst (n. mregtelentst) vgz sejtekben (pl. mjsejtek).
A DER s SER kontinuus kompartimentumok.

A foszfolipid szintzis enzimei a SER membrnjnak citoszl felli felletn, a prekurzorok a citoszolban tallhatk.
A szintetizld foszfolipidek a SER membrnjnak citoszol felli lipidrtegbe plnek be. Ennek kvetkeztben
a membrn kls rtege folyamatosan nagyobbodik. Az ebbl fakad egyenetlensget a scramblase enzim egyenlti
ki gy, hogy a lipidek egy rszt a SER membrnjnak citoszol felli rtegbl tforgatja a lumen felli rtegbe.
A membrnok kt rtegnek foszfolipid sszettelben (pl. a foszfatidil-kolinra, foszfatidil-etanolaminra stb.)
megmutatkoz asszimmetrit ms specifikus flippzok alaktjk ki.
Foszfatidil-kolin.
48
Foszfatidil-etanolamin.
A ceramid s a koleszterin molekulk is a SER-ben szintetizldnak. A szteroid vegyletek szintzisnek
meghatrozott folyamatai szintn a SER-ben jtszdnak le.
Ceramid ltalnostott kplete.

A SER-ben ellltott lipidek vezikulris transzporttal kerlnek t a Golgi-kszlkbe, ahol bizonyos lipidmolekulk
(pl. a ceramidok) talaktdnak, s tovbbi vezikulris transzporttal jutnak el clterletkre (pl. plazmamembrn).
A mitokondriumba, a plasztiszba s a peroxiszmkba szlltfehrjk (n. karrier proteinek) kzremkdsvel
juthatnak el.
A SER fontos funkcija a citoszol kalciumszintjnek szablyozsa. A Ca++-ionok koncentrcija a citoplazmban
jellemzen alacsony, alacsonyabb, mint a sejten kvli trben. A plazmamembrnban s a SER-ben lv kalciumpumpk gondoskodnak a citoszol alacsony szabad Ca++-ion koncentrcijrl. A sejten bell a kalcium a SERben raktrozdik. Megfelel ingerek hatsra a SER-bl a kalcium felszabadul. Ez a mechanizmus igen fontos
szerepet jtszik az izomsejtek, klnsen a harntcskolt izomrostok mkdsben. Utbbiakban a SER nagy
kiterjeds, specilis vltozata, a miofibrillumokat hlzatosan krllel szarkoplazmatikus retikulum alakult
ki.
A SER rszt vesz a glkz anyagcserben is. A glikogn szintzisnek lnckezd lpse a SER feladata, a folyamat
tovbbi lpsei a citoszolban zajlanak. A kialakul glikogn szemcsk jellemzen a SER krnykn, csoportokba
rendezdve tallhatk meg. A glikogn lebontsakor keletkez glkz-6-foszft a SER membrnjban elhelyezked
transzporter segtsgvel bejut a SER lumenbe, ahol a glkz-6-foszfatz enzim lehastja a foszftcsoportot. A
glkz molekula szintn transzporter kzvettsvel jut ki a citoszolba, majd a plazmamembrnon t vgl a vrbe.
A SER specilis enzimrendszerei rvn fontos helyszne a mregtelentsnek. A sejtekbe jut, a szervezet szmra
idegen anyagok (xenobiotikumok, mint pl. gygyszerhatanyagok, mrgek), vagy ppen a szervezetben keletkez
kros anyagok, molekulk talaktsval a SER membrnjban elhelyezked kevert funkcij oxidzrendszer
(mixed function oxidases MFO) enzimkomplexe foglalkozik. Alkotelemei pl. a citokrm-P450, citokrm-b5,
flaprotein fehrjecsaldok tagjai. Az MFO tbb tucat reakcit kpes katalizlni. Enzimei szubsztrt-specificitsa
gyenge, egy enzim tbbfle szubsztrtot is kpes talaktani, ugyanakkor egy adott szubsztrtot tbb enzim is
talakthat. A katalizlt reakcikhoz NADPH s lgzsi oxign szksges. Az oxignmolekula egyik atomja az
talaktand szubsztrtot oxidlja, a msik elektronokat s protonokat felvve vzz alakul. A szubsztrtok
talaktsnak clja oldhatsguk nvelse, a sejtekbl, a szervezetbl val eltvoltsuk megknnytsre.
(Elfordulhat, hogy ppen a fenti talakts sorn jnnek ltre kros hats molekulk.) Minden eukarita sejtben
megtallhat az MFO rendszere. Az llati szervezetben a mjsejtek rendelkeznek a legnagyobb mregtelentsi
kapacitssal, br a mregtelentsben jelents a szerepe a lgutaknak, a brnek, a blfalnak.
Krdsek:
1. Milyen trbeli alakzatokbl pl fel a DER?
2. Mi a transzlokon?
3. Mi az SRP szerepe a fehrjk irnytsban?
49
4. Mi a dajkafehrjk szerepe a DER.ben?

5. Mi a hatsa a stop-transzfer szekvencinak?
6. Mi a SER szerepe a glkz anyagcserben?
7. Mi a mregtelents f enzimkomplexe?
50
8. fejezet - A Golgi-kszlk
A Golgi-kszlket (ms nven Golgi-komplex, Golgi-appartus) 1898-ban rta le Camillo Golgi olasz orvos s
citolgus. Ez a sejtorganellum Golgi ltal alkalmazott mdszerekkel egy a sejt belsejben elhelyezked, membrnnal
hatrolt, hlzatos szerkezetknt tnt fel. Tnyleges szerkezett az elektronmikroszkpos vizsglatok, mkdst
morfolgiai s biokmiai, molekulris biolgiai vizsglatok segtsgvel trtk fel. Az eukarita sejtekben ltalnosan
elfordul, membrnnal hatrolt, eltr felpts alkompartimentumokbl ll, heterogn, sszetett organellum.
Szerkezete a klnbz sejttpusoktl s azok klnbz fiziolgiai llapotaitl fggen vltozatos s vltoz
felpts lehet. Klnsen fejlett a szekrcira specializldott sejtekben. A Golgi-komplex kzponti szerepet
jtszik a sejt ltal ellltott lipid- s fehrjeforgalomban, a jelents transzport tvonalak fontos szereplje.
Camillo Golgi (18431926) olasz orvos, citolgus; 1906-ban megosztott Nobel-djat kapott (Santiago Ramn y
Cajal-lal) az idegrendszer finomszerkezetnek vizsglatban elrt eredmnyeirt.
A Golgi-kszlk felptse
A Golgi-kszlk kzponti eleme a 48 prhuzamos, szorosan egyms felett fekv ciszterna rendezett csoportjbl
ll diktioszma. A ciszternk szma a diktioszmn bell, illetve a diktioszmk szma a sejtben a sejttpustl
fgg: egyes llati sejtekben egyetlen nagykiterjeds diktioszma, mg nvnyi sejtekben akr tbb szz kisebb
mret tallhat.
A ciszternk nagyjbl kr alak, a szlkn kiszlesed, kiss hajltott, lapos, zskszer struktrk. A bellk
felpl diktioszma polarizlt felpts, megklnbztetjk a bemeneti (belpsi, bemen), n. ciszoldalt
(cisz-ciszterna) s az azzal ellenttes kimeneti (kilpsi, kimen), n. transz oldalt (transz-ciszterna). A ciszciszterna membrnvastagsga az endoplazmatikus retikulumval egyezik (kb. 6 nm), a transz-cisztern a
plazmamembrnhoz hasonl (1012 nm). A kt szls ciszterna kztti medilis ciszternk vastagsga cisztransz
irnyban nvekszik. A ciszternk szlein tgulatok s nhol tubulus-szer kpzdmnyek vannak. A cisz s transz
felsznen kiterjedt, hlzatba szervezd tubulusrendszer alakulhat ki (elssorban az llati sejtekre jellemz), ezek
a cisz- s a transz-Golgi hlzat (cis Golgi network CGN; trans Golgi network TGN).
Golgi kszlk diktioszmja hidrbl (TEM). A cisz oldalhoz kzeli SER ciszternt piros nyl jelli.
A diktioszmk krl szmos 5080 nm tmrj, n. Golgi-vezikula is megfigyelhet. Szerepk a ciszternk
kztti anyagtranszportban s a membrnok kztti egyensly fenntartsban jelents.
A diktioszmk llati sejtekben gyakran a sejtmag kzelben, gyakran vszeren csoportosulnak. A nvnyi
sejtekben elszrtan helyezkednek el, cisz felsznkkel jellemzen DER ciszternk fel fordulnak.
51
A Golgi-kszlk
A Golgi-kszlk mkdse
Izotppal jellt aminosavak felhasznlsval vgzett ksrletek alapjn bizonythat (lsd: Palade ksrletei), hogy
a Golgi-appartus funkcija az ER-ben szintetizldott vladk- s membrnfehrjk, illetve -lipidek fogadsa,
posztszintetikus mdostsa (feldolgozsa), vlogatsa (szortrozsa) s tovbbtsa rendeltetsi helykre.
A feldolgozand anyag felvtele a cisz oldalon trtnik (CGN), innen a cisz, majd a medilis ciszternkba vndorol
a DER-bl szlltott anyag, mikzben jellemz mdosulsokon megy keresztl, majd a transz oldalon hagyja el a
kszlket, rendeltetse szerint szegreglva s szortrozva.
Az endoplazmatikus retikulum s a Golgi-apparttus kztt nincs kzvetlen s folytonos sszekttets. A DERbl a Golgi-kszlkbe vezikulris transzporttal trtnik a szllts, melynek eredmnyekppen cskken a DER
s nvekszik a Golgi-kszlk tmege, membrnfelszne, trfogata. Br a DER-ben szintetizldott fehrjk
bizonyos mrtkig feldsulva kerlnek a transzportvezikulkba, mgis a DER-ben tallhat anyag gyakorlatilag
vlogats nlkl kerl a Golgi-kszlk cisz oldalra.
A kt kompartimentum egyenslyban tartst, tovbb az traml anyag sztvlasztst s irnytst tbb
egymshoz kapcsolt, trben s idben sszehangolt mechanizmus vgzi.
A vezikulris transzport nemcsak a DER Golgi irnyba, de visszafel is mkdik. A CGN membrnjban lv
receptorok felismerik, ktik azon fehrjket, amelyeken ER retencis szignl tallhat. Ezek az ER sajt fehrji,
melyek a cisz oldalon, vlogatst kveten specilis transzportvezikulkba csomagoldnak s visszajutnak az ERbe. A Golgi-ciszternkbl gy eltnnek a DER fehrji s koncentrldnak a szekrcis fehrjk: a kimen oldali
ciszternkban a DER sajt (n. rezidens) fehrji nem mutathatk ki. A folyamat cskkenti a Golgi, ill. nveli a
DER tmegt, hozzjrulva a kt sejtorganellum kztti egyensly fenntartshoz.
A DER-ben a fehrjk egysges, nem specifikus kotranszlcis mdostsa az N-glikozilci. A Golgi-kszlkben
ez az egysges szerkezet felbomlik: glikozidzok hatsra egyes cukormonomerek (fleg mannz csoportok)
lehastdnak. A medilis ciszternban tovbbi mannz molekulk lehastsa mellett a glikozil transzferzok j
monoszacharidokat (pl. fukzt, galaktzt, szilsavat) kapcsolnak a lncokhoz. A folyamat a TGN lumenben
fejezdik be, eredmnye az N-glikozilcis mintzat talakulsa, egyediv vlsa.
Galaktz s mannz.
Az elbbiekhez hasonl folyamatban a Golgi medilis s transz ciszterniban a fehrje szerin vagy treonin
aminosavainak hidroxil csoportjaihoz is kapcsoldhatnak sszetett cukor oldallncok (ez az n. O-glikozilci).
A vgeredmny az adott fehrjre (glikoproteinre) jellemz sszettel oligoszacharid oldallncok kialakulsa,
melyek a tovbbikban vlogats alapjul szolglhatnak.
A lizoszomlis enzimek azonostsa mr a CGN-ban megtrtnik, a felismers alapja a fehrjk felletn kialakul
specilis aminosav mintzat. Az itt elhelyezked oligoszacharid oldallncok egyes mannz molekuli a 6. sznatomon
foszforilldnak. A mannz-6-foszft (M6P) jel kt clt szolgl: egyrszt a megakadlyozza a lizoszomlis fehrjk
tovbbi talaktst, msrszt elsegti a megfelel vlogatst. A transz-Golgi hlzat membrnjban lokalizld
receptorfehrjk ismerik fel a M6P jelet s ktik meg a megkttt lizoszomlis enzimeket, melyek vezikulris
transzporttal vgs rendeltetsi helykre, a lizoszmkba szlltdnak. A receptorok visszajutnak a transz Golgihlzatba (reciklizci).
A Golgi-kszlk fontos funkcija a plazmamembrn (pl. glikoklix) s az extracellulris mtrix fehrjinek
kialaktsa. A proteoglikn molekulk esetben igen nagymrtk a glikozilci: a fehrjersz szerin oldallncaira
52
A Golgi-kszlk
tbbszz diszacharid egysgbl ll glkz-amino-glkn (GAG) lncok kapcsoldnak. A TGN-ban egyes

cukorkomponensek szulfatlsra is sor kerlhet, ezzel kialaktva a proteogliknok jellemz negatv tltst.
A vladk- s membrnfehrjk ms csoportjai kisebb-nagyobb tmrj szekrcis vezikulkba, kondenzl
vakulkba, vladkszemcskbe tmrlve vlnak le a transz-Golgi hlzatrl, s a plazmamembrnhoz vndorolnak,
azzal fzionlnak, beltartalmuk pedig a kls krnyezetbe rl (exocitzis).
A sejt fehrjeforgalmnak ltalnostott vzlata. A kk tvonal a kapuzott transzportot, a zld a vezikulris

transzportot, a piros a transzmembrn fehrjetranszportot jelli.
A membrnlipidek tbbsge a SER-en szintetizldik, majd szintn a Golgi-kszlkbe kerlnek. A Golgiban a
ceramidokbl glikolipidek s szfingomielin molekulk keletkeznek. Utbbi fontos komponense az n. lipid
tutajoknak. A ceramidok talaktst vgz enzimek a Golgi lumenben vannak, gy a szfingomielin is a lumen
felli lipidrtegben helyezkedik el. A TGN-rl lefzd membrnlipideket tartalmaz vezikulk a plazmamembrnnal
fuzionlva annak kls rtegbe juttatjk e molekulkat.
Ceramid ltalnostott kplete.
Szfingomielin kplete.
A Golgi-kszlk mkdst, pontosabban a Golgi transzportmechanizmust kt elmlet prblja magyarzni.
Mindkt elmletnek vannak ksrletes bizonytkai, de egyik sem perdnt.
53
A Golgi-kszlk
A vezikulris transzport modellben a ciszternk lland kpzdmnyek, s a Golgi vezikulk biztostjk az egyes
ciszernk kztti anterogrd (a cisz ciszterna fell a transz ciszterna fel halad, a feldolgozand fehrjket s
lipideket szllt) anyagtranszportot.
A ciszternarsi modellben az anyagramls a ciszternk haladsval magyarzhat. A cisz oldalon a CGN
elemekbl jabb s jabb cisz ciszternk llnak ssze, mikzben a korbban ltrejtt ciszternk medilis majd
transz pozciba kerlnek, ahol vezikulkra, vakuolkra esnek szt. Ebben a modellben a Golgi vezikulk a cisz, a medilis- s transz-ciszternkra jellemz enzimek retrogrd transzportjk bonyoltva biztostjk az egyes
ciszternk mkdst.
A vezikulris transzport
Az eukarita sejtek membrnnal hatrolt organellumai, az ER s a Golgi, a Golgi s a plazmamembrn, a
plazmamembrn, az endoszomlis kompartimetnum s a Golgi, a Golgi s a lizoszomlis kompartimentum kztti
kapcsolat megteremtsben, a membrnramls fenntartsban, az anyagok szlltsban a vezikulk kpzdsvel,
lefzdsvel, szlltsval s fzijval jr szelektv, szablyozott vezikulris transzport jtsza a f szerepet.
A vezikulris transzport membrn- s szolubilis komponensek szlltst s clba juttatst vgzi. Jellegzetes
clzott vezikulris transzportfolyamat a neurotranszmitterek szinapszisokba trtn szlltsa, inger hatsra trtn
kirlse.
A vezikulris transzport kt f mozzanata a vezikula kpzdse s lefzdse, illetve a vezikula clmembrnhoz
trtn kiktdse, s fzija. Br az egyes rendszerek molekulris komponensei eltrek, kzs bennk, hogy a
vezikulakpzdshez szablyoz molekulkra, szignlokra s specilis burokkpz fehrjkre van szksg. A
lefzdsben gyakran mechanoenzimek mkdnek kzre. A megfelel membrnhoz val ktdshez
marker/felismer molekulk (a vezikula falban, illetve a fogadmembrnban lev jel/jelfog fehrjk), a membrnok
egybeolvadshoz fzis fehrjk szksgesek. A vezikulakpzdsben mindig rszt vesz valamilyen burok- s
kis G fehrje, a szllts clzottsgt biztostjk.
Az ER Golgi-kszlk, valamint a Golgi ciszternk egyms kztti vezikulris transzportjban kis G proteinek
mint szablyoz fehrjk, valamint a COP burokfehrjk (coatomer protein) vesznek rszt.
A G proteinek guanin nukleotidokat, GDP-t vagy GTP-t ( g uanozin-di-, vagy -trifoszft), tudnak ktni, GTP-z
aktivitssal rendelkeznek. ltalban GTP-kttt llapotban aktvak, GDP kttt llapotban inaktvak, molekulris
kapcsolknt mkdnek. Aktv llapotba kerlsket a GDP-t GTP-re kicserl GEF enzimek (guanosine exchange
factor) segtik el. Sajt GTP-z aktivitsuk csekly, gyors inaktivldsukhoz GAP fehrjk (GTP-ase activating
protein) szksgesek.
Kt csoportjuk a monomerikus kis G fehrjk, illetve az alfa, bta, s gamma alegysgekbl ll heterotrimer G
fehrjk. Utbbiak esetben az alfa alegysgnek van GDPGTP kt tulajdonsga s GTP-z aktivitsa. Az alfa
G fehrje inaktv, GDP kttt llapotban a bta s gamma G fehrjkkel heterotrimert alkot, aktv, GTP kttt
llapotban disszocil.
Az ER s Golgi kztti n anterogrd transzportban a COPII burokfehrje a Sar1 kis G fehrje, a Golgi s ER
kztti retrogrd, tovbb a Golgi ciszternk kztti, mindkt irny transzportban a COPI burokfehrje s az
ARP kis G fehrje kzremkdik.
Az ARP a donor (a transzport vezikult kpz) membrnban lv GEF enzim hatsra GDP helyett GTP-t kt s
kapcsoldik a membrnhoz. A membrnba pl ARP-GTP molekulk kr szervezdnek (ATP felhasznlsval)
a COPI burokfehrjk, ezzel elindtva a membrnkitremkedst, vgl a vezikula lefzdst. A burokfehrjk
megakadlyozzk a vezikula spontn visszaktdst is. A transzport vezikula burokfehrjivel egytt szlltdik
a cl organellumhoz. A clmembrnban elhelyezked GAF hatsra az ARP molekulk elhidrolizljk a GTP-t.
Az ARF molekulris kapcsolknt mkdik: GTP-kttt llapotban fenntartja a burokfehrjemembrn asszocicit.
A GTP-t GDP-v hidrolizlva inaktivv vlik: a burokfehrjk levlnak a vezikula falrl, mely gy fzikpess
vlik s s ssze tud olvadni a clmembrnnal.
A vezikulk membrnja azonostfehrjt is tartalmaz, mely a clmembrnokon lv jelfog fehrjhez nagy
affinitssal ktdik, ha a vezikula vdburkt kpez burokfehrjk levlnak. Az azonostfehrje szintn kis
G fehrje, a Rab csald tagja. A klnbz transzportvezikulkra klnbz Rab fehrjk jelenlte jellemz. A
54
A Golgi-kszlk
jelfog molekula a clmembrn nagy specifits Rab receptorfehrjje. Ez a jeljelfog rendszer biztostja azt,
hogy a vezikulk a donor kompartimentumrl levlva csak a specifikus fogad (akceptor) kompartimentum
membrnjval tudjanak fuzionlni. Ez a mechanizmus hatrozza meg a transzport irnyt. A jeljelfog kapcsolat
kialakulsa hatsra a Rab elhidrolizlja GTP-jt, a Rab fehrje a citoszolba kerl, a felszabadul energia pedig
biztostja a vezikula clmembrnhoz val ktdsnek, dokkolsnak energiaszksglett. A dokkolsban s a
vezikula clmembrnnal trtn fzijban a SNARE fehrjk szerepe dnt. A vezikula membrnjban a vSNARE, a clmembrnban a t-SNARE (t = target) egymst felismerve, a membrnok citoszol felli oldaln
kiemelked heliklis domnjk sszekapcsoldsval n. transz-SNARE komplexet hoznak ltre. Ez a komplex
ms fzis fehrjkkel egyttmkdve, a vzmolekulkat is kiszortva, egymshoz olyan kzel hzzk a vezikula
s a clmembrn fellett, hogy megindulhat a membrnfzi.
A mr fuzionlt membrnrszeken a transz-SNARE komplex sztkapcsolst az NSF (N-etilmaleimid sensitive
factor) vgzi. Az NSF citoszol fehrje, amely ATP megktsvel kapcsoldik a SNAP (soluble NSF attachment
protein) fehrjkhez s a clmembrnba beplve, az ATP-t elhidrolizlva szttekeri az sszekapcsoldott SNARE
molekulkat (SNARE = SNAP receptor). Ezt kveten az NSF s SNAP komplex is sztesik.
A vezikulris transzport tovbbi jellegzetes formit az Endoszomlis lizoszomlis kompartimetum c. fejezetben
trgyaljuk.
Krdsek:
1. Sorolja fel a Golgi-kszlk elemeit!
2. Magyarzza meg a Golgi-kszlk polaritst!
3. Mi biztostja a Golgi ciszternk kztt a kapcsolatot?
4. Milyen funkcik kthetk a Golgi-kszlk ciszternihoz?
5. Milyen mechanizmus biztostja a kapcsolatot a DER s a Golgi-kszlk kztt?
6. Milyen szerepet jtszik a Golgi-kszlk a szekrciban?
55
9. fejezet - A szekrcis appartus

A szekrci (nem tvesztend ssze az exkrcival, ami a sejtek s a szervezet szempontjbl kros vagy felesleges
anyagok eltvoltst jelenti) valamilyen, a szervezet szmra hasznos anyagot tartalmaz vladkkijuttatsa a
sejten kvli vagy sejtek kzti trbe. A klnbz sejttpusok ltal termet vladk kmiai sszettelt (fehrjk,
sszetett lipidek, szternvzas vegyletek, elektrolitok stb.) s funkcijt (hormonok, enzimek, szignlok) tekintve
igen eltr lehet, s a vladk sejtbl val kijuttatsnak mechanizmusa is vltozatos. E fejezetben a fehrjk
szekrcis tvonalt mutatjuk be.
A szekrci a szekrtum szintzisbl, a nyerstermk feldolgozsbl s vlogatsbl s irnytsbl, vgl a
sejtbl a sejtkztti trbe, esetleg a sejt felsznre irnyul transzportfolyamatbl ll. A szekrcis appartus
azokbl a sejtorganellumokbl ll ssze, amelyek a fenti folyamatokban rszt vesznek. Tgan rtelmezve a
szekrcis appartus elemei a DER s SER, a Golgi, a vezikulris transzportrendszer elemei, a szekrcis granulumok
s a plazmamembrn.
George E. Palade (19122008) romn szlets, amerikai sejtbiolgus; 1974-ben megosztott Nobel-djban
rszeslt a sejt struktrjnak, kmiai sszettelnek s mkdsnek feltrsban elrt eredmnyeirt.
A szekrcis appartus mkdsnek, a szekrcis fehrjk sejten belli transzportjnak vizsglatra Palade a
sejtfrakcionls mdszere mellett nagy felbonts autoradiogrfis ksrleti mdszert vezetett be. Ksrleteiben
rvid idre (3 percre) 3 H-izotppal (trciummal) jellt aminosavat (leucin) tartalmaz, majd ezt kveten nem
jellt tptalajra helyeztk a tengeri malac hasnylmirigy szervszeleteket. A hrom perc alatt a sejtek ltal felvett
jellt aminosavak bepltek a sejtekben szintetizlt fehrjkbe, gy autiradiogrfis mdszerrel elektronmikroszkpos
felvteleken is kimutathatk, s lokalizcijuk azonosthat. A rvid idej jells lehetv teszi a fehrjk
transzportjnak rszletes nyomonkvetst (n. pulse-chase mdszer). A hrom perces impulzusszer jells alatt
az izotp a DER ciszernkban koncentrldik. A ksrlet kezdett kvet 10. percben a jel nagy menniysgben
megjelenik a Golgi vezikulkban, 40 perc mlva a TGN kondenzl vakulumaiban mutatkozik, majd ezt kveten
az r szekrcis granulumokban is megjelenik. A jellst kveten kb 120 perc mlva detektlhat a jel a sejten
kvli trben. Ez a ksrletsorozat egyrtelmen bebizonytotta, hogy a szekrcis fehrjk irnytsban a Golgikszlk kzponti szerepet tlt be.
A szekrcis fehrjk tbbsge az endoplazmatikus retikulumon, kttt riboszmkon szintetizldik. A DER
ciszternk lumenbe jutva glikozilldnak s chaperonok kzremkdsve hajtogatdnak, majd szegregldva,
transzport vezikulk kzvettsvel a Golgi-kszlkbe kerlnek. A Golgi ciszternkban jabb glikozilcis lpsek
eredmnyeknt oligoszacharid mintzatuk talakul, szksg szerint a peptidlnc talaktsra is sor kerlhet
(lncrvidls, nem-fehrje komponensek). A fehrje membrnba csomagolva lefzdik a transz-Golgi hlzatrl,
s a sejtvz komponenseinek kzremkdsvel a plazmamembrnhoz vndorol, ahol a szekrtum kirtsre
kerl sor. Kt f szekrcis tvonalat klnbztetnk meg: konstitutv szekrci s regullt szekrci.
A konstitutv szekrci minden eukarita sejtben megfigyelhet, transzportja a plazmamembrnba s annak
felsznre irnyul. A TGN-rl kismret vezikulk fzdnek le, ezek beltartalma az extracellulris mtrix fehrji
s proteogliknjai, membrnjba pedig a plazmamembrn lipid s fehrje komponensei is beplnek. A TGN-rl
lefzd vezikula a sejtvz mentn ri el a plazmamembrnt, majd azzal fzionlva tartalmt a sejt felsznre
juttatja, membrnja a plazmamembrnba simul.
A konstitutv szekrci, br nem ignyel szignlt, szablyozott folyamat. Egyrszt a szllts volumene, sebessge
befolysolhat, msrszt a polarizlt felpts sejtekben a szekrcis vezikulk sszettele vltoz s a szekrci
56
A szekrcis appartus
irnytott (klnbz membrndomnok!). A konstitutv szekrci hozzjrul a plazmamembrn mennyisgnek

s polarizltsgnak fenntartshoz, illetve szablyozshoz.
A regullt szekrci elssorban a szekrcis tevkenysgre specializldott sejttpusokban jellemz. A szekretland
termk szintn a TGN-ban vlogatdik s csomagoldik. A szekrcis fehrjk vlogatst tbb rszfolyamat
segti el. A szekrcis fehrjk aggregldsukat elsegt szekvencit tartalmazhatnak, amely a TGN tubulusaiban
jellemz magasabb Ca++-szint s savas pH hatsra szelektv aggregcit eredmnyez. A folyamatot gyorsthatjk
fehrje-fehrje s fehrje-lipid tpus klcsnhatsok is. Elbbire chaperon molekulk kzremkdse, utbbira
egyes szekrcis fehrjk lipidtutajokhoz (a TGN lumene felli oldalon) trtn kihorgonyzdsa plda. A
lipidtutajokon szervezd aggregtumok fontos szerepet jtszanak a szekrtum szekrcis vezikulba trtn
szelektv becsomagolsban. A lefzd retlen szekrcis vezikula hosszabb-rvidebb ideig troldik a
citoplazmban, ahol egymssal fzionlhatnak, anyagot vehetnek fel a citoszolbl s enzimatikusan mdosulhat
beltartalmuk. Egyes sejtekben (pl. hasnylmirigy kls elvlaszts sejtjeiben) a szekrcis vezikulk vizet
vesztenek, tartalmuk koncentrldik, fzionlva alaktjk ki a szekrcis granulumokat. Ms, pl. nylkban gazdag
szekrtumot termel sejtekben (pl. blhm kehelysejtjeiben) a szekrcis vezikulk vizet vesznek fel, megduzzadnak.
Vgs lpsknt a plazmamembrnhoz trtn specilis s specifikus ideiglenes csatlakozs (dokkols) vezet a
beltartalom jelents rsznek kirtshez. Ezt kveten a vezikula levlik a plazmamembrnrl s visszatr a
TGN-ba. A szekrcis vezikula ideiglenes kapcsoldst s tartalmnak kirtst a poroszma, egy
plazmamembrnhoz kapcsolt molekulakomplex irnytja.
A szablyozott szekrci specilis esete figyelhet meg egyes sejtpusoknl (pl. csontfal sejtek, spermiumok),
melyekben fiziolgis krlmnyek kztt, funkcijuknak megfelelen lizoszomlis fehrjk exportjra kerl sor.
Bizonyos krlmnyek kztt tumorsejtek is kpesek lioszomlis enzimek szekrcijra, mellyel a szveti ktelkbl
val kilps s a migrci lehetsgt teremtik meg.
Vladkszemcsk a plazmamembrn alatt.
Vladk granulum rlse. A kp kzepn lthat vladkszemcse anyaga fellazulva rl ki a sejtbl

Alternatv szekrcis tvonalon szekretldnak egyes szabad riboszmkon szintetizld fehrjk (pl.
interleukinok), amelyek ABC transzporterek kzvettsvel jutnak ki a sejtbl. Ennek az tvonalnak szerepe lehet
pl. a citotoxikus fehrjk eltvoltsban s a citoszol fehrjetartalmnak szablyozsban is.
Krdsek:
1. Milyen kompartimentumok vesznek rszt a szekrcis appartus kialaktsban?
2. A sejt melyik kompartimentumban alakul ki a szekrcis granulum?
3. Milyen kapcsolat van a szekrci s a membrnramls kztt?
57
A szekrcis appartus
4. Milyen folyamat sorn rlnek a vladkszemcsk?

5. Hogyan vlogatdnak a TGN-ban a szekrcis fehrjk?
58
10. fejezet - Az
endoszomlislizoszomlis
kompartimentum
A szekrcis folyamatokban az anyagramls a kpzds helyrl (DER vagy SER) a Golgi-kszlken keresztl
a plazmamembrn, a klvilg fel irnyul. Vgs lpse az anyag kijuttatsa a sejtbl membrnba csomagolva
exocitzissal vagy alternatv tvonalakon. Az ezzel ellenttes irny vezikulris transzportfolyamat a sejt
krnyezetben tallhat makromolekulk, oldott anyagok, szilrd rszecskk bekebelezssel trtn felvtele, az
endocitzis
Az endoszomlislizoszomlis kompartimentum vltozatos sszettel, heterogn vezikulris s tubulris elemeket
is tartalmaz kiterjedt rendszer. Feladata a sejtbe vezikulris transzporttal bekerl anyagok fogadsa, vlogatsa
s tovbbtsa a lizoszmlis appartusba.
Az endocitzis
A folyamat sorn elszr egy bemlyeds jelenik meg a plazmamembrnon, amely azutn lefzdik. gy a klvilg
egy-egy darabja a sejtbe jut, de a citoszllal mgsem keveredik el, mert a vezikula membrnja, amely tulajdonkppen
a plazmamembrn egy lefzdtt darabja, izollva tartja. A lefzdtt vezikula 12 percen bell sszeolvad egy
n. korai endoszmval. Az endoszma-kompartimentum a vakuolris appartus rsze, kisebb-nagyobb vakulk,
tubulusok halmazbl ll, melyek az endocitzissal felvett anyagok fogadst, vlogatst s tovbbtst vgzik.
Az endocitzissal felvett anyagok legnagyobb rsze az endoszmkbl a lizoszmkba kerl, ahol lebomlik. A
degradci termkei (pl. a fehrjkbl lebontssal szrmaz aminosavak) ezutn kiramlanak a lizoszmkbl s
szintetikus folyamatokban hasznosulnak.
Az endocitzis kt vltozata fordul el: a fagocitzis (sejtfals), mely nagymret (>0,2 m) rszecskk
bekebelezst jelenti s a pinocitzis (sejtivs), mely a krnyez testfolyadk s az abban oldott anyagok felvtele.
Egysejtekben a fagocitzis a tpllkfelvtel leggyakoribb mdja. Tbbsejt szervezetekben inkbb vdekez,
a sejtszm llandsgt biztost szerepe van: fagocitzissal trtnik a szervezetbe kerlt baktriumok eltvoltsa,
az elregedett sejtek (pl. eritrocitk) kiszrse, a sejttrmelk lebontsa. Ezeket a feladatokat fagocitzisra specializlt
sejtek vgzik. A fagocitzist a bekebelezend sejtek felletn megjelen molekulk (pl. antitestek a baktriumok
felsznn, mdosult oligoszacharidcsoportokat hordoz glikoproteinek reged sejteken) vltjk ki, amelyeket a
fagocita sejtek plazmamembrnjban lv receptorfehrjk kpesek megktni, s ez indtja meg a bekebelezst.
A bekebelezett anyag nagymret specilis endoszmba, a fagoszmba kerl, amely lizoszmkkal olvad ssze,
s tartalmt a lizoszomlis enzimek megemsztik.
Pinocitzisra gyakorlatilag minden sejt kpes, s folyamatosan vesz fel krnyezetbl anyagokat ezen az ton.
Leggyakrabban elfordul vltozata az n. receptormedilt endocitzis. A receptor s liganduma (a receptorhoz
specifikusan s reverzbilisen ktd molekula) kztti kapcsolat ltrejtte indtja be a felvtelt. Ennek sorn a
receptorligandum komplexek aggregldnak, vagyis kisebb-nagyobb foltokban tmrlnek a sejtfelsznen, majd
bellrl, a receptorok citoplazmba nyl rszhez burokfehrjk kezdenek asszocildni. A burok ktfle fehrjbl
ll: az adaptin s ms fehrjket tartalmaz adaptorkomplexbl, amelyek kzvetlenl a receptorokhoz kapcsoldnak
s a klatrin nev fehrjbl, mely az adaptorkomplexhez kpes ktdni. A klatrin/adaptor burok hasonlan a
COP tpus burokhoz elsegti a plazmamembrn betremkedst, majd lefzdst, stabilizlja a vezikula
falban a receptorligandum komplexeket s megakadlyozza a lefzdtt vezikula vletlenszer visszaolvadst
a plazmamembrnba. A formld vezikula plazmamembrnrl trtn lefzdst mechanoenzimek: dinamin
s ms fehrjbl ll gyr alak komplex segti el. A receptormedilt endocitzis anyagfelvtelt eredmnyez.
A megkttt anyag koncentrcija a betremked membrn felsznn tbbszrse az oldatban lvnek.
A lefzdtt vezikula a korai endoszmkhoz sodrdik, a klatrin/adaptor burka levlik, sszeolvad az endoszmval.
A korai endoszma degradlenzimeket nem tartalmaz, funkcija a receptorok s ligandumaik sztvlasztsa. Az
endoszmamembrn egy specilis protontranszlokl ATP-zt (vakuolris ATP-z, protonpumpa, l. 31. old.)
tartalmaz, amelynek mkdse savas pH-t (~pH6) tart fenn az endoszma belsejben. Ilyen pH-rtken a
59
Az endoszomlislizoszomlis kompartimentum
receptorligandum komplex disszocildik, a szabadd vlt receptorok vezikulkba gyazva lefzdnek az

endoszma falrl s visszavndorolnak a plazmamembrnba, ahol ismtelt felvtelt tudnak elindtani. A korai
endoszmban maradt ligandum sorsa tbbfle lehet. Legtbbjk vezikulris transzporttal a ksi endoszmkba,
majd innen a lizoszmkba jut, ahol degradldik. Vannak olyan ligandumok is, amelyek elkerlik ezt az utat s
vezikulris transzporttal a sejt msik oldalhoz vndorolnak, majd kirlnek. Ezt a folyamatot transzcitzisnak
nevezik.
Az endocitzissal beraml anyag mennyisge meglepen nagy. Makrofgok sajt trfogatuk 25%-nak megfelel
oldatot kpesek rnknt felvenni. A vezikulakpzshez sajt plazmamembrn-felletk mintegy 50200%-t
hasznljk fel rnknt. Az endocitzis sorn a sejtek trfogata, fellete nem vltozik lnyegesen, a felvett oldat
nagy rsze (elssorban a vz) valahogyan visszajut a krnyezetbe, a plazmamembrn bekebelezsre felhasznlt
darabjai, gy a receptorok is, reciklizldnak.
Az endocitzis funkcionlis jelentsge abban rejlik, hogy segtsgvel a sejt folyamatosan tszri krnyezett,
ekzben felvesz s lebont szmos makromolekult, melyek degradcis termkeit j szintzisekben felhasznlja,
s gy az endocitzis a szintetikus-szekrcis folyamatokkal egybekapcsolva lehetv teszi a krnyezet
makromolekulinak folyamatos kicserldst, gy, hogy azok sszettele, koncentrcija a szervezet szmra
optimlis szinten maradjon.
Endocitzissal vesz fel a sejt nhny szmra ltfontossg anyagot, gy pl. a membrnok szintzishez szksges
koleszterint.
Rendkvl intenzv receptormedilt endocitzissal trtnik a szikanyagok felvtele szmos faj oocitiban.
Az endocitzis fontos funkcija a plazmamembrn mennyisgnek s sszettelnek folyamatos szablyozsa.
Az endocitzis cskkenti, mg a reciklizls s az exocitzis nveli a plazmamembrn fellett. Egyttes hatsuk
tartja egyenslyban a sejtfelsznt. Az endocitzissal felvett plazmamembrndarabok egyes integrns membrnfehrji
nem reciklizlnak, hanem a lizoszmkba kerlve degradldnak. gy viselkednek pl. a nvekedsi faktorok vagy
az inzulin receptorai. Ptlsuk szintzissel trtnik, s a kt folyamat egyttes hatsa a membrnkomponensek
folyamatos kicserldst, megjulst eredmnyezi.
Az endocitotikus vezikulk mellett a plazmahrtyn gyakran megfigyelhetk apr, mintegy 50100 nm tmrj,
palack formj betremkedsek, kaveolk (caveola). Ezeket a kaveolin fehrje burkolja. A kaveolk lefzdsben
szintn kzremkdik a dinamin mechanoenzim. A kaveolk membrnjban sok koleszterin, szfingomielin tovbb
nhny a jeltviteli folyamatokban szerepet jtsz fehrje (pl. kinzok, G-protein, kalciumcsatorna, kalciumpumpa)
tallhat. A kaveolk fontos szerepet tltenek be tbb fontos sejttani folyamatban. Rszt vesznek a transzcitzisban,
egyes jeltviteli folyamatokban, s sajtos membrnszerkezetknek ksznheten egyes anyagok specilis
felvtelben. Kaveolk tjn kerlhetnek a sejtbe egyes baktriumok, vrusok is.
A lizoszomlis kompartimentum
A lizoszmk a sejt emsztfunkci elltsra specializldott organellumai. Alakjuk vltozatos, ltalban nhny
tized mikromter tmrj vakulk, tubulusok formjban figyelhetk meg. Terket a lebonts klnbz
stdiumaiban lv auto- vagy heterofg eredet anyag tlti ki, emiatt az egyes lizoszmk morfolgiailag jelentsen
klnbzhetnek egymstl. Kzs tulajdonsguk, hogy belsejkben sokfle lizoszomlis bont enzim (savas
hidrolzok) proteinzok, nuklezok, lipzok, glikozidzok, foszfatzok tallhat, melyek kpesek a lizoszmk
terbe bekerlt szerves anyagokat ptkveikre lebontani. A lizoszomlis enzimek pH-optimuma 5 krl van. Az
alacsony pH-t a lizoszmamembrnban tallhat protontranszlokl ATP-z-molekulk tartjk fenn. A lizoszmkat
kb. 1012 nm vastag membrn hatrolja, mely csak a kis molekulatmeg (kb. 200 Da-ig) anyagok szmra
tjrhat. Ezrt a degradci vgtermkei a citoplazmba knnyen tjutnak, de maguk a lizoszomlis enzimek s
szubsztrtjaik, a klnbz makromolekulk nem. A degradci teht zrt trben, elklntve trtnik, ami megvdi
a krnyez citoplazmt a lizoszomlis enzimek krost hatstl. A bontsi folyamat nem mindig vezet a lizoszmt
elhagyni kpes kismolekulj vgtermkek kialakulsig, ilyenkor emsztetlen anyagokkal teltett maradvnytestek
halmozdnak fel a sejtekben.
A lizoszomlis enzimek s membrnjaik fehrji idvel maguk is lebomlanak. Ptlsuk folyamatos szintzissel
trtnik. A lizoszomlis fehrjk, a vladkfehrjkhez hasonlan, mind glikoproteinek s a RER-ben
szintetizldnak inaktv formban. Oligoszacharid oldallncaik sok foszforillt mannzt tartalmaznak, mely
60
vlogatsi jelknt szolgl. A vlogats a transz Golgi-hlzatban trtnik, itt klnlnek el a lizoszma enzimjei
a tbbi fehrjtl, s innen klatrinburkos vezikulk szlltjk ket a ksi endoszmkba, ill. a lizoszmkba.
Aktivldsukat valsznleg az itteni alacsony pH vltja ki.
A lizoszmk zrtsga miatt terkbe a legtbb makromolekula csak membrnba csomagolt formban, vagyis
vezikulris transzporttal kpes bekerlni, gy, hogy a szllt vezikula membrnja sszeolvad a lizoszma
membrnjval. Ilyen anyagfelvteli t az elzleg mr tgyalt endocitzis, amely a kls krnyezet anyagait juttatja
a lizoszmkba. A klvilgbl szrmaz makromolekulk lebontst heterofginak nevezik. Az autofgia, a
citoplazma sajt anyagainak lizoszomlis felvtelt s lebontst jelenti. Leggyakoribb vltozata az gynevezett
makroautofgia, melynek sorn elszr a citoplazma egy-egy darabjt specilis izollmembrn klnti el a
krnyezettl, majd az gy kialakul autofagoszma mr kpes sszeolvadni egy lizoszmval s tartalma
megemsztdik. Az izollmembrn eredett, kialakulsnak mechanizmust mg nem ismerjk pontosan. Az
autofgia msik vltozata a mikroutofgia. Ilyenkor nem szksges izoll membrn kzremkdse: magn a
lizoszmn keletkezik bemlyeds, melybe bekerl krnyezetnek egy darabja, majd a lizoszma zrdik s
megindul a degradci. Egy tovbbi vltozat a chaperon-medilt autofgia, melynek sorn hordozfehrjhez
kapcsolva transzportldik valamilyen citoszolos fehrje a lizoszmk terbe.
Fiatal autofg vakula (nyl). A beltartalom struktri azonosthatk, s denzitsa nem klnbzik a krnyez
citoplazmarszektl.
Az emsztds jeleit mutat autofg vakula (nyl). A beltartalom struktri mg azonosthatk, de sttebb a
krnyezetnl.
Az emszts elrehaladtval a beltartalom sztesik, a denzitsa n..
61
Az ids autofg vakulk sszeolvadva (nyl) komplex kpzdmnyeket hoznak ltre.

Az autofgia intenzitst elssorban az intracellulris aminosavszint szablyozza. Ha ez magas, az autofgia
gtldik, mg aminosavhinyban fokozdik. Egyes hormonoknak is lehet szablyoz hatsa, gy az inzulin erteljesen
gtolja, mg a glkagon stimullja az autofg degradcit.
Az autofgia ltalban kis intenzits folyamat, de bizonyos krlmnyek kztt jelentsen felersdik. hezskor
pl. a mjsejtek sajt fehrjik 45%-t is kpesek rnknt autofg ton lebontani, s gy tmenetileg fenntartani
az letfontossg, a fehrjeszintzishez, valamint a glkoneogenezishez szksges szabad aminosavszintet. Intenzv
autofgia figyelhet meg szveti trendezdssel/lebontssal jr folyamatokban, pl. a lrvlis szervek involcija
(visszafejldse) sorn.
A lizoszomlis rendszer hinyos mkdse slyos zavarokat okoz a szervezetben, s n. trolsi betegsgek
kialakulshoz vezet. Az ok valamilyen lizoszomlis enzim hinya (vagy a gn hibja, vagy a vlogats zavara
miatt), aminek kvetkeztben szubsztrtja nem tud elbomlani s abnormlis mennyisgben felhalmozdik a
lizoszmk belsejben.
A sejtekben a szintetikus folyamatokkal egyidejleg degradci is folyik, ezrt a sejtet alkot molekulk, ill. a
bellk felpl organellumok lland kicserldsben vannak (ez all csak a mag s a mitokondriumok DNSllomnya kpez kivtelt). A legrszletesebben tanulmnyozott degradcis folyamat a fehrjk lebontsa, a
proteolzis. Ez legegyszerbben gy vizsglhat, hogy a fehrjket radioaktv aminosavak beptsvel jelljk.
Ezutn lebontsuk sebessge radioaktivitsuk cskkensbl kiszmthat. A folyamat jl jellemezhet a felezsi
idvel, azzal az idszakasszal, mely alatt egy adott mennyisg fehrje fele elbomlik.
Egyes fehrjk felezsi ideje nagyon rvid, mindssze nhny perc. Nhny transzkripcis faktor, a mitzist
szablyoz ciklinek, anyagcsere-folyamatokat szablyoz kulcsenzimek tartoznak ebbe a csoportba. Gyors
degradcijuk az ltaluk befolysolt reakcik rzkeny szablyozst teszi lehetv. Ugyancsak gyorsan
degradldnak az abnormlis pl. transzlcis hiba miatt rossz helyre beplt aminosavakat tartalmaz fehrjk
is. A fehrjk dnt tbbsgnek felezsi ideje nhny rtl nhny napig terjedhet.
A fehrjedegradci jelentsge abban rejlik, hogy a szintzissel egybehangolva gyors, finom vlaszt, a
krlmnyekhez trtn hatkony alkalmazkodst tesz lehetv. Segtsgvel tud megszabadulni a sejt hibs,
denaturldott, mkdskptelen fehrjitl. A proteolzis segt fenntartani a szervezet mkdshez szksges
lland szabad aminosavszintet.
A fehrjelebonts intenzitsa szles hatrok kztt ingadozhat. Normlis tpanyag-elltottsgnl, egyenslyi
llapotban a sejtek sszfehje-tartalmuk 0,11%-t degradljk rnknt. Ez az n. bazlis fehrjekicserlds.
hezs, a sejtet rt srls hatsra ez tbbszrsre nvekedhet. Regenerld szervekben vagy jszltt llatokban
a gyors nvekedst viszont nem annyira a fokozott fehrjeszintzis, mint inkbb a visszaszorult degradci okozza.
Extralizoszomlis proteindegradci
Proteolitikus enzimek a sejt minden organellumban elfordulnak. Hatsuk azonban loklis, s elssorban a fehrjk
mdostst okozzk (pl. a szignlpeptidz a szignlpeptidet hastja csak le). A fehrjk tmeges, aminosavakig
trtn bontsa kt proteolitikus rendszerben trtnik. Az egyik a mr trgyalt lizoszomlis rendszer, melybe
autofgival kerlnek be a sejt sajt fehrji. Normlis krlmnyek kztt autofg-lizoszomlis ton csak a
fehrjk elenysz hnyada bomlik le, de stressz hatsra (pl. tpanyagmegvons) a rendszer aktivldik, s a
62
teljes proteolzis mintegy 6080% mr a lizoszomlis tra tereldik. A msik nagy proteolitikus rendszert a
proteaszmk alkotjk. A proteaszma egy kzponti rszbl, magbl (az n. 20S proteaszmbl) s a hozz
kapcsold regulcis egysgekbl ll. A mag tbbtucatnyi alegysgbl felpl, henger alak, mintegy 11x15
nm mret test, melynek falt gyrbe rendezett fehrjealegysgek alkotjk. 4 gyr vesz rszt a mag kialaktsban,
mindegyik gyr 7 alegysgbl ll. A henger bels rege kb. 5 nm tmrj, itt trtnik a peptidlnc feldarabolsa.
Ez a tr olyan szk, hogy normlis trszerkezet, feltekeredett fehrjk nem frnek el benne. A lebontand fehrjk
elzetes kitekerst a henger vgeihez sapkaszeren kapcsold n. 19S regulcis egysg vgzi. A folyamat
energiaignyes, ATP felhasznlsval jr.
A proteaszma szerkezete.
A proteaszma mkdsnek szablyozsa a lizoszmktl teljesen eltr. Mg a lizoszomlis rendszer enzimjeit
membrn izollja a krnyezettl s oda lebontand anyag csak egy fzis lpsen keresztl juthat, a proteaszmk
szabadon helyezkednek el a citoszolban s a magban, teht kontaktusba kerlhetnek brmely ott tallhat fehrjvel.
Ennek ellenre sem bontanak le minden, a krnyezetkben elfordul fehrjt. A specifitst kijell s vlogat
mechanizmusok biztostjk. A jel egy kis molekulatmeg, minden sejtben elfordul fehrje, az ubikvitin, melynek
lncait (poliubikvitint) egy tbb tagbl ll enzimrendszer kti a degradland fehrjre. A vlogats azon alapul,
hogy a poliubikvitint hordoz fehrjket a 19S regulcis egysg felismeri, megkti, majd kitekeri s beereszti a
mag katalitikus regbe, ahol megtrtnik a degradci. A folyamat kezdetn az ubikvitin lncok lehasadnak a
hordoz molekulrl, s ismtelt ciklusban felhasznldnak jabb szubsztrtok kijellsre. A kzponti hengerhez
msfajta szablyozegysg is kapcsoldhat. Ez a komplex nem ubikvitinlt fehrjket kpes lebontani, mkdse
nem ATP-ignyes. A vlogats/felismers mechanizmusa nem ismeretes. Proteaszms ton bomlik le szmos
rvid felezsi idej szablyozfehrje (pl. ciklinek, transzkripcis faktorok), ez a rendszer tartja fenn a bazlis
fehrjekicserldst s tvoltja el a srlt, abnormlis fehrjket.
Krdsek:
1. Milyen folyamat sorn jn ltre endoszma?
2. Vzolja fel az endocitzis f lpseit!
3. Hogyan kpzdik a klatrin-burkos vezikula?
4. Mi a klnbsg a korai s a ksi endoszma kztt?
5. Mit jelent a receptor reciklizci?
6. Mi a transzcitzis?
7. Hogyan keletkezik a primer lizoszma?
8. Definilja a hetero- s autofgia fogalmt!
9. Vzolja a prtoteaszma felptst s mkdst!
10. Mi az ubikvitin szerepe a fehrjebontsban?
63
11. fejezet - A nvnyi sejtek vakuolris

rendszere
A kifejlett nvnyi sejtek jelents rszt foglalhatjk el a vakulumok, vagy akr egyetlen nagy kzponti vakulum.
Ez utbbi esetben a citoplazma vkony rtegknt veszi krl a vakulumot. A vakulumok membrnnal krlvett
kompartimentumok, melyeket a vezikulknl nagyobb mretk miatt klntnk el. Vizet, klnbz vzben oldott
anyagokat, enzimeket, raktrozott fehrjket, csapadkokat, kristlyokat vagy akr membrnnal krlvett jabb
vakulumokat tartalmazhatnak, de gyakran tallunk bennk lebontsra vr sejtorganellumokat is.
A vakulumok igen sokrt szerepet jtszanak a nvnyi sejt letben, ennek megfelelen tartalmuk, szmuk,
mretk s alakjuk is igen vltozatos. Az osztdssal kialakul kismret, merisztematikus sejtek ltalban tbb
kismret vakulumot tartalmaznak, majd a sejt trfogatnak nvekedsvel a vakulumok mrete is nvekszik,
s sok sejtben csak egy nagy vakulum marad.
A vakulum de novo tbbfle mdon is kialakulhat. Leggyakrabban a Golgi-kszlkrl levl vezikulkbl jn
ltre, vagy a sima illetve durva felszn endoplazmatikus retikulumbl fzdnek le. Megfigyeltk azt a jelensget
is, amikor a sima felszn endoplazmatikus retikulum nylvnyai krbevesznek egy citoplazmarszt, majd e
nylvnyok sszeolvadsval a citoplazmarszlet bezrdik. A bels membrn illetve a citoplazma ksbb
megemsztdik s kialakul a vakulum.
A vakulum feladatai
Turgor
A vakulum a benne tallhat sk s egyb ozmotikusan aktv molekulk, valamint a fligtereszt hrtya
tulajdonsgaival rendelkez tonoplaszt rvn jelents ozmotikus szvervel rendelkezik, ami a citoplazmbl vz
beramlst okozza. A citoplazma a vizet a sejtmembrnjn keresztl az extracellulris trbl ptolja. Ez a folyamat
trfogatnvekedssel jr, s mindaddig folytatdik, amg a sejtet krlvev sejtfal a nvekedsnek gtat nem szab.
A sejtfalra gyakorolt hidrosztatikai nyoms a turgor. A turgor az intra- s extracellulris ozmotikus nyoms
klnbsge. A legtbb nvnyi sejt turgora 105- 106 Pa kztti rtk. A vakulum s a citoplazma illetve az sszes
kompartimentum egyenslyi llapotban ugyanakkora ozmotikus nyomssal s vzpotencillal rendelkezik, gy
nett vzramls nem trtnik. Amirt a vakulumot tesszk felelss a turgor ltrehozsrt az elssorban nagyobb
mrete, s a benne lezajl ozmotikus vltozsok. A vakulum legfontosabb ozmotikumai a Na+, K+ s Cl- de
ezenkvl mg nagyon sok oldott anyag sorolhat az ozmotikumok kz. Az ozmotikumok koncentrcijnak
fenntartsban illetve vltztatsban a membrn transzportfolyamatai s a vaklumban lezajl polimerizcisdepolimerizcis folyamatok jtszanak szerepet.
A turgor igen fontos a nvny alakjnak megszabsban, mivel a lgy nvnyi rszek alapveten a turgor rvn
s tartjk meg feszes llapotukat. A vzveszts az ilyen nvnyi rszek lankadst okozza.
Trfogatnvels
A nvnyi ltforma megkvnja a nagy fellet test kialaktst. A nagy fellet lehetsget ad a hatkony
fotoszintzisre s gzcserre. A fellet nvelse azonban a trfogat nvelsvel is egytt jr, amit a
leggazdasgosabban a vzzel val feltlts biztosthat. Ezrt is alakulhatott ki a nagymret vakulum.
Homeosztzis
A vakulum a legfontosabb vz-, ion-, s aminosavraktr. A vzraktrozsi szerep klnsen nyilvnval a szukkulens
nvnyek esetn. Az ionok raktrozshoz sorolhatjuk a H+ felhalmozst is, br ennek legtbbszr kzvetlen
funkcionlis szerepe van. A vakuolris protonpumpa a vakulumba trtn H+ szlltshoz egy ATP molekult
hasznl el. Mivel a tonoplaszt a H+ teresztst tekintve jobban szigetel mint a plazmamembrn, a proton nagy
valsznsggel a vakulumban is marad. A vakulum pH-ja a vakulum tpustl fggen jelents eltrst mutat,
64
A nvnyi sejtek vakuolris rendszere
s dinamikusan vltozik. Fehrje raktroz vakulumokban kezdetben 7 krli, majd a fehrje lebonts sorn
cskken. Emszt vakulumokban savas. Nem ritka, hogy a vakulum pH-ja 2,5 alatti. A protonok citoplazmba
juttatsval a vakulum befolysolja a citoplazma pH-jt, s ezzel az ottani enzimek aktivitst a citoszkeleton
szervezdst stb.
Vdelem a patognek s nvnyevk ellen

A vakulumban sok olyan anyag halmozdhat fel, mely a nvny vdelmt biztostja az t megtmad llnyekkel
szemben. A nvnyek msodlagos anyagcserjnek szmos termke antimikrobilis, antifunglis hats, de ppgy
tallunk kztk a rovarokra, vagy akr az emlskre hatkony toxinokat. A vakulumokban felhalmozott anyagok
ezrt fontos npi gygyszati s gygyszeripari alapanyagok. A teljessg ignye nlkl lljon itt nhny plda:
az alkaloidok kzismert toxinok, melyek hatsspektruma igen szles. Kis mennyisgben gygyszerknt, vagy
lvezeti szerknt is hatsosak. Ismertebb alkaloidok a nikotin (dohny), koffein (kv), teofillin (tea), morfin
(mk), atropin (nadragulya), akonitin (sisakvirg), koniin (brk). Gyakori, hogy a nvnyi vakulumban inaktv
alkaloid a nvnyevk blrtraktusban alakul t toxikus formv.
a fenoloidok igen hatkony toxinok, antimikrobilis szerek, de a nvnyevkre is hatssal vannak.
A cianogn glikozidokbl rendkvl mrgez hidrogncianid szabadul fel (amigdalin)
protez inhibtorok, melyek gtoljk a nvnyt elfogyaszt llny emsztenzimeinek mkdst s az a
tpllkozs ellenre gyakorlatilag henhal
sejtfalbont enzimek, mint kitinz, glukanz
tejnedvek, melyek azon kvl, hogy insekticid s fungicid hatsak biztostjk a sebzett felszn zrdst is
Toxikus anyagok felhalmozsa, elklntse

Mivel a nvnyek nem kpesek elhagyni a szmukra toxikuss vlt krnyezetet, olyan mechanizmusokat fejlesztettek
ki, melyek talaktjk s/vagy a vakulumba transzportljk a szmukra toxikus vegyleteket. Ez az elklnts a
xenobiotikum hatstalants egyik fontos lpse. A xenobiotikumok s egyes lebomlsi termkek vakulumba
trtn transzportjt az n. ABC transzportercsald tagjai vgzik. A levelekben felhalmozott mrgez anyagok a
lombhulls sorn el is hagyjk a nvny szervezett.
Sznanyagok felhalmozsa
A vakulumok gyakran nagy mennyisg sznes vegyletet halmoznak fel, ezltal virgszirmokat, termseket s
egyb nvnyi rszeket tesznek szness. Ez nem ncl, a nvnyek gy fontos jelzseket kldenek a
krnyezetknek, mint pldul a beporz rovaroknak. A sznanyagok leginkbb antocianinok, melyekre jellemz,
hogy indiktor tulajdonsgak, vagyis sznk a pH fggvnyben vltozik. Savas kzegben vrs, semlegesben
bord, majd lgos krnyezetben kk, zld s srga. A sznvltozs szintn fontos informcit jelenthet, a virg
rse, vagy megporzatlan s megporzott llapota szerint vltozhat.
Raktroz feladat
A vakulumok hasznos, ksbb felhasznland anyagokat, pldul fehrjket raktrozhatnak az elzekben felsorolt
anyagokon tl. A fehrjeraktroz vakulumok klnsen a magvakban szemtermsekben fordulnak el. Feladatuk
nem az energiatrols, hanem, hogy aminosav raktrknt szolgljanak a csranvny szmra. Egyes fehrjeraktroz
vakulumok ms anyagokat s enzimeket is tartalmazhatnak.
Ltikus feladat
A nvnyi sejtekben az llati lizoszmkhoz hasonl feladatokat a vakulum lt el. A ltikus vakulumban savas
hidrolz enzimek vgzik a fehrjk, nukleinsavak, sznhidrtok s lipidek lebontst. Feladatuk igen sokrt, a
sejtalkotk turnovern tl, a szeneszcencia (regeds) s programozott sejtpusztuls folyamataiban is rszt vesznek.
65
Fontos szerepet jtszanak a lombhulls eltti lebont folyamatokban s gy a mg felhasznlhat anyagok lebontsa
rvn azok jrahasznostsban. Az endocitzissal, vagy fertzssel sejtbe jutott anyagok lebontsban is rszt
vesznek.
A nvnyi vakulum ltikus feladatokat is ellt
A ltikus s a fehrjeraktroz vakulum

A nvnyi sejtekben gyakran tallunk ktfle vakulumot, legtbbszr ltikus s fehrjeraktroz vakulum, vagy
vakulumok klnbztethetk meg. A ltikus vakulumok az llati sejtek lizoszmlis feladatait ltjk el, ennek
megfelelen sok hasonlsg mutathat ki kzttk. Ezek a vakulumok a transz Golgi hlzat (TGN) terletrl
levl tsksburk, vagy msknt klatrinburkos vezikulk (CCV) ltal szlltott emszt enzimek segtsgvel
vgzik a lebontst. Az emszt enzimek vlogatsa a Golgi kszlkben zmben a fehrjk N terminlis vgn
lev jel alapjn trtnik. Az llati sejtekben a mannz 6 foszft a lizoszomlis enzimek vlogatsi jele, a nvnyekben
ms szignlok jtszk ezt a szerepet. A megvelel N terminlis vlogatsi jellel rendelkez fehrjk egy membrnban
tallhat receptormolekulhoz kapcsoldnak (BP80/AtELP Arabidopsis thaliana EGF receptor like protein). A
receptor egy adaptor fehrjn (AP-1) keresztl klatrint kt meg a kls felsznn, s levlik a transz Golgi hlzatrl.
A vezikula falban tallhat egy olyan fehrje is (v-SNARE), amelyik a clvakulum falban tallhat komplementer
fehrjhez kapcsoldva biztostja a vezikulk fzijt. A citoplazmba kerl klatrinburkos vezikula falban
tallhat protonpumpk mkdse rvn a bels krnyezet elsavasodik, a chlatrinburok levlik, s az eddig inaktv
emsztenzimek aktivldnak. A vezikulk vagy kzvetlenl egy ltikus vakulummal fzionlnak, vagy a nvnyi
vakuolris rendszer f elosztjnak tekinthet n. prevakuolris kompartmenttel (PVC). Ez az llati sejteknl
multivezikulrist testknt (MVB) lert vakulum, vltozatos megjelens, ltalban egy tgabb feji vakulumrsszel,
s az ahhoz kapcsold vkony csszer nylvnnyal rendelkezik. A PVC membrnjban tallhat dokkol protein
(t-SNARE) kapcsoldik a vezikula SNARE fehrjje, s vgbemegy a fzi. A BP80/AtELP receptorok lebomlanak,
vagy retrogrd transzporttal visszajutnak a Golgi kszlkbe. A PVC-bl vezikulk tovbbszlltjk az
emsztenzimeket a ltikus vakulumba. A ltikus vezikulk/vakulumok megklnbztetse a raktroz vezikulktl
egy msik plazmamembrn fehrjecsald segtsgvel is trtnhet. Ezek a funkcijukat tekintve vztranszportot
biztost aquaporinok, a tonoplast intrinsic proteinek (TIP). Ezek egyik tpusa a TIP jellemz a ltikus enzimeket
tartalmaz vezikulkra s vakulumokra. A ltikus vakulumok vgzik a sejt lebont folyamatainak jelents rszt,
ide rtve az autofgit, az endocitzissal bejutott anyagok lebontst, az ubiquitinlt mebrnfehrjk lebontst.
ppen ezrt bennk gyakran tallunk sejtorganellumokat mielinburokszeren feltekert membrnszerkezeteket. A
ltikus vakulumok pH-ja savas, ami a savas hidrolzok aktivitsnak felttele.
66
A nvnyi vakuolris rendszer kapcsolatai

A nvnyi sejtek az llati sejtekhez kpest korltozottabb mrtkben kpesek endocitzisra. Ennek egyik oka a
sejtfal szrhatsa, vagyis csak azok az anyagok kpesek a sejtmembrnig eljutni, melyek a sejtfalon tjutnak. A
msik tnyez a nvnyi sejtek turgora. Mindezek nem akadlyozzk meg az endocitzist, de tbb energit ignyel
a turgornyoms ellenben trtn endocitzis, s a sejtfal szrhatsa miatt a fagocitzis szerepe cskken. Ennek
ellenre ezek a folyamatok lejtszdnak a nvnyekben is, s pldul a baktriumok fagocitzisa gyakori jelensg
ppgy, mint a receptor medilt endocitzis. Az endocitzisnak szintn jelents szerepe van a membrnfehrjk
lebontsban. Az ubiquitinlt transzmembrn fehrjk sszegylnek egy adott membrnterletre, majd endocitzissal
levlasztdnak a membrnrl. Az gy ltrejtt vezikula a PVC-be kerl, majd onnan a ltikus vakulumba, ahol
ezek a fehrjk lebomlanak.
Fontos szerepet jtszik a nvnyi vakuolris rendszer a sejtorganellumok, membrnok lebontsban is. Az llati
autofgihoz hasonl folyamatok a nvnyi vakulomban jtszdnak le. A szeneszcencia (regeds) sorn leboml
anyagok is a vakulumba kerlnek, majd innen transzportldnak a lebontott, de mg felhasznlhat anyagok a
nvny tll szvetei fel.
A fehrjeraktroz vakulumok keletkezse alapveten ktfle mdon trtnik. Ebben fontos szerepe van magnak
a raktrozott fehrjnek. Az Osborne fle fehrjecsoportosts szerinti knnyen oldhat albuminok s globulinok
alkotjk az egyik tpust, mg a nehezen oldhat prolaminok s a diszulfidhd kts gluteinek (esetenknt albuminok
s globulinok is) a msik tpust. A kt tpus termszetesen azonos kezdeti lpsekkel rendelkezik, vagyis a fehrjk
szintzise mindkt esetben a durva felszn endoplazmatikus retikulumban megy vgbe. Az els tpus szerinti
tvonal a Golgi kszlken keresztl halad. A DER-ben szintetizlt fehrjk vezikulris transzporttal jutnak a
Golgi cisz oldalra. A transz oldalon a fehrjket a C terminlis vgkn tallhat szignl alapjn a ciszternk
membrnjban lev receptorok vlogatjk ki. A fehrjk ezutn vezikulkba csomagoltan vlnak le, de ezek krl
nem alakul ki chlatrin burok. Membrnjukban az TIP fehrjk mutathatk ki. Ezeket a vezikulkat ers festdsk
alapjn denz vezikulknak (DV) is nevezik. A denz vezikulk vagy kzvetlenl fuzionlnak a fehrje raktroz
vakulummal (PSV), vagy a PVC/MVB kzbeiktatsval jutnak el a vakulumba. Fzival rtik tartalmukat a
fehrje raktroz vakulum belsejbe. Jellemz plda a raktrozott globulinokra a hvelyesek fazeolinja.
A msik tvonal a Golgi kszlk megkerlsvel halad. A ksn, a differncici utols szakaszban szintetizld
albuminok s globulinok, de fknt a prolaminok akkumulcijra jellemz szlltsi t ez. A DER-rl levl n.
prekurzor akkumull vezikulk (PAC) ltalban kzvetlenl a fehrje raktroz vakulumhoz szlltdnak, s
kihagyjk a Golgi kszlket. Anyagaikat nem fzival juttatjk be a vakulumba, hanem a vakulum membrnja
bekebelezi a vezikulkat, gy abban a - membrnok ksbbi lebontsig membrnba csomagolt fehrjeraktrozs
folyik. Ilyen raktrozott prolaminok a gabonaflk szemtermsben gyakoriak. A kukorica tartalk fehrjje a zein
is ide tartozik.
67
A ktfle vakulum illetve a PSV s a ltikus enzimeket tartalmaz vezikulk fuzionlhatnak egymssal, ami a
raktrozott fehrjk felhasznlsnak elfelttele. Egyes fehrjeraktroz vakulumok, mint pl a heterogn
aleuronszemcsk biztosan ilyen fzis termkek anlkl, hogy a lebonts rgtn megindulna. A heterogn
aleuronszemcskben az alapllomnyt alkot raktrozott fehrje mellett egy kristlyos szerkezet, membrnfehrjket
tartalmaz rsz s egy globoidnak nevezett inozitol hexafoszftot, raktrozott tpanyagot (fitolsav) tartalmaz
kplet is tallhat. Fontos megemlteni, hogy a fehrjeraktrozs nem energiaraktrozs, a fehrjkre a nvnyeknek,
elssorban a fejld csiranvnynek, mint fehrje ptelemekre, aminosavakknt van szksge.
A a nvnyi sejtek jelents rszben csak egyfle kzponti vakulum tallhat, mely inkbb a ltikus vakulumhoz
hasonl, s benne lebont folyamatok zajlanak. Ennek ellenre ugyanez a vakulum mg szmtalan feladatot kpes
elltni, mint pldul sznanyagok, ionok raktrozsa. A klnbz feladatok egy vakulumon belli elltsnak
szablyozsrl egyenlre kevs informcival rendelkeznk.
Lipidraktrozs
A nvnyi sejtek gyakran halmoznak fel lipideket a citoplazmban. Ezek a lipidcseppek nem tekinthetk
vakulumoknak, vagy vezikulknak, mert nem rendelkeznek teljes membrnburokkal. A lipideket egy fl membrn
burkolja, vagyis kifel a polros, befel az apolros oldalukkal elhelyezked foszfolipidek es egyb membrnpt
lipidek, melyekbe fehrjk is beplnek. Eredetket megvizsglva egyrtelmv vlik ez a szerkezeti felpts. A
raktrozott lipidek szintzise az endoplazmatikus retikulum tubulris vgein, pontosabban annak membrnjban
trtnik. Mivel a durva felszn s a sima felszn retikulum nem mindig klnthet el hatrozottan, - hiszen
tmennek egymsba, - a tubulris s ciszternlis tpusok elklntse itt praktikusabbnak tnik. Az irodalomban
ezrt nha a DER, nha a SER szerepel a lipidszinzis helyeknt.
Lipidcseppek kialakulsa az endoplazmatikus retikulumbl Az ER felsznhez kapcsolt riboszmkon oleozin

szintzis folyik. Az oleozin a kt membrn kz benylik az apolros rszvel, s stabilizlja a lipidcseppet. Szerpe
van a lipz enzimek (pirossal) megktsben is.
A raktrozott lipidek mint triacil-glicerolok (TAG) halmozdnak fel az ER membrnjnak ketts foszfolipid rtege
kztt. A lipidek (TAG) szintzisrt felels enzimek az ER membrnjban tallhatk. A lipidcseppek keletkezsben
jelents szerepe van az oleosin nev fehrjnek, ami a membrnba pl be, kifel hidrofil felsznvel a citoplazmval
rintkezik, hidrofb rsze pedig a lipidek kz nylik. Az oleosin az ER-hez kttt riboszmkon szintetizldik,
s mint membrnfehrje nem kerl be a ciszternba, hanem a membrnban marad. A membrnban mozogva eljut
a tubulris ER vghez, ahol a lipidcseppek levlsa trtnik. Ezen a terleten s a lipidcseppeken ppgy
68
nincsenek riboszma dokkol fehrjk, mivel azok a fl membrnban nem frnek el. A felduzzadt ER membrn,
mint lipidcsepp levlik a membrnrl, gyakorlatilag az ER membrnjnak kls felvel burkolva. A membrnba
plt oleosin fehrjk megakadlyozzk a kismret lipidcseppek sszeolvadst, stabilizljk azokat, s ktdsi
helyet biztostanak a lipidek lebontsban ksbb fontos lipzoknak. Nem minden nvnyi sejtben tallhat
lipidcseppet burkolnak oleosin molekulk. Elssorban olyan olajos magvakban fordulnak el, melyek kiszradnak
(repce, napraforg), de hinyoznak pldul az olajfa termsnek olajcsepjeibl, mivel itt nincs fiziolgis kiszrads.
Az ilyen lipidcseppek nagyobb mretek is a sorozatos sszeolvadsok eredmnyekppen alakulnak ki.
Krdsek:
1. Milyen feladatokat lt el a nvnyek vakuluma?
2. Hnyfle vakulumot klnbztetnk meg a nvnyi sejtben?
3. Milyen eredetek a LV-ok?
4. Honnan szrmaznak a raktrozott fehrjk?
5. Mi a PVC?
6. Hogyan trtnik a LV-ok emsztenzimeinek a vakulumba trtn transzportlsa?
7. Hogyan alakul ki a sejt turgora?
8. Miben klnbznek a fehrje raktroz s a ltikus vakulumok?
9. Milyen szerepe van a nvnyi vakuolris rendszernek a vdekezsben?
10. Hogyan jnnek ltre a lipidcseppek?
11. Mi az oleosin szerepe?
69
12. fejezet - A mikrotestek

A mikrotestek gyakorlatilag minden eukarita sejttpusban megtallhat, egyszeres membrnnal hatrolt, kzeltleg
gmb alak, 0,11,5 mikromter tmrj sejtszervecskk. A membrn ltal hatrolt teret a mtrix tlti ki, amelyben
gyakran fehrjekristly (cor vagy kristalloid) helyezkedik el. Szmuk a sejt fiziolgiai llapottl fggen vltoz
lehet, funkcijuk igen sokfle, az adott szervezettl s annak sejttpustl fggen vltoz.
A mikrotestekrl felttelezik, hogy a mitokondriumhoz s a szntestekhez hasonlan, de azokat az evolcis
idskln megelzve, endoszimbiontaknt vltak az eukarita sejtek organellumaiv. Evolcis fejldsk sorn
elvesztettk sajt genetikai s fehrjeszintetizl appartusukat. Ez a hipotzis nincs kellen bizonytva.
A peroxiszmk
Minden eukarita sejtben megtallhat sejtalkotk, melyek peroxiszomlis membrnnal hatrolt, kzeltleg gmb
alak, nhny mikromter tmrj sejtszervecskk. Mindig tartalmaznak hidrogn-peroxidot generl (innen
ered elnevezsk) oxidzokat (pl. hgysav-oxidz) s a reakci eredmnyeknt keletkez hidrogn-peroxidot bont
katalz (peroxidz) enzimet. A katalz akr a peroxiszomlis mtrix fehrjekszletnek harmadt is kiteheti (gyakran
kikristlyosodnak ltrehozva a kristalloidot).
Peroxiszma TEM fotja. A mtrixban a krisztalloid jl lthat.

A lgzsi oxign felhasznlsval a peroxiszomlis oxidzok meghatrozott szerves molekulkat dehidrognezik,
mikzben peroxid keletkezik:
A fenti kt reakciban RH2 valamilyen szerves szubsztrt, a reakciban hidrogndonor. llati sejtekben a
szubsztrtok lehetnek L- s D-aminosavak, hgysav, hossz C-lnc alkoholok vagy hossz C-lnc aldehidek
stb.. Az alkoholokbl aldehidek, az aldehidekbl zsrsavak keletkeznek. A hidrogndonoroknak megfelelen
szmos peroxiszomlis oxidzt ismernk. A msodik lpsben a katalz enzim jabb szubsztrtokat (belertve az
1 sznatomos hangyasavat, formaldehidet, etilalkoholt s egyb a sejt/szervezet szmra mrgez anyagot)
dehidrognez, gy eliminlva a rendszerbl a toxikus hidrognperoxidot. Ha valamilyen okbl hidrognperoxid
halmozdik fel a sejtben, a katalz enzim kpes azt vzz alaktani. Az utbbi reakcik a gerincesek szervezetben
a mjban (mregtelents) s a vesben (mrgez anyagok kivlasztsa) klnsen fontosak.
A peroxiszmk f fiziolgis funkcija azonban hossz C-lnc zsrsavak oxidcija, a -zsrsavoxidci. A

reakciban a zsrsavak a koenzim-A-val kialaktott tiol-szter ktsben vesznek rszt. A kezd lpsben az s
sznatomok kztt ketts kts alakul ki s hidrognperoxid keletkezik:
70
A mikrotestek
ahol R hosszlnc zsrsav, SCoA koenzim-A (S a molekula SH csoportjnak kn )

A sznatom tbb lpsben tovbboxidldik, amely vgl egy kt sznatomos molekularsz levlst (acetilkoenzim-A formjban) s a 2 sznatommal rvidebb zsrsavlnc koenzim-A-ra ktdst eredmnyezi:
A peroxiszmban nincs elektrontranszportlnc s ATP-szintetz (ms nven ATP-szintz), ezrt az oxidci sorn
felszabadul energia h formjban szabadul fel.
A peroxiszmk zsrsavoxidl enzimrendszere a hossz sznlnc (1022 sznatomos) molekulk feldolgozsra
specializldott a 8 s annl rvidebb sznlnc zsrsavakat a mitokondrilis zsrsavoxidl rendszer oxidlja
hatkonyabban. Ez a munkamegoszts felttelezi a kt organellum egyttmkdst is, amit a kzttk megvalsul
lipidforgalom is altmaszt.
A peroxiszmknak nincs sajt fehrjeszintetizl rendszere, fehrjik a citoplazmban, szabad riboszmkon
szintetizldnak s utlag transzportldnak a peroxiszmba. A fehrje importot a peroxiszmlis fehrjk Cvagy N-terminlisn lv szignl biztostja (PTS1 s PTS2; PTS = peroxisomal targeting signal), amelyet a
citoszolban lv szabad peroxiszmlis receptor molekulk ismernek fel. A receptor megkti a PTS szignlt
tartalmaz fehrjt, amely ebben a komplexben importldik a peroxiszma mtrixba. Itt a receptor felszabadul,
s visszajut a citoszolba (receptor reciklizci). Az importot a membrn receptorai s transzlokcis fehrji segtik.
A peroxiszma lipid importra is rszorul. Az importlt fehrjk s lipidek miatt a peroxiszma trfogata megn,
majd kettosztdik. A peroxiszmlis membrn az endoplazms retikulumbl szrmazik. Az ER-bl kismret
vezikulk (mikroperoxiszmk) fzdnek le, melyek egymssal vagy a mr ltez peroxiszmkkal fzionlnak.
A peroxiszma fehrjekszlete 32 ismert fehrjbl ll, ezek a peroxinok, melyeket a PEX gnek kdolnak.
Glioxiszma
Nvnyek s fonalas gombk specilis sejtszervecskje. Nvnyekben az olajos magvak raktroz szvetben
tallhat meg. Az oxidcis/peroxidcis s a -zsrsav-oxidci enzimkszletn tl a glioxalt-ciklus enzimeit is
tartalmazza. Csrz magban a lipid depkban a zsrsavbontsbl keletkez acetil gykkbl sznhidrtok
ellltshoz (glkoneogenezis) szksges kztes reakcitermkek jnnek ltre. A sznhidrtok ellltsra ezt
az anyagcsere-tvonalat a fotoszintzis beindulsig hasznljk a csranvnyek.
Levl peroxiszma
A levl peroxiszma a C3-as nvnyek fotorespircis komplexnek egyik tagja. A peroxiszmlis enzimkszleten
tl a glikolsav anyagcsere-tvonal enzimeit is tartalmazza. A szntesttel s mitokondriummal kpzett fotorespircis
komplex tagjaknt fontos szerepet tlt be a nvnyi sejtek anyagcserjben. Rszletesebben lsd a plasztiszokrl
szl fejezetben.
Glikoszma
Az ostoros egysejtek kztt (pl. Trypanosoma spp.) elfordul sejtorganellum. A glkognt s a glikolzis
enzimkszlett is tartalmazza. A glkolzis gyors s hatkony elindtsrt felels, a folyamat a glicerinaldehidfoszft keletkezsig jtszdik le a glikoszmban.
A glkz raktrozsrt felels mjsejtekben is megtalltk a glikoszmkat.
71
A mikrotestek
Hidrogenoszma
Az 1970-es vekben azonostottk anaerob parazita egysejtekben, korbban a peroxiszmbl szrmaztattk, ma
mr ltalnosan elfogadott, hogy eredete a mitokondriumbl vezethet le (redukldott mitokondrium). Kt
membrn hatrolja, molekulris hidrognt, acettot, szndioxidot s ATP termel. Kutatsnak modellszervezetei
Trichomonas fajok.
Krdsek:
1. Mi a peroxiszmk jellemz kzs enzimatikus reakcifolyamat?
2. Mi a katalz?
3. Mi a PTS?
4. Mit tartalmaz a kristalloid?
5. Sorolja fel a mikrotestek tpusait!
72
13. fejezet - A mitokondriumok

Az llati sejtek az anyagcsere-folyamataikhoz szksges energit a tpanyagok, elssorban zsrok s sznhidrtok
lebontsbl nyerik. A tpanyagok aerob, oxign felhasznlsval trtn lebontsa specializlt sejtszervecskkben,
a mitokondriumokban jtszdik le. A mitokondrilis oxidcis energia legnagyobb rsze ATP-szintzisre fordtdik,
vagyis nagyenergij foszftktsek formjban konzervldik. A lgzshez kapcsolt ATP-szintzis folyamatsort
nevezzk oxidatv foszforilcinak. Az oxidatv foszforilci a mitokondriumok f funkcija. Emellett jelents
szerepk van egyes ionok, elssorban a kalcium eloszlsnak szablyozsban, a szervezet hegyenslynak
fenntartsban s szintetikus folyamatokban (pl. a citrtkr kztes termkei zsrsav- s aminosav-szintzis kiindul
anyagai).
A mitokondriumok gyakorlatilag minden eukarita sejtben tallhat, fnymikroszkppal is azonosthat, fonl
vagy plcikaszer, nhny mikromteres testek. Szmuk, eloszlsuk sejttpusonknt vltoz, mjsejtekben pl. az
ssztrfogat kb. td rszt teszik ki. Jellemz, hogy a sejt azon terletein csoportosulnak, ahol intenzv ATPfogyaszt folyamat megy vgbe (pl. izmokban a miofibrillumokhoz simulva).
A mitokondrium felptse
A mitokondriumot kt membrn hatrolja. A kls membrn sima fellet, a bels membrn mly redket
kpez, melyek beemelkednek a mitokondrium belsejbe. A redk lehetnek a mitokondrium hossztengelyre
merleges lemezszer kpletek (n. cristk) vagy rendezetlen lefuts csvek (tubulusok). Mindkt esetben a redk
igen nagyra nvelik a bels membrn felsznt, szmuk s sszfelsznk egyenes arnyban ll az oxidatv
foszforilci intenzitsval. A kt membrn kztti keskeny, kb. 10 nm szles intermembrn rs a kls kamra.
A redk ltal hatrolt keskeny tr kzlekedik a kls kamrval. A bels membrn ltal hatrolt tr a bels kamra,
amit a mtrix tlt ki. A mitokondrium membrnjai s az ltaluk hatrolt terek sszettelkben s funkcijukban
is jelentsen eltrnek egymstl, de a klnbz terekben s felszneken lejtszd folyamatok szorosan egymshoz
kapcsoltan mkdnek.
Kriszts tpus mitokondrium hosszmetszete (TEM) .
Tubulris tpus mitokondrium hosszmetszete (TEM)

A kls membrn fehrje lipid arnya a plazmamembrnhoz hasonlan 1:1 (szrazanyag tartalomra vonatkoztatva).
Nagy mennyisgben tartalmaz egy porin nev fehrjt, ami -redket forml transzmembrn domnjai segtsgvel
igen nagymret hidrofil csatornt alkot (a legpermeabilisabb membrnt ltrehozva). Ennek ksznheten a kls
membrn tereszti a citoszol szmos molekuljt (kb. 5 kD molekulatmegig), gy a kls kamrban az 5 kD-nl
kisebb tmeg molekulk (ionok, cukrok) koncentrcija kzelt a citoszolhoz, br fehrje sszettele jellegzetesen
eltr.
A bels membrn feltnen sok fehrjt tartalmaz (szrazanyagtartalmnak kb. 75%-a fehrje). Benne lokalizldnak
az elektrontranszportlnc (lgzsi lnc, terminlis oxidci) fehrjekomplexei, az ATP-t szintetizl
73
A mitokondriumok
enzimkomplexek s egy sor transzloklfehrje. A bels membrn ersen szigetel tulajdonsg, specilis lipid
komponense a kardiolipin, amelynek ksznheten mg a kis molekulk, ionok szmra sem tjrhat.
A kls s bels membrn transzloklfehrji kztt vannak egymshoz kapcsoldk is, amelyek a citoplazmban
szintetizldott mitokondrilis fehrjket juttatjk be a citoszolbl a mitokondriumok belsejbe.
A mtrix anyaga tartalmazza a mitokondrium fehrjinek kb. ktharmadt. Itt tallhat a mitokondrium sajt
gnllomnya, gyr alak mitokondrilis DNS (mtDNS) tbb kpiban, sajt fehrjeszintetizl szervecski, a
mitokondrilis (70S) riboszmk, tovbb a citrtkr s a zssav--oxidi enzimrendszere.
A mitokondrium mkdse
A glikolzis, a sznhidrtok anaerob lebontsa 3 sznatomos termkig (piroszlsavig) a citoszolban trtnik. A
piruvt ezutn belp a mitokondrium mtrixba, dekarboxilldik s acetil-CoA keletkezik belle. Ugyanez a
termk keletkezik a zsrsavak lebontsbl is. Az acetil-CoA a citrtkrben oxidldik el, ahol ciklusonknt a
kztes termkekbl 2 molekula szndioxid s 4 pr proton s elektron lp ki. Ez utbbiakat elektronakceptor
koenzim molekulk (NAD+, ill. FAD+) veszik fel:
A reduklt akceptorok (NADH s FADH2) elektronjaikat az elektrontranszportlnc fehrjekomplexeinek adjk t.

A NADH oxidcija sorn mrhet standard szabadenergia-vltozs kb. 52 kcal/ml. Ez kzvetetten hasznosulhat
ATP-szintzisben s a bels membrn egyes transzportrendszereiben. Egy molekula NADH + H+ oxidlsa sorn
2,53 ATP-molekula keletkezhet, mg egy molekula FADH2 oxidlsa sorn felszabadul energia 1,52 molekula
ATP szintzist fedezi. Ez azt jelenti, hogy egy ecetsav molekula mitokondrilis metabolizlsa kb. 10 molekula
ATP szintzist eredmnyezi.
NADH s FADH2 nagyenergij elektronjai egy soklpcss rendszeren, az elektrontranszportlncon keresztl
jutnak el az oxignig, mikzben energijukat fokozatosan adjk le, mely protontranszportra fordtdik. Az
elektrontranszportlnc fehrji nagyobb komplexekbe tmrlve gyazdnak be a bels membrnba. Ngy ilyen
enzimkomplexet ismernk, kzttk kt elektronhordoz molekula, az ubikvinon (koenzim-Q, CoQ) s a citokrm
c biztostja a kapcsolatot.
Az elektrontranszportlncban az egyes komplexek elektronaffinitsa (redoxpotencilja) eltr, s gy kapcsoldnak
egymshoz, hogy mindegyik az eltte levt kpes oxidlni. Az ramls a I. komplextl, mely kzvetlenl a NADHtl veszi t az elektronokat, a legnagyobb elektronaffinitssal (legpozitvabb redoxpotencillal) rendelkez vgs
elektron akceptor, az oxign fel irnyul. Az egyes lpsekben felszabadul energit a komplexek arra hasznljk,
hogy protonokat pumpljanak ki a mtrixbl a kls kamrba. gy a membrn kt oldala kztt protonkoncentrcis elektromos potencilklnbsg (pH-gradiens, rtke kb. 11,4 pH-egysg) alakul ki. A kett egyttesen (kzs
nven elektrokmia potencilklnbsg, elektrokmiai gradiens) hajtja vissza a protonokat a bels kamrba.
Azonban a bels membrn a protonokat csak protoncsatornkon engedi t.
A f visszaramlsi (kiegyenltdsi) t az ATP-szintetzon (ATP-szintetz) keresztl vezet. Ez egy tbb alegysgbl
ll fehrjekomplex, amelynek katalitikus ATP-szintetizl egysge a bels membrn mtrix felli oldaln van,
mg transzmembrn egysge a bels membrnba rgzl s protoncsatornaknt mkdik. A csatornn keresztl
visszaraml protonok energija hajtja az ATP-szintzist. Az ATP-szintetz akkor llt el ATP-t, ha az elektrokmiai
gradiens elg nagy. Ha a gradiens (vagyis a kls kamrba kerl protonok koncentrcija) tl kicsi, az ATPszintetz ATP-t bont s protont pumpl ki a mtrixbl.
A mitokondriumok mkdse a klnbz anyagcseretermkek folyamatos ki- s beramlsa mellett biztosthat.
Mivel a bels membrn e molekulk szmra nem tjrhat, szlltsukat a bels membrnba plt integrns
transzloklfehrjk vgzik. A zsrsavak s a piroszlsav transzportrendszerei a pH gradienst hasznostjk,
csakgy, mint a foszftkicserl rendszer, mely szervetlen foszftot hoz be hidroxil-ion egyidej kiszlltsval.
Az ADP/ATP-transzloklfehrje negatv tltst visz ki a mtrixbl, vagyis a potencilklnbsg kihasznlsval
dolgozik. Szintn a proton gradiens mkdteti a mitokondrilis Ca-ion transzportot, mely norml esetben csak a
74
A mitokondriumok
sajt ionszksglet fedezsre szolgl, de a sejt srlse esetn fontos szerepe lehet a citoszol Ca-szintjnek
szablyozsban.
A mitokondrium-membrnok transzportrendszere.
A transzloklrendszerek teht valamilyen mdon az elektrokmiai potencilklnbsget hasznljk fel a
transzportra, gy versenyeznek az ATP-szintetzzal. Szmtsok szerint minden 4 kipumplt protonbl hozzvetleg
3 visszaramlsa szksges 1 molekula ATP szintzishez, mg a negyedik proton energija a transzportrendszereket
hajthatja.
A bels membrn integritsa alapvet az elektrokmiai gradiens kialaktsban s hasznostsban. A membrn
mkdsnek srlse az oxidci s foszforilci sztkapcsolshoz vezet, Ebben az esetben a protonok az ATPszintetz megkerlsvel is visszajuthatnak a mtrixba. ATP nem keletkezhet, a lgzsi energia h formjban
szabadul fel.
A sztkapcsols fiziolgiai szerepre plda az emlsllatok barna zsrszvetnek mkdse. Mitokondriumaiban
egy klnleges protoncsatorna, a termogenin fehrje lokalizldik, melyen a protonok szabadon tjuthatnak. gy
nem alakulhat ki az ATP-szintzishez szksges elektrokmiai gradiens viszont, az oxidci fokozott htermelshez
vezet. Ezrt a jl kapillarizlt barna zsrszvet fontos szerepet jtszik, klnsen az jszltt s fejletlen szervezetek
hhztartsban.
Klnbz szervezetekben, ms-ms mrtkben RNS importra is sor kerlhet. Nvnyekben, egysejtekben s
lesztsejtekben a citoszolbl tRNS kerl a mtrixba. Emlskben kis RNS-ek importjt figyeltk meg.
A mitokondriumok osztdsa
A sejtekben lv mitokondriumok szma s mrete nagy vltozatossgot mutat, ltalban igazodik a sejt anyagcsere
szintjhez. j mitokondrium nem keletkezik de novo, hanem csak a meglvk nvekedsvel s befzdssel
trtn osztdsa tjn jhet ltre. Osztdsuk hasonlt a baktriumok hasadssal trtn osztdsra s
nagymrtkben fggetlen a sejt sajt osztdsi ciklustl. A megtermkenyts sorn a spermiumbl a
mitokondriumok nem jutnak be a petesejtbe, ami azt jelenti, hogy a szervezet sejtjeinek mitokondriumai mind
anyai eredetek. A mitokondriumok nvekedshez fehrje- s nukleinsav-szintzis szksges. Ehhez a
mitokondrium sajt gnllomnya nem elegend, hiszen a mtDNS kevs bzisprbl llnak (a humn mtDNS kb.
16 000 bzispr hosszsg), egy-egy gyr a riboszomlis s transzfer-RNS gnjein kvl kevs fehrjekdol
gnt (humn mtDNS mindssze 13-at) tartalmaz, gy a mitokondrium fehrje-importra szorul. A mitokondrilis
fehrjk dnt tbbsgnek gnje a sejtmagban lokalizldik. A mitokondriumok, a nvnyi szntestekhez hasonlan,
szemiautonm organellumok. A mitokondrilis fehrjk legnagyobb rsze a citoplazmban szintetizldik, onnan
jut a mitokondriumba. A transzlokcit bonyolult receptorokbl, transzportl- s feldolgozfehrjkbl ll
appartus vgzi. A legtbb ilyen fehrje a citoszolban, szabad riboszmkon szintetizldik, N-terminlisukon
mitokondrilis lokalizcis szignl van. Ezt a szignlt a kls membrnban lv receptor ismeri fel. A ligandumot
kttt receptor a transzlokcis rendszerekhez kapcsoldik s megindul a fehrje transzlokcija. Az importlt
fehrje a transzport-komplexek kzvettsvel ltalban a mtrixba kerl, ott nyeri el vgs formjt (pl. lehastdik
rla a szignl) s jut a rendeltetsi helyre, a mtrixba, a kls kamrba vagy a membrnokba. A transzport alatt
chaperon fehrjk segtik a folyamatot. A transzport energiaignyes folyamat.
75
A mitokondriumok
Eredete
A mitokondrilis DNS s fehrjeszintetizl appartus, a DNS mkdse s molekulris sajtossgaik alapjn, a
prokaritk genetikai appartushoz hasonlak. Ezt az endoszimbionta elmlettel lehet magyarzni. Az elfogadott
nzet alapjn a mitokondriumok se valamilyen aerob anyagcserre kpes prokarita szervezet lehetett, amely
endocitzissal jutott be egy si eukaritkba, kzttk tarts egyttls alakult ki.
Krdsek:
1. Mit jelent a szemiautonmia a mitokondrium esetben?
2. Rajzoljon le egy mitokondriumot s sorolja fel a rszeit?
3. Melyek a mitokondrium legfontosabb funkcii?
4. Hol lokalizldnak ezek enzimkszletei?
5. Hogyan kapcsoldnak egymshoz a rszfolyamatok?
6. Mi a kemiozmotikus kapcsols lnyege?
7. Hogyan alakul ki az elektrokmiai gradiens?
8. Mi a klnbsg a kls s bels membrnok felptsben?
9. Milyen szerepe van a porin fehrjnek
10. Milyen folyamatok versengenek az ATP-szintetzzal?
76
14. fejezet - A plasztiszok s a

fotoszintzis
A viszonylag kevs kemoautotrf llnytl eltekintve, melyek a szervetlen anyagokbl trtn szerves anyag
szintzishez az energit kmiai ktsekbl nyerik, az lvilg alapveten a napfny energijbl l. Azok az
llnyek melyek ezt kzvetlenl kpesek felhasznlni a fotoautotrf szervezetek, mg a hetertrf szervezetek az
autotrfok ltal felptett anyagokbl tpllkoznak.
A fotoautotrf szervezetek a fny energijval szndioxidbl s valamilyen redukl anyagbl kpesek szerves
vegyleteket, els krben sznhidrtokat felpteni. A reduktv krnyezetben l fotoautotrf szervezetek redukl,
elektrondonorknt szolgl anyagknt fknt knhidrognt hasznlnak fel (pl. knbaktriumok), mg az oxidatv
krnyezetben lk elektrondonorknt vizet hasznlnak. Az ltalnos fotoszintetikus folyamat a kvetkez kplettel
jellemezhet
(ahol A = S vagy O)
A fotoszintzis a nvnyeknl a bakterilis eredet, endoszimbita plasziszban, elssorban a fotoszinzisre
specializldott kloroplasztiszban jtszdik le.
Kloroplasztisz
A kloroplasztisz a nvnyekben ketts membrnnal bortott sejtorganellum, mely sok prokarita jellemvonst
mutat, bizonytkul a bakterilis, endoszimbionta eredetnek. Ilyen prokarita jellemvonsok:
cirkulris DNS tbb kpiban
sejtmag, illetve mindenfle, bels membrnnal krlvett kompartimentum (organellumok) hinya
bakterilis riboszmk, fehrjeszintzis
baktriumokra jellemz membrnalkotk a bels s rszben a kls burkolmembrnban
osztdssal trtn szaporods (nincs de novo keletkezs)
Kloroplasztisz tilakoid rendszere

A plasztiszok burkolmembrnjai a fehrjk transzportja sorn kialakul transzlokonoktl eltekintve soha nem
kapcsoldnak egymshoz. A kt membrn sszettelben jelentsen klnbzik egymstl, ami az eltr eredetnek
(a bels membrn bakterilis a kls kevert eredet) ksznhet.
77
A plasztiszok s a fotoszintzis
Levl mezofillum sejtek kloroplasztiszokkal.

A kloroplasztisz belsejt az alapanyagnak, plazmnak tekinthet mtrix a sztrma alkotja, melyben a fehrjeszintzis
s mg sok egyb folyamat zajlik. Itt tallhat a plasztiszok DNS-e, mely tipikus gyr alak DNS, tbb kpiban.
A sztrmban helyezkedik el a plasztisz bels membrnrendszere, a tilakoidrendszer. A tilakoidok zskszer
membrnszerkezetek, melyek llhatnak szabadon (sztrma tilakoidok), vagy egymsra rtegzdve (grnum
tilakoidok). A tilakoid membrnok ltal krbezrt tr a tilakoid lumene. A tilakoidok kapcsolatban llhatnak a
bels burkolmembrnnal, de keletkezsk kln szintzissel trtnik, s nem egyszeren a bels burkolmembrn
betrdsvel jnnek ltre. A tilakoid membrnokban folyik a fotoszintzis fnyszakasza, mg a stt szakasz, a
Calvin-ciklus a sztrmban zajlik.
A plasztiszok egyb tpusai

A plasztiszok nagyon sokfle formban jelenhetnek meg a sejtben ezeknek csak egyik, br leggyakoribb formja
a kloroplasztisz. Maga a plasztisz sz a plasztikussgra utal, mivel a plasztiszok formja, szerkezete nagyon
vltozatos lehet, s a klnbz tpusok egymsba is talakulhatnak.
A magasabbrend nvnyek kloroplasztisza ltalban lencse alak kb. 510 m hossz s 35 m szles organellum,
de alakja vltoz, s nha fnymikroszkppal az l kloroplasztiszoknak egy hossz, farokszer nylvnya is
megfigyelhet, amit sztromulnak neveznk. Szmuk egy sejtben a sejt funkcijtl fgg, mezofill sejtekben
30150 plasztisz is elfordul. Algkban lehet egy sejtben csak egy plasztisz is. Az algk plasztiszai alakban
rendkvl vltozatosak, lehetnek csavarodott szalag, vagy csillag alakak, kehelyszeren beblsdk stb.
78
Plasztisz tpusok, s egymsba alakulsuk
Stromulk.
Proplasztisz
A klnbz plasztisz tpusok ebbl a kevss differencilt proplasztiszbl alakulnak ki. Ilyen plasztiszok tallhatk
a merisztematikus sejtekben, de sok szvetben megmaradnak a proplasztiszok a szveti differencici utn is. gy
megtallhatk az epidermisz sejtjeiben, a rhizodermiszben, s a gykr ms szveteiben is elfordulhatnak. Mretk
ltalban 0,21 m, bels szerkezetk gyengn fejlett. A tilakoid rendszer csupn nhny lamellra s a bels
membrn kevs invagincijra korltozdik. A sztrmban kevs riboszma s egy, vagy nhny kismret
kemnytszemcse tallhat.
Kromoplasztisz
A sznes, ltalban srga, narancsszn vagy vrs plasztiszok. Sznket a bennk felhalmozd karotinok s
xanthofillok adjk. A kromoplasztiszok felelsek nagyon sok terms (paradicsom, paprika), virg (krmvirg,
bdske) s gykr (srgarpa) sznrt. A kromoplasztiszok kialakulhatnak kzvetlenl proplasztiszokbl, vagy
zld szn kloroplasztiszokbl is. A termsek sznnek megvltozsa az rs sorn a kloroplasztisz kromoplasztissz
alakulsval fgg ssze. A karotinoidok bioszintzise a membrnokban trtnik, ezrt a kromoplasziszokban itt
rengeteg enzim tallhat. A karotinoid bioszintzist vgz sokfle enzim mind a magban kdolt, a citoplazmban
szintetizldik, s ezutn transzportldik a plasztisz sztrma llomnyba, ahol chaperonok segtenek a
fehrjestruktra kialaktsban. Ezek az enzimeknek a sztrmban inaktvak, csak a membrnhoz val kapcsoldssal
aktivldnak. Itt tallhatk a szubsztrtjaik is. A karotinoidok nagyon sokflk, konjuglt kettsktseket tartalmaz
sznlncok. Bioszintzisk kzponti tpusa a likopin, mely pldul a bdske virgnak srga sznt adja. A likopin
mg egyenes sznlnct klnbz enzimek talaktjk s a sznlnc vgein gyrk jnnek ltre. A karotinok
sznt elssorban a konjuglt kettsktseket tartalmaz sznlnc delokalizlt elektronjainak a gerjeszthetsge
biztostja. A kromoplasztiszok kialakulsa nem keverend ssze a szeneszcens plasztiszok, a gerontoplasztiszok
79
kialakulsval, br a kloroplaszisz szne itt is srgra vlt. A kromoplasztiszok mkd plasztiszok, s vissza is
kpesek alakulni kloroplasztissz, mint ahogy azt a srgarpa fldbl kikerl s megzldl rszein
megfigyelhetjk. A kromoplasztiszok kialakulsa sorn a lipid tartalm plasztoglobulusok felszaporodnak a
sztrmban, majd megnylt tubulusokk alakulnak. Ezekben trtnik meg a karotinoidok felhalmozdsa. A karotin
kristlyok ezekben a lipidcseppekben, vagy a sztrmba kikerlve tallhatk. Amennyiben az talakuls
kloroplasztiszbl trtnik, a tilakoid rendszer lebomlik, bellk egyrteg membrnlipidekkel burkolt
plasztoglobulusok alakulnak s a fejlett kromoplasztiszban a tilakoid rendszernek mr csak a maradvnyai tallhatk
meg. A kromoplasztiszokban j membrnok alakulnak ki, melyek zskokat, vagy csszer kpleteket alkotnak.
Leukoplasztisz
Szintelen plasztiszok, igen fejletlen tilakoidokkal. Elsrend feladatuk a lipid anyagcserben val rszvtel,
elssorban a monoterpenoidok bioszintzise. A terpenoidok fontos illolajok, gyantk, melyek gygyszati,
lelmiszeripari alapanyagok is. Maga a klorofill fitol oldallnca, s a karotinoidok is terpenoidok. A terpenoid
bioszintzis a nvnyekben a plasztiszokban s az endoplazmatikus retikulumban trtnik, de a kiindul alapanyag
a citoplazmban szintetizldik acetil-CoA-bl. Az endoplazmatikus retikulummal val szoros egyttmkdsre
utal, hogy a leukoplasztiszok krl gyakran tallunk ER tubulusokat. A leukoplasztiszok elssorban a kivlaszt
kpletekben, virgokban, epidermiszben tallhatk. Nem keverendk ssze a kemnytt tartalmaz
amiloplasztiszokkal.
Amiloplasztisz
A nvnyi sejtekben a kemnyt raktrozsa kizrlag plasztiszokban, nagy mennyisgben az erre specializldott
amiloplasztiszokban trtnik. Az amiloplasztiszok bels membrnrendszere gyengn fejlett, gyakran az egsz
sztrmallomnyt kemnytszemcsk tltik ki. A nvnyi kemnyt -1,4-glkzpolimer, (amilz) mely idnknt
1,6-os elgazsokat is tartalmaz (amilopektin). Az amilz molekulk egy kristlyosodsi gcbl indulnak ki
sugarasan, s a szerkezet kiritkulsnak megakadlyozsra idnknt 1-6-os oldalelgazsokat hoznak ltre. Az
ilyen, sok elgazst tartalmaz szakaszok eltr trsmutatjuk miatt fnymikroszkppal is lthat gyrket
alkotnak a kemnytszemcsken. A kemnyt teht nem ktfle anyagbl (amilz s amilopektin) ll, csupn
egyes szakaszokon a glkzpolimer nagyobb gyakorisggal gazik el. Kemnytszemcsk ms plasztiszokban,
is elfordulnak, ha nem is nagy mennyisgben. A kloroplasztisz ltal szintetizlt glkz molekulk ideiglenesen
kemnytben raktrozdnak mivel egybknt ozmtikus problmt jelentennek. Amiloplasztiszok elssorban
raktroz szervekben, magvakban, termsekben fordulnak el nagy mennyisgben. Az amiloplasztiszok kpesek
kloroplasztiszokk alakulni (fnyre kerlt burgonya megzldlse) s fordtva.
Etioplasztisz
Fny hinyban a proplasztiszbl trtn kloroplasztisz kialakuls megakad, s egy specilis plasztisz az etioplasztisz
alakul ki. Ez a plasztisztpus nem egy tmeneti forma a kloroplasztisz differencicijban, hanem inkbb egy
kerlt llomsnak tekinthet. A kloroplasztisz kialakulshoz, a bels tilakoidrendszer kifejldshez szksg
van a klorofill-fehrje komplexek kialakulsra. A klorofill bioszintzisnek azonban van egy fnyfgg lpse
(a protoklorofillid klorofillid talakuls) aminek eredmnyeknt a szntelen protoklorofillid halmozdik fel, de
ez nem kpes megfelel fehrjekapcsolatok kialaktsra. A tilakoid szerkezet ennek hinyban nem jn ltre, de
a felhalmozd membrnalkotk egy sajtos kristlyszer, trbeli csszerkezett lnak ssze. Ez az n. prolamellris
test (PLB). Fny hatsra gyorsan kialakul a klorofill, s a prolamellris test trendezdik a kloroplasztiszra jellemz
tilakoidrendszerr. Etioplasztiszok normlis krlmnyek kztt csak ritkn fordulnak el a nvnyekben (pl.
rgyek belsejben) inkbb a fnytl elzrt hajtsokban alakulnak ki knyszersgbl. Kloroplasztiszbl
visszaalakuls etioplasztissz nem fordul el, mert a tilakoid rendszer nem alakul vissza prolamellris testt.
Gerontoplasztisz
A szeneszcens plasztiszokat nevezzk gerontoplasztiszoknak is. A plasztiszok lebomlsnak jellegzetes lpsei
vannak melyek a levelek lehullsa eltt mennek vgbe, amennyiben erre megfelel id ll rendelkezsre. Szp
megnylvnulsa ennek az szi lombsznezds. Ilyenkor a plasztiszok srga, barna, vrs sznv alakulnak, de
ez a folyamat eltr a kromoplasztiszok kialakulstl. Ilyenkor nem intenzv karotinoid szintzis miatt alakul ki a
szn, hanem a jelenlv karotinoidok vlnak lthatv, mivel a sznket elfed klorofill bomlsa korbban indul
80
meg. A klorofill bomlsval az elektrontranszportlnc sztessvel, a fny gerjesztsnek eredmnyekppen reaktv

gykk keletkeznnek, ezt gtolja egy bizonyos mrtkig a karotinoidok jelenlte. A kloroplasztisz a programozott
sejthall folyamatainak fontos rsztvevje, s a nvny igyekszik a levlhulls eltt minden fontos anyagot
felhasznlni, visszaszvni. A szeneszcencia els jeleknt a tilakoid rendszer dezorganizldik, a sztrmallomny
denzitsa jelentsen megn. A membrnok lipidtartalma lipidcseppekbe, plasztoglobulusokba kerl t, majd kijut
a plasztiszbl s a sejt ms anyagaival egytt a nvny tll rszeibe transzportldik. A folyamat vgre a
plasztisz szinte teljesen kirl s elpusztul. A folyamat egy ideig reverzibilis, pl. giberellinsav kezelssel
visszafordthat.
Gerontoplasztiszok Az szi lombszinezds a szeneszcens plasztiszok eredmnye. A plasztiszok tilakoidrendszere

sztesik, a membrnok lipidtartalma lipidcseppekbe (plasztoglobulusok) kerl.
A plasztiszok (s mitokondriumok) eredete,

endoszimbita elmlet
Ma mr ktsgbevonhatatlan tny, hogy a plasztiszok, s a mitokondriumok valaha lt cianobaktriumok illetve
a mitokondrium esetben egy -proteobaktrium endoszimbionta leszrmazottai. Sachs mr 1882-ben lerta
knyvben, hogy a plasztiszok a sejtben osztdssal szaporodnak, szmukban alkalmazkodva a sejthez, mintha
nll lnyek lennnek. 1885-ben Schimper lerta a proplasztiszokbl trtn kloroplasztisz differencildst, s
az a tny hogy a kloroplasztiszok mindig egy szintelen plasztiszbl alakulnak ki, valamint Sachs megfigyelsei
arra a kvetkeztetsre juttattk, hogy a plasztiszok szimbizisban lnek a nvnyi sejttel. Arra is rmutatott, hogy
a szimbizisnak igen nagy jelentsge van a nvnyek evolcijban. Mintegy t vvel ksbb Altmann publiklta
megfigyelseit a mitokondriumok festdsvel kapcsolatban. Felfigyelt r, hogy a mitokondriumok ugyanazokkal
a festkekkel mutathatk ki eredmnyesen a nvnyi s llati sejtekben, mint amik a baktriumok festsre is
alkalmasak. Ezek alapjn Altmann arra a kvetkeztetsre jutott, hogy a mitokondriumok a sejtben l baktriumok.
Mivel cikkben e fontos megfigyelsen tl sok megalapozatlan llts is szerepelt (pldul a sejtmagot nll letre
alkalmas bioplazmnak tekintette) nem kapott tudomnyos tmogatst. Egy fiatal orosz biolgus Mereschkowsky
1905-ben publiklta elszr pontos megfigyelsekkel s rvekkel altmasztott elkpzelst arrl, hogy a plasztiszok
idegen mikroorganizmusok, cianobaktriumok a nvnyi sejtben, melyek a sejtfejlds korai stdiumban
kerltek be a heterotrf tpllkozs sejt belsejbe, s ott szimbizisba kerlve egytt evolvldtak a nvnyi
sejttel. A nvnyi sejtek szerinte olyan llati sejtek, melyeket megszlltak a cianobaktriumok. Ebbl az elkpzelsbl
fejldtt ki az endoszimbionta elmlet.
81
A plasztiszok,s klnbz llnyek endoszimbizissal trtnt kialakulsa

A plasztiszok teht valamikor lt cianobaktriumok leszrmazottai. Az endoszimbizis eredmnyeknt a sok milli
v alatt az egykori endoszimbiontk elvesztettk nllsgukat, a sejt felgyelete al kerltek s sejtorganellumokk
vltak. Az endoszimbizis els lpseknt egy eukarita sejt bekebelezte a cianobaktriumot s az a sejtben lve
szaporodott, fotoszintetizlt. Gnjeinek nagy rsze tkerlt a sejtmagba. Eredeti, 45000Kb mret DNS-k kb.
200Kb-ra cskkent, s mintegy 120 gnt tartalmaz. A sejtmagba tkerlt gnek szma mintegy 800. Az elsdleges
szimbizis eredmnyeknt ltrejtt llnyek hrom csoportjt ismerjk: Glaukofitk, vrs moszatok s zld
moszatok. A Glaukofitk kis csoportjban tallhat plasztisz hasonlt taln leginkbb a cyanobaktriumra. A
plasztisz kt membrnja kztt megtallhat a cianobaktriumokra jellemz sejtfal. A plasztiszban csak klorofill
a, s fikobilinek tallhatk, a kemnyt a plasztiszon kvl raktrozdik. A vrs s zld algk plasztiszai nem
rendelkeznek fallal a kt membrn kztt. A kt membrn eredetrl nincs egyrtelm tudsunk. Mivel a
cianobaktriumnak eleve kt membrnja s kztte sejtfala volt, a bekebelez membrnnal egytt az elsdleges
szimbionta plasztisznak hrom membrnja kellene, hogy legyen. Valsznleg a bekebelez membrn korn eltnt,
de a plasztisz kls membrnjnak sszettele alapjn az vegyes (prokarita s eukarita) eredetnek tekinthet.
Benne eukarita foszfatidilkolin s prokarita galaktolipidek is megtallhatk. A zldmoszatokbl szrmaztathatk
a szrazfldi nvnyek, teht plasztiszaik, br sokfle megjelensek, ennek a valamikori cianobaktriumnak a
maradvnyai.
Az elsdleges szimbiontk jabb bekebelezs ldozataiv vltak, gy jabb llnyek alakultak ki. Mind a
zldmoszatok, mind a vrsmoszatok gn tallunk msodlagos szimbizissal kialakult llnyeket. A zldmoszat
bekebelezsvel alakult ki a Chlorarachniophyta csoport s az Euglenk. A Chlorarachniophytk estben a
bekebelez eukaritban l elsdleges szimbionta megrizte sejtmagjnak maradvnyait is, ez az n. nukleomorf.
Ezeknek a plasztiszoknak ngy membrnja van, bellrl kifel haladva kett az eredeti plasztisz, egy az elsdleges
bekebelez eukarit, s egy a msodlagos bekebelez eukarita bekebelez membrnja. Az eredeti sejtmag
maradvnya teht a msodik s harmadik membrn kztt tallhat. Az eredeti sejtbl gyakorlatilag ms nem
maradt meg. Az Euglenk esetben csak 3 membrnja van a plasztisznak, mivel a bekebelez membrn s az
elsdleges endoszimbionta sejtmembrnja valsznleg egybeolvadt. Nukleomorf sem tallhat a plasztiszban.
Az euglna a plasztiszvizsglatok egyik kedvelt ksrleti alanya, mivel a sejt elviseli a plasztisz elvesztst s kpes
heterotrf tpllkozsra ttrni. Termszetesen az elvesztett, vagy kirtott plasztiszt sohasem tudja regenerlni.
82
A vrsmoszatok vonaln a msodlagos endoszimbizis eredmnyeknt nagyon klnbz csoportok jttek ltre.
Az egyik csoport a Chromistk, ide tartoznak a Heterokont ostorosok (Diatmk, barnamoszatok, Oomycotk), a
Haptophytk, s a Cryptomonadok (Cryptophytk). Mindegyikk ngy membrnnal burkolt plasztisszal rendelkezik,
de a nukleomorf csak a Cryptomonadoknl maradt meg, amit cryptonucleusznak neveznek. A msik gon az
Alveolata csoport tagjai tallhatk. A Dinoflagelltk hrom membrnnal burkolt plasztisszal rendelkeznek,
fotoszintetizlnak s sok kzlk egyben heterotrf mdon is tpllkozik (mixotrfok). A Csillsok csoportja nem
rendelkezik plasztisszal ami magyarzhat a plasztisz elvesztsvel, de a Chromalveolata csoport egysges
szrmazsnak megkrdjelezsvel is. Akik plasztisz tartalm sktl vezetik le a Ciliata csoportot, igazolst
talltak az jabban megjelent cikkekben, miszerint a plasztisz gnek lbnyomaira bukkantak a csillsok magjban.
Mivel azonban a csillsok kztt is vannak fotoszintetizl organizmusokat bekebelez fajok, illetve ms forrsok
is elkpzelhetek, tbben felvetik a horizontlis gntranszfer lehetsgt. A harmadik Alveolata csoport az
Apicomplexa. Ebben a csoportban kizrlag parazita organizmusok tallhatk, mint pldul a malria, vagy a
babesia krokozja. Jellemzjk egy apicoplastnak nevezett, nem fotoszintetizl plasztisz, melyet hrom, vagy
ngy membrn burkol. A plasztisz a sejt szmra fontos anyagokat llt el, gyakorlatilag nlklzhetetlen, s
felttelezheten msodlagos endoszimbizis eredmnyeknt kerlt a sejtbe. Az endoszimbizis jabb harmadlagos
szintjt is ismerjk, melyben a Dinoflagelltk kebeleznek be elsdleges, vagy msodlagos szimbiontkat. Mind
zldalgkkal, mind a Chromistk csoportjaival alkotnak szimbizist.
Mai endoszimbionta pldk

Br sokig gy gondoltk, hogy az endoszimbizis egy egyedi folyamat volt, ami csak igen ritkn trtnhet meg,
egy klnleges llny a Paulinella chromatofora rcfolni ltszik erre a paradigmra. A Paulinella egy amba,
melyben kloroplasztiszknt mkd cianobaktriumok lnek szimbizisban. Ez a szimbizis jval fiatalabb mint
a mr ismert elsdleges szimbizis. A Paulinnella sejtmagjban eddig mintegy 30 plasztisz eredet gnt sikerlt
azonostani, s a cianobaktrium elvesztette gnjeinek mentegy 75%-t. Amirt annyira klnleges ez az llny
az abbl ered, hogy az eddigi elkpzelsek szerint a cianobaktriumbl a sejtmagba trtn gntranszfer, s az
ezzel sszefgg plasztiszba irnyul fehrjetranszport az eddigi elkpzelsek szerint rendkvl sszetett folyamat,
s csak lassan, fokozatosan alakulhatott ki. Ez az llny esetleg megadhatja a kulcsot ehhez a rejtlyhez. A
Paulinella esetben a plasztiszba irnyul fehrjetranszport a nvnyekkel ellenttben a szekrcis mechanizmuson
(ER, Golgi) keresztl vezikulrisan trtnik. Tbb olyan llnyt is ismernk, amelyik valamilyen mrtk
szimbizisban l cianobaktriumokkal, vagy ms fotoszintetizl llnyekkel, de ezekben a szimbizis nem jelenti
a cianobaktrium llandsulst a sejtben. Ismertek tengeri csigk (pl. Elysia chlorotica) melyek algkkal
tpllkoznak, de az algk plasztiszait rintetlenl hagyva, azokat specilis sejtekbe szlltjk. Itt a plasztiszok
hnapokon keresztl is kpesek fotoszintetizlni, s energival elltni a gazdaszervezetet. Hasonl plasztiszlopst
megfigyeltek a Csillsok (Myrionecta rubra) s az egybknt heterotrf mdon l Dynoflagelltk (Pfisteria
piscicida) esetben is. E kt utbbi csoport esetn ez kevsb meglep, hiszen plasztiszt tartalmaz skkel
rendelkeznek.
Plasztiszmag gntranszfer
A cianobaktriumok endoszimbiontaknt val stabilizldsa a bekebelez s az endoszimbionta kztti informcis anyagramls pontos szablyozst kvetelte. Valsznleg ennek a stabilizlsnak fontos lpse volt a
cianobaktrium gnjeinek tjutsa a sejtmagba. A gntranszfer a sejtmagba viszonylag egyszeren vgbemehet,
ilyen ksrleteket a maternlisan rkld plasztiszgenom alapjn a spermasejt degradld plasztiszaiban jelenlv,
s a magba tjut rezisztenciagnek segtsgvel sikeresen, s viszonylag nagy gyakorisgot kimutatva vgeztek.
A problma elssorban a prokarita s az eukarita gnszablyozs klnbsgben rejlik. A prokarita gn a
sejtmag DNS llomnyba beplve mg nem lesz mkdkpes. Mindezeken tl, mg kdolni kell a
gntermkeknek a plasztiszba trtn bejutst biztost szekvencikat is, hiszen az eredeti gntermk helyben
kszlt, mg a sejtmagba tkerlt gn termkt kt, hrom, vagy ngy membrnon is t kell juttatni. Egyelre nem
tudjuk, hogy ez a szervezds hogyan alakult ki.
Klnsen rdekesek ebbl a szempontbl a msodlagos szimbizissal kialakult llnyek. Ezek jelents rsznl
az elsdleges bekebelez sejtmagjbl a gnek teljes mrtkben tkerltek a msodlagos bekebelez sejtmagjba,
de a Chlorarachniophytk s Cryptomonadok (Cryptophytk) esetben az elsdleges gazdasejt sejtmagja bizonyos
mrtkben fennmaradt. Ez a nukleomorf a Chryptomonadok esetben mg mkd gneket tartalmaz, s krltte
megmaradt a citoplazma egy rsze is, 80 S riboszmkkal, s mkd fehrjeszintzissel. Ily mdon az eredeti
83
cianobaktrium genom jelentsen talaktva hrom helyen lokalizldik, melyeknek egytt kell mkdni, s a
gntermkeket clba kell juttatni.
A csillsok esetben annak ellenre, hogy a legtbben plasztiszt tartalmaz skre vezetik vissza ket, a plasztisznak,
illetve az elsdleges bekebeleznek nyoma sem maradt. A legjabb genetikai analzisek azonban tbb (16) plasztisz
specifikus gn nyomt fedeztk fel a sejtmagban. Mg nem eldnttt krds, hogy ezek egy tnyleges plasztisz
lbnyomai, vagy esetleg horizontlis gntranszferrel kerltek be a sejtmagba.
Fehrje transzport a plasztiszba (targeting)

A nvnyi sejtek esetben a plasztisz szmra kszl fehrjk jelents rsze a sejtmagban kdolt, s csak egy
kisebb rsze magban a plasztiszban. A legismertebb plda a Rubisco enzim, melynek kisebbik alegysgnek a
gnje a magban, a nagyobbik a plasztiszban tallhat. A sejtmagban kdolt fehrjk szintzise a citoplazmban,
szabad riboszmkon trtnik. A fehrjk clbajuttatsa vgett, az N-terminlis vgen tranzit peptid szakasz
tallhat. A tranzit peptid biztostja, hogy a fehrje tjusson a plasztisz kt membrnjn. A fehrjket chaperonok
(Hsp 70) transzportra alkalmas formba hozzk, majd a fehrjk kapcsoldnak a plasztisz kls membrnjn
kialakul transzlokonhoz. Ez a TOC (translocon of the outher chloroplast membrane), mg a bels membrnban
egy hasonl transzlokon, a TIC (translocon of the inner chloroplast membrane) szervezdik. A kt transzlokon
sszekapcsoldik, s a fehrje egyszerre jut t a kt membrnon. A sztrmban levgdik a tranzit peptid szakasz,
majd chaperonok segtsgvel (Hsp 60) helyrell a fehrje konformcija. Amennyiben a fehrjnek mg a tilakoid
membrnon is t kell jutnia, egy msik tranzit peptid szakasszal is rendelkezik az els utn. Az ilyen fehrjkrl
a sztrmba kerlve az els tranzit peptid levgdik s gy exponldik a msodik tranzit peptid, ami a kls
membrnokon val tjutshoz hasonlan biztostja a tilakoid membrnon trtn tjutst. A plasztisz membrnjaiban
tallhat transzportl fehrjk rszben a cianobaktrium szekrcis rendszernek elemeibl alakultak ki.
A citoplazmban szintetizlt fehrjk bejuttatsa a plasztiszba.

A magban kdolt fehrjk transzportja a msodlagos szimbiontk esetben klnsen bonyolult s mg elgg
ismeretlen folyamat. Az elsdleges szimbionta eukarita magbl a gnek teljes egszben, vagy nagy rszben
tkerltek a msodlagos bekebelez eukarita sejtmagjba. Ezzel egytt j transzport feladatokat is meg kellett
oldani, hiszen a termelt fehrjnek most hrom, vagy ngy membrnon keresztl kell eljutni a plasztisz bels
sztrma llomnyig. A transzportmechanizmusok a membrnok szma s azok tpusa szerint klnbz, br a
pontos rszletek mg nem tisztzottak.
84
A komplex plasztisszal rendelkez, msodlagos szimbizissal ltrejtt llnyek esetben a sejtmagban kdolt
plasztiszfehrjk clba juttatsa bonyolult feladat, hiszen hrom, vagy ngy membrnon kell a fehrjnek tjutnia
ahhoz, hogy a plasztisz belsejbe kerljn. A kt bels membrnon trtn tjuts nagy vonalakban minden
msodlagos szimbiontnl megegyezik az elsdleges plasztiszval, teht tranzit peptid szekvencik rvn
transzlokonokon keresztl trtnik. A bonyodalmat a tovbbi membrn illetve membrnok okozzk.
A hrom membrnnal rendelkez euglnk, s a dinoflagelltk esetben, annak ellenre, hogy eltr szrmazsak,hiszen az egyik a zldalga, mg a msik vrsmoszat bekebelezsvel alakult ki,- viszonylag hasonl a fehrjk
clba juttatsnak mdja. A harmadik membrn tulajdonkppen a msodlagos bekebelez vakuolris membrnjnak
tekinthet, vagy esetleg kevert szrmazs. Kt f hipotzis ltezik a harmadik membrn szrmazst illeten. Az
egyik szerint a msodlagos gazdaszervezet olyan tpllkozst folytatott, hogy nem kebelezte be ldozatt, hanem
meglkelve annak membrnjt csak a benne lev anyagokat szvta ki, s emsztette meg. Ebben az esetben az
elsdleges eukarita gazdasejt membrnja nem is kerlt be a sejtbe. A msik elkpzels szerint ugyangy, ahogyan
az elsdleges szimbizis esetben is trtnt, a bekebelez membrn, s a bekebelezett kls membrnja egyeslt.
Mivel itt mindkt membrn eukarita membrn, az eredet feldertse nem olyan egyszer, mint az elsdleges
endoszimbizis esetben. A magba tkerlt gnek egy ersen hidrofb szignl szekvencit kdolnak, gy a fehrjk
szintzise a durvafelszn endoplazmatikus retikulumhoz kapcsold riboszmkon trtnik. A tranzit peptid szakasz
utn a fehrjk jelents rsznl mg egy stop transzfer funkcij hidrofb szakasz is kvetkezik, ami meggtolja
a fehrjk transzlokldst az ER lumenbe. A tranzit peptid teht belg a lumenbe, de a tnyleges fehrje a
citoplazmban helyezkedik el, az ER membrnjhoz kihorgonyozva. A fehrjk vezikulris transzporttal, a Golgikszlken keresztl jutnak el a plasztisz kls membrnjhoz (PPM-periplasztidlis membrn). A membrnfzi
eredmnyeknt a fehrjk a PPM-be kerlnek, s tranzit peptid rszk belg a periplasztidlis trbe. Itt receptor
fehrjk felismerik ket, majd transzlokon, s transzportl fehrjk rvn bejutnak a plasztiszba.
A ngy membrnnal krlvett plasztiszok esetben meg kell klnbztetnnk a CER-el (chloroplast endoplasmatic
reticulum) rendelkez chromistkat az Apicomplextl, valamint a zldalga tartalm Chlorarachnophyttl,
melyeknl a CER nem alakult ki. A helyzetet a nukleomorf meglte tovbb bonyoltja.
A CER-el rendelkez csoportok esetn az endoplazmatikus retikulum a kt kls membrnnal folytonos, s a
plasztiszok legkls membrnjn riboszmk tallhatk. Itt trtnik a plasztiszfehrjk transzlcija. A fehrjken
itt is tranzit peptid szakasz tallhat a kt bels membrnon val tjutshoz. A Chyiprophytknl fedeztk fel azt,
hogy a szintetizlt fehrjk a kt kls membrn kztti trbl (CER lumene) hogyan jutnak ki a plasztisz irnyba.
Annak ellenre, hogy ER a PPC-ben (periplasztidlis kompartment), vagyis az eredeti eukarita maradvny
citoplazmjban nem tallhat, a nukleomorf kdol ERAD (endoplazmatikus retikulum asszocilt degradci)
fehrjket, s ezeket meg is szintetizlja az itt lev riboszmkon. Ezek a fehrjk eredetileg arra szolglnak, hogy
a hibs szerkezet fehrjket kijuttassk az endoplazmatikus retikulumbl a citoplazmba, ahol a proteaszma
rendszer degradlja ket. Ezek a fehrjk most a plasztiszba sznt fehrjk PPC-be juttatst vgzik. A PPC-bl
a mr ismert transzlokon ltali transzporttal jutnak be a plasztisz belsejbe. (A nukleomorf nlkli CER-el burkolt
csoportoknl a sejtmagba vndoroltak az ERAD gnek, ahol gy dupliklva tallhatk meg.)
Fotoszintzis
A fotoszintzis sorn a kloroplasztiszok megktik a fny energijt. Az energia
Egy mlnyi 490 nm-es foton energija teht 240 kJ, mg egy ml 700 nm-es foton 170 kJ. A fnyenergit vgs
soron szndioxid fixlsra hasznljk fel. Egy mlnyi CO2 fixlshoz 2840 kJ energia kell. A fotoszintzis egy
biolgiai redox folyamatnak tekinthet, ahol a CO2 az elektonfelvev, (vagyis redukldik) s a H2O, vagy H2S
az elektrondonor (vagyis oxidldik). Az eredmny CH2O sznhidrt.
illetve
85
Az els egyenlet az oxigntermel fotoszintetizl llnyekre (nvnyek, algk, cianobaktriumok), mg a msodik

egyenlet az anoxigenikus fotoszintetizl baktriumokra (pl. kn-bbor baktriumok) jellemz. Br ez utbbiak
mind evolcis, mind ksrleti szempontbl fontos llnyek, mi a tovbbiakban a nvnyek fotoszintetikus
folyamatait trgyaljuk.
Br a fotoszintzis nett egyenlete egyszer, a folyamat szmos rszreakci eredmnyekppen alakul ki. A
fotoszintzist alapveten kt szakaszra lehet osztani, egy fnyfgg fnyszakaszra, s egy fnytl fggetlen
sttszakaszra. (Megjegyzend, hogy a sttszakasz fnyben s sttben egyarnt vgbemehet.) A fnyszakaszban
a fnyenergia felhasznlsval a kloroplasztiszok oxidljk a vizet, s gy oxign, valamint NADPH s ATP
keletkezik. A sttszakaszban, vagy Calvin ciklusban a szndioxid redukcija trtnik sznhidrtokk, s ehhez
a fnyszakaszban termeldtt NADPH s ATP hasznldik fel. A fnyszakasz a kloroplasztiszok tilakoid
membrnjaihoz kttt folyamat, mg a Calvin ciklus a sztrmban zajlik.
A fotoszintzis fnyszakasza
A fnyszakasz sorn a vzbl nyert elektron egy membrnban elhelyezked elektrontranszportlncon szlltdik,
majd a szintn vzbl szrmaz proton felhasznlsval NADP reduklsra, vagyis NADPH ellltsra hasznldik
fel. A folyamat sorn protonok koncentrldnak a tilakoidok lumenben, melyek a potencilgrdiensnek megfelelen
a lumenbl az ATP-szintetz enzimen keresztl kijutva ADP + P ATP talakulshoz szolgltatnak energit. Az
egsz folyamat energiafedezetl az a fnyenergia szolgl, melyet a tilakoid membrnokban elhelyezked kt
fotorendszer (PSI s PSII) pigmentjei nyelnek el.
A fnyabszorpci sorn a pigmentek aktivldnak, elektronjaik magasabb energiaszintre kerlnek. A gerjesztett
elektron alapllapotba val visszajutsa sorn kibocsjthat ht s fnyt (fluoreszcencia), de kzvetlenl is tadhatja
energijt egy hozz kzel elhelyezked msik molekulnak. Ennek felttele az igen szoros kapcsolaton kvl,
hogy a kibocsjtott energia a msik molekula gerjesztsi energijnak feleljen meg. (Mskpp fogalmazva, a
molekula ltal kibocsjtott emisszis (fluoreszcens) fny a msik molekula abszorpcis tartomnyba essen.)
Ilyenkor nincs fluoreszcencia, az energia kzvetlenl jut t a msik molekulra. Ez a folyamat a pigmentekbl ll
antennarendszerben biztostja a klsbb pigmentektl a kzpontiak fel trtn energiaramlst. A pigment
gerjesztett elektronja fotokmiai reakciba is lphet egy msik anyaggal, nagy energij elektronjt annak tadva
maga oxidldik, mg a msik anyag redukldik. Ez a folyamat jtszdik le a pigmentrendszerek kzpontjban.
Klorofill a molekula szerkezete

A klorofill az egyik legfontosabb pigment a kloroplasztiszokban. Szinte minden fotoszintetizl organizmusban
megtallhat valamilyen formja. A klorofill egy feji porfirin (tetrapirrol) gyrbl, s egy ahhoz kapcsold
hossz sznlnc (20 C atomos) hidrofb fitol farokrszbl ll. A porfirin gyr nagyon hasonl a hemoglobin
hem rszhez, de belsejben Mg++ ion tallhat. A nvnyekben klorofill a s b tallhat, a fotorendszer kzpontjban
a klorofill a helyezkedik el, mg az antennarendszerben mindkett megtallhat. A klorofill zld sznt az adja,
hogy elnyeli a kk s vrs hullmhossz fnyt, de a zldet nem.
86
Klorofillok abszorpcis spektrumai

A msik legfontosabb pigmentcsoport a karotinoidok. Tetraterpnek, melyek nyolc izoprn egysgbl plnek fel.
A 40 C atomos lnc konjuglt kettsktseket tartalmaz. A karotinoidok a klorofill ltal nem hasznostott 400-500
nm-es hullmhossztartomnyban nyelnek el, s az energit a klorofill fel tovbbtjk. Sznk ennek megfelelen
srgtl a vrsig terjed. Fontos szerepk van abban is, hogy a klorofillok ltal felvett, de a fotoszintzisben fel
nem hasznlt energit tveszik, gy a reaktv oxigngykk kpzst megakadlyozzk. Ez klnsen fontos a
gerontoplasztissz trtn talakulsban, ahol a fotoszintetikus elektrontranszport mr sztessben van, de a klorofill
molekulk mg jelen vannak, s gerjesztdnek. Ezrt a karotinoidok ksbb bomlanak le, mint a klorofillok. Ez
az alapja a szp szi lombsznezdsnek.
A bta-karotin szerkezeti kplete.
A karotin s fikobilinek abszorpcis spektruma.
87
A fikobilinek a cyanobaktriumok s vrsmoszatok jellemz pigmentjei, melyek az 500-650 nm-es tartomnyban

nyelnek el. Jellegzetes fehrjkkel asszocildott komplexeket, n. fikobiliszmkat alkotnak. Lineris tetrapirrol
felptsek, de fm ion nem asszocildik hozzjuk. A nvnyekben nincsenek.
A nem oxigntermel fotoszintetikus organizmusokkal ellenttben az oxignt termelk nem egy, hanem kt
reakcicentrummal, fotorendszerrel rendelkeznek, amelyben a fotokmiai folyamat, azaz a fnyenergia segtsgvel
trtn elektronleads vgbemegy. Ez a kt centrum a folyamat sorrendjben a kettes fotorendszer (PS II) s az
egyes fotorendszer (PS I). A fotorendszerekben a kzponti rszhez fnygyjt antennarendszerek kapcsoldnak,
melyek az abszorbelt energit kzvetlen energiatadssal a kzpont fel tovbbtjk. A klorofill a molekulk
elektront adnak le az elektron akceptor molekulknak. A gerjesztsi hullmhossz szerint a PS II P680-as klorofill
centruma feofitinnek (klorofillhoz hasonl Mg-ot nem tartalmaz pigment), mg a PS I P700-as klorofill reakci
centruma egy msik klorofill a molekulnak adja t gerjesztett elektronjt. A PS II-ben az elektron ezutn kt
plasztokinon molekulra (plasztokinon A, majd plasztokinon B) jut, a PS I-ben pedig elszr egy plasztokinonra,
majd Fx nek jellt Fe-S centrumra kerl. Mindkt fotorendszerben fehrjk kapcsoldnak mind a kzponti klorofill
molekulkhoz, mind a fnygyjt antennapigmentekhez, specilis felpts pigment-protein rendszereket alkotva.
A tilakoid membrnok legnagyobb mennyisgben jelenlev fehrji a fnygyjt komplexek (LHC light harvesting
complex). Ezek a transzmembrn fehrjk 12 klorofill s 2 karotin molekult ktnek meg s gyakran trimerizlt
formban fordulnak el.
A fotorendszerek elektrontranszporter molekulkkal vannak sszektve egymssal, vagyis a PS II-bl szrmaz
elektronok ptoljk a PS I leadott elektronjait. A PS II a leadott elektronjait a vzbontsbl ptolja. A PS I elektronjai
pedig vgl a NADPH kpzsben hasznldnak fel. A fotoszintzis elktrontranszportjnak ez az n. Z smja,
mivel a redox potencilnak megfelen felrajzolt elektrontranszfer egy eldnttt Z betre emlkeztet. A fny hatsra
a PS II egy ers oxidnsbl (elektron elvonbl) egy gyenge reduktnss (elektron lead) vlik, ami,
elektronegatvabb rvn, elektront ad le az oxidnsknt mkd egyes fotorendszernek. Fny hatsra az egyes
fotorendszer vlik elektronegatvv s reduklja (elektront ad t) a NADP+-t.
A fotoszintzis n. Z-smja az elektrokmiai potencil fggvnyben.

A PS II teht egy integrns membrn komplex, mely ll egy P680 reakcicentrumbl, pigmentekbl, pigmentkt
fehrjkbl, a vz oxidlsban rsztvev fehrjkbl, feofitinbl, plasztokinonbl stb. Fny hatsra gerjesztdve
a reakcicentrum elektront ad t a plasztokinonnak. A hinyz elektronokat a PS II a vz bontsbl szrmaz
elektronokkal ptolja. A PS II ennek megfelelen egy vz-plasztokinon oxidoreduktzknt mkdik. A vz bontsbl
a lumenben oxign, proton (H+) s elektron keletkezik, mely utbbi a reakcicentrum leadott elektronjt ptolja.
Az oxign (O2) tdiffundl a membrnon, s vgl a lgkrbe jut. A protonok a lumen belsejben halmozdnak,
mgnem az ATP szintetz enzimen keresztl, ATP szintzissel egybekapcsolt transzporttal ki nem jutnak a sztrmba.
88
A II. fotorendszer felptse (PS II).

Az elektronok a plasztokinonrl (PQ) a citokrm b6f komplexre kerlnek tovbb, mikzben termszetesen
energiaszintjk folyamatosan cskken. A cit b6f komplex a plasztokinonnal egyttmkdve egy sajtos
elektroncirkulcit valst meg, amit Q ciklusnak is neveznek. Ennek sorn az elektronok rszben visszajutnak a
plasztokinonra, ami a sztrmbl protonokat felvve PQH2-v alakul. A protonokat a sztmbl a tilakoid lumenbe
transzportlva ismt leadja kt elektronjt, s plasztokinonn alakul vissza. A folyamatban fontos szerepet jtszik
a komplex egyik vas s kn tartalm fehrjje a Rieske Fe-S protein. A ciklus hajtereje az a tbblet elektronramls
ami a PQ s a citokrm b6f komplex kztt vgbemegy. Az elektronok a citokrm b6f komplexrl a plasztocianinra
kerlnek. A plasztocianin a tilakoid lumen felli oldaln tallhat viszonylag kis mret (11 kD), rz tartalm
szolubilis fehrje. mely a membrn bels felsznn gyors mozgsra kpes. Ez a fehrje az elektront felvve elmegy
a PS I komplexhez s ott az elektront annak tadja. Mivel a PS II elssorban a grnum tilakoidok terletn tallhat,
mg a PS I a sztrma tilakoidokban, a plasztocianinnak viszonylag nagy utat kell megtennie. Az elektron leadsa
utn az oxidldott plasztocianin visszajut a citokrm b6f komplexhez az jabb elektronszlltmnyrt.
A PS I hasonl felpts komplex, mint a PS II. A PS I a fny abszorpcijnak segtsgvel elektront ad t a
sztrma oldalon tallhat szolubilis FE-S proteinnek, a ferredoxinnak. A PS I teht egy fnyfgg plasztocianinferredoxin oxidoreduktznak tekinthet. A PS I reakcicentrumbl (P700) az elektron tbb sajt
transzportermolekuln t juttatja az elektront a ferredoxinra. A ferredoxin reduklt formja a ferredoxin NADP+
reduktz molekulhoz kapcsoldva biztostja a reduklert (-420 mV potencil elektront) a NADP+ + H+
NADPH talakulshoz.
A fotoszintetikus elektrontranszport a tilakoid membrnban.

A lumenben protonok halmozdnak fel a fnyszakasz mkdse sorn. Ezek egy rsze kzvetlenl a vz bontsbl
szrmazik, msik rsze pedig a plasztokinon-citokrm b6f komplex egyttmkdsvel a sztrmbl a lumenbe
transzportlt proton. A lumen pH-ja egyre savasabb vlik, a proton koncentrci klnbsge a sztrma s a lumen
kztt pedig egyre n. Ez a koncentrciklnbsg a hajtereje az ADP +P ATP reakcinak, melyet az ATPszintetz komplex katalizl. Egy molekula ATP szintzishez az ATP-szintetz komplex csatornjn ngy protonnak
89
kell thaladnia. A folyamat igen hasonl a mitokondriumokban vgbemen ATP szintzishez. Ezt, a proton kmiai
potencilklnbsgbl szrmaz energit ATP szintzisre felhasznl folyamatot ler elmletet hvjuk
kemiozmtikus hipotzisnek.
Ciklikus fotofoszforilci
A nvnyek kpesek ATP ellltsra a PS II mkdse, azaz vzbonts nlkl is. Ennek az a lnyege, hogy a PS
I fnyelnyelse rvn nyert energival az elektront cirkulltatjk, mikzben protont pumplnak a lumenbe. A
ferredoxin redukcija utn az elektront (s a protont) nem a NADPH ellltsra hasznljk fel, hanem a ferredoxin
azt a ferredoxin-plasztokinon oxidoreduktznak adja t. Innen az elektron a plasztokinonra kerl, s az a sztrmbl
protonokat pumpl a lumenbe. A folyamat innentl a megismert mdon folyik tovbb, vagyis a protongrdiens
krra ATP szintetizldik. Az elektron visszakerl a ferredoxinra, s a folyamat kezddik ellrl. Ez a ciklikus
fotofoszforilci, melynek sorn termszetesen NADPH nem keletkezik.
Calvin-ciklus
A fotoszintzis fnyszakasza ltal termelt NADPH s ATP a sttszakaszban a CO2 fixlsra s ezzel cukrok
szintzisre hasznldik fel. A folyamathoz mr nincs szksg fnyenergira ezrt kapta a kiss megtveszt
sttszakasz elnevezst. A folyamat a plasztisz sztrma llomnyban megy vgbe. Az 1950-es vekben Melvin
Calvin, Andrew Benson, s James A. Bassham fedezte fel, innen kapta a Calvin-ciklus elnevezst. 14CO2-t juttattak
be fotoszintetizl zldalgkba, s sr mintavtellel vizsgltk a keletkezett radioaktv termkeket. Az els
radioaktv termk a 3-foszfoglicerinsav (3-PGA) volt, de nem hrom, csak egy 14-es C izotpot tartalmazott. A
ciklus lpseit mra mr rszletesen feldertettk. A folyamat kulcsenzime a ribulz-1,5-bifoszft
karboxilz/oxigenz, kzismertebb nevn a Rubisco. Ez az enzim 8 kis s 8 nagy alegysgbl pl fel. A kis
alegysget a sejtmag kdolja, s a citoplazmban szintetizldik, mg a nagy alegysg a plasztiszban kdolt, s ott
szintetizldik. A Rubisco a fld legnagyobb mennyisgben ellltott fehrjje, a plasztiszok sztrmallomnynak
mintegy felt teszi ki. Szubsztrtja a ribulz 1,5 bifoszft, ami egy t sznatomos cukor. A Rubisco enzim ezt egy
szndioxid felhasznlsval karboxillja, de a keletkez 6 C-atomos cukor sztesik kt 3-foszfoglicerinsavra (3PGA). A folyamat sok lpst kveten zrt cikluss vlik, melyben 3 CO2 fixlsa eredmnyez nett egy 3
sznatomos cukrot (3-PGA). A ciklusban 13 enzim vesz rszt, 3 ATP s 2 NADPH hasznldik fel, mg a ciklus
sorn a ribulz-1,5-bifoszft jratermeldik. Mivel a folyamat els termke egy 3 C-atomos cukor, a szndioxid
fixls ezen mdjt C3-as tnak, az ezt kivitelez nvnyeket C3-as nvnyeknek is nevezik. A sznhidrtok
szintzise rvn triz foszftok, abbl hexz foszftok keletkeznek, vgl kemnyt formjban raktrozdnak
a kloroplasztiszban. Innen glkzz lebontva kerlnek a citoplazmba, majd szacharzknt szlltdnak el ms
sejtekhez a flomen keresztl.
C4-es sznasszmilcis t
A Rubisco enzim nevben benne van, hogy karboxilz, s oxigenz is egyben. A Rubisco a ribulz 1,5 bifoszft
molekult oxidlni is tudja oxign felhasznlsval, aminek eredmnyekppen egy PGA s egy kt sznatomos
molekula, a foszfoglikolsav keletkezik. A Rubisco oxigenz kpessge mg az obligt anaerob baktriumok
esetben is megvan, amibl azt a kvetkeztetst vontk le sokan, hogy az enzim mg az anaerob lgkri viszonyok
sorn alakult ki. Az oxign s a szndioxid az enzim azonos rszhez kapcsoldik, teht vetlkeds folyik kzttk.
Norml lgkri viszonyok mellet a karboxilci mintegy hromszoros sebessggel folyik az oxigencihoz kpest,
ami azt jelenti, hogy a fixlt szndioxid egy rsze mindenkppen elvsz az oxigenz funkci miatt. Ez a vesztesg
a szndioxid koncentrcijnak cskkensvel rohamosan n. Fontos kiemelni, hogy az enzim mkdse sorn a
kt folyamat egyenslya az enzim kzvetlen krnyezetben lev szndioxid koncentrcitl fgg. Norml
krlmnyek kztt a levlben mkd kloroplasztiszok ltal elhasznlt szndioxid a krnyez levegbl a
gzcserenylsokon keresztl viszonylag gyorsan ptldik. Amennyiben a levelek valamilyen oknl fogva nem
nyitjk ki a sztmikat, a levl sejtkztti jrataiban, s gy a plasztiszokban is cskken a szndioxid koncentrci.
A sztmk kinyitsa a prologtats nvelsvel jr, ezrt vzhiny esetn a nvny knytelen gzcserenylsait
zrva tartani, hogy a kiszradst elkerlje. Ez viszont az oxigenz folyamat fel tereli a Rubisco enzim mkdst,
ami vgs soron szndioxid keletkezssel jr a szndioxid fixls helyett (fotorespirci). Egyes nvnyek, fknt
a szraz krlmnyekhez alkalmazkodottak, kifejlesztettek egy szndioxid koncentrlsra alkalmas mdszert,
melyet az els megkttt szndioxid molekult tartalmaz ngy sznatomos termkrl (oxlecetsav) C4-es
sznasszimilcis tnak neveztek el. A C4-es nvnyek gyakran sajtos morfolgiai blyegekkel is rendelkeznek,
90
ami ennek a sajtos anyagcsere folyamatnak a megnyilvnulsa. A legjellemzbb ezek kzl a Kranz (a nmet
koszor szbl) szindrmt mutat nvnyek levlfelptse s mkdse. Ezeknek a leveleiben ktfle
fotoszintetizl alapszvetet klnthetnk el, a nyalbok krl elhelyezked nyalbhvely sejteket, s a krlttk
sugarasan elhelyezked mezofillum sejteket. Ilyen nvny pldul a kukorica is. A ktfle sejtben a plasztiszok
is eltr felptsek. A mezofillum sejtekben a plasztiszok grnumosak, de nem tartalmaznak kemnytt, mg a
nyalbhvely sejtjeinek plasztiszaiban a grnumok hinyoznak, de sok kemnytt tartalmaznak. Ez ltszlag
ellentmonds, hiszen a kemnyt, illetve cukor szintzishez NADPH is kell, ami csak a vzbontssal sszekapcsolt
fotoszintzis rvn keletkezhet. A vzbonts viszont a PS II rendszerhez kttt, ami a grnumtilakoidokban tallhat.
Grnumok viszont nincsenek a nyalbhvely plasztiszaiban.. A mezofillum sejtekben vannak grnumos plasztiszok,
de azokban nincs kemnyt. A ktfle sejt, illetve az azokban tallhat ktfle plasztisz egyttmkdse a
magyarzat a ltszlagos ellentmondsra. A mezofill sejtek ktik meg a szndioxidot, a plazmban lev foszfoenol
piroszlsav karboxilz (PEP karboxilz) segtsgvel. A keletkezett ngy sznatomszm oxlecetsav a
plasztiszokban NADPH felhasznlsval almasavv alakul, majd szimplasztikus ton szlltdva eljut a nyalbhvely
sejtekig. A nyalbhvely sejtek plasztiszai az almasavat dekarboxilezik, gy szndioxid s piroszlsav keletkezik.
A dekarboxilezssel egytt NADPH kpzdik. A piroszlsav szimplasztikusan visszajut a mezofill sejtek
plasztiszaiba, ahol ATP felhasznlsvsl foszfoenol piroszlsavv alakul s a citoplazmba kerl, kszen arra,
hogy jabb szndioxidot vegyen fel. A mezofillum plasztiszai grnumosak, teht mind NADPH-t, mind ATP-t
kpesek szintetizlni, vagyis az almasav ellltshoz szksges redukl er, s a PEP ellltshoz szksges
ATP is megtermeldik bennk. A nyalbhvely plasztiszaiban az almasav dekarboxilezsvel a szndioxid
koncentrci megemelkedik, ami a Rubisco enzim karboxilz hajlamt ersti. A Calvin ciklushoz szksges
NADPH pedig az almasav dekarboxilezse sorn termeldik. Az itt lv plasztiszok PS II nlkl is kpesek ATPt ellltani a ciklikus fotofoszforilci segtsgvel, gy a Calvin ciklus zavartalanul mkdhet. A C4-es t teht
nem alternatv tvonala a C3-as szndioxid asszimilcinak, hanem annak egy kiegsztse. A C4-es t rvn a
levl sejtjei kpesek szndioxidot transzportlni a nyalbhvelybe, ahol a C3-as szndioxid asszimilci vgbemegy.
A szndioxid transzportls rvn a nyalbhvelyben a szndioxid koncentrci magas lesz, gy a Rubisco
karboxilzknt mkdik. A C4-es nvnyek gy nem knyszerlnek olyan gyakran kinyitni a sztmikat, ezltal
cskkentik a prologtatst, s nem ersdik fel bennk a fotorespirci sem.
AC
-es sznnasszimilci.
A C4-es tnak az elbb lertaktl nmileg eltr egyb formi is lteznek. Egyik rdekes megoldsa ennek a
Crassulaceae tpus szndioxid asszimilci. Ezekben a nvnyekben a C4-es s C3-as t nem trben, hanem idben
klnl el. jszaka, amikor a sztmk nyitsa kevsb jr egytt intenzv prologtatssal, ezek a nvnyek fixljk
a szndioxidot, s almasav formjban a sejtnedv vakulumban raktrozzk. Nappal bezrt gzcserenylsok mellett
az almasavbl szndioxidot s piroszlsavat ksztenek dekarboxilezssel, s a szndioxidot a Calvin ciklus rvn
megktik.
91
Crassulaceae tpus sznasszimilci.
Fotorespircis komplex
A Rubisco enzim oxigenz aktivitsa rvn a szndioxid fixlsa helyett a ribulz 1,5-bifoszftbl 3foszfoglicerinsavat, s kt sznatomos 2-foszfoglikolsavat hoz ltre. Ez a foszforizlt kt sznatomos molekula
redukldva glikolsavv alakul, s tjut a kloroplasztisszal szomszdos peroxiszmba. Itt oxignnel reakciba
lpve hidrognperoxidd s glioxilsavv alakul. A hidrognperoxidot a peroxiszma katalz enzime bontja, a
glioxilsav pedig glicinn alakulva tovbbkerl a mitokondriumba. Itt kt glicin molekulbl szndioxid kilpse
mellett egy hrom sznatomos szerin molekula keletkezik, mely a peroxiszmba visszajutva hidroxipiroszlsavv,
majd glicerinsavv alakul. A glicerinsav visszajut a kloroplasztiszba, foszforilldik, s 3-foszfoglicerinsavknt
belp a Calvin-ciklusba.
A fotorespirciban rsztvev hrom sejtorganellum szoros kapcsolata anatmiailag is megnyilvnul.
Elektronmikroszkpos felvteleken gyakran tallhatk szorosan egyms mellett. Ezt a kpletet nevezzk
fotorespircis komplexnek.
A fotorespirci vzlatos folyamata.

A Rubisco enzim oxigenz tulajdonsgnak htterrl keveset tudunk, de mg az anaerob viszonyok kztt alakult
ki. Mivel a lgkr szndioxid koncentrcija a fldtrtnet sorn cskkent, oxign koncentrcija viszont rohamosan
emelkedett, a Rubisco enzim szndioxid fixlsi hatkonysga fokozatosan romlott. A mai szrazfldi nvnyek
Rubisco enzime szzszor nagyobb affinitst mutat a szndioxid, mint az oxign irnyba, de az alacsony (0,036%)
szndioxid koncentrci miatt a karboxilz-oxigenz mkds arnya kb. 3:1. Mivel kt glicinbl szrmazik egy
92
szndioxid ezrt kb. minden 6 megkttt szndioxidbl 1 felszabadul a fotorespirci rvn. A baktriumok Robisco
enzime mg kevsb hatkony, ezrt sokan annak ellenre, hogy kpesek lennnek az oxignt tolerlni, nem tudnak
aerob krlmnyek kztt lni, fotoszintetizlni. A hmrsklet emelkedse a helyzetet tovbb rontja, mivel a
vzben oldott szndioxiddal s oxignnel kell kalkullnunk, s a szndioxid oldkonysga a hmrsklet nvelsvel
az oxignnl gyorsabban cskken. A hatkonysg nvelsnek egyik tja a mr bemutatott C4-es fotoszintzis,
vagyis a szndioxid koncentrlsa a Calvin ciklusra specializldott sejtek plasztiszaiba.
Krdsek
1. Mi az elektrondonor a fotoszintzis folyamatban?
2. Milyen sejttani jellegzetessgek utalnak a plasztiszok prokarita eredetre?
3. Milyen plasztisztpusok vannak?
4. Mekkora egy kloroplasztisz?
5. Milyen szerkezet a kloroplasztisz bels membrnrendszere?
6. Milyen llnybl alakult ki a plasztisz?
7. Az elsdleges szimbizis eredmnyeknt milyen llnyek keletkeztek?
8. Milyen llnycsoportok alakultak ki a msodlagos szimbizis ltal?
9. Mely csoportokban maradt meg a nukleomorf?
10. Milyen jabb endoszimbizist ismernk?
11. Mi a fotoszintzis nett egyenlete?
12. Milyen kt f szakaszra oszthat a fotoszintzis s ezek hol jtszdnak le?
13. Hol trtnik a vzbonts?
14. A tilakoid melyik oldaln halmozdik a proton?
15. Melyik elektrontranszporter egysg mkdik protonpumpaknt is?
16. Mi az elektron vgs felvevje a fnyszakaszban?
17. Hol hasznldik fel a fnyszakaszban termelt ATP s NADPH?
18. Mirt nevezzk C3-as sznasszimilcis tnak a Calvin-ciklust?
19. Mi a lnyege a C4-es fotoszintzisnek?
20. Mi a fotorespircis komplex?
93
15. fejezet - A sejtvz

A mikrotubulris vz
Az eukarita sejt egyik jellegzetes szerkezeti eleme az intracellulris vz, mely molekulris sszetevi alapjn
hrom komponensre bonthat: a mikrotubulusokra, az aktin hlzatra s az intermedier (kztes) fonalak
rendszerre.
A bels vz megjelense az evolci egyik fontos lpse volt, megnyitotta az utat a bonyolult felpts eukarita
sejtek kifejldse s vgs soron a soksejtsg kialakulsa eltt. Korbban gy vltk, hogy a prokaritknak
nincsen bels vzrendszerk. Azonban az utbbi idben tbb baktriumban is talltak tubulin- illetve aktinszer
molekulkat, melyek polimerizcijval egyszer szerkezet bels vz alakulhat ki.
A hromfle vz funkcija rszben tfed, de emellett jellegzetes eltrseket is mutat. Az intermedier filamentumok
mechanikai szilrdsgot klcsnznek a sejtnek. Az aktinvz f funkcija az alak fenntartsa, ill. a letapadst, az
alak- s helyvltoztatst eredmnyez mozgsjelensgek generlsa. A mikrotubulusok tartjk fenn a sejt bels
rendezettsgt, a sejtmag s az organellumok jellegzetes elhelyezkedst. k teszik lehetv a hozzjuk kapcsold
motorfehrjk kzremkdsvel az egyes kompartimentumok kztti transzportot, a kromoszmk szegregcijt
a sejtosztds sorn, ltalban a bels trendezdst eredmnyez mozgsokat. A mikrotubulusok alkotjk a sejt
mozgsszerveinek, a csillknak, ill. ostoroknak a vzt. A vzelemek sszessgkben az intracellulris
membrnokval sszemrhet, hatalmas hordozfelletet alkotnak, melyhez szmos makromolekula (enzimek,
nukleinsavak) kpes hozzktdni, s gy loklisan az ltaluk katalizlt reakcik szmra optimlis mikrokrnyezet
alakul ki.
Mind az aktin, mind a mikrotubulris vz dinamikusan vltoz, llandan tpl hlzatot alkot.
A mikrotubulusok
A mikrotubulusok kb. 24 nm tmrj, vltoz ltalban nhny mikron hosszsg csvek, melyek fala
tubulinbl ll. A tubulin kt, egymshoz hasonl, kb. 55 kDa tmeg polipeptidbl, az - s a -tubulinbl ll
heterodimer. A sejtekben kimutathat egy harmadik tubulintpus, a -tubulin is, mely az n. mikrotubulris
organizl centrumokban MTOC lokalizldik. Mind az -, mind a -tubulin kpes egy-egy GTP-molekult
megktni. A polimerizcis folyamatban a -tubulinhoz kttt GTP GDP-v s foszftt hidrolizl, az -tubulinhoz
kttt GTP azonban vltozatlan marad.
A polimerizci sorn, mely in vitro is jl tanulmnyozhat, a tubulin-heterodimerek fej-farok orientciban
(az egyik dimer -alegysge a kvetkez dimer -alegysghez ktdve) sszekapcsoldnak s fonalszer
struktrkba, protofilamentumokba szervezdnek. 13 protofilamentum laterlisan egymshoz illeszkedve s
egymshoz kpest 0,9 nm-rel elcsszva alaktja ki a mikrotubulus hengeres formjt. A protofilamentum kt vge
nem egyforma, a bellk szervezd mikrotubulus polarizlt szerkezet: egyik, gynevezett gyors, vagy plusz
vgn szabad , mg msikon ( lass, vagy mnusz vg) szabad alegysgeket hordoz.
Mikrotubulus kteg. A taxol hatsra a mikrotubulusok stabilizldnak s ktegeldnek.

A mikrotubulus nvekedse vagy rvidlse jabb s jabb heterodimereknek a cs vgeire trtn asszocicijval,
ill. disszocicijval valsul meg. A polimerizci elssorban az oldat szabad heterodimer koncentrcijtl fgg:
94
A sejtvz
ha ez magas, az asszocici kerl tlslyra s a mikrotubulus nvekedni fog, alacsony rtknl viszont a tubulin
alegysgek levlnak, s a cs kezd rvidlni. Azt a szabad dimerkoncentrcit, melynl az idegysg alatt trtn
rpls s levls ppen kiegyenlti egymst, kritikus koncentrcinak nevezik. rdekes mdon a kritikus
koncentrci a cs kt vgre nzve nem egyenl: a gyors vgen alacsonyabb, mint a lass vgen. Ezrt ltezik
olyan dimerkoncentrci-tartomny, ahol a mikrotubulus gyors vge mg nvekszik, mikzben a lass vge mr
rvidl.
A kt vg eltr viselkedsnek oka az, hogy a polimerizcit jelentsen befolysolja a -tubulin GTP-z-aktivitsa.
A csvgekre bepl GTP-tartalm dimerek alegysgn a GTP a polimerizcit kveten hamarosan elhidrolizl,
ezrt a csvek falban mr GDP-tartalm -tubulin van. A hidrolzis cskkenti a dimerek kztti kts erssgt:
a GDP-tartalm tubulin disszocicira hajlamos. Mivel szabadon kilg alegysg csak a + vgen van, ez a
vg reagl rzkenyen a szabad dimer koncentrci vltozsra. Nvekedse akkor figyelhet meg, ha a GTPtartalm dimerek asszocicija gyorsabb, mint az ezt kvet GTP-hidrolzis. Ilyenkor a csvgeken GTP-tartalm
dimerekbl ll sapka alakul ki, mely nem hajlamos disszocicira. Ha a rpls lelassul (pl. a GTP-tartalm
dimerkoncentrci loklis cskkense miatt), ez a sapka eltnhet, a csvgeken a hidrolzis kvetkeztben GDPtartalm dimerek jelennek meg, s ez azonnali depolimerizcit eredmnyez. Ez vezet a mikrotubulusok dinamikus
instabilitshoz, ahhoz az l sejtekben jl megfigyelhet folyamathoz, melynek sorn az sszpolimer (az sszes
mikrotubulus) mennyisge a sejten bell idben ugyan jelentsen nem vltozik, de az egyes mikrotubulusok vgei
hol nvekedsi fzisban, hol rvidlsben vannak). A dinamikus instabilits kvetkezmnyeknt a sejt mikrotubulris
appartusa folyamatosan tpl: a sejt energit (GTP-t) hasznl fel arra, hogy a rendszert llandan talakulsra
ksz llapotban tartsa.
Az osztds gtlsra szleskren alkalmazott citosztatikumok jelents rsze tulajdonkppen a dinamikus
instabilits megzavarsn keresztl fejti ki hatst. Az szi kikerics hatanyaga, a kolchicin, vagy a Vinca-fajokbl
kinyerhet alkaloidk s szrmazkaik (vinblasztin, vincristin) kis koncentrciban gtoljk a csvgeken a
kicserldsi folyamatokat s befagyasztjk a mikrotubulris rendszert, mg nagyobb koncentrciban teljes
depolimerizcit okoznak. A tiszafaflkbl kinyerhet taxol s szrmazkai ellenttes hatsak, tlzott polimerizcit
okoznak s stabilizljk a mikrotubulusokat.
A mikrotubulusok trbeli elrendezdst a mikrotubulus-organizl centrumok (MTOC) irnytjk. llati
sejtekben a dominns MTOC a sejtkzpont (centroszma), de MTOC-aktivitssal rendelkeznek a csillk bazlis
testei is. A trbeli rendezettsg azltal jn ltre, hogy a mikrotubulusok mnusz vgeikkel gyazdnak a sejtkzpont
anyagba. Ennek a tnynek kt fontos kvetkezmnye van: egyrszt az egsz mikrotubulris appartus irnyultsgra,
polaritsra tesz szert, mivel a csvek gyors vgei egynteten kifel nznek, msrszt a centroszma anyagba
begyazott mnusz vgek stabilizldnak, mivel az asszocici/disszocici itt gtldik. A mikrotubulusok vgei
tulajdonkppen a centroszma anyagban lokalizld, gamma-tubulinbl ll gyrkhz ersdnek hozz. Egyegy ilyen gyr 13 alegysgbl ll s polimerizcis magknt mkdik, melyre az - s -tubulinbl ll
heterodimerek fokozatosan rplnek. A gyrk szma egyben a sejtkzpontbl sztsugrz mikrotubulusok
lehetsges szmt is behatrolja.
A felsorolt tnyezkn kvl a mikrotubulusok viselkedst jelentsen befolysoljk a mikrotubulusokhoz
asszocilt fehrjk (MAP) is. A MAP-ok egyik csoportjt az n. struktrafenntart (szerkezeti) fehrjk
alkotjk. Ezek hossz, szlszer molekulk, melyek a mikrotubulusokhoz asszocilva kilgnak azok felletrl.
Klnsen nagy mennyisgben fordulnak el idegszvetben. A MAP-ok szerepe sokrt: elsegtik a tubulin
polimerizcit, stabilizljk s ktegekbe rendezik a mikrotubulusokat. A csoporton bell az egyes mikrotubulusok
kztti tvolsgot a felsznkrl kilg MAP-ok hossza hatrozza meg. A MAP-ok egy tovbbi fontos funkcija
a horgonyzs: kpesek megktni, s ezltal a mikrotubulus kzelben rgzteni ms fehrjket, gy klnbz
enzimeket is. Ezltal az egyes mikrotubulusok krl sajtos mikrokrnyezet alakul ki.
A MAP-ok egy msik nagy csoportjt az n. motorfehrjk (mechanokmiai MAP-ok) alkotjk. A motorfehrjk
mechanokmiai enzimek, kpesek ATP-t hidrolizlni, s a felszabadul energit mechanikai munka elmozduls
vgzsre felhasznlni. A mikrotubulusokkal kapcsolatban kt nagy csaldjuk ismert: a kinezinek s a dineinek.
Fontos tulajdonsguk, hogy felismerik a mikrotubulus polaritst s az egyik meghatrozott vg fel haladnak: a
legtbb kinezin plusz-vg motor mg a jelenleg ismert dineinek minusz-vg motorok. A sejten belli irnytott
anyagmozgats (pl. vezikulris transzport, kromoszmk szlltsa a mitzisban) a mikrotubulusokhoz kapcsolt
motorfehrjk kzremkdsvel valsul meg.
95
A sejtvz
A sejtkzpont
A sejtkzpont a sejtmag kzelben elhelyezked viszonylag kicsi (~12 m tmrj), bizonytalan kontr test,
melyet membrn nem hatrol, ezrt anyaga lesen nem klnl el a krnyez citoplazmtl. llati sejtekben
morfolgiailag kt rszre klnthet el: a centrilumokra s az ket felhszeren krlvev pericentriolris
anyagra. A magasabbrend nvnyi sejtekbl a centrilumok hinyoznak.
A centrilumok henger alak, nhny tized mikron hosszsg testek, melyek falt 9 tubuluscsoport alkotja. Egyegy csoport hrom mikrotubulris tagbl (triplet) ll. A centrilumok szma a sejtciklus sorn vltozik. Az
osztdsbl kilp sejtekben ltalban egy pr figyelhet meg. Ksbb a pr kt tagja eltvolodik egymstl, s
mindegyik mellett egy-egy j centrilum kpzdik. A kvetkez osztdsba lp sejtben teht mr 2 pr centrilum
van, mindegyik prban egy ids s egy jonnan kpzdtt centrilummal. Osztdskor egy-egy pr jut a keletkez
kt utdsejtbe, s a ciklus ismtldik.
A pericentriolris anyag nhny jellegzetes fehrjt tartalmaz, kzttk a mr emltett gamma-tubulinbl ll
gyrket. A citoplazmatikus mikrotubulusok mnusz vgeikkel a pericentriolris anyagba gyazdnak
A sejtkzpontnak hrom funkcija van: nuklecis helyknt szolgl, ahol megindulhat a tubulin polimerizcija,
szervezi a mikrotubulris vzat (kialaktja a mikrotubulris hlzat trbeli rendezettsgt, polaritst) s kpes
reproduklni nmagt. A mikrotubulus-szervez s nuklel aktivits a pericentriolris anyag sajtossga, ehhez
a centrilumok nem szksgesek. A reprodukci mechanizmust nem ismerjk, ltre a centrilumok szmnak
ciklikus vltozsibl lehet kvetkeztetni.
A csillk s ostorok
A csillk s ostorok a sejtek mikrotubulusokbl felpl mozgsszervecski, melyek eredetk szerint a centrilumok
szrmazkainak tekinthetk. Ezt a tnyt a XIX. szzad vgn Lenhossk Mihly ismerte fel. Szerkezetk hasonl,
a klnbsg szmukban, hosszukban, a mozgs mdjban s szablyozsban van. A csillk szma tbb szz is
lehet egy sejtben, mg ostorbl ltalban egy van. A csillk jval rvidebbek (510 m), mint az ostorok
(150200 m), csapsuk gyorsabb s sszehangolt. Csillk az egysejtek nagy csoportjban (Ciliata) s a soksejtek
klnbz reges szerveit blel hmban (lgzszervek, emsztkszlk, hgy- s ivarvezetkek) fordulnak el.
Mdosult csillk a fnyrzkel sejtek csapjai s plciki. Tipikus ostoros sejtek a hmivarsejtek.
A csillk jellegzetes szerkezete eredetkbl kvetkezik. Kialakulsuk els lpse az, hogy a sejtkzpont
pericentriolris anyagban bazlis testek kpzdnek. Ezek a centrilumoktl morfolgiailag nem klnbz, apr,
henger alak testek, melyek fala 9 darab hrmas tagols cscsoportbl (tripletekbl) ll. Ksbb a bazlis testek
a plazmahrtya al kerlnek s ott sorokba rendezdnek gy, hogy hossztengelyk a membrnra merlegesen ll.
Ezutn minden triplet els kt tagjn polimerizci indul meg: a bazlis test MTOC-knt viselkedik. A nvekv
mikrotubulusprok (dupletek) maguk eltt toljk kifel a plazmamembrnt, gy alakul ki a csill.
Paramecium faj csilljnak keresztmetszet (TEM). Jl azonosthat 9+2-es szerkezet.

Keresztmetszetben vizsglva a csillkra az n. 9+2-es szerkezet jellemz. Ezzel jelzik, hogy a plazmamembrn
alatt, a csill palstjban az emltett 9 mikrotubuluspr fut vgig (+ vgeik kifel nznek, vgeik a bazlis testbe
gyazdnak), mg kzpen, a csill tengelyben 2 klnll mikrotubulus helyezkedik el. Minden perifris cspr
egyik (n. A) tagjn egymstl szablyos tvolsgban kt kar helyezkedik el, mely kpes a kvetkez cspr
96
A sejtvz
B tagjhoz ktdni. A karok dineinbl llnak. A bazlis testbl a citoplazma fel gyakran fonalak indulnak ki,
ezek a gykrnylvnyok, melyeknek kihorgonyz, stabilizl szerepk van.
Vorticella faj csillsor hosszmetszet. Jl lthatk a bazlis testek s a bellk kinv mikrotubulusok. (TEM
felvtel)
A csillk s ostorok mkdsk kzben vltozatos mozgst vgeznek. Csillk esetben ez rendszerint gyors
lecsapsbl ll, melyet egy lassabb visszatrs kvet, mikzben a csill ersen behajlik s oldalirnyban kitr. Az
ostorokon ltalban szinusz hullmok futnak vgig. A csillk mkdse sszehangolt: a lecsapsok egyirnyak,
s a sejtet bort csillsorok nem egyszerre, hanem egyms utn csapnak le: a sejtek felsznn csillhullmok
futnak vgig, melyek egy irnyba hajtjk a sejtek felsznre tapadt anyagokat (pl. a lgutakbl a garatba sodorjk
a porszennyezdst).
Az aktinvz
Az aktin az llati sejtek egyik leggyakoribb fehrjje, sszfehrje-tartalmnak kb. 510%-t (izmokban kb. 20%t) alkotja. Szabad monomer (globulris aktin, G-aktin) vagy polimer (filamentlis aktin, F-aktin, aktinfonal)
formjban fordul el. Minden aktin monomer egy molekula ATP megktsre kpes. Az aktinfonalak tmrje
kb. 6 nm, hosszuk tbb m is lehet. Az aktinvz az aktinfonalak s a hozzjuk kapcsold fehrjk sszessge. A
polimerizcis folyamat mechanizmusa s a polimer viselkedse sok tekintetben hasonl ahhoz, ami a tubulinmikrotubulus rendszerben megfigyelhet. A polimerizci nhny monomerbl ll nuklecis hely kialakulsval
kezddik. A szlnvekeds sorn jabb s jabb monomerek asszocildnak, s kialakul a fonalas szerkezet
aktinpolimer. A nvekeds sebessge a hozzfrhet szabad monomer koncentrcijtl fgg. A kritikus koncentrci
elrsekor a vgek nvekedse lell: az idegysg alatt trtn monomer-rpls s -levls ilyenkor kiegyenlti
egymst. Azonban, a mikrotubulusokhoz hasonlan, az aktinfonal kt vgre jellemz kritikus monomerkoncentrci
eltr, az n. gyors (+) vgre nzve alacsonyabb, mint a lass () vgen. A kett kztti
koncentrcitartomnyban az aktinfonal lland tplsben van. Ilyenkor a gyorsan nv vghez idegysg alatt
annyi monomer asszocildik, amennyi a lassan nv vgen levlik, ezrt a polimer ssztmege (hossza) nem
vltozik, de anyaga folyamatosan kicserldik (n. taposmalom-llapot). A monomerekhez kttt ATP a beplst
kveten gyorsan hidrolizl, ezrt a fonalak bels tmegt ADP-tartalm aktin alkotja, ATP-tartalm aktin csak
a vgeken, az elbb emltett taposmalom-llapotban gyakorlatilag csak a gyors vgen figyelhet meg. A nukleozidtrifoszft hidrolzis labilizlja a polimert, mivel az ADP-tartalm aktinmolekulk kztt a kts gyengbb, mint
az ATP-tartalm molekulk kztt. Ezrt a vgen lev ATP-tartalm aktinmonomerek sapkaknt vdik a polimert
a gyors sztesstl. Ha ez a sapka eltnik s ADP-tartalm aktin jelenik meg a polimer vgn, a fonal gyorsan
sztesik.
Az aktinhlzat szervezdst tucatnyi, aktinhoz asszocilt fehrje irnytja. Ezek egy rsze a polimerizci
lpseit szablyozza. Ide tartoznak a G-aktinkt fehrjk, melyek a monomerekhez ktdve gtoljk azok
beplst a polimerekbe, tovbb a fragmentl- s sapkakpz fehrjk, melyek rvid darabokra trik a polimereket
s a vgeikhez ktdve lelltjk a monomerek kicserldst. Msik csoportjuk, a hlzatba rendez fehrjk, az
aktinfonalakat prhuzamos ktegekbe vagy laza hlzatba szervezik. Ilyen hlzat alakul ki a plazmamembrn
alatt (n. kortiklis vz), melynek jelents szerepe van az alak fenntartsban.
97
A sejtvz
Az aktinvz motorfehrji a miozinok. A miozinok dnt tbbsge + vg motor: ATP elbontsa kzben az
aktinszlon a + vg irnyban cssznak el. Jellegzetes kpviseljk a II. tpus (konvencionlis) miozin, mely
nagy mennyisgben fordul el izmokban, de ms sejtekben is. A molekula egy-egy nehz lncbl s kt-kt knny
lncbl ll hexamer. A kt nehz lnc globulris feji rgii s a hozzjuk asszocildott knny lncok ktdnek
az aktinpolimerhez, hossz farki vgeik egyms kr tekerednek, s ms miozinmolekulk farki vgeihez
kapcsoldnak. Nem izom tpus sejtekben egy msik miozin (miozin I.) is elfordul, mely nem kpez dimereket.
Feji rsze ennek is az aktinszlhoz ktdik, mg rvid farki rsze membrnokhoz, vezikulkhoz ktdve azok
szlltst vgzi. A mikrotubulusokhoz hasonlan az aktinvzhoz is kapcsoldhat vg irny motorfehrje,
ilyen a miozin VI.
Motorfehrjk
Az aktinvz kzremkdsvel trtn alak- s helyvltoztats ktfle molekulris mechanizmusra vezethet
vissza. Az llbak, nylvnyok kpzdst loklis, gyors aktinpolimerizci okozza. Ezt tipikusan valamilyen
inger vltja ki, melyet sejtfelszni receptorok rzkelnek. A jel specilis kis G fehrjk kzvettsvel nuklel s
polimerizcit gyorst fehrjket aktivl. A gyorsan nvekv aktinszlak toljk kifel a plazmamembrnt, a miozin
ebben a folyamatban nem jtszik szerepet. Ha a kitremkedsbe mikrotubulusok is beplnek, akkor a nylvny
stabilizldik. gy alakulnak ki pl. a neuronok hossz nylvnyai. Helyvltoztatshoz mr miozin kzremkdse
is szksges. A mozgs sorn az llb egyes pontjai letapadnak az aljzatra, s a tapadsi pontok kztt miozint is
tartalmaz aktinktegek kpzdnek.Ezek miozin jelenltben kontrakcira kpesek s elrehzzk a sejtet. Kitapads
hinyban a kortiklis vz egyenletes szehzdsa gmb alak felvtelre kszteti a sejtet.
Szarkomra. A kp kt szln vannak a Z-vonalak az aktin filamentumokkal, kzpen az M-vonal, hozz kt

oldalrl kapcsoldnak a miozin molekulk.
Mind a sejtvndorlsnak, mind a nylvnykpzdsnek fontos szerepe van az egyedfejlds sorn a szveti
struktrk kialaktsban s az egyes szervek kztti kapcsolat ltrehozsban.
Az intermedier filamentumok
Az intracellulris vz harmadik komponenst az intermedier fonalak (filamentumok) alkotjk. A fonalak tmrje
kb. 10 nm (vastagabbak, mint az aktinfonalak, viszont vkonyabbak, mint a mikrotubulusok innen ered az
intermedier, kztes elnevezs), hosszuk tbb mikron. ltalban rendezetlen, az egsz sejtet behlz fonadkot
alkotnak, melynek egyes rszei klnbz sejtkapcsol struktrkhoz ersdnek. Az intermedier fonalak nehezen
tpl, stabilis vzszerkezetet hoznak ltre, melyhez motorfehrjk nem kapcsoldnak.
Az intermedier filamentumok egyik csoportja, a sejtmag vzt alkot lamin fonadk, minden eukarita sejt magjban
megtallhat. Nem minden sejt citoplazmjban fordulnak el intermedier filamentumok (hinyoznak pldul az
zeltlbak sejtjeinek citoplazmjbl). A legvltozatosabb citoplazmatikus intermedier vz a gerincesekben
tallhat, itt az intermedier filamentumokat szvettpusonknt eltr fehrjk alkotjk.
Br a fonalakat alkot fehrjk molekulatmegben, aminosav-szekvencikban eltrnek egymstl, szerkezetk
kzs vonsokat mutat, polimerjeik hasonlak: molekulik kzps rsze mintegy 310350 aminosavnyi hossz,
plcika formj, -heliklis szerkezet szakaszt tartalmaz. A polimerizci sorn elszr dimerek, majd ezekbl
antiparallel orientcij tetramerek, ezek tovbbi asszocicijbl pedig a kb. 10 nm vastagsg fonalak alakulnak
ki. Br az intermedier fonalak ltalban stabilisak, bizonyos krlmnyek kztt, pl. az osztd sejtekben, mgis
depolimerizldnak. Ez kinzok hatsra trtnik, melyek foszforilljk a fonalak fehrjit, s ez vezet a polimer
sztesshez.
Krdsek:
98
A sejtvz
1. Milyen evolcis elnyket biztostott a sejtvz kialakulsa?

2. Csoportostsa a sejtvz alkotelemeit!
3. Milyen feladatokat lt el, milyen funkcikat biztost a sejtvz?
4. A sejtvz mely komponensei jtszanak szerepet a sejtosztdsban? Sorolja fel, hogy az egyes komponensek
milyen funkcit tltenek be az osztds egyes fzisaiban!
5. Mi a jelentsge a kortiklis aktinvznak?
6. Magyarzza meg a dinamikus instabilits jelensgt! rtelmezze a mikrotubulusok s az aktin filamentumok
esetben!
7. Milyen molekulkat sorolunk az intermedier filamentumok kz? Indokolja a csoport elnevezst!
8. Milyen kapcsolat van az aktin globulris s a filamentlis formi kztt?
9. Milyen fehrjket sorolunk a motorfehrjk kz? Mi a jellemz funkcijuk?
10. Vzolja fel a vzizom aktomiozin rendszernek felptst s magyarzza el a cssz-filamentum mechanizmus
lnyegt!
11. Mi a klnbsg az anterogrd s a retrogrd transzport kztt?
12. Mi a jelentsge a dinein molekulknak a csillk felptsben?
13. Sorolja fel a tubulin fehrje tpusait! Jellemezze szerepket a sejtvz kialaktsban!
14. A sejt milyen struktrira jellemz a gamma tubulin elfordulsa!
15. Miben klnbzik a centrilum s a citocentrum?
16. Rajzolja le egy csillszl keresztmetszett, s magyarzza el kp alapjn a csillszl felptst!
17. Mit jell a GTP-sapka kifejezs? Mi a jelentsge a sejtvz mkdsben?
18. A sejt mely funkcii krosodhatnak, ha a mikrotubulusok kpzdst meggtoljuk?
99
16. fejezet - Sejt-sejt, sejt-ECM

kapcsolatok, jeltvitel
Az llati szervezet nem sejtek vletlenszer halmaza, hanem specifikusan sszekapcsolt szvetekbe rendezdtt
sejtcsoportokbl pl fel. Kapcsolatok nlkl a sejtek nem letkpesek (ksrleti krlmnyek kztt kimutathat,
hogy tartsan izollt, kapcsolatoktl megfosztott sejtekben npusztt program aktivldik). A kapcsolatot a
plazmamembrn specilis fehrji, a sejtadhzis molekulk alaktjk ki. Mkdsk a jel/receptor rendszer
mkdshez hasonl: az adhzis molekula egyszerre tekinthet ligandumnak, mely stabilan a sejtfelsznhez
rgzl, s receptornak, mely megkti a szomszd sejt felsznn vagy a sejtkzi llomnyban (extracellulris
mtrixban) elhelyezked partner adhzis molekulkat. A hasonlsg abban is megnyilvnul, hogy a kapcsolat
ltrejtte a sejt belsejben vlaszfolyamatokat indt el: legtbbszr a citoszkeleton trendezdst, kinzok
aktivldst eredmnyezi. A kapcsolat lehet homofil vagy heterofil, aszerint, hogy azonos tpus vagy eltr
adhzis molekulk kztt jn ltre. Egy sejt felsznn egyidejleg tbbfle adhzis molekula is kimutathat, de
ezek lokalizcija eltr, s funkciik is klnbzk.
A sejtkapcsol molekulk s szerkezetek f

tpusai
Occludin s Claudin
Az occludinok s claudinok gerinces llatok sejtjeiben elfordul integrns membrnfehrjk, melyek a hmsejtek
kztti n. szoros kapcsolat (zrkapcsolat, zonula occludens, tight junction) f molekulris komponensei. A
szoros kapcsolatok a sejtek oldalfelsznei kztt alakulnak ki, kzvetlenl az apiklis rgi alatt. Az occludin s
claudin molekulk itt fonalakba rendezdnek, melyek krbefogjk a sejtet. A szomszdos sejtek fonalktegei
pontosan egymshoz illeszkednek s lezrjk a sejtkztti jratokat. A szoros kapcsolatok szerepe ketts: meggtoljk
az n. paracellulris transzportot, vagyis nem engedik anyagok tszivrgst az apiklis oldalrl (pl. a bl rege
fell) a bazlis oldalra a sejtkztti jratokban; meggtoljk a plazmamembrn molekulinak oldalirny (a
membrn skjban trtn) elmozdulst, s ezzel stabilizljk a membrn apiklis s bazolaterlis oldalai kztti
molekulris klnbsgeket. Gerinctelen llatokban nincs sem claudin, sem occludin, de kimutathat egy specilis,
a szoros kapcsolatok funkcijt ellt struktra, az gynevezett szeptlis (vlaszfalas) dezmoszma. Ez tipikusan
zeltlbak sejtjei kztt fordul el. A kapcsolat helyn a szomszdos sejtek kztt ltrafok-szeren elhelyezked
hidak figyelhetk meg, melyek zrjk a sejtek kztti jratokat. A szeptumok molekulris sszettele nem ismert.
100
Sejt-sejt, sejt-ECM kapcsolatok, jeltvitel
Rekeszes dezmoszma (hidrbl, TEM fot).
Cadherinek
A cadherinek mintegy 700750 aminosavbl ll transzmembrnfehrjk.
Sok vltozatuk ismert, gy az E-cadherin a hmsejtekre jellemz, az N-cadherin neuronokban, izomszvetben
fordul el. Homofil ktst alaktanak ki, vagyis a szomszdos sejtek cadherinmolekulinak extracellulris rgii
kapcsoldnak ssze. A kts kalciumfgg (innen az elnevezs kalcium-dependens-adhzi), keltorokkal
(kalciumelvon anyagokkal) kezelve a szveteket, azok sztesnek sejtjeikre. A molekula citoplazmba nyl Cterminlis szakasza kzvett fehrjken (- s -catenineken) keresztl az aktinvzhoz ktdik. A cateninek a
membrn bels, citoplazmatikus oldaln morfolgiailag jl szlelhet megvastagodst, lemezt alkotnak. Ebbe
gyazdnak be az aktinfonalak. A -cateninnek emellett egy msik funkcija is van: szabad (nem cadherinhez
kttt) molekuli bejuthatnak a sejtmagba, ahol egyes gnek expresszijt szablyozzk. A cadherinek teht
tttelesen, a szabad/kttt -catenin arny befolyslsn keresztl, ellenrizni tudjk egyes gnek mkdst. A
cadherinek eloszlsa a hmokban nem vletlenszer: ltalban a szoros kapcsolatok alatt, azok kzelben
lokalizldnak, egy vszer znt alkotva a sejt krl. Ezt a znt s a bellrl hozzkapcsolt aktinfonalak
sszessgt adhzis vnek (adhzis szalagnak zonula adherens) nevezik. Szerepe ketts: mechanikai stabilitst
klcsnz az sszekapcsolt sejtpopulcinak; az aktinvz loklis sszehzdsa az sszekapcsolt sejtrteg
deformldst, redk, bemlyedsek kialakulst okozza.
Az adhzis v mellett a stabil sszekapcsoldst egy msik sejtkapcsol szerkezet, a dezmoszma (macula
adherens) biztostja. A dezmoszmk foltszer, korong alak kpzdmnyek, az adhzis v alatt elszrtan
helyezkednek el s sejt-sejt kztti kapcsolatot hoznak ltre. F molekulris komponenseik a cadherincsaldba
tartoz dezmoglein s dezmokollin nev integrns membrnfehrjk, melyek a cadherinhez hasonlan,
extracellulris rszeikkel homofil ktsben kapcsoljk ssze a szomszdos sejteket. A molekulk citoplazmatikus
rgiihoz cateninszer kapcsolmolekulk s vzelemek, de nem aktin, hanem intermedier filamentumok
kapcsoldnak. A hmok mellett klnsen sok dezmoszma tallhat a szvizomban.
A hmokban gyakori egy tovbbi kapcsolszerkezet, a hemidezmoszma, mely alakjban, funkcijban hasonlt
a dezmoszmkhoz, de molekulris sszettele attl eltr. A hemidezmoszmk foltszer kpzdmnyek, a sejtek
bazlis oldaln helyezkednek el, s feladatuk a sejt rgztse az extracellulris mtrixhoz (a ktszveti llomny
molekulihoz). F alkotelemk az integrin nev membrnfehrje, mely kt alegysgbl ll dimerek formjban
csoportosul a hemidezmoszmkban. Az integrinek extracellulris rgii a ktszvet molekulihoz, elssorban
a fibronektinhez ktdnek, mg citoplazmba nyl vgei a citoszkeleton intermedier fonalaihoz kapcsoldnak.
101
Kt mirigysejt kztt a piros nyl mutatja a dezmoszmt.
Az integrinek
Az integrinek alkotjk a sejtadhzis molekulk legnagyobb csoportjt. Kt (alfa s bta) alegysgbl ll
heterodimerek formjban mutathatk ki a legtbb sejt felsznn. Egy-egy alegysg hossz extracellulris rszbl
(ez a ligandumkt rgi), egyszeres membrntvel szakaszbl s viszonylag rvid citoplazmba nyl Cterminlis rgibl ll. Ez utbbihoz kzvett fehrjk, kinzok s citoszkeletlis elemek (aktin- vagy intermedier
filamentumok) kapcsoldnak. A cadherinekhez hasonlan, a ligandum ktshez kationok, kalcium vagy magnzium
jelenlte szksges.
Az integrinek f funkcija a sejt-extracellulris mtrix kapcsolat kialaktsa, de egyes sejttpusok kztt sejt-sejt
kapcsolatot is tudnak ltesteni. A tipikus receptorok mkdshez hasonlan a ligandumok a mtrix molekulinak
megktse jeltviteli folyamtokat indt meg. A ligandumkttt integrinek foltszer kpletekbe tmrdnek,
aggregldnak, s a citoplazmba nyl C-terminlis szakaszaihoz szmos ms fehrje kezd asszocildni. Az gy
kialakul szerkezet az n. foklis adhzis korong, mely klnsen jl megfigyelhet szvettenyszetben tartott
sejteken, ahol az aljzathoz val letapadst biztostja. A korong anyagban kimutathat egy jellegzetes fehrje, a
foklis adhzis kinz (FAK), melynek aktivitsa szmos ms fehrje mkdst szablyozza. A letapads mint
jel a FAK kzvettsvel kt nagy folyamatsort befolysol. Egyrszt klnbz ttteleken keresztl szablyozza
a sejtciklust: normlis nvekedsre, osztdsra csak a krnyezetkkel kapcsolatot kialaktott, letapadt sejtek
kpesek. Msrszt, az adhzis korongok szervezik az aktinvzat: miozint is tartalmaz aktinkbelek ktdnek
hozzjuk. Ennek a mozgsban van jelentsge. Ugyanis a mozg sejt kinyl llbainak kzelben folyamatosan
foklis adhzis korongok alakulnak ki, s az ezekhez ersd aktinkbelek segtsgvel tudja elrehzni magt
a sejt. Ehhez viszont az is szksges, hogy a hts letapadsi helyek folyamatosan sztszereldjenek. A jelensg
rvilgt az integrinmedilt adhzi egy fontos tulajdonsgra: esetenknt a kapcsolatok nagyon labilisak, gyorsan
kialakulnak, de knnyen meg is sznnek.
Az integrineket alkot kt alegysg mindegyiknek tbb vltozatt kpesek a sejtek ellltani, ezrt szmos
alfa/bta heterodimer-kombinci alakulhat ki. Ezek kzl eddig kb. 20-at ismernk. Az egyes kombincik ms
s ms ligandumot ktnek meg, pl. az 51 heterodimer specifikus liganduma a fibronektin, az 11 kombinci
kollagnt kt nagy affinitssal, a hemidezmoszmkban 64 sszettel dimer tallhat. Nyilvnval, hogy a
dimersszettel vltoztatsval a sejt szablyozni tudja, hogy krnyezetnek mely komponensvel ltestsen
kapcsolatot.
Immunglobulinszer adhzis molekulk

A csoportba olyan transzmembrnfehrjk tartoznak, melyek extracellulris rgija n. Ig-szer
(immunglobulinszer) domneket (szakaszokat) tartalmaz, melyek szerkezetkben hasonltanak az ellenanyagmolekulk (immunglobulinok) egyes rgiihoz. Mintegy 20-fle vltozatuk ismert, a legtbb sejtflesg felsznn
kimutathatk. A csoport legjobban ismert tagja az n. N-CAM (neuronlis sejt(cell)-adhzis molekula), mely a
neuronok mellett sok ms sejtben is elfordul. Az Ig-szer adhzis molekulk leggyakrabban homofil ktst
ltestenek, de elfordul heterofil kapcsolat is. gy pl. az endotel sejtek Ig-szer adhzis molekulikkal ktik meg
a leukocita integrineket. A kts kialaktshoz kalcium jelenlte nem szksges. Az Ig-szer adhzis molekulk
intracellulris rgijhoz nem, vagy csak kevs citoszkeletlis elem tapad, ezrt az ltaluk ltestett kapcsolat nem
102
jrul klnsebben hozz a szvet mechanikai stabilitsnak biztostshoz. Jelentsge abban van, hogy az Igszer adhzis molekulk segtsgvel az azonos tpusba tartoz sejtek felismerik egymst, laza kapcsolatot tudnak
ltesteni, melyeket azutn a cadherinen alapul ktsek egy kvetkez lpsben stabilizlnak.
Szelektinek
A szelektinek olyan sejtfelszni adhzis molekulk, amelyek egy msik sejt felsznn jelenlv specilis szerkezet
(szilsavat, galaktzt, fukzt s acetil-glkzamint tartalmaz) oligoszacharid lncokat ismernek fel s ktnek
meg. Csak gerincesekben tallhatk s a keringsben sodrd sejtek, illetve a kapillrisok falt blel endotel
sejtek felsznn mutathatk ki. Hrom vltozatuk ismert: az L-szelektinek leukocitk felsznn, az E- s P-szelektinek
az endotel sejtek, illetve vrlemezkk felsznn fordulnak el. A szelektinek gyenge, tmeneti kapcsolatokat
ltestenek az endotel sejtek s a kapillrisokban sodrd leukocitk kztt, ez utbbiakat lelasstjk, s gy
elsegtik a mr emltett, integrineken alapul stabil kitapadst.
Jeltvitel receptorokkal
A sejtek lland kapcsolatban llnak krnyezetkkel, amelybl anyagokat vesznek fel, s amelybe sajt termkeiket
rtik. Ezek az anyagok informcit hordoznak annak a kzegnek az llapotrl, amelyben a sejt l s mkdik.
Az evolci sorn bonyolult jelfog rendszer alakult ki ezen informcik feldolgozsra, mely lehetv teszi a
krnyezet vltozsaira adott korrekt vlaszreakcit, vgs soron a sejt letben maradst.
A jelfog rendszer egyszer formban mr a prokaritkban s egysejt eukaritkban (Protista) is megtallhat
(pl. a kemotaxist kivlt rendszer), de klns jelentsgre s fejlettsgre tett szert az llatokban, ahol a szervezetet
alkot sok sejt mkdsnek sszehangolsa a f feladata.
A rendszer elemei a jelhordoz molekulk (ligandumok vagy elsdleges hrvivk), az ezek felfogsra megktsre
specializldott receptorok, az intracellulris kzvett molekulk, melyek az aktivlt receptorrl a clmolekulk
fel kzvettik a jelet, s a clmolekulk, melyek mkdsnek beindulsa (esetleg kikapcsolsuk) jelenti magt
a vlaszt. A jelkzvett rendszerre ltalban jellemz az rzkenysg (a receptorok a sokszor csak nanomlos
koncentrciban jelen lv ligandumaikat is kpesek megktni, a vlasz egy koncentrcikszb elrsekor indul
be). A jeltvitel jelents erstssel trtnik (pl. egyetlen adrenalin- vagy glkagonmolekula megktse mjsejtekben
tbb milli glkzmolekula felszabadulst idzheti el). A sok lpsbl ll jeltviteli folyamat szmos beavatkozsi
helyet knl, ezrt finoman szablyozhat; az tviteli lncban mindig van negatv visszacsatols, ezrt a rendszer
egy bizonyos id utn nmagtl lell.
A ligandumok kmiai szempontbl ugyan vltozatos molekulk, de a plazmamembrnon val thatolkpessgk
alapjn kt nagy csoportra oszthatk. A hidrofb (lipofil) jelleg anyagok knnyen tdiffundlnak a
plazmamembrnon, receptoraik a citoplazmban s a magban lokalizldnak. Ebbe a csoportba tartoznak a szteroidok
(pl. progeszteron, tesztoszteron, mellkvesekreg hormonjai, zeltlbak vedlsi hormonja), az A- s D-vitaminszrmazkok, a tiroxin (lsd a sorozat Endokrin szervek ktett). A msik csoportba olyan ligandumok tartoznak,
melyek szmra a plazmamembrn nem tjrhat, ezrt a citoszolba belpni nem tudnak, receptoraik a sejtfelsznen
vannak. Jellegzetes kpviselik a klnbz aminosav-szrmazkok (pl. (adrenalin, dopamin, hisztamin),
peptidhormonok (pl. inzulin), nvekedsi faktorok (pl. epidermlis nvekedsi faktor). Br egyes szervek (pl.
endokrin mirigyek) kifejezetten jelhordoz molekulk szintzisre specializldtak, gyakorlatilag minden sejt
elllt s kibocst olyan molekulkat, amelyekkel a krnyezetben lv ms sejtek mkdst befolysolni tudja.
A ligandumokat legtbbszr a keringsi rendszer szlltja el a clsejtekig. Gyakori azonban, hogy a jelmolekula
nem jut a keringsbe, csak loklisan, a sejt krnyezetben hat. Ennek extrm pldi a szinapszisok, melyekben a
ligandum (pl. acetilkolin) a szinaptikus rs szk terbe rl, ahol azonnal kapcsolatba kerl az rintkez sejt
posztszinaptikus membrnjban lv receptorokkal. Elfordul az a vltozat is, hogy a ligandum az t termel sejt
felsznn marad. Ilyenkor a ligandumhordoz s a receptorhordoz sejtek sszekapcsoldhatnak. A kapcsolds
lehet tmeneti, de tarts is, ami stabilis sejtkapcsolatok kialakulst eredmnyezi.
A receptorok fehrjk, amelyekre az jellemz, hogy ligandumaikat reverzbilisen, specifikusan s ltalban nagy
affinitssal ktik meg s a receptorligandum komplex kialakulsa valamilyen jellegzetes vlaszreakci beindulst
eredmnyezi. A specifits azt jelenti, hogy a receptor a krnyezetben elfordul legklnbzbb molekulk kzl
csak a re jellemzvel lp kapcsolatba (az inzulinreceptor pl. csak inzulint, s nem ms hormont kt meg stb.). A
nagy affinits a receptor azon kszsgt jelenti, hogy ligandumot mg akkor is kpes ktni, ha az nagyon kis
103
koncentrciban van jelen. Az affinits szmszeren azzal a ligandumkoncentrcival jellemezhet, amelynl a

sejtfelszni receptorok fele foglalt llapotba kerl. Ez ltalban nagyon alacsony, 109107 M krli rtk. A
ligandum ktdse aktivlja a receptort, vagyis kpess teszi valamely re jellemz specifikus vlaszreakci
beindtsra. A vlasz lehet pl. anyagcsere-folyamat (pl. glikognlebonts/glkzfelszabaduls adrenalin hatsra
mjban s izomban), membrnpermeabilits-vltozs (pl. Na+-beramls szinapszisokban acetilkolin hatsra),
sejtnvekeds/sejtosztds (nvekedsi faktorok hatsra), citoszkeleton trendezdse (sejt-sejt kapcsolatok
kialakulsakor). A vlaszt eredmnyez reakcisort befolysolja a receptor lokalizcija. A sejtfelszni receptorok
integrns membrnfehrjk, a membrnt elhagyni nem kpesek, hatni a citoplazmban vagy magban lejtszd
folyamatokra csak kzbeiktatott kzvett molekulk sorozatn keresztl tudnak. A citoplazmban lokalizld
receptorok viszont knnyen kapcsolatba lpnek clmolekulikkal, a jeltvitel nem, vagy csak kevs kzbeiktatott
lpst ignyel. Ezt a szteroid hormonok hatsmechanizmusval lehet szemlltetni. E hormonok receptorai
tulajdonkppen transzkripcis faktorok, s szabad llapotban a citoszolban lokalizldnak. A receptoroknak hrom
domnje (jellemz szerkezettel s funkcival rendelkez rgija) van: a hormonkt rsz, a transzkripcit aktivl
rgi s a DNS-kt rsz. A hormon megktse utn a receptor dimerizldik (kt receptorfehrje sszekapcsoldik)
s a maghrtya prusain keresztl a magba vndorol. Itt a dimer a DNS-molekulk azon s csakis azon rszeivel
lp kapcsolatba, melyek jellegzetes inverz bzisprsorozatbl llnak. Ha egy ilyen szekvencia valamilyen gn
szablyozrgijban elfordul, akkor a receptor oda tud ktdni, s megindtja az adott gn trst. A vlaszreakci
specifitsa teht azon alapul, hogy az aktivlt receptor egy jellegzetes bzissorozatot ismer fel a DNS-molekulkon.
A szteroidok ltal kivltott vlasz hosszan tart (rk, napok), miutn az trs, majd az ezt kvet fehrjeszintzis
hosszabb idt ignyel.
A plazmamembrnba plt felszni receptorok jeltviteli mechanizmusaik alapjn hrom nagy csoportba sorolhatk:
ioncsatorna-receptorok, G-proteinhez kapcsolt receptorok s enzimaktivitssal rendelkez receptorok. Az
ioncsatorna-receptorok olyan transzmembrnfehrjk, amelyek a ligandum ktsre kinylnak s valamilyen ion
pl. Na+ szmra tmenetileg tjrhatv vlnak. Ilyen pl. az acetilkolin-receptor, de tbb ms neurotranszmitter
receptora is.
A G-proteinhez kapcsolt receptorok csaldjba tbb szz klnbz receptor tartozik. Kzs szerkezeti
jellegzetessgk, hogy peptidlncaikban mindig 7 transzmembrn- (membrnt tvel) rgi fordul el, extra
(aminoterminlis) s intracellulris (C-terminlis) rgiik vltoz hosszsgak. Enzimatikus aktivitssal nem
rendelkeznek. G-proteinhez kapcsolt receptorok kzvettik szmos hormon (pl. adrenalin, glkagon), illatanyagok,
kemotaxist kivlt peptidek, fny (fotonok) hatst a sejtekbe. Nevket onnan kaptk, hogy a jeltvitel egy jellegzetes
fehrjecsald, a heterotrimer (hrom klnbz alegysgbl ll) G-fehrjk kzremkdsvel trtnik. A Gfehrjk a plazmamembrn bels oldaln, a receptorok krnyezetben helyezkednek el. Egyik () alegysgkn
kthely van guanozin-di- vagy -trifoszft szmra (innen ered a G fehrje nv). GDP-kttt llapotban a
fehrje inaktv. A jeltvitel azon alapul, hogy a ligandum ltal aktivlt a receptor kicserlfaktorknt kezd mkdni:
arra kszteti a G-fehrje alegysgt, hogy GDP helyett GTP-t kssn meg. GTP-kttt llapotban a G-fehrje
aktvv vlik, disszocil s alegysgekre, melyek mindegyike hatni kezd valamilyen effektorfehrjre. Az
alegysg egyik tipikus effektora az adenilt-ciklz, a alegysg tipikusan ioncsatornkat nyit s foszfolipzokat
aktivl. A G-fehrje azonban GTP-z aktivitssal is rendelkezik, ezrt rvid id alatt elbontja a rajta lev GTPt, ezltal jra inaktv llapotba kerl s a hrom alegysg ismt sszell. A G-fehrje teht kapcsolknt mkdik:
az aktivlt receptor bekapcsolja, sajt enzimaktivitsa viszont egy id mlva automatikusan kikapcsolja, s gy a
jeltviteli lnc megszakad. A sejtekben a G-fehrjk sokfle vltozata fordul el, s ezek ms s ms effektorokat
aktivlnak. Kzlk egyik leggyakoribb az adenilt-ciklz, egy plazmamembrnhoz kttt enzim, amely ATP-bl
ciklikus adenozin-monofoszftot (cAMP) szintetizl. A cAMP-t gyakran msodlagos hrvivnek is nevezik a
jeltviteli lncban betlttt szerepe miatt. A cAMP hatsra egy kinz (proteinkinz-A) aktivldik, ez tovbbi
enzimeket foszforill, s ezen keresztl szablyozza aktivitsukat.
A cAMP szerkezet.
104
Mjban pl. az adrenalin G-fehrje adenilt-ciklz cAMP proteinkinz-A kaszkd egyik vgs
clmolekulja a glikogn-foszforilz, amely glikognbl glkzt szabadt fel. A cAMP transzkripcis faktorok
aktivitst is befolysolja, gy hat egyes gnek expresszijra is.
Egy msik G-fehrjn keresztl aktivld effektor a foszfolipz-C nev enzim, mely a plazmamembrn
foszfatidil-inozitol molekulit hastja. A kt keletkez termk (msodlagos hrviv) kzl a diacil-glicerin (DAG)
egy kinzt (proteinkinz-C PKC) aktivl. A PKC-hoz a sejtek nvekedst, differencildst szablyoz jeltviteli
utak kapcsoldnak. A msik termk, az inozitil-trisz-foszft (IP3), kalciummobilizl hats. Jelenltben
kalciumionok szabadulnak fel az endoplazmatikus retikulum ciszternibl. A kalciumionok fontos msodlagos
hrvivk, mivel a citoplazmban szmos olyan fehrje van, melyek aktivitst kalcium szablyozza. A citoplazma
szabadkalcium-koncentrcija alapllapotban olyan alacsony (kevesebb, mint 10-7 M), hogy a kalciumfgg
szablyozfehrjk nem tudnak teltdni s inaktvak. Ha valamilyen jeltviteli folyamat Ca-szintnvekedst okoz,
akkor a kalciumkt fehrjk teltdnek kalciummal, s ilyen llapotban kpesek ms fehrjk mkdst
szablyozni. A kalciumkt fehrjk szablyozzk pl. az aktin-miozin rendszer kontrakcijt izmokban. Az egyik
legfontosabb univerzlisan elfordul kalciumfgg szablyozfehrje, a kalmodulin, mely szmos enzim, gy
pl. kinzok, ionpumpa-ATP-zok regultora. A kalciumpumpk (Ca-ATP-z) mkdse viszont egy id mlva
jra alacsony szintre szortja az intracellulris kalciumkoncentrcit, s a nyugalmi llapot helyrell.
A szmos G-fehrjhez kapcsolt receptor specifikus hatst tbb tnyez egyttesen okozza: egyrszt egy adott
receptort csak sajt liganduma kpes aktivlni, msrszt a klnbz G-fehrjk eltr receptorok hatst kzvettik
s effektorenzimeik is klnbzek lehetnek. Az egyes jeltviteli utak egymst is szablyozzk. Pl. a kalmodulin,
mely foszfolipz-C-n keresztl aktivldik, stimullja az adenilt-ciklzt is, s rajta keresztl a cAMP-fgg
kinzok mkdst. Ismernk gtl hats heterotrimer G-fehrjket is. A jeltviteli rendszer fontos tulajdonsga,
hogy tartsan magas ligandum koncentrci jelenltben a vlasz intenzitsa cskken. Ennek htterben tbbfle
mechanizmus van. A receptoron keresztl aktivlt kinzok sok esetben magt a receptort is foszforillhatjk, s
ez ltalban cskkenti a receptor rzkenysgt. Gyakori, hogy a receptorok endocitzissal a lizoszmkba kerlnek,
ahol degradldnak. A sejt gy cskkenteni tudja a sejtfelszni receptorok szmt.
A membrnreceptorok harmadik nagy csoportjt azok a receptorok alkotjk, amelyek ligandumkttt llapotban
enzimaktivitst mutatnak, vagy azrt, mert maga a receptor rendelkezik katalitikus rgival, vagy azrt, mert a
receptorhoz enzim, ltalban valamilyen kinz, asszocildik. Kzs strukturlis jellemzjk, hogy hrom domnbl
llnak: a molekula extracellulris rgijban van a ligandumkt hely, a citoplazmba nyl rszen a katalitikus
hely, s a kettt heliklis szerkezet, a membrnt egyszeresen tvel transzmembrndomn kti ssze. Legnagyobb
csoportjukat a receptor protein-tirozin kinzok alkotjk. Tipikus ligandumaik a klnbz nvekedsi faktorok,
az inzulin, teht olyan jelfehrjk, melyek a sejteket nvekedsre, osztdsra ksztetik. A ligandum megktse
utn a receptor ltalban dimerizldik, majd a peptidlnc citoplazmatikus rgijban lev tirozinok
autofoszforilldnak. A csoport ms tagjai szerin/threonin kinzaktivitst mutatnak (vagyis nem tirozinra hanem
szerin- vagy threoninmaradkokra visznek r foszftcsoportot). Ismeretesek olyan receptorok is, amelyek foszfatzaktivitsak vagy protezokhoz asszocildnak. A receptoron kialakult foszfotirozin-mintzatot kzvett adaptor
fehrjk ismerik fel, melyekhez viszont kicserlfaktorok ktdhetnek. A membrn citoplazmatikus oldaln, a
receptor krnyezetben tallhat egy n. kis G-tpus fehrje a Ras mely a jeltvitelben a kapcsol szerept
tlti be. A Ras alapllapotban guanozindifoszftot kt meg s inaktv. A kicserlfaktor hatsra a GDP lecserldik
GTP-re s a GTP-kttt Ras kpes aktivlni egy kinzt, amely azutn tovbbi, n. MAP-kinzokat (mitognaktivlt
proteinkinzok) kapcsol be, s a jel lavinaszeren felersdik. A vgs clmolekulk ltalban transzkripcis
faktorok, melyeket a kinzok aktivlnak, s ez beindtja a nvekedst szablyoz gnek mkdst. A Ras maga
GTP-z, ezrt egy id mlva GDP-v bontja a hozzktdtt GTP-t, ezzel inaktivldik s kikapcsolja az egsz
jeltviteli lncot (ez a mechanizmus hasonl ahhoz, ahogyan a heterotrimer G-fehrjk mkdnek a G-proteinekhez
kapcsolt receptorok esetben). A Ras egyes mutcii a fehrje GTP-z aktivitst bntjk, ilyenkor a Ras tartsan
GTP-kttt, vagyis aktv llapotban marad, nem tud kikapcsolni, s folyamatosan serkenti a kinzokon keresztl
a sejtprolifercit. A daganatos sejtekben gyakran kimutathat a Ras ilyen jelleg hibja. A receptor protein-tirozin
kinzok nemcsak a Ras-MAP-kinz rendszeren keresztl fejthetik ki hatsukat. Gyakori, hogy aktivlnak egy
msik kinz rendszert is, a foszfatidil-inozitol kinzokat, melyek a plazmamembrnban elhelyezked foszfatidilinozitol molekulkat foszforilljk. Ilyenkor teht nemcsak a receptor fehrjn, hanem a membrn egyik lipid
komponensn is kialakul foszforillt mintzat, melyhez tovbbi jeltviv molekulk (adaptorok, ms kinzok)
kapcsoldnak. A foszfatidil-inozitol kinzok aktivlsa fokozott fehrje szintzist, nvekedst, sejtosztdst, a
sejtpusztuls gtlst eredmnyezi.
105
A nvekedsi faktorok gyakran nemcsak az itt lert kinzkaszkdokat aktivljk, hanem receptor-medilt endocitzist
is induklnak. Ennek eredmnyeknt a receptorok egy rsze a lizoszmkba kerl, ahol degradldik, s ez cskkenti
a sejt ligandummal szembeni rzkenysgt.
Az enzimaktivits receptorok tovbbi fontos csoportjt a szerin/treonin kinz aktivitssal rendelkez receptorok
alkotjk. Ezek dimerek, a ligandum hatsra a dimer egyik tagja foszforillja a msik tag citoplazmatikus rgijban
tallhat szerin/treonin maradkokat s ezltal azt aktivlja. Az aktivlt receptor ezutn kpes specilis transzkripcis
faktorokat foszforillni, melyek a magba transzlokldnak s ott egyes gnek trst szablyozzk. A receptorszerin/treonin kinzok ligandumai a sejtek sorst, differencildst szablyoz morfogn hats anyagok (pl.
activin, l. rszletesen a sorozatFejldstan ktetben).
Mg az elbbiekben trgyalt receptorok ltalban a nvekeds/szintzis folyamatait szablyozzk, a sejtekben
kimutathat a receptorok egy specilis csoportja is, a hall-receptorok, melyek a sejtpusztuls egyik formjt,
az apoptzist kpesek kivltani.
Jeltvitel: sejtek kztti kommunikci

rskapcsolatokon keresztl
Az llati szervezet sejtjei kztt mkdik a jeltvitel egy specilis formja, mely nem ignyel receptorokat: a
rskapcsolatokon (gap junction) keresztli kommunikci. Gerincesekben a rskapcsolatok folt alak, nhny 100
nm tmrj terletek a plazmamembrnon, melyekben a kapcsolat szerkezeti elemei, a konnexonok helyezkednek
el. Egy-egy konnexon 6 alegysgbl (6 konnexinmolekulbl) ll, henger alak szerkezet, amelynek kzepn
csatorna hzdik. Az rintkezsi helyeken a kt sejt kztti rs mintegy 22,5 nm-re szkl (innen a rskapcsolat
elnevezs), s a szomszdos sejtek konnexonjai szorosan egymshoz illeszkednek. gy az rintkez sejtek kztt
a konnexonok csatorni kzvetlen kapcsolatot ltestenek, melyeken keresztl klnbz ionok, kismolekulj
anyagok (kb. 1 kDa-ig) t tudnak ramlani. Rskapcsolatok tallhatk pl. az elektromos szinapszisokban s a
szvizom sejtjei kztt, ahol iontereszt kpessgk az ingerlet gyors, ksedelem nlkli tovaterjedst teszi
lehetv. Ms sejtek kztt a rskapcsolatok az anyagcsere-folyamatok sszehangolsban jtszanak fontos szerepet
azltal, hogy msodlagos hrvivket (pl. Ca-ionokat, cAMP-t), ATP-t, aminosavakat stb. eresztenek t. Jelentsgkre
utal, hogy a rskapcsolatok mr az embrionlis fejlds korai szakaszaiban (pl. egrnl mr a 8-sejtes stdiumban)
kialakulnak a sejtek kztt.
Gerinctelenekben nincs konnexin gn ezrt a konnexinek is hinyoznak. Helyette egy msik fehrjt, az innexint
termelik. Ez aminosav szekvencijban ugyan a konnexintl eltr, de funkcijban ahhoz hasonlt. Az innexinek
a gerincesek konnexonjaihoz hasonl szerkezet s mkds kommunikcis kapcsolatot kpesek ltrehozni a
szomszdos sejtek kztt.
106
Krdsek:
1. Sorolja fel a sejtadhzis molekulk fbb csoportjait!
2. Csoportostsa a sejtkapcsol struktrkat!
3. Mit takar a FAK rvidts?
4. Mi a klnbsg a dezmoszma s a hemidezmoszma kztt?
5. Mi a heterofil s homofil kapcsolat kztti klnbsg molekulris httere?
6. Melyek a jeltviteli rendszer f elemei?
7. Soroljon fel hrom receptortpust!
8. Mi a heterotrimer G-fehrje mkdsnek alapja?
9. definilja a msodlagos hrviv fogalmt?
10. Mi a klnbsg a konnexin s konnexon kztt?
107
17. fejezet - A nvnyi sejtfal

A nvnyi sejteket sok ms llnyhez hasonlan (de az llatoktl eltren) sejtfal hatrolja. A sejtfalak lebontsval
a nvnyi sejtek - megfelel ozmotikus kzegben - gmb alak sejtekre esnek szt, protoplasztokk alakulnak. A
nvnyi sejtfal elhatrolja a sejteket egymstl, de a sejteket sszekt, a sejtfalakon tnyl citoplazmaszlak, a
plazmodezmk rvn a sejtek kapcsolatban maradnak egymssal. Ez a fajta kapcsolat sokkal gyakoribb a nvnyi
sejtek kztt, mint az llati sejteket sszekapcsol hasonl struktrk, s nagyobbak is azoknl. A nvnyek szinte
minden sejtje membrn s citoplazms kapcsolatban ll a szomszdjaival, gy a nvnyi test topolgiai rtelemben
szinte egyetlen - vagy nhny - sejtfalakkal feldarabolt sokmagv sejtnek tekinthet.
A sejtfal szerepe rendkvl sokrt, s ennek megfelelen megjelense, felptse is sokfle. A sejtfal megszabja
a sejt alakjt, biztostja a turgort, vdi a sejtet a krtevktl, fizikai, kmiai behatsoktl, szignlok kpzdsi
helye, szlltsi plya, szr, vagy ppen szigetelrteg. A sejtfal dinamikusan vltoz leboml s tpl struktra,
melyet sokfle anyag pt fel. Kialakulsa a sejtosztds vgn trtnik, majd tovbbfejldve kialakul az elsdleges
sejtfal. Ez a mg a megnylsra kpes sejtfal tovbbi vastagodsokkal, klnbz anyagok berakdsval alakul
t az llandsult sejtek msodlagos falv. Ez utbbi mr csak rendkvli esetekben alakul vissza alakvltoztatsra
kpes sejtfall. Az elpusztult sejtek fala megtartva alakjt, rszt vesz a nvnyi test kialaktsban, st bizonyos
sejtek pusztulsa rvn kpesek a sejtfalak feladatukat betlteni. Ilyen lettelen de mkd, feladatukat beteljest
sejtek a tracheidk, tracheatagok, rostok.
A sejtfal kpzdse
A nvnyi sejtek osztdsakor a sejtek a sejtfalkpzds rvn vlnak kln egymstl. A telofzis vgn a magors
megmaradt mikrotubulris s mikrofilamentlis elemei mentn a Golgi-kszlkbl szrmaz vezikulk a kzpskba
vndorolnak, s sszeolvadnak. Ez a vezikulkbl, miktotubulusokbl, s mikrofilamentumolbl ll kplet a
fragmoplaszt. A vezikulk fzija sorn a bennk tallhat pektin anyagok egybemlenek, s ez fogja kialaktani
a kzplemezt, melyet kt oldalrl a vezikulk membrnjbl kialakul j sejtmembrn bort. A vezikulk fzijban
fontos szerepe van az endoplazmatikus retikulumbl kiraml kalcium ionoknak. A folyamat fokozatosan megy
vgbe, kezdetben a vezikulk tubulusokat, majd lapos zskszer kpleteket hoznak ltre, melyen itt-ott nylsok
tallhatk. Ezeken a nylsokon a citoplazma folytonossga megmarad a leend sejtek kztt, s rajtuk gyakran
az endoplazmatikus retikulum is tnylik. Ezekbl alakul ki a plazmodezma.
A sejtfal szli rszein a vezikulk membrnja fuzionl a sejtmembrnnal. Itt a mr meglev sejtfal rszbeni
lebontsra is szksg van, hogy a kzplemezek tallkozzanak egymssal.
A kzplemez fknt cellulzrtegeknek a kzplemezre trtn szintzise rvn vastagszik, s kialakul az
elsdleges sejtfal. Ez a fknt pektinbl s cellulzbl ll fal mg rugalmas, s a cellulzszlak lefutsi irnyra
merlegesen knnyen nyjthat. Tovbbi anyagok berakdsval (inkrusztci), s rrakdsval (adkrusztci)
a fal egyre merevebb, s vastagabb vlik. Ez az n. msodlagos sejtfal, ami mr megnylsra nem kpes. A
kialakult msodlagos sejtfalban ltalban hrom rteget lehet elklnteni, melyekben a cellulzszlak lefutsi
irnya is klnbz.
Elsdleges sejtfal fellnzeti kpe (SEM fot).
108
A nvnyi sejtfal
Msodlagos sejtfal fellnzeti kpe (SEM fot).

A sejtfal vastagodsa, elssorban jabb cellulz rtegek kialakulsval a membrn felsznnl trtnik, vagyis a
sejtfal a sejtek fel centripetlisan nvekszik. Ettl eltr, n. centrifuglis sejtfalvastagods figyelhet meg a
sprk s pollenszemek esetben, mivel azok a krnyez sejtektl kapnak sejtfalpt anyagokat.
A sejtfal rtegei. A bal oldali brn kt szomszdos sejt kztti sejtfalegyttes metszete, a jobb oldalin egy sejtet
krlvev sejtfal metszete lthat.
A sejtfalat felpt anyagok

A sejtfal anyagait szerkezeti szerepk, s kmiai termszetk, sszettelk alapjn csoportosthatjuk. Hrom f
csoportba rendezhetjk a sejtfal alkotit:
Vzanyagok A sejtfal hossz, szlas szerkezet alapanyagai, mint a cellulz s a kallz
Mtrix anyagok A cellulz szlak kztti, ltalban cellulzhoz, vagy kzvetlenl egymshoz kapcsold
sznhidrtok s fehrjk
Inkrusztl s adkrusztl anyagok Fknt a msodlagos sejtfalra jellemzek. Ilyen pl. a lignin, a para, a kutin.
Cellulz
Glkz szerkezeti kplete klnbz brzolsokban.
109
A nvnyi sejtfal
A cellulz molekula szerkezeti kplete.

A cellulz a nvnyi sejtfalak legltalnosabb anyaga. 1-4 kts -D-glkz polimer. A sejtfalban a
cellulzmolekulk hossz, prhuzamos szlakbl ll ktegeket, mikrofibrillumokat hoznak ltre. A
mikrofibrillumokban 36 molekula fut egytt, s a kzttk kialakul H-hidak kristlyszeren rendezett, n.
parakristlyos szerkezetet alaktanak ki tbb ezer glkz molekulra is kiterjed hosszban. Ezeket a parakristlyos
szakaszokat micellknak is nevezik. A mikrofibrillumok tmrje a rendezettsg mrtktl fggen 512 m, az
elemi cellulz szlak 23 m hosszak, mg a mikrofibrillumok tbb szz m hosszak lehetnek. A cellulz
szintzist a membrnban tallhat enzimkomplex, az n. rozetta enzim vgzi. Ez az enzimkomplex -1,4-glknszintetz, azaz cellulz szintetz enzimeket tartalmaz. A rozetta komplexben 6 darab krben elhelyezked egysg
figyelhet meg a fagyasztva trt mintk elektronmikroszkpos kpn, innen kaptk nevket is. Minden egysg hat
cellulz szintetz enzimet tartalmaz, gy egytt 6x6 = 36 molekult szintetizlnak egyszerre, ez alkotja a cellulz
mikrofibrillumot. A komplex a membrnon tnylva, a citoplazmbl nyeri a szintzishez az alapanyagot, s a
membrn kls felsznre bocsjtja ki a cellulz lncokat. A cellulz szintzis kzvetlenl UDP-glkzbl trtnik.
Az immuncitokmiai vizsglatok arra utalnak, hogy a komplex citoplazma felli oldalhoz szorosan asszocildnak
szacharz szintetz enzimek, melyek szacharzbl UDP felhasznlsval UDP-glkzt s -fruktzt hoznak ltre.
Az elbbi a komplex katalitikus helyn polimerizldik cellulzz, s a levl UDP a szacharz szintetzhoz
visszakerlve a kvetkez UDP-glkz molekula keletkezsvel jra felhasznldik.
Rozetta komplex s a cellulz mikrofibrillum szintzis.
110
A nvnyi sejtfal
A cellulz mikrofibrillumok szintzise

A fruktz molekulk a citoplazmba kerlnek. A membrnba gyazott rozetta komplexek a cellulz mikrofibrillumok
szintzise sorn el kell, hogy mozduljanak, mivel a cellulz szlakat nem lehet betolni a sejtfalba. Csak gy
kpzdhetnek, hogy a rozetta enzim a szintzissel ellenttes irnyban folyamatosan mozog. ennek a mozgsnak
az irnya szabja meg a cellulz mikrofibrillumok lefutsi irnyt. Amennyiben ez random mdon trtnne, a
cellulz szlak igen merev, szinte megvltoztathatatlan hlzatot alkotnnak, pedig az elsdleges sejtfalnak mg
megnylsra kpesnek kell lennie. A rozetta enzimek elmozdulsi irnyt, s ezzel a cellulzszlak lefutst a sejt
kortiklis citoszkeleton rendszere, a mikrotubulusok s aktin filamentumok elrendezdse szabja meg. A rozetta
enzimek citoplazmba benyl rsze ugyanis mikrotubulusok hatrolta snplyn mozdulhat csak el, gy a cellulz
mikrofilamentumok kvl mintegy lekpezik a membrn alatti mikrotubulusok lefutst.
A genomban a cellulz szintetz gnje nagyon sok kpiban tallhat meg. Ez a sejtfalpts szablyozsban
fontos szerepet jtszik, pldul ms gnek mkdnek az elsdleges s msok a msodlagos sejtfal ptse sorn.
Kallz
A kallz a cellulztl eltren 1-3 kts -D-glkn lncokat alkot, amelyek ketts, vagy hrmas hlixet formlnak.
ltalban specilis helyeken alkotja a sejtfalat vagy annak egy rszt. Jellemz a srlt szvetekben trtn
megjelense. Kallz fala van a pollentmlnek, a fiatal mikrosprnak, de kallz tallhat a rostasejtek
rostameziben, vagy az elzrd plazmodezmk nyaki rszn. A kallz bizonyos mrtkben szigetel, a nagy
molekulkat nem engedi t. Szintzise a cellulzhoz hasonlan a sejtmembrnban tallhat enzimek (-1,3-glkn
szintetzok) rvn trtnik.
Keresztkt gliknok vagy hemicellulzok

A hagyomnyos hemicellulz elnevezs mindazokra az anyagokra vonatkozott, melyeket a sejtfalbl 1M-os lggal
ki tudtak vonni. Tudjuk rluk, hogy poliszacharidok, melyek hidrogn hidakkal kpesek a cellulz mikrofibrillumokra
tapadni s hlszeren sszektni azokat. Innen a keresztkt gliknok elnevezs.
Gliknoknak nevezzk az egyfle cukor alkotta lncokat, homopolimereket (melyek glikozidos ktst tartalmaznak).
Elnevezsk a monomer cukor szerint trtnik, vagyis a nevben lev -z vgzdst lecserljk -n vgzdsre.
111
A nvnyi sejtfal
Hexzok kpletei
A keresztkt gliknoknak kt f csoportjt szoktk elklnteni. Az egyik a xiloglknok (XyG) a msik a
glkuronoarabinoxilnok. Mg az els tpus a ktszikek s az egyszikek krlbell felnek (pl. Arales, Liliales,
Orchhidales) a sejtfalban megtallhat, az egyszikek msik rsze (Commelina-flk: Bromeliales, Ciperales,
Poales) a glkuronoarabinoxilnokat tartalmazza.
A xiloglknok a cellulzhoz hasonl glkz homopolimer gerinchez (1,4-D-glkn), a 6-os sznatomnl
bizonyos szmban xilz molekulk kapcsoldnak. A xilz molekulkhoz ms cukrok is kapcsoldhatnak. A
glkuronoarabinoxilnok xilz homopolimer vzhoz 1-3 ktssel arabinz, vagy glkuronsav kapcsoldik, s
mint az xiloglknok esetben, ezekhez esetleg ms cukormolekulk is kapcsoldhatnak.
Xiloglkn (XyG) felptse

Kisebb mennyisgben, de egyes fajokban, specilis sejtek falban esetleg feldsulva mannnok is elfordulnak.
Ilyenek pldul a datolya magvak falban tartalk tpanyag szerept betlt mannnok. A mannz homopolimerhez
glkz, vagy galaktz kapcsoldhat.
112
A nvnyi sejtfal
Glkuronoarabinoxiln (GAX) szerkezete
Pektin
A sejtfalbl kalcium keltorokkal (EGTA, EDTA, ammnium oxalt) kivonhat anyagokat nevezzk pektinnek.
A pektinek szintn poliszacharidok, melyek ersen hidratltak, s nagy mennyisgben galakturonsavat tartalmaznak.
A galakturonsav karboxilcsoportja miatt tltssel rendelkez molekulk, melyek kalcium pekttknt vannak jelen
a sejtfalban. Befolysoljk a sejtfal pH rtkt tltssel ltjk el a falat, befolysoljk teresztkpessgt, a
kzplemez ltal biztostjk a szomszdos sejtek sszekapcsolst s fontos szignlmolekulk forrsai, amennyiben
a sejtfalat valamilyen krosods ri. A sejtfalban tltssel rendelkez hlzatot alaktanak ki, mely a sejtfal cellulz
vzhoz s a keresztkt gliknokhoz ppgy kapcsoldik, mint a sejtfalban lev fehrjkhez, enzimekhez. A
pektinek kmiailag kt f csoportja a homopolimerek s a heteropolimerek.
Homogalakturonn
A homopolimer pektinek leggyakoribb kpviseli a homogalakturonnok (HGA) melyek 1-4 kts galakturonsav
polimerek.
Xilogalakturonn felptse
Ezekhez a lncokhoz a xilogalakturonnok esetben 1-3-as ktssel Xilz molekulk kapcsoldnak. A
ramnogalakturonn II (RG II) tpus pektinek igen vltozatos cukrokat tartalmaznak melyek a galakturonsav
homopolimerhez kapcsoldnak (ramnz, apiz, fukz stb.) gyakran sszetett oldallncknt. Az RGII pektinek
apiz molekulihoz br kapcsoldik melyen keresztl dimerizldnak. A viszonylag kis mennyisgben jelenlev
RGII pektinek rendkvli vltozatossg s egyben igen konzervatv molekulk, ami a sejtfalban betlttt specilis
szerepkre utal.
113
A nvnyi sejtfal
Ramnogalakturonn II felptse
A heteropolimer pektinek f kpviselje a ramnogalakturonn I (RG I). A molekula gerinct ramnz s galakturonsav
pti fel vltakozva, s ehhez klnbz neutrlis cukrok alkotta oldallncok (arabinn, galaktn, arabinogalaktn)
csatlakoznak. AZ arabinogalaktnok egyik tpushoz jellegzetes fehrjk (arabinogalaktn proteinek) kapcsoldnak.
Ramnogalakturonn I felptse
Fehrjk
A sejtfalban elfordul strukturlis fehrjket nagy multign csaldok kdoljk. Szintzisk az endoplazmatikus
retikulumban trtnik, glikozilcijuk pedig a Golgi-kszlkben megy vgbe. Innen vezikulris transzporttal a
sejtmembrnhoz szlltdnak s exocitzissal kerlnek a sejtfalba. A sejtfalban a poliszacharidokhoz hasonlan
hlzatot alkotnak. Csoportostsukat a bennk nagy mennyisgben elfordul jellegzetes aminosavak alapjn
tehetjk meg. Ilyen jellegzetes csoportok a hidroxiprolinban gazdag glikoproteinek (HRGP), a prolinban gazdag
fehrjk (PRP) s a glicinben gazdag fehrjk (GRP). A HRGP csoport legismertebb tagja az extenzin. Ez a
hosszks glikoprotein a sejtfal megnylsakor a vzszerkezet thidalsval korltozza a sejtfalszerkezet tlzott
fellazulst. Hasonl alakak a PRP csoport tagjai is, mg a glicinben gazdag fehrjk -redztt szerkezetet
mutatnak. k a sejtmembrn-sejtfal kapcsolat kialaktsban jtszanak fontos szerepet.
114
A nvnyi sejtfal
A sejtfal strukturlis fehrjinek negyedik nagy csoportja a mr emltett arabinogalaktn proteinek vagy helyesebben
proteogliknok, mivel a sznhidrtok arnya a molekulban tbb mint 95%.
A sejtfalban a strukturlis fehrjken kvl sokfle enzimet tallunk melyek fknt a sejtfal ptsben,
megnylsban, tszervezsben, lebontsban vesznek rszt. Ilyenek a sejtfal H-hd ktseit fellazt expanzin,
a transzgikozilzok, pektinzok, a sejtfal asszocilt kinzok (WAK), de tallunk a falban ms funkcij fehrjket
is (lektinek, szignlfehrjk).
Inkrusztl s adkrusztl anyagok

A msodlagos sejtfalba s a sejtfal felletre klnbz anyagok rakdnak be ezek fknt szilrdt s vd
funkcival rendelkeznek.
Lignin
A cellulz utn a legnagyobb mennyisgben termelt szerves anyag. A zrvaterm nvnyek akr 30%-t is kiteheti.
A sejtfalak fsodst a lignin okozza. Szintzise a sejtfalban a fenilpropanoid anyagcsere aroms termkeibl
(kumaril, koniferil s szinapil alkoholok) trtnik. A lignin kialakulsainak rszleteirl keveset tudunk, de a korbbi
elmletekkel szemben, melyek az alkotelemek autopolimerizcijval trtn kpzdst ttelezte fel, ma egyre
inkbb az enzimek segtsgvel trtn szintzis tnik valsznnek. Immunhisztokmiai vizsglatok alapjn
felttelezik, hogy a lignin polimerizciban fontos szerepk van a prolinban gazdag fehrjknek.
Para vagy szuberin

Szerkezete s kpzdse szinn alig ismert. A szuberin kt domnbl egy poliaroms rszbl s az ahhoz utlag
hozzkapcsold hossz (>20) sznlnc lipidek alkotta alifs rszbl ll. Feladata a vzszigetels s az
antimikrobilis hats. Srlt szvetekben nagy mennyisgben termeldik, de hajtseredet fldbeni szervek
felsznn, a msodlagos s harmadlagos brszvet kialakulsa sorn is, s pldul az endodermiszben az egyik f
komponense a sejtfalnak.
Kutin
Hossz sznlnc zsrsavak s alkoholok szterei. Az szterkpzds a zsrsavlncok karboxilcsoportja s egy
msik zsrsav kzbens hidroxilcsoportja kztt is vgbemegy, gy egy hlszer szerkezet alakul ki. A kutin
monomerek az endoplazmatikus retikulumban kpzdnek s innen szlltdnak a sejtmembrnhoz. A nvnyek
felsznnek vdrtegt, a kutikult alkotja. Hidrofb tulajdonsga miatt vd a kiszradstl illetve gtolja a vz
bejutst is. A nvnyek szrazfldre val kilpsnek egyik fontos tnyezje volt a kutikula kialakulsa, amely
mr a mohk egy rsznl megfigyelhet.
Kutin-kivls brszveti sejt kls faln (TEM keresztmetszet).
Viasz
Az epidermisz felsznn gyakran viaszrteg alakul ki, melynek alakja szerkezete fajonknt eltr. Br a viaszok
szintzise is az endoplazmatikus retikulumban trtnik, 16, 18 sznatomszm zsrsavakbl, sszettelk bonyolult
s alig tudunk valamit szintziskrl s szlltsukrl. Mivel vzben teljesen oldhatatlanok, felttelezhetn a kutin
anyagaival egytt lipidcseppekben, vagy a vezikulk membrnjba plve jutnak el a sejtmembrnhoz, ahol azzal
sszeolvadva juttatjk ki a viasz elanyagait. A sejtfalban a felttelezsek szerint lipid transzfer proteinek szlltjk
ket. A viasz szerepet jtszik a rovarok tvoltartsban, vagy ppen csalogatsban, a prologtats cskkentsben,
115
A nvnyi sejtfal
de fnyvisszaver kpessge is jelents. A virgszirmok hamvas, brsonyos felszne, tompa csillogsa is a

viaszrtegnek ksznhet.
Sporopollenin
A pollenszemek illetve sprk kls sejtfalrtegnek, az exinnek az anyaga. A legellenllbb bioszintetikus anyag,
melyet semmifle organizmus nem kpes lebontani. Kmiai ellenlkpessge miatt sszettelnek kidertse sem
egyszer feladat. gy tnik, hogy szintzisnek oldalrl, vagyis Arabidopsis pollenfal mutnsok vizsglatval a
rejtly taln megolddik. A sporopollenint nem maguk a pollenszemek, hanem az ket krlvev taptum sejtek
termelik. A kiindulsi anyag a kzepes s hossz zsrsavak acetil-CoA-val szterestett formi. A zsrsavszterek
hidroxilezett formi fenilpropanoidokkal alkotott vegyletei vlasztdnak ki ezekbl a sejtekbl az pl
pollenszemekre, ahol lipid transzfer proteinek s glicin gazdag proteinek segtsgvel pl fel bellk a pollenfal
exinje.
A sejtfal szerkezete
A sejtfal hemicellulz s pektin tartalma alapjn ktfle sejtfaltpust szoktak elklnteni. Az I. tpus sejtfalban
Xiloglknok alkotjk a hemicellulzt s magas pektintartalom jellemzi ket. Ez a ktszikek s az egyszikek
egy, mr emltett rszre jellemz. A XyG lncok H-hd ktsekkel kapcsoldnak a cellulz mikrofibrillumokhoz
s egymshoz is, mind parallel, mind antiparallel irnyban. Elg hosszak ahhoz, hogy tveljk a mikrofibrillumok
kzti teret s keresztkssk azokat. A kersztktsben azonban a pektin anyagok ppolyan fontosak. Metilszterek
formjban szlltdnak a helykre, ahol a pektin metilszterz enzim a metilcsoportot lehastva biztostja a kalcium
ionok kapcsoldst. A kalcium ionok stabilizljk a szomszdos lncokat. A pektin hlzat megszabja a sejtfal
porozitst is. Az I tpus sejtfal struktrfehrjkben is gazdag, melyek szintn hlzatot alkotnak.
A II. tpus sejtfalra a glkuronoarabinoxilnok, s a minimlis pektintartalom jellemz. Az egyszik kommelidaflk
jellemz sejtfalsszettele ez. Mivel a xilz polimerhez kapcsold glkuronsav s arabinz meggtolja a lncok
H-hidakkal trtn sszekapcsoldst, ahol ilyen oldalcsoportok vannak az sszekapcsold lncok kinylnak,
sztgaznak. A sejtfal tltst itt nem a pektinekben lev galakturonsav, hanem a GAX glkuronsav tartalma
biztostja. A sejtfal struktrfehrje tartalma szintn alacsony, viszont jellemz a fenoloid szrmazkok jelenlte.
A sejtfal megnylsa
Az elsdleges sejtfal mg megnylsra kpes. Ehhez a cellulz mikrofibribrillumoknak el kell mozdulni egymshoz
kpest. Az elmozduls csak a szlak tvolodsval valsthat meg, vagyis a krkrsen, vagy spirlisan elrendezett
cellulzszlakra merlegesen nylhat meg a sejt. A megnyls mechanizmusra tbbfle elkpzels is szletett.
Az egyik klasszikusnak tekinthet elmlet szerint a sejtek a membrnban lev protonpumpk rvn hidrogn
ionokat juttatnak a sejtfalba, amely a savas hidrolz enzimek aktivlsval, s a cskkent pH rvn fellaztja a
sejtfal szerkezett, megbontva a cellulz mikrofibrillumok s a keresztkt gliknok, pektinek kztti H-hd
kapcsolatokat. Az eredeti elkpzels azonban nem ad magyarzatot arra, hogy hogyan stabilizldik jra a sejtfal,
mirt nem feszti szt a fellazult szerkezetet a sejtek turgornyomsa. A savas hidrolz enzimek azonostsa sem
sikerlt. Az jabb elmletek sokkal specifikusabb enzimmkdst tteleznek fel. Az egyik enzim a xiloglkn
transzglikozilz, mint a neve is mutatja kpes a XyG lncot elvgni, s egy msik lnccal egyesteni, gy a
mikrofibrillumok kztti kipnyvzst laztani. Az expanzin a cellulz s a gliknok kztti H-hidak felbontst
vgzi. Hogy a fellaztott poliszacharid vz ne essen szt, azt a sejtfal vzfehrji biztostjk, mint pldul az
extenzin, mely hlzatot alkotva korltozza a mikrofibrillumok tlzott eltvolodst a turgornyoms feszt hatsra.
A PRP-k is rszt vesznek a falszerkezet stabilizlsban. A gymlcsrs sorn a kzplemezek feloldsban, a
terms puhtsban ms enzimek, mint a pektin-metil-szterzok, s a poligalakturonzok jtszanak szerepet.
A pollenfal szerkezete, kialakulsa

A nvnyek spri illetve a pollenszemek igen ellenll sejtfallal rendelkeznek. A zrvatermk pollenszemnek
sejtfalt pldnak tekintve vizsgljuk meg a falszerkezetet illetve annak kialakulst. A kifejlett pollenszem fala
kt rtegbl ll, a kls sporopollenin alap exinbl, s a pektocellulz alap bels intinbl. Az exine rteget
tovbb oszthatjuk egy alapi nexine (vagy endexine) s egy kls sexine (vagy ektexine) rtegre. A sexine rteg
sajtos mintzattal rendelkezik, oszlopok, bakulumok, s esetlegesen azokra rtegezd tet, tectum alkotja. A
116
A nvnyi sejtfal
legkls rteg a triphin, mely a krnyez taptum sejtek maradvnya alkotta bevonat, mely fehrjket, lipideket
is tartalmaz, s fontos szerepe van a pollen bibe klcsnhatsban.
A pollenfal rtegei.
A pollenszem a mikrosprbl alakul ki annak osztdsval, de sejtfaluk gyakorlatilag folyamatosan alakul t. A
meiozissal ltrejv mikrosprkat egy kallz sejtfal veszi krl melyen nincsenek plazmodezmk. A kallz sejtfal
al, a mikrosprk egy cellulz alap primexine rteget szintetizlnak, majd a mikrosprkat krlvev taptum
sejtek megkezdik a kallz fal lebontst. A megmarad primexine rteg templtul szolgl a kialakul exinnek.
Az exine rteg elssorban sporopolleninbl pl fel, aminek ptkveit a krnyez taptum sejtek szintetizlnak,
s juttatnak exocitzissal a pollenszem felsznre, ahol egyelre ismeretlen mdon pl fel az exine mintzata. Az
intint a leboml primexine helyre, az exine al, maga a pollenszem szintetizlja. A pollenszem teht centrifuglis
vastagodssal pl exine, s hagyomnyos centripetlis nvekedssel kialakul intine rtegekkel rendelkezik.
Liliom-faj pollenjnek SEM fotja (4000x nagyts).
Apoplasztikus s szimplasztikus szllts

A nvnyekben vgbemen szlltsi folyamatok kt f csoportra oszthatk aszerint, hogy a sejtmembrn ltal
hatrolt tren bell (szimplaszt) vagy azon kvl (apoplaszt) trtnik-e. A szimplasztikus szllts a sejteket
sszekt plazmodezmkon keresztl valsul meg. Az apoplasztikus szllts gyakorlatilag passzv anyagmozgs
a koncentrci-, s nyomsviszonyoknak megfelelen. Az apoplasztikus tr a sejtmembrnon kvli terlet, vagyis
a sejtfal s a sejtkztti tr. Apoplasztikus transzporttal mozognak pldul a gykr krgi rszben a talajoldatokbl
bejutott anyagok, de apoplasztikus transzport a xilm elemek ltali szllts is. A szimplasztikus transzport mindig
rvidtv, sejtrl sejtre trtnik. A szimplasztikus transzport s az apoplasztikus transzport sszekapcsoldik, de
ehhez a szlltott anyagnak t kell jutni a sejtmembrnon. Ez a lps kontrolllt folyamat, a legtbb anyag esetben
a sejtmembrn csatornin keresztl trtnik.
117
A nvnyi sejtfal
Az endodermisz szerepe a sejt apoplasztikusszimplasztikus szlltsnak tvltsban

A nvnyek gykernek felszvsi znjban a kregrsz s a szlltszveteket tartalmaz kzponti henger kztt
egy parsodott sejtfal sejtrteg az endodermisz tallhat. Ennek a rtegnek a sugrirny falain egy hidrofb,
vszer parsods alakul ki, mely meggtolja a szimplasztikus trben raml anyagok tovbbjutst a kzponti
henger irnyba s fordtva. A sejtkztti trben lev ionok, cukrok stb. csak a sejtfal megkerlsvel juthatnak
t az endodermisz tloldalra. Ehhez a parsodott vi rgihoz a sejtmembrn is ersen ki van horgonyozva, gy
a sejtfal sejtmembrn kztt sem trtnhet anyagramls. Az egyetlen t a membrnon keresztli transzport, amit
a sejt felgyel. Ezzel a mdszerrel az apoplasztikus anyagtranszportot a nvny kpes szimplasztikus transzportra
tvltani.
A kzponti hengert krbelel endodermisz parsodott harntfalai.
Plazmodezmk
A sejtosztds citokinzis fzisban, a kzplemez kialakulsa sorn a vezikulk fzija nem teljes. A kt utdsejt
kztt citoplazma hidak maradnak, melyeken a sejtmembrn tfordul a szomszdos sejt membrnjba, s ezeken
a sejtkapcsolatokon keresztl az endoplazmatikus retikulum is tnylik. Ezek a citoplazma hidak plazmodezmkk
alakulnak. A plazmodezmk belsejben az tnyl endoplazmatikus retikulum egy szablyos szerkezet csvet
alkot, ez a dezmotubulus. A plazmamebrn alkotta csatorna s a benne kzpen fut dezmotubulus felsznn is
elektrondenz bevonat figyelhet meg, mely fehrjkbl ll. A dezmotubulus kzepn szintn egy ersebben festd
rdszer kplet figyelhet meg az elektronmikroszkpos felvteleken. A plazmodezmk alakja lehet egyenes,
megtrt, elgaz, s bls. Ez utbbi tpus esetben a sejtfalon tnyl plazmodezma kzptjon kitgul, kiblsdik,
s a dezmotubulus s a citoplazmamembrn eltvolodik egymstl. A kiblsdsekben a membrn felsznn lev
citoplazmakpeny (cytoplasmic sleeve) fehrjerszecskit s a dezmotubulust kllszer nylvnyok ktik ssze.
A tgulatokban, vagy az elgaz plazmodezmk elgazsi pontjain a dezmotubulusok merev szerkezete fellazulhat,
s a szokvnyos endoplazmatikus retikulum kpet mutatja.
118
A nvnyi sejtfal
Plazmodezma szerkezete.
A plazmodezmkon keresztl trtn szllts kt tvonalon mehet vgbe. A dezmotubulus s a citoplazmamembrn
kztti vkony citoplazmarszben, vagy a dezmotubuluson keresztl. Br elmletileg a membrnramls is egy
lehetsges anyagtranszport, a plazmamembrn lipidjeinek mozgst a plazmodezmn keresztl nem sikerlt
kimutatni. A dezmotubulus igen szk rege elektronmikroszkpban0 ugyan tmrnek ltszik, de ez fknt a
membrn lipdjeinek s fehrjinek a polros, membrnbl kilg rszeit tartalmazza. Endoplazmatikus retikulum
lokalizlt lipidek ramlst a dezmotubuluson keresztl sikerlt kimutatni.
A dezmotubulus krli teret a dezmotubulushoz s a citoplazmamembrnhoz asszocildott nagymret
fehrjepartikulumok szktik be. A klnbz mret, fluoreszcensen jellt rszecskk vizsglata igazolta az
elektronmikroszkpos mrseket, miszerint a rs krlbell 2-4 nm nagysg partikulumok tjutst teszi lehetv.
Ennek megfelelen a plazmodezmk molekulaszrknt mkdnek. Bizonyos esetekben a sejtek teljesen elzrjk
ezt a kis rst is, kallzt szintetizlva a plazmodezmk nyaki rsznl a sejtfalra s beszktve ezzel a plazmodezmkat.
A plazmodezmk zrsa kallz szintzissel.

Srls hatsra, vagy hirtelen turgorvltozsra a plazmodezmk zrdnak. Ebben a felszabadul kalcium ionoknak
is szerepe van, mivel a kallz szintetz enzim megemelkedett kalciumion koncentrcira aktivizldik. A
turgorllapot helyrellsa utn a plazmodezmk jra megnylnak. Mivel aktin polimerizcit gtl szerrel (citokalazin
D) a plazmodezmk tjrhatsga jelentsen megn, felttelezik, hogy plazmodezma-asszocilt aktin filamentumok
is rszt vesznek a plazmodezmlis transzport szablyozsban, a plazmodezma nyaki rsznek szktse rvn.
Klnbz vegyszerek vagy vrusfertzs hatsra a plazmodezmk teresztkpessge nagymrtkben megnhet,
de a 2-4 nm-es mrethatr (SEL-size exclusion limit), ami kb. 800 D molekulatmegnek felel meg bizonyos sejtek
esetben eleve egy nagysgrenddel is nagyobb lehet.
Megfigyeltk bizonyos fehrjk- pldul a KNOTTED1 transzkripcis faktor-, tjutst a plazmodezmkon annak
ellenre, hogy mretk jval nagyobb volt, mint az adott plazmodezmra jellemz mrethatr. Felttelezhet, hogy
bizonyos fehrjk s RNS molekulk kpesek megnvelni a plazmodezmk teresztkpessgt akr 40 kD-ra is.
Ezt hasznljk ki bizonyos vrusok is, melyek olyan fehrjkkel rendelkeznek (MP, moving protein) amely nagyon
hasonlt pl. a fent emltett sajt fehrjre. Hogy a sejtben milyen egyb molekulk segtik a plazmodezmlis
transzportfolyamatokat, egyelre mg csak hipotzis szinten van, de a nagymret molekulk chaperonokkal, vagy
ahhoz hasonl fehrjkkel val kiegyenestst a legtbb modell felttelezi.
119
A nvnyi sejtfal
A plazmodezmkon keresztl trtn szlltst leginkbb fluoreszcens prbkkal lehet vizsglni. A fluoreszcensen
jellt klnbz mret dextrn molekulk jl hasznlhatak a plazmodezma SEL/MEL (mass exclusion limit)
rtknek mrsre, illetve az egymssal aktv plazmodezmlis kapcsolatban lev sejtek kimutatsra.
Plazmodezmk msodlagos keletkezse.

Plazmodezmk nem csak a sejtosztdskor alakulhatnak ki, hanem msodlagosan olyan sejtek kztt is, ahol nem
voltak plazmodezmk. Klnsen nyilvnval ez egymsra oltott nvnyi szvetek esetbe. Az els jele az j
plazmodezmk kialakulsnak az az, hogy a sejtfal mindkt oldaln az endoplazmatikus retikulum a sejtmembrnhoz
kapcsoldik. Ezutn mindkt oldalon megkezddik a sejtfal vkonytsa, vgl a membrnok, s az endoplazmatikus
retikulum is fuzionl. A plazmodezma kialakulst kveten a sejtfalak visszaplnek.
A plazmodezmk meg is szntethetk a sejtek kztt. A sztma komplexek mellksejtjei s a tbbi epidermiszsejt
kztt az eredeti plazmodezmlis kapcsolat megszakad. Hasonl folyamatokat lehet megfigyelni a mikrospra
anyasejtek meizisra val felkszlse sorn is. rdemes megjegyezni, hogy ezek kztt a sejtek kztt a
citoplazmlis kapcsolat nem a klasszikus plazmodezma struktrt jelenti, hanem nagy fellet citoplazma
kapcsolatokat a sejtek kztt, mely gyakorlatilag nem kpeznek akadlyt mg a riboszmk szmra sem.
Sejtfal-sejtmembrn kapcsolat
A nvnyekben nem talltak integrinhez, vagy cadherinhez hasonl molekulkat. Az extracellulris mtrix, a sejtfal
s a membrnok, vagy az azon belli citoszkeleton kapcsolata ms molekulkon alapul. A nvnyi sejtek nehezen
megbonthat kapcsolata a sejtfallal nem lenne clszer, hiszen a nvnyi sejtek a turgorvltozst, a plazmolzist
s deplazmolzist t kell, hogy vszeljk. Ez nyilvn rugalmasabb sejtmembrn sejtfal asszocicikat ignyel.
A plazmolizlt nvnyi sejtek membrnjai egy ideig - mikroszkppal is jl lthat mdon - kapcsolatban maradnak
a sejtfallal az n. Hecht-fle fonalakon keresztl. Ezek nem a plazmodezmk okozta kihorgonyzdsai a sejteknek,
amit az is egyrtelmen bizonyt, hogy olyan sejtfalakon is megjelennek, mint az epidermiszsejtek kls fala, ahol
plazmodezmk nem lehetnek. A sejtfal sejtmembrn asszocicikban tbbfle fehrje, glikoprotein jtszik szerepet.
Az egyik legfontosabb csoport ezek kzl a sejtfal asszocilt kinzok (WAK). Ezek transzmebrn fehrjk,
melyeknek a sejtmebrnbl kifel ll, extracellulris rszk (mely igen hasonl az llati epidermlis nvekedsi
faktorhoz) foszforillt llapotban ers pektinkt tulajdonsgot mutat. A citoplazmba belg rszk proteinkinz
aktivitssal rendelkezik.
Felmerl annak a lehetsge is, hogy ezek a kinzok pektin receptorknt is mkdhetnek. A WAK-ok szintn ers
ktdst mutatnak a sejtfal glicinben gazdag glikoproteinjeihez, (GRP) melyek egybknt szintn ersen
asszocildnak a pektinekhez. Egy msik, sejtmembrnsejtfal kapcsoldsban fontos csoport az AGP
proteogliknok. Ezek nem transzmembrn fehrjk, de glikozil-foszfatidilinozitol (GPI) kihorgonyzsuk rvn a
membrnban, a foszfolipz C ltali hasts rvn szignlvezetsi tvonal rszei lehetnek. Egy igen fontos
sejtmembrn - sejtfal asszocicit jelent a membrnban tallhat sejtfal polimereket gyrt enzimek nagy szma.
Elssorban a cellulz szintzist vgz rozetta komplexeket kell megemlteni, melyek a sejt kortiklis mikrotubulris
hlzatval is kapcsolatban vannak, de hasonlak ehhez a kallz szintetz enzimek is. Sok jellt van mg a listn,
melyekrl a kutatsok mg nem egyrtelmen bizonytottk a sejfal- sejtmebrn asszociciban jtszott szerepket.
A sejtfal szerepe a sejt vdelmben

A sejtfal a nvnyi sejt vdelmt tbbfle mdon is elltja. Mechanikai vdelmet nyjt a sejt szmra, de e mellet
igen fontos szignlok forrsa is, amennyiben a sejtet tmads ri. Egy leegyszerstett pldn is jl nyomon
kvethet a sejtfal, mint els vdvonal szerepe a krokozk elleni kzdelemben. Mivel a nvny nem tud
elmeneklni a tmad ell, csupn kmiai, biolgiai mdszerekkel tud vdekezni. Amennyiben egy gomba
megtmadja a nvnyi sejtet, megindul a lthatatlan kzdelem a krokoz, s a nvnyi sejt kztt. A gomba a
sejtfallal tallkozva emszt enzimeket bocsjt ki, mint pldul endo-poligalakturonzokat (EPG), melyek a sejtfal
pektin llomnyt kezdik el bontani. A pektinbonts eredmnyekppen keletkez oligogalakturonnok fontos
informcit szolgltatnak mind a gomba, mind a megtmadott sejt szmra. A gomba ebbl rzkeli, hogy j
helyen jr, emszt enzimei clba talltak. A nvnyi sejt is rzkeli az oligogalakturonnokat, ami riadjelknt
mkdve, tudatja a sejttel, hogy gombatmads rte. A sejtfelszni receptorokon keresztl beindul egy szignlvezetsi
t, ami a nvnyt j anyagok szintzisre serkenti. A nvny egyrszt a gomba galakturonz enzimt blokkol
120
A nvnyi sejtfal
poligalakturonidz inhibitor fehrjt (PGIP) termel, msrszt vlaszcsapsknt megtmadja a gombt fitoalexinek,
kitinzok s -1,3-endoglkanzok segtsgvel. A gomba sejtfalnak emsztse rvn keletkezett sejtfal
oligoglknok visszajelzst adnak a gombnak, hogy ellentmads trtnt, ezrt glkanz inhibitor fehrjket
termel, hogy blokkolja a nvny ellentmadst. A harc vmillik ta folyik, az ellensgek jabb s jabb trkkket
vetnek be.
Termszetesen a mechanikai vdelem sem becslend le. Nagyon sok sejt, vastagodott falval komoly ellenllst
tud kifejteni a legklnbzbb behatsok ellen. Ez legtbbszr nem is a vastagodott fal sejt vdelmt szolglja,
hanem ezek a sejtek vnak meg ms nvnyi rszeket. Ilyenek pl. a krte ksejtjei, melyek a magokat vdik, de
a csonthjasok bels termsfala is ers vdelme a magoknak.
Krdsek:
1. Milyen feladatokat lt el a nvnyi sejtfal?
2. Hogyan csoportosthatjuk a sejtfal alkotelemeit?
3. Mi a cellulz kmiai sszettele?
4. Hogyan szintetizldik a cellulz?
5. Mibl, s hogyan alakul ki a kzplemez?
6. Milyen szerepet tltenek be a pektinek s hemicellulzok a sejtfal szerkezetben?
7. Mi az apoplaszt s a szimplaszt?
8. Mi a klnbsg az elsdleges, s msodlagos sejtfal kztt?
9. Hogyan alakulnak ki a plazmodezmk?
10. Mire j az n. hidrofb sejtfal-sejtmembrn komplex?
11. Milyen fehrjk, glikoproteinek vesznek rszt a sejtfal-sejtmembrn kapcsolat kialaktsban?
12. Mi a sejtfal szerepe a patognek elleni vdekezsben?
13. Mik azok az inkrusztl anyagok?
14. Hogyan pl fel a pollenszemek fala?
121
18. fejezet - A sejtciklus s a

sejtosztds
A sejtciklus
A ma ismert letformk legkisebb nll mkdsi s szervezdsi egysge a sejt. Az egysejteknl s a
soksejtekben egyarnt rvnyes, hogy j sejt(ek) csak korbban ltez sejtbl jhet(nek) ltre, a sejt osztdsa
sorn. Az egysejtek esetben a sejt osztdsa j egyedek ltrejttt eredmnyezi. A soksejt szervezetekben az
egyedfejldsk sorn a megfelel sejtszm, a szvetek s szervek a megtermkenytett petesejt (zigta) s
utdsejtjei meghatrozott szm osztdsval alkulnak ki. A sejtek reprodukcija ltalban a sejt tmegnek,
anyagainak megkettzdsvel, kt genetikailag azonos utdsejt kialakulsval jr, szigor rendben lezajl
esemnyek sorn valsul meg. A sejt anyagainak megkettzdst, majd osztds kvetkeztben kt j sejt ltrejttt
eredmnyez folyamat a sejtciklus. Hagyomnyos definici szerint a sejtciklus a mitzis kezdettl a kvetkez
mitzisig tart.
A sejtciklust, annak meghatroz trtnsei alapjn, fzisokra osztjuk. A hagyomnyos fnymikroszkpos
vizsglatokkal a ciklust kt szakaszra lehet osztani, a mag s a sejt kett osztdsra, valamint az osztdsok kztt
eltelt idszakra. A sejtmag osztdsa (mitzis) s a sejt egsznek (citoplazmjnak) osztdsa (citokinzis)
egyttesen alkotjk az M fzist. (Gyakran nevezik ezt a kt folyamatot egyttesen mitzisnak.) Kt egymst kvet
M fzist elvlaszt szakasz az interfzis. Korszer vizsgl mdszerekkel azonosthat, hogy az interfzis is jl
elklnthet szakaszokbl ll: a tipikus sejtciklusban G1, S s G2 fzisokra tagolhat.
Az M fzisban megtrtnik a kromoszmk sztvlsa s a sejt kettosztdsa. Interfzisban a sejt nvekszik,
tmege megkettzdik, majd a mitzisban felezdik. A fehrjk, ribonukleinsavak szintzise, a sejtorganellumok
szmnak nveledse az interfzisban folyamatos, de megkettzdsk, majd felezdsk a mitzis sorn nem
szigoran pontos, ezrt a kt utdsejt tmege eltr. E klnbsgek ltalban mr az j ciklus elejn kiegyenltdnek:
az osztdsbl kisebb tmeggel kilp sejtek hosszabb idt tltenek a G1 fzisban, mint a nagyobbak, ezalatt
tmeghinyukat ptoljk. A DNS szintzise az interfzis sorn nem folyamatos, kizrlag az S fzisban zajlik. A
duplikci pontos, minden DNS-molekulrl egy msolat kszl, tovbb a felezds a mitzis sorn szigoran
egyenl, mindkt utdsejt pontosan egyforma kromoszmakszletet rkl. Hasonlan szigor szablyozs
figyelhet meg a centrilumok szmban s sztosztsban. Ezek szma az interfzisban, ltalban az S fzis sorn,
duplzdik, majd osztdskor fele-fele arnyban kerlnek a kt utdsejtbe.
A sejtciklus ltalnostott smja.

A G1 fzisban minden kromoszma egy DNS-molekulbl ll (2C; egy kromatids llapot), az S fzisbl kilp
sejtek kromoszmi mr 2-2 DNS-molekult tartalmaznak (4C; kt kromatids llapot).
Az egyes fzisok hossza a sejttpustl s a kls krlmnyektl (pl. oxign- s tpanyagelltottsg) fgg. Az
lesztsejtek kedvez krlmnyek kztt 1,52 rnknt osztdnak. Emlssejtek ciklusideje szvettenyszetben,
122
A sejtciklus s a sejtosztds
optimlis krlmnyek kztt kb. 2024 ra. Az M fzis kb. 1 ra, az S fzis kb. 8 ra, a G2 kb. 4 ra. A G1 fzis
a leghosszabb s ltalban a legvltozbb is.
A sejtciklus trtnsei szigoran meghatrozott rendben kvetik egymst. Ellenrz pontok molekulris
mechanizmusok mkdnek a ciklus meghatrozott pontjain, melyek a tovbblpst csak akkor engedik, ha a
fzisra jellemz rszfolyamatokat a sejt vgrehajtotta. s nem mutatkozik krosods a genetikai rkt kszletben.
A hrom f ellenrz pont: a G1/S fzis hatrn, a G2 fzis vgn s az M fzisban mkdik.v
A sejt akkor tud a G1-bl az S fzisba lpni, ha a G1 fzis sorn n. nvekedsi faktorokhoz (ltalnosabban n.
mitognekhez) jutott s tmege megfelel mretre nvekedett, DNS-llomnya p, a replikcihoz szksges
appartus s anyagok (pl. polimerzok, nukleotidok stb.) rendelkezsre llnak. Mindezek ellenrzsre a G1 fzis
vgn kerl sor (G1 ellenrzsi pont). Jellemz, ha ezen a ponton tllendl a sejt, akkor normlis esetben vgig is
halad a cikluson. (Ezr is nevezik a G1 ellenrzsi pontot start pontnak vagy restrikcis pontnak.) A G2 ellenrzsi
pont nem engedi mitzisba lpni a sejtet akkor, ha DNS-molekuli krosodottak vagy hinyosan replikldtak az
S fzis sorn. Az M ellenrzsi pontok a mitzis metafzisban mkdnek: pldul a sejt addig nem lp t az
anafzisba, amg az sszes kromoszma r nem ktdik a szegregcit biztost magorsra (mitotikus kszlkre)
s el nem helyezkedik az ekvatorilis skban.
A sejtciklus folyamatainak sszehangolst molekulris mechanizmusok biztostjk. Ltezskre a sejthibridizcis
s magtltetsi ksrletek szolgltattak bizonytkot. A fzisok kztti tmenetet kinzokbl s
szablyozfehrjkbl ll komplexek mkdse irnytja. Alapvet elemei a ciklinfgg protein kinzok (cyclin
dependens kinase Cdk), valamint a ciklinek. A sejtben tbbfle Cdk s ciklin is mkdik (mai ismereteink
szerint tbb mint tz Cdk s tbb mint 30 ciklin), specifikus kombinciik ms s ms fzistmeneteket szablyoznak.
A G1 esemnyeit a Cdk4/ciklin-D (vagy a Cdk6/ciklin-D) komplex, a G1/S tmenetet a Cdk2/ciklin-E komplex
aktivitsa szablyozza. A Cdk2/ciklin-A komplex az S fzisban aktv, a Cdk1/ciklin-A az S-G2 tmenetet s a G2
fzis trtnseit irnytja. A Cdk1/ciklin-B komplex a G2-bl a mitzisba lendti a sejtet.
A kapcsolknt funkcionl, periodikusan vltoz ciklin/kinz rendszer mkdst szmos bels s kls tnyez
modullja. A Cdk-k aktivitst a ciklinek mellett mg tbbfle inhibitor fehrje is befolysolja, s a Cdk-k maguk
is ms kinzok s foszfatzok szubsztrtjai: aktivitsuk fgg foszforilltsguk szintjtl is. A Cdk molekulk
(apoenzimek) aktivitsukat csak a ciklinekkel (koenzimek) kpzett komplexben (holoenzim) kpesek kifejteni. A
Cdk a komplex kialakulsakor foszforilldik, egy aktivl (Cdk aktivl kinzok hatsra) s kt gtl (Cdk gtl
kinzok hatsra) foszforilcis helyen. A komplex ltrejttk kveten a gtl foszforilcis helyekrl foszfatz
enzimek tvoltjk el a foszft csoportokat, gy az enzimkomplex aktivldik. A Cdk molekulk koncentrcija
tbb-kevsb lland a ciklus sorn. A ciklus egyes szakaszaira jellemz ciklinek koncentrcija ciklusrl ciklusra
periodikusan vltozik: jonnan szintetizldnak, majd ubikvitinldnak s a proteaszma rendszerben degradldnak.
A sejtciklus szablyozsa.
123
Megfelel tpanyag-elltottsg mellett s az n. nvekedsi faktorok hatsra a G1 fzisban aktivldik a sejtekben

a receptor tirozin-kinz/Ras/MAP kinz jeltviteli t. (Ma mr tbb mint 50 nvekedsi faktor ismert. Parakrin
mdon hat, a clsejt plazmamembrnjban tallhatk receptorokhoz igen nagy affinitssal ktd jelmolekulk.)
A jeltviteli tvonalon aktivldnak s felszaporodnak azon transzkripcis faktorok, melyek a sejtciklus elindtshoz
szksges gnek expresszijt irnytjk. A ciklin-D gn fokozd aktivitsa kvetkeztben megn a ciklin-D
koncentrcija a sejtben s aktivldik a Cdk4/ciklin-D komplex. E komplex egyik szubsztrtja az Rb-fehrje (a
retinoblasztoma-gn termke, a gn delcija retinoblasztomt, egy daganatos elvltozst okozhat). Az Rb szmos
foszforilcis hellyel rendelkezik, s defoszforillt llapotban az E2F transzkripcis faktort tartja kttt llapotban.
A Cdk4 fokozatosan foszforillja az Rb fehrjt, mely hiperfoszforillt llapotba kerl. Ekkor az E2F faktor
felszabadul, s a magban megindtja a G1/S tmenethez s a DNS replikcijhoz szksges gnek tbbek kztt
a ciklin-E gnjnek trst: a sejt tlp a G1-bl az S fzisba. Nvekedsi faktorok hinyban ez a szablyozs
nem mkdik, a nvekeds s a lelassul vagy lell, a ciklin-D koncentrci cskken, a G1 fzis elhzdik, st a
sejt kilphet a ciklusbl s G0 fzisba kerlhet.
Megakad a sejt a G1/S hatron akkor is, ha DNS-llomnyt krosods (pl. szltrs) rte. A DNS megfelel
szerkezett, psgt a p53 fehrje ellenrzi. A p53 folyamatosan termeldik, normlis krlmnyek kztt gyorsan
degradldik is, koncentrcija ezrt alacsony. Hibs DNS szakaszon tetramerizldik s stabilizldik,
koncentrcija hirtelen emelkedik. A p53 egyben transzkripcis faktor, pldul a p21 kinzgtl fehrje szintzist
indtja be. A p21 a Cdk4/ciklin-D komplexhez ktdve azt inaktv llapotban tartja, a sejt nem lp az S fzisba,
ez lehetsget biztost a DNS hiba kijavtsra. Ha a DNS kijavtsa sikertelen, a p53 apoptotikus fehrjk kpzdst
is kpes stimullni, melyek sejtpusztulst (apotzist) okoznak. Ezrt a p53 a genom integritsnak egyik fontos
re, megakadlyozza, hogy a sejt krosodott, hibs DNS-molekulit repliklja s utdaiba rktse.
A valsgban mg szmos ms tnyez befolysolja a G1/S fzistmenetet, de a szablyozs lnyegt a fenti kt
mechanizmus is jl megvilgtja: a kls s bels hatsok gy szablyozzk a fzistmeneteket, hogy klnbz
ttteleken keresztl gtl vagy aktivl jeleket generlnak, melyek clpontja valamelyik Cdk. Ez integrlja a
pozitv s negatv jeleket, s attl fggen, hogy melyik van tlslyban, engedi tovbb vagy lltja meg a sejtet a
ciklus valamelyik fzisban.
Az S fzisban a sejt egyszer s csakis egy msolatot kszt DNS-molekulirl. A szablyozmechanizmus, mely
minden DNS-rl csak egy kpia ksztst engedlyezi, egy fehrjekomplex, a jogostfaktor (licensing factor)
mkdsn alapul. Ez a komplex a mitzis vgn a DNS-molekulk azon szakaszaira ktdik, ahol majd a kvetkez
S fzisban megindul a replikci. A msolst vgz DNS-polimerz csak a jogostfaktor ltal kijellt helyekrl
tudja megindtani a replikcit, de ehhez a G1/S fzis hatrn aktivld Cdk-k (pl. Cdk2-ciklinE) kzremkdse
is szksges. Hatsukra a jogost faktor egyes fehrji foszforilldnak, majd levlnak a DNS-rl, utat nyitva a
DNS-polimerznak, mely viszont a jogost faktor hinyban ismtelten mr nem tud a replikcis ered pontokhoz
ktdni, teht nem indulhat meg ugyanazon szakasz ismtelt lemsolsa.
A G2/M tmenetet kivlt MPF nev faktor (maturation promoting factor, rst/mitzist elsegt faktor) a
Cdk1/ciklin-B komplex, mely szmos fehrjt, gy a hisztonokat, a magvz, a magvacska, a magors fehrjit
kpes foszforillni. A ciklin-B az interfzis elejn hinyzik a sejtbl, majd fokozatosan felhalmozdik s a G2/M
fzis hatrn elri azt a kritikus koncentrcit, mely a Cdk1 aktivlshoz szksges. Ekkor a kinz mkdni kezd,
foszforillja az M fzis vgrehajtshoz szksges fehrjket, de emellett aktivl egy proteolitikus enzimrendszert
is (az APC-t), mely a ciklin-B-t a metafzisban perceken bell elbontja. Ezzel a kinz kikapcsoldik, s jra csak
akkor kezd mkdni, ha a fehrjeszintzis elegend j ciklin-B-t produkl. A ciklin-B/Cdk1 kinz komplex, teht
egy viszonylag egyszer nszablyoz rendszer, melyben az egyik komponens (a ciklin) periodikus mennyisgi
vltozsai szablyozzk a msik komponens (a kinz) aktivitst, ami viszont visszahat a szablyoz komponensre.
A sejtciklus tipikus, az eukaritkban ltalnosan rvnyesl formja ngy fzisbl ll, m szmos vltozata is
ltezik. Az embrionlis sejtciklus igen rvid ideig tart (810 perc), csak az M s S fzisok klnthetk el, a G1
s G2 fzisok kimaradnak vagy nagyon rvidek. (A G nv az angol gap = rs szbl szrmazik, jelezve, hogy
az M s S fzisokat idbeli rs vlasztja el egymstl.) A G fzisokra jellemz ellenrzsi pontok nem mkdnek,
egyedli molekulris szablyzmechanizmust az M-Cdk (Cdk1-ciklinB) komplex biztostja. Amikor a ciklinB
kapcsoldik a Cdk1-hez, kialakul az aktv kinz komplex, a sejt belp az M fzisba. Az osztdst kveten a
ciklinB elbomlik, s a sejt az S fzisba lp. Itt a DNS duplikldik, a ciklinB jra szintetizldik. A DNS replikci
rvidebb ideig tart, mint a ciklinB szintzise, gy a DNS megkettzdse rendben befejezdhet, mieltt a sejt a
kvetkez M fzisba lpne. A sejtszm minden ciklusban duplzdik, mg a sejtek tmege nagyjbl felezdik.
Ez azrt lehetsges, mert a petesejt ltalban igen nagy, tmege az tlagrtket sokszorosan meghaladja a
124
felhalmozott tartalk anyagok miatt. A gyors, rvid ciklusok addig zajlanak, amg a sejtek mrete az tlagos szintre
nem cskken, ekkor beiktatdnak a mrettartst biztost G1 s G2 fzisok.
Ha az M fzis vgn elmarad a citokinezis, kt- s tbbmagv sejtek alakulhatnak ki (a mjban pl. gyakoriak a
ktmagv sejtek). A meizisban az els osztdst kveten kimarad az S fzis, ezrt a msodik meiotikus osztds
haploid sejteket eredmnyez. Bizonyos rovarlrvk egyes sejtjeiben ppen ellenkezleg, a sejtek ismtelt S fzisokon
mennek keresztl, melyeket nem kvet mitzis, s a replikldott DNS-szlak egytt maradnak, ris- (n. politn
sokfonalas) kromoszmk jnnek ltre.
A soksejtek szervezetben gyakran elfordul, hogy egyes sejtek hosszabb-rvidebb idre megllnak a ciklus
valamelyik fzisban. Az oocitkra pl. jellemz, hogy a meiotikus osztds hossz idre (akr vekig is)
felfggesztdik az profzis I-ben. A nvekeds ilyenkor sem sznetel, hiszen a fejld petesejtben folytatdik a
szikanyagok felhalmozsa. A petesejtek hormonlis (gerincesekben progeszteron-) hatsra fejezik be az osztdst,
de a meizis II. metafzisban ltalban jra megllnak s a ciklus csak a megtermkenyts utn lesz teljes.
A sejtek kls vagy bels hatsra (vagy inkbb annak hinyban) kilphetnek a sejtciklusbl, G0 fzisba kerlnek.
Kls hats lehet pl. a nvekedsi faktor, vagy a tpllk megvonsa stb. A ciklusbl val kilps ebben az esetben
ideiglenes, a kls hats megszntt kveten a sejt visszalphet a G1 fzisba. m ha a sejtek tl hossz idt
tltenek G0 fzisban, elveszthetik kpessgket a ciklusba trtn visszatrsre. Ennek oka lehet a DNS kovalens
mdosulsa pl. metills kvetkeztben. Ez utbbi az osztdkpessg teljes elvesztst jelenti, mivel az ilyen sejt
nem ksztethet DNS-szintzisre.
A kifejlett soksejt szervezetek f tmegt valamilyen funkcira specializldott, differencilt sejtek alkotjk,
melyek az egyedfejlds korai szakaszaiban mr megjelennek. Jellemz rjuk, hogy az utols sejtciklus G1 fzisbl
G0 fzisba lpnek. Az utols nhny ciklus sorn olyan gnek aktivldnak e sejtekben, amelyek elksztik a
ciklusbl val program szerinti kilpst, majd a differencildst. A ciklizl sejtek szintetikus kapacitsukat sajt
anyagaik folyamatos megkettzsre fordtjk, a G0 llapot differencild/differencilt sejtek elssorban a
funkciik elltshoz szksges anyagokat lltanak el (pl. az izomsejtek nagy mennyisg aktint s miozint, a
mirigysejtek vladkot stb.). A ciklusbl val kilps lehet ideiglenes vagy vgleges. A ciklusbl vglegesen kilp
sejtek tipikus pldi a neuronok s a szvizomsejtek. Osztdkpessg hinyban populciik jellemzen
regenercira kptelenek, a sejtszm stabilizldik, majd az letkor elrehaladtval a sejtpusztuls miatt fokozatosan
cskken. A differencilt sejtek egyes csoportjai a ciklusbl csak ideiglenesen lpnek ki. Megfelel inger hatsra
a G0 llapotbl jra visszatrnek a G1 fzisba, majd szablyosan thaladva az S s G2 fzisokon, osztdnak. Az
ilyen tpus sejtek az elvesztett sejtek ptlsra (a szvetek, szervek regenercijra) kpesek (pl. mjsejtek).
Szmos gyorsan kicserld, megjul szvetben egytt fordulnak el ciklizl nem vglegesen differencilt n.
trzssejtek (stem cells, ssejtek) s az osztdkpessgket elvesztett differencilt sejtek, melyek folyamatosan
pusztulnak. Ilyen pl. a br hmrtege, melynek felletrl a differencildott s elhalt sejtek lekopnak, vagy a bl
felszvhmja, melynek hmsejtjei a blbolyhok cscsairl lelkdnek. Az ilyen rendszerekben a trzssejt
osztdsbl szrmaz kt utdsejt egyike megrzi ciklizlkpessgt (trzssejt marad), mg a msik utdsejt G0
fzisba kerl, differencildik, elltja feladatt, majd elpusztul.
A sejtciklusbl val kilps vagy visszatrs szablyozsnak tanulmnyozsra szvettenyszeteken nylik
lehetsg. A ciklizlsra csak nvekedsi faktorok jelenltben kpesek a sejtek (rgrbbi kifejezssel a sejtciklus
szrumfgg), e faktorok hatsa a G1 fzisban rvnyesl. Szksges a ciklizlshoz, hogy a sejtek ki tudjanak
tapadni valamilyen hordozfelletre. A sejt-sejt kapcsolatok kialakulsa (a sejtek kzvetlen fizikai kapcsolatnak
kialakulsa) ugyanakkor a ciklizlst gtl tnyez. A sejtek szma (a sejtsrsg) egy szveti rendszerben szintn
ciklusszablyoz tnyez. Ezt utbbi regenercis ksrletekben igazolhat. Pldul a mj egy rsznek eltvoltst
kveten, a megmaradt csonk sejtjei nhny rn bell visszalpnek a sejtciklusba, majd addig osztdnak, mg a
szerv normlis mrete helyre nem ll. Ekkor a sejtek tbbsge G0 fzisba lp, a tovbbi proliferci lell. (A br
felhmjnak srlst kvet sebgygyuls is hasonl jelensg.)
Egy sejt osztdsi potenciljt jl jellemzi, hogy hny cikluson tudnak keresztlmenni l szervezetben. A lehetsges
ciklusszm fajra jellemz, genetikailag szablyozott rtk. Humn embribl szrmaz fibroblasztok tenyszetben
kb. 50 sejtciklust kpesek vgrehajtani, azutn G0 fzisba, majd szeneszcenciba lpnek, a nvekedsi faktorokra
nem reaglnak (a ciklusba vissza nem lptethetk) s vgl elpusztulnak. A jelensg oka a kromoszmk telomerikus
szakasznak fokozatos rvidlse. Az S fzisban a DNS-szlak vgeinek replikcijt, vagyis az eredetivel
megegyz hosszsg biztostst egy specilis enzimkomplex, a telomerz vgzi. A telomerz szomatikus sejtekben
nem, vagy csak igen kis aktivitssal mkdik, ezrt az egymst kvet ciklusokbl a sejt egyre rvidebb
kromoszmkkal kerl ki, vgl letkptelenn vlik. A ciklizlkpessg kimerlst/elvesztst cellulris
125
regedsnek nevezik. A teljes osztdsi potencilt a szervezet valsznleg nem hasznlja ki (50 ciklus elmletileg
250 szm tonnnyi sly sejttmeget eredmnyezhet).
A sejtciklust szablyoz molekulris mechanizmusok hibs mkdse tbbszrs mutci kvetkeztben, n.
transzformlt sejtek, immortlis llandan kontrolllatlanul osztd sejtvonalak alakulnak ki. Ennek szmos
oka lehet, pl. tarts telomerzenzim-aktivits, mely kikapcsolja a ciklusszm-korltot, vagy az Rb-gn hinya, ami
miatt az E2F tpus transzkripcis faktorok llandan szabad llapotban vannak, s ez felfggeszti a G1/S tmenet
ellenrzst. Hasonl hatsa van a Cdk inhibitor fehrjk hinynak vagy alulmkdsnek stb. A sejtosztdst
serkent gneket protoonkogneknek nevezzk. Ezek tlmkdst elidz mutcijval ltrejv transzforml
gnek az onkognek. Utbbiak termkei nagyobb mennyisgben termeldhetnek, vagy aktivitsuk nagyobb,
esetleg szablyozsuk felfggesztdse miatt llandan bekapcsolt llapotban vannak. Hatsuk dominns a
protoonkognek termkei felett, fokozott sejtosztds, sejtburjnzs kvetkezhet be. Az osztdst gtl gnek a
tumor szupresszor gnek. Norml mkds termkeik hozzjrulnak a sejtciklus szablyozsnak egyenslyhoz.
E gnek delcis vagy alulmkdst okoz mutcija a sejtciklus szablyozsnak felborulst eredmnyezheti.
Mindkt gncsoport mutcija a ciklus szablyozsnak zavarhoz, szlssges esetben annak felfggesztdshez,
vgl tumorok kialakulshoz vezethet.
Nemzedkvltakozs, nvnyi s llati

letciklus
Az ivarosan szaporod llnyek ivarsejtjeinek egyeslst kveten kialakul a diploid zigta, melyben az anyai
s apai eredet kromoszmk egyarnt megtallhatk. Mivel ezek a kromoszmk azonos gneket hordoznak, de
allljaik klnbzek lehetnek, az utdok bizonyos mrtkben heterozigtk, vagyis egy adott gn tekintetben
bizonyos valsznsggel eltr allllal, informcival rendelkeznek. Ez egyrszt alapja a sokflesgnek, msrszt
a klnbz alllokkal rendelkez kromoszmaprok az esetleges hibk javtsra, vagy legalbbis maszkolsra
lehetsget adnak. A hibs gn esetleg haploid llapotban letlis lenne, de egy mkd alllje ugyanennek a gnnek
a msik szltl szrmaz kromoszmn kompenzlhatja a hibt. Az rem msikoldala, hogy gy, a letlis recesszv
mutcik nem szelektldnak ki. A diploid llapot mgis elnysnek tnik, s az llnyek nagyobb rszre
jellemz. Azok az llnyek, mint pldul az llatok, melyek egsz letket diploid fzisban tltik, s csupn az
ivarsejtjeik haploidok, a diplonta letciklus kpviseli. A meiotikus osztds az ivarsejtek kpzsekor megy vgbe.
Ennek szinte fordtottja a haplonta letciklus, ami alacsonyabbrend llnyek, pldul egyes algk esetben
figyelhet meg. Az llny haploid, az ivarsejtek kpzse mitzissal trtnik, s az ivaros szaporods eredmnyeknt
kialakul zigta azonnal meiotikusan osztdik, vagyis 4 haploid utd keletkezik. A szrazfldi nvnyekre a
haploid, s diploid letszakaszok vltakozsa, a haplodiplonta letciklus, vagy kevsb precz, de gyakran hasznlt
kifejezssel nemzedkvltakozs jellemz. Az ivarsejtek egyeslsvel ltrejtt zigta mitotikus osztdsokkal
egy diploid letszakaszt kpvisel struktrt, vagy nvnyt, a sporofitont alaktja ki, mely meizissal haploid
sprkat hoz ltre. A sprk mitotikusan osztdva kialaktjk a haploid gametofiton letszakaszt, amely az ivarsejtek
mitotikus kpzsvel zrul. Az ivarsejtek fzijval az letciklus jra indul. A trzsfejlds sorn megfigyelhet
a diploid fzis, vagyis a sporofiton egyre ersebb dominancija. Mg a mohk esetben a gametofiton a dominns,
maga a moha nvnyke, a harasztok esetben mr a sporofiton a fejlettebb szervezds s hosszabb let. A
zrvatermk gametofitonja mr ersen reduklt, csupn a pollenszemre, illetve az embrizskra korltozdik.
A gombk egy rsze sajtos, n. dihaploid letciklussal rendelkezik. A dihaploid llapotot az ivaros folyamatot
kvet, magfzi nlkli, a kt szli mag szinkron osztdsval trtn ktmagvas llapot jellemzi. Ezeken a
fbb letciklusokon tl, az alacsonyabbrend llnyek kztt szmtalan mdosult letciklusformt figyelhetnk
meg, klnsen a gazdacsers, lskd letmddal sszefggsben.
A sejtosztds
Mitzis
A mitzis, vagy szmtart magosztds az ltalnos, testi sejtekre jellemz osztdsi forma. A nvnyeknl az
ivarsejtek is mitzissal jnnek ltre a mr haploid gametofiton sejtekbl. A sejtosztds folyamata az lvilgban
elg egysges mdon megy vgbe, de azrt tallunk szmos eltrst a nvnyi s llati osztds kztt. A nvnyek
a fenyk s zrvatermk esetben mr nem rendelkeznek centrilummal, nincs mozg alakjuk, ezrt a sejtosztdsban
126
oly fontos citocentrum, vagy sejtkzpont is centrilum nlkl alakul ki. Egy msik fontos klnbsg, hogy az llati
sejtek kettvlsa a mitzis vgn aktin filamentumokbl kialakul gyr segtsgvel trtnik, mg a nvnyek
citokinzise a sejtfalkpzssel egytt jr folyamat s a fragmoplaszt vgzi. A kt sejtosztds kztti tovbbi
aprbb klnbsgekre, a sejtoszds lpseinek trgyalsakor trnk ki.
A nvnyi mitzis fzisai.
Profzis
A G1 fzis vgn a sejtek felkszlnek a mitzisra. Ekkorra az S fzis sorn kialakult bennk a DNS szl msolata,
a testvrkromatida, vagyis 4C DNS mennyisggel rendelkeznek. Az llati sejtekben megtrtnt a citocentrum
duplikldsa is, vagyis kt pr citocentrummal rendelkeznek. A mitzis profzisban megindul a kromoszmk
kondenzcija, ami fnymikroszkppal is nyomon kvethet. Kezdetben csak egy fonlgombolyaghoz hasonl
kpet ltunk, majd a kromoszmk is elklnthetk lesznek, ahogy egyre vastagodnak s rvidlnek. Nvnyeknl
a mikrotubulusokbl a leend kzpsk kerletn kialakul egy n. preprofzisos kteg, mely a neve ellenre a
profzisban jn ltre. Ez a gyrszer kplet a profzis vge fel fel is bomlik. Pontos szereprl nincsenek
ismereteink, de kijelli a leend osztdsi skot, a ksbbi kzplemez helyt. A tbbi mikrotubulus, mely az
interfzisban a kortiklis mikrotubulusokat alkotta eltnik s a mag felsznt kvetve csoportosul, majd egyre
inkbb a plusok fel orientldik. A plusok a nvnyek s llatok esetben klnbzkppen alakulnak. Az
llati sejtekben a plus egy jl meghatrozott rsze a sejtnek melynek kzepben tallhat a centrilumpr. A
nvnyeknl ezzel szemben a plus egy diffz, nagyobb mret terlet, mely fel a mikrotubulusok ktegei
mutatnak a mnusz vgeikkel. A centrilumok az llati sejtekben az S fzisban megkettzdtek, s a profzis elejn
a sejt kt leend plusra vndorolnak. Meg kell jegyezni, hogy az llati oocitk centrilum nlkli meiotikus
osztdsa nem hasonlt a nvnyekhez, mivel az oocitkban a plusok csak ksbb alakulnak ki a random
mikrotubulus rendszerben, mg a nvnyekben a plusok MTOC funkcija kezdetektl megnyilvnul.
Prometafzis
A profzis vgn a maghrtya felbomlik. Apr vezikulkk alakul, melyek fzionlnak az endoplazmatikus
retikulummal. A membrn sztesse utn egszen a telofzis vgig kimutathatk az ER-ben, amikor a sejtmaghrtya
jjszervesshez hasznldnak fel. Mieltt a magmembrn sztesik a mag prus komplexek disszocilnak, lyukakat
hagyva a membrnban. A magmembrn sztessben fontos szerepe van a laminvz foszforillsnak, s ezltal
a laminbl ll intermedier filamentumok s a magmembrn kapcsolatnak megbontsnak. Ezt fknt a mitzis
promoting faktornak (MPF) nevezett protein kinz vgzi. Foszforilci hatsra a magmembrn s a prusok
sztesnek, a defoszforills pedig a visszaplsket induklja.
127
Korbban gy vltk, hogy a mitzis alatt az endoplazmatikus retikulum dezintegrldik, vezikulkra esik szt.
Valjban az ER a mitzis sorn vgig megmarad, de a ciszternlis jellege sejtektl fgg mrtkben megsznik,
s egy fenesztrlt lemez, vagy kifejezetten (br skba rendezett) tubulris formv alakul, de nem esik szt
vezikulkra. Az ER felsznn tallhat riboszmk szma jelentsen lecskken, s a transzlci blokkoldik.
A maghrtya felbomlsval a mitotikus ors teljesen kialakul, a mikrotubulusok behatolnak a mag llomnyba,
s hozzkapcsoldnak a kromoszmkhoz. A mikrotubulusok msik rsze a kromoszmk kztt thaladva a
szembl rkez mikrotubulusokkal kapcsoldik ssze, kialaktva a plus-plus rostokat. A mikrotubulusok a
kromoszmkhoz elssorban a kinetochoron keresztl kapcsoldnak. Ezrt ezeket a mikrotubulusktegeket
kinetochor rostoknak nevezzk. Egy-egy ilyen ktegben, rostban tbb tucat, vagy akr szznl is tbb mikrotubulus
tallhat. A kinetochor a kromatidk kapcsoldsi pontjainl kialakul fehrje komplexek, melyekhez a
mikrotubulusok plusz vge kapcsoldik. A mitotikus kromoszmnak mindegyik kromatidjn tallhat egy-egy
kinetochor. A kapcsolds mechanizmusrl keveset tudunk, de a kapcsoldsnak flexibilisnek kell lennie, hogy
biztostsa a kromoszmk mozgst. Mikrotubulris motorfehrjket (kinezin, dinein) sikerlt kimutatni a
kinetochorban.
A mikrotubulris magors kiplsvel megindul a kromoszmk vndorlsa az equatorilis skba. A vndorls
pontos mechanizmusa mg nem ismert, s biztosan nem teljesen azonos a nvnyek s llatok esetben. A kinetochor
mikrotubulusok nmagukban nem elegendek a kromoszmk kzpskba rendezshez. A kromoszmk mozgsa
nem egyenletes, s fknt az llati sejtekben oszcilll, ide-oda mozgs jellemzi. A kzpskba rendezsre tbbfle
elmlet is ismert. Az llati sejtek esetn mkd modell az n. sarki szl (polar wind). A kromoszmk karjait
megfigyelve kiderl, hogy azok a kzpsk fel nznek. Ha llati sejtekben letrik egy kromoszmadarab, az annak
ellenre, hogy nincs kinetochor rsze, a kromoszmkkal egytt a kzpskba rendezdik. Ez arra utal, hogy a
mikrotubulusok a kinetochor nlkl is kpesek a kromoszmkat mozgatni ebben a szakaszban. gy kpzelik,
hogy a plusok fell folyamatosan nvekv mikrotubulusok tnyleges kapcsolds nlkl lkdsik a kromoszmkat,
s ezt a kinetochor mikrotubulusok flexibilitsuk rvn kvetik. Amennyiben a kinetochor mikrotubulusok mozgatsa
a dominns, a kromoszma karjai lemaradnak, amennyiben a nem specifikusan kapcsold mikrotubulusok
mkdse erteljesebb, a karok a haladsi irnyba llnak. Mivel a mikrotubulusok felplse s lebomlsa rendkvl
gyors- letidejk kevesebb, mint egy perc a folyamat elg dinamikus lehet a kromoszmk mozgatshoz. Mivel
llati sejtekben a mikrotubulusok szinte egy pontbl indulnak ki, a tvolsggal arnyosan cskken az egysgnyi
keresztmetszetben lev mikrotubulusok szma. Minl kzelebb van teht egy kromoszma az egyik plushoz,
annl nagyobb az onnan eltol er. A ktoldali mikrotubulusok srsge a kzpskban egyenl, itt teht a
kromoszma stabilizldik. Nvnyek esetben ez az elmlet nem mkdkpes, mert a magorsba bekerl
brmilyen rszecskt a magors kispri a terletrl, nem gyjti ssze a kzpskban. A nvnyek esetben hinyzik
az llati kromoszmkra jellemz oszcilll mozgs is, a kromoszmk nagyjbl egyenletes sebessggel haladnak,
amg el nem rik a kzpskot. Egy msik elmlet azzal prblja magyarzni a kromoszmk kzpskba rendezst,
hogy felttelezi, a kinetochor rostok hzereje a hosszukkal arnyos. Ennek az elmletnek mg nincs kidolgozott
molekulris mechanizmusa.
Metafzis
A kromoszmk a magors segtsgvel a kzpskba rendezdnek. Mindegyik kinetochorhoz szmtalan
mikrotubulus kapcsoldik. A kapcsoldsok folyamatosan jraplnek, s minl inkbb egy adott plus fel ll
egy kinetochor annl valsznbb, hogy az onnan rkez mikrotubulusokkal kapcsoldik ssze. A folyamat addig
folytatdik, mg minden kromoszmnl nem teljesl az a felttel, hogy egyik kinetochorja csak az egyik, a msik
kinetochorja csak a msik plustl kap mikrotubulusokat. Ez a felttele az osztds folytatsnak, vagyis ez egy
n. ellenrzsi pont.
Anafzis
A sikeres kzpre rendezds utn megindul a kromatidk sztvlsa. Ehhez nincs szksg a hzfonalakra, a
sztvlasztst egy topoizomerz enzim vgzi. Ezutn a sztvlt kromatidk megindulnak a plusok fel. A vndorlst
gyakran kt szakaszra osztjk, anafzis A-ra s anafzis B-re. Az els szakaszban a plusok tvolsga nem vltozik,
vagyis a kromatidk mozgsa a hzfonalak rvidlsvel arnyos. A msodik szakaszban a plusok tvolodnak
egymstl, gy ez is kzrejtszik a kromatidk mozgatsban. A hzfonalak a kromatidk mozgatsa sorn
rvidlnek, de nem felttlenl ez szolgltatja az ert a hzshoz. A mikrotubulusokhoz asszocilt fehrjk, a
klnbz motorfehrjk szintn rszt vehetnek a kromatidk mozgatsban. A mikrotubulusok depolimerizcijnak
mrskelt induklsval ksrletileg sikerlt a kromatidk mozgst gyorstani. A plus-plus rostok az anafzis
128
B-ben a plusz vg motorfehrjn, a kinezinen keresztl sszekapcsoldva kpesek eltolni egymst, s ezzel a
plusokat tvoltani egymstl. A nvnyi s llati sejtek kztt a kromatidk hzsban az anafzisban nem
talltak klnbsgeket.
Megfigyeltk, hogy az endoplazmatikus retikulum szinte rtapadva a kromatidkra, kveti azokat a plusok fel.
Telofzis
A plusokra rkezett kromatidk krl megindul a maghrtya kialakulsa. A maghrtya felbomlsakor az
endoplazmatikus retikulumba szlltdott magmebrn fehrjk a kromatidkat krlvev ER membrnban
lokalizldnak. Az endoplazmarikus retikulum tubulusai krbelelik a kromatidkat s kialakul az j maghrtya.
Megjelennek a magprus komplex disszocilt partikulumai, s fokozatosan beplve kialaktjk a magprusokat.
Ezzel egytt jr a laminvz felplse, ami a lamin fehrjk defoszforillsa kvetkeztben indul meg. Nem
meglep ezek utn, hogy a maghrtya, s az endoplazmatikus retikulum egysget kpez, s a maghrtya felsznn
riboszmk tallhatk.
Citokinzis
A sejt kettvlsa az llati, s nvnyi sejtekben teljesen eltren trtnik. Az llati sejtekben, a kzpskban, a
sejtmembrn alatt, ahhoz kihorgonyozva kialakul egy aktinbl, s miozinbl ll gyr. Az aktinszlak ebben
ellenttes polaritssal vannak jelen. A miozin motorfehrje az aktinszlakat egymssal szembe hzva egyre szkti
a gyrt, s vgl kettfzi a sejtet.
A nvnyi sejtek kettvlsa a sejtfal kialakulsval egytt trtnik. A magors mikrotubulusainak rszbeni
jjszervezsvel s j mikrotubulusok, valamint aktin filamentumok rvn kialakul egy fragmoplasztnak nevezett
kplet. Ebben a mikrotubulusok, s aktinfilamentumok a magors plus-plus rostjainak megfelelen helyezkednek
el. Kezdetben a kzps rgiban futnak a citoszkeletlis elemek, de a folyamat elrehaladtval, a szlek fel
orientldva egy tgul csszer kpletet alkotnak. Feladatuk a Golgi kszlkekbl szrmaz vezikulk kzpskba
szlltsa. Itt a vezikulk sszeolvadnak, s pektin tartalmuk sszemlik. Ez alkotja a sejtlemezt. A fragmoplaszton
a kirlt vezikulk egy rsze visszaramlik a Golgi-kszlkhez. A fzi a kzps rszen indul meg, kezdetben
egy tubulris hlzat alakul ki, majd az egyre tbb vezikula fzijval egy fenesztrlt lemez. A lemez pozcijt
a citoszkeleton stabilizlja. A lukak szmnak cskkensvel a fragmoplaszt fokozatosan kifel halad. A lemez
kialakulsa sohasem teljes, az itt jelenlev endoplazmatikus retikulum ugyanis tbb helyen tnylik a kpzd
sejtfal-sejtmembrn egysgen. Felttelezik, hogy az endoplazmatikus retikulumnak, illetve az ltala a vezikulk
kr kijuttatott kalcium ionoknak fontos szerepe van a vezikulk fzijban. Ahogy a sejtlemez egyre jobban
kiterjed, elri a sejtmembrnt s fuzionl vele. Ezzel megtrtnik a sejtek sztvlsa.
Vakuolizlt nvnyi sejtek esetn a citoplazmnak t kell rendezdnie, hogy az osztdshoz, s a leend
sejtfalkpzshez a citoplazma a kzpskban helyezkedjen el. A citoplazmalemezt, amiben a citoszkeleton is
koncentrldik fragmoszmnak nevezzk. Meg kell emlteni, hogy a fragmoplaszt, s fragmoszma kifejezseket
nha mg a szakirodalomban is hibsan hasznljk, pldul a fragmoplasztot keverik a kzplemezzel, s a
fragmoszmt a kzplemezt kialakt Golgi vezikulkkal.
Meizis
Az llati letciklus sorn az ivarsejtek kpzse, a nvnyek haplodiplonta letciklusa sorn pedig a sprk meizissal,
vagy szmfelez osztdssal keletkeznek. Meizis eltt a DNS az S fzisban ugyangy megkettzdik, mint a
mitzis eltt, teht 4C DNS szintrl indul az osztds. A meizis sorn kt egymst kvet sejtosztds megy
vgbe, a meizis I, s a meizis II. A meizis I sorn az apai s anyai eredet homolg kromoszmk prba llnak,
s az adott kromoszmbl az egyik sejtbe egy ktkromatids apai vagy anyai kromoszma kerl vletlenszeren.
Kzben a homolg kromoszmk kztt gnkicserlds trtnik a crossing over sorn. A meizis I utn teht a
sejtekbe, a testi sejtekhez kpest csak fele annyi kromoszma kerl, egy adott kromoszmbl csak vagy az apai,
vagy az anyai. A sejtek teht 2C DNS tartalommal rendelkeznek ugyan, de csak 1N kromoszmaszerelvnynek
megfelel DNS-el. A meizis msodik szakasza tulajdonkppen egy norml mitzis, amikor a kt kromatids
kromoszmk vlnak szt. A meizis vgeredmnye teht ngy haploid sejt lesz, ami az llatok esetben kzvetlenl
ivarsejtknt funkcionlhat, nvnyek esetben pedig mitzisok utn alakul ki az ivarsejt. Az ivarsejtek fzijval
jra diploid sejt jn ltre, a zigta.
129
A meizis teht igen fontos osztdsi folyamat, egyrszt biztostja az ivarsejtek haploid llapott, msrszt nveli
a genetikai variabilitst. Ez utbbit egyrszt az apai s anyai kromoszmk vletlenszer sztvlsa, msrszt a
crossing over sorn trtn gnkicserlds rvn teszi.
Mivel a meizis nagyon sok lpse a mitzishoz hasonlan trtnik, itt csak az eltrseket rszletezzk, ami fknt
a meizis I profzist rinti. Itt trtnik ugyanis a homolg kromoszmk prosodsa s a crossing over.
llati sejt meiotikus osztdsa
Meizis I
Profzis
A meizis leginkbb ebben a szakaszban, illetve az itteni trtnsek kvetkezmnyeiben tr el a mitzistl, illetve
az annak megfeleltethet meizis II-tl. A profzis I ennek megfelelen tbb szakaszra klnthet.
A leptotn szakaszban mr ktkromatids kromoszmk vannak, de mg csak vkony fonalaknak ltszanak, a kt
kromatida fnymikroszkposan nem klnthet el.
A zigotn szakaszban trtnik meg a homolg kromoszmk prosodsa, vagyis az apai s anyai eredet kt-kt
kromatidval rendelkez kromoszmk prba llnak. Kialakulnak a bivalensek, melyek sszesen ngy kromatidt
tartalmaznak (tetrd). A prosods folyamn kialakulnak a kromoszmaprok kztti kapcsoldsok, a szinapszisok,
melyek igen pontos, gnszint egymshoz rendelst biztostjk a homolg kromoszmk kromatidinak.
A pachitn szakaszban a kromoszmk megrvidlnek, a homolgok kromatidi kztt kialakul az n. szinaptonms
komplex, ami egy hatrozott szerkezet kapcsolds. Ebben nagymret fehrjekomplexek, az n. rekombincis
nodulusok figyelhetk meg melyek nevket a rekombinciban val felttelezett rszvte rszvtelkrl kaptk.
A diplotn szakaszban megindul a homolgok kettvlsa, a szinaptonms komplex sztesik, de bizonyos pontokon
a homolg kromatidk kztti kapcsolat fennmarad. Ezeket a kapcsoldsi pontokat kiazmknak nevezzk. Itt
felttelezheten a rekombinci miatti tkeresztezdsek (crossing over) tallhatk.
A profzis vgn a diakinzisben a kiazmk elcssznak a kromoszmk vgei fel, a crossing over befejezdik.
A kromoszmaprokon kialakul a kt kinetochor rgi, az egyik homolgon egy s a msikon mg egy, vagyis a
homolg kromoszmk kromatidi kzs kinetochor rgit kpeznek. A centromer szakaszon a kromoszmk
mg ersen sszetapadtak.
130
A tovbbi szakaszok sokban hasonltanak a mitzisra, de a metafzis I-ben a kromoszmaprok rendezdnek a

kzpskba, s az anafzisban a homolg kromoszmk vlnak el egymstl, s ktkromatids formban vndorolnak
a plusok fel. A telofzis vgn a kt mag kialakulsa, illetve a citokinzis nem minden esetben fejezdik be,
hanem megindul a meizis II, ami tulajdonkppen egy mitzis. Amennyiben a sejt kettvlik, s a sejtmagok
kialakulnak, egy rvid interkinzis szakasz utn kvetkezik a meizis msodik szakasza. A vgeredmny norml
esetben ngy haploid sejt, melyek kzl kett-kett azonos.
Krdsek:
1. Milyen osztdssal jnnek ltre a magasabbrend nvnyek illetve az llatok ivarsejtjei.
2. Mi az alapvet klnbsg a mitzis s a meizis kztt?
3. Mik vlnak szt a mitzis, illetve a meizis I anafzisban?
4. Hny kromatidbl ll egy meizis I-es, metafzisos kromoszma?
5. Mi az a kiazma?
6. Mi a preprofzisos kteg?
7. Mikor bomlik le az osztds sorn a maghrtya, s mi lesz a sorsa?
8. Hogyan alakul ki a telofzisban a kt j maghrtya?
9. Mi a klnbsg a zrvaterm nvnyek s az llatok sejtkzpontja kztt?
10. Mi a klnbsg a nvnyek s llatok citokonzise kztt?
11. Hova ktdnek a kromoszmn a hzfonalak?
131
19. fejezet - A sejtpusztuls

Egy szervezet mrett az t alkot sejtek szma, nagysga s a sejtkztti llomny mennyisge hatrozza meg.
E tnyezk kzl a sejtszmnak van dominns szerepe. Egyes fajokban a sejtszm egszen pontosan meghatrozott
rtk. Pldul a C. elegans fonlfreg egyedfejldse sorn 1090 szomatikus sejt keletkezik, kzlk 131 apoptzissal
elpusztul, s gy ll be a faj egyedeire jellemz 959-es sejtszm. A legtbb fajban a szmszablyozs azonban nem
ilyen szigor, de a testmret tlagrtke fajra jellemz tulajdonsg, vagyis a sejtszm korltok kz szortott. A
sejtszmot a sejtosztds nveli, a sejtpusztuls cskkenti, a ciklusbl val kilps (G0 llapotba lps) stabilizlja.
gy pl. az embrionlis fejlds legkorbbi szakaszaiban norml esetben G0 fzis vagy pusztul sejt nem fordul
el s a ciklus nagyon gyors (csak M s S fzisok vltakozsbl ll), a sejtszm robbansszeren n.
A sejtpusztuls tbbfle formja ismert, melyeket egyrszt a morfolgiai blyegek, msrszt az eltr molekulris
mechanizmusok szerint lehet megklnbztetni.
A nekrzis
A sejtpusztuls egyik formja a nekrzis. Olyan, a sejtet rt kls hats vlthatja ki, mely durva, nem javthat
krosodst okoz. A hats lehet pl. mechanikai roncsolds, mrgezs, hhats, sugrkrosods, a keringsi zavarok
miatt kialakul oxignhinyos llapot, vrusfertzs stb. kvetkezmnye. A krost hats ltalban sejtek kisebbnagyobb csoportjt ri, nekrotikus zna alakul ki. Jellemz az ionpumpk ATP-hiny miatti lellsa, a citoplazma
s a sejt krnyezete kztti jellegzetes ioneloszls fenntarthatatlansga. A plazmamembrn permebiliss vlik, a
sejtbe nagy mennyisg vz s kalcium-ion ramlik be. A megnvekedett citoplazmatikus Ca-ion koncentrci
szmos enzimet, pl. lipzokat, protezokat aktivl, melyek krostjk a membrnokat. Lavinaszeren ersd
reakcisorozat indul be. A nekrotikus sejt megduzzad, sejthrtyja felszakad, citoplazmjnak anyagai a sejtkztti
trbe kerlnek. A krnyez kapillrisok permeabilitsa is megn, plazmafehrjk ramlanak a nekrotikus terletre,
gyullads alakul ki. Elssorban a fehrjk bomlstermkei kemotaktikus hatst gyakorolnak a makrofgokra,
leukocitkra, melyek kilpve a keringsbl a pusztul sejtek krnyezetbe vndorolnak s rszt vesznek a
sejttrmelk eltakartsban. A folyamat lezrsakppen a hinyz sejtek helyt kitlt, az eredeti szveti struktrtl
eltr szerkezet s beerezettsg ktszveti tpus, hegszvet alakul ki.
Nekrotizl sejt (a kzps vilgos terlet).
A programozott sejthall
A sejtpusztuls msik formja, a meghatrozott program szerint lezajl, szablyozott folyamatok eredjeknt
kialakul programozott sejthall (programmed cell death PCD). Ennek egyik, jellegzetes morfolgiai
vltozsokkal ksrt vltozata az apoptzis. Az apoptotikus sejtek zsugorodnak, felsznkrl kisebb-nagyobb
citoplazmadarabok fzdnek le (bleb kpzds), a kromatinllomny ersen kondenzldik, a DNS fragmentldik
s utbb a mag is feldaraboldik. Az apoptzis sorn a plazmamembrn szemipermeabilitsa vgig megmarad, de
a membrn kls rtegben foszfatidilszerin jelenik meg. A szomszdos, p sejtek ennek alapjn ismerik fel az
apottikus sejtet/blebet s ez vltja ki a fagocitzist. Ilyen krlmnyek kztt a sejtek kzti trbe bomlstermkek
nem jutnak, gy a gyullads s a szveti trendezdssel jr hegkpzds nem lp fel. A folyamat igen gyors,
nhny ra alatt lezajlik.
132
A sejtpusztuls
A DNS marginlis kondenzcija figyelhet meg az apoptotikus sejtmagokban (patkny hasnylmirigy kls
elvlaszts mirigysejt).
Az apoptzis evolcisan rendkvl konzervatv folyamat, a soksejt llatok sejtjeiben azonos lpsekben megy
vgbe s a kivitelezsrt felels molekulk is nagyon hasonlak. Az apoptzist a sejtekben folytonosan jelenlv
specilis enzimrendszer hajtja vgre.
Az endonuklezok felelsek a DNS fragmentcijrt. A magban DNS molekulkat a nukleoszmk kztt
hastjk, klnbz mret fragmentumokat ellltva. A transzglutaminzok keresztktseket hoznak ltre a
citoplazma fehrji kztt, ezzel nagymret fehrjeaggregtumok kpzdnek a sejtben.
Az apoptotizl sejtben a Golgi kszlk a sejtvz degradldsa miatt sztszik.

A rendszer f komponensei a fehrjebont kaszpzok. Szintzisk s trolsuk a sejtben igen szigoran szablyozott:
inaktv formban kpzdnek s troldnak, aktivlsukhoz a molekula proteolitikus hastsa szksges, msrszt
a sejtben tbb kaszpz-gtl s aktivl fehrje is van. A kaszpzok kztt vannak inicitorok (kaszpz-2, -8, -9,
-10) s effektorok (kaszpz-3, -6, -7). Az effektorok univerzlis hatsak, az inicitorok viszont specilis kivlt
hatssal aktivlhatk. A kaszpzok proteolitikus kaszkdsort alkotnak. Szubsztrtjaik kz tartoznak az
endonuklezok, a nukleris laminok, a sejtvz bizonyos fehrji stb.
Az apoptzis kivltsban, illetve szablyozsban kls s bels tnyezk egyarnt szerepet jtszanak. A kls
tnyezk kztt egyarnt tallhatk az apoptzist gtl s indukl hats jelmolekulk (tllsi s hall szignlok).
Gtl hatsak lehetnek a klnbz trofikus faktorok s egyes hormonok. A trofikus faktorok jelenltt a sejtek
receptoraik segtsgvel rzkelik (tllsi jelek s receptorok). Az apoptzist gtl hats tbbek kztt azon
alapul, hogy a jel a sejtben a Bcl-2 csald proaptotikus tagjainak mkdst gtolja.
Az immunrendszer sejtjei szmos citokint termelnek (a citokinek kis molekulatmeg fehrjk), melyek tbbek
kztt az immunvlasz szablyozsban jtszanak szerepet. Ezek egyik csoportja apoptzisindukl hats. A
csoport kt jellegzetes tagja a tumor nekrzis faktor (TNF) s az n. Fas/Apo ligandum, melyek megtallhatk a
citotoxikus sejtek felsznn, mg a clsejtek hordozzk ezek receptorait (hall ligandumok s receptorok). A
133
A sejtpusztuls
ligandumreceptor kapcsolds aktivlja a receptort, mely kzvett molekulkon keresztl azutn beindtja a
kaszpzok mkdst. Mindezen hatsok sszeredmnyeknt a clsejt kiknyszertett apoptzisba lp s elpusztul,
megakadlyozva ezzel a vrusfertztt vagy kros sejtek szervezeten belli elszaporodst.
Az apoptzis szablyozsban kulcsszerepe van a mitokondriumoknak, melyekben egy ers kaszpzaktivl
fehrje, a citokrm-c lokalizldik. A citokrm-c az elektron transzport lnc egyik tagja,normlis krlmnyek
kztt a bels membrnon l, de sejtkrost hatsokra kidiffundlhat a citoszolba, ahol egyes kaszpzokat aktivl.
A kiramls a mitokondriumok kls membrnjn tallhat prusokon keresztl trtnik. A prusok mkdst
egy fehrjecsald (a Bcl-2 tpus fehrjk) ellenrzi, mely proapoptotikus s antiapoptotikus (a kiramlst elsegt,
illetve gtl) tagokat egyarnt tartalmaz.
Nem ritka, hogy az apoptzist nem a bels krnyezet fiziolgis vltozsai, hanem valamilyen vratlan krost
hats esemny vltja ki. Az egyik leggyakoribb ilyen esemny a DNS-szltrs, mely bekvetkezhet klnbz
vegyletek vagy sugrzsok hatsra. A ciklizl sejtek ilyenkor a G1/S fzis hatrn megllnak, mert a p53 fehrje
kzremkdsvel egy Cdk-inhibitor kezd termeldni. Ha a hibt sikerl kijavtani, a ciklus folytatdik. Ellenkez
esetben a p53 induklja a Bcl-2 csald proapoptotikus tagjait s beindul az apoptzis, a sejt npuszttssal
akadlyozza meg, hogy hibs DNS-kszlettel rendelkez utdsejtek jjjenek ltre.
Az apoptotikus sejtpusztuls immunrendszer ltal kiknyszertett vltozata az erre szakosodott limfocitk, a
citotoxikus T-sejtek s a termszetes lsejtek kzremkdsvel valsul meg. Clsejtjeik a szervezet azon sejtjei,
melyek felsznn idegenknt azonostott fehrjk, fehrjefragmentumok jelennek meg. A ktfle test kontaktusba
kerl, majd a citotoxikus sejt kivltja a clsejt pusztulst. A citotoxikus sejt egyik rtett termke a perforin nev
fehrje, mely lyukakat kpez a clsejt membrnjn, ezen keresztl vz s ionok ramlanak be citoplazmjba (ez
a nekrzisra emlkeztet folyamat). A citotoxikus sejt enzimeket is juttat a clsejtbe (granzimek), melyek a
kaszpzokat aktivljk.
Az apoptzis jelentsge, funkcija sokrt. gy pl. a tiroxin (pajzsmirigyhormon) tmeges apoptzist okoz az
ebihalak lrvlis szveteiben, ami a metamorfzis termszetes velejrja. Az A-vitamin s szrmazkai a
vgtagbimbk szvetben a leend ujjpercek kztti sejtek elhalst indukljk, s ez teszi lehetv az ujjak
formldst. Ezek a pldk mutatjk, hogy a sejtpusztuls a normlis egyedfejlds termszetes s szksgszer
velejrja. A normlis fejldsi folyamatban a felesleges sejtek eltvoltsval segt belltani az optimlis sejtszmot,
s apoptzissal trtnik a funkcivesztett lrvlis szvetek eltvoltsa a metamorfzis sorn. Felntt szervezetben
kiegyenslyozza a sejtosztds sejtszmnvel hatst s megszabadtja a szervezetet sajt meghibsodott sejtjeitl.
Az apoptzist szablyoz mechanizmusok krosodsnak slyos kvetkezmnyei lehetnek. Szmos tumor esetben
kimutattk, hogy valamelyik apoptzist indukl gn hibja miatt a transzformldott sejtek nem hajtjk vgre az
npusztt programot, s ez vezet tbbek kztt a hibs sejtek elszaporodshoz.
A programozott sejtpusztuls megvalsulhat autofgival is. Az rintett sejtekben az autofg vakuolk tmeges
felhalmozdsa figyelhet meg. A degradcit a lizoszomlis enzimek vgzik.Normlis krlmnyek kztt az
autofg aktivits alacsony, de kls hatsra annyira felersdhet, hogy ez a citoplazma s az organellumok nagy
rsznek elvesztshez s ennek kvetkeztben sejtpusztulshoz vezet. Fokozott autofg aktivitst vlthat ki a
hypoxia, a nem megfelel tpanyagellts, gyulladsos folyamatok stb.
A fokozott autofg aktivits vgletes kvetkezmnye lehet, hogy a sejt elpusztul, apoptzist szenved.
134
A sejtpusztuls
Intenzv autofgia jellemzi pldul a teljes talakulssal fejld rovarok lrvlis szveteinek sejtjeit a lrva-bb
talakuls sorn, vagy klnbz idegrendszeri megbetegedsekben szenvedk pusztul neuronjaiban (pl. Parkinson
kr).
Krdsek:
1. Sorolja fel a sejtpusztuls jellemz tpusait!
2. Vzolja fel a nekrzis s az apoptzis kztti morfolgiai klnbsgeket!
3. Hatrozza meg, hogy miben klnbzik a nekrzis s az apoptzis folyamatnak lefolysa!
4. Melyek az apoptzist vgrehajt enzimrendszer f komponensei?
5. Milyen szerepe lehet az autofginak a sejtpusztulsban?
135
20. fejezet - A sejtek vizsglatnak

mdszertani alapjai
A sejttani vizsglati mdszerek felbonthatk kpalkot s nem kpalkot mdszerekre. A kpalkot vizsglati
mdszerek elssorban fny- s elektronmikroszkpit jelentenek, mg a nem kpalkot mdszerek kz tartoznak
a centrifugls, elektroforetikus eljrsok, molekulris biolgiai mdszerek stb. Termszetesen a kpalkot
mdszerek ezekhez is sok ponton kapcsoldhatnak, mikroszkppal vizsglhatjuk egy adott frakci sszettelt,
vagy pldul egy gntermk megjelenst.
A kvetkezkben a teljessg ignye nlkl a sejtek vizsglatra alkalmas, tbbsgben klnbz mikroszkpos
mdszerekkel foglalkozunk, elssorban azzal a cllal, hogy megismerjk, milyen krdsekre kaphatunk vlaszt
ltaluk, illetve, hogy rtelmezni tudjuk az ltaluk alkotott kpet.
Fnymikroszkpia
A sejttani vizsglatok a sejtek s sejtalkotk kis mretnek megfelelen gyakorlatilag a fnymikroszkpok
fejldsvel prhuzamosan haladtak. Az els sejttani vizsglatok a holland Anton(y) van Leeuwenhoek (1673-ban
kezdte publiklni eredmnyeit) s az angol Robert Hook nevhez fzdnek. Hook 1665-ben kiadott Micrographia
cm munkjban hasznlja elszr a sejt (cella, cellula) kifejezst, melyet a parafa sejtfalakkal hatrolt egysgeire
vonatkoztatott. Ellenttben Leeuwenhoek mikroszkpjval ami tulajdonkppen egy igen j minsg, s nagy
nagyts lupe volt, Hook sszetett lencserendszert (objektv + okulr) tartalmaz mikroszkppal dolgozott. Br
ennek kpminsge gyengbb volt a Lewenhoek ltal hasznlt szerkezetnl, mgis az optika fejldsvel ebbl a
tpusbl alakult ki a mai mikroszkp. Ahogy az optika fejldtt gy trult fel egyre finomabb rszleteiben a sejt.
Kialakultak azok az eljrsok, amivel vizsglhatv tettk a sejteket, szveteket, vagyis kifejldtt egy kln
mdszertani tudomny, a mikrotechnika.
Fnymikroszkp.
A fnymikroszkpok sszetett nagyts lencserendszerek, melyek alapveten objektvbl s okulrbl llnak. Az
objektvek nagytott valdi kpt az okulrral tovbb nagytjuk, gy a mikroszkp vgleges nagytsa a kt
lencserendszer nagytsnak szorzata. A nagytst ugyan tovbbi lencskkel mg lehetne nvelni, de ennek mr
nincs rtelme, mert a mikroszkp optikai feloldkpessge, vagyis a kp rszletgazdagsga nem nvekszik. A
feloldkpessg ugyanis a mikroszkp objektvjtl s az alkalmazott fny hullmhossztl fgg. Akrmilyen j
minsg is a mikroszkp, a fny hullmhossznak felnl kisebb rszletek mr nem vizsglhatak vele. Ez a
gyakorlatban 0,2 m-t jelent. A hagyomnyos tvilgt mdban mkd mikroszkpok mellett kialakultak specilis
fnymikroszkpos vizsglati eljrsok is. Ezek egy rsze a festetlen mintk jobb kontrasztjt igyekszik elrni
(fziskontraszt, differencil interferencia kontraszt, Hoffmann-fle modulcis kontraszt) mg ms mikroszkpok
az anyag szerkezetnek vizsglatra alkalmasak, mint pldul a polarizcis mikroszkpia. A fnymikroszkpia
legelterjedtebb specilis vizsglati mdszere mindenkppen a fluoreszcens mikroszkpia, s ennek specilis
vltozata a konfoklis lzer scanning mikroszkpia. A fluoreszcens mikroszkpia htterben igen szles spektrum
mikrotechnikai, molekulris biolgiai metodika is ll, mely szinte mindenfle anyag jellst lehetv teszi.
136
A sejtek vizsglatnak mdszertani alapjai
Fziskontraszt mikroszkpia
Az l festetlen sejtek ltalban igen kis kontraszttal rendelkeznek. Az ilyen mintk vizsglatra fejlesztette ki
Zernike a fziskontraszt eljrst, amirt 1953-ban Nobel djat kapott. A hasonlan tltsz, de a fnyt diffraktl,
a fny fzist befolysol rszek az emberi szem szmra nem klnthetk el, mivel a kpskban tallkoz hullmok
nem okoznak fnyintenzits vltozssal jr interferencit. Az eljrs lnyege, hogy az ilyen mintn szrdott
(diffraktlt) hullmoknak a fzist megvltoztatva, mr amplitd- s gy intenzitsvltozst okoz interferencit
lehet a kpskban ltrehozni. Ezltal a klnbz trsmutatj vagy klnbz vastagsg rszletek lthatv
vlnak, annak ellenre, hogy fnyteresztsk hasonl. A fziskontraszt eljrssal alkotott kpek a sejtalkotkat
a szrke rnyalataiban jelentik meg.
Frits Zernike (18881966) holland fizikus; Nobel-djat kapott 1953-ban az ltala alkalmazott fziskontraszteljrsok kifejlesztsrt, klnsen a fziskontraszt-mikroszkp feltallsrt.
Hasonl kontrasztnvel eljrs a Nomarsky fle differencil interferencia kontraszt (DIC) technika, de ennl a
mdszernl az rnyalatok finomabbak, s dombormszeren kiemelik a trsmutat, illetve vastagsgklnbsgeket.
A kp fnyereje s feloldsa is jobb, ezrt ltalban kedveltebb kontrasztnvel eljrs.
Fluoreszcens mikroszkpia
A fluoreszcencia jelensge rgta ismert, de mikroszkpos felhasznlsa csak a fluoreszcens festkek, prbk, az
immunfluoreszcens jells s a termeltetett fluoreszcens fehrjk szleskr alkalmazsval vlt robbansszerv.
A fluoreszcens anyagok a megvilgt fny hatsra gerjesztett llapotba kerlnek, majd a gerjeszts a megvilgt
fnynl nagyobb hullmhossz fny kibocsjtsval sznik meg. Ez a kibocsjtott fluoreszcens fny, a gerjeszt
fnytl szrk segtsgvel elklnthet, gy a fluoreszcens anyagok a mikroszkpban stt httr eltt vilgtanak.
A mdszer gy rendkvl rzkeny s specifikus. A klnbz sznben fluoreszkl jelek egy kpen is elklnthetk
egymstl, ami tbbszrs jellst is lehetv tesz. A fluoreszcens mikroszkpok ltalban nagy teljestmny,
rvid hullmhossz fnyben s UV-ben gazdag fnyforrssal, s klnbz kombincij szrkszletekkel
rendelkeznek. Egyik leghatkonyabb tpusuk a konfoklis lzer scanning mikroszkp (CLSM). Ennl a megvilgt
fnyforrs lzer, mely pontrl-pontra vgigpsztzza a mintt, s detektlja a kivltott fluoreszcens fny erssgt.
A pontokbl szmtgp segtsgvel kpet alkot. Mivel a sajtos konfoklis optikai elrendezs miatt a detektlt
pont tulajdonkppen egy kis trfogategysg (voxel), optikai szeletelsre, s ezltal trbeli kpalkotsra is alkalmas.
137
Ecetmuslica agybl kszlt metszet fluoreszcens festssel (kk: DNS, piros: FIP200 fehrje, zld: p62 fehrje
jellse; Nagy Pter felvtele).
A fluoreszcens jells rendkvl sokfle lehet. A hagyomnyos rtelemben vett festkek specifikusan ktd
fluoreszkl anyagok. Ilyen pldul a DNS-hez ktd DAPI (diamino-fenilindol), vagy a kallzhoz kapcsold
anilinkk. A jellseket forradalmastotta az immunfluoreszcens technika kifejldse. A jellni kvnt anyagot,
ltalban fehrjt (pldul tubulint) kivonjk a mintbl s azzal valamilyen llatot immunizlnak, vagyis bejuttatjk
a vrkeringsbe. Az ellene termelt antitesteket kivonjk s megtiszttjk, majd fluoreszcens jellmolekult
kapcsolnak hozz. Ez az antitest a minthoz keverve csak a keresett fehrjhez kapcsoldik, s fluoreszklva
megjelli azt. ltalban nem kszl minden anyaghoz jellt antitest, hanem az n. szendvics technikt alkalmazzk.
Ekkor a keresett anyag ellen termeltetett antitestet (legyen pldul egr anti tubulin IgG) egy msodlagos
fluoreszcensen jellt antitesttel (pl. az egr IgG-nek az aspecifikus rsze ellen termeltetett, fluoreszcensen jellt
nyl IgG-vel) teszik lthatv. Nagyon sok molekulnak vannak fluoreszcens analgjai, s egyre inkbb levltjk
az izotpos jellst a fluoreszcens mdszerek. Igen nagy karriert futott be egy medzbl izollt fehrje a green
fluorescent protein (GFP). A GFP gnjt megfelel promter utn beptve a sejt specifikusan kezdi termelni, s
ez fluoreszcens mikroszkppal jl kimutathat.
Indirekt (ktlpcss) immunjells.
Fnymikroszkpos mikrotechnika
A mikrotechnikai eljrsok lnyege, hogy a sejtek eredeti llapott lehetsg szerint megrizve azt mikroszkpos
vizsglatokhoz elksztse. Mivel az tvilgtsos mikroszkpban csak viszonylag vkony (10 m nagysgrend)
mintk vizsglhatk az llati s nvnyi mintk ltalban csak metszetkszts utn vizsglhatk. Bizonyos
szvetekbl frissen is lehet kzi, vagy rezg pengj metsz berendezssel, n. vibratmmal elfogadhat vastagsg
metszetet kszteni, az esetek zmben a mintt valamilyen merevt, a metszst lehetv tev anyagba kell
begyazni. Elssorban ez az anyag, s termszetesen a vizsglat clja hatrozza meg a mikrotechnikai procedrt.
A leggyakrabban alkalmazott mdszerek a fagyasztva metszs, a paraffinba s a mgyantba gyazott anyagok
metszse.
138
Mikrotm vegkssel, mgyantba gyazott prepartum metszshez.

A paraffinos s mgyants begyazs viszonylag hossz (akr tbb napos), s klnbz anyagokkal val titatst
ignyl procedra, ezrt a mintt elszr fixlni, rgzteni kell. A fixls clja, hogy megprbljuk az l sejteket,
szveteket olyan llapotban megtartani, ami a vizsglat cljait tekintve a lehet legkzelebb ll a termszetes
llapothoz, s lehetv teszi a kivlasztott festst, jellst, vagy az egyb elvgezni kvnt vizsglatot is. A fixls
sorn gyorsan megljk a sejtet, s kzben rgztjk a struktrt. Elssorban a fehrjk s lipidek rgztse, vagyis
elmozdulsuk, kiolddsuk, mkdsk megakadlyozsa a cl. A fnymikroszkpos vizsglat finomsgtl, s
a tovbbi vizsglati mdszerektl fggen tbbfle fixlszert is hasznlhatunk. Durvbb, fknt szvettani
vizsglatokhoz jl bevltak a koagulatv fixlk (ecetsav, alkohol, kloroform stb., illetve ezek keverkei) de a
finomabb sejttani vizsglatokhoz inkbb a nem koagulatv fixlszerek (paraformaldehid, glutraldehid) alkalmasak.
Ezek hlszer keresztktseket hoznak ltre a fehrjemolekulk kztt. A fixlszerek ltalban savas, vagy
semleges kmhatsak, de ritkn (pl. mitokondriumok vizsglathoz) lgos fixlkat is hasznlunk. A fixls
idtartama a minta mrettl fggen nhny perctl tbb rig tarthat. A fixlszert ltalban ki kell mosni a
mintbl, majd a mintt a begyazshoz vztelenteni kell. Ezt felszll alkohol, vagy aceton sor segtsgvel
vgezzk. Egyes mgyantk esetn nem szksges a teljes vztelents, mert nhny szzalk vztartalom mellet
is polimerizldnak.
Paraffinos begyazs eltt a mintkat mg t kell itatnunk egy paraffint old anyaggal (kloroform, xilol stb.), mivel
sem az alkohol, sem az aceton nem elegyedik a paraffinnal. A szerves oldszerben lev mintkhoz fokozatosan
adagoljuk a paraffint egszen az oldat teltettsgig, majd a mintt a paraffin olvadspontjt meghalad hmrsklet
termoszttba helyezzk. Itt az oldszert elprologtatjuk, s tovbbi paraffint adagolunk hozz. A teljes titats
utn a mintkat kivesszk a termoszttbl. Ekkor a paraffin megdermed, s a minta kszen ll a metszsre.
Mgyants begyazs esetn kztes oldszerre nincs szksg. A mintt magval a polimerizlatlan mgyantval
itatjuk t, majd a polimerizcit hvel, UV fnnyel, vagy kmiailag beindtjuk. Mivel a mgyanta polimerizci
utn mr nehezen vghat, a mintkat megfelel begyaz formba (pl. zselatin kapszulkba) helyezzk a
polimerizltats eltt.
139
Paraffinba gyazott anyag metszse fm kssel. A manyag rcs hordozfelleten rgztett paraffin-blokkbl
ksztett metszetek szalagszeren egymshoz tapadva sorakoznak a ks felletn.
A paraffinba gyazott anyagok metszst mikrotmban fm kssel vgezzk. A metszetek hajlamosak egymshoz
tapadni, gy hossz szalag formjban sorozatmetszetek kszthetk. A metszetekbl a fests eltt ki kell oldani
a paraffint, s a festknek megfelel kzegbe kell tvinni. Mindezt a trgylemezre melegtett metszeteken szoktk
elvgezni. A ksz metszeteket lefedanyaggal s fedlemezzel bortva llandsthatjuk.
A mgyantba gyazott mintk metszsre veg vagy gymnt, ritkbban fm kseket hasznlunk. A paraffinos
technikhoz hasonlan szrazan vgezzk a metszst, mivel a fnymikroszkpos metakrilt gyantk vzben
duzzadnak. A metszeteket egyenknt kell kezelni, s trgylemezre rgzteni. A gyanta kioldsra ltalban nincs
szksg, mivel az jl tltszik. Csak specilis festsekhez, jellsekhez lehet szksg a gyanta kioldsra.
A festst a trgylemezhez rgztett metszeteken vgezzk. A festkek lehetnek hagyomnyos festkek, melyek
viszonylagos specificitssal, ionosan, vagy kovalensen ktdnek a minta bizonyos anyagaihoz, de vgezhetnk a
metszeteken specilis kmiai reakcikat (citokmia), vagy immunolgiai jellseket (immuncitokmia) is.
A fnymikroszkpos mikrotechnikban is alkalmazzk a fagyasztott llapotban trtn metszst, de ez ltalban
csak a metszs megknnytst szolglja, s nem azonos az elektronmikroszkpiban alkalmazott kriotechnikval.
Legtbbszr a paraffinos metszsre alkalmas mikrotm mintatartjt cserlik le egy Peltier-elemmel (flvezet
alap ht-ft egysg) httt mintatartra, de vannak httt kamrba szerelt mikrotmok is (kriosztt) melyben
a ks is httt.
Elektronmikroszkpia
A fnymikroszkpok feloldkpessgnl s nagytsnl, mint lttuk, maga a fny hullmhossza a f korltoz
tnyez. A felgyorstott elektronokkal nagysgrendekkel rvidebb hullmhossz s ezltal sokkal jobb feloldkpessg
s nagyts rhet el. A mai elektronmikroszkpok atomi szint (<1 azaz 0,1 nm) feloldkpessggel rendelkeznek,
br ez a biolgiai mintk vizsglatakor a gyakorlatban nem rhet el.
140
Biolgiai transzmisszis elektronmikroszkp kszlk (TEM)

Alapveten kt f elektronmikroszkpos technikt, s ennek megfelel kszlket kell elklntennk, a
transzmisszis elektronmikroszkpot (TEM) s a scanning elektronmikroszkpot (SEM). A transzmisszis
elektronmikroszkp a minta tvilgtsval, a fnymikroszkpokhoz hasonl mdon mkdik, de fny helyett
gyorstott elektronokat, az optikai lencsk helyett pedig elektromgneses lencsket hasznl. A kpet az elektronok
becsapdsnak hatsra fluoreszkl ernyn ltjuk. A TEM-ben csak nagyon vkony (kb. 50100 nm) mintkat
vizsglhatunk, mivel az elektronok thatolkpessge igen gyenge. A kpet leegyszerstve egy rnykpnek kell
elkpzelni, vagyis ahol a mintban az elektronokat eltrt nagy rendszm elemek vannak, onnan kevs elektron
jut el az ernyig s stt lesz a kp, ahol pedig knny elemek vannak, melyek nem tudjk olyan mrtkben
eltrteni az elektronokat az eredeti irnyuktl ott vilgos lesz a kp. Ezrt festjk (kontrasztozzuk) az
elektronmikroszkpos mintkat nehzfmekkel.
141
Rutin biolgiai scanning elektronmikroszkp berendezs (SEM)

A scanning vagy psztz elektronmikroszkp egy fl transzmisszis elektronmikroszkp, mivel elektronforrssal,
megvilgt lencserendszerrel ugyangy rendelkezik, mint a TEM, de a mintba becsapd elektronok nem a
hagyomnyos kpalkotsi elvek szerint hozzk ltre a kpet, ezrt a kpalkot optika hinyzik. Az elektronsugr
a lzer scanning mikroszkpokhoz hasonlan pontrl-pontra psztzza vgig a mintt, s az onnan visszaszrdott,
vagy a mintban ionizci rvn keletkezett elektronokat detektljuk. Ebbl a pontonknt kivltott jelbl a
szmtgp hozza ltre a kpet. A SEM-ben ezrt brmilyen vastag mintt vizsglhatunk, a kp csak a felszni
rtegbl szrmaz elektronokbl jn ltre. Ennek megfelelen a SEM kp trhats, viszonylag nagy
mlysglessg felszni lekpezs.
Transzmisszis elektronmikroszkp felptse az elektron-nyalb sugrmenetnek feltntetsvel.
142
Scanning elektronmikroszkp felptse, elektronoptikai elemei.
Elektronmikroszkpos mikrotechnika
Az elektronmikroszkpos mikrotechnika sok szempontbl hasonl a fnymikroszkpos mintaelksztshez, s
trtnelmileg abbl is alakult ki. Mivel a nagy feloldkpessg a legfinomabb mintakezelst ignyli, szba sem
jhetnek a koagulatv fixlszerek. Elektronmikroszkpos vizsglatokhoz a rutin fixlszer glutraldehid a fehrjk
trhlstsra, s ozmium-tetroxid a lipidek fixlsra. Ez utbbi tovbbi elnye, hogy egyben kontrasztanyagknt
is mkdik, az ozmium ers elektronszr kpessge miatt. A fixland anyagnak igen kismretnek kell lennie
(egyik irnyban maximum 2 mm), mivel a fixlszer penetrcija lass, s ez vastagabb minta esetn rossz fixlst
eredmnyezne. A fixlst moss, majd vztelents kveti. Ezutn a mintt mgyantval kell titatni (fknt epoxy,
specilis esetben metakrilt), kint formba helyezni, s polimerizltatni. A minta metszst (epoxy gyanta esetn)
n. kddal elltott veg, vagy gymnt kssel vgezzk. Ennek lnyege, hogy a vgs sorn a metszet rszik a
kdban lev vz felsznre, ahonnan knnyen sszegyjthet az elektronmikroszkp mintatartjul szolgl apr
rcsra (mikrostly vagy grid).
143
Ultramikrotm s vezrl egysge (balra).
Szraz vegks, s csnakkal szerelt gymntks. A metszst az vegks trt lvel, illetve a csiszolt s fmhzba
foglalt gymnttal (csillog rsz) vgezzk.
Metszs ultramikrotmmal, gymntkssel.
144
Az ultramikrotmmal ksztett metszetek 3 mm tmrj mikrorostlyokra (grid) kerlnek. A gridek

rcshlzata srsgben, azaz lyukmretben is klnbz lehet. A klnbz mret begyazott anyagokbl
kszlt s ezrt eltr mret metszeteket a megfelel lyukmret rostlyra kell felvenni.
Ultramikrotmmal ksztett metszet a mikrorostly rcshlzatra kitertve (kis nagyts TEM fot a grid
egy rszletvel).
Az sszegyjttt metszeteket mg uranil-acetttal s lom-citrttal kontrasztostjuk (festjk), hogy a TEM-ben
megfelel kontraszt kpet kapjunk. Minl tbb nehzfms ktdik egy adott struktrhoz, annl tbb elektront
fog elnyelni, szrni, eltrteni az eredeti irnybl. Ezek a rszletek stten jelennek meg a kpen, vagyis
elektrondenzek.
A scanning elektronmikroszkpos mintaelkszts csak az els lpsekben hasonlt a TEM-es preparlshoz. A
minta mrete itt nem korltoz tnyez, hiszen csak a felszn j megrzse a feladat. A fixlszer kivlasztsa sem
mindig kritikus. A vztelents utn a SEM-es vizsglatokhoz a mintt egy igen vkony vezetkpes rteggel kell
bevonni, egybknt a beltt elektronok nem vezetdnnek el, s a minta tltdse nagyon lerontan a kpalkots
lehetsgt. A mintt legtbbszr arannyal, sznnel, vagy palldiummal (esetleg ezek keverkvel) vonjuk be,
gy, hogy a fmet nagy vkuumban a mintra gzlgtetjk. A vkuum miatt a mintnak teljesen szraznak kell
lennie. (Egybknt a hagyomnyos mikroszkpokban is, akr TEM, akr SEM nagy vkuum van, mivel az elektronok
a levegben szrdnnak.) A mintk kiszrtst ltalban a kritikus pont szrt berendezssel vgezzk. A
folyamat lnyege, hogy minden anyagnak van egy olyan, n. kritikus pontja a nyoms-hmrsklet diagramon,
amely rtkek felett a folyadk s gz fzis nem klnthet el, vagyis a felleti feszltsg megsznik. Ez lehetv
teszi a mintbl az adott anyag elprologtatst oly mdon, hogy kzben a felleti feszltsg okozta
struktravltozsok elkerlhetk. Mivel a szndioxid kritikus pontja viszonylag knnyen elrhet (7,38 MPa =
145
73,8 bar s 31,1C) a vztelent anyagot folykony szndioxidra cserljk ki, s ezt prologtatjuk el a kszlkben.
Ezek utn a szraz minta mr fmgzlhet s SEM-ben vizsglhat.
Kriotechnika
Az elektronmikroszkpos mintaelkszts egy alternatv lehetsge a minta hirtelen lefagyasztsa s bizonyos
lpsek alacsony hmrskleten trtn kivitelezse. A kriofixls sorn a mintt olyan gyorsan kell lehteni, hogy
a benne lev vz ne tudjon jgkristlyokk alakulni, hanem eredeti formjban szilrduljon meg, vitrifikldjon.
A jgkristlyok ugyanis nagyobb trfogatak, mint a vz s a kristlykpzds is struktra-roncsol hats. Ehhez
a mintt 108 fok/s sebessggel kell hteni, ami csak a felszni kb. 510 m vastagsg rtegben valsthat meg
norml krlmnyek kztt. A nagy nyoms kriofixl berendezsekkel ez a vastagsg kb. egy nagysgrenddel
nvelhet. A kriofixlst ltalban folykony nitrogn hmrskletre (-196C) lehttt propnnal vgzik, mivel
ez hatkonyabban ht, mint az lland forrsban lev, s ezrt gzbuborkokat kpz folykony nitrogn. A
folykony nitrogn hmrskletn gyakorlatilag minden reakci lell, ezrt idelis fixlsi mdszer. A krds az,
hogyan lehet a kriofixlt anyagot vizsglatra alkalmass tenni. A legmodernebb s egyben legkltsgesebb megolds,
ha a mintt egyltaln nem engedjk olyan hmrskletre felmelegedni (kb. -100C), hogy a kristlyosods
megtrtnjen. A mintt ekkor alacsony hmrskleten kell metszeni s specilis elektronmikroszkpban vizsglni.
Mivel ilyenkor a mintban nincsenek nehz atomok, a kpalkots is specilis mdon trtnik. Lehetsg van
azonban arra is, hogy a mintbl a vitrifiklt vizet eltvoltsuk anlkl, hogy az tkristlyosodna. Ehhez vagy
alacsony hmrskleten ki kell oldani (freeze substitution) vagy vkuumban el kell szublimltatni (freeze drying).
Az gy ellltott mintkat ezutn mr a hagyomnyos mikrotechnikai eljrsokkal lehet begyazni, s metszeni.
A kriotechnikkhoz tartozik az a gyakorlati szempontbl (immuncitokmia) fontos mdszer, amikor magt a
metszst alacsony hmrskleten vgezzk, annak ellenre, hogy a fixls nem alacsony hmrskleten trtnt.
A mintkat szacharz oldattal itatjuk t, ami meggtolja a jgkristlyok kialakulst, s egyben knnyen metszhet
fagyott llapotban. A kriomikrotmmal gy ellltott metszetek felolvasztst kveten jellhetk antitestekkel,
s kiszrts utn vizsglhatk az elektronmikroszkpban. Az elektronmikroszkpos immuncitokmihoz az
antitesteket nhny nm tmrj aranyszemcskkel jellik meg, melyek ersen elektronszrk, s gy kontrasztos
fekete pttykknt jelennek meg a mikroszkpi kpen. (Metakrilt gyantba gyazott mintbl kszlt metszetek
is alkalmasak immuncitokmiai jellsre, de eredmnyessgk messze elmarad a kriometszett anyagoktl.)
Az elektronmikroszkpos kp rtelmezse Mtermkek

A mikroszkpi kp rtkelsekor a mikrotechnikai elkszts hatst figyelembe kell venni, nem ltezik ugyanis
olyan mdszer, mely ne okozna valamilyen mtermket. Az anyagok egy rsze kiolddik a mintbl, ms rsze
reakciba lp a felhasznlt reagensekkel, ozmotikus vltozsok torzthatjk a struktrt, sszecsapzdsok,
kristlyosodsi folyamatok befolysoljk az eredeti llapotot. Mtermk keletkezhet az elkszt eljrsok sorn,
a begyazs alatt, a metszet ksztsekor s kontrasztostsakor egyarnt. Albb bemutatunk nhny mtermk
tpust, amely megnehezti, vagy ppen lehetetlenn teszi a mikroszkpi kp rtelmezst.
Mtermk I. A metszet kontrasztostsa sorn annak felletre kerlt csapadkok zavarjk vagy lehetetlenn
teszik az rintett terlet rtkelst. A kialakul csapadk mrete, alakja, kompakt vagy diffz volta a kristly
anyagi minsgtl s kialakulsnak krlmnyeitl fgg. Balra s kzpen hatrozott, szablyos alak, jellemz
mret, a jobb oldali kpen szablytalan alak, sszecsapzdott kristlyok lthatk.
146
Mtermk II. A minta ultramikrotmban val elgtelen rgztsbl vagy a tlsgosan lgy mgyanta
kvetkeztben a metszeten vltoz vastagsg, ritmikusan ismtld, egyenetlen svok jelennek meg, n. chatter
mintzat alakul ki. A ks lnek hibja okozza a metszeten egyenes vonalban vgighzd svot, a kscskot.
(TEM felvtel)
Mtermk III. A ks hasznlatt kveten a ks csnakjnak nem kell tiszttsa s szrtsa miatt baktriumok
telepedhetnek meg s kerlhetnek az jabb metszetek felletre (TEM felvtel).
Mtermk IV. A metszetek mikrorostlyra trtn felvtelekor elfordul, hogy metszet anyaga felgyrdik,
sajt magra visszahajlik. A gyrds terletn a metszet hromszorosan rtegzdve fekete svknt tnik fel. A
fotn a gyrds a kp fels rszben lthat (TEM felvtel).
147
Mtermk V. Amennyiben a metszet tl vkony, vagy a mgyanta nem egyenletesen tlti ki a mintt, a metszet
ksztse sorn vagy az elektronmikroszkpos vizsglat hatsra a metszet kilyukadhat. A lyuk krl a metszet
alakvltozsa az eredeti struktra arnyainak vltozst idzi el. (TEM felvtel)
Ha ismerjk, hogy az adott eljrs milyen mtermk kpzdst okozhatja, relisabban tudjuk rtkelni a kapott
kpet. Azt is figyelembe kell vennnk, hogy egy metszet klnsen a TEM esetben a sejtnek csak egy igen
kis szelete. Egy 100 m (100 000 nm) tmrj sejtbl kivgva egy 50 nm-es szeletet olyan, mintha az egyetem
szerkezett egy vletlenszeren kivgott 1 cm-es szeleten vizsglnnk. A vkony szeletek abbl a szempontbl is
megtvesztek lehetnek, hogy nem tudunk bellk a trbeli viszonyokra kzvetlenl kvetkeztetni. Egy vakulban
tallhat membrnnal krlvett mitokondrium lehet, hogy csak a vakulum beblsdsbe benyl citoplazma
rszlet. Ezek a problmk rvilgtanak arra, hogy milyen fontos a korrelatv fny- s elektronmikroszkpia, vagyis
az azonos rszek fnymikroszkpos, majd elektronmikroszkpos sszehasonlt vizsglata. A trbeli viszonyok
megismersben igen nagy segtsget jelentenek az olyan hromdimenzis rekonstrukcis mikroszkpi technikk,
mint pldul a CLSM (Confocal laser scanning microscopy), vagy az elektrontomogrfia.
Krdsek:
1. Mi a fnymikroszkpok feloldkpessgnek hatra?
2. Milyen mikroszkpok alkalmasak az l sejtek s festetlen mintk kontrasztjnak nvelsre?
3. Milyen alapon csoportosthatk a fnymikroszkpos fixlszerek?
4. Mirt kell a begyazand mintt vztelenteni?
5. Mik a legelterjedtebb begyazanyagok a fnymikroszkpos mikrotechnikban?
6. Milyen f elektronmikroszkp tpusok vannak?
7. Mekkora az elektronmikroszkp feloldkpessge?
8. Mivel fixlunk a rutin elektronmikroszkpos (TEM) vizsglatokhoz?
9. Milyen vastag egy elektronmikroszkpos metszet?
10. Milyen kssel ksztjk az elektronmikroszkpos metszeteket?
11. Milyen vastagsgban tudunk kriofixlni?
Fagyasztva trs, fagyasztva marats,

replikakszts
A pillanatszeren a folykony nitrogn hmrskletre lehttt (fagyasztott) biolgiai mintt megfelel
berendezsben el kell trni, ezt kveten a fagyott trsi felsznrl n. platinaszn replika (levonat) kszthet.
A replika a mintrl levlasztva transzmisszis elektronmikroszkpban vizsglhat. A minta trsekor a fagyott
anyagban a trs a strukturlis szempontbl leggyengbb pontokon, felleteken fut. A megfagyasztott sejtekben
a biolgiai membrnok hidrofb skjban, a kt lipidrteg kztt a leggyengbb a ktds, gy a membrnokra
148
rfut trs beugorva a membrnok belsejbe, azok felsznvel prhuzamosan, a membrn kzpskjban halad.
gy a trs ltal feltrt, mestersgesen ellltott felszn a ketts lipidrteg egyms fel tekint felletnek valamelyike
lesz.
Ezzel az eljrssal a biolgiai membrnok bels szerkezetrl, felptsrl nyerhetnk olyan informcikat,
amelyeket metszetek vizsglatval nem vagy csak rendkvli nehzsgek rn lenne lehetsges. Azon tl, hogy a
trsfelsznek trhats kpt lthatjuk, vizsglhat pldul az integrns membrnfehrjk (intramembrn
partikulumok) elhelyezkedse. A trsvonal az integrns membrnfehrjk nagy rszt megkerli.
A minta elksztsi eljrs lpseinek meghatrozsakor figyelembe kell venni a fagyaszts kvetkezmnyeit,
illetve az ezek kivdsre alkalmazott anyagok hatsait. A mintt elszr rgztik, majd n. krioprotektv anyaggal
itatjk t, ezt kveti a fagyaszts.
Az l, nem fixlt, nem kezelt mintban a fagyaszts hatsra bekvetkez jgkristlykpzds s trfogatvltozsok
krosthatjk a membrnokat, roncsolhatjk a membrnnal hatrolt struktrkat. Ennek kivdsre gyors fagyasztst
s krioprotektv anyagot kell alkalmazni. Ez utbbi elsegti a minta vegszer fagyst (vitrifikci); e clbl
ltalban koncentrlt (30%-os) glicerint alkalmaznak. A krioprotektv anyagok s az l llapot minta sejtjeinek
klcsnhatsa a sejtek eredeti morfolgiai jellemzinek megvltozst okozhatnk, ezrt a krioprotekci eltt a
mintt (az esetek tbbsgben) glutraldehides rgztkeverkben fixlni kell.
A fagyaszts kt lpcsben trtnik, fontos hogy a fagysi folyamat a lehet leggyorsabban vgbemenjen. A mintt
folykony nitrognnel httt cseppfolystott gzba (pl. Freon-22) helyezik. Az elfagyasztott anyag ezt kveten
folykony nitrognbe (-196C) kerl, amelyben trolhat is. Ha a mintt elfagyaszts nlkl helyeznnk a folykony
nitrognbe, a minta felsznn a nitrogn azonnal felmelegedne, buborkkpzds indulna meg (a folykony nitrogn
forrni kezdene), ami tovbb lasstan a fagys sebessgt.
A fagyott minta trsre, az erre a clra kialaktott, zrt, folykony nitrognnel httt, alacsony nyoms trben
kerl sor. A fm mintatartn elhelyezett anyagnak egy folykony nitrognnel httt kst vezetnek. Ennek hatsra
a rideg minta nem metszdik, hanem a ks ltl kiindul hasads mentn trik, gy nem sk, hanem jellegzetes
domborzat mestersges felsznt kapunk. A minta letrt darabjnak eltvoltsa utn a minta felletn marad
membrnrszek a biolgiai membrn egyik, a sejt valamely terhez fagyott lemezbl llnak.
Ha a membrn citoszolhoz (citoplazmhoz) vagy kariolimfhoz (nukleoplazmhoz) fagyott lemeze marad a minta
felsznn, akkor a membrn plazmallomny felli lemeznek (lipidrtegnek) a trsi (a membrn kzpskja
felli) felsznt ltjuk. Ezt a felletet P-felsznnek nevezzk (a P a plazmra utal). Ha a membrn extracellulris
trhez vagy valamelyik organellum bels terhez fagyott lemeze marad a minta felsznn, akkor E-felsznrl
beszlnk. Az E az extracellulris trre (sejthrtya esetben), illetve a sejtbe felvett vagy ott elkpzett
extraxellulris trrel homolgnak tekinthet terekre (a sejtalkotk esetben) utal. A trt felszneken mutatkoz
szemcsk, vagyis a membrn fehrjinek lenyomatai jellemzen a P-felszneken mutatkoznak nagyobb szmban.
A trt, fagyasztott prepartumban a membrnok bels felszne trul fel a legszebben. Ha a trst kveten azonnal
elksztjk a replikt, e felsznek tanulmnyozsra nylik lehetsg. A mdszer megnevezse fagyasztva trs
(freeze fracture). Ha a fagyasztva trst kveten kialakult felsznrl a fagyott vizet (nhny percig) hagyjuk
szublimlni, akkor a trt felsznek mellett a membrnok termszetes (citoszol, kariolimfa, extracellulris tr vagy
az organellum bels tere felli) felsznei is lthatv vlnak. A minta vizes fzisba gyazd struktrinak a trt
felsznnel rintkez rszei szabadd vlnak, kiemelkednek, a fellet bemardik. Ezrt nevezik ezt a mdszert
fagyasztva maratsnak (freeze etching).
A trst vagy a trst s maratst kveten kszl el a replika. A kialakult felsznre 45-os szgben, platina
elprologtatsval kialaktott platina gzt juttatunk, amely a prepartum hideg, fagyott felsznn vkony, vltoz
vastagsg bevonatot kialaktva csapdik le. A platinafilm vastagsga a ferdn a mintra rkez platina atomok
miatt a felszn domborzati viszonyaitl fggen alakul. A kiemelked struktrk ellenttes oldaln kevesebb platina
rakdik le, st platinamentes terletek is kialakulhatnak.
A platinafilm egyenetlen, egyes helyeken hinyos, ezrt a felsznre merlegesen szenet (grafitot) gzlve egyenletes
sznrteget hozunk ltre, mely hordozrtegknt tartja meg a platinafilmet. Ezt kveten a felsznnek megfelel
domborzat platinaszn-hrtyrl a biolgiai mintt felolvasztva, lemaratva megkapjuk a replikt. A replika
transzmisszis elektronmikroszkpban vizsglva a platina-rnykols miatt trhats kpet ad. A kprl
149
megllapthat a platina gzls irnya, ami szksges a replika fotjnak helyes rtelmezshez: a fotkon a
platinarnykok fehrek, a platinalerakdsok sttek lesznek!
Patkny blhmsejt szoros sejtkapcsol struktrja rszlete. A replika fotjnak fels rszn a mikrobolyhok
sora, alattuk a sejtkapcsol struktra hlzatos elemei ltal kpzett kazetti lthatk (fagyasztva trt ksztmny,
TEM fot).
Krdsek:
12. Milyen szempontokat kell figyelembe venni a fagyasztsi eljrs sorn?
13. Mi a klnbsg a fagyasztva trt s maratott felsznek kztt?
14. A membrnokra rfut trs a membrn mely felszneit trja fel?
15. Indokolja a P- s E-felszn elnevezst!
16. Melyik felszn gazdagabb intramembrn rszecskkben?
17. Vzolja fel, hogyan kszl a replika?
18. Hogyan azonosthat a platina-rnyk a kinyomtatott pozitv kpen?
19. Hogyan lehet felismerni s megklnbztetni a P- s E-felsznt?
A citokmiai mdszerek alapjai

A sejtek kmiai komponenseinek kimutatsval a citokmia foglalkozik. A citokmiban alkalmazott mdszerek
lnyege olyan eljrsok, protokollok kidolgozsa, amelyek alkalmasak a kivlasztott vegylet sejten belli
elhelyezkedsnek (lokalizcijnak) feltrsra, azonostsra. A mdszerek alapja olyan (akr tbb lpsbl
ll) kmiai vagy biokmiai reakci, amelyben a kpzd reakcitermk csapadk (nem olddik fel s nem diffundl
el kpzdsnek helytl) s mikroszkpban jl lthat (sznes vagy elekrondenz). A korai mdszerek a sejtek
makromolekulinak s szervetlen alkotelemeinek kzvetlen kimutatsra, azonostsra szolgltak (ler
hisztokmia).
150
Sznhidrt-kimutats PAS festssel (PAS perjdsavSchiff-reagens) egr utbl metszetn. A pspklila szn
jelzi a magas sznhidrttartalm vladk elhelyezkedst a metszeten.
A mdszertan fejldsnek s a kutatsok ignyeinek megfelelen a sejtekben vgbemen folyamatok kimutatsra,
nyomon kvetsre indirekt eljrsok is megjelentek (funkcionlis hisztokmia). Ez utbbi esetben pl. enzimeket
ismert reakcimechanizmusuk alapjn (enzimcitokmia), egyedi fehrjket pedig immunolgiai mdszerrel
(immuncitokmia) mutathatunk ki.
Enzimcitokmia
A XX. szzad els felben a sejttani kutatsok eredmnyekppen a gyorsan fejld biokmiai kutatsok sorn
szmos enzim, enzimrendszer azonostsra kerlt sor. Hamar kialakult az a kp, hogy a sejt anyagcserjt a
legegyszerbb folyamattl a legbonyolultabbig az enzimek katalizljk. Az enzimolgiai kutatsok jelentsgt
az anyagcsere-folyamatok feltrsban, s megrtsben elrt eredmnyek tmasztjk al. Az enzimek sejtekben
trtn kimutatsra kidolgozott n. enzimcitokmiai mdszerek a XX. szzad msodik felben, az 1980-as vekig
hdtottak, de jelentsgket a mai napig sem vesztettk el.
Az eljrsok alapja az, hogy a sejtben vagy sejtkztti llomnyban elhelyezked enzimet olyan szubsztrttal
reagltatjuk, amellyel reakciba lp, s a kpzd reakcitermk a prepartumban azonosthat, megfigyelhet.
A prepartum elksztse (mintavtel, metszetkszts) sorn alkalmazott mikrotechnikai lpsek htrnyos hatsai
ellenre a ksztmnyben tallhatk olyan enzimek, melyek mkdkpessgket megtartottk. Ebben az esetben
megfelel krlmnyek (hmrsklet, pH, ionkoncentrci, kofaktorok) biztostsval aktivlhatk, s megfelel
szubsztrtjuk (oldhatatlan csapadkot ad, az adott enzimfehrjre nzve specifikus, nem bomlik el spontn)
hozzadsval egy vagy tbb lpsben sznes csapadk kpezdhet. A csapadk elhelyezkedse az aktv enzim
lokalizcijt jelzi.
Gmri lgos foszfatz kimutatsa a vesetubulusok sejtjeiben egr vese hosszmetszetn. A sejtek nem
ismerhetek fel, mert az alkalmazott nagyts ehhez tl kicsi.
151
Az enzimek kimutatsra szolgl eljrsok alapveten ngy csoportba sorolhatk:

1. A szubsztrt a reakci eredmnyekppen szntelen reakcitermkk alakul t. Utbbi a szubsztrttal egyttesen
alkalmazott vegylettel pillanatszeren lejtszd reakcija sorn alakul t sznes, oldhatatlan csapadkk.
2. Ha az enzim s szubsztrt klcsnhats eredmnye egy szntelen, de oldhatatlan vegylet, akkor a sznes
csapadk kialaktsra az enzimreakcit kveten is van lehetsg.
3. A szubsztrt oldhatatlan, sznes csapadkk alakul az enzimreakci hatsra. Az alkalmas szubsztrtok szma
igen korltozott!
4. Az enzimek irreverzibilisen blokkolhatk aktv centrumaikhoz kovalensen ktd inhibitorokkal. Az inhibitorhoz
jelzmolekult ktve a gtolt enzim lokalizcija igen pontosan azonosthat. Specilis laborignyei miatt ritkn
alkalmazott mdszer.
Br l llapot mintn is lehet enzimcitokmiai vizsglatot vgezni, de ilyen mintkon sok a tves reakci, hamis
httrjellds. A minta fixlsa alapvet fontossg. Olyan rgztszert kell hasznlni, mellyel biztosthat az
enzimek azonnali irreverzibilis immobilizcijt, de az enzim aktivitsnak megrzsvel. Enzimcitokmiai
eljrsokban rgztszerknt legelterjedtebben pufferelt formaldehid- s/vagy glutraldehidet, alkalmaznak.
Lnyeges a fixlszer gyors penetrcija.
Az albbi hrom kpbl ll sorozaton harntcskolt izom azonos terletrl kszlt keresztmetszeti ksztmnyeken
ATP-z aktivitsnak kimutatsa tanulmnyozhat. Az enzimreakci sttbarna csapadk kpzdsvel jr. A
kpek abban klnbznek, hogy a szubsztrttal trtn inkubls eltr pH-n zajlott. Ezrt a kpeken eltr pH
optimumon mkd TP-z enzimek reakcija, s lokalizcija mutatkozik meg. gy lehetsgess vlik pl. az
eltr miozin fehrjk kimutatsa.
TP-z aktivits kimutatsa; pH=4,2.
152

Az enzimcitokmiai eljrs mtermk(ek) kpzdsvel jrhat (elgtelen vagy hibs fixls, a keletkez csapadk
kiolddik stb.), gy a ksztmnyek kirtkelsnl fokozott vatossggal kell eljrni, s az enzimreakci specifitst
kontroll prepartumokkal kell igazolni. A kontroll lehet pozitv, amelyben az alkalmazott enzimreakci biztosan
(bizonytottan) lejtszdik, ezzel lehet igazolni az alkalmazott reakci mkdst. A negatv kontrollal lehet kizrni
a hamis eredmnyeket: a szubsztrt kihagysval vagy specifikus gtlszerek alkalmazsval vagy az enzim hvel
trtn inaktivlsval elmletileg a csapadkkpzds elmarad.
Az enzimcitokmia alkalmazhat elektronmikroszkpos vizsglatokhoz ksztett metszeteken is. A hiteles
eredmnyek elrshez fokozottan kell gyelni a minta ultrastruktrjnak megrzsre, a megfelel elektrondenz
csapadk biztostsra (pl. fmsk alkalmazsval), s a csapadk diffzijnak kizrsra (pl. alacsony hmrsklet
alkalmazsval).
Elektronmikroszkpos enzimcitokmia. Savas foszfatz kimutatsa lizoszomlis appartus elemeiben (elektrondenz

struktrk; Kis Viktor felvtele).
Immuncitokmia
Az utbbi 2530 vben egyre szlesebb krben alkalmazott, az immunbiolgiai mdszerek csaldjba tartoz
eljrs. Alapja az antign-antitest reakci, vagyis az, hogy az antitestek nagy specifitssal ktdnek azon
molekulkhoz, amelyekkel szemben termeldtek. Az antitest (immunglobulin tpus vrfehrje) e tulajdonsgt
lehet felhasznlni arra, hogy egy sejtben, egy metszeten vagy esetleg sejttenyszetben a megfelel antignek
jelenlte, lokalizcija nagy pontossggal kimutathat legyen.
Antign lehet minden nagy molekulasly vegylet (fehrjk, peptidek, egyes lipidek, sznhidrtok), leggyakrabban
valamely fehrje. (Antign cljra kis molekulatmeg anyagok is felhasznlhatk: megfelel hordozmolekulkhoz
ktve, az gy kialaktott molekulval szemben knnyen termeltethet immuncitokmiai clra felhasznlhat antitest.)
A mdszer lnyege, hogy a kimutatand anyagot, pl. fehrjt egy llatbl (pl. patkny) izolljk s tiszttjk, majd
bejuttatjk egy msik llatfaj (pl. nyl) szervezetbe. A patknybl szrmaz fehrjt a nyl immunrendszere
antignknt azonostja, majd ellenanyagot (primer antitest) kpez ellene. A termeld antitestet a nyl vrbl
153
kivonjk, tiszttjk. Ez az antitest patknybl szrmaz mintn specifikusan ktdhet a megfelel fehrjhez
(antignhez). A kttt antitestek nem lthatk, ezrt azokat mikroszkposan is azonosthat jellssel kell elltni.
Ha a jellst kzvetlenl a primer antitesthez ktjk, akkor direkt immuncitokmiai jellst alkalmazunk. A
jells lehet egy enzim, ekkor az antitestet enzimcitokmiai mdszerekkel lehet lthatv tenni, a minta a kialakul
csapadk tulajdonsgaitl fggen fny- vagy elektronmikroszkpban vizsglhat. E clra gyakran a peroxidzreakcit alkalmazzk, mely mr igen kis jellds mellett is diaminobenzidin (DAB) s hidrognperoxid jelenltben
intenzv barna, oldhatatlan reakcitermket ad. A jells lehet egy fluoreszcens festkmolekula (n. flourofr, pl.
fluorescens izotiociant FITC) is, ez esetben a minta fluoreszcens mikroszkppal tanulmnyozhat. A direkt
eljrs elnye, hogy egyszeren s gyorsan kivitelezhet, de relatve sok antitestet ignyel, s magas lehet a tves
httrjells.
Az antitest Y alak molekula, melyek kt karja tartalmazza a varibilis antign kthelyeket. A molekula szra
tbb olyan konzervatv, az adott fajra jellemz szekvencit tartalmaz, melyekkel szemben tovbbi antitestek
termeltethetk. Ezrt az gy ellltott (msodlagos) antitest a primer antitestet szolgltat fajbl ellltott antitestek
jellsre felhasznlhat.
A direkt immuncitokmiai jells smja.
Az indirekt immuncitokmiai jells smja.

Ha a nylbl szrmaz (primer) antitestet egy harmadik llatfaj egyedbe (pl. kecske) juttatjuk, akkor az ott
antignknt jelenik meg s ellenanyag-kpzdst (szekunder antitest) indukl. A szekunder antitest specifikusan
fog ktdni a primer antitest megfelel rgijhoz. A patknybl szrmaz mintn a nyl szervezetbl kivont
primer antitest specifikusan ktdik az antignjhez (a patkny adott fehrjjhez), a jellmolekulval sszekapcsolt
szekunder antitest szintn specifikusan ktdik a primer ellenanyaghoz. Ez az indirekt immuncitokmiai eljrs.
Az eljrs munkaignyes, de egy primer antitesthez tbb szekunder antitest is ktdhet, gy a jells ersebb, a
mdszer rzkenyebb, mint a direkt eljrsnl. Az indirekt eljrsok kztt szmos tbblpses protokollt dolgoztak
ki. A tbblpses immuncitokmiai reakcisor lehetsget biztost az antignkimutats rzkenysgnek nvelsre.
Az immuncitokmiai vizsglatokat elektronmikroszkpos mintkon is lehet vgezni, ha a jellsre hasznlt
reakcitermk megfelel elektronelnyel komponenst is tartalmaz. Ez lehet enzimreakci eredmnyekppen
ltrejv nehzfmtartalm (pl. ozmium) csapadk, vagy a szekunder ellenanyaghoz adszorbeltatott meghatrozott
mrettartomnyba es (115 nm tmrj) kolloidlis aranyszemcse (immunogold eljrs). Elbbi esetben a
nehzfmet tartalmaz csapadk, az utbbiban a szablyos s egysges mret aranyszemcsk rnyka jelli az
antign helyt a metszeten.
154
Immunogold eljrssal jellt elektronmikroszkpos immuncitokmiai ksztmny. Mjsejt vladkszemcsjn

lthat kerekded fekete pttyk az aranyszemcsk kpei. A mintn kt, eltr mret aranykolloiddal jellt antitest
lokalizcija lthat (ketts jells).
Termszetesen az immuncitokmiai eljrsok sorn is keletkezhetnek hamis jelek (pl. az alkalmazott antitestek
aspecifikus ktdsvel, keresztreakcik kialakulsval), melyeket megfelel kontroll alkalmazsval lehet az
eredmnyek rtkelsnl figyelembe venni.
Krdsek:
20. Csoportostsa az enzimek kimutatsra szolgl eljrsokat!
21. Mi az antignantitest reakci lnyege?
22. Milyen molekulk alkalmasak antignknt trtn felhasznlsra?
23. Mi az eljrsbeli klnbsg a direkt s indirekt immuncitokmiai eljrsok kztt?
24. Mi a jelentsge az indirekt eljrsban hasznlt szekunder antitestnek alkalmazsnak?
25. Mi az elnye az indirekt eljrsnak?
26. Mekkora lehet a jellshez felhasznlt kolloidlis aranyszemcsk mrete?
27. Milyen eszkzzel lehet tanulmnyozni az immunogold eljrssal ksztett prepartumokat?
28. Mirt alkalmas az aranykolloid jells elektronmikroszkpos minta kezelsre?
Autoradiogrfia
A radioaktivits jelensgt Henri Becquerel fedezte fel a XIX. szzad vgn (1896) s Marie Curie nevezte el
(1898). A XX. szzad elejn Hevesy Gyrgy dolgozta ki a radioaktv nyomjelzs elvt s erre alapozva a radioaktv
nyomjelzs technikjt (HevesyPaneth, 1913), mely a fizikai, kmiai s biolgiai folyamatok/jelensgek
tanulmnyozsban a ms mdszerekkel nem kvethet folyamatok s azok dinamikjnak vizsglatt tette lehetv.
A mestersges radioaktivits felfedezse (1935), majd ezt kveten a mestersges radioaktv izotpok ellltsa
nagy lkst adott a mdszer fejldsnek.
155
Hevesy Gyrgy (18851966) vegysz; Nobel-djat kapott 1943-ban az izotpok nyomjelzknt trtn
alkalmazsrt a kmiai folyamatok vizsglathoz.
A radioaktv nyomjelzsi technikk fejldse s finomodsa lehetv tette az l sejtekben vagy a szervezetben
lezajl anyagcsere folyamatok, fiziolgiai vltozsok idbeni s trbeni alakulsnak kvetst. Orvosi terleten
trtn alkalmazsval kialakult s fejldsnek indult a nukleris medicina.
A sejtek anyagcserjben igen sok kismolekulj vegylet jtszik szerepet, egy rszk ms, nagyobb molekulkba
vagy ppen makromolekulkba pl be. Ha egy bepl kismolekulj anyagot radioaktv izotppal jellnk,
akkor a jells ksbb megjelenik a nagymolekulban is, melynek lokalizcija megfelel mdszerrel
meghatrozhat. Az autoradiogrfia alkalmas gygyszerhatstani vizsglatokra, anyagcsere s lettani folyamatok
nyomon kvetsre, gnexpresszi kimutatsra stb. gy pl. egy aminosav jellsvel nyomon kvethet, hol veszi
fel a sejt a jellt molekulkat, azok hol s milyen sebessggel plnek be az ppen szintetizld fehrjkbe, s
mi lesz a jellt fehrjk sorsa.
Biolgiai mintkon a H, C, N, O, P, S s I radioaktv izotpjai alkalmasak a jellsre. Az lettudomnyi kutatsokban
a -sugrz izotpokat (3H, 14C, 32P, 35S) alkalmazzk a leggyakrabban. Anyagcsere-vizsglatokban fleg a 3H,
14
C jelzett vegyleteket, fehrjeszintzis kutatsban a 3H, 14C vagy 35S jelzett aminosavakat, nukleinsavak
szintzisnek vizsglatra a 32P jelzett nukleotidok hasznlata terjedt el. A kutatsokban leggyakrabban hasznlt
izotp a trcium (a hidrogn izotpja: 3H).
Az izotppal jellt molekult (aminosavakat, nukleotidokat, sznhidrt monomereket) injekcival lehet bejuttatni
a ksrleti llatba, vagy a tenyszt mdiummal a sejt-, szvettenyszetbe, majd miutn a sejtek felvettk azokat
beplnek a szintetizld a makromolekulkba. Br a jellt molekulk tulajdonkppen miniatr sugrforrsok,
maga a jellds szabad szemmel vagy mikroszkppal nem detektlhat, lthatv kell tenni azt. Ebbl a clbl
a kirtkelend mintt (szvettani metszetet, sejttenyszetbl szrmaz sejteket) vkony fnyrzkeny (ezsthalogenid szemcsket tartalmaz) emulzis rteggel kell lefedni. Az izotpbl kilp sugrzs behatolva az
emulziba, klcsnhatsba lphet az abban elhelyezked ezst-halogenid szemcskkel (expozci), ltens kpet
kialaktva. Az exponlt szemcsk hagyomnyos fnykpszeti eljrssal lthat ezstszemcskk alakthatk, a
nem exponlt szemcsk az emulzibl kimoshatk. gy az eredmny az izotpjelzsek kzelben (idelis esetben
pontosan felette) elhelyezked stt ezstszemcsk halmaza.
Az gy kialakul autoradiogram denzitomterrel kirtkelhet. A feketeds a sugrzs intenzitsval szles
tartomnyban arnyos ezrt kzelt mennyisgi kirtkelsre is alkalmas. A mdszer lehetsget ad nagyobb
kiterjeds akr az egsz testet magba foglal mintk vizsglatra is (makro-, illetve egsztest autoradiogrfia).
Ha a minta fny- vagy elektronmikroszkpos clra kszlt metszet, az ezst fny- s elektronelnyel tulajdonsgai
miatt a prepartum (megfelel elksztst kveten) fny-, illetve elektronmikroszkpban is vizsglhat (mikroautoradiogrfia).
Patkny nagyagy keresztmetszet autoradiogram. Baloldalon dopamin transzporter jellt, jobb oldalon negatv
kontrol.
156
Az autoradiogram minsge fgg az alkalmazott izotp tulajdonsgaitl, a sejtek ltal felvett jellt molekulk
mennyisgtl, a sugrzs mintban, illetve emulziban megtett tjnak hossztl. Ha vastag a minta, n a sugrzs
elnyeldsnek s szrdsnak valsznsge. Ha vastagabb az emulzi a benne kialakul kp denzitsa n
(nagyobb az eslye a klcsnhats bekvetkeztnek tbb ezstszemcse keletkezhet), de a sugrzs nagyobb
terleten is szrdhat, ezrt az ezstszemcsk nem felttlenl a jellt anyag felett jelennek meg, kevsb pontos
az autoradiogram.
Krdsek:
29. Mi a radioaktv nyomkvetsi eljrs alapja?
30. Melyek a jellshez leggyakrabban felhasznlt izotpok?
31. Hogyan lehet mikroszkpban lthatv/tanulmnyozhatv tenni a radioaktv jellst?
32. Mi befolysolja az autoradiogram minsgt?
33. Kinek a nevhez ktdik a radioaktv nyomkvetsi eljrs elvnek s technikjnak kidolgozsa?
A sejtalkotk centrifuglis leptssel trtn

elklntse Sejtfrakcionls
A sejt struktrjt, a sejtorganellumok szerkezett, kiterjedst, alakjt, mennyisgt s elhelyezkedst fny- s
elektronmikroszkppal is lehet vizsglni. Azonban a sejt alkotelemeinek kmiai sszettelrl, az egyes sejtalkotk
mkdsrl rszletesebb ismerteket lehet gyjteni gy, hogy ha az organellumokat izolljuk a sejt tbbi
alkotelemtl s ellltjuk tiszttott, dstott frakciikat (sejtfrakcionls).
A sejtalkotk s bizonyos makromolekulk frakcikban trtn elklntsre egyes fizikai tulajdonsgaikban (pl.
mretkben, alakjukban, srsgkben) megmutatkoz klnbsgeket lehet kiaknzni. Ehhez sejttenyszetbl
vagy valamely szervbl vett minta egyarnt alkalmas lehet. A legmegfelelbb az olyan szervbl szrmaz minta,
amelynek sejtllomnya tlnyom tbbsgben azonos sejttpusbl ll, s relatve kevs ktszveti rost tallhat
benne. Ilyen szerv pldul a mj vagy az izom.
Az eljrs alapveten kt f szakasza a homogenizls, azaz a sejt megbontsa, feltrsa a sejtalkotk hozzfrhetv
ttelre, valamint a centrifugls vagyis a sejtorganellumok centrifuglis leptssel trtn elvlasztsa a frakcik
ellltsra.
Homogenizls
Szervekbl, szvetekbl szrmaz mintk esetben a sejteket szveti ktdskbl (sejtsejt, s sejtECM
kapcsolatok!) fel kell szabadtani. A sejtfelszni molekulris kapcsolatokat s a sejtkapcsol struktrkat bontani
kell. Ez megfelel ion-sszettel oldatok, enzimek, mechanikai behats vagy ezek kombincija alkalmazsval
valsthat meg.
A sejtalkotk a sejt "feltrsval" vlnak hozzfrhetv. Ez a sejthrtya felszaktsval s a sejtvz feldarabolsval
rhet el, ennek megvalstsra mechanikai, fizikai, fizikai-kmiai mdszerek alkalmazhatk. Az albbi mdszerek
tbbsgnl a sejtalkotk egy rsze srl, klnsen a kiterjedt kompartimentumok (pl. SER, DER) feldaraboldnak,
sszefgg membrnjaik vezikulkk tagoldnak (vezikularizci).
Hipozmotikus oldatba helyezve a sejteket (ozmotikus sokk), a membrnnal hatrolt terekbe vz ramlik be, ami
a membrnnal hatrolt terek megduzzadshoz, vgl a membrn felszakadshoz vezet.
A konyhai turmixgp mkdsi elvre pl, de specilis kikpzs n. kses homogeniztor klnsen detergens
s/vagy szerves oldszerek alkalmazsval kombinlva makromolekulk (pl. DNS) szeparlsra is alkalmas.
157
Az ultrahanggal trtn kezels alkalmas a sejtfal szttrsre is, gyakran sejtkultrk, sejtszuszpenzik sejtjeinek
feldolgozshoz hasznljk. Az ultrahangos homogeniztorral j eredmnnyel nyerhet ki egy tiszttott sejtfrakci
organellumainak beltartalma.
Sejtszuszpenzi kismret rsen, meghatrozott nyomssal trtn tprselsekor (french press) a sejtekre hat
nyrfeszltsg s a nyomsvltozsok hatsra szakad fel a sejthrtya.
A sejtekre hat nyrfeszltsget s a kialakul folyadkelegy bels srldst hasznlja fel a sejtek feltrsra a
Potter-Elvehjem homogeniztor. Ez egy vegcsbl s a csbe preczen illeszked csiszolt veg vagy teflon
dugattybl ll. A dugatty kzzel (kis mennyisgek feldolgozshoz) vagy motorral (5 ml-es mintatrfogat felett)
mozgatva a tengelye krl forgathat. A csbe helyezve a kisebb szvetdarabokat tartalmaz mintt vagy
sejtszuszpenzit, a dugatty forgatsa kzben az anyagot tbbszr t kell prselni a cs s a dugatty fala kztti
rsen. Ennek hatsra a szervdarabkk sztesnek, a sejtek felszakadnak, a sejtorganellumok kisodrdnak. Sokoldal,
tbb paramterben jl szablyozhat, ezrt szles krben alkalmazott mdszer.
Potter-Elvehjem homogenizl cs s teflon dugattyja.
A Potter-fle homogenizl mkdsi elve.

A kialakul szuszpenzi, a homogeniztum, diszperz rendszer, melyben sejttredkek, a sejtorganellumok s
tredkeik, a sejtkztti llomny elemei tallhatk meg. A csak sejtekbl, szvetekbl, szervdarabokbl ksztett
homogeniztum tl sr (tl nagy bels srlds) lenne, ezrt a feltrs eltt a feldolgozand anyaghoz n.
homogenizl mdiumot kell adni (1 g minthoz 35 ml mdium). A homogenizl mdium rendkvl
leegyszerstve modellezi a sejten belli krlmnyeket: tartalmaz egy- s ktrtk kationokat, aniont, pufferkomponenst (a pH belltsra) s a megfelel ozmolalits belltsra szolgl vegyszert (ltalban szacharz,
cziumklorid stb.).
A homogenizls lehet enyhe vagy durva. Elbbi esetben a sejteket, sejtalkotkat gyengbb behatsnak tesszk
ki, a srlkenyebb organellumok jl megtarthatk, de a sejtek feltrsa nem egyenletes, nagyobb sejtrszletek
megbontatlanul maradhatnak. A durva homogenizls eredmnye egy egyenletes feltrs, de ennek ra az
rzkenyebb organellumok nagymrtk srlse. Ez utbbi esetben a srlt sejtalkotkbl kiszabadul anyagok
ms frakcikat szennyeznek.
158
Patkny hasnylmirigybl enyhe homogenizlssal ksztett prepartum. A DER ciszterni nem vltak el
egymstl s a sejtmagtl.
Mjbl ellltott DER frakci jl mutatja az ers homogenizls hatsra lejtszd vezikularizci eredmnyt.
A homogeniztum ellltsa sorn gondoskodni kell a kiszabadul enzimek aktivitsnak gtlsrl alacsony
(kzel 0C) hmrsklet biztostsval, szksg esetn enzimgtlk (pl. hasnylmirigybl vett minta feldolgozsnl
tripszin inhibitor) hozzadsval.
A homogeniztumbl centrifuglis leptssel nyerhetk ki a klnbz sejtalkotk frakcii.
Centrifugls
A homogeniztumban a sejtalkotk rszecskinek mozgst alapveten a nehzsgi ertr, illetve az lept
kzegben fellp srldsi erk hatrozzk meg. A tnyleges mozgst befolysolja a rszecskk mrete (trfogata),
alakja (fellete) s srsge, pontosabban az lept kzeg s az leped rszecske srsge kztti klnbsg.
Az lept kzegnl nagyobb srsg rszecskk a nehzsgi er irnyba haladva lepednek (szedimentci),
a kzegnl kisebb srsgek pedig ellenttes irnyban elmozdulva flzdnek (flotci). Az lepeds (vagy
flzds) sebessge egyenesen arnyos a rszecske s a kzeg srsgklnbsgvel, ngyzetesen arnyos a
rszecske mretvel s fordtottan a kzeg bels srldsval. Mivel a sejtorganellumok s tredkeik a kolloid
mrettartomnyba tartoznak (tmrjk: 1 nm0,5 m), ezrt rszecskik sebessge mg viszonylag nagy
srsgklnbsg esetn is nagyon csekly. Ezen tlmenen az 1 m s ennl kisebb tmrj rszecskk hmozgsa
mr rzkelhet mrtkben a gravitcis mozgs ellen hat. Ezrt a gyakorlatban a sejtorganellum frakcik
ellltsra a norml nehzsgi ertr alkalmazsa csak igen korltozottan felel meg.
A megolds az lepedsi (flzdsi) sebessg megnvelse centrifuglis ertr alkalmazsval. Az erre a clra
kifejlesztett eszkzk a laboratriumi (s ipari) centrifugk, melyek kzl mg a legkisebbek is a nehzsgi ertrnl
nagysgrenddel nagyobb centrifuglis ertr ltrehozsra kpesek. Sejtfrakcionlsi feladatokhoz az n. preparatv
ultracentrifuga a legalkalmasabb. (Ultracentrifugnak nevezik a 20 000/perces fordulatszmnl nagyobb teljestmny
centrifugt.)
Azt, hogy a forgstengelytl mrt adott tvolsgban a centrifuglis gyorsuls hnyszorosa a nehzsgi gyorsulsnak
a relatv centrifuglis ertrrel (RCE) fejezik ki. A gyakorlatban alkalmazott centrifuglis gyorsuls a nehzsgi
159

lland 102105-szeres tartomnyba esik, ilyen krlmnyek kztt a hmozgs s a gravitcis mozgsok lepts
vagy flzds ellen hat komponensei elhanyagolhatak!
A kzegnl nagyobb srsg (leped) rszecskk centrifuglis, mg a kzegnl kisebb srsg (flzd)
rszecskk ezzel ellenttes irny centripetlis mozgst vgeznek. A rszecskk sebessge egyenes arnyban n
a forgsi tengelytl mrt tvolsggal, illetve a fordulatszm ngyzetvel.
A centrifuglsos elvlasztsi mdszer elmleti alapjait megad egyenletrendszer a gravitcis mozgst, a srldsi
ert (Stokes-egyenlet) s a centrifuglis gyorsulst ler egyenleteken alapszik. A felhasznlt sszefggseket
idelis rendszerre vonatkoztatjuk: a rszecskk 50 nm krliek, gmbszerek, a kzeg srsge (kb. 1 g/cm3),
viszkozitsa (kb. 1 centipoise), mely a 20C-os vzvel egyez. (A valsgban a sejtfrakcionlskor az leptend
rszecskk mrete szles skln szrhat, alakjuk jelentsen eltrhet a gmbtl.)
A centrifuglis ertrben leped (flzd) rszecske fontos jellemzje egysgnyi szggyorsulsra vonatkoztatott
lepedsi (vagy flzdsi) sebessge, amit a rszecske lepedsi egytthatjnak (szedimentcis koefficiensnek)
neveznek. Jele: s, dimenzija szekundum, rtknek nagysgrendje vizes kzegben s makromolekulk esetben
1013 s, amit nagyobb rszecskk, pl. sejtorganellumok esetben knyelmi okokbl 1013-szorosban, n.
Svedbergben (S) fejeznk ki (S=10-13 s). Pldul az eukarita riboszma kis alegysgnek lepedsi egytthatja
40S, azaz s=4x1012.
Theodor Svedberg (18841971) svd fizikokmikus; a diszperz rendszereken vgzett kutatsairt kapott Nobeldjat 1926-ban. Munkssgval alapveten hozzjrult a fehrjemolekulk centrifuglis lepedsi sebessgnek
s ezltal molekulatmegnek mrsre alkalmas analitikai ultracentrifugls technikjnak kifejlesztshez,
A gyakorlatban a percenknti fordulatszmot (RPM revolutiones pro minutum), a centrifugls idejt percekben
(vagy rkban), s az RCE rtkt (ltalban 1000xg-ben kifejezve) adjk meg.
Balra fix mintatart lls szgrotor, jobbra a fordulatszm nvelsre az erhatsoknak megfelelen
kilendl mintatartkkal az n. kilendl rotor (a rotortart talpakon).
A differencilis centrifugls
E mdszerrel a sejt alkot elemeinek egymstl klnbz fizikai tulajdonsg frakciit llthatjuk el. A
rszecskket egy adott srsg kzegbl, vagy esetleg egy adott srsg folyadkrtegen t leptjk ki.
160
Ha az leptend rszecskk kztt nagy a srsgklnbsg, akkor az lepedsi egytthatjuk, ebbl kvetkezen
lepedsi sebessgeik kztt rdemi klnbsg mutatkozik, ami elssorban a srsgklnbsgbl szrmazik. Ha
nem elegenden nagy a rszecskk kztti srsgklnbsg, akkor a trfogat-, esetleg alakbeli eltrseik jutnak
dnt szerephez. Ezrt lehetsges, hogy br a sejtorganellumok tbbsgnek srsge az 1,1331,22 g/cm3-es
szk tartomnyba esik, lepedsi egytthatjuk mgis t nagysgrendet is tfogva 101106 S-ig terjed. Ennek az
a kvetkezmnye, hogy a kicsiny srsgklnbsg ellenre a klnbz mret rszecskk adott kzegben, adott
centrifuglis fordulatszm mellett is igen klnbz sebessggel fognak lepedni.
Az lepedsi sebessg klnbsgekrt, teht, dnten a rszecskk mretklnbsgei felelsek: a differencilis
centrifuglssal a rszecskket gyakorlatilag trfogatuk szerint frakcionlhatjuk. A nagyobb trfogat rszecskk
lepednek gyorsabban. Elszr a nagyobb trfogat, nagyobb sebessggel leped rszecskket, majd sorban a
kisebb sebessggel lepedket klntjk el.
Albert Claude (18981983) belga sejtbiolgus; Nobel-dj 1974.

Albert Claude belga kutat alkalmazta elszr (1940) a differencilis centrifuglst, ezzel elindtva a mdszer
mig tart sikert a biokmiai s molekulris biolgiai kutatsokban. Munkssgt 1974-ben az orvostudomnyi
Nobel-dj odatlsvel ismertk el.
Alapos feltrssal kapott homogeniztumban nem marad sejttrmelk, gy a sejtmagok a legnagyobb trfogat
rszecskk. A centrifugls paramtereit gy kell megvlasztani, hogy adott centrifugn kivlasztott fordulatszm
mellett, a meghatrozott centrifuglsi id alatt az elklntend sejtalkotk sszes rszecskje lejusson a centrifuga
cs aljra. Ezzel kt frakcit kapunk: az adott sejtorganellumokat tartalmaz ledk (szedimentum; csapadkszer
llomny a cs aljn) s az azt mr nem tartalmaz fellsz (szupernatans).
Az ledk nyers frakci, hiszen az adott krlmnyek kztt a kisebb sebessggel leped rszecskk egy hnyada
is bejut a szedimentumba. A nyers frakcibl a kisebb rszecskket az ledk tbbszri mossval, j mdiumban
trtn reszuszpendlsval s jracentrifuglsval lehet eltvoltani. Az ismtelt centrifugls eredmnyekppen
a frakci minden rszecskje ismt az ledkbe kerl, a kisebb (szennyez) rszecskkbl azonban minden
mosssal egyre kevesebb. Hromhat moss utn megkapjuk az n. tiszttott frakcit.
A magfrakci sejttpustl fggen 5001000 g rtk mellett 1020 percig trtn centrifuglssal nyerhet
ki. A magfrakci feletti fellsz a sejtmagmentes posztnukleris szupernatans (PNS). Rendre nvekv RCE
rtkek alkalmazsval s megfelel centrifuglsi id kivlasztsval nyerhetk ki a PNS-bl a mret szerint
kvetkez sejtalkotk frakcii.
161
Patkny mjbl erteljes homogenizlssal ellltott tiszttott magfrakci.

A sejtalkotk mrettartomnya szerint a nvnyi sejtekben a vakulumok s/vagy a plasztiszok, majd a
mitokondriumok, llati sejtekben ltalban a mitokondriumok, vagy az azoknl nagyobb vladkszemcsk
kvetkeznek.
llati sejtek mitokondrium frakcijnak kinyershez ltalban 1020 percig tart, RCE=300010 000 g melletti
centrifuglst hasznlnak. A mitokondriumok, a lizoszmk s a peroxiszmk egy rsze sok sejttpusban azonos
mrettartomnyba esik, s ezrt differencilis centrifuglssal egymstl szt nem vlaszthatk. Ilyen sejtek (pl.
mjsejtek) esetben gyakran elbb kileptik a 30004500 g, 10 perc mellett kpzd n. nehz mitokondrium
frakcit. Ez mitokondriumokban dsabb, mg az azutn kb. 7000 g, 20 perc alkalmazsval ellltott n. knny
mitokondrium frakci a kisebb mret mitokondriumokat s a lizoszmk, valamint a peroxiszmk zmt
tartalmazza. Termszetesen mindkt nyers mitokondrilis szubfrakci szennyezett az emltett hrom organellumnl
kisebb rszecskkkel is.
Nyers mitokondrium frakci.

A nyers mitokondrium frakci fltt a posztmitokondrilis szupernatans (PMS) kpzdik. Ez apr vezikulkat
tartalmaz, melyek a homogenizlskor keletkeztek a DER, a SER, a Golgikszlk elemeibl, valamint a
plazmamembrnbl. A PMS ultracentrifuglsval (100 000 g, 1 ra, 0,25 M/l szacharz mdiumban) elllthat
a szabad riboszmkat is magba foglal nyers mikroszma frakci. A fennmarad, lepthet rszecskket mr
nem tartalmaz posztmikroszomlis fellsz a homogenizl kzeggel higtott citoplazma alapllomny s a
citoszol. A klnbz membrnorganellumok mikroszomlis vezikulinak trfogata az ltalban szoksos
homogenizlsi eljrsok (lsd ott) utn nem klnbzik olyan diszkrt rtkben, hogy differencilis centrifuglssal
kielgten sztvlaszthassuk ket egymstl.
Mivel azonban bizonyos srsgklnbsg van a rszecskk kztt, szoks a nyers mikroszmt kt szubfrakcira
bontani. Az n. nehz mikroszma frakci (2030 000 g, 1020 perc) apr lizoszmkat, a durva felszn ER-bl
szrmaz vezikulkat tartalmaz. A SER, s Golgi-komplex membrnjainak s vezikulinak tbbsge s a riboszmk
a knny mikroszma frakciban (kb. 100 000 g, 1 ra) nyerhetk ki. A nehz s knny mikroszma azonban
csak nyers frakcinak tekintend, mert klcsnsen szennyezik egymst.
A mikroszma frakci szubfrakcii kizrlag kismrtk srsgklnsgeiket kihasznlva tisztthatk tovbb,
erre alkalmas mdszer az n. srsggradiens centrifugls.
162
A differencilis centrifuglssal nyert sejtfrakcik anyagi sszettel (lipidfehrje arnyuk, enzimsszettelk,

membrnjuk s beltartalmuk kmiai sszettele) szempontjbl, valamint funkcionlis szempontbl (in vitro)
vizsglhatk.
A srsg-gradiens centrifugls
A frakcik tovbbi bontsa, a rszecskk mg finomabb elklntse mr nem a rszecskemretben megmutatkoz
klnbsgeken alapszik.
Ha a centrifuglst egy pontrl-pontra nvekv srsg s megfelel srsgtartomnyt tfog mdiumban
vgezzk, a rszecskk addig lepednek, amg el nem rik a nekik megfelel srsg oldatrszt. Ekkor megsznik
az leped rszecske s az lept kzeg kztti srsg klnbsg, egyenslyi helyzet alakul ki, s a rszecske
lebegni fog. Ha az elvlasztand sejtalkotk srsge brmilyen csekly mrtkben is, de klnbzik, megfelel
srsg-gradiens alkalmazsval elklnthetk egymstl.
Autofg vakulumok frakcija. Az eltr elektrondenzits az eltr emsztettsgi fokra utal.
A sejtvz mikrotubulris elemeit tartalmaz tiszttott frakci.

A srsg-gradiens kifejezetten preparatv, csekly mennyisgek kifinomult kezelsre hasznlhat,
ultracentrifuglsos mdszer.
Krdsek:
34. Soroljon fel nhny, a sejtek feltrsra lehetsget ad mdszert!
35. Mirt elnys a Potter-Elvehjem homogenizl hasznlata?
36. Mi a homogenizls clja?
37. A sejtalkotk mely tulajdonsga alapjn lehet differencilis centrifugls segtsgvel frakciikat elklnteni
egymstl?
38. Sorolja fel a f frakcikat ellltsuk sorrendjben!
39. Hogyan kaphatunk tiszta frakcikat differencilis centrifuglssal?
163
40. Mi az elvi klnbsg a differencilis s srsg-gradiens centrifuglsi mdszerek kztt?

41. Mit jelent a srsg-gradiens?
164
A. fggelk - Animcik
1. animci: A biolgiai membrn felptse
2. animci: A fagyasztva trs folyamata
3. animci: Na+K+ ionpumpa komplex molekulris modellje
4. animci: Ntrium-ioncsatorna trbeli modellje
5. animci: A maghrtya prus a pruskomplex nlkl
6. animci: DNS kettsszl egy darabjnak molekulris modellje
7. animci: 70s riboszma trbeli molekulris modellje
8. animci: A chaperon-molekula trbeli modellje
9. animci: A tubuli dimer trbeli modellje
10. animci: mikrotubulus
11. animci: Az aktin filamentum s miozin kapcsoldsa
12. animci: A konnexon trbeli modellje
13. animci: Klatrin triszkelion
14. animci: Klatrin burok trbeli modellje
15. animci: Rosetta komplex alfa alegysg trbeli modellje
165

A Sejtbiológia Alapjai

Uploaded by

Document Information

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

A Sejtbiológia Alapjai

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

A sejtbiolgia alapjai

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

Az endodermisz szerepe a sejt apoplasztikus-szimplasztikus szlltsnak tvltsban ............ 118

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

2. fejezet - A sejtek molekuli

Az terkts ltalnostott szerkezeti kplete. R1 s R2 lehet azonos vagy klnbz szhidrogncsoport.

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

Karboxilcsoport (pirossal jellve) a karbonsavak ltalnostott szerkezeti kpletben.

Kt sznatomos karbonsav az ecetsav szerkezeti kplete.

Az szterkts (pirossal jellve) ltalnostott szerkezeti kplete.

A savanhidridek ltalnostott szerkezeti kplete. R1 s R2 jellhet azonos vagy klnbz sznlncokat.

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

Az aminok (balra) s az amidok (jobbra) ltalnostott szerkezeti kplete.

A glicerin, a glicerinaldehid s a glicerinsav szerkezeti kplete.

A piroszlsav (ionja a piruvt) s a tejsav (ionja a laktt) szerkezeti kplete.

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

A D-glkz (szlcukor) nylt lnc, valamint - s - (gyrs) alakja.

A D-glkz - s - (gyrs) alakja.

A D-galaktz s D-mannz (szintn hexoaldzok) -piranzgyrs szerkezeti kplete.

Egy hexoketz, a D-fruktz (gymlcscukor) furanzgyrs alakja.

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

t sznatomos furanzgyrs cukrok a D-ribz (balra) s a 2-dezoxi-D-ribz (jobbra). Elbbi a ribonukleotidok

Hexzamin a D-glkzamin (balra) s szrmazka, az N-acetil-D-glkzamin szerkezeti kplete.

A glicerin egy hromrtk alkohol, szmos anyagcserefolyamat kztes termke.

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

A cellobiz kt -D-glkzbl -14 ktssel pl fel. Szerkezete a glikozidos hidroxilcsoportok trllsban tr

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

Balra az amilz el nem gaz, heliklis lnca, jobbra az amilopektin lthat.

A glikogn elgaz lncnak rszlete.

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

A lipidek osztlyozsa az l szervezetekben betlttt funkcijuk szerint.

Az sszetett, hidrolizlhat lipidek

A zsrsav ltalnostott szerkezeti kplete.

A palmitinsav (C16) szerkezeti kplete.

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

A sztearinsav (C18) szerkezeti kplete.

A linolsav szerkezeti kplete (a ketts ktsek cisz-konfigurcijak!).

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

A glicerin (glicerol) szerkezeti kpletnek ktfle brzolsi mdja.

A neutrlis zsr (triglicerid = triacil-glicerol) ltalnostott szerkezeti kplete.

A foszfatidsav szerkezeti kplete. A glicerin-vz pirossal jellve.

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

A foszfatidil-kolin szerkezeti kplete.

A foszfatidil-etanolamin szerkezeti kplete.

A foszfatidil-inozitol szerkezeti kplete.

A szfingozin szerkezeti kplete.

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

A ceramidok ltalnostott szerkezeti kplete. A zsrsav komponens pirossal jellt.

Egyszer, nem hidrolizlhat lipidek

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

Az izoprn szerkezeti kplete.

A cisz-fitoen szerkezeti kplete.

A -karotin szerkezeti kplete.

A szternvz. A gyrket az ABC betivel, a sznatomokat szmokkal jellik. R a 17 sznatomra kapcsold

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

A koleszterin szerkezeti kplete. A polros molekularszletet a hidroxilcsoport kpviseli.

Az aminosavak ltalnostott szerkezeti kplete az alfa helyzet sznatom megjellsvel.

XML to PDF by RenderX XEP XSL-FO F ormatter, visit us at http://www.renderx.com/

hasonlsgbl a rokonsg fokra, az evolcis tvolsgra is lehet kvetkeztetni. A domnek