Professional Documents
Culture Documents
ลักษณะการเจริญของเส้นใยเห็ดหิ้งบนอาหารต่างๆ
ลักษณะการเจริญของเส้นใยเห็ดหิ้งบนอาหารต่างๆ
นิภาพร อามัสสา (Nipaporn Armussa)1
ั เสนาะเมือง (Niwat Sanoamuang)2*
นิวฒ
บทคัดยอ
นำเห็ดหิง้ จำนวน 21 ชนิด และเห็ดทีเ่ พาะเลีย้ งในเชิงการคาแลวอีก 2 ชนิด มาศึกษาเปรียบเทียบลักษณะการเจริญเติบโตบนอา
หารเลีย้ งเชือ้ ชนิดตางๆ ทัง้ บนอาหารแข็งและอาหารเหลว การเจริญของเสนใยบนอาหารแข็ง 5 ชนิดทีใ่ ชคอื รำขาว (rice brand dextrose
malt peptone agar - RbDMPA) มันสำปะหลัง (cassava dextrose malt peptone agar - CDMPA) มันเทศ (sweet potato dextrose
malt peptone agar - SpDMPA) มันฝรั่ง (potato dextrose malt peptone agar - PMPA) และ อาหารพีดีเอ (potato dextrose agar -
ุ หภูมหิ อ ง (28+2 oซ) วัดเสนผาศูนยกลางของโคโลนีทกุ 24 ชม. เปนเวลา 96 ชม.
PDA) หลังจากเลีย้ งเชือ้ บนอาหารเลีย้ งเชือ้ แข็งทีอ่ ณ
พบวา อาหารเลี้ยงเชื้อมีผลตอการเจริญของเสนใยอยางมีนัยสำคัญยิ่ง (p<0.001)โดยภาพรวมเห็ดหิง้ เจริญบน RbDMPA, CDMPA,
SpDMPA, PMPA และอาหาร PDA มีขนาดเสนผาศูนยกลางของโคโลนีเฉลีย่ เทากับ 47.5+18.1, 47.0+16.3, 46.1+18.2, 44.6+19.0
และ 44.8+19.9 มิลลิเมตรตามลำดับ โดยเสนใยของเห็ดที่เจริญบนอาหาร RbDMPA และ PMPA มีลักษณะหนากวาเสนใยบนอาหาร
ชนิดอื่น จึงไดเลือกอาหารทั้ง 2 ชนิดมาทำการทดลองผลิตเสนใย ผลการทดลองพบวาอาหาร RbDMPB ใหน้ำหนักเสนใยเฉลี่ยของเชื้อ
เห็ดทั้ง 23 ชนิดสูงกวาที่เลี้ยงในอาหาร PMPB อยางมีนัยสำคัญยิ่ง (p<0.001) โดยมีคาน้ำหนักเสนใยเฉลี่ยเทากับ 6.36+5.56 และ
2.73+1.73 g/l ตามลำดับ
Abstract
Twenty one species of shelf fungi and two commercial edible mushrooms were cultured and grown on both solid media
and in submerged conditions in order to investigate their growth characteristics and mycelium production. The solid media in this
experiment were rice brand dextrose malt peptone agar (RbDMPA), cassava dextrose malt peptone agar (CDMPA), sweet potato
dextrose malt peptone agar (SpDMPA), potato dextrose malt peptone agar (PMPA) and potato dextrose agar (PDA). All cultures
were grown on solid media at room temperature (28+2oC) and their colony diameters were measured at 24 hour intervals up to
96 hours. The growth patterns were significantly different (p<0.001) on RbDMPA, CDMPA, SpDMPA, PMPA and PDA and
the average colony diameters were 47.5+18.1, 47.0+16.3, 46.1+18.2, 44.6+19.0 and 44.8+19.9 mm, respectively. Mycelium
growth was clearly thicker on RbDMPA and PMPA compared to the others so that the two media were selected for further
investigation. All fungal species were cultured in submerged conditions in these two selected media and they were shaken on a
rotary shaker for 15 days at room temperature. Dry mycelium of each species was weighted and the average bio-mass seen to
be significantly different (p<0.001) between the two media. The average bio-mass values on RbDMPB and PMPB were
6.36+5.56 and 2.73+1.77 g/l., respectively. Applications are discussed.
et al., 2003) อาหารสังเคราะหเหลว (Hwang et al., Daedalea quercina L.:Fr., Daedaleopsis confragosa
2003) และจากวัสดุธรรมชาติ (Yang et al., 2003) (Bolton:Fr.) Schrst, Fomitopsis feei (Fr.) Kreisel,
เสนใยของเห็ดเหลานีม้ คี ณุ สมบัตใิ กลเคียงกับทีม่ อี ยใู น Fomitopsis nivosa (Berk./ Gilb & Ryvarden,
ดอกของเห็ดหิง้ และเห็ดอืน่ ๆ มีโปรตีนและกรดอะมิโน Ganoderma lucidum (W.Curtis: Fr.) P. Karst.,
ที่จำเปนครบสมบูรณและสามารถปลดปลอยสารโพลี Heterobasidion annosum (Fr.) Bref., Hexagonia
แซคคาไรดออกมามากมาย (Armussa et al., 2003; apiaria (Pers.) Fr., Hexagonia tenuis (Hook.) Fr.,
2004) Lenzites acuta Berk., Lenzites betulina (L.:Fr.) Fr.,
อาหารที่ใชเลี้ยงเห็ดหิ้งที่มีรายงานแลวสวน Microporus xanthopus (Fr.) Kunt., Phellinus gilvus
มากจะประกอบไปดวยแหลงคารบอน ไนโตรเจน และ (Schwein.) Pat., Phellinus cf. hartigii (Allesch. &
มีแรธาตุบางชนิดที่ตองการศึกษาแตกตางกันไป ธาตุ Schnabl.) Bondazev., Pycnoporus sanguineus (L.:Fr.)
อาหารที่ผสมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อทำหนาที่กระตุนการ Murrill., Schizophyllum commune Fr.:Fr., Trametes
เจริญของเสนใยหรืออาจกระตุนใหสรางสารโพลีแซค hirsuta (Fr.) Pilat, Trametes versicolor (L.:Fr.)
คาไรด (Chang et al., 2006) ทีม่ าของแหลงคารบอน Pilat., Trichaptum byssogenum (Jungh.) Ryv. และ
อาจเปนทางเลือกที่สำคัญจำเปนตองทำการศึกษาเพื่อ Tyromyces pelliculosus (Berk.) Cunningh. พรอม
รองรับการผลิตที่อาจมีมากขึ้นในอนาคต ประเทศไทย เปรียบเทียบดวยเห็ดขอนขาว - Lentinus squarrosulus
สามารถผลิตขาว มันสำปะหลัง มันเทศ หรือแมกระทัง่ Mont. และเห็ดนางรม - Pleurotus ostreatus (Jacquin
ธัญพืชไดมากมายหลายชนิด การนำมาใชเปนอาหาร ex Fries) Kummer
สำหรับเลี้ยงเห็ดเปนการเพิ่มมูลคาเพิ่มใหกับแหลง
อาหารเหลานี้ ดังนัน้ จึงตองการศึกษาการเจริญของเห็ด ชนิดของอาหารเลี้ยงเชื้อ
หิ้ ง ในอาหารเลี้ ย งเชื้ อ ชนิ ด ต า งๆโดยใช รำข า ว ชนิดของอาหารเลี้ยงเชื้อที่นำมาใชประกอบ
มันสำปะหลัง มันเทศ มันฝรัง่ และมันฝรัง่ ผสมมอลทและ ดวย อาหาร 5 ชนิดคือ Potato Dextrose Agar (PDA),
เปปโตน เพือ่ ทดสอบการเจริญของเห็ดหิง้ และเลือกใช Potato Dextrose Malt Peptone Agar (PMPA), Cas-
แหลงอาหารที่มีอยูในทองถิ่นสามารถหาไดงายทุกฤดู sava Dextrose Peptone Agar (CDMPA), Rice-brand
กาลและมีราคาถูก เปนการสรางเทคโนโลยีการผลิตเห็ด Dextrose Malt Peptone Agar (RbDMPA) และ
แนวทางใหมตอไป ดังนั้นการวิจัยนี้จึงมีวัตถุประสงค Sweet-potato Malt Peptone Agar (SpMPA) โดยมี
เพือ่ เพาะเลีย้ งเสนใยเห็ดหิง้ ในอาหารตางชนิดในสภาพ องค ป ระกอบหลั ก ดั ง นี้ ในอาหารทุ ก สู ต รจะใช แ ป ง
หองปฏิบตั กิ าร เปนขอมูลเบือ้ งตนสกู ารพัฒนาใชตอ ไป 20% น้ำตาล dextrose 2%, malt extract 1%, pep-
ตามลำดับ tone 0.1% และผงวนุ 2% ยกเวน PMPAจะใช Potato
broth 2.4% สวน PDA จะไมมี malt extract และ pep-
อุปกรณและวิธกี ารศึกษา tone เนือ่ งจากเปนอาหารมาตรฐานทีใ่ ชเพาะเลีย้ งเชือ้ รา
ชนิดของเห็ด โดยทัว่ ไป สวนอาหารเลีย้ งเชือ้ เหลวทีค่ ดั เลือกมา 2 ชนิด
เห็ดทีน่ ำมาทดสอบการเจริญเติบโตในอาหาร เพื่อการทดลองตอไปนั้นยังคงมีองคประกอบเหมือน
เลีย้ งเชือ้ สังเคราะหประกอบดวยเห็ดหิง้ 21 ชนิด ทีเ่ ก็บ กับอาหารแข็งเดิมยกเวนไมมีผงวุน
รวบรวมมาจากปาเทือกเขาภูพาน อ.กุดบาก อ.พรรณนา
อ.ภูพาน และ อ. เมือง จังหวัดสกลนคร คือ Amauroderma การทดสอบการเจริญเติบโตบนอาหารแข็ง
rugosum (Fr.) Tor., Bjerkandera adusta (Fr.) Karst., นำเห็ ด ทั้ ง 23 ตั ว อย า ง มาเลี้ ย งและเพิ่ ม
ปริมาณเสนใยในอาหารเลี้ยงเชื้อ PDA และบมเชื้อที่
314 ลักษณะการเจริญเติบโตของเสนใยเห็ดหิง้ บนอาหารสังเคราะหชนิดตางๆ วารสารวิจัย มข. 10 (4) : ต.ค - ธ.ค. 2548
Berovic, M., Habijanic, J., Zore, I., Wraber, B., Fang, Q.H. and Zhong, J.J. 2002. Effect of initial
Hodzar, D., Boh, B. and Pohleven, F. 2003. pH on production of ganoderic acid and
Submerged cultivation of Ganoderma lucidum polysaccharide by submerged fermentation of
biomass and immunostimulatory effects of Ganoderma lucidum. Process Biochemistry
fungal polysaccharides. Journal of Biotech- 37: 769–774.
nology 103: 77-86. Ghorashi, S., Bucke, C. and Keshavarz, T. 2003.
Blanqueza, P., Casasa, N., Fontc, X., Gabarrella, Isolation of biologically active compounds
X., Sarra, M., Caminalb, G. and Vicenta, from Ganoderma sp. Proceedings of the 2nd
T. 2004. Mechanism of textile metal dye International conference on Medicinal
biotransformation by Trametes versicolor. Mushroom and the International Conference
Water Research 38: 2166–2172. on Biodiversity and Bioactive Compounds
Chang, M.Y., Tsai, G.J. and Houng, J.Y. 2006. 17-19 July 2003. Peach, Pattaya, Thailand.
Optimization of the medium composition for Hwang, H.-J., Kim, S.-W., Choi, J.-W. and Yun,
the submerged culture of Ganoderma lucidum J.W. 2003. Production and characterization
by Taguchi array design and steepest ascent of exopolysaccharides from submerged
method. Enzyme and Microbial Technology culture of Phelllinus linteus KCTC 6190.
38: 407-414. Enzyme and Microbial Technology 33: 309-
Cohen, R., Suzuki, M.R. and Hammel, K.E. 2004. 319.
Differential stress-induced regulation of two Jarosz-Wilkolazka, A., Kochmanska-Rdest, J.,
quinine reductases in the brown rot basidi- Malarczyk, E., Wardas, W. and Leonowicz,
omycete Gloeophyllum trabeum. Applied and A. 2002. Fungi and their ability to
Environmental Microbiology 70(1): 324- decolourize azo and anthraquinonic dyes.
331. Enzyme and Microbial Technology 30:
Couto, S., Gund?n, R., Lorenzo M. and Sanroman, 566–572.
M.A. 2003. Screening of supports and Jaouani, A., Sayadi, S., Vanthournhout, M. and
inducers for laccase production by Trametes Penninckx, M. 2003. Potent fungi for
versicolor in semi-solid-state conditions. decolourisation of olive oil mill wastewaters.
Process Biochemistry 38: 249-/255. Enzyme and Microbial Technology 33: 802-
Cui, J. and Chisti, Y. 2003. Polysaccharopeptides 809.
of Coriolus versicolor: physiological activity, Jean-Phillippe, S.R. 2005. Antioxidant Properties
uses, and production. Biotechnology Advances of some Edible Fungi in the Genus Pleurotus.
21: 109-122. A thesis presented for the Master of Science
Dodor, D.E., Hwang, H-M. and Ekunwe, S.I.N. degree. The University of Tennessee, Knoxville.
2004. Oxidation of anthracene and benzo [a] Kim, H.O., Lim, J.M., Joo, J.H., Kim, S.W.,
pyrene immobilized laccase from Trametes Hwang, H.J., Choi, J.W. and Yun, J.W.
versicolor. Enzyme and Microbial Technology 2005a. Optimization of submerged culture
35: 210–217.
318 ลักษณะการเจริญเติบโตของเสนใยเห็ดหิง้ บนอาหารสังเคราะหชนิดตางๆ วารสารวิจัย มข. 10 (4) : ต.ค - ธ.ค. 2548
condition for the production of mycelial bio- Mau, J.L., Tsai, S.Y., Tseng, Y.H. and Huang, S.J.
mass and exopolysaccharides by Agrocybe 2005. Antioxidant properties of hot water
cylindracea. Bioresource Technology 96: extracts from Ganoderma tsugae Murrill.
1175-1182. LWT-Food Science and Technology 38:
Kim, K., Leem, Y., Kim, K., Kim, K., and Choi, 589-597.
H.T. 2002. Transformation of the medicinal Novotny, C., Svobodova, K., Erbanova, P., Cajthaml,
basidiomycete Trametes versicolor to T., Kasinath, A., Lang, E. and Sasek, V.
hygromycin B resistance by restriction 2004. Ligninolytic fungi in bioremediation:
enzyme mediated integration. FEMS Micro- extracellular enzyme production and degra-
biology Letters 209: 273-276. dation rate. Soil Biology and Biochemistry 36:
Kim, Y.O., Han, S.B., Lee, H.W., Ahn, H.J., Yoon, 1545–1551.
Y.D., Jung, J.K., Kim, H.M. and Shin, C.S. Pe as, M.M., Rust, B., Larraya, L.M. Ram rez, L.
2005b. Immuno-stimulating effect of the and Pisabarro, A.G. 2002. Differentially
endo-polysaccharide produced by submerged regulated, vegetative-mycelium-specific
culture of Inonotus obliquus. Life Sciences 77: hydrophobins of the edible basidiomycete
2438-2456. Pleurotus ostreatus. Applied and environ-
Klinhom, U., Klinhom, W. and Kanchanamayoon, mental Microbiology 68(8): 3891-3898.
W. 2003. Mushroom and Traditional Peng, Y., Zhang, L., Zeng, F. and Kennedy, J.F.
Knowledge in Northeast Thailand. Proceedings 2005. Structure and antitumor activities of
of the 2 nd International Conference on the water-soluble polysaccharides from
Medicinal Mushroom and the Internatioal Ganoderma tsugae mycelium. Carbohydrate
Conference on Biodiversity and Bioactive Polymers 59: 385–392.
Compounds, 17-19 July 2003. Peach, Rosales, E., Couto, S.R. and Sanroman, M.A. 2005.
Pattaya, Thailand. Re-utilisation of food processing wastes for
Liu, J., Yang, F., Ye, L.B., Yang, X.J., Timani, production of relevant metabolites: applica-
K.A., Zheng, Y. and Wang, Y.H. 2004. tion to laccase production by Trametes
Possible mode of action of antiherpetic hirsuta. Journal of Food Engineering 66:
activities of a proteoglycan isolated from the 419–423.
mycelia of Ganoderma lucidum in vitro. Stamets, P. 2001. Insights into the cultivation of
Journal of Ethnopharmacology 95: 265- Polyporaceae mushrooms: the ancient ones.
272. International Journal of Medicinal Mush-
Mao, X.B. and Zhong, J.J. 2006. Significant rooms 3: 92.
effect of NH4+ on cordycepin production by Stamets, P. 2005. Medicinal Polyporaceae of the
submerged cultivation of medicinal mushroom forests of North America: Screening for novel
Cordyceps militaris. Enzyme and Microbial antiviral activity. International Journal of
Technology 38: 343-350. Medicinal Mushrooms 7: 362.
KKU Res J 10 (4) : Oct. - Dec. 2005 ลักษณะการเจริญเติบโตของเสนใยเห็ดหิง้ บนอาหารสังเคราะหชนิดตางๆ 319
Wagner, R., Mitchell, D.A., Sassaki, G.L., Yang, F.-C., Ke, Y.F., and Kuo, S.S. 2004.
Amazonas, M.A.L.A. and Berovic, M. Effect of fatty acids on the mycelial growth
2003. Current techniques for the cultivation and polysaccharide formation by Ganoderma
of Ganoderma lucidum for the production of lucidum in shake flask culture. Enzyme and
biomass, ganoderic acid and polysaccharides. Microbial Technology 27: 295-301.
Food Technology and Biotecnology 41(4):
371-382.
Yang, F.-C., Hsieh, C. and Chen, H.M. 2003.
Use of stillage grain from rice-spirit distillery
in the silid state fermentation of Ganoderma
lucidum. Process Biochemistry 39: 21–26.
ตารางที่ 1 การเจริญเติบโตของเสนใยเห็ดหิง้ ในอาหารเลีย้ งเชือ้ แข็ง 5 ชนิดคือ รำขาว มันสำปะหลัง มันเทศ PMPA
และ PDA
ตารางที่ 3 น้ำหนักเสนใยของเห็ดหิง้ ทีเ่ ลีย้ งในอาหารรำขาว (Rice bran dextrose malt peptone, RbDMPB) และ
PMPB (potato dextrose malt peptone)
น้ําหนักของเสนใยแหง (กรัม/ลิตร) ในอาหารตางๆ
Species
รําขาว PMPB เฉลี่ย
Amauroderma rugosum (Fr.) Tor. 1.46 + 0.06 1.36 + 0.06 1.42 + 0.07
Bjerkandera adusta (Fr.) Karst. 5.70 + 0.53 3.53 + 0.32 4.61 + 1.25
Daedalea quercina L.:Fr. 2.53 + 0.15 1.40 + 0.10 1.96 + 0.63
Daedaleopsis confragosa (Bolton:Fr) 4.80 + 0.70 2.46 + 0.31 3.63 + 1.37
Schrst
Fomitopsis feei (Fr.) Kresel 2.40 + 0.36 1.60 + 0.26 2.00 + 0.52
Fomitopsis nivosa (Berk.) Gilb & Ryv. 20.73 + 0.42 4.76 + 0.38 12.74 + 8.75
Ganoderma lucidum (W.Curtis: Fr.) P. 1.96 + 0.15 1.33 + 0.12 1.64 + 0.37
Karst.
Heterobasidion annosum (Fr.) Bref. 8.90 + 0.52 2.16 + 0.40 5.53 + 3.72
Hexagonia apiaria (Pers.) Fr. 2.73 + 0.49 1.70 + 0.17 2.21 + 0.65
Hexagonia tenuis (Hook.) Fr. 4.83 + 0.12 3.56 + 0.31 4.19 + 0.72
Lentinus squarrosulus Mont. 3.70 + 0.62 1.23 + 0.25 2.46 + 1.42
Lenzites acuta Berk. 21.23 + 2.06 2.90 + 0.17 12.06 + 10.13
Lenzites betulina (L.: Fr.) Fr. 4.60 + 0.10 3.26 + 0.23 3.93 + 0.88
Microporus xanthopus (Fr.) Kunt. 2.16 + 0.32 1.66 + 0.15 1.91 + 0.35
Phellinus gilvus (Schwein.) Pat. 4.60 + 0.20 4.50 + 0.20 4.55 + 0.15
Phellinus cf. hartigii 2.47 + 0.55 1.86 + 0.12 2.16 + 0.48
(Allesch.&Schnab) Bondartzew.
Pleurotus ostreatus (Jacquin ex Fries) 2.60 + 0.10 2.03 + 0.25 2.31 + 0.35
Kummer
Pycnoporus sanguineus (L.:Fr.) Murrill 12.03 + 1.86 3.30 + 0.17 7.66 + 4.92
Schizophyllum commune Fr.:Fr. 9.26 + 0.25 6.20 + 0.53 7.33 + 1.72
Trametes hirsuta (Fr.) Pilat 4.50 + 0.20 3.23 + 0.06 3.86 + 0.71
Trametes versicolor (L.:Fr.) Pilat 13.56 + 0.95 1.60 + 0.10 7.58 + 6.58
Trichaptum byssogenum (Jungh.) 3.06 + 0.31 2.20 + 0.61 2.63 + 0.64
Ryvarden
Tyromyces pelliculosus (Berk.) 6.60 + 0.17 5.00 + 0.36 5.80 + 0.92
Cunningh.
เฉลี่ย 6.36 + 5.56 2.73 + 1.37 4.55 + 4.43
CV = 11.74 % ชนิดเห็ดหิ้ง (P<0.0001)
N = 138 อาหาร (P<0.0001)
ชนิดเห็ดหิ้ง * อาหาร (P>0.05)