中華林學季刊 (Quarterly Journal of Chinese Forestry) 39(2):279－292（2006） －279－

學術論述

固相微萃取技術應用於植物揮發成分
之分析

徐鈺雯1 陳盈如2 吳金村3 張上鎮4

（收件日期：民國 95 年 2 月 16 日、接受日期：民國 95 年 3 月 22 日）

【摘要】固相微萃取為一簡單、快速且不需使用溶劑的萃取技術。此項技術近年來被廣
泛運用於複雜物質之萃取分析，本文將此技術之發展、原理及其應用於植物揮發成分之
分析做一整理，以供相關研究人員選擇萃取方法之另一參考。

【關鍵詞】植物揮發成分、固相微萃取

APPLICATION OF SOLID PHASE MICROEXTRACTION

TECHNIQUE TO THE ANALYSIS OF BIOGENIC VOLATILE
ORGANIC COMPOUNDS
1 2 3 4
Yu-Wen Hsu Ying-Ju Chen King-Tsuen Wu Shang-Tzen Chang

（Received: February 16, 2006; Accepted: March 22, 2006）

【Abstract】Solid phase microextraction (SPME) is a simple, fast and solvent-free extraction

technique. This method has been widely applied to the analyses of complex mixtures. The
purpose of this paper is to introduce the theory and development of SPME and some recent
studies on the applications of SPME to the analyses of biogenic volatile organic compounds.
Hopefully, this brief review paper will provide an alternative of choosing extraction methods
for the related researchers.
【Key words】 Biogenic volatile organic compounds (BVOCs), Solid phase microextraction
(SPME)

1 台灣大學森林環境暨資源學系助理。
Assistant, School of Forestry and Resource Conservation, National Taiwan University.
2 台灣大學森林環境暨資源學系研究生。
Graduate Student, School of Forestry and Resource Conservation, National Taiwan University.
3 中興大學森林學系教授。
Professor, Department of Forestry, National Chung-Hsing University.
4 台灣大學森林環境暨資源學系教授，通訊作者。
Professor, School of Forestry and Resource Conservation, National Taiwan University, Corresponding Author.
－280－ 固相微萃取技術應用於植物揮發成分之分析

I、前言 Pawliszyn 所提出之固相微萃取裝置，

目前已有商業化之產品（如圖 2 所示
固相微萃取法（solid phase microex- Supelco 固 相 微 萃 取 裝 置 ） ， 其 原 理 與
traction, SPME）是近年來逐漸受到重視的 Pawliszyn 先前提出的裝置相同，經過改良
一種萃取方法。此方法成功的應用於複雜 後操作更為方便準確，並且有手動萃取與
物質之萃取分析，如水中微量芳香族化合 自動化萃取兩種不同模式的裝置。商業化
物之萃取、多環芳香族化合物（polycyclic 產品主要包含兩個部份，一為固定器
aromatic hydrocarbons, PAHs）之萃取、水 （holder），另一為塗覆（coating）高分子
中及食品中揮發性氯化物之微量分析、水 吸附物質的熔融矽纖維（fused silica fi-
中多氯聯苯（polychlorobiphenyls, PCBs）、 ber）。固定器的功用是用來固定和支撐熔
水中農藥之分析、魚體中有機金屬的分 融矽纖維，控制纖維之伸縮；塗覆纖維部
析、空氣中有機污染物、尿液與其他基質 份則有許多種類之塗覆物質可供不同性質
內的安非他命及其他藥物的分析，近年來 之待測物選用。
國外亦將此項技術應用於植物揮發成分之
固相微萃取法於 1990 年發展初期，纖
分析與鑑定，用以比較樹種間之親緣關係
維上並未塗覆一層高分子化合物作為吸附
（Lagalante and Montgomery, 2003）、不同
物質，是以熔融矽纖維本身的吸附力來吸
處理材之揮發成分（Diäaz-Maroto et al.,
附分析物，因此早期此法的吸附能力與線
2004），亦用於探討逆境（徐鈺雯，2004）
性範圍無法使分析者滿意。後來，為了利
與蟲害（Zini et al., 2002）對植物生理之影
用固相微萃取法分析各種樣品，進而發展
響等，然而國內還甚少將此項技術運用於
出許多不同種類的塗覆纖維。目前已商業
植物揮發成分採樣方面，故本文將此項技
化的吸附纖維共有七種，塗覆纖維種類及
術及應用作一簡介，提供相關研究另一採
樣方法之選擇。

II、固相微萃取法之發展

固 相 微 萃 取 法 於 1990 年 由 Janusz
Pawliszyn 等人設計，此裝置如圖 1 所示，
組成元件包含一個不鏽鋼管，此鋼管以耐
高溫之環氧樹脂連接一段矽纖維，於矽纖
維上塗覆一層靜相，再將不鏽鋼管通過一
個 Hamilton 7000 型注射針針頭，並突出於 圖 1 以 Hamilton 7000 型注射針改裝之固
注射針之外，然後以環氧樹脂接合不鏽鋼 相微萃取裝置（Pawliszyn, 1997）
管的另一端，即為固相微萃取的最初裝置 Fig. 1 Custom-made SPME device based on
（Pawliszyn, 1990）。 Hamilton 7000 (Pawliszyn, 1997)
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溶劑中，其穩定性各有差異，例如 non-
bonded phases 可用在部分可與水混溶的有
機溶劑，但不適合與低極性溶劑一起使
用，否則會產生輕微膨潤的現象；而 bonded
phases 則對於所有的有機溶劑均很穩定，
但部份低極性之溶劑則例外；crosslinked
phases 在大部分可與水混溶的有機溶劑以
及部分低極性溶劑中均相當穩定（Hiroyuki
et al., 2000）。
圖 2 Supelco 研發之第一套商業化固相微
吸附纖維的種類相當多，同時亦有許
萃取裝置圖（Pawliszyn, 1995）
多不同的厚度，欲獲得靈敏度佳的分析效
Fig. 2 Design of the first commercial SPME
device made by Supelco (Pawliszyn, 果，需根據分析樣本的特性，選擇適合之
1995) 塗覆纖維種類與厚度，一般是根據「like
dissolves like 」 原 理 ， 例 如 低 極 性 的
PDMS PDMS PDMS
100 M
polydimethylsiloxane（PDMS）纖維便適合
7M 30 M
CAR/PDMS
Low

75 m 用於揮發性香味成分等低極性化合物的萃
DVB/CAR/PDMS
50/30m
取。PDMS 是屬於較堅固耐用的吸附纖
PA
Polarity

85 m
PDMS/DVB
維，可承受高溫達 300℃。至於其他的吸附
65 m
纖維，如較高極性的 polyacrylate（PA）則
CW/DVB
65 m
較適用於極性較高的分析物如酚類
High

CW/TPR
50 m
Fiber
（phenols）及醇類（alcohols）等；混合型
Weak Retention Strong
的 塗 覆 纖 維 如
Properties
PDMS/DVB
（polydimethylsiloxane/ divinylbenzene）、
圖 3 商業化之各種固相微萃取吸附纖維
CAR/DVB（carboxen/ divinylbenzene）、
特性（Hiroyuki et al., 2000）
Fig. 3 Properties of commercially available CW/DVB（carbowax/ divinylbenzene）以及
SPME fibers (Hiroyuki et al., 2000) CW/TPR（carbowax/ templated resin）較適
bonded, non-bonded, 用於低分子量之揮發性化合物與極性化合
partially crosslinked, 物 。 CAR/PDMS （ carboxen/polydimethyl-
highly crosslinked
siloxane）與其他相似的吸附纖維相比具有
特性如表 1 所示（György and Vékey, 較佳的吸附效能，但其再現性較差，同時
2004）。若依塗覆的方式可分成「non- 所需之平衡時間亦較長。除了塗覆物質以
、
bonded」「bonded」
、「partially crosslinking」 外，塗覆層之膜厚對不同揮發性分析物的
以及「high crosslinking」四種（圖 3）。隨 萃取效果、分析靈敏度也有很大的影響，
塗覆方式不同，在不同性質與不同極性的 一般而言，揮發性化合物需要較厚的塗覆
－282－ 固相微萃取技術應用於植物揮發成分之分析

表 1 市售之固相微萃取吸附纖維種類及其特性（György and Vékey, 2004）

Table 1 Properties and species of commercially available SPME fibers (György and Vékey, 2004)

Maximum
Film
thickness Coating operating Compounds to be
Fiber coating Polarity Technique
method tempera- analysed
(μm)
ture (℃)
Polydimethylsiloxane
100 Non-polar Non-bonde 280 GC/HPLC Volatiles
(PDMS)
Non-polar
PDMS 30 Non-polar Non-bonded 280 GC/HPLC
semivolatiles
Medium- to non-polar
PDMS 7 Non-polar Bonded 340 GC/HPLC
semivolatiles
PDMS-divinylbenzene
65 Bipolar Cross-linked 270 GC Polar volatiles
(DVB)
PDMS-DVB 60 Bipolar Cross-linked 270 HPLC General purpose
PDMS-DVB 65 Bipolar Cross-linked 270 GC Polar volatiles
Polar semivolatiles
Polyacrylate (PA) 85 Polar Cross-linked 320 GC/HPLC (phenols)

Carboxen-PDMS 75 Bipolar Cross-linked 320 GC Gases and volatiles

Carboxen-PDMS 85 Bipolar Cross-linked 320 GC Gases and volatiles
Polar analytes
Carbowax-DVB 65 Polar Cross-linked 265 GC
(alcohols)
Polar analytes
Carbowax-DVB 70 Polar Cross-linked 265 GC
(alcohols)
Carbowax-templated
50 Polar Cross-linked 240 HPLC Surfactants
resin (TPR)
DVB-PDMS-Carboxen 50/30 Bipolar Cross-linked 270 GC Odours and flavours

層，而半揮發性則以較薄的塗覆層吸附效 分析之後，只要經適當的活化淨化步驟
率較佳，塗層較厚的吸附纖維因可吸附較 （condition process）即可重複使用，符合
多量之樣品而可提高分析靈敏度，然塗覆 經濟上的考量。
層越厚所需的平衡時間越長，所需的分析
時間亦越長（Hiroyuki et al., 2000）。 III、採樣及分析方法簡介
固相微萃取法從不同基質中萃取分析
物，僅需要一個萃取步驟即可完成，且萃 (I) 採樣方式

取過程無需使用溶劑，十分簡單快速，既 固相微萃取技術可分為直接固相微萃
可大幅降低分析物於多步驟萃取過程中漏 取 與 頂 空 固 相 微 萃 取 （ head-space
失的情形，也減低了操作上之困難與溶劑 SPME）。直接萃取是將吸附纖維放入待測
對環境的危害，比傳統方法靈敏度高，適 溶液中直接進行吸附，即完成萃取濃縮之
用範圍廣。此外，固相微萃取纖維在每次 步驟，其原理是依據 Nerst 所提出的分配率
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（partition）為基礎，是一種分析物於基質 n s = KVs C 0, aq
與纖維塗覆物質（fiber coating）之間的平
由此可知，固相微萃取法之萃取效率
衡概念，與液相－液相萃取（liquid-liquid
與分析物濃度有關，而與水樣體積無關。K
extraction, LLE）和固相萃取（solid phase
值是固相微萃取纖維上的塗覆物質對於分
exraction, SPE）的完全萃取（exhaustive
析物吸附效果的一個重要指標，每一化合
extraction）方式不同。固相微萃取的分配
物對於不同種類、厚度的固相微萃取纖維
常數（distribution constant, K）如下所示
都有一個特定的 K 值，可用於分析工作時
（Pawliszyn, 1997; Zhang and Pawliszyn,
的一個參考（Zhang and Pawliszyn, 1993）。
1993）：
頂空固相微萃取大多用於 VOCs 或
C
K= s semi-VOCs 的採樣。當塗覆纖維置於頂空
C aq
時，分析物必須先由溶劑中轉移至頂空，
Cs：達成平衡時，分析物於固相吸附物質 再移至纖維塗覆層上。頂空固相微萃取法
上的濃度 之萃取效率受到分析物的分配常數（Kow）

Caq：達成平衡時，原分析物於水樣中的濃 及亨利常數（Henry’s constant）影響。根

度 據頂空固相微萃取中吸附於纖維上分析物
的量及影響參數可列出以下之方程式：
而上式可寫成：
K1K 2 V1
Cs Cs Vaq ns = × n0
K= = K1K 2 V1 + V2 + K 2 V3
ns C 0, aq Vaq − n s
C 0, aq −
Vaq
Cs Cg
Cs Vaq × Vs K1 = K2 =
= Cg C aq
(C 0, aq Vaq − ns) × Vs
n s Vaq n0：原本水樣中分析物的含量＝C0,aqVaq
=
(C 0, aq Vaq − n s ) × Vs
Cs：平衡時分析物於固相吸附物質上的濃
整理後可得 度

KVs C 0, aq Vaq Caq：平衡時分析物於水樣中的濃度

ns =
Vaq + KVs
Cg：平衡時分析物於上空間氣相的濃度

ns：吸附在纖維塗覆物質上分析物的量 分析溶液樣品時，如 K2 很小時，則吸

Vaq：分析水樣的體積 附於纖維上的量非常有限，反之則較易揮
發至頂空為纖維塗覆層所吸附。當氣體體
Vs：纖維塗覆物質的體積
積遠大於纖維塗覆物質之體積時，上述方
C0,aq：分析水樣中分析物的原始濃度
程式可簡化為：
當溶液體積遠大於塗覆纖維之體積時
N s = K1Vs C g
(Vaq >> KVs)，上式可簡化為：
－284－ 固相微萃取技術應用於植物揮發成分之分析

(II) 分析方法 析，可依照分析樣品的性質，選擇適當的

以固相微萃取裝置採樣完成後，即可 溶劑來進行動態脫附（dynamic desorption）

以氣相層析儀注射口加熱的熱脫附方式， 方式或靜態脫附（static desorption）方式進

或液相層析儀之溶劑沖提方法，將分析物 行分析，然而利用溶劑脫附方法所能使用
由吸附纖維上脫附下來進行分析，如圖 4 的纖維塗覆物質有其限制，所以目前應用
所示（Supelco, 2002）。 固相微萃取方法，大多是利用氣相層析儀

目前固相微萃取方法大多是以氣相層 進行熱脫附方式分析。

析儀或是氣相層析質譜儀進行分析，將萃
取纖維直接在氣相層析儀的注射口處進行 IV、影響萃取效率之條件
熱脫附而不需要任何的改裝。一般而言，
除了分析樣品的極性以及纖維塗覆厚
最佳的脫附溫度大約等於揮發性最低化合
度會影響吸附纖維對樣品之萃取量外，吸
物的沸點。而吸附纖維塗覆厚度較厚、注
附時間與待分析樣本之濃度亦會對吸附效
射口溫度較低時，需要較長的脫附時間，
故最佳的脫附時間與脫附溫度須視分析物 率造成影響。一般欲改善吸附纖維之萃取

的種類及所選用之吸附纖維不同而有所調 效率，可藉由攪拌、添加鹽類、調整 pH 值

整（Hiroyuki et al., 2000）。 以及改變溫度等方式來達成。

若是以高效能液相層析儀分析，則需 攪拌方式可加速分析物自樣本基質傳

要一個特製的溶劑脫附腔（solvent desorp- 遞至吸附纖維表面的速率，進而縮短萃取

tion chamber），利用動相（mobile phase） 時間，然而太快速的攪拌速度則可能會對
沖提塗覆纖維，使分析樣品自吸附纖維上 分析之準確度造成影響；此外，基於鹽析
脫附，進入高效能液相層析儀中進行分 效應的原理，在飽和的樣本中加入鹽類可
有效地提高萃取效率，然而鹽類與塗覆纖
維的直接接觸可能會對吸附纖維造成傷
害，因此較不宜應用在直接固相微萃取
法；樣本中的 pH 值會影響分析物存在的形
式，同時影響其萃取的效率，一般會針對
欲分析物的酸鹼值而進行調整，如以直接
固相微萃取法進行萃取時，則需注意過高
與過低的 pH 值都可能對吸附纖維造成傷
害，必需格外注意（Hiroyuki et al., 2000）。

萃取溫度的差異亦會使吸附於塗覆纖
圖 4 SPME 萃取流程簡示圖（ Supelco,
維上分析物的量有所不同，利用頂空固相
2002 ）
Fig. 4 A simple sample extraction proc- 微萃取法進行揮發成分萃取時，為提高分
ess for SPME (Supelco, 2002) 析物的濃度並加速萃取速率，一般常利用
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加熱的方式，在萃取未達平衡時，溫度上 所能採集之容積相當大，且採樣管體
升會加速質量傳輸速率與提高蒸氣壓，提 積小、重量輕、易於運輸、成本低、方便、
供分析物脫離樣品基質所需的能量，進而 適用範圍大及效果好，又可依待測物不同
縮短平衡的時間。然而在達到萃取平衡 的物性和化性，來選擇較合適的吸附劑，
後，溫度的上升會造成亂度的增加與分配 以達最佳的採樣及分析效果，故一直是較
係數下降，反而使分析物由基質分配至塗 為普遍使用的方法。但需注意採樣管及吸
覆纖維的量減少（李茂榮等，2005）。 附劑的清潔，如採樣管本身有雜質或受到
外界污染時，將會影響分析之結果，所以
綜合上述可知，需先找到適合樣品性
採樣前的清洗步驟極為重要。亦需特別注
質的吸附條件，如：塗覆纖維的選擇、吸
意吸附劑和待測物之間的化學反應，空氣
附溫度、吸附時間、pH 值、攪拌速度、脫
中的其他化合物會和吸附劑表層產生氧化
附時間、脫附溫度（等於氣相層析儀注射
或異構化反應，導致吸附時，無法正確的
口溫度）等條件確立之後，才能得到可信
吸附到所要的目標物（target analyte）。
的結果。
由於上述之採樣方法受到採樣體積、
保存、清洗等條件的限制，皆有其不便之
V、 固 相 微 萃 取 法 於 植 物 揮 發 成
處，而固相微萃取法既可選擇塗覆纖維且
分分析之應用 活化淨化方法簡便，可有效彌補上述採樣
方法的不便之處。無論是葉片、花、果或
早期空氣採樣多利用以下方法：
木材，置於密閉空間皆可以頂空固相微萃
( I ) 注射器採樣（ syringe sampling ） 取吸附其所揮發之物質，進一步以氣相層
注射器所能採集的容積範圍在 10-6-2 析質譜儀分離鑑定，甚至定量待測物所含
L 之間，空氣樣品可穩定的存放在注射器 之成分，應用實例如下：

中，長達 1 小時而不致流失（Arnt et al., ( I ) 固相微萃取應用於種間之親源與抗

1997）。 病能力分析

(II) 採樣袋（ polymeric bags ） Lagalante 與 Montgomery（2003）以

採樣袋常使用之材質為鐵氟龍 SPME 分析世界七種鐵杉（Tsuga cana-

（Teflon），必需未經污染才可，其所能採 densisand, Tsuga caroliniana, Tsuga chi-

nesnsis, Tsuga diversifolia, Tsuga hetero-
集的容積範圍在 1-102 L 之間，此裝置需有
phylla, Tsuga sieboldii 以及 Tsuga merten-
一採樣幫浦。如果袋上有不易察覺的孔
siana）植物之揮發成分，並以統計軟體對
隙，則散失之待測物或是侵入之雜質會影
七種鐵杉各揮發成分的相對量差異進行分
響分析結果，且採樣袋無法長時間儲存樣
析，評斷其成分差異性與樹種親緣性之關
品。
係，以及成分差異對 hemlock woolly adel-
(III) 固體吸附劑（ solid adsorbent ） gid（Adelges tsugae）蟲害之抵抗能力的相
－286－
關性。試驗結果顯示，SPME 法可區別出
其種間差異，在 PCA（principal component
analysis）統計分析結果圖上（圖 5）可將
七種鐵杉區分為亞洲、美洲東部以及 T.
mertensiana 三個群落，其中 T. mertensiana
以 first component 分析落於負值區域，顯
示較接近於松亞科（Pinoideae），而其他
六 種 鐵 杉 則 均 屬 於 冷 杉 亞 科
（Abietoideae），此結果與傳統形態分類法
（Taylor, 1972）的推估結果一致，因此顯
示 SPME 應用於品種之分析具有不錯效
果。此外，以 second component 分析鐵杉
對 hemlock woolly adelgid 蟲害抵抗能力，
落於負值區域之 T. caroliniana 與 T. cana-
densis 屬於敏感型，對蟲害抵抗能力較差，
其 餘 落 於 正 值 區 域 之 鐵 杉 對 hemlock
woolly adelgid 之抵抗性佳，此分析結果與
實際現象相符，而分析其成分差異，得知
可能造成對蟲害較具抵抗性之成分主要為
α-pinene、β-caryophyllene 及α-humulene
等。
(II) 固相微萃取在文物保存中之應用
木材為博物館中內裝最常使用之用
材，其揮發成分對文物之劣化具有影響。
Oikawa 等人（2005）利用 SPME 對博物館
中常使用木材（western red cedar, spruce,
kiri and sugi）之揮發物進行偵測，並探討
其對文物保存之影響。試驗結果顯示，木
材揮發物對文物保存之影響程度隨樹種不
同而有很大差異，同時取決於其揮發成分
的種類，若木材揮發成分中含有 hinokitiol
或 acetic acid 等成分則對文物劣化之影響
更甚於總揮發性有機物（TVOC）之含量，
固相微萃取技術應用於植物揮發成分之分析
圖 5 各鐵杉之類化合物以 PCA 統計方
法計算結果。first component 負值者
屬松亞科之鐵杉，正值屬冷杉亞科之
鐵杉；second component 正值者為對
hemlock woolly adelgid 較具抵抗力
之鐵杉種類，負值為較易受 hemlock
woolly adelgid 傷 害 之 鐵 杉 種 類
（Lagalante and Montgomery, 2003）
Fig. 5 Terpenoid compositions of species
in the genus, Tsuga, were analyied
by the Principle Components Analy-
sis (PCA). Pinoideae belonged to the
negative first component, while
Abietoideae revealed positive first
component value. Species, with
positive values of second component
are less susceptible to the hemlock
woolly adelgid (Adelges tsugae)
than those with negative second
component values (Lagalante and
Montgomery, 2003)
此類成分對鐵器、銅器、蜜陀僧
（ mitsudasou ）等文物材質及變色具有影
響。分析比較四種試驗木材的主要成分，
其中，以 western red cedar 及 spruce 之揮發
成分中含有大量該類化合物（圖 6），對文
物劣化變質之影響遠甚於 kiri 與 sugi 兩樹
種，故較不適宜作為博物館之內裝材料。
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(III) 固 相 微 萃 取 應 用 於 偵 測 植 物 揮 發
成分之變化

Zini 等人（2001，2002）曾利用 SPME

分析鑑定三種桉樹葉片所釋出之植物揮發
成分，並比較其成分之異同，採樣的空間
設備如圖 7 所示，由表 2 之結果可發現
isoprene, α-pinene, limonene, 1,8-cineole,
(E)- β -ocimene, β -caryophyllene 為
Eucalyptus citriodora、Eucalyptus dunni 及
Eucalyptus saligna 之主要揮發成分，其餘
較微量之揮發成分及其比例則因樹種不同
而有所不同；此外亦偵測檸檬桉
圖 6 木材揮發成分之氣相層析圖(a) west-
（Eucalyptus citriodora）在不同環境及在受
ern red cedar (b) spruce (c) kiri (d)
到機械傷害的逆境中其β-caryophyllene 之
sugi (Oikawa et al., 2005)
變化情形。試驗中分別將試材置於溫室以 Fig. 6 Gas chromatography spectra of vola-
及實驗室中生長，溫室光線為自然光，溫 tile organic compounds from wood
(a) western red cedar (b) spruce (c)
度變化為 19-36℃，實驗室則以螢光照射，
kiri and (d) sugi (Oikawa et al., 2005)
溫度控制於 24-27℃，而溫室之輻射能約為
實驗室之 250-330 倍。試驗期間前三天分
別偵測植物在兩不同環境中揮發成分之變
化，後三天則對實驗室之植物進行機械性
傷害並偵測其成分變化，以了解受傷之逆
境對β-caryophyllene 揮發量之影響。試驗
結果顯示，當葉片剛放入取樣瓶中時，β
-caryophyllene 的揮發量最高，隨取樣時間
之增長而揮發量逐漸下降，溫室組之下降
速率較實驗室組之下降速率和緩，同時平 圖 7 生長中植物 BVOC 之採樣玻璃容器
均揮發量亦較大（圖 8A 、 B ），顯示β （Zini et al., 2001）
Fig. 7 Glass container for live plants
-caryophyllene 之揮發量與溫度及光線具有 BVOC extraction: 1, silanized glass
一定之相關性；而機械性傷害對β cylindrical body; 2, silanized glass
lid; 3, sampling holes topped with
-caryophyllene 揮發量的影響方面，檸檬桉
LB-1 silicone septa; 4, SPME holder
葉片受到傷害後，第三天β-caryophyllene + fiber; 5, 5 V DC power supply; 6,
的揮發量有明顯增加（圖 8C），而此結果 microfan; 7, Teflon support for mi-
crofan; and 8 Teflon tape seal (Zini
與部分學者認為β-caryophyllene 在植物體 et al., 2001)
－288－ 固相微萃取技術應用於植物揮發成分之分析

表2 由 E. citriodora、E. dunni 和 E. saligna 葉片所釋出之 BVOC 成分及含量 （Zini et al.,

2002）
Table 2 Identification and relative abundances (RA) for BVOC emitted by E. citriodora, E.
dunni, and E. saligna leaves (Zini et al., 2002)

RAa
No. Compound
E. citriodora E. dunni E. saligna
b
1 isoprene ++/+ x/+ ++/+
2 hexenal nd xe xe
3 3-(Z)-hexen-1-ol nd xe nd
4 α-thujene x nd nd
5 α-pinene + ++ ++
6 camphene nd xe x
7 sabinenec x nd nd
8 β-pinenec + x xe
9 β-myrcene x xe nd
10 α-phellandrene nd xe xe
11 3-(Z)-hexenol acetate nd xe xe
12 p-cymene nd ++/+ ++
13/14 limonene + 1,8-cineoled + ++ +
15 (Z)-β-ocimene x xe xe
16 (E)- β-ocimeneb +/x x/++ +/++
17 γ-terpinene nd +/x +
18 terpinolene nd nd xf
19 linalool + nd nd
20 cis-rose oxide + nd nd
21 campholenal nd nd +/ xb,f
22 trans-rose oxide + nd nd
23 isopulegol +/xb nd nd
24 citronellal ++ nd nd
25 α-terpineol nd xe xf
26 trans-carveol nd nd xf
27 citronellol ++ nd nd
28 3,7-dimethyl-2,6-octadienal x nd nd
29 citronellyl acetate + nd nd
30 3,7-dimethyl-2,6-octadienal acetate x nd nd
31 β-caryophyllene ++ +g x
32 aromadendrene nd + xe
33 α-caryophyllene x nd nd
34 globulol nd +/xe xe
a ++
, peak area usually 10% or more of the total area of identified peaks; +, peak area usually between 1% and
10% of the total area of identified peaks; x, peak area usually less than 1% of total area of identified peaks; nd,
non detected; compounds written in bold letters were only tentatively identified. b Relative abundance ex-
tremely variable from sample to sample. c Separation incomplete. d Coeluting substances. e Presence of the
compound is not constant during the sampling period. f Present only in the laboratory. g Not present in E. dun-
nii B
中華林學季刊 (Quarterly Journal of Chinese Forestry) 39(2):279－292（2006） －289－

性物質以抵抗蟲害的推論是相呼應的。

(IV) 固相微萃取應用於偵測木片經不同處
理後之成分揮發量變化

Diäaz-Maroto 等人（2004）亦利用此
項技術分析 American oak、French oak、
Hungarian oak 和 Russian oak 四種不同櫟木
木片經過不同處理後主要成分揮發量的變
化（表 3、4），發現不同之木片經過預烤
後再採樣， furfural 、 vanillin 和 syringal-
dehyde 揮發量皆明顯增加，而 trans-oak
lactone 和 cis-oak lactone 揮發量則減少。

(V) 固相微萃取應用於偵測植物之異戊二
烯釋出量

固相微萃取亦可與光合作用系統合併
使用（圖 9），由光合作用系統中的同化箱
（cuvette）採集空氣樣品，更可進一步監
測植物當時的光合作用速率及氣孔導度，
有助於了解植物的生理作用，徐鈺雯
（2004）曾以此項系統分別偵測不同樹種
於正常情況下之異戊二烯釋出量及光合作
time (min) 用速率，其結果如表 5 所示，所偵測之樹
種 中 ， 釋 出 量 較 大 者 為 檸 檬 桉 （ 32.87
mg/L），其次為楓香（11.33 mg/L），樟
圖 8 檸檬桉全日之β-caryophyllene 揮發
變化量：(A)溫室，未受傷葉片；(B) 樹僅有微量的釋出，至於青剛櫟及栓皮櫟
實驗室，未受傷葉片；(C)實驗室， 則無法測到異戊二烯的釋出。
受傷葉片（Zini et al., 2002）
Fig. 8 Circadian profiles for β-caryophyllene VI、結語
emitted by E. citriodora leaves: (A)
greenhouse sampling, undamaged 綜合上述實例，SPME 應用在林木揮
leaves; (B) laboratory sampling, un- 發成分領域的研究，除可用於植物種類親
damaged leaves; (C) laboratory sam-
源關係的分析、針對特定化合物的偵測
pling, damaged leaves (Zini et al.,
2002) 外，亦可針對植物體中揮發成分與環境中
的物理、化學、生物等複雜因子彼此間交

中扮演著「infochemical」的角色，作為毒 互影響的關聯性提供快速、有效的偵測方
－290－ 固相微萃取技術應用於植物揮發成分之分析

表 3 以 HS-SPME 分析不同櫟木木片（未烤過）之主要揮發成分（Diäaz-Maroto et al., 2004）

Table 3 Main volatile compounds of nontoasted oak wood chips from different origins isolated
by HS-SPME (Diäaz-Maroto et al., 2004)
American oak French oak Hungarian oak Russian oak
Compound Flavor note
Mean(n= 3) RSD (%) Mean(n= 3) RSD (%) Mean(n= 3) RSD (%) Mean(n= 3) RSD (%)
sweet, baked
furfural 14576277 2.8 5746745 5.1 6339976 6.8 7891343 7.9
bread, caramel
trans-oak lactone oak woody, 5245675 11.5 1679733 11.7 22833 0.9 1940 8.4
cis-oak lactone coconut 17314473 11.6 11074463 11.2 187297 1.7 14890 9.2
eugenol cinnamon, clove,
405343 5.7 102971 8.2 20807 8.6 5832 4.6
spice, strong
vanillin sweet, vanilla,
2392 8.7 3144 6.6 689 6.6 894 8.5
fragrant
syringaldehyde not described 15110 8.8 12967 9.5 2631 8.6 39523 7.1

表 4 以 HS-SPME 分析不同櫟木木片（烤過）之主要揮發成分（Diäaz-Maroto et al., 2004）

Table 4 Main volatile compounds of toasted oak wood chips from different origins isolated by
HS-SPME (Diäaz-Maroto et al., 2004)

American oak French oak Hungarian oak Russian oak

Compound
Mean(n= 3) RSD (%) Mean(n= 3) RSD (%) Mean(n= 3) RSD (%) Mean(n= 3) RSD (%)

Furfural 23510980 4.4 25491937 9.7 28377960 2.0 22437402 2.8

trans-oak lactone 502282 3.5 270367 7.4 Tr Tr

cis-oak lactone 3746346 3.7 2113334 5.9 43982 6.5 Tr
eugenol 353583 7.3 262962 5.3 834357 8.2 111961 9.1
vanillin 2346053 4.8 1655215 8.7 8406797 7.7 946548 9.8
syringaldehyde 748036 4.7 619956 9.3 1665231 7.9 250075 8.0

表 5 五種樹種之光合作用速率及異戊二烯釋出量（徐鈺雯，2004）
Table 5 Isoprene emission and photosynthesis rate from five tree species (徐鈺雯，2004)

Photosynthesis rate Isoprene emission

Species
（μmol/m2 s1） （mg/L）
檸檬桉（Eucalyptus citriodora Hook.） 23.08 32.87
楓 香（Linquidambar formosana Hance） 39.65 11.33
樟 樹（Cinnamomum camphora L.） 7.48 Trace
青剛櫟（Cyclobalanopsis glauca Thunb.） 12.13 ND
栓皮櫟（Quercus variabilis Blume） 6.38 ND

法，相較於傳統浸泡抽出或蒸餾萃取的方 能反映植物體實際揮發物的偵測方法，因
式，SPME 提供了較溫和、快速、靈敏且 此，如能善加使用，此項技術可以幫助我
中華林學季刊 (Quarterly Journal of Chinese Forestry) 39(2):279－292（2006）
圖 9 開放式差異式光合作用系統之流程
Fig. 9 Process of open differential mode
PACsys 9900
們更迅速的採集極易散失之微量揮發成
分。
VII、引用文獻
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