Plasmic → DNA แบบ วง กลม ของ แบค+เ-ย

ส0ป เทคโนโล5 ทาง 7เ8นเอ

เทคโนโล5ทาง 7เ8นเอ
การ ฝาก ;าย <ว =อน

|
→

→ การ เพาะ เ@ยง เAอเBอ

→ ไรใน การ ปEบป0ง FนG Hช FนGJตL ,

FนMNศวกรรม และ การโคลน5น

แnRง5nS 1TอใU Vง W XNต Yน W Zกษณะ ] ^องการ
↳ เPน การ <
Q
Vง W XNต _ดแปลง FนMกรรม (
Genetically modifiedorganism) หbอ GMO

การ <ดแRง 5น
ะ ]cยม d มา อeบาย การเอา fนghน ใน มSษi ไป ใjใน พลาด k แบค+เ-ย ใUแบค+เ-ย lวย สmาง fนghน
ค

DNA ] nก <ด Rอ oน = DNA สาย ผสม ( Recombinant DNA)

การ <ด5น และ พลาด kค

ใน การ <ด แRง oน ^อง W การ <ด Bน ออก มา แqวไป ใjใน สาย ONA ] ^องการ
" "
↳

rเPน ^องใs เอนไซu <ด rเพาะ

rrestrictionenzyme)

* <ด สาย DNA ไv ปลาย 2 แบบ ปลาย w rbluntend) พอ h cวคxโอไทy 2 สาย เzา {น

ปลาย เห|ยว rstichyend) พอ h cวคxโอไทy 2 สายไ} เzา {น

☒ การ <ด5น vวย เอนไซu <ด rเพาะ ^อง <ด พลาด k ค vวย เอนไซu เ7ยว {น เTอใUปลาย เห~อน {น ไvRอ{นไv
จะ
เอนไซu <ด rเพาะ แRละ ชcด W€แห•ง ‚_บ เบส Rาง {น เ-ยก บƒเวณ Yน „า บƒเวณ จด r rrecognitionsite)
<ด ของ เอนไซu<ด rเพาะ …-3
'

ทน ทาง การ

รต ย .
ปลาย เห|ยว
tco RI GA
Bamltt Gifi
Hind III AA

กะ .
ปลาย †
Sma I LG
He 111 GC

การ เsอ ม 5น เ‡า {บ สาย DNA

↳ 5น พลาด ˆก nก <ด
ใUW ปลาย ประเภท เ7ยว {น แqว ไ} สามารถ แ‹อม {นไv
จะ
,

^องใs เอนไซuไจ เกส (

ligas e) เชอ ม 5น และ พลาด kค ใUเPน Œนเ7ยว {น

เ•อ 5น อŽใน พลาด k ค Wo 7เ8นเอ ของ jง W XNตใด 5น Yน จะ แสดง ออก

rgene expression
)
ๆ
Vง W XNต ]nก <ด Rอ 5น Yน ๆ จะ แสดง Zกษณะ
Rางๆ ออก มา

* •า เอา 5น ] สmาง โปร‘น เ’อง แสงไv ไป สด “อไ“ DNA ปลา <ว ใส ปลา <ว Yน จะ แสดง Zกษณะ Uอง แสงไv
การ
เ”ม rนวน DNA vวย เทคcค PCR

↳ กร•] ^องการ ONA ปƒมาณ มาก เ–อd มา Nเคราะ— ประกอบ หZกงาน สามารถ ใs
ๆ
chain reaction [ PCR) เ”ม ปƒมาณ
เทคcค
Polymerase ONA

W สาร ] เ˜ยว‡อง 1) d NTP

ตย .
DNA 2- ( เบส A, ร, C G)
,
3) Primer 4) DNA
Polymerase
เ
d สาร ™ง 4 ใj หลอด ทดลอง ขนาด เšก

d เ‡า เด รอง Thermal cyde

d
W การ เป›ยนแปลง œณห•k 3 lวง

① ↳ เ”ม ž ใU DNA คลาย <ว แ} แบบ สาย Ÿ → สาย เ ยว

°

as

เ¡ม^น
② ↳ ลด ลง มา ] ยง -
oo
°

เ Tอ ใU Primer 0์บ ONA แ}แบบ

→

③ ↳ เ”มไป ] เ–อใU ONAP DNA แ} แบบ เPน สาย Ÿ

°

d NTP มา “อ
olymerase
>2
เอา

↳ Jงเคราะ— DNA สายให}

* <ว แR กระบวน การ] 1- 3 £บเPน 1 รอบ การ ž PCR จะ ไv DNA เPน เPน 2 เzา จาก ของ เ¤ม

การ หา ขนาด ของ DNA vวย เทคcค Gel electrophoresis

↳ เ•อไv DNA ปƒมาณ ] มาก พอ สามารถ d มา ทดสอบ หา ขนาด ของ DNA ไv

vวย เทคcค Gd หbอ Run Gel

electrophoresis
→ โปร‘น histone ( t)

* -
DNA ประ¥ เPน ลบ อŽใน สนามไฟ§า PNA ¨ง เ‡า หา ©ว บวก

Tอ เPน <วกลางใU ONA

agarosegel หbอ polyacrylamide gel
-
Jงเกต ระยะ ¨ง DNA d ONA ใj ใน เวลาªน เ ¨ง
-

DNA ขนาด ให« ¨ง sา ก„า DNA ขนาด เšก

•า DNA มSษi มา
Rvngel พบ „า DNA ของ
¬ก ๆ คน
เค-อน ] ไv ระยะ เzา {น
ๆ ( เพราะ ขนาด DNA เzา {น)

DNA เค-อน ]เzา {น เพราะ เPน

สมช .
ชcด เ7ยว {น
หาก d DNA ของ
มSษi <ด vวย เอนไซu <ด rเพาะ เอ ไป Rungel
พบ„า PNA แRละ คน
nก {ด
เPน zอน W rนวนไ} เzา {น แRละ zอน ของ แRละ คน

ขนาด ไ} เzา {น ราดสอน ] ไ} เzา ) ยกเ®น คน W สาย ¯ม £น … เคbอ ญา± จะ W บางzอน ขนาด เzา {น

การ หา ‚_บ เบส

sequencing ) โดย Nเคราะ— อง² ประกอบ

↳ สามารถ หา ‚_บ DNACDNA

ของ cวคxโอไทy ของ เค’อง Automated

sequencer

ฮอ…โมน Eกษา เบาหวาน

ประ´กµ
¶
การ ใsเทคโนโล5 ทาง 7เPน 1 อ m
แพใน กรน dไป ไกลโคเจน → สบ กqามา °

↳ vาน เภJชกรรม และ การ แพทi

-

W การ d เอา 5น ] เ˜ยว {บ การ สmาง fนghน ไป <ด Rอใj

ของ คน พลาด k ค แบค+เ-ย เ–อ ใUแบค+เ-ย สmาง fนghน

↳ vาน การ เกษตร และ

œตสาหกรรม
-
W การ Fฒนา เค’องหมาย โมเล¸ล rmolecular maher ) <ดไ®{บ 5น]^องการ
สามารถ ž การ ¹ดเºอก FนG ] ^องการไv»น+ ไ} ^องไป ทดลอง ป¼ก
-
d เอา 5น ] สmาง แ½ง <ด Rอ ใj ‡าว ใน ด žใU ‡าวโพด สmาง แ½งไvมาก‡น ( ‡าวโพด GMO )

↳ vาน c±Nทยาศาสต…
<ว จาก ขนาด ของ DNA
-

ระ¾ ¾คคล
¿าน การ <ด vวย เอนไซu <ด rเพาะ
d มา Nเคราะ— vวย เทคcค Gel
Electrophoresis

จะ เÀน „า หมายเลข 2 W Zกษณะ

แถบ DNA 1 ห}อน ของ ¼ก แRไ} เห~อน แ}

แสดง „า หมายเลข 2 เPน Tอ

-

ระ¾ <ว คน
โดย การ Nเคราะ— การ Short tandem repeatanalysis ) ใน DNA จะ W

€แห•ง เบส 2- 6 เบส Áา {น หลาย นา โดย โครโมโซม เPน โธ โม โลกน W‚_บ เบส ] ‡า
ๆ
เห~อน {น rนวน ‡า ไ} เzา{น Ã ไv
อาจ จะ สามารถ d มา Nเคราะ— €แห•ง โดยใs

เทคcค PCR ใน การ 1 Äม rนวน แqวd มาNเคราะ— ขนาด vวย เทคcค Gel
tlectrophoresis