Sejtbiológia

A sejthártya és transzport folyamatok – II.

Dr. Farkas Eszter

Tanszékvezető egyetemi docens
A sejthártya: transzport folyamatok
Pumpa Transzporter Csatorna
A sejthártya
feladatai:
- Transzport
- Ingerek felvétele
- Sejtek közötti
kommunikáció

Na+-glükóz Szivárgó Na+

Példa Na+/K+ pumpa
kotranszporter csatorna
Szelektivitás Teljes Közepes Gyenge (10-20 x)
Sebesség (ion/s) Lassú (100) Közepes (<1000) Gyors (106)
Konc. grádiens ellenében mentén mentén
Energiaigény Van Nincs Nincs
Transzport típusa Elsődleges aktív Másodlagos aktív Passzív
Transzport folyamatok: transzport típusok
Uniport Szimport (ko-transzport) Antiport

glükóz Na+/cukrok Na+/H+

aminosavak Na+/aminosavak Na+/Ca2+
Példák Na+/Cl- Cl-/HCO3-
Na+/K+/2Cl- (NKCC)
Na+/H2PO4-
Passzív:
A transzport típusa Másodlagos aktív
facilitált diffúzió!!
Transzport folyamatok: uniporterek, a facilitált
diffúzió
Facilitált diffúzió:
- Sebesség > passzív diffúzió
(transzporter: katalizátor)

A trasnzport sebessége
- Molekulára szelektív
- Egy szabad Facilitált
szubsztrátkötőhely →
diffúzió
szubsztrát beköt →
konformáció-változás →
szubsztrát leválása
- Telítődik (korlát: Passzív diffúzió
transzporterek
elérhetősége)
A szubsztrát koncentrációja
Transzport folyamatok: uniporterek, a facilitált
diffúzió
Glükóz transzporter
izoformák

A trasnzport sebessége
• GLUT1: eritrociták, BBB
• GLUT2: máj, vese
tubulusok, hasnyálmirigy
β-sejtek
• GLUT3: neuronok,
placenta
• GLUT4: adipociták,
harántcsíkolt izom,
szívizom
• .
• . A szubsztrát koncentrációja (mM)
• GLUT14
Transzport folyamatok: transzport típusok
Uniport Szimport (ko-transzport) Antiport

glükóz Na+/cukrok Na+/H+

aminosavak Na+/aminosavak Na+/Ca2+
Példák Na+/Cl- Cl-/HCO3-
Na+/K+/2Cl- (NKCC)
Na+/H2PO4-
Passzív:
A transzport típusa Másodlagos aktív
facilitált diffúzió
Transzport folyamatok: a kotranszporterek
Na+/glükóz Na+/I- Na+/K+/Cl- Na+/Cl- H+/mono-carboxilát
kotranszporter szimporter kotranszporter kotranszporter kotranszporter
Extracell. SGLT1 NIS NKCC NCC MCT

Intracell.

Vékonybél Pajzsmirigy Vese Henle kacs BBB: tejsav

hámsejtek follikuláris sejtek, hámsejtek apikális eltávolítása
apikális felszín: bazolaterális felszíne (NKCC), disztális
glükóz felvétele a membrán: a jód tubulusok hámsejtek
bélből felhalmozása apikális felszíne (NCC):
koncentráció- (emlőmirigyben: vizelet koncentrálása
grádienssel jód az anyatejbe)
szemben
A glükóz transzportja

Bélüreg Bélhámsejt Vérér

• Uniport: Facilitált
diffúzió (GLUT)
• Ko-transzport:
másodlagos aktív
transzport (SGLT)
Transzport folyamatok: transzport típusok
Uniport Szimport (ko-transzport) Antiport

glükóz Na+/cukrok Na+/H+

aminosavak Na+/aminosavak Na+/Ca2+
Példák Na+/Cl- Cl-/HCO3-
Na+/K+/2Cl- (NKCC)
Na+/H2PO4-
Passzív:
A transzport típusa Másodlagos aktív
facilitált diffúzió
Transzport folyamatok: az antiporterek

Na+/Ca2+ Na+/H+ Cl-/HCO3-

antiporter antiporter antiporter
NCX NHE AE

Extracell.

Intracell.

Sok sejttípusban: Ca2+ Intracellulátis pH Intracellulátis pH

homeosztázis szabályozás, a Na+-on szabályozás, lúgos pH
szabályozása túl a savas pH aktiválja; jellegzetes
[Ca2+]i=70 nm, aktiválja szerep az
[Ca2+]e=2 mM eritrocitákban
Transzporterek: a pH szabályozás

• A citoszol pH-ja a H+ ion koncentráció 1. Cl-/HCO3-

függvénye antiporter (AE)
• Ha a H+ megoszlása a sejthártya két 2. Na+/H+
antiporter

Extracelluláris tér
oldalán passzívan történne, a citoszol

Intracelluláris tér
(NHE)
pH-ja 6,4 lenne. 3. Cl-/Na+, HCO3-
• A citoszol valós pH-ja 7,2 transzporter
 Transzporterek szerepe!
• A citoszol fiziológiás pH-ja
alapvetően a H+ és HCO3- (sav és
bázis) felvételének és leadásának
egyensúlyától függ.
Transzporterek: a pH szabályozás

A citoszol A citoszol
savasodása: lúgosodása:

1. Anyagcsere 1. H+ aktív
folyamatok leadása
2. H+ passzív 2. Bázisok aktív
szivárgása a felvétele
sejtbe (H+
csatornák)

Casey et al., 2010

A sejthártya: transzport folyamatok
Pumpa Transzporter Csatorna
A sejthártya
feladatai:
- Transzport
- Ingerek felvétele
- Sejtek közötti
kommunikáció

Na+-glükóz Szivárgó Na+

Példa Na+/K+ pumpa
kotranszporter csatorna
Szelektivitás Teljes Közepes Gyenge (10-20 x)
Sebesség (ion/s) Lassú (100) Közepes (<1000) Gyors (106)
Konc. grádiens ellenében mentén mentén
Energiaigény Van Nincs Nincs
Transzport típusa Elsődleges aktív Másodlagos aktív Passzív
Transzport folyamatok: csatornák
Ember: kb. 400 gén kódol csatornákat!

Integráns transzmembrán fehérjék →

pórusok → ionok passzív áramlása
elektrokémiai grádiensük szerint

A csatornák fő feladatai:
- A sejttérfogat szabályozása: pumpákkal,
transzporterekkel szoros
együttműködésben
- Membránpotenciál kialakítása:
koncentráció, töltés
- A citoszol Ca2+ homeosztázisának
szabályozása → szekréció (mirigyek),
kontrakció (izom)
- Sejtek közti kommunikáció
Transzport folyamatok: csatornák
Ioncsatorna
• Szelektív
permeabilitás Ion
• Kapuzás filter

Sejthártya
Funckionális állapot
• Vezető (nyitott)
• Nem vezető
(zárt/inaktivált) Kapu
szerkezeti állapot szerint
Csatornák: szelektivitás
Osztályozás:
1. Nagy szelektivitású: egy adott ionra nézve átjárható: pl.
+
3.
feszültségfüggő K csatorna
2. Kis szelektivitású: több, azonos töltésű ionra nézve
átjárható: pl. nikotinerg acetilkolin-receptor (Na+, K+, Ca2+)
3. Nem szelektív: gap junction csatorna

1. 2.
Csatornák: kapuzás
Kapuzás: szerkezeti állapotok közti átmenet egy jól meghatározott inger hatására
Inger alapján:
• Feszültségkapuzott csatorna: membránpotenciál-változás – aktivációs küszöb: nyit
• Ligandkapuzott csatorna: aktiváló molekula extracell. köt: nyit
• Intracelluláris hírvivő által kapuzott csatorna
• Membránfeszülés által kapuzott csatorna
Extracell.
Cl- tér

Cl- Intracell.
a membránfeszülés által tér
kapuzott csatorna
mechanikai ingerre nyit
(pl. nikotinerg (pl. Ca2+-aktivált (pl. téforgatcsökkentés)
(pl. akciós potenciál) actelikolin-receptor) K+ csatorna)
Példák…

… csatornák szerkezetére és működésére

Csatornák: a feszültségkapuzott K+ csatorna

Feszültségkapuzott K+ csatorna
(KV csatorna), szelektivitás:
- Négy alfa alegység: tetramer csatorna
- Minden alegység: 6 transzmembán
szegmens, és intra- ill. extracelluláris
összekötő hurkok
- Hidrofil pórus: S5-S6 és a köztük levő P-
szegmens alkotja (4 alegység → 4 K+ kötő S5 S6
hely) K+
Csatornák: a feszültségkapuzott K+ csatorna

S5 S6

Működés S4
- S4 szegmens: feszültségérzékelő – töltéssel
rendelkező szegmens (alegységenként 5-7 pozitív
töltés aminosav oldalláncok révén)
- a membránpotenciál megváltozása → a szegmens
az extracelluláris tér felé kimozdul → a pórus nyílik
S5 S6

S4
Csatornák: a feszültségkapuzott Na+ csatorna
Szerkezet (izom, idegsejtek):
- Egy nagy pórust kialakító -alegység: >2000 aminosav, 24 transzmembrán szegmens,
6 szegmens (S1-S6) alkot egy domént (DI-DIV) → pszeudo-tetramer
- Pórus: S5-S6 és köztük P-szegmens; feszültség szenzor: S4
- Két, járulékos  alegység – működés módosítása, extracelluláris matrix
komponensekhez csatlakozva a csatornák immobilizálása és csoportosulása a
membránban

Szerkezet: multimer fehérje:

- Pórust kialakító alegységek: a szelektivitás és a kapuzás jellemzőinek meghatározása
- Járulékos alegységek: a csatorna működésének módosítása
Csatornák: a feszültségkapuzott Na+ csatorna

Működés:
- Három
konformációs
állapot: zárt,
nyitott, inaktivált
- Aktivációs kapu
(S4)
- Inaktivációs
kapu: a DIII/DIV
közti hurok IFM
szakasza
- Akciós potenciál
és fájdalom
(lidokain
célpontja)
Csatornák: a feszültségkapuzott Ca2+ csatorna
Szerkezet (izom, idegsejtek):
- A feszültségkapuzott Na+ csatornához hasonló 1 alegység
- 2: a csatorna összeállása, normál kapuzási kinetika; β, γ és δ: az α1 kihelyezése a
sejthártyára, a csatorna feszültségfüggésének módosítása

Típusok (helyük,
aktivációs küszöbük, az
ionáram jellemzői, az
inaktiváció kinetikája és
a csatorna
farmakológiája
alapján):
N, T, L és P/Q
Csatornák: a feszültségkapuzott Ca2+ csatorna

Funkció:
- Hozzájárulnak a
depolarizációhoz (az alacsony
intracell. konc. miatt nagyon
hatékony)
- Ca2+ beáramlása:
neurotranszmitter szekréció
stimulációja
- További Ca2+ felszabadulás
kiváltása az ER-ből → izom
kontrakció
Csatornák: ligandkapuzott csatornák
Csatornák: ligandkapuzott csatornák

Pl. Ionotróp glutamát receptorok

(glutamát-kapuzott ioncsatornák):
- Idegszövetben (serkentő
ingerületátvitel)
- Kis szelektivitású kation csatornák
(Na+, K+, Ca2+)
- A poszt-szinaptikus membrán
depolarizációja →
felszültségkapuzott Na+ csatornák
nyitása
Csatornák: ligandkapuzott csatorna – az NMDA
receptor

Tetramer (heteromer): két homológ pár

Csatornák: ligandkapuzott csatorna – a nikotin típusú
acetil-kolin receptor
Csatornák: ligandkapuzott csatorna – a nikotin típusú
acetil-kolin receptor
Pentamer fehérjék:
- 4 különböző de homológ alegység
- Minden alegység 4 transzmemrán -
hélixet tartalmaz, és egy hosszú
intracelluláris hurkot az M3 és M4 domén
között
- Az alfa alegységek mély zsebeibe köt az
acetil-kolin.
- Ideg-izom kapcsolat (neuro-muszkuláris
junkció)
- Blokkolók: α-bungarotoxin, kurare
- Myasthenia gravis
Csatornák: intracelluláris hírvivő által kapuzott


Csatornák: intracelluláris hírvivő által kapuzott
ATP-szenzitív K+ csatorna (KATP-csatorna):
- Pórust kialakító alegységek: a szelektivitás és a kapuzás jellemzőinek meghatározása
- Járulékos alegységek: a csatorna működésének módosítása
Glükóz metabolizmus → ATP → SUR1-hez köt → K+ csatorna zár → membrán potenciál: depolarizáció →
Feszültségfüggő Ca2+ csatornákat nyit → Ca2+ beármalik → inzulin leadása

ABC transzporter
Csatornák: a sejttérfogat szabályozása

Fiziológiás állapot: a sejtek izotóniás Hipertóniás Izotóniás Hipotóniás

közegben vannak
Hipotóniás közeg → a sejt duzzad
(sejtszervek is)
Hipertóniás közeg → a sejt zsugorodik
 Komplex térfogatszabályozási
mechanizmusok:
• Szabályozó térfogatcsökkenés
(“regulatory volume decrease,
RVD)
• Szabályozó térfogatnövekedés Mechanizmus: a szervetlen ionok
(regulatory volume increase, RVI) eloszlásának megváltoztatása
Csatornák: a szabályozó térfogatcsökkenés
Limfocita:
Hipotóniás közeg → térfogatnövekedés →
membránfeszülés
• Membránfeszülés-kapuzott kis vezetőképességű
Cl- csatorna aktivációja
→ Cl- vesztés
→ Membrándepolarizáció
• Feszültség-kapuzott, depolarizáció-aktivált K+
csatorna nyitás
→ K+ kiáramlás
• Csökkent intracelluláris ozmolaritás
→ Passzív vízvesztés
→ Normál sejttérfogat visszaállása
Csatornák: a szabályozó térfogatcsökkenés

Sejttípustól függő mechanizmusok!

Példák:
1. membránfeszülés-
Hipotóniás
aktivált Ca2+ csatornák közeg
→ Ca2+ beáramlás →
Ca2+-aktivált K+ és Cl-
csatornák nyílása RVD
2. K+/Cl- szimport
aktivációja (eritrociták)
3. Hosszútávú
szabályozás:
aminosavak vesztése Normál sejttérfogat Sejtduzzadás
(taurin)
A szabályozó térfogatnövekedés
Limfocita:
Hipertóniás közeg → térfogatcsökkenés
• A Na+/H+ antiporter aktivációja
→ H+-vesztés
→ Intracelluláris lúgosodás
• HCO3-/Cl- antiporter aktivációja
→ HCO3- vesztés
• A H+ és HCO3- veszteség pótlása: szénsav-anhidráz
enzim (CO2+H2O → H2CO3 → H+ + HCO3-
→ Na+ és Cl- felhalmozódás, intracelluláris
ozmolaritás emelkedése
→ Passzív vízbeáramlás
→ Normál sejttérfogat visszaállása
A szabályozó térfogatnövekedés

Sejttípustól függő mechanizmusok!

Példák:
1. A sejt zsugorodása → a
Na+/K+/2Cl- (NKCC1)
kotranszporter aktivációja
(foszforiláció révén)
2. Hosszútávú RVI: szerves,
ozmotikusan aktív
metabolitok
felhalmozása,
makromolekulák
lebontása (taurin,
szorbitol, inozitol)
Csatornák: a vízcsatornák

Sejthártya (lipid kettős réteg): csekély

vízpermeabilitás
→ Vízcsatornák (aquaporinok): a víz
szabad diffúziója az ozmolaritás szerint
(109 molekula/s)
Példák:
- AQP-1: eritrociták, endothelsejtek,
vese proximális csatornák, plexus
choroideus
- AQP-2: vese gyűjtőcsatornák
- AQP-4: agy - asztrociták
Csatornák: ammónia csatornák

- Legismertebb ammónia csatorna izoforma az

emberi szervezetben: az eritrociták Rh
antigénje
- Szerkezet: három alegység, minden alegység
11 transzmembrán -hélix
- Minden alegység tartalmaz
ammóniára/metil-ammóniumra átjárható
pórust
- Másodpercenként több száz molekula jut át
(mM koncentráció mellett)
- Átjutáskor NH4+ és CH3NH3+ protont veszít (a
pórus hidrofób; NH3 és CH3NH2), a sejtbe
jutva visszanyeri.
Következő előadás

Sejtfelszíni receptorok és szignalizáció