‫اجلمهورية اجلزائرية الدميقراطية الشعبية‬ ‫رقم الرتتيب ‪.....

:‬‬
‫وزارة التعليم العايل والبحث العلمي‬ ‫رقم التسلسل ‪...... :‬‬
‫جامعة الشهيد محه خلضر الوادي‬
‫كلية العلوم الدقيقة‬
‫قسم‪ :‬الكيمياء‬
‫مذكرة خترج لنيل شهادة ماسرت أكادميي يف الكيمياء‬
‫تخصص ‪ :‬كيمياء العضوية‬
‫من إعداد ‪:‬‬
‫صاحلي اخلنساء ‪ -‬حدد سهيلة‬
‫حتت عنوان‪:‬‬
‫الدراسة الكيميائية للمستخلصات اخلامة ملسحوق نبتة الثوم‬
‫(‪ )Allium sativum L‬املزروعة مبنطقة الوادي‬

‫نوقشت يوم ‪2021/06/20‬‬

‫أمام جلنة املناقشة املكونة من ‪:‬‬

‫رئيسا‬ ‫جامعة الشهيد محه خلضر ‪ -‬الوادي‬ ‫أستاذة مساعد(أ)‬ ‫مسية شيحي‬

‫مناقشا‬ ‫جامعة الشهيد محه خلضر ‪ -‬الوادي‬ ‫أستاذ حماضر (أ)‬ ‫نور الدين اتمة‬

‫جامعة الشهيد محه خلضر ‪ -‬الوادي مساعد مؤطر‬ ‫أستاذة حماضر (أ)‬ ‫حنان دابش‬

‫مؤطرا‬ ‫جامعة الشهيد محه خلضر ‪ -‬الوادي‬ ‫نعيمة بن شيخة أستاذة تعليم عايل‬

‫السنة اجلامعية ‪2021/ 2020 :‬‬

 ‫الشكر والعرفان‬
‫الحمد هلل والشكر له كما ينبغي لجالل وجهه وعظيم سلطانه الذي بفضله وعونه تم إنجاز هذا العمل‬
‫المتواضع‪.‬‬
‫الشكر بعد هللا إلى من ال يسعنا رد الجميل لهما إال بالشكر إلى أغلى ما في الوجود "والدينا " وغفر هللا‬
‫ألبوينا الكريمين ورحمهما هللا ‪ ,‬سائلين من المولى عز وجل أن يمد أمهاتنا بالصحة والعافية ‪,‬هذا اليوم‬
‫هو ثمرة جهدهما وعنائهما وصبرهما وأملهما‪.‬‬
‫كما نتقدم بجزيل الشكر إلى األستاّذة المحترمة "بن شيخة نعيمة " التي أشرفت على هذا العمل من‬
‫خالل توجيهاتها وارشاداتها طيلة فترة العمل فجزاها هللا عنا كل الخير‪ ,‬ونشكر أيضا أستاذة دباش حنان‬
‫على توجهتها طيلة فترة عمل ‪.‬‬
‫كما نتوجه بالشكر إلى األستاذة " شاللبة إيمان " على ما جادت به من نصائح واإلرشادات خالل‬
‫فترة العمل‪.‬‬
‫الشكر موصول أيضا إلى مسؤولي المخبر البيداغوجي بكلية العلوم الدقيقة إلى كل من‬
‫" كنزة " ‪ " ,‬منى " ‪" ,‬كريمة "و" حفيظة"‪ ,‬على كل التسهيالت التي قدموها لنا خالل فترة العمل‪.‬‬
‫كما نتوجه بالشكر إلى المخبرية "جهاد شنه "على إنجازها إلختبارات الفعالية البيولوجية على مستوى‬
‫مخبر المجد للتحاليل الطبية‪.‬‬
‫وال ننسى أن نتوجه بالشكر إلى مسؤول مخبر ترقية وتكنولوجيا الموارد الصح اروية األستاذ‬
‫"محمد علي طليبة " على كل التوجيهات خالل فترة العمل‪.‬‬
‫وال ننسى أن نتوجه بالشكر إلى كل من ساعدنا في إتمام هذا العمل من قريب أو بعيد‪.‬‬
‫كما نتقدم بالشكر إلى أعضاء اللجنة المناقشة لقبولهم مناقشة هذه المذكرة‪.‬‬
‫كما تتسع دائرة الشكر إلى األساتذة الكرام وجميع طلبة دفعة ماستر ‪.2021‬‬

‫‪I‬‬
 ‫الملخص‬
‫يهدف هذا العمل إلى دراسة كيميائية للمستخلصات الطازجة والجافة لنبات الثوم )‪(Allium sativum‬‬
‫بنوعيه األبيض و األحمر و هذا عن طريق النقع في (الميثانول ‪ /‬الماء) بنسبة (‪ ,)% 20-% 80‬حيث‬
‫كان أفضل مردود الستخالص العينات الجافة ‪ ,% 25.98‬و بالنسبة للعينات الطازجة‪ ,‬أحسن نسبة‬
‫مردود كانت ‪ ,% 18.77‬كما تم من خالل اختبارات المسح الكيميائي الكشف عن نواتج األيض الثانوي‬
‫حيث تبين أنها تحتوي على أغلب مواد األيض الثانوي كالفينوالت و الفالفونيدات والقلويدات‪ ,‬و بعض‬
‫الخصائص الفيزيائية‪.‬‬
‫تم التقدير الكمي للمركبات الفينولية في مستخلصات نبات الثوم باستخدام مطيافية األشعة فوق‬
‫البنفسجية‪-‬المرئية‪ ,‬حسب طريقة (‪ (Singleton‬و ذلك باستخدام كاشف الفولين (‪Réactif -Ciocalteu‬‬
‫‪ )de Folin‬ومحلول ثالثي كلور األلمنيوم (‪ ,)AlCl3‬حيث قدرت كمية الفينوالت للعينات الطازجة للثوم‬
‫األحمر واألبيض على التوالي بـ (‪ 10.07 mg EAG / g‬و ‪ ,)3.85‬أما بالنسبة للعينات الجافة‬
‫لمسحوقي الثوم األحمر و الثوم األبيض‪ ,‬ف قدرت ب ـ (‪ 20.45 mgEAG / g‬و ‪ )13.49‬على‬
‫ْ‬
‫التوالي‪ .‬كما تم تقدير كمية الفالفونيدات لعينات الثوم األحمر و األبيض الطازجة‪ ,‬فكانت القيم‬
‫( ‪ 7.89mgEQr/ g‬و ‪ )3.61‬على التوالي‪ .‬أما بالنسبة لعينات مسحوقي الثوم األحمر و الثوم األبيض‬
‫ْ‬
‫الجافة‪ ,‬فكانت القيم على التوالي (‪ 5.18 mg EQr / g‬و‪ ,)0.20‬و الختبار الفعالية المضادة لألكسدة‬
‫قمنا بإتباع االختبارين ‪ ,)CAT( ,)DPPH( :‬حيث قدرت كمية (‪: )CAT‬‬
‫بالنسبة لعينات الثوم األحمر و الثوم األبيض الطازجة على التوالي بـ (‪ 17.19 mg EAA /g‬و‬
‫‪.)18.82‬‬
‫بالنسبة لعينات مسحوقي الثوم األحمر و الثوم األبيض الجافة على التوالي بـ (‪ 18.35 mg EAA / g‬و‬
‫ْ‬
‫‪.)18.82‬‬
‫كما قدرت (‪ )IC50‬لـ (‪: )DPPH‬‬
‫بالنسبة لعينات الثوم األحمر و الثوم األبيض الطازجة على الترتيب (‪ 3.53 mg / ml‬و ‪.)6.40‬‬
‫بالنسبة لعينات مسحوقي الثوم األحمر و الثوم األبيض الجافة بالقيم اآلتية على التوالي (‪mg / ml‬‬
‫ْ‬
‫‪ 2.77‬و ‪.)1.71‬‬
‫من جهة أخرى‪ ,‬أظهرت مطيافية األشعة تحت الحمراء (‪ )FTIR‬للمستخلصات الميثانولية لنبات الثوم‬
‫(‪ )A. sativum‬على وجود مجموعات وظيفية مثل مركبات الهيدروكسيل والكربونيل‪ ,‬والكربوكسيل‪.‬‬
‫و أخي ار و بعد تقييم اختبار الفاعلية المضادة للبكتيريا تجاه ساللتين من بكتيريا (‪)E. Coli‬‬
‫و (‪ ,)S. aureus‬تحصلنا على أكبر قطر تثبيط عند الساللة (‪ )S. aureus‬حيث قدر بـ (‪ 37‬مم)‪.‬‬
‫‪ ,DPPH‬السالالت‬ ‫الكلمات المفتاحية ‪:‬الثوم )‪ ,)Allium sativum‬المركبات الفينولية‪,CAT ,‬‬
‫البكتيرية‪ ,‬األيض الثانوي ‪.FTIR ,‬‬

‫‪II‬‬
Résumé :

Ce travail vise une étude chimique des extraits frais et secs de l'ail (Allium sativum), blanc et
rouge, par macération dans le mélange (méthanol / eau) à raison de (80 % / 20 %), où les
meilleurs rendements de l'extraction des échantillons secs et les échantillons frais ont été
respectivement de 25,98 % et de 18,77 %.

Des métabolites secondaires ont également été détectés par des tests de balayage chimique, où
il a été constaté qu'ils contiennent la plupart d’entre eux tels que les phénols, les flavonoïdes,
les alcaloïdes, ainsi que certaines propriétés physiques.

La détermination quantitative des composés phénoliques dans les extraits de l'ail a été réalisée
par spectroscopie UV-Visible et ce, selon la méthode Singleton en utilisant le réactif de Folin-
Ciocalteu, ainsi qu’une solution de trichlorure d'aluminium (AlCl3).

La quantité des phénols dans les échantillons frais des ails, rouge et blanc, a été estimée à
(10,07 et 3,85 mg EAG / g) respectivement, tandis qu’elle a été estimée à (20,45 et 13,49 mg
EAG / g) respectivement dans les échantillons secs des poudres d'ail rouge et d'ail blanc.

La quantité des flavonoïdes a également été évaluée pour les échantillons frais d'ail rouge et
blanc, et les valeurs ont été (7,89 et 3,61 mg EQr / g) respectivement. Quant aux échantillons
secs d'ail rouge et d'ail blanc en poudre, les valeurs ont été (5,18 et 0,20mg EQr / g)
respectivement.

Pour tester l'activité antioxydante, nous avons suivi les deux tests (DPPH) et (CAT), où les
résultats de (CAT) ont été comme suit :

 Pour les échantillons frais d'ail rouge et d'ail blanc : (17,19 et 18,82 mg EAA /g)
respectivement.
 Pour les échantillons secs d'ail rouge et d'ail blanc en poudre : (18,35 et 18,82 mg EAA /
g) respectivement.
Concernant les valeurs des (IC50) relatives au test (DPPH), elles ont été :

 Pour les échantillons frais d'ail rouge et d'ail blanc : (3,53 et 6,40 mg / ml) respectivement.
 Pour les échantillons secs d'ail rouge et d'ail blanc en poudre : (2,77 et 1,71 mg / ml)
respectivement.
D'autre part, la spectroscopie infrarouge (FTIR) des extraits méthanoliques de l'ail (A.
sativum) a montré la présence de groupements fonctionnels tels que les hydroxyles, les
carbonyles et les carboxyles. Enfin, après évaluation de l'activité antibactérienne sur deux
souches, à savoir, (E. coli), et (S. aureus), le plus grand diamètre d'inhibition a été obtenu
pour la souche (S. aureus), et a été estimé à (37 mm).
Mots-clés :
Ail (Allium sativum ), composés phénoliques, CAT, DPPH, souches bactériennes, métabolites
secondaires, FTIR.

III
 ‫قائمة المختصرات‬
A . sativum : Allium sativum.
DPPH : picrylhydrazyl diphenyl.
CAT : phosphmolybdenum.
R : Rendement.
UV: Ultra-Violet.
A : Absorbance.
ml : millilitre.
g: gramme.
Nm : nanométre.
mg: milligramme.
mg E AG/g : milligramme Equivalent Acide Gallique par gramme.
mg EQr/g: milligramme Equivalent Acide Quircetin par gramme.
λ : longueur d'onde .
% : pourcentage.
I%: pourcentage d'inhibition.
FTIR: Fourier Transform Infrared Spectrophotometer .
DMSO: Dimethyl Sulfoxide.
AA: Acide Ascorbic .
E.coli: Escherichia coli.
S.aureus : Staphylococcus aureus.
ATB: Antibiotique.

IV
‫الصفحة‬ ‫الفهرس‬

‫‪I‬‬ ‫الشكر والعرفان‬

‫‪II‬‬ ‫الملخص‬

‫‪IV‬‬ ‫قائمة المختصرات‬

‫‪V‬‬ ‫فهرس المحتويات‬

‫‪XI‬‬ ‫قائمة األشكال‬

‫‪XIII‬‬ ‫قائمة الجداول‬

‫‪01‬‬ ‫مقدمة عامة‬

‫‪02‬‬ ‫المراجع‬

‫الفصل األول‬

‫الدراسة النظرية حول نبات الثوم‬

‫‪Allium sativum‬‬

‫مدخل‬

‫‪.1.I‬العائلة الزنبقية ‪04............................................................. Liliaceae‬‬

‫‪.1.I‬الوصف النباتي لعائلة الزنبقية ‪04.................................................. Liliaceae‬‬

‫‪.2.1.I‬الجنس ‪04......................................................................... Allium‬‬

‫‪.2.I‬دراسة نباتية حول نبات الثوم ‪06............................................ Allium sativum‬‬

‫‪.1.2.I‬التصنيف النباتي ‪06..........................................................................‬‬

‫‪.2.2.I‬األسماء الشائعة لنبات الثوم ‪06..............................................................‬‬

‫‪.3.2.I‬وصف نبات الثوم ‪07........................................................................‬‬

‫‪V‬‬
‫‪.1.3.2.I‬الجذور ‪07................................................................................‬‬

‫‪.2.3.2.I‬الساق ‪07.................................................................................‬‬

‫‪.3.3.2.I‬األوراق والفصوص ‪07.....................................................................‬‬

‫‪.4.3.2.I‬األزهار ‪08................................................................................‬‬

‫‪.4.2.I‬الجزء المستعمل من نبات الثوم ‪08........................................ Allium sativum‬‬

‫‪.5.2.I‬الموطن األصلي واإلنتشار الجغرافي لنبات الثوم ‪09....................... Allium sativum‬‬

‫‪.6.2.I‬التركيب الكيميائي لنبات الثوم ‪10......................................... Allium sativum‬‬

‫‪.7.2.I‬اإلستعماالت الشعبية الطبية لنبات الثوم ‪11............................... Allium sativum‬‬

‫‪.8.2.I‬أستعماالت الطب الحديث لنبات الثوم ‪11................................. Allium sativum‬‬

‫المراجع ‪12 ........................................................................................‬‬

‫الفصل الثاني‬

‫المركبات الفينولية ومضادات األكسدة‬

‫مدخل‬

‫‪.1.II‬متعدد الفينول ‪17..............................................................................‬‬

‫‪.1.II‬تعريف ‪17.....................................................................................‬‬

‫‪.2.II‬الفالفونيدات ‪18...............................................................................‬‬

‫‪.1.2.II‬تعريفها ‪18..................................................................................‬‬

‫‪.2.2.II‬أقسام الفالفونيدات ‪18.......................................................................‬‬

‫‪VI‬‬
‫‪.3.II‬الجذور الحرة ومضادات األكسدة ‪20............................................................‬‬

‫‪.1.3.II‬تعريف الجذور الحرة ‪20.....................................................................‬‬

‫‪.2.3.II‬مضادات األكسدة ‪20.......................................................................‬‬

‫‪.1.2.3.II‬تعريفها ‪20...............................................................................‬‬

‫‪.2.2.3.II‬أنواع مضادات األكسدة ‪20................................................................‬‬

‫المراجع ‪21..........................................................................................‬‬

‫الفصل الثالث‬

‫الطرق والوسائل‬

‫‪.1.III‬تقديم المنطقة المدروسة ‪24...................................................................‬‬

‫‪.2.1.III‬الموقع الجغرافي لمنطقة وادي سوف ‪24.....................................................‬‬

‫‪.2.III‬المواد والطرق ‪24.............................................................................‬‬

‫‪.1.2.III‬المادة النباتية ‪24...........................................................................‬‬

‫‪.2.2.III‬األدوات والوسائل المستعملة ‪24.............................................................‬‬

‫‪.1.2.2.III‬المواد المستعملة ‪24.....................................................................‬‬

‫‪.2.2.2.III‬األدوات المستعملة ‪25...................................................................‬‬

‫‪.3.2.2.III‬األجهزة المستعملة‪25....................................................................‬‬

‫‪.3.III‬تعريف اإلستخالص ‪25......................................................................‬‬

‫‪.1.3.III‬األستخالص سائل – صلب ‪25............................................................‬‬

‫‪.2.3.III‬األستخالص على البارد (النقع ) ‪25........................................................‬‬

‫‪VII‬‬
‫‪.4.III‬تحضير المستخلصات المستعملة في الدراسة ‪26...............................................‬‬

‫‪.1.4.III‬العينات الجافة ‪26.........................................................................‬‬

‫‪.2.4.III‬العينات الطازجة ‪27.......................................................................‬‬

‫‪.3.4.III‬مخطط عام لتجارب المنجزة ‪28............................................................‬‬

‫‪.5.III‬حساب مردود اإلنتاجية للمستخلصات ‪29......................................................‬‬

‫‪.6.III‬تقدير درجة الحموضة (‪ )pH‬وتقدير درجة الناقلية (‪29....................................)EC‬‬

‫‪.7.III‬الكشف األولي للمركبات الكيميائية لنبات الثوم ‪29.............................................‬‬

‫‪.1.7.III‬الفالفونيدات ‪29...........................................................................‬‬

‫‪.2.7.III‬الفينوالت والعفص ‪29......................................................................‬‬

‫‪.3.7.III‬القلويدات ‪30..............................................................................‬‬

‫‪.4.7.III‬الصابونين ‪30.............................................................................‬‬

‫‪.5.7.III‬المركبات المرجعة (الكربوهيدرات )(السكريات ) ‪30..........................................‬‬

‫‪.6.7.III‬الجليكوسيدات ‪30..........................................................................‬‬

‫‪.7.7.III‬الستيرويدات ‪30...........................................................................‬‬

‫‪.8.7.III‬التانينات ‪30...............................................................................‬‬

‫‪.9.7.III‬التربينات الثالثية والستيروالت ‪31...........................................................‬‬

‫‪.10.7.III‬األنثوسينات ‪31..........................................................................‬‬

‫‪.8.III‬التقدير الكمي بواسطة مطيفية األشعة فوق البنفسجية – المرئية (‪31................. )UV-Vis‬‬

‫‪.1.8.III‬التقدير الكمي للمركبات الفينولية الكلية ‪32..................................................‬‬

‫‪VIII‬‬
 ‫‪.2.8.III‬مبدأ ‪32...................................................................................‬‬

‫‪.3.8.III‬المنحنى القياسي لحمض الغاليك ‪32.......................................................‬‬

‫‪.4.8.III‬طريقة العمل ‪33...........................................................................‬‬

‫‪.9.III‬التقدير الكمي للفالفونيدات الكلية ‪33..........................................................‬‬

‫‪.1.9.III‬المنحنى القياسي لحمض الكرستين ‪34......................................................‬‬

‫‪.2.9.III‬طريقة العمل ‪35...........................................................................‬‬

‫‪.10.III‬تقدير الفعالية المضادة لألكسدة بطرق الكيميائية ‪35..........................................‬‬

‫‪.1.1.10.III‬اختبار فعالية مضادات األكسدة الكلية ‪ CAT‬بإستعمال مولبيدات األمنيوم ‪35............‬‬

‫‪.2.1.10.III‬طريقة العمل ‪36.......................................................................‬‬

‫‪.2.10.III‬اختبار تثبيط الجذر الحر‪37...................................................... DPPH‬‬

‫‪.1.2.10.III‬تحضير الكاشف ‪37...................................................................‬‬

‫‪.2.2.10.III‬طريقة العمل ‪37.......................................................................‬‬

‫‪.3.2.10.III‬حساب نسبة التثبيط ‪ I%‬للجذر الحر ‪38....................................... DPPH‬‬

‫‪.4.2.10.III‬تحديد مقدار ‪ IC50‬المثبطة لجذر الحر ‪38..................................... DPPH‬‬

‫‪.11.III‬مطيافية األشعة تحت الحمراء ‪38...........................................................‬‬

‫‪.12.III‬اإلختبارات البيولوجية ‪39....................................................................‬‬

‫‪.1.12.III‬النشاط المضاد لميكروبات (البكتيريا ) ‪39.................................................‬‬

‫‪.2.12.III‬الخطوات العلمية لهذا اإلختبار ‪39........................................................‬‬

‫‪.3.12.III‬قراءة النتائج ‪41..........................................................................‬‬

‫‪IX‬‬
‫المراجع ‪42..........................................................................................‬‬

‫الفصل الرابع‬

‫النتائج والمناقشة‬

‫‪.1.IV‬حساب مردود للمستخلصات نبات الثوم ‪47................................ Allium sativum‬‬

‫‪.2.IV‬دراسة بعض خصائص الفيزيائية ‪49...........................................................‬‬

‫‪.3.IV‬نتائج الكاشف األولي لنبات الثوم ‪50...........................................................‬‬

‫‪.4.IV‬التقدير الكمي ‪51.............................................................................‬‬

‫‪.1.4.IV‬التقدير الكمي للفينوالت بإستخدام )‪51.......................................... (UV-Vis‬‬

‫‪.2.4.IV‬التقدير الكمي للفالفونيدات بإستخدام )‪53........................................ )UV-Vis‬‬

‫‪.5.IV‬الفاعلية المضادة لألكسدة ‪56..................................................................‬‬

‫‪.1.5.IV‬الفعالية المضادة لألكسدة الكلية ‪56................................................... CAT‬‬

‫‪.2.5.IV‬نتائج القدرة التثبيط للجذر الحر ‪58................................................. DPPH‬‬

‫‪.6.IV‬مطيافية األشعة تحت الحمراء ‪59...................................................... FTIR‬‬

‫‪.7.IV‬الفاعلية المضادة لبكتيريا ‪61.................................................................‬‬

‫المراجع ‪68........................................................................... ..............‬‬

‫الخاتمة ‪72.........................................................................................‬‬

‫المالحق‬

‫‪X‬‬
 ‫قائمة األشكال‬

‫الشكل( ‪ :)1.I‬نبات الثوم ‪7.......................................................Allium sativum‬‬

‫الشكل (‪ : )2.I‬عرض أجزء نبات الثوم ‪8.........................................Allium sativum‬‬
‫الشكل (‪ : )3.I‬البنية الكيميائية لمكون رئيسي لثوم ‪9.............................Allium sativum‬‬
‫الشكل (‪ : )1.II‬الهيكل األساسي للفالفونيدات ‪18...................................................‬‬
‫الشكل ( ‪ :)2.II‬أهم أقسام الفالفونيدات ‪19.........................................................‬‬
‫الشكل (‪ : )3.II‬مقطع تحت المجهر للجذور الحرة ‪20................................................‬‬
‫الشكل (‪ : )4.II‬أنواع مضادات األكسدة ‪21..........................................................‬‬
‫الشكل (‪ : )1.III‬طريقة االستخالص لعينات الجافة ‪26..............................................‬‬
‫الشكل ( ‪ :)2.III‬طريقة األستخالص لعينات الطازجة ‪27...........................................‬‬
‫الشكل (‪ :)3.III‬مخطط عام للتجارب المنجزة ‪28.....................................................‬‬
‫الشكل (‪ :)4.III‬رسم تخطيطي يوضح مبدأ عمل جهاز ‪32...........................UV-Visible‬‬
‫الشكل (‪ : )5.III‬منحنى القياسي لحمض الغاليك ‪33.................................................‬‬
‫الشكل (‪ : )6.III‬بعض مستخلصات ناتجة عن كشف مستخلصات الفينوالت ‪33......................‬‬
‫الشكل (‪ : )7.III‬آلية تشكل المعقد األصفر‪34.......................................................‬‬
‫الشكل ( ‪ : )8.III‬منحنى القياسي للكرستين ‪34.....................................................‬‬
‫الشكل (‪ :)9.III‬بعض مستخلصات ناتجة عن كشف الفالفونيدات ‪35................................‬‬
‫الشكل (‪ :)10.III‬منحنى القياسي حمض األسكوربيك‪36.............................................‬‬
‫الشكل (‪ : )11.III‬بعض مستخلصات بعد إضافة محلول الموليبدات‪36...............................‬‬
‫الشكل (‪ : )12.III‬آلية تثبيط العمل المضادة لألكسدة مع الجذر الثابت ‪37....................DPPH‬‬
‫الشكل(‪ : )13.III‬بعض مستخلصات بعد إضافة محلول ‪38.........................................DPPH‬‬

‫الشكل(‪ : )14.III‬صورة فوتوغرافية لجهاز مطيافية األشعة تحت الحمراء ‪38....................FTIR‬‬

‫الشكل (‪: )15.III‬قطر منطقة التثبيط للبكتيريا ‪41...................................................‬‬
‫الشكل (‪: )1.IV‬أعمدة بيانية لمردودية المستخلصات للعينات الطازجة لنبات الثوم )‪47..)A.sativum‬‬
‫الشكل (‪ :)2.IV‬أعمدة بيانية لمردودية المستخلصات لعينات الجافة لنبات الثوم ) ‪48.....)A.sativum‬‬

‫‪XI‬‬
‫الشكل (‪ :)3.IV‬أعمدة بيانية لكمية الفينوالت للمستخلصات العينات الطازجة لنبات الثوم‬
‫)‪52...................................................................................)A.sativum‬‬
‫الشكل (‪ :)4.IV‬أعمدة بيانية لكمية الفينوالت للمستخلصات العينات الجافة لنبات الثوم‬
‫) ‪52................................................................................)A.sativum‬‬
‫الشكل (‪ :)5.IV‬أعمدة بيانية لكمية الفالفونيدات لمستخلصات العينات الطازجة لنبات الثوم‬
‫)‪54...................................................................................)A.sativum‬‬
‫الشكل (‪ :)6.IV‬أعمدة بيانية لكمية الفالفونيدات لمستخلصات العينات الجافة لنبات الثوم‬
‫)‪55...................................................................................)A.sativum‬‬
‫الشكل (‪ : )7.IV‬أعمدة بيانية لقيم المضادات لألكسدة اإلرجاعية ‪ CAT‬الطازجة لنبات الثوم‬
‫)‪56...................................................................................)A.sativum‬‬
‫الشكل (‪ :)8.IV‬أعمدة بيانية لقيم المضادات لألكسدة اإلرجاعية ‪ CAT‬لعينات الجافة لنبات الثوم‬
‫) ‪57..................................................................................)A.sativum‬‬
‫الشكل (‪ : )9.IV‬منحنيات النشطية لمستخلصات العينات الطازجة في تثبيط الجذر الحر ‪59...DPPH‬‬
‫الشكل (‪ : )10.IV‬منحنيات النشاطية لمستخلصات العينات الجافة في تثبيط الجذر الحر ‪59...DPPH‬‬
‫الشكل (‪ : )11.IV‬أطياف (‪ )FTIR‬لمستخلصات الميثانولية لنبات الثوم )‪60............)A.sativum‬‬
‫الشكل (‪ : )12.IV‬أعمدة بيانية توضح أقطار تثبيط لمستخلصات العينات الطازجة والجافة لمستخلص‬
‫‪ DMSO‬لنبات الثوم ‪63.............................................................................‬‬
‫الشكل (‪ : )13.IV‬أقطار تثبيط للمستخلصات لعينات الطازجة والجافة لمستخلص ‪ DMSO‬في وجود‬
‫المضاد الحيوي ‪63............................................................................ ATB‬‬
‫الشكل (‪ : )14.IV‬أقطار تثبيط لعينات الطازجة والجافة لمستخلص الميثانولي إتجاه سالسلتين بكتيرتين‬
‫‪ E.coli ,S.aureus‬في وجود المضادة الحيوي ‪65.............................................ATB‬‬

‫‪XII‬‬
 ‫قائمة الجدوال‬
‫الجدول (‪ :)1.I‬بعض أنواع النباتية التابعة لجنس الثوم ‪5..........................Allium sativum‬‬

‫الجدول (‪ :)2.I‬التصنيف النباتي لنبات الثوم ‪6....................................Allium sativum‬‬

‫الجدول (‪ :)3.I‬التركيب الكيميائي لفصوص الثوم ‪10..............................Allium sativum‬‬

‫الجدول (‪ :)1.III‬األنواع المختبرة للميكروبات واختصارتها ‪39.........................................‬‬

‫الجدول (‪ :)1.IV‬مردود المستخلصات المدروسة ‪47..................................................‬‬

‫الجدول (‪ :)2.IV‬الخصائص الفيزيائية لمستخلصات المدروسة ‪49.....................................‬‬

‫الجدول (‪ :)3.IV‬نتائج الكواشف األيض الثانوي ‪50..................................................‬‬

‫الجدول (‪ :)4.IV‬اإلمتصاصية وكمية الفينوالت لمستخلصات المدروسة‪51.............................‬‬

‫الجدول (‪ :)5.IV‬قيم اإلمتصاصية وكمية فالفونيدات للمستخلصات المدروسة ‪54....................‬‬

‫الجدول (‪ :)6.IV‬قيم النشاطية المضادة لألكسدة الكلية ‪56......................................CAT‬‬

‫الجدول (‪ :)7.IV‬قيم ‪ IC50‬و‪ ARP‬لمستخلصات ‪59.........................................DPPH‬‬

‫الجدول (‪ :)8.IV‬نوع الرابطة والتردد الموافق لكل مستخلص ميثانولي لنبات الثوم ‪61 ....A.Sativum‬‬

‫الجدول (‪ :)9.IV‬أقطار التثبيط (مم) ألنواع البكتيريا الناتجة عن تراكيز مختلفة لمستخلص ‪DMSO‬‬
‫لنبات الثوم ‪62..........................................................................A.sativum‬‬

‫الجدول (‪ :)10.IV‬أقطار التثبيط (مم) ألنواع البكتيريا لمستخلص الميثانولي لنبات الثوم ‪A.sativum‬‬
‫‪64..................................................................................................‬‬

‫‪XIII‬‬
‫مقدمة‬
 ‫مقدمة عامة‬

‫مقدمة عامة‬
‫تعتبر الطبيعة بما تحويه من أصناف ال تعد وال تحصى من النباتات كنز ال يفنى من المواد األولية‬
‫الغزيرة والمتنوعة ]‪ , [1‬حيث جذب اهتمام االنسان منذ بداية وجوده على األرض أمور عديدة وكان‬
‫للصحة والجمال قدر هام في حياته وقد دفعاه للبحث عن السبل التي تؤدي إليهما في كل ما حوله وقد‬
‫ربط االنسان األول بين النباتات البرية التي تعيش حوله وبين األمراض التي يصاب بها ]‪.[2‬‬
‫وبفضل التقدم العلمي والتكنولوجي السريع استطاع اإلنسان تدريجيا االستغناء عن النباتات واألعشاب‬
‫في العالج واستبدالها باألدوية و العقاقير الكيميائية ]‪ , [3‬في الوقت الحالي تحتل النباتات الطبية مكانة‬
‫كبيرة في الميادين الزراعة والكيمياء والصيدلة ]‪ [4‬بعد ما أصبحت المعالجة النباتية قائمة على أسس‬
‫علمية والجدير بالذكر أنها تكون على شكل مستحضرات تقليدية ومواد فعالة نقية ( فالفونيدات‪ ,‬تربينات ‪,‬‬
‫متعدد الفينوالت وغيرها وبالتالي يكون لها عدة استطبابات في آن واحد ) ]‪.[5‬‬
‫كما تستعمل النباتات الطبية بشكل واسع في الجزائر خاصة في المناطق الجنوبية ‪ ,‬من بينها منطقة‬
‫الوادي التي تعتبر نموذجا مثاليا لدراسة انتشار واستعمال النباتات الطبية الصحراوية ]‪.[6‬‬
‫لذلك تركزت دراستنا في هذا البحث على احدى نباتات الطبية في الجزائر والموجودة في مناخ‬
‫الصحراوي بمنطقة وادي سوف والذي يعرف بإسم الثوم ‪ Allium Satvium‬والمعروف منذ زمن الرومان‬
‫والفراعنة ‪ ,‬حيث أن العديد من األطعمة واألعشاب والمنتجات الطبية المشتقة من النباتات غنية بالمركبات‬
‫الفينولية التي يمكن أن تمنع األمراض أو تعالجها أو تشفيها من أمراض القلب التاجية (كورونا)‪ ,‬وأيضا‬
‫تجلت استعماالتها الطبية الفعالة في عالج إرتفاع ضغط الدم والزكام ]‪.[8] [7‬‬
‫و ا نطالقا من هاته الخصائص العالجية وغيرها تبادرت الى أذهاننا العديد من األسئلة مفادها ماهي‬
‫المركبات الكيميائية الفعالة المكونة لنبتة ؟ و هل هذه المركبات لها تأثير على كبح الجذور الحرة ؟ و هل‬
‫لها فعالية بيولوجية ؟‬
‫و لإلجابة على كل هاته األسئلة قمنا بدراسة تجريبية لفصوص نبات الثوم التي تنتمي إلى عائلة‬
‫الزنبقية حيث تم تقدير المركبات الفينولية المتواجدة فيه واختبار فعاليتها المضادة لألكسدة ‪.‬‬
‫و قد شملت هذه المذكرة ‪:‬‬
‫الجزء النظري ‪:‬ويضم فصلين ‪.‬‬
‫‪ ‬الفصل األول ‪:‬الدراسة النباتية لنبات الثوم ‪.‬‬
‫‪ ‬الفصل الثاني ‪:‬الدراسة الكيميائية ‪.‬‬
‫الجزء العملي ‪:‬ويضم فصلين ‪.‬‬
‫‪ ‬الفصل الثالث ‪:‬الطرق والوسائل ‪.‬‬
‫‪ ‬الفصل الرابع ‪:‬النتائج والمناقشة ‪.‬‬

‫‪1‬‬
 ‫مراجع مقدمة عامة‬

‫المراجع ‪:‬‬
‫]‪ [1‬حسان ‪ ,‬ق ‪ .,‬معجم األعشاب والنباتات الطبية ‪ .‬دار الكتب العلمية ‪ 568‬صفحة ‪. )2010( ,‬‬
‫غياث ‪ ,‬م ‪ .,‬تعيين التركيب الكيميائي للزيت العطري ااألساسي في أوراق نبات المليسة وتعيين‬ ‫]‪[2‬‬
‫المحتوى الكلي للفينوالت و الفالفانويدات من منقوع أورقها ‪.‬دراسة مقدمة لنيل درجة الماجستير في‬
‫الكيمياء ‪.‬جامعة دمشق ‪ 142‬ص‪.)2015( ,‬‬
‫]‪ [3‬راهوني ‪ ,‬س ‪.‬وساري ع ‪ ,.‬استخالص وتحليل الزيت األساسي لنبات الجعدة (‪Teucirum polium‬‬
‫) مذكرة تخرج لنيل شهادة أستاذ التعليم الثانوي ‪ ,‬المدرسة العليا لألستاذة ‪ 62 ,‬ص‪.)2008( ,‬‬
‫]‪ [4‬حسان ‪ ,‬ق ‪ .,‬معجم األعشاب والنباتات الطبية ‪,‬دار الكتب العلمية ‪ 568‬صفحة ‪.)2010( ,‬‬
‫]‪ [5‬شروانة س ‪ ,.‬فصل وتحديد منتجات األيض الثانوي الفالفانويدي لنبتة ( ‪) Lycium arabicum‬‬
‫مذكرة تخرج لنيل شهادة ماجستير‪,‬جامعة قسنطينة ‪ 65,‬ص ‪.)2007(,‬‬
‫]‪ [6‬حليس ‪ ,.‬الموسوعة النباتية لمنطقة سوف ‪,‬النباتات الصحراوية الشائعة في منطقة العرق الشرقي‬
‫الكبير‪ .‬دار النشر بالمنطقة الصناعية كوينين والية الوادي ‪ ,‬مطبعة الوليد ص ‪.)2007(,248‬‬
‫المراجع االجنبية ‪:‬‬
‫‪[7] Gebre selema ,G., Mebrahtu, G.Medicinal values of garlic: A‬‬
‫‪review.International Journal of Medicine and Medical Sciences,Vol. 5(9),401-‬‬
‫‪408p.(2013).‬‬
‫‪[8] Rahman, M.J., A.C. de Camargo, and F.J.F.c. Shahidi, Phenolic profiles and‬‬
‫‪antioxidant activity of defatted camelina and sophia seeds.. 240: p. 917-925.‬‬
‫‪(2018).‬‬

‫‪2‬‬
 ‫الفصل األول‬
‫الدراسة النظرية حول نبات الثوم‬
‫‪Allium Sativum‬‬
‫الدراسة النظرية حول نبات الثوم ‪Allium Sativum‬‬ ‫الفصل األول‬

‫مدخل ‪:‬‬
‫الثوم ‪ (Allium sativum) L'ail‬من محاصيل الخضر التي تتبع الفصيلة الزنبقية )‪)Lilaceae‬‬
‫وهو محصول ذو قيمة إقتصادية و غذائية كبيرة و يعتقد أن موطن الثوم جنوب أوروبا و قد عرفه قدماء‬
‫المصريين منذ ‪ 2780‬قبل الميالد والحضارات القديمة ‪ ,‬و يستعمل في الطهي و صناعة التخليل و حفظ‬
‫اللحوم و األسماك ‪ ,‬كما يستعمل في بعض األغراض الطبية ]‪. [1‬‬

‫‪.1.I‬العائلة الزنبقية ‪: Liliaceae‬‬

‫‪ .1.1.I‬الوصف النباتي لعائلة الزنبقية ‪: Liliaceae‬‬

‫تشمل العائلة الزنبقية ( ‪ ) Liliaceae‬حوالي ‪ 254‬جنسا وحوالي ‪ 4075‬نوعا ‪.‬وهي نباتات عشبية‬
‫معمرة ]‪ , [2‬و تتميز نباتات هذه العائلة بأوراق بسيطة بها عروق متوازية والساق غالبا عشبي وال‬
‫يتفرع ]‪ , [3‬والثمرة كبسولة مكونة من ثالثة غرف وأحيانا تكون عباره عن عنبه ‪ ,‬األزهار سفلية ثنائية‬
‫الجنس ‪,‬المتاع علوي مكون من ثالثة كرابل ملتحمة ‪ ,‬والوضع مشيمي محوري ‪ ,‬الطلع مكون من ‪6‬‬
‫أسدية في محيطين ‪ ,‬في كل محيط ثالثة أسدية ]‪.[5] [4‬‬

‫‪ . 2.1.I‬الجنس ‪: Allium‬‬

‫يشمل جنس ( ‪ )Allium‬حوالي ‪ 30‬نوعا يسود كثيرا من دول العالم وقد اشتق إسمه من العائلة‬
‫الزنبقية )‪ . [6] )Liliales‬ومن أنواع أخرى لهذا الجنس يوضحها الجدول رقم (‪)1.I‬‬

‫‪4‬‬
Allium Sativum ‫الدراسة النظرية حول نبات الثوم‬ ‫الفصل األول‬

. [7] Allium sativum ‫ بعض أنواع النباتية التابعة لجنس الثوم‬: )1.I(‫الجدول‬

Allium vineale L Allium oleraceum L

Allium roseum L Allium lusitanicum L

Allium neapolitanum L Allium ericetorum L

Allium schoenoprasum L Allium subhrisutum L

5
Allium Sativum ‫الدراسة النظرية حول نبات الثوم‬ ‫الفصل األول‬

: Allium sativum ‫ دراسة نباتية حول نبات الثوم‬. 2.I

: ‫التصنيف النباتي‬.2.1.I

.[ 8 ] Allium sativum ‫التصنيف النباتي لنبات الثوم‬:)2.I(‫جدول‬

Régne Plante ‫المملكة‬

Sous régne Trachéophyte ‫تحت المملكة‬
Embranchement Spermatophytes ou ‫الشعبة‬
Phanérogames
Sous embranchement Angiospermes ‫تحت الشعبة‬
Classe Monocotyledomes ‫الصف‬
Sous classe Liliidae ‫تحت الصف‬
Ordre Lilales ‫الرتبة‬
Famille Liliaceae ou Lilacées ‫العائلة‬
Genre Allium ‫الجنس‬
Espéce Allium Sativum ‫النوع‬

: [11] [10] [9] ‫األسماء الشائعة لنبات الثوم‬.2.2.I

‫ الثوم‬: ‫اإلسم العربي‬

Allium sativum : ‫اإلسم العلمي‬

garlic : ‫اإلسم اإلنجليزي‬

Ail :‫اإلسم الفرنسي‬

6
‫الدراسة النظرية حول نبات الثوم ‪Allium Sativum‬‬ ‫الفصل األول‬

‫‪.3.2.I‬وصف نبات الثوم ‪:‬‬

‫نبات عشبي منتفخ محمر ‪ ,‬رائحته قوية ونفاذة ‪,‬األوراق طويلة ومسطحة وناعمة مع نصل ورقة‬
‫أسطوانية ومجوفة ]‪ , [12‬رأس الثوم عبارة عن بصلة مكونة من فصوص مسطحة وصلبة مع قمة حادة‬
‫‪,‬يتم لف جميع الفصوص في غشاء رقيق أبيض أو وردي ‪.‬عدد الفصوص لكل بصلة يختلف من ‪5‬إلى‬
‫‪ 16‬فص ‪ .‬ساقها مجوفة ويمكن أن يصل إرتفاعها إلى ‪ 50‬سم ‪ .‬الزهور تختلف في العدد ووجودها أو‬
‫غيابها في العديد من األصناف ‪,‬أما التكاثر فيكون عن طريق األبصال والفصوص]‪.[13‬‬

‫الشكل )‪ : ( 1.I‬نبات الثوم ‪( Allium Sativum‬األصلي)‬

‫‪ .1.3.2.I‬الجذور ‪:‬‬
‫يتشابه المجموع الجذري الثوم مع المجموع الجذري للبصل ‪ ,‬وينتج كل نبات من ‪ 40-60‬جذرا‬
‫تنتشر جانبا لمسافة نحو ‪ 45‬سم ‪ ,‬ورأسيا لعمق ‪ 75‬سم ‪ ,‬تعتبر جذور الثوم قليلة التفريغ ‪,‬لكن تفرعاتها‬
‫أكثر وأطول قليال مما في البصل ‪ ,‬وتنتشر الجذور في الطبقة السطحية من التربة وتشغلها بصورة جيدة‬
‫]‪.[14‬‬

‫‪.2.3.2.I‬الساق ‪:‬‬
‫تتشابه ساق الثوم مع ساق البصل ‪,‬وتموت الساق الرئسية للنبات عند نضج البصلة ‪ ,‬كما تموت‬
‫الجذور واألوراق ‪,‬وتظل الفصوص فقط محتفظة بحيويتها ‪[15].‬‬

‫‪ .3.3.2.I‬األوراق والفصوص ‪:‬‬

‫أوراق الثوم زورقية الشكل أي غير أنبوبية ويبلغ عرضها نحو ‪ 3-1.5‬سم األوراق عند نضجها‬
‫رقيقة ‪ ,‬وجافة وحرشفية ‪ ,‬ولونها أخضر ‪ .‬وتتكون رأس الثوم من ‪ 8-4‬محيطات من الفصوص ‪,‬‬
‫يحتوي كل محيط منها على ‪ 8-14‬فصا ‪ ,‬ويشبه المحيط شكل حدوة الفرس ‪ ,‬ويصغر فيه حجم الفص‬
‫كلما كان قريب من أحد طرفي الحدوة ‪.‬‬
‫‪7‬‬
‫الدراسة النظرية حول نبات الثوم ‪Allium Sativum‬‬ ‫الفصل األول‬

‫يتكون كل فص من ورقتين ناضجتين وبرعم خضري ‪ ,‬تسمى الورقة الخارجية بالورقة الحامية ‪,‬‬
‫وهي عبارة عمد أسطواني ذي فتحة صغيرة في قمته ‪ ,‬ويكون نصلها أثريا ويحيط الغمد بكل فص‬
‫‪,‬وتكون له طبقة سطحية من األنسجة الملتفة القوية التي تصبح رقيقة ‪,‬وجافة ‪,‬ومتينة عند النضج ‪[15].‬‬

‫‪ .4.3.2.I‬األزهار ‪:‬‬
‫إن الشمراخ الزهري لنبات الثوم مصمت وقصير وينتهي الشمراخ بنورات خيمية صغيرة ‪,‬توجد بها‬
‫بالبل زهرية دائما ‪,‬إال أن األزهار تكون دائما صغيرة ‪ ,‬وعقيمة ويعني ذلك أنه ليست للثوم بذور ‪[16] .‬‬

‫فصوص الثوم (‪(D‬‬ ‫لمبة الثوم (‪)C‬‬ ‫األزهار (‪)B‬‬ ‫األوراق (‪)A‬‬

‫]‪[10] [9‬‬ ‫الشكل (‪ :)2.I‬عرض أجزء نبات الثوم ‪Allium sativum‬‬

‫‪ .4.2.I‬الجزء المستعمل من نبات الثوم ‪: Allium sativum‬‬

‫الجزء المستعمل من الثوم هي الفصوص التي تشتهر بمركبات الكبريت ‪ ,‬الذي يمكن يختلف محتواه‬
‫اختالفا كبيرا اعتمادا على الصنف واألصل الجغرافي ‪ ,‬ووقت الحصاد وظروف التخزين ‪[ 17 ] .‬‬
‫]‪.[18‬‬

‫‪8‬‬
‫الدراسة النظرية حول نبات الثوم ‪Allium Sativum‬‬ ‫الفصل األول‬

‫حيث المكون الرئيسي للثوم هو ‪: Alliine‬‬

‫‪Alliine‬‬

‫الشكل (‪ :)3.I‬البنية الكيميائية لمكون الرئيسي لثوم ‪[19 ] .Allium sativum‬‬

‫‪.5.2.I‬الموطن األصلي واإلنتشار الجغرافي لنبات الثوم ‪: Allium sativum‬‬

‫ينتمي الثوم للعائلة الزنبقية ‪ ,‬المنتشرعلى نطاق واسع يزرع على مستوى العالم بشكل أساسي‬
‫لتطبيقاته الغذائية ‪ ,‬ونشأته كانت في آسيا الوسطى ثم انتشرت إلى الصين ‪ ,‬الشرق األوسط ‪ ,‬قبل إنتقال‬
‫من الغرب إلى جزيرة صقيلية ‪ ,‬وشمال إفريقيا ]‪ .[20‬أوسط وجنوب أوروبا ‪ ,‬ثم المكسيك ]‪ .[21‬وتعد‬
‫الصين هي المنتج الرئيسي مع أكثر من ‪ 81%‬من اإلنتاج العالمي ]‪ .[22‬يعتبر ثاني أهم المحاصيل‬
‫الخضر التابعة للعائلة الزنبقية بعد البصل ويعتقد ان موطنه األصلي منطقة وسط آسيا ‪[23].‬‬

‫‪9‬‬
‫الدراسة النظرية حول نبات الثوم ‪Allium Sativum‬‬ ‫الفصل األول‬

‫‪ .6.2.I‬التركيب الكيميائي لنبات الثوم ‪: Allium sativum‬‬

‫نبات الثوم يحتوي على مواد كيميائية مختلفة النسب نلخصها في الجدول (‪)3.I‬‬

‫الجدول(‪ :)3.I‬التركيب الكيميائي لفصوص الثوم ‪[22] Allium sativum‬‬

‫نسبتها‬ ‫المادة الكيميائية‬

‫)‪4.21(mg/100g‬‬ ‫القلويدات‬
‫(‪3.54 (mg/100g‬‬ ‫التانينات‬
‫(‪5.56 ( mg/100g‬‬ ‫الفالفونويد‬
‫)‪0.80 (mg/100g‬‬ ‫الصابونين‬
‫)‪0.64 )mg/100g‬‬ ‫الكاروتينات‬
‫)‪0.04)mg/100g‬‬ ‫سترويدات‬
‫)‪0.02)mg/100g‬‬ ‫‪Cardenolides‬‬
‫)‪15.33)mg/100g‬‬ ‫بروتين خام‬
‫)‪0.72)mg/100g‬‬ ‫الدهون الخام‬
‫)‪2.10)mg/100g‬‬ ‫ألياف خام‬
‫)‪4.08)mg/100g‬‬ ‫الرماد‬
‫)‪73.22(mg/100g‬‬ ‫الكربوهيدرات‬
‫)‪10.19)mg/100g‬‬ ‫البوتاسيوم‬
‫)‪26.30)mg/100g‬‬ ‫الكالسيوم‬
‫)‪10.19)mg/100g‬‬ ‫الفسفور‬
‫)‪5.29)mg/100g‬‬ ‫الحديد‬
‫)‪0.001)mg/100g‬‬ ‫المغنيسيوم‬
‫)‪0.34)mg/100g‬‬ ‫الزنك‬
‫)‪0.001)mg/100g‬‬ ‫المنغنيز‬
‫‪/‬‬ ‫كوبالت‬
‫‪/‬‬ ‫الرصاص‬
‫‪3.91%‬‬ ‫الحموضة‬
‫‪0.97%‬‬ ‫حموضة قابلة للمعايرة‬
‫‪2.39%‬‬ ‫أمالح‬

‫‪10‬‬
‫الدراسة النظرية حول نبات الثوم ‪Allium Sativum‬‬ ‫الفصل األول‬

‫‪ .7.2.I‬اإلستعماالت الشعبية الطبية لنبات الثوم ‪: Allium sativum‬‬

‫استعماالت نبات الثوم في الطب الشعبي غير محدودة ‪ ,‬نذكر منها في نقاط التالية ‪:‬‬

‫‪ ‬يستخدم الثوم على نطاق واسع لتجنب اإلصابة نزالت البرد ‪.‬كما يعتبر الثوم قاتال للفيروسات‬
‫المسببة للبرد والرشح ‪ ,‬تناول الثوم عند الشعور ببداية اآلالم بالحلق يمنع حدوث إلتهابات الحلق ونزالت‬
‫البرد ‪.‬ويعتقد أن الثوم يزيد من مناعة الجسم ضد الخاليا المرضية والسر في قوة الثوم هو مادة تدخل في‬
‫تكوينه تعرف باسم أليسين ‪ ,‬وهي المادة البيولوجية الرئيسية التي تنتجها نبتة الثوم ‪ ,‬ولها القدرة على‬
‫خفض معدل اإلصابة بالزكام الشائع بنسبة تزيد على النصف ‪.‬ويستخدم الثوم لعالج الكحة والربو‬
‫والسعال الديكي ‪[24].‬‬
‫‪ ‬يخفض ضغط الدم حيث تبين بأن مادة آليسين في الثوم تمنع النوع المتوسط من إرتفاع الضغط‬
‫دموي ‪(.‬من خالل منع تكوين انجوتنسين الذي يقلص األوعية الدموية ويحبس الماء واألمالح داخل‬
‫الجسم ) ويخفض معدل الكوليسترول بالدم ‪[25] .‬‬
‫‪ ‬أستخدام المصريون األوائل الثوم لعالج اإلسهال حيث وجد الوصفة الطبية على الجدران القديمة‬
‫للمعابد يعود تاريخها إلى ‪ 1500‬قبل الميالد ‪ ,‬أما األطباء اليونانيون فقد استخدموه لعالج االمراض‬
‫المعوية واليابانيون والصينيون القدماء لعالج الصداع‪ ,‬إنفلونزا وإلتهاب الحلق والحمى وإلتهاب األذن‬
‫‪[26].‬‬

‫‪ .8.2.I‬أستعماالت الطب الحديث لنبات الثوم ‪Allium sativum :‬‬

‫‪ ‬الثوم مفيد لألسماك حيث عند إضافة الثوم بنسب معينة لعليقة األسماك وجد زيادة في وزن السمك‬
‫مع زيادة مقاومة األسماك للعدوى البكتيري ‪[27].‬‬
‫‪ ‬يستعمل كعالج للسعات النحل والحشرات حيث يدعك مكان اللسعة بسن الثوم لتخفيف ألم اللسعة كما‬
‫يستخدم لتسكين ألم أسنان وذلك بوضع فصوص ثوم مهروسة موضع اآللم ويستخدم لمعالجة القشرة في‬
‫فروة الرأس كما يستخدم عصير الثوم كمطهر للجروح العفنة والقروح ‪[28].‬‬
‫‪ ‬الثوم من أهم المنتجات الطبيعية لحماية نظام القلب و األوعية الدموية حيث يقلل الثوم بشكل فعال‬
‫من إرتفاع ضغط الدم بعد آليات من خالل مقاومة اإلجهاد التأكسدي وتثبيط اإلنزيم المحول لألنجيوتنسين‬
‫وزيادة اكسيد النتروجين وكبريتيد الهيدروجين عالوة على ذلك حسنت معالجة مستخلص الثوم أنسجة‬
‫القلب في نموذج الفئران ‪[22].‬‬
‫‪ ‬أجريت دراسة حول خاصية مضادة األكسدة لنبات الثوم (النيء و المطبوخ ) الثوم النيء أظهر‬
‫فعالية لألكسدة أقوى من الثوم المطبوخ بواسطة عدة مقاييس وتم العثور على الخصائص المضادة‬
‫لألكسدة مثل ( ‪ )H2O2,FRAP,DPPH‬وبالمقارنة بين مستخلص الثوم متعدد الفصوص ومستخلص الثوم‬
‫ذو الفص الواحد ‪ ,‬يحتوي هذا األخير على كمية أقوى من الفينول وأظهرت المركبات نشاطا مضادا‬
‫لألكسدة ‪[29].‬‬

‫‪11‬‬
 ‫مراجع الفصل األول‬

‫المراجع العربية ‪:‬‬

‫]‪ [3‬هاني ‪,‬م ‪ .,‬دراسة بيولوجية و مورفولوجية لبذور بعض األعشاب الضارة بمحاصيل الحبوب‬
‫الشتوية في منطقة الهضاب العاليا السطايفية ‪ ,‬أطروحة مقدمة لنيل شهادة ‪ :‬دكتوراء علوم ‪ ,‬جامعة‬
‫فرحات عباس ‪ ,‬سطيف ص ‪.)2012( ,178‬‬

‫]‪ [18‬غسان ‪,‬ج‪,‬ز‪ . ,‬قتيبة ‪ ,‬ي‪,‬ع‪. ,‬أنس ‪,‬م‪,‬ت‪ .,‬تأثير موعد الزراعة وتغطية التربة في نمو وحاصل‬
‫الثوم ‪ ,‬مجلة ديالي للعلوم السراعية ‪.)2011( ,251-240:)1(3,‬‬

‫]‪ [21‬هيام ‪,‬ر‪,.‬معصومة ‪,‬ع‪ ,.‬أسرار العالج بالزيتون ‪ ,‬دار القلم ‪ ,‬الطباعة والنشر والتوزيع ‪ ,‬بيروت‬
‫‪.‬لبنان ‪ .‬ص ‪.)2016(, 104‬‬

‫]‪ [23‬حسن ‪ ,‬أ‪ ,‬ع ‪ . ,‬إنتاج خضر المواسم المعتدلة والباردة في أراضي الصحراوية ‪ ,‬سلسلة العلوم‬
‫الخضر في األرضي الصحراوية ‪ ,‬الطبعة األولى ‪ ,‬الدار العربية للنشر والتوزيع ‪.)1994(,‬‬

‫]‪ [24‬كتاب دليل البدائل الطبية للدكتورة سامية حمزة عزام ‪ ,‬دار المناهل للنشر ‪2002‬م‪.‬‬

‫]‪ [25‬آية ‪,‬ج‪ ,‬س ‪ .,‬إيمان ‪,‬م‪ ,‬ع‪ .,‬الثوم وفوائده الصحية ‪,‬مجلة أسيوط للدراسات البيئية – العدد‬
‫األربعون ‪.‬ص‪.)2014( ,3‬‬

‫]‪ [28‬حسين ‪,‬س‪.‬ص‪,.‬سالي ‪,‬ب‪.‬ش‪ ,.‬الطب البديل عن طريق معرفة القيمة الغذائية للفواكه والخضر‬
‫واألعشاب ‪ .‬الطبعة األولى ‪ ,‬الدار الدولية لإلستثمارات الثقافية ‪ ,‬القاهرة ‪ ,‬مصر‪ ,‬ص ‪.74:‬دار األسرة‬
‫لإلعالم ودار عالم الثقافة ص‪.)2014( , 67‬‬

‫‪12‬‬
 ‫مراجع الفصل األول‬

: ‫المراجع األجنبية‬
[1] Francois ,L .E . Yield and quality response of salt – stressed garlic .
Hortscience 29 (11) : 1314-1317.(1994).

[2] Azizbek ,S,.Sultankul ,A,. Distributed Species of Family Liliaceae

and Iridaceae in Tarkapchigai Botanical Geographical Region
(Uzbekistan )/ Gulistan State University, Gulistan , Uzbekistan ,
International Journal of Science and Research ,8 (12) : 32-38 p.(2018).

[4] Rahmawati , L , U ,. Purwanti , E,. Budiyanto, M, A ,K,. Zaenab ,S ,

Susetyarini, R , E,. Permana,T,I,. Identification of Pollen Grains
Morphology and Morphometry in Liliaceae, Department of Biology
Education , Faculty of Teacher Training and Education ,University of
Muhammadiyah Malang , East Java, Indonesia, IoPPublishing:1-8
p.(2019).

[5] Hammiche ,V,. Morphologie et Systematique botaniques , office.

(1995).

[6] Yousuf,A,.FAGBUARO,S,S,.FAJEMILEHIN,S,O,K Chemical

composition ,phytochemical and mineral profile of garlic (Allium
Sativum).Journal of Bioscience and Biotechnology Discovery.3(5):105-109.
(2018).

[7] Mareel,L . Situation de l'hypertension artérielle dans le monde et poition

du canda.Socété camadienne d'hypertension artérielle.no88,8p.(2006).

[8] Touil A ., LITAIEM J.ET ZAGROUBA F.ISothermes de sorption et

propriétés thermodynamique de l'Allium Sativum. Journal of the Tunisian
chemical Society,17,105-114.(2015).

[9] Goetz,P., & Ghedira,k .Phytothérapie anti-infectieuse.springer Science

& Business Media.(2012).

[10] Moumen F.Valorisation desplantes condimentairescultivées et

spontanées dans l'ouest algérien :cas dugenre Allium. Thése de doctorat és
Sciences de l'environnement,Université Djillali Liabes de Sidi Bel Abbes,
Sidi Bel Abbes,171p.(2016).

13
 ‫مراجع الفصل األول‬

[11] Ghourri,M.,Zidane,L.,& Douira, A. Catalogue des plantes

médicinales utilisées dans le traitement de la lithiase rénale dans la
province de Tan –Tan (Maroc Saharien).International Journal of
Biological and Chemical Sciences,7(4),1688-1700. (2013).

[12] Morrison ,B.H. The Useful plants of west tropical Africa,2: Families
EI. Royal Botanic Gardens. (1994).

[13] Mbarek,A.Elabbadi, N.Bensalah ,M.Gamouh,A.Aboufatima,

Benharref, et al. Anti-Tumor properties of blackseed(Nigella Sativa L.)
extracts, Brazilian.Journal of Medical and Biological Research.40:839-
847p..(2007).

[14] Weaver, J.E.and W.E.Bruner. Root development of Vegetable crops.

MeGraw-Hill Book Co., Inc.,N.Y.351p.(1927).

[15] Jones,H.A.and L.k.Mann.Onions and thier allics.Interscience Pub.,

Inc.,N.Y.286p.(1963).

[16] Takagi,H. Garlic, Alluim Sativum L.,pp.109-146.In:J.L.Brewster

and H.D.Rabinowich.(eds.).Onions and allied corps.Vol.
3.Biochemistry,Food Science, and minor crops.CRC Press, Inc .Boca
Raton ,Florida.(1990).

[17] Céline,G,. Les bienfaits de l'ail dans les maladies cardiovasculaires

,diplôme d'etat de docteur en pharmacie, Universite de picardie jules
verne ufrde pharmacie,120p.(2016).

[19] Bruneton ,Jean. Pharmacognosie: phytochimie,plantes médicinales

Paris: Tec &Doc;Cachan:EM inter,1120p.(1999).

[20]Londhe,V,P,.Gavasane,A,T,.Nipate,S,S,.Bandawane,D,D,.Chaudhari,
P,D,. Role of garlic (Allium Sativum) in various diseaszs: an Overview ,
Journal Innovative,1(4):129-134. (2011).

[22] Yusuf,A,.FAGBUARO,S,S,.FAJEMILEHIN,S,O,K,. Chemical

Composition ,phytochemical and mineral profile of garlic (Allium
Sativum).

Journal of Bioscience and Biotechnology Discovery.3(5):105-109.(2018).

14
 ‫مراجع الفصل األول‬

[26] Gebreselema,G.,Mebrahtu,G. Medicinal Values of garlic: A review.

Internatinal Journal of Medicine and Medical Sciences, Vol.5(9),401-
408p.(2013).

[27] Olusola ,S.A, Emikpe, B.O.and Olaifa ,F.E. The Potentials of

medicinal plant extraces as bio-antimicrobials in aquaculture. Int. J. Med .
Arom .Plants.3(3):404-412.(2013).

[29] Shang ,A,O., Shi-Yu;C,.Xia-Yu,X,.Ren-You,G.,Guo-Yi,T,.(2019):-

Harold Corke, Vuyo Mavumengwana ,Bioactive Compounds and
Biological. Functions of Garlic (Allium Sativum L.) Foods
(8)246:31p.(2019).

Six Varietes d'olives introduits dans le Sud-Est Algerien . European

Scientific Journal , 12(33): 537-553.

15
 ‫الفصل الثاني‬
‫المركبات الفينولية ومضادات األكسدة‬
‫المركبات الفينولية ومضادات األكسدة‬ ‫الفصل الثاني‬

‫مدخل ‪:‬‬

‫جميع الكائنات الحية لديها األيض األساسي الذي يوفر لها الجزيئات األساسية ( األحماض النووية ‪,‬‬
‫الدهون‪ ,‬البروتينات ‪,‬األحماض األمينية و الكربوهيدرات )‪ ,‬في المملكة النباتية باإلضافة إلى هذا تنتج‬
‫النباتات عدد كبير من المركبات والتي ليست مستمدة مباشرة من عملية التمثيل الضوئي وإنما تأتي نتيجة‬
‫للتفاعالت الكيميائية الالحقة ‪ ,‬وتسمى هذه المركبات بمواد األيض الثانوي ]‪ , [1‬والمتمثلة في المركبات‬
‫الفينولية والتربينات والسترويدات والمركبات األزوتية ‪...‬الخ]‪.[2‬‬

‫‪.1.II‬متعدد الفينول‬

‫‪.1.1 .II‬تعريفها ‪:‬‬

‫تشكل المركبات الفينولية حيزا كبيرا في حقل المنتجات الطبيعية ‪ ,‬نظرا لكثرة عددها وتباين هيكلها‬
‫البنائية لها ] ‪ , [3‬وقد تم عزل والتعرف على اكثر من ‪ 8000‬مركب فينولي وتم توزيعها في مختلف‬
‫االقسام بداللة هيكلها الكربوني ]‪ .[4‬تتميز بنيتها بوجود حلقة عطرية او اكثر مرتبطة بمجموعة‬
‫هيدروكسيل حرة او مستبدلة مع مجموعة اخرى (إيثر‪ ,‬أستر ‪ , ]5 [ ) .. .‬غير أن تعريفها كيميائيا‬

‫صرفا للفينوالت بهذا الطريقة يعد غير كاف لتشخيص المركبات الفينولية النباتية ‪ ,‬إذا أن هناك منتجات‬
‫ايضية ثانوية أخرى تشمل هذا التعريف أيضا ولكنها تنتمي إلى مجموعات كيميائية نباتية مختلفة مثل‬
‫بعض القلويدات كالمورفين (‪ )Morphin‬وبعض التربينات كالتيمول (‪ )Thymol‬التي تضم في بنائها‬
‫حلقة بنزينية ومجموعة هيدروكسيل فينولية مما يستوجب إدخال شرط االصطناع االحيوي لحصر حدود‬
‫هذه المجموعة وعليه ليكون تعريف المركبات الفينولية اكثر ضبط يستوجب أن يكون على النحو التالي ‪:‬‬
‫مشتق غير أزوتي حاوي على حلقة بنزين أوأكثر تحمل مجموعة هدروكسيل حر أو مرتبط بوظيفة‬
‫أخرى تكونت حلقاتها العطرية إما من حمض شيكيميك (‪ ) C7H10O5‬أو عديد األسيتات [‪. ]6‬‬

‫‪17‬‬
‫المركبات الفينولية ومضادات األكسدة‬ ‫الفصل الثاني‬

‫‪.2.II‬الفالفونيدات‬

‫‪.1.2.II‬تعريفها‪:‬‬
‫الفالفونيدات هي مصطلح التيني مشتق من الكلمة اليونانية ( ‪ ) Flavous‬والتي تعني اللون األصفر‬
‫وهي عبارة عن صبغات ملونة تنتشر في معظم األصناف]‪ , [7‬تحوي على ‪ 15‬ذرة كربون في‬
‫بنائها‪,‬موزعة على حلقتين عطريتين سداسيتين ‪ A‬و‪ B‬مرتبطتين بحلقة غير متجانسة ‪ C‬تحتوي على ذرة‬
‫الألوكسجين (‪ ) Pyran‬أو)‪ ( Pyron‬من الصيغة ( ‪.[8] )C6-C3-C6‬‬

‫الشكل( ‪: )1.II‬الهيكل األساسي للفالفونيدات‬

‫‪.2.2.II‬اقسام الفالفونيدات‪:‬‬

‫تختلف الفالفونيدات حسب نوع الحلقة ‪,‬عدم التشبع ‪,‬ودرجة األكسدة ‪,‬الحلقة ‪, C‬حيث يحدد نوع‬
‫الفالفونيدات داخل المجموعة الواحدة من خالل المستبدالت على الهيكل الفالفانويدات ككل ‪ ,‬حيث تم‬
‫تصنيفها على حسب نوع الحلقة ‪ C‬ودرجة تأكسدها ]‪.]9‬‬

‫‪18‬‬
‫المركبات الفينولية ومضادات األكسدة‬ ‫الفصل الثاني‬

‫الشكل(‪ : )2.II‬اهم أقسام الفالفانويدات [‪.]10‬‬

‫‪19‬‬
‫المركبات الفينولية ومضادات األكسدة‬ ‫الفصل الثاني‬

‫‪.3.II‬الجذور الحرة ومضادات األكسدة‬

‫‪.1.3.II‬تعريف الجذور الحرة ‪:‬‬

‫الجذور الحرة هي عبارة عن جزئ أو ذرة تحتوي على إلكترون غير مزدوج في مداره الخارجي‬
‫‪,‬ويطلق بعض العلماء مصطلح العامل المؤكسد على الجذر الحر ]‪ . [11‬بإمكانها أن تتفاعل بسرعة‬
‫وبسهولة مع مركبات أخرى أو مع الخاليا الحية محاولة إقتناص ما ينقصها من إلكترونات لتصل إلى‬
‫االستقرار الكيميائي وبالتالي تخريب الخاليا الحية]‪.[12‬‬

‫الشكل(‪: )3.II‬مقطع تحت المجهر للجذورالحرة ‪.‬‬

‫‪.2.3.II‬مضادات األكسدة‬
‫‪.1.2.3.II‬تعريفها ‪:‬‬
‫هي مجموعة من العناصر والمركبات التي لها القدرة على منع أو ابطاء عملية األكسدة بهدف حماية‬
‫المركبات األخرى من األوكسجين ‪,‬تتواجد بصورة طبيعية في معظم الخضروات والفاكهة ومعظم‬
‫األعشاب الطبية ]‪ . [12‬فمضادات األكسدة عبارة عن مواد مانحة لذرات الهيدروجين أو أنها تتحد مع‬
‫الجذر وتتحول إلى مركب مستقر ]‪.[13‬‬

‫‪.2.2.3.II‬أنواع مضادات األكسدة ‪:‬‬

‫يكتمل الدور األساسي لمضادات األكسدة في كسر سلسلة من التفاعالت الجذرية الناتجة من األكسدة‬
‫وتنقسم مضادات األكسدة من حيث مصادرها إلى طبيعية والمصنعة كما هو موضح في الشكل التالي‬
‫]‪. [14‬‬

‫‪20‬‬
‫المركبات الفينولية ومضادات األكسدة‬ ‫الفصل الثاني‬

‫أنواع مضادات األكسدة‬

‫الطبيعية‬ ‫اإلصطناعية‬

‫مضادات‬ ‫مضادات‬ ‫‪Butylhdroxytolue‬‬ ‫‪Butylhdroxya‬‬

‫غير إنزيمية‬ ‫إنزيمية‬ ‫)‪ne (BHT‬‬ ‫)‪niso(BHA‬‬

‫الفيتامين ‪C‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪ -‬إنزيم فوق أكسيد الديسموتاز‬

‫الفيتامين ‪E‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪Superoxide dismutaz‬‬
‫الجلوتاثيون‬ ‫‪-‬‬ ‫‪ -‬الكاتاالز ‪Catalas‬‬
‫المعادن مثل‬ ‫‪-‬‬ ‫‪ -‬جلوتاثيون بيروكسيداز‬
‫(الحديد‬ ‫‪Glutathione peroxidas‬‬
‫‪,‬الزنك)‬

‫الشكل (‪:)4.II‬أنواع مضادات األكسدة‪.‬‬

‫‪21‬‬
 ‫مراجع الفصل الثاني‬

‫المراجع العربية‪:‬‬
‫[‪ ]3‬بو بطيمة أ ‪ ,‬مقارنة بين الطريقة الفيتوكيميائية والطريقة اإللكتروكيميائية في دراسة الفينوالت‬
‫بعض نوى التمر المحلي ‪ ,‬مذكرة ماستر أكاديمي ‪ ,‬جامعة قاصدي مرباح ورقلة ص‪.)2012( , 97‬‬

‫بحث وتحديد نواتج األيض الثانوي لنبات القات ‪ Catha edulis‬من العائلة‬ ‫[‪ ] 5‬ميثاق ج ‪,‬‬
‫ونبات البوليكاريا ( ‪ )Pulicaria jaubertii‬من العائلة )‪ (Asteraceae‬وتقييم‬ ‫)‪(Celastraceae‬‬
‫‪,‬رسالة مقدمة لنيل شهادة دكتوراه علوم في الكيمياء العضوية ‪,‬جامعة منتوري‬ ‫الفعالية البيولوجية‬
‫‪.)2010( ,‬‬ ‫قسنطينة ‪,‬ص‪142‬‬

‫[‪ ] 6‬عزري في الكيمياء جامعة قاصدي ‪,‬مرباح و رقلة خضرة دراسة الليبيدات والفينوالت في بعض‬
‫أنواع التمر المحلي ‪,‬مذكرة ماجستير في الكيمياء جامعة قاصدي مرباح ورقلة ‪)2013(,‬‬

‫]‪ ]7‬سهيلة العقون ‪ ,‬فصل والتحليل األيض الثانوي والفالفونويدي نبتة تنتمي إلى العائلة الشفوية‬
‫‪ lamiaceae‬ودراسة التأثير المضاد للبكتيريا مذكرة ماجستير ‪,‬جامعة منتور ‪ ,‬قسنطينة ‪.(2003(,‬‬

‫]‪ [8‬شباح ك ‪ ,‬فصل وتحديد منتجات األيض الثانوي الفالفونيدي ( )‪dactylifera (Deglebeida‬‬
‫‪ ) phoenix‬مذكرة ماجستير ‪ ,‬جامعة قاصدي مرباح ‪ ,‬ورقلة ‪,‬ص ‪. )2007( , 98‬‬

‫]‪ [9‬بن سالمة ع‪ ,‬النشاطات المضادة لألكسدة والمثبطة لألنزيم المؤكسد للكوانثين لمستخلصات أوراق‬
‫)‪ , )Hertiac heirifolia L‬مذكرة تخرج لنيل شهادة الماجستير ‪ ,‬جامعة فرحات عباس‪ ,‬سطيف ‪,‬ص‬
‫‪.)2012(,64‬‬

‫[‪ [10‬باز مسعود ‪ ,‬استخالص وتحديد بنيات منتوج األيض الثانوي عند نبات جنس ( ‪Centaurea‬‬
‫‪ ) C.Sphaerocephala L‬مذكرة ماجستير قسنطينة ‪ :‬جامعة منتور ‪,‬ص ‪. ) 2006( ,109-8‬‬

‫]‪ [11‬الدناصوري م ‪,‬النباتات الطبية والعطرية ودورها كمضادات لألكسدة ‪ ,‬جامعة األزهر‪ ,‬مصر‪.‬‬

‫]‪ [12‬بولوطة ح‪ ,‬النشاط المضاد للتأكسد وإمكانية وقائية المستخلص المثانولي لنبتتي ( ‪Incan‬‬
‫‪ )centarirea‬و ( ‪ ) Matricaria pnbexens‬على السمية الكبدية ‪ ,‬مذكرة ماجستير ‪ ,‬جامعة‬
‫منتوري ‪ ,‬قسنطينة ‪ ,‬ص ‪.)2009( , 125‬‬

‫)‪Rhantherium‬‬ ‫‪ E,C‬والمستخلص البوتانولي لنباتي‬ ‫]‪ [13‬عمراني ‪ ,‬دور فيتامين‬

‫‪ )chrysanthemum Fontanesi Suaveolane‬في الوقاية من التسمم بدواء ( ‪Soduim‬‬
‫‪ ) valproate‬لدى الفئران الحوامل دراسة المحرض (‪ , ) Invivo) ,( Invitro‬رسالة دكتوراه علوم‬
‫‪ ,‬جامعة قسنطينة ‪ , 1‬ص ‪. )2009(, 106‬‬

‫‪21‬‬
 ‫مراجع الفصل الثاني‬

:‫المراجع االجنبية‬
[1] MOHAMMEDI Z., Etude phytochimique et activités biologiques de
quelques plantes médicinales de la région nord et sud ouest de l'algérie. Thèse
doctorat . Université Abou Bekr.170p.(2013).

[2] ZEGHEB N., L'effet antibactérien de l'extrait flavonoidique de la plant

(Zygophyllum album L.). Mémoire de Fin d'Etudes en vue de l'obtention du
diplôme MASTER. Université Mohamed Khider Biskra.73p, (2013 ).

[4] BENHAMMOUN., Activité antioxydante des extraits des composes

phénoliques de dix plantes médicinales de Louest et du Sud –Ouest Algérien
,(2012).

[14] Miquel , can antioxidant diet Suplementation protect against age –

related mitochondria l damage , Acad S ci. 959.p:508-516,(2002).

22
‫الفصل الثالث‬
‫الطرق والوسائل المستعملة‬
 ‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫تمت هذه التجارب على مستوى مخابر ‪ :‬كلية العلوم الدقيقة بجامعة الشهيد حمه لخضر الوادي‬
‫ومخبر المجد للتحاليل الطبية ‪.‬‬

‫‪.1.III‬تقديم منطقة الدراسة‪:‬‬

‫‪.2.1.III‬الموقع الجغرافي لمنطقة وادي سوف ‪:‬‬

‫تقع وادي سوف في منطقة الواحات في الجنوب الشرقي الجزائري ‪ ,‬ضمن منطقة العرق الشرقي‬
‫الكبير ‪ ,‬الحدود الشمالية للمنطقة تنتهي عند منطقة الشطوط المالحة الشمالية (شط ملغيغ وشط مروانة )‬
‫أما جنوبا فتمتد المنطقة إلى أعماق العرق الشرقي الكبير حتى منطقة ورقلة ‪ ,‬ومن الشرق تصل حدود‬
‫المنطقة إلى الشطوط المالحة للجمهورية التونسية (شط الجريد وشط الغرسة ) ‪ ,‬أما غربا فتنتهي عند‬
‫الحدود المنبسطة لمنطقة وادي ريغ ومنطقة تقرت ]‪.[1‬‬

‫‪.2.III‬المواد والطرق ‪:‬‬

‫‪.1.2.III‬المادة النباتية ‪:‬‬

‫تحصلنا على نبتة الثوم ‪ Alluim sativum‬من منطقة وادي سوف ‪ ,‬حيث تم إستخدام الفصوص من‬
‫نبات الثوم ‪ ,‬حيث وضعت حزم صغيرة في طبق واسع ومسطح ومعرض ألشعة الشمس نسبيا ومغطاة‬
‫بعروشها لمدة أسبوع حتى تجف العروش والرؤوس نسبيا ويفضل تقليبها من حين إلى أخر حتى ال‬
‫تتعفن النباتات‪ ,‬جمعت الحزم في صفوف مناسبة بحيث تكون العروش للداخل والرؤوس للخارج ويكون‬
‫في مكان مهوى ‪ ,‬تستغرق عملية تجفيف مدة ‪ 30‬يوم للتأكد من الجفاف التام لفصوص ‪ ,‬ثم طحن‬
‫العينات بالهون للحصول على مسحوق تحفظ داخل علب في مكان بارد وجاف لإلستعمال الحقا في‬
‫العمل ‪ ,‬أما جزء اآلخر من العينات يقطع إلى مكعبات صغيرة ويصبح جاهزا للعمل ‪ .‬معدل [‪.]2‬‬

‫‪.2.2.III‬األدوات والوسائل المستعملة ‪:‬‬

‫خالل هذه التجربة استخدمنا مجموعة من المواد واألدوات وكذا األجهزة إلنجاز تجاربنا العلمية ‪.‬‬

‫‪.1.2.2.III‬المواد المستعملة ‪:‬‬

‫ميثانول (‪.)%80()CH3-OH‬‬ ‫‪‬‬
‫ماء مقطر ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫كاشف الفولين ( ‪( 3H2O-P2O513WO35MoO310H2O .Réactif de Folin - ciocateai‬‬ ‫‪‬‬
‫محلول كربونات صديوم (‪.)M=)105.99g/mol()Na2CO3‬‬ ‫‪‬‬
‫محلول ثالثي كلوريد األمونيوم (‪.)M=241.43g/mol()AlCl3,H2O‬‬ ‫‪‬‬
‫حمض األمونياك (‪.)NH4OH‬‬ ‫‪‬‬
‫ثالثي كلوريد الحديد (‪.)FeCl3‬‬ ‫‪‬‬
‫حمض الكبريت (‪.)H2SO4‬‬ ‫‪‬‬

‫‪24‬‬
 ‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫الكلوروفورم (‪.)CHCl3‬‬ ‫‪‬‬

‫هيدروكسيد صديوم (‪.)NaOH‬‬ ‫‪‬‬
‫محلول الفهلينغ ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫‪. )picrylhydrazyl diphenyl( DPPH‬‬ ‫‪‬‬
‫‪.)Phosphomolybdenum( CAT‬‬ ‫‪‬‬
‫‪.2.2.2.III‬األدوات المستعملة ‪:‬‬
‫بيشر ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫حوجلة ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫مخبارمدرج‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫أنابيب إختبار ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫ورق ألمنيوم ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫ورق برافيلم ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫سحاحة ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫المستعملة ‪:‬‬ ‫‪.3.2.2.III‬األجهزة‬
‫ميزان إلكتروني حساس‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫جهازترشيح تحت الفراغ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫جهاز مبخر الدوراني ‪.Rotavapeur‬‬ ‫‪‬‬
‫جهاز مطيافية األشعة فوق البنفسجية –المرئية ‪.UV-Visible‬‬ ‫‪‬‬
‫جهاز مطيافية األشعة تحت الحمراء ‪FTIR‬‬ ‫‪‬‬
‫حاضنة ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫اإلستخالص ‪:‬‬ ‫‪ .3.III‬تعريف‬
‫هو عزل مركب أوعدة مركبات من مادة خام بواسطة مذيبات عضوية ‪,‬حيث إذا كانت المادة المراد‬
‫فصلها صلبة فنطبق عليها استخالص (سائل – سائل ) وإن كانت المادة الصلبة فنطبق استخالص‬
‫(صلب –سائل ) ‪ ,‬ولهذا األخير عدة األشكال ترتبط بعدة عوامل مختلفة منها درجة الحرارة ‪ ,‬الضغط ‪,‬‬
‫وكيفية استعمال المذيب ‪:‬‬

‫‪.1.3.III‬إستخالص سائل –صلب ‪:‬‬

‫‪.2.3.III‬إستخالص على البارد (النقع)‪:‬‬

‫تعتمد هذه الطريقة على وضع المادة الخام داخل إناء يحتوي على كمية محددة من المذيب ‪,‬بحيث يكون‬
‫الحجم المذيب المستعمل يغطي المادة الخام بنسبة تقريبية قدرها (المذاب ‪ /1V‬المذيب‪ )3V‬في الظروف‬
‫العادية (ضغط ودرجة حرارة الغرفة ) مع تحريك من حين إلى ألخر ‪ ,‬وتترك في مدة زمنية معينة ‪,‬‬
‫خاللها يتم انتقال المركبات المراد فصلها من المادة الخام الى المذيب ‪ ,‬تتبع عملية الفصل بعملية الترشيح‬

‫‪25‬‬
 ‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫لنزع الشوائب و ترسبات ‪ ,‬ونستعمل عملية النقع للمواد التي تتأثر وتتفكك بالحرارة ]‪.[4][3‬‬

‫‪ .4.III‬تحضير المستخلصات المستعملة في الدراسة ‪:‬‬

‫‪.1.4 .III‬العينات الجافة ‪:‬‬

‫نقوم بوزن ‪ 40‬غ من النبات الجافة وتوضع داخل القارورة ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫نضيف لها ‪ 130‬مل (ميثانول ‪ ,‬ماء ) (‪ )%20-%80‬حتى غمرت كل النبتة ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫تنقع لمدة ‪ 48‬ساعة مع الرج من حين ألخر ‪ ,‬وتكرر العملية ‪ 3‬مرات ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫يرشح المستخلص بإستعمال ورق ترشيح والقطن مع اإلحتفاظ بالرشاحة والراشح ‪(.‬تكرر العملية‬ ‫‪‬‬
‫ثالثة مرات)‬
‫جمعنا رشاحات ‪ 3‬ثم قمنا بتجفيفها في جهاز المبخر الدوراني عند ‪ T=45‬درجة المئوية‬ ‫‪‬‬
‫يجمع الناتج من العملية التبخير في بيشر ثم يترك ليجف ‪ ,‬فنحصل على مستخلص ميثانولي‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫وزن المستخلص بعد التجفيف ‪.‬‬ ‫‪‬‬

‫الشكل(‪ :)1.III‬طريقة إستخالص للعينات الجافة ‪.‬‬

‫‪26‬‬
 ‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫‪.2.4.III‬العينات الطازجة ‪:‬‬

‫نتبع نفس الخطوات السابقة بحيث تكون كتلة العينة ‪ 40‬غ منقوعة في ‪ 130‬مل من ميثانول ‪ /‬ماء‬
‫بالتراكيز سابقة الذكر ‪.‬‬

‫الشكل (‪ :)2.III‬طريقة إستخالص للعينات الطازجة ‪.‬‬

‫‪27‬‬
 ‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫‪.3.4.III‬المخطط العام لتجارب المنجزة‪:‬‬

‫النبتة المدروسة‬

‫‪40‬غ من عينة طازجة‬ ‫‪40‬غ من عينة جافة‬

‫ميثانول ‪ /‬ماء‬

‫‪%20/ %80‬‬

‫تنقع لمدة ‪ 48‬ساعة‬

‫(ثالثة مرات)‬

‫ترشيح‬

‫جهاز المبخر الدوراني‬

‫المستخلص الخام‬

‫إختبار الفعالية‬ ‫التقدير الكمي‬

‫المضادة لألكسدة‬ ‫للمركبات الفينولية‬

‫إختبار الفعالية‬ ‫‪FTIR‬‬ ‫الكشف األولي‬

‫البيولوجية‬ ‫عن نواتج‬
‫(مضاد البكتيريا)‬ ‫األيض الثانوي‬
‫الب‬

‫إختبار‬ ‫التقدير الكمي‬ ‫التقدير الكمي‬

‫إختبار‬
‫للفالفونيدات‬ ‫للفينوالت‬
‫‪CAT‬‬ ‫‪DPPH‬‬
‫الشكل (‪ : )3.III‬مخطط عام للتجارب المنجزة‬

‫‪28‬‬
 ‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫‪.5.III‬حساب مردود اإلنتاجية للمستخلصات ‪:‬‬

‫مردود مستخلصات هو النسبة بين وزن المادة المستخلصة بعد تجفيف والتي نرمز لها ب )‪)Mf‬على‬
‫وزن المادة اإلبتدائية للنبتة ونرمز لها ب (‪ )Mi‬حسب العالقة التالية‪:‬‬

‫‪R%= Mf/Mi ×100‬‬

‫‪Mf ‬الكتلة النهائية ‪.‬‬

‫‪ Mi ‬الكتلة اإلبتدائية ‪.‬‬
‫‪ R% ‬المردودية اإلنتاجية للمستخلصات ب‪.[15[ %‬‬
‫‪.6.III‬تقدير درجة الحموضة (‪ )pH‬وتقدير درجة الناقلية (‪:)EC‬‬
‫تم تقدير درجة الحموضة وفق طريقة (‪ )MARX( )1999‬وقيمة الناقلية الكهربائية وفق طريقة‬
‫(‪ )JONES()2001‬وذلك بإتباع الخطوات التالية ‪[7][6]:‬‬

‫‪ ‬نضع ‪ 2‬غرام من مسحوق النبتة الجافة في ‪ 20‬ملل من الماء المقطر ‪.‬‬

‫‪ ‬نرج الخليط بجهاز الرج المغناطيسي لمدة ‪ 10‬د ثم نقوم بترشيحه للحصول على الراشح ‪.‬‬
‫‪ ‬تقدر درجة حموضة الراشح بواسطة جهاز ‪ pH meter‬ودرجة الناقلية الكهربائية بجهاز قياس‬
‫الناقلية الكهربائية ‪.‬‬
‫‪.7.III‬الكشف األولي للمركبات الكيميائية لنبات الثوم ‪:‬‬
‫تمثل المنتجات الطبيعية الفعالة مجموعة من المركبات الطبيعية المصنعة حيويا من طرف النباتات‬
‫ابتداء من منتجات األيض األولي والمتمثلة في الفينوالت والتربينات والقلويدات وغيرها ]‪.[8‬وتصنف‬
‫منتجات األيض الثانوي إما على أساس مصدرها الطبيعي أوعلى أساس تأثيرها البيولوجية والتصنيف‬
‫األكثر شيوعا يكون على أساس البنية الكيميائية ]‪ .[9‬ومن هذا المنطلق تم الكشف على أهم العائالت‬
‫الكيميائية في النباتات وكانت الطريقة كالتالي ‪:‬‬

‫‪.1.7.III‬الفالفونويدات ‪:‬‬
‫نأخذ ‪ 2‬مل من المستخلص المائي أوالكحولي ‪ ,‬ونمزجه مع ‪ 1‬مل من (‪ )0.5M( )NaOH‬إذا ظهر‬
‫اللون األصفر هذا يدل على وجود الفالفونويدات ]‪.[10‬‬

‫‪.2.7.III‬الفينول والعفص ‪:‬‬

‫نمزج ‪ 2‬مل من (‪ )%2( )FeCl3‬مع المستخلص الخام ‪,‬إذا ظهر اللون األسود أو األزرق واألخضر‬
‫فهذا يدل على وجود العفص والفينوالت ]‪.[10‬‬

‫‪29‬‬
‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫‪.3.7.III‬القلويدات ‪:‬‬

‫كاشف ماير )‪ : )Mayers reagent‬يحضر بإذابة ‪13.5‬غ من كلوريد الزئبق ‪ HgCl2‬و ‪ 5‬غ‬
‫من يوديد البوتاسيوم ‪ KI‬في لتر من الماء المقطر ]‪.[11‬‬

‫نأخذ ‪ 100‬ملي غرام من النبات الجاف ونمزجه مع ‪ 5‬مل من الميثانول ‪,‬يرشح المزيج ‪,‬نمزج ‪ 2‬مل من‬
‫الرشاحة مع ‪ 5‬مل من حامض الهيدروكلوريك (‪ ,)%1( )HCl‬ونأخذ ‪ 1‬مل من المزيج نضيف لها‬
‫بعض قطرات من كاشف ماير ‪.‬إذا ظهر راسب بلون برتقالي فهذا دليل على وجود القلويدات ]‪.[12‬‬

‫‪.4.7.III‬الصابونين ‪:‬‬

‫نمزج ‪ 2‬مل من الماء المقطر مع المستخلص الكحولي أو المائي‪,‬يرج المحلول بقوة ثم يترك ‪ 20‬دقيقة ‪.‬‬

‫عدم تشكل رغوة داللة على عدم وجود الصابونين ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫رغوة أقل من ‪ 1‬سم معناه وجود الصابونين بكمية ضعيفة ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫رغوة من ‪ 1‬إلى ‪ 2‬سم معناه وجود الصابونين ‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫رغوة أكثر من ‪ 2‬سم معناه النبات غني جدا بالصابونين ]‪. [13‬‬ ‫‪‬‬
‫‪.5.7.III‬المركبات المرجعة (الكربوهيدرات )(السكريات)‪:‬‬
‫نمزج ‪ 5‬غ من النبات الجاف مع ‪ 30‬مل من الميثانول ‪,‬ونترك المزيج يغلي لمدة ‪ 1‬ساعة ‪ ,‬نصفي‬
‫المزيج وناخذ منه ‪ 1‬مل ونضيف إليه ‪ 2‬مل من الماء المقطر و ‪ 20‬قطرة من كاشف فهليج ‪ ,‬ثم نقوم‬
‫بالتسخين ‪,‬إذا ظهر راسب أحمر أجوري فهذا دليل على وجود السكريات المرجعة ]‪.[10‬‬

‫‪.6.7.III‬الجلكوسيدات ‪:‬‬
‫نمزج ‪ 2‬مل من حمض الكبريت المركز مع مستخلص النبات ‪ ,‬في حالة ظهور بني محمر فهذا‬
‫يشسير إلى وجود أغليكون السترويد من جليكوسيدا ت ]‪.[10‬‬

‫‪.7.7.III‬الستيرويدات ‪:‬‬

‫نمزج ‪ 2‬مل من الكلوروفورم وحمض الكبريت المركز مع مستخلص النبات إذا ظهر في طبقة‬
‫الكلوروفورم السفلي اللون أحمر فهذا يدل على وجود السترويدات ] ‪.[10‬‬

‫‪.8.7.III‬التانينات ‪:‬‬
‫نأخذ ‪ 5‬غ من النباتات الجاف ثم نمزجها مع ‪ 30‬مل الماء المقطر ونتركه يغلي لمدة ‪ 1‬سا‪.‬‬

‫نأخذ ‪ 1‬مل من الرشاحة مع ‪ 2‬مل الماء المقطر وقطرات من ‪ , FeCl3,‬ظهور اللون األخضر المزرق‬
‫يدل على وجود )‪.]13[ (Tanins galliques‬‬

‫‪30‬‬
 ‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫‪.9.7.III‬التربينات الثالثية والستيروالت‪:‬‬

‫من(ِ‪ ,)CHCl3‬ثم نرشح المزيج ونأخذ ‪1‬مل من‬ ‫نأخذ ‪5‬غ من النبات الجاف ونمزجه مع ‪ 20‬مل ِ‬
‫الرشاحة ونضيف إليها )‪ (H2SO4‬بعناية على جدران األنبوب فتشكل طبقتان ‪.‬الطبقة ذات اللون‬
‫األخضر تشير إلى وجود التربين ]‪.[ 10‬‬

‫‪.10.7.III‬األنثوسينات ‪:‬‬
‫نمزج ‪ 2.5‬غ من النبات الجاف مع ‪ 50‬ملل من ماء مقطر مغلي ‪ 15‬دقيقة فنتحصل على مستحلب‬
‫نقوم بتصفيته ‪ ,‬ثم نأخذ منه ‪ 2‬مل ونمزجه مع ‪ 2‬مل من (‪ )HCl‬وقطرات من )‪ (NH4OH‬إذا ظهر‬
‫اللون الوردي أو األحمر المائل لألزرق البنفسجي هذا دليل على وجود األنثوسينات ]‪. [13‬‬

‫‪.8.III‬التقدير الكمي بواسطة مطيافية األشعة فوق البنفسجية ‪ -‬المرئية (‪:)UV- VIS‬‬
‫تعد هذه التقنية من أقدم الطرق استعماال في التحليل الكمي والكيفي ‪ ,‬ومن اهم الوسائل التي تساعد‬
‫في تحديد المركبات الكيميائية للمركبات ‪,‬تشمل على منطقة الضوء المرئي ومنطقة األشعة فوق‬
‫البنفسجية ‪,‬ومن أهم طرق التقدير الكمي طريقة قياس اإلمتصاصية (الكثافة الضوئية ) للمحاليل حيث‬
‫مجالها الكهرومغناطيسي (طول الموجي ) مابين ‪700 - 200‬نانومتر ]‪.]14‬‬

‫ينقسم اشعاع المنبع الضوئي الى حزمتين ‪ ,‬تمر احدى الحزمتين عبر خلية تحوي المحل المرجع ‪,‬‬
‫وثانية عبر خلية تحتوي المحلول المراد تحديد امتصاصية ‪ ,‬يطرح المطياف امتصاصية المحل في‬
‫الحزمة المرجع من امتصاصية العينة في حزمة العينة ‪ ,‬ويسجل أغلب المطياف منحنى اإلمتصاصية‬
‫(شدة االمتصاص) بداللة الطول الموجي وتعطى اإلمتصاصية أوكثافة الضوئية بالعالقة التالية]‪:[15‬‬

‫) ‪A= Log ( I0 / I‬‬

‫‪ : I0 ‬شدة الضوء الوارد ‪.‬‬

‫‪ : I ‬شدة الضوء الصادر ‪.‬‬
‫والشكل الموالي يوضح مبدأ عمل الجهاز‪:‬‬

‫‪31‬‬
‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫الشكل)‪: (4.III‬رسم تخطيطي يوضح مبدأ عمل جهاز ‪.] 14[ UV-visible‬‬

‫‪.1.8.III‬التقدير الكمي للمركبات الفينولية الكلية ‪:‬‬

‫تم تقدير كمية الفينوالت حسب طريقة "‪ "Singleton‬للمستخلصات بمساعدة كاشف (‪Folin-‬‬
‫‪ , )ciocalteu‬وحمض الغاليك كفينول مرجعي ]‪. [16‬‬

‫‪.2.8.III‬المبدأ‪:‬‬
‫كاشف ‪ Folin-ciocalteu‬يتكون من حمض فوسفوتنغتينيك (‪ )H3PW12O40‬وحمض‬
‫فوسفوموليبيديك )‪ (H3PMO12O40‬والذي يرجع بواسطة الفينوالت الى اكاسيد التنغستين )‪(W8O23‬‬
‫والموليبيدين (‪ )Mo8O23‬ذات اللون األزرق ‪.‬‬

‫المركبات الفينولية تقدر كميا بواسطة جهاز( ‪ (Spectroscopie UV-visible‬حيث يستعمل حمض‬
‫الغاليك (‪ )Acide gallique‬كفينول مرجعي عند طول الموجة‪.[17] λ= 765nm‬‬

‫‪.3.8.III‬المنحنى القياسي لحمض الغاليك ‪:‬‬

‫قمنا بتحضير محاليل ممدة من حمض الغاليك ذو تراكيز مختلفة تتراوح مابين (‪mg/ml )0-0.2‬‬
‫‪,‬في أنابيب اإلختبار نأخذ ‪ 1ml‬من كل محلول ثم نضيف له ‪ 0.5ml‬من كاشف الفولين (ممخفف ‪10‬‬
‫مرات ) يترك في الظالم لمدة ‪ 5‬دقائق ‪ ,‬بعدها نضيف له ‪ 2ml‬من كربونات الصوديوم بتركيز (‪ (7.5‬ثم‬
‫نرج األنابيب جيدا ونضعها في الظالم لمدة ‪ 30‬دقيقة‪.‬‬

‫وتقاس اإلمتصاصية المزيج في جهاز المطيافية األشعة فوق البنفسجية ‪UV- Visible‬عند طول‬
‫الموجي‪.[ 18 ] λmax =765nm‬‬

‫‪32‬‬
 ‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫منحنى الغاليك‬ ‫‪y = 11.26x + 0.029‬‬

‫‪R² = 0.993‬‬
‫‪3‬‬

‫‪2.5‬‬

‫‪2‬‬
‫االمتصاصية‬

‫‪1.5‬‬

‫‪1‬‬

‫‪0.5‬‬

‫‪0‬‬
‫‪0‬‬ ‫‪0.05‬‬ ‫‪0.1‬‬ ‫‪0.15‬‬ ‫‪0.2‬‬ ‫‪0.25‬‬
‫التركيز (‪(mg/ml‬‬

‫الشكل(‪:)5. III‬منحنى القياسي لحمض الغاليك [‪.]18‬‬

‫‪.4.8.III‬طريقة العمل‪:‬‬
‫ولتقدير الفينوالت في المستخلص النباتي نمزج ‪ 1‬مل من المستخلص المثانولي مع ‪ 0.5‬مل من كاشف‬
‫) ‪ (Folin-ciocaltea‬بتحضير سلسلة من التراكيز للحصول على المنحنى القياسي [‪.] 10‬‬

‫الشكل(‪: )6. III‬بعض مستخلصات ناتجة عن كشف مستخلصات الفينوالت ‪).‬األصلي)‬

‫‪.9.III‬تقدير الكمي للفالفونيدات الكلية ‪:‬‬

‫تم تقدير كمية الفالفونيدات لمختلف المستخلصات المدروسة باستعمال محلول ثالثي كلور األلمونيوم‬
‫‪ AlCl3‬حيث يتفاعل هذا األخير ويشكل معقدا أصفر اللون بينه وبين مجموعة الهيدروكسيل ‪OH‬‬
‫الموجودة في الحلقات البنزينية للفالفونيدات ‪ ,‬وتم قياس هذه المعقدات لونيا باستعمال مطيافية الضوئية‬
‫عند الطول الموجي ‪. [17] λ = 420nm‬‬

‫‪33‬‬
‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫الشكل )‪: (7.III‬آلية تشكيل المعقد األصفر]‪.]19‬‬

‫‪.1.9.III‬المنحنى القياسي لحمض الكرستين ‪:‬‬

‫قمنا بتحضير محاليل ممدة من حمض الكرستين ذو تراكيز مختلفة تتراوح مابين (‪) 0.06 -0.01‬‬
‫‪ mg/ml‬في انابيب االختبار نأخذ ‪ 1.5‬مل من كل محلول نضيف له ‪ 1.5‬مل من محلول ثالثي كلور‬
‫االلمينوم ‪ AlCl3‬ونتركه في الظالم لمدة ساعة ‪.‬‬

‫‪UV-Visible‬عند طول‬ ‫وتقاس إمتصاصية المحاليل في جهاز مطيافية األشعة فوق البنفسجية‬
‫الموجي‪.]18]λ = 420nm‬‬

‫منحنى الكرستين‬ ‫‪y = 24.743x + 0.009‬‬

‫‪R² = 0.993‬‬
‫‪1.6‬‬
‫‪1.4‬‬
‫‪1.2‬‬
‫‪1‬‬
‫االمتصاصية‬

‫‪0.8‬‬
‫‪0.6‬‬
‫‪0.4‬‬
‫‪0.2‬‬
‫‪0‬‬
‫‪0‬‬ ‫‪0.01‬‬ ‫‪0.02‬‬ ‫‪0.03‬‬ ‫‪0.04‬‬ ‫‪0.05‬‬ ‫‪0.06‬‬ ‫‪0.07‬‬
‫التركيز) (‪mg/ml‬‬

‫الشكل( ‪ :)8.III‬منحنى القياسي للكرستين [‪.]18‬‬

‫‪34‬‬
‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫‪.2.9.III‬طريقة العمل ‪:‬‬

‫لتقدير الكمي للمركبات الفالفونيدية في المستخلص النباتي قمنا بمزج ‪ 1‬مل من مستخلص النبات مع‬
‫‪ 1‬مل من ثالثي كلور األلمنيوم(‪, )AlCl3( )% 2‬رججنا األنبوب جيدا وتركناه في الظالم لمدة ساعة‬
‫حتى يتغير اللون الى األصفر ]‪.]10‬‬

‫الشكل)‪: (9.III‬بعض مستخلصات ناتجة عن كشف الفالفونويدات‪(.‬األصلي)‬

‫‪.10.III‬تقدير الفعالية المضادة لألكسدة بطرق الكيميائية ‪:‬‬

‫هي قياس لقدرة المستخلص أو مركب على تثبيط الجذور الحرة أو توقيف عملية األكسدة ‪ ,‬المضادة‬
‫لألكسدة بعدة الطرق نذكر منها ‪ :‬اختبار ‪ DPPH‬أو اختبار ‪ FRAP‬او اختبار ‪ ABTS‬أو القدرة اإلرجاعية‬
‫‪.PR‬‬

‫هذه الطرق تعتمد على التلوين ونزع التلوين في طول موجي معين ]‪.[20‬‬

‫في دراستنا هذه تطرقنا الى اختبارين مختلفين ‪.DPPH,CAT‬‬

‫‪.1.1.10.III‬اختبار فعالية مضادات األكسدة الكلية ‪ CAT‬باستعمال موليبدات األمنيوم‪:‬‬

‫يعتمد اختبار القدرة الكلية المضادة لألكسدة للمستخلصات على استعمال طريقة الفوسفوموليبيدات‬
‫)‪ .)Phosphomolybdenum‬حيث يعتبر من الطرق المباشرة لقياس القدرة االرجاعية لمضادات‬
‫األكسدة وذلك باعتماد الموليبيدات (‪ )(MoO4-2)Molybdate‬الى ( ‪ )M(Mo)Molybdden‬مشكلة‬
‫لون أخضر فاتح]‪.]21‬‬

‫إن إجمالي الفعالية المضادة لألكسدة تقدر كميا بواسطة ‪ U V-Visible‬حيث يستعمل حمض‬
‫االسكوربيك كفينول مرجعي عند طول موجي ‪.]22[ λmax = 695nm‬‬

‫‪35‬‬
‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫منحنى األسكوربيك‬ ‫‪y = 14.762x + 0.0591‬‬

‫‪R² = 0.9971‬‬
‫‪1.8‬‬
‫‪1.6‬‬
‫‪1.4‬‬
‫‪1.2‬‬
‫االمتصاصية‬

‫‪1‬‬
‫‪0.8‬‬
‫‪0.6‬‬
‫‪0.4‬‬
‫‪0.2‬‬
‫‪0‬‬
‫‪0‬‬ ‫‪0.02‬‬ ‫‪0.04‬‬ ‫‪0.06‬‬ ‫‪0.08‬‬ ‫‪0.1‬‬ ‫‪0.12‬‬
‫التركيز (‪(mg/ml‬‬

‫الشكل (‪ :)10.III‬منحنى قياسي حمض االسكوربيك [‪.]23‬‬

‫‪.2.1.10.III‬طريقة العمل‪:‬‬

‫تحضير محلول الموليبدات ‪:‬‬

‫‪ : 4mM -‬موليبيدات األمونيوم ‪.)NH4(2 MoO4‬‬

‫‪ :0.6M -‬حمض الكبريت )‪.(H2SO4‬‬
‫‪ :28mM -‬فوسفات الصوديوم )‪.]22[ (Na3PO4‬‬

‫نقوم بتحضير تراكيز قدرها ‪ ) 2-0.3( mg/ml‬من كل مستخلص ‪ ,‬ونأخذ من كل تركيز ‪ 0.1 ml‬في‬
‫أنابيب ونضيف له ‪ 1ml‬من محلول الموليبيدات ونضعه في حمام مائي تحت درجة الحرارة‪ 95 C°‬لمدة‬
‫ساعة فنتحصل على اللون األخضر ‪ ,‬ونتركها تبرد ثم نقوم بقراءة االمتصاصية عند طول موجي‬
‫‪λ = 695nm.‬‬

‫الشكل)‪ : (11.III‬بعض مستخلصات بعد إضافة محلول الموليبيدات ‪(.‬األصلي)‬

‫‪36‬‬
‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫‪.2.10.III‬اختبار تثبيط الجذر الحر ‪:DPPH‬‬

‫يعتمد هذا إختبار على استعمال جذر ‪ DPPH‬ثنائي فينيل بكريل هايدرازيل ‪picrylhydrazyl‬‬
‫)‪) diphenyl‬المشتق من جزيئة ‪.]24[ DPPH-H‬‬

‫وهو مادة صلبة ذات لون بنفسجي والذي يتحول الى اللون األصفر عند ارجاعه بواسطة المركبات‬
‫المضادة لألكسدة عند طول الموجي ‪.]25] λmax = 517nm‬‬

‫الشكل (‪ :)12.III‬آلية تثبيط العامل المضاد لألكسدة مع الجذر الثابت ‪.[26] DPPH‬‬

‫‪.1.2.10.III‬تحضير الكاشف ‪:‬‬

‫يتم تحضير محلول ‪ DPPH‬وذلك بإذابة ‪ 4mg‬من ثنائي فنيل هايدرازيل في ‪ 100‬مل من الميثانول‬
‫فنتحصل على محلول بنفسجي داكن [‪.] 27‬‬

‫‪.2.2.10.III‬طريقة العمل ‪:‬‬

‫نقوم بتحضير تراكيز مختلفة من المستخلصات المخففة (لكل مستخلص المذيب المناسب له )‪ ,‬نأخذ‬
‫‪ 1ml‬من كل تركيز ونضعهها في أنابيب اختبار ثم نضيف لها ‪ 1ml‬من محلول ‪ DPPH‬نتركها في‬
‫الظالم لمدة ‪ 30‬دقيقة ثم نقوم بقراءة االمتصاصية في جهاز ‪ UV-Visible‬عند طول موجة‬

‫‪.]27[ λmax= 517nm‬‬

‫بنفس الطريقة تجرى مع حمض األسكوربيك وذلك قصد مقارنة فعالية المضادة لألكسدة والجذور الحرة‬
‫لمستخلصات المدروسة مع حمض األسكوربيك ‪.‬‬

‫‪37‬‬
 ‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫الشكل ( ‪ :)13.III‬بعض مستخلصات بعد إضافة محلول ‪( .DPPH‬األصلي)‬

‫‪.3.2.10.III‬حساب نسبة التثبيط ‪ I%‬للجذر الحر ‪: DPPH‬‬
‫يتم حساب نسبة تثبيط الجذر الحر لمختلف التراكيز للمستخلصات النباتية وفق العالقة التالية ‪.]28[ :‬‬

‫‪I%=[(A0-A) / A0]×100‬‬

‫‪ : A0 ‬امتصاصية ‪DPPH‬عند (‪. )517nm‬‬

‫‪ :A ‬امتصاصية ‪ DPPH‬في وجود مادة المدروسة بعد ‪ 30‬دقيقة عند (‪.)517nm‬‬
‫‪ : I0 ‬نسبة التثبيط العامل المضاد لألكسدة ‪.‬‬
‫‪.4.2.10.III‬تحديد مقدار ‪ IC50‬المثبطة لجذر الحر ‪: DPPH‬‬
‫يعبر عن نشاط المضاد لألكسدة لكل مستخلص بقيمة ‪ IC50‬وتركيز المادة القادرة على تثبيط ‪50 %‬‬
‫من جذر ‪ DPPH‬ويتم حسابها بتطبيق المعادلة الخطية لمنحنى تغير نسبة التثبيط (‪ )I%‬بداللة التراكيز‬
‫المختلفة للمستخلصات النباتية [‪.[29‬‬

‫‪.11.III‬مطيافية األشعة تحت الحمراء ‪:‬‬

‫الجهاز المستعمل للقياس بواسطة األشعة تحت الحمراء ‪:‬‬

‫في هذا العمل قمنا بتسجيل طيف األشعة تحت الحمراء بواسطة ‪ FTIR‬من نوع ( ‪Agilent‬‬
‫‪ (Technoogies Cary 630 FTIR‬كما هو موضح في الشكل ‪:‬‬

‫الشكل(‪: )14.III‬صورة فوتوغرافية لجهاز مطيافية األشعة تحت الحمراء ‪(.FTIR‬األصلي)‪.‬‬

‫‪38‬‬
‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫‪.12.III‬اإلختبارات البيولوجية ‪:‬‬

‫‪.1.12.III‬النشاط المضاد للميكروبات (البكتيريا)‪:‬‬

‫في هذه الدراسة تم اختبار حساسية ضد الميكروبية (البكتيريا)‪ ,‬من أجل تحديد النشاط المضاد‬
‫للميكروبات للمستخلص النباتي الذي تم الحصول عليه عن طريق االستخراج باستخدام الميثانول ‪ ,‬وهذا‬
‫بتطبيقها على نوعين من سالالت بكتيرية ممرضة والتي تم الحصول عليها من مخبر المجد لتحاليل‬
‫الطبية ‪.‬‬

‫الجدول(‪ : )1.III‬األنواع المختبرة للميكروبات واختصارتها‬

‫اإلختصارات‬ ‫العائلة‬ ‫الغرام‬ ‫االنواع المختبرة‬

‫‪Escherichia coli‬‬
‫‪E. coli‬‬ ‫‪Enterobacteriaceae‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪ATCC25922‬‬

‫‪S. a‬‬ ‫‪Micrococcaceae‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪Staphylococus aureus‬‬

‫‪.2.12.III‬الخطوات العلمية لهذا االختبار ‪:‬‬

‫أوال‪ :‬اختبار تحضير الكائنات الحية الدقيقة ‪:‬‬

‫بعد نمو البكتيريا في أوساط االزرع لمدة حوالي عشرة أيام ‪ ,‬تم كشط سطح البكتيريا المسببة ألمراض‬
‫النباتية بقضيب زجاجي على شكل حرف ‪ L‬ثم إذابتها في ‪ 5‬مل من الماء الفيزيولوجي المعقم [‪.]30‬‬

‫ثانيا ‪ :‬تحضيرأوساط الزرع ‪:‬‬

‫نعقم منطقة العمل بواسطة موقد بنزن ‪ ,‬ثم نقوم بتحضير ‪ 12‬طبق بتري ونسكب بها وسط الزرع الذي‬
‫تمت إذابته في معقم بالضغط ‪ ,‬وتلقيح األطباق بالوسط (‪ ) sabouraud dextrose agar‬ب ‪100‬‬
‫ميكرو لتر من المحلول المحضر للبكتيريا ]‪ . ]32] [31‬وبوجود موقد البنزين في الطاولة العمل نحصل‬
‫على وسط معقم وتترك األطباق لتبرد وتتجمد ‪.‬‬

‫ثالثا ‪ :‬تحضير المستخلصات ‪:‬‬

‫‪ ‬تمت إذابة المستخلص في الميثانول (‪ ) Méthanol‬من أجل الحصول على تركيز ‪ 20‬ملغ‪ /‬مل‬
‫لكل مستخلص عضوي ‪.‬‬
‫‪ ‬تم تحضير ثالث تراكيز مختلفة لكل مستخلص عضوي (‪ )10,5,2.5‬ملغ ‪ /‬مل ‪ ,‬وذلك بإذابتها‬
‫في ‪.DMSO‬‬

‫‪39‬‬
‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫رابعا‪ :‬زراعة البكتيريا ‪:‬‬

‫من أجل زراعة البكتيريا نغمس الماسح القطني في المعلق البكتيري ‪ ,‬ثم يتم مسحه على كامل أوساط‬
‫الزرع المحضرة سابقا في أطباق بتري على شكل خطوط متقاربة مع تكرار العملية ‪ 3‬مرات وتدوير‬
‫الطبق بزاوية ‪ 60‬في كل مرة ‪.‬‬

‫خامسا‪ :‬وضع األقراص‪:‬‬

‫تم استعمال أوراق محضرة من ورق الترشيح معقمة ‪ ,‬بواسطة ماصة مجهرية نأخذ ‪ 10‬ميكرو لتر‬
‫من المستخلص الميثانولي والمستخلص المذاب في (‪ )DMSO‬و وضعه على األقراص المعقمة من ورق‬
‫الترشيح ( قطرها ‪ 6‬مم ) ‪ ,‬ثم نضعها على أسطح علب البتري المزروعة بالبكتيريا ‪ ,‬كما تم استخدام‬
‫الميثانول و)‪ ) DMSO‬كعنصر تحكم سلبي [ ‪.]34 []33‬‬

‫نحدد ‪ 5‬أجزاء في كل طبق بتري حيث نخصصها للمستخلصات الميثانولية والمستخلص المذابة في‬
‫)‪ )DMSO‬أما الجزء السادس للشاهد في كل من الميثانول وال‪ DMSO‬أما المضاد الحيوي يوضع في‬
‫مركز الطبق لغرض المقارنة بالنسبة للبكتيريا ‪.‬‬
‫ثم وضع األطباق التي تم إنهاؤها لمدة ساعتين عند درجة الحرارة ‪ °4‬م ‪ ,‬يتم وضع علب بتري بشكل‬
‫مقلوب في الحاضنة تحت درجة حرارة ‪ °37‬م لمدة ‪ 24‬ساعة ‪.‬‬
‫من خالل إختبار النشاطية للمستخلص الميثانولي للنبتة على كل من ‪ E.Coli‬و ‪Staphecocuse‬‬
‫‪ aruice‬تم إستعمال المضاد الحيوي ) ‪. )Chloramphénicol disque: 30 ug‬‬
‫بعد إنتهاء مدة الحضن نقوم بإخراج علب بتري لقياس األقطار المثبطة ب ال (مم) للمستخلصات‬
‫والمضاد الحيوي والشاهد والتي تكشف عن نشاط مضادات البكتيريا في المستخلص]‪. ]35‬‬

‫‪40‬‬
 ‫الطرق والوسائل المستعملة‬ ‫الفصل الثالث‬

‫‪ .3.12.III‬قراءة النتائج ‪:‬‬

‫بعد الحضن إذا ثبط المستخلص نمو البكتيريا‪ ,‬تظهر مناطق واضحة حول محيط األقراص تسمى‬
‫مناطق تثبيط النمو البكتيري للساللة المختبرة ‪ ,‬يحسب قطر هذا التثبيط بالميلمتر وحسب سلم تقدير ‪,‬‬
‫ترتب قيم أقطار مناطق التثبيط (‪ ) D‬للنمو البكتيري في خمسة أقسام ]‪.]36‬‬
‫‪ ‬جد قوية التثبيط ‪ ) 30 ≥ D ( :‬مم‬
‫‪ ‬قوية التثبيط ‪ ) 21 ≥ D ≥ 29 ( :‬مم‬
‫‪ ‬معتدلة التثبيط ‪ ) 16 ≥ D ≥ 20 ( :‬مم‬
‫‪ ‬واسعة التثبيط ‪ ) 11 ≥ D ≥ 15 ( :‬مم‬
‫‪ ‬غير مثبطة ‪ )10 ≤ D ( :‬مم‬

‫الشكل(‪ : )15.III‬قطر منطقة التثبيط للبكتيريا [‪.]37‬‬

‫‪41‬‬
 ‫مراجع الفصل الثالث‬

‫المراجع باللغة العربية‬

‫] ‪ [1‬حليس ي ‪ ,‬الموسوعة النباتية لمنطقة سوف ‪ ,‬التباتات الصحراوية الشائعة في منطقة العرق‬
‫الشرقي الكبير ‪ ,‬مطبعة الوليد ‪ ,‬الوادي الجزائر ‪ ,‬ص ‪. )2005( , 54‬‬

‫[‪ ]2‬كتاب الثوم ‪ ,‬للمهندس الزراعي ‪ ,‬سعود شلة ‪ ,‬قسم األرشاد‪ ,‬نشر رقم ‪, 85‬ص ‪.)1975(, 20‬‬

‫]‪ ] 11‬أ‪ .‬ح‪ .‬م‪ .‬العذاري‪ ,‬وأ‪.‬ع‪ .‬م‪ .‬السلطانة ‪ ,‬دراسة كمية ونوعية المركبات القلوانية والصابونينية‬
‫ألوراق وثمار بعض األصناف من نبات السدر‪, (magazin of al kufa university for biolog).‬‬
‫‪ : )2( 4 .‬ص ‪. )2012( 17 -1‬‬

‫[‪ ]15‬حوى ابراهيم ‪ , .‬دراسة الفعالية البيولوجية لبعض نباتات العائلة الشفوية والفعالية ضد األكسدة ‪,‬‬
‫مذكرة ماجستير ‪ ,‬جامعة قاصدي مرباح ‪ ,‬ورقلة ‪. )2013( ,‬‬

‫[‪ ] 17‬ربيعي عبد الكريم ‪ ,‬المساهمة في دراسة الفعالية االمضادة لألكسدة لمستخلصات بروبوليس جنوب‬
‫الجزائر بالطرق الكيميائية والكهروكيميائية ‪ ,‬مذكرة تخرج لنيل شهادة الماجستير ‪ ,‬تخصص كيمياء‬
‫تحلياية ومراقبة المحيط جامعة قاصدي مرباح ورقلة ‪. )2010( ,‬‬

‫[‪ ] 19‬صحراوي صباح ‪ , .‬مساهمة في تحسين ظروف اإلستخالص المركبات الفينولية من نباتات‬
‫الطبية لمنطقة الوادي نبات الخبيز ‪ ,‬مذكرة ماستر كيمياء ‪ ,‬جامعة حمه لخضر الوادي ; ص ‪,58‬‬
‫(‪. )2018‬‬

‫[‪ ] 22‬سمية شمسة ‪ ,‬دراسة مقارنة المردودية والنشاطية المضادة لألكسدة في المستخلص الكحولي‬
‫والمائي عند نبات ) ‪ , ) Zygophyllum album .L‬مذكرة تخرج لنيل شهادة ماستر أكاديمي ‪ ,‬علوم‬
‫الطبيعية والحياة ‪ ,‬جامعة الوادي ‪. )2015( ,‬‬

‫[‪ ]23‬زيدان حليمة ‪ ,.‬الفاعلية البيولوجية لمستخلص الخام المائي والكحولي ألزهار شجر الرمان‬
‫الحامض والحلو‪,.‬مذكرة ماستر كيمياء ‪ ,‬جامعة حمه لخضر الوادي ;ص‪.)2018(, 61‬‬

‫[‪ ]24‬العابد إ ‪ ,‬دراسة الفعالية المضادة للبكتيريا والمضادات لألكسدة لمستخلص القلويدات الخام لنبات‬
‫الضمران )‪ (Traganum nudatum‬مذكرة ماجستير ‪ ,‬جامعة قاصدي مرباح ‪ ,‬ورقلة ‪ ,‬ص ‪, 105‬‬
‫(‪. )2009‬‬

‫[‪ ]26‬بن خناثة م ‪ ,‬المساهمة في دراسة مستخلصات نبتة الكخلة )‪ , (Ferula vexeritensis‬مذكرة‬
‫ماستر ‪ ,‬جامعة قاصدي مرباح ‪ ,‬ورقلة ‪ ,‬ص ‪. )2006( , 83‬‬

‫[‪ ]27‬صحراوي صباح ‪ , .‬مساهمة في تحسين ظروف اإلستخالص المركبات الفينولية من نباتات‬
‫الطبية لمنطقة الوادي نبات الخبيز ‪ ,‬مذكرة ماستر كيمياء ‪ ,‬جامعة حمه لخضر الوادي ; ص ‪,58‬‬
‫(‪. )2018‬‬

‫‪42‬‬
 ‫مراجع الفصل الثالث‬

‫ التقدير الكمي لعديدات الفينول والفالفانويد ودراسة النشاطية البيولوجية‬, ‫ دردوري س‬, ‫] اللبي ز‬28[
‫) مذكرة تخرج لنيل شهادة ماستر أكاديمي تخصص‬Bassimuricata L ) ‫لمستخلصات نبات الغبيثاء‬
.)2016( , ‫ الوادي‬, ‫ جامعة الشهيد حمه لخضر‬, ‫بيولوجيا وتثمين النبات‬

: ‫المراجع باللغة األجنبية‬

]3[ Shohami. E, Gati. I, Bi et-Yannai E, Trombouler V, Kohen R.,
Neuratauma J,(1999).

[4] Chevion S., chevion M, Chock P,B., Beecher G.R, Jornale of Medicinal
Food ,(1999).

[5] Boukrin H., Contribution à létude phytochimique des extraits bruts des
épices Contenus dans le mélange Ras-el hanout. Théme Master Academique.
Université kasdi Merbah ourgla.P99.(2014).

[6] Marx, E., J.M. Hart, and R.G. Stevens, Soil test interpretation guide. (1996).

]7[ Jones, J.B., Laboratory guide for conducting soil tests and plant analysis.
CRC press. (2001).

[8] Belkhiri cours de pharmaconosie – PG . de chimie et phytochimie ,

Universite Mentouri , constantine , (2006) .

]9[ Abdelghafour , M., Radioltse gamma des flavonoides , étude de leur

réactiviyé avec les radicaux issus des alcools formation de depsides , these de
doctora , (2003) .

]10[ Jardat , N . , F . Hussen , and A .J.J.M .E .S . Al Ali , Preliminary

phytochemical Screening , quantitative estimation of total Flavonoides , Total
phenols and antioxidant activity of E phedra aladta Decne . 6(6): p . 1771 – 8 ,
(2015) .

]12[ S . Al – Daihan , M . Al Faham , N .Al Shawi , R . Almaymam , A Brnawi

, and R . shafi bhat , Antibacterial activity and phytochemical Screening of some
medicinal plants commonly used in saudi Arabia against Selected pathogenic
microorganisms . Journal of King Saud University – science , 25 (2) : p .115-
120 , (2013) .
]13[ Yadav, M., et al., Preliminary phytochemical screening of six medicinal
plants used in traditional medicine. 6(5): p. 539-54 .8. (2014).

43
 ‫مراجع الفصل الثالث‬

]14[ Asadi S, Ahmadiani A, Ali Esmaeili A, Sonboli A, Ansari N, In Vitro

Antioxidant activities and an inverstigation of neuroprotection by six sabiria
species from Iran: Acomparative study Food chemical and Toxicology,(2010).

]16[ Yogita chavan . Rekha S . Singhal "Ultrasound – assisted extraction

(UAE) of bioactives from arecanut (Areca catechu L) and optimization study
response surface methodology". Innovative Food Science and Emerging
Technologies 17.106-13,(2013).

]19[ Berst C., Cuvelier M.E., Sci Aliments,16(1996).

]18[ Y.I. Tur'yan, P. Gorenbein, R. Kohen. Journal of Electroanalytical
Chemistry 571,183-188. (2004) .
]20[ Bloisms., antioxidant determination by theuse of astable free radical.
Nature.181.pp: 1199-2000.(2012).

]21[ Ardestani A., Yazdanaparast R., Inhibitory effects of ethyl acetate extract
of Teucrium polium on in vitro protein glycoxidation, Food and chemical
Toxicology. 45:2402-2411,(2007).

]25[ P. Molyreux, Song Klan Karin J. Sci Technol., 26,p 211-219, (2004).

]29[ DZIR S., HASSEN I., FATNASSI S., MRABET Y., CASABLANCA H.,
HANCHI B., HOSNI K, Phenolic contituents antioxidant . and antimicrobial
activities of rosy garlic (Alliumroseum var. odoratissimum). SciVerse Science
Sirect joumal of functional foods (4).423-432.

]30[ Mukhtar, I.J.M., Influence of Trichoderma species on seed germination in

okra. 6(1&2): p. 47-50. (2008).

]31[ Poulose, S.M., E.D. Harris, and B.S.J.T.J.o.n. Patil, Citrus limonoids
induce apoptosis in human neuroblastoma cells and have radical scavenging
activity. 135(4): p. 870-877. (2005).

]32[ Valko, M., et al., Free radicals and antioxidants in normal physiological
functions and human disease. 39(1): p. 44-84.( 2007).

]33[ Hazalin, N.A., et al., Cytotoxic and antibacterial activities of endophytic

fungi isolated from plants at the National Park, Pahang, Malaysia. 9(1): p. 1-5.(
2009).

44
 ‫مراجع الفصل الثالث‬

]34[ Poncea, G., Fritzr Del Vallc.,et Rouras, I., Antimicrobial activity of
essentialoils of the native microflora of organic Swiss chard. Lebensmittel-
Wissenxchuft and Technologie. (2003).
]35[ Yamaç, M. and F.J.P.b. Bilgili, Antimicrobial activities of fruit bodies
and/or mycelial cultures of some mushroom isolates. 44(9): p - .114 115,( 2006).

]36[ Mutai, C., et al., Antimicrobial activity of Acacia mellifera extracts and
lupane triterpenes. 123(1): p. 143-148. (2009).

]37[ Baurer .A , W ., Kirry . W.M.M.,Sherries.J.C.A., Turch .M. Antibiotic

susceptiblity testing by a standardized single disk method.-Amer. J. Clin.
Pathol., 45:493-496,(1966).

45
‫الفصل الرابع‬
‫النتائج والمناقشة‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪ .1.IV‬حساب المردود مستخلصات نبات الثوم ‪: Allium sativum‬‬

‫بعد عملية إستخالص تم تقدير المردود ب (‪ (%‬والنتائج مدونة في الجدول التالي ‪:‬‬

‫الجدول (‪ :)1.IV‬مردود المستخلصات المدروسة‬

‫كتلة العينة كتلة المستخلص المردود (‪)%‬‬ ‫المستخلص‬ ‫نوع العينة‬

‫)‪)g‬‬ ‫)‪)g‬‬
‫‪18.77‬‬ ‫‪7.527‬‬ ‫‪40‬‬ ‫العينات الطازجة ثوم أحمر‬

‫‪12.39‬‬ ‫‪4.959‬‬ ‫‪40‬‬ ‫ثوم أبيض‬

‫‪25.98‬‬ ‫‪10.413‬‬ ‫‪40‬‬ ‫ثوم أحمر (مسحوق)‬ ‫العينات الجافة‬

‫‪7.29‬‬ ‫‪2.919‬‬ ‫‪40‬‬ ‫الثوم أبيض‬

‫(مسحوق)‬

‫مردود اإلستخالص‬
‫‪20.00%‬‬

‫‪15.00%‬‬

‫‪10.00%‬‬

‫‪5.00%‬‬ ‫‪18.77%‬‬
‫‪12.40%‬‬
‫‪0.00%‬‬

‫ثوم أحمر‬ ‫ثوم أبيض‬

‫الشكل (‪ : (1.IV‬أعمدة بيانية لمردودية المستخلصات للعينات الطازجة لنبات الثوم ( ‪)A. sativum‬‬

‫‪ ‬تعليق على النتائج ‪:‬‬

‫قد بينت النتائج المتحصل عليها من خالل االعمدة البيانية والممثلة في الجدول للعينات الطازجة أن‬
‫نسبة المردود للمستخلصات متباعدة ‪ ,‬حيث نجد أن نسبة المردود لمستخلص ثوم أحمر قدرت ب‬
‫‪ 18.77 %‬و نسبة المردود لمستخلص ثوم أبيض قدرت ب ‪ 12.40%‬حيث أعطى الثوم األحمر أحسن‬
‫مردود مقارنة بالثوم األبيض وهذا راجع لنوع مستخلص وتركيز المذيب (ميثانول ‪ -‬ماء) المستخدم ‪.‬‬

‫‪47‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫مردود اإلستخالص ‪%‬‬

‫‪30.00%‬‬
‫‪25.00%‬‬
‫‪20.00%‬‬
‫‪15.00%‬‬
‫‪10.00%‬‬
‫‪25.99%‬‬
‫‪5.00%‬‬
‫‪0.00%‬‬
‫‪7.30%‬‬

‫ثوم أحمر (مسحوق )‬ ‫ثوم أبيض (مسحوق)‬

‫الشكل )‪ : (2 .IV‬أعمدة بيانية لمردودية المستخلصات للعينات الجافة لنبات الثوم )‪.)A.sativum‬‬

‫‪ ‬تعليق على النتائج ‪:‬‬

‫من خالل النتائج الموضحة في الشكل (‪ )2 .IV‬نجد ان أكبر قيمة للمردود كانت في مستخلص ثوم‬
‫أحمر (مسحوق) قدرت ب ‪ , 25.98 % :‬تليها قيمة مردود ثوم أبيض و قدرت ب ‪ , 7.29% :‬عند‬
‫دراسة أخرى أجريت لنفس النبات وجد أن نسبة المردود تتراوح بين ‪ 0.62% , 0.93 %‬علما ان كتلة‬
‫ابتدائية لنبتة ‪.]1[ 32 g‬‬

‫‪ ‬مقارنة بين مردود العينات الطازجة والجافة ‪:‬‬

‫نالحظ أن مردود االستخالص للعينات الجافة أكبر من مردود إستخالص للعينات الطازجة ‪ ,‬أما من‬
‫ناحية النوع نالحظ أن ثوم أحمر في كلتا الحالتين (الطازجة‪ ,‬الجافة ( أحسن مردود من ثوم أبيض‬
‫(الطازج ‪,‬الجاف )‪ ,‬و هذا راجع الى الطبيعة الكيميائية للمركبات الفعالة الموجودة في الفصوص [‪. ]2‬‬

‫‪48‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪.2 .IV‬دراسة بعض الخصائص الفيزيائية ‪:‬‬

‫الجدول (‪ :)2.IV‬الخصائص الفيزيائية للمستخلصات المدروسة ‪.‬‬

‫المستخلصات‬ ‫الناقلية‬ ‫‪pH‬عند ‪ 24‬م‪°‬‬ ‫لون المستخلص المظهر‬

‫‪ms/cm‬عند‬
‫‪ 24‬م‪°‬‬
‫ثوم أحمر‬ ‫‪4.96‬‬ ‫‪6.5‬‬ ‫لزج‬ ‫برتقالي داكن‬
‫(مسحوق)‬
‫ثوم أبيض‬ ‫‪3.72‬‬ ‫‪5.9‬‬ ‫لزج‬ ‫أصفر‬
‫(مسحوق)‬
‫ثوم أحمر‬ ‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫لزج‬ ‫برتقالي‬
‫ثوم أبيض‬ ‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫لزج‬ ‫بني مصفر‬

‫‪ ‬تعليق على النتائج ‪:‬‬

‫من خالل النتائج المتحصل عليها لقياس الناقلية و درجة الحموضة ‪ pH‬عند درجة الحرارة (‪)24 C°‬‬
‫للمستخلصات المتحصل عليها خالل الدراسة ‪:‬‬

‫‪ ‬بالنسبة للعينات الطازجة ‪:‬‬

‫‪ ‬بعد عملية النقع مرورا بالمراحل سابقة الذكر تحصلنا على مستخلص للثوم أحمر ذو لون‬
‫برتقالي والمظهر اللزج ‪ ,‬وللثوم أبيض كان ذو اللون بني مصفر ومظهر اللزج ‪.‬‬
‫‪ ‬بالنسبة للعينات الجافة ‪:‬‬
‫‪ ‬قيمة الناقلية للثوم أحمر (مسحوق) قدرت ب ‪ )4.9 ms /cm( :‬و درجة الحموضة كانت ‪:‬‬
‫(‪ )3.72ms/cm‬وللثوم أبيض (مسحوق) قدرت درجة الحموضة ب ‪ )5.9( :‬ذو اللون أصفر‬
‫و المظهر اللزج ‪ ,‬نالحظ أن قيم درجة الحموضة كانت متساوية تقريبا و كذلك في قيم الناقلية ‪.‬‬

‫‪49‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪.3 .IV‬نتائج الكشف األولي لنبات الثوم ‪:‬‬

‫الجدول (‪ :)3.IV‬نتائج الكواشف األيض الثانوي‬

‫ثوم األبيض‬ ‫ثوم األحمر‬ ‫ثوم أحمر ثوم أبيض‬ ‫الكواشف‬

‫(مسحوق) (مسحوق)‬
‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫فينوالت‬
‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫فالفونيدات‬
‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫القلويدات (ماير)‬

‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫صابونيات‬

‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫مركبات مرجعة‬
‫(السكريات)‬
‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫الجليكوسيدات‬
‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫الستيرويدات‬
‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫التانينات‬
‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫التربينات‬
‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫األنثوسينات‬

‫(‪ :)+‬وجود المادة الفعالة ‪ : )-( ,‬عدم وجود المادة الفعالة ‪.‬‬

‫‪ ‬تعليق على النتائج ‪:‬‬

‫بعد عملية الكشف الفيتوكيميائي عن نواتج األيض الثانوي في النبتة المدروسة تحصلنا على النتائج‬
‫التجريبية الموضحة في الجدول (‪ )3.IV‬التي توضح وجود و عدم وجود مجموعات كيميائية معينة ‪,‬‬
‫ترتبط هذه االختبارات بكثافة الترسبات أو التعكر أو اللون والتي تتناسب أيضا مع كمية المادة المطلوبة ‪.‬‬

‫حيث أبرزت الدراسة المخبرية للكشف عن محتوى فصوص الثوم من مواد األيض الثانوي أنها‬
‫تحتوي على أغلب مواد األيض الثانوي كالفينوالت ‪ ,‬و فالفونيدات ‪ ,‬الصابونيات ‪,‬التربينات و‬
‫الستيروالت ‪,‬و القلويدات ‪ ,...‬مع غياب التانينات واألنثوسينات ‪ ,‬وهو ما تؤكده الدراسات السابقة [‪]3‬‬
‫‪.]5[,]4[,‬‬

‫‪50‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪ .4.IV‬التقدير الكمي ‪:‬‬

‫‪.1.4 .IV‬التقدير الكمي للفينوالت بإستخدام جهاز ‪: UV-Vis‬‬

‫تم تقدير كمية الفينوالت الكلية للمستخلصات المدروسة وذلك بإعتماد على معادلة الخطية للمنحنى‬
‫العياري لحمض الغاليك ‪:‬‬

‫‪Y=11.26x+0.029‬‬

‫تحصلنا على النتائج المدونة في الجدول التالي ‪:‬‬

‫الجدول (‪ : )4.IV‬قيم االمتصاصية وكمية الفينوالت للمستخلصات المدروسة‬

‫كمية الفينوالت‬ ‫االمتصاصية‬ ‫التركيز‬ ‫المستخلص‬ ‫نوع العينة‬

‫‪mgEAG/g‬‬ ‫(‪)nm‬‬ ‫)‪(mg/ml‬‬
‫‪10.07‬‬ ‫‪0.596‬‬ ‫‪5‬‬ ‫العينات الطازجة ثوم أحمر‬
‫(‪) 20% /80%‬‬
‫‪3.85‬‬ ‫‪0.246‬‬ ‫‪5‬‬ ‫ثوم أبيض‬
‫(‪)20% /80%‬‬
‫‪20.45‬‬ ‫‪0.835‬‬ ‫‪3.5‬‬ ‫ثوم أحمر (مسحوق)‬ ‫العينات الجافة‬
‫(‪)20%/80%‬‬
‫‪13.49‬‬ ‫‪0.789‬‬ ‫‪5‬‬ ‫ثوم أبيض (مسحوق)‬
‫(‪)20% /80%‬‬

‫‪51‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫كمية الفينوالت لعينات الطازجة‬

‫‪12‬‬
‫‪10‬‬
‫‪8‬‬
‫‪6‬‬
‫‪4‬‬
‫‪10.07‬‬
‫‪2‬‬
‫‪0‬‬ ‫‪3.85‬‬

‫ثوم أحمر‬ ‫ثوم أبيض‬

‫الشكل (‪ : )3.IV‬أعمدة بيانية لكمية الفينوالت مستخلصات العينات الطازجة لنبات الثوم )‪.(A.Sativum‬‬

‫‪ ‬تعليق على النتائج ‪:‬‬

‫من خالل النتائج الموضحة في الشكل (‪ )3.IV‬التي تمثل كمية االفينوالت للمستخلصات الطازجة‪,‬‬
‫تبين أن كمية الفينوالت للثوم أحمر قدرت ب ‪ , )10.07 mg E AG /g) :‬تليها كمية الفينوالت للثوم‬
‫أبيض قدرت ب ‪ , ) 3.85 mg E AG/g ( :‬من النتائج المتحصل عليها الحظنا أن كمية الفينوالت‬
‫كانت كبيرة لمستخلص الثوم أحمر مقارنة بالثوم أبيض كانت صغيرة ‪.‬‬

‫كمية الفينوالت لعينات الجافة‬

‫‪25‬‬

‫‪20‬‬

‫‪15‬‬

‫‪10‬‬

‫‪5‬‬ ‫‪20.45‬‬
‫‪13.49‬‬
‫‪0‬‬

‫ثوم أحمر (مسحوق )‬ ‫ثوم أبيض( مسحوق)‬

‫الشكل (‪ :)4.IV‬أعمدة بيانية لكمية الفينوالت مستخلصات العينات الجافة لنبات الثوم‬
‫(‪.)A. sativum‬‬

‫‪52‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪ ‬تعليق على النتائج ‪:‬‬

‫من خالل النتائج الموضحة في الشكل (‪ )4.IV‬التي تمثل كمية االفينوالت للمستخلصات الجافة ‪ ,‬تبين‬
‫أن كمية الفينوالت للثوم أحمر (مسحوق) و قدرت ب ‪ , (20.45 mg EAG/g) :‬تليها كمية الفينوالت‬
‫للثوم أبيض قدرت ب‪ , )13.49 mg E AG /g (:‬من خالل النتائج المتحصل عليها الحظنا أن كمية‬
‫الفينوالت كانت كبيرة لمستخلص ثوم أحمر بودر مقارنة بالثوم أبيض كانت أقل ‪.‬‬

‫‪ ‬مقارنة بين نتائج العينات الطازجة والجافة ‪:‬‬

‫تبين من خالل النتائج أن كمية الفينوالت للعينات الطازجة والجافة كانت متفاوتة ‪ ,‬إذ سجلت أكبر قيمة‬
‫للفينوالت للعينات الطازجة كانت عند ثوم أحمر وقدرت ب‪ ) 10.07mgEAG/g( :‬أما بالنسبة للعينات‬
‫الجافة كانت عند ثوم أحمر (مسحوق) وقدرت ب ‪.)20.45 mgEAG/g ( :‬‬

‫من خالل النتائج المتحصل عليها الحظنا أن كمية الفينوالت كانت صغيرة وهذا راجع إلى نوع‬
‫المستخلص و نسبة الكحوالت المرتفعة في مزيج ‪( 80%‬ميثانول ) وكمية المركبات الفينولية (كلما زادت‬
‫نسبة الميثانول قلت كمية الفينوالت في المستخلص والتي يمكن تفسيرها بأن نسبة الكحول (ميثانول)‬
‫المرتفعة تعمل على اعاقة انحالل بولي فينول خالل عملية إستخالص ‪ ,‬وهذا ما أكدته دراسة [‪ ,]6‬وهذا‬
‫مايتوافق مع النتائج عند فحص النتائج التي تثبت أن كمية الفينوالت تكون أقل في الكحولي [‪. ]8[ ]7‬‬

‫كما أثبتت نتائج دراستنا المتحصل عليها للمستخلصات تضم أكبر كمية من متعدد فينول مقارنة مع‬
‫الدراسات سابقة حيث قدرت ب ‪ , ]9[ )0.05-0.98 mg E AG /g( :‬و كذلك الدراسة التي أعطت‬
‫كمية الفينوالت ‪.]10[ )0.05,0.18,0.98 mg EAG/ g( :‬‬

‫‪.2.4.IV‬التقدير الكمي للفالفونيدات باستخدام جهاز ‪: UV- Vis‬‬

‫تم حساب كمية الفالفونيدات للمستخلصات المدروسة وذلك باإلعتماد على المعادلة الخطية للمنحنى‬
‫القياسي للكريستين و الممثلة كالتالي ‪:‬‬

‫‪Y = 24.74 x – 0.009‬‬

‫‪53‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫تحصلنا على النتائج المدونة في الجدول التالي ‪:‬‬

‫الجدول (‪ : )5.IV‬قيم اإلمتصاصية وكمية الفالفونيدات للمستخلصات المدروسة‬

‫كمية الفالفانويدات‬ ‫التراكيز اإلمتصاصية‬ ‫المستخلص‬ ‫نوع العينة‬

‫(‪)mg E AG/g‬‬ ‫(‪)nm( )mg/ml‬‬
‫‪7.89‬‬ ‫‪0.967‬‬ ‫‪5‬‬ ‫ثوم أحمر (‪)%20 /80%‬‬ ‫العينات الطازجة‬
‫‪3.61‬‬ ‫‪0.393‬‬ ‫‪4.5‬‬ ‫ثوم أبيض (‪)% 20/80%‬‬
‫‪5.181‬‬ ‫‪0.635‬‬ ‫‪5‬‬ ‫ثوم أحمر (مسحوق)‬ ‫العينات الجافة‬
‫(‪) 20%/80%‬‬
‫‪0.200‬‬ ‫‪0.165‬‬ ‫‪35‬‬ ‫ثوم أبيض (مسحوق)‬
‫(‪)%20 / 80%‬‬

‫كمية الفالفونيدات لعينات الطازجة‬

‫‪8‬‬
‫‪7‬‬
‫‪6‬‬
‫‪5‬‬
‫‪4‬‬
‫‪3‬‬
‫‪7.89‬‬
‫‪2‬‬
‫‪1‬‬
‫‪0‬‬ ‫‪3.61‬‬

‫ثوم أحمر‬ ‫ثوم أبيض‬

‫الشكل (‪ : )5.IV‬أعمدة بيانية لكمية الفالفونيدات لمستخلصات العينات الطازجة لنبات الثوم‬
‫)‪.) A .sativum‬‬

‫‪ ‬تعليق على النتائج ‪:‬‬

‫من خالل النتائج المبينة في الشكل أن الكمية أكبر للفالفونيدات نجدها عند ثوم أحمر والتي قدرت ب‪:‬‬
‫(‪ , )7.89 mg E AQ /g‬أما بالنسبة للثوم أبيض كانت أقل وقدرت ب‪, )3.61mg E AQ/g ( :‬‬
‫نستنتج من خالل الدراسة أن كمية الفالفونيدات أكبر بالنسبة للثوم ‪.‬‬

‫‪54‬‬
 ‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫كمية الفالفونيدات لعينات الجافة‬

‫‪6‬‬
‫‪5‬‬
‫‪4‬‬
‫‪3‬‬
‫‪2‬‬
‫‪5.18‬‬
‫‪1‬‬
‫‪0‬‬

‫‪0.2‬‬

‫ثوم أحمر (مسحوق )‬ ‫ثوم أبيض (مسحوق)‬

‫الشكل (‪ : )6.IV‬أعمدة بيانية لكمية الفالفونيدات لمستخلصات العينات الجافة لنبات الثوم‬
‫)‪.(A.sativum‬‬

‫من خالل النتائج المبينة في الشكل (‪ )6.IV‬تبينا أن أكبر قيمة للفالفونيدات بالنسبة للعينات الجافة‬
‫كانت للثوم أحمر (مسحوق) و قدرت ب‪ , )5.18 mg E AQ /g( :‬وكانت أقل بالنسبة للثوم أبيض‬
‫(مسحوق) وقدرت ب ‪:‬‬

‫(‪ )0.20mg E AQ /g‬من خالل النتائج نستنتج أن كمية الفالفونيدات أكبر بالنسبة للثوم األحمر وأقل‬
‫بكثير بالنسبة للثوم أبيض ‪.‬‬

‫‪ ‬مقارنة بين نتائج العينات الطازجة والجافة ‪:‬‬

‫من خالل النتائج أن كمية الفالفونيدات تكون في العينات الطازجة أكبر عند ثوم أحمر الذي يقدر ب ‪:‬‬
‫(‪ )7.89mg E AQ /g‬أما بالنسبة للعينات الجافة تكون أكبر عند ثوم أحمر (مسحوق) حيث بلغت كميتها‬
‫(‪ , )5.18mg E AQ/g‬ومنه نستنتج أن كمية الفالفونيدات مرتفعة عند العينات الطازجة من وجودها في‬
‫العينات الجافة ومن هنا نستنتج أن المواد الفعالة موجودة أكثر في العينات الطازجة أكثر من العينات‬
‫الجافة ‪ ,‬ومنه يمكننا القول أن هناك عالقة بين كمية الفينوالت وكمية الفالفونيدات أي انه كلما زاد تركيز‬
‫متعدد الفينول زاد تركيز الفالفونيدات ‪.‬‬

‫كما أثبتت نتائج دراستنا المتحصل عليها للمستخلصات حققت أكبر كمية من الفالفونيدات مقارنة مع‬
‫الدراسات األخرى حيث قدرت ب ‪.]10[ ) 6.99, 5.78., 4.16ug E AQ/g ( × 10-3 :‬‬

‫‪55‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪.5.IV‬الفاعلية المضادة لألكسدة ‪:‬‬

‫‪.1.5.IV‬الفعالية المضادة لألكسدة الكلية ‪: CAT‬‬

‫من نتائج إمتصاصية المتحصل عليها من محاليل المحضرة وبحسابات رياضية مطبقة على معادلة‬
‫حمض األسكوربيك تم تقييم النشاطية المضادة لألكسدة الكلية ‪ CAT‬للمستخلصات من خالل المعادلة‬
‫التالية ‪:‬‬

‫‪Y = 14.762 x + 0.0591‬‬

‫الجدول )‪ : (6.IV‬قيم النشاطية المضادة لألكسدة الكلية ‪: CAT‬‬

‫قيم اختبار نشاطية‬ ‫اإلمتصاصية‬ ‫التراكيز‬ ‫المستخلص‬ ‫نوع العينة‬

‫‪)mg E AA/g (CAT‬‬ ‫(‪)nm( )mg /ml‬‬
‫‪17.19‬‬ ‫‪0.313‬‬ ‫‪1‬‬ ‫ثوم أحمر‬ ‫العينات‬
‫‪18.82‬‬ ‫‪0.337‬‬ ‫‪1‬‬ ‫ثوم أبيض‬ ‫الطازجة‬
‫‪18.35‬‬ ‫‪0.330‬‬ ‫ثوم أحمر (مسحوق) ‪1‬‬ ‫العينات الجافة‬
‫‪18.82‬‬ ‫‪0.337‬‬ ‫ثوم أبيض (مسحوق) ‪1‬‬

‫مضادات األكسدة االرجاعية (‪ ) CAT‬للعينات الطازجة‬

‫‪19‬‬

‫‪18.5‬‬

‫‪18‬‬

‫‪17.5‬‬

‫‪17‬‬
‫‪18.82‬‬
‫‪16.5‬‬

‫‪16‬‬ ‫‪17.19‬‬

‫ثوم أحمر‬ ‫ثوم أبيض‬

‫الشكل (‪ : )7.IV‬أعمدة بيانية لقيم المضادات لألكسدة اإلرجاعية ‪ CAT‬الطازجة لنبات الثوم‬
‫)‪. ( A. sativum‬‬

‫‪56‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪ ‬تعليق على النتائج ‪:‬‬

‫أظهرت النتائج الموضحة في الشكل (‪ )7.IV‬إن قيم اختبار النشاطية للثوم أحمر كانت‬

‫(‪ , )17.19 mg E AA/g‬أما بالنسبة للثوم أبيض كانت (‪ , )18.82 mg E AA/g‬نستنتج من‬
‫خالل نتائج المتحصل عليها أن ثوم أبيض له فعالية مضادة لألكسدة أكبر من ثوم أحمر ‪.‬‬

‫مضادات األكسدة االرجاعية ‪ ) ) CAT‬للعينات الجافة‬

‫‪19‬‬
‫‪18.8‬‬
‫‪18.6‬‬
‫‪18.4‬‬
‫‪18.2‬‬ ‫‪18.82‬‬

‫‪18‬‬ ‫‪18.35‬‬

‫ثوم أحمر (مسحوق)‬ ‫ثوم أبيض (مسحوق)‬

‫الشكل (‪ : )8.IV‬أعمدة بيانية لقيم المضادات لألكسدة اإلرجاعية ‪ CAT‬للعينات الجافة لنبات الثوم‬
‫)‪.)A.sativum‬‬

‫‪ ‬تعليق على النتائج ‪:‬‬

‫بينت النتائج الموضحة في الشكل (‪ )8.IV‬والتي تعبر عن نتائج اختبارتقييم النشاطية المضادة‬
‫لألكسدة الكلية ‪ ,‬حيث قدرت أكبر قيمة لها عند ثوم أبيض (مسحوق) حيث قدرت ب‪mg E AA (:‬‬
‫‪ , )18.82/g‬وكانت أقل عند ثوم أحمر (مسحوق) وقدرت ب ‪ . ) 18.35mg E AA/g( :‬من‬
‫خالل النتائج يمكننا القول أن ثوم أبيض له فعالية أكبر من ثوم أحمر ‪.‬‬

‫نستنتج من خالل النتائج المتحصل عليها أنه للثوم أبيض في كلتا الحالتين (الطازجة والجافة) نشاطية‬
‫مضادة لألكسدة أفضل من ثوم أحمر في كلتا الحالتين (الطازجة والجافة )‪ .‬والحظنا أن كل ما يزيد‬
‫تركيز المستخلص تزداد معه فعالية المضادة لألكسدة ‪.CAT‬‬

‫‪57‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪ .2.5.IV‬نتائج القدرة التثبيط للجذر الحر ‪ : DPPH‬بعد حساب النسبة المئوية للتثبيط (‪)I%‬‬
‫بداللة كل تركيز تم رسم المنحنيات البيانية التالية ‪:‬‬

‫‪ ‬العينات الطازجة ‪:‬‬

‫‪y = 8.6233x - 5.26‬‬

‫ثوم أبيض‬ ‫‪R² = 0.9918‬‬ ‫ثوم أحمر‬ ‫‪y = 14.384x - 0.8387‬‬
‫‪R² = 0.9991‬‬
‫‪100‬‬ ‫‪40‬‬

‫نسبة التثبيط ‪%‬‬

‫نسبة تثبيط ‪%‬‬

‫‪30‬‬
‫‪50‬‬ ‫‪20‬‬
‫‪10‬‬
‫‪0‬‬ ‫‪0‬‬
‫‪0‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪0‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬
‫التراكيز (‪)mg/ml‬‬ ‫التراكيز )‪)mg/ml‬‬

‫الشكل (‪ : )9.IV‬منحنيات النشاطية لمستخلصات العينات الطازجة في تثبيط الجذر الحر ‪. DPPH‬‬

‫‪ ‬العينات الجافة ‪:‬‬

‫‪y = 25.092x + 7.0793‬‬ ‫‪y = 15.049x + 8.2367‬‬
‫‪R² = 0.9964‬‬
‫ثوم أبيض )مسحوق(‬ ‫ثوم أحمر(مسحوق)‬ ‫‪R² = 0.9976‬‬
‫‪100‬‬ ‫‪100‬‬
‫نسبة التثبيط ‪%‬‬
‫نسبة تثبيط ‪%‬‬

‫‪50‬‬ ‫‪50‬‬

‫‪0‬‬ ‫‪0‬‬
‫‪0‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪0‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬
‫التركيز )‪(mg/ml‬‬ ‫التراكيز )‪(mg/ml‬‬

‫الشكل (‪ : )10.IV‬منحنيات النشاطية لمستخلصات العينات الجافة في تثبيط الجذر الحر ‪. DPPH‬‬

‫‪ ‬من خالل المنحنيات التي تمثل منحنيات النشاطية للعينات المدروسة في تثبيط الجذر الحر ‪DPPH‬‬
‫والتي من خاللها تحسب قيمة ‪ IC50‬للمستخلصات علما أن القيمة أقل منها تعني التأثير التثبيطي‬
‫األفضل ‪ ,‬القيم مبينة في الجدول أدناه ‪:‬‬

‫‪58‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫جدول (‪ :)7.IV‬قيم ‪ IC50‬و‪ ARP‬لمستخلصات ‪.DPPH‬‬

‫)‪ARP = (1/IC50‬‬ ‫)‪IC50 (mg/ml‬‬ ‫المستخلص‬ ‫نوع العينة‬

‫‪0.28‬‬ ‫‪3.53‬‬ ‫ثوم أحمر‬ ‫العينات الطازجة‬
‫‪0.15‬‬ ‫‪6.40‬‬ ‫ثوم أبيض‬
‫‪0.36‬‬ ‫‪2.77‬‬ ‫ثوم أحمر (مسحوق)‬ ‫العينات الجافة‬
‫‪0.58‬‬ ‫‪1.71‬‬ ‫ثوم أبيض (مسحوق)‬
‫‪0.20‬‬ ‫‪4.91‬‬ ‫حمض األسكوربيك‬

‫‪ ‬تعليق على النتائج ‪:‬‬

‫من النتائج المتحصل عليها لقيم ‪ IC50‬و (‪ )ARP‬والمسجلة في الجدول أدناه ‪:‬‬

‫اعتمادا على أنه هناك عالقة تناسبية من (‪ )ARP‬و‪ IC50‬حيث كلما زادت فعالية زادت قيمة (‪)ARP‬‬
‫أظهرت قيم ‪ IC50‬المتحصل عليها أن لمستخلص ثوم أبيض (مسحوق) أفضل نشاطية في اقتناص الجذر‬
‫الحر ‪ DPPH‬عن باقي المستخلصات وقدرت ‪ IC50‬ب (‪ )1.71mg/ml‬تليها ثوم أحمر(مسحوق) و‬
‫قدرت ب ‪ )2.77 mg/ml( :‬أما بالنسبة للعينات الطازجة سجلت أقل نشاطية و قدرت ب ‪ :‬بالنسبة للثوم‬
‫أحمر (‪ (3.53 mg/ml‬بالنسبة للثوم أبيض قدرت ب‪. )6.40mg/ml( :‬‬

‫بمقارنة مع قيمة ‪ IC50‬لحمض األسكوربيك والتي قدرت ب‪ ]11[ )4.91 mg/ml( :‬بينت أن جميع‬
‫المستخلصات المدروسة لها فعالية أفضل من حمض األسكوربيك ‪ ,‬بإستثناء مستخلص ثوم أبيض‬
‫الطازج الذي أعطى فعالية أقل ‪.‬‬

‫و بالمقارنة دراستنا مع دراسة أخرى التي أظهرت توافق الى حد كبير إلى ما توصلو إليه بالنسبة لقيمة‬
‫‪ IC50‬مستخلصات التي قدرت ب (‪. [10 ] ) 6.01,4.41,1.03‬‬

‫ومنه نستنتج أن مستخلصات الثوم المدروسة لها فاعلية مضادة لألكسدة في كل من إختبارين ‪ CAT‬و‬
‫‪.DPPH‬‬

‫‪.6.IV‬مطيافية األشعة تحت الحمراء‪: FTIR‬‬

‫تم مسح مجال الترددات ‪ )4000-400( cm-1‬بواسطة جهاز )‪AgilentTechnoogies Cary 630‬‬
‫‪ (FTIR‬وهذا في مخبر كلية العلوم الدقيقة بجامعة الوادي‪ ,‬بحيث أي تردد ممتص يميز نوع إهتزاز‬
‫رابطة معينة و عليه سوف نستخدم هذه الخاصية لتتبع دراسات خصائص الروابط الكيميائية مستخلصات‬
‫الميثانولية لنبات الثوم ‪.A.sativum‬‬

‫يتم تحديد الروابط الكيميائية من خالل مواقع إهتزازها في طيف األشعة تحت الحمراء كما هو في‬
‫الشكل (‪ , )11.IV‬و الجدول (‪ )8.IV‬أدناه ‪:‬‬

‫‪59‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

100 A B
100

80
80
Transmission

Transmission
1620
60 2926
1400
60 2912
1600
3262
40 3250 1397
40

517
20
1016 523
20
1027
0
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
Wavenumber (cm-1) Wavenumber (cm-1)

C D
100 100

80
80
Transmission

Transmission

1620
60 2919 1400
60 2923
1620
40
3270 3254 1397
40

20 505
532
1015 20
1020
0
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
Wavenumber (cm-1) Wavenumber (cm-1)

)‫ الثوم أحمر (مسحوق‬:D )‫ الثوم أبيض (مسحوق‬:C ‫ الثوم أحمر‬: B ‫ الثوم أبيض‬:A

.A.sativum ‫) مستخلصات الميثانولية لنبات الثوم‬FTIR( ‫ أطياف‬:)11.IV( ‫الشكل‬

60
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪A.sativum‬‬ ‫الجدول (‪ :)8.IV‬نوع الرابطة والتردد الموافق لكل مستخلص ميثانولي لنبات الثوم‬

‫الترددات (‪)cm-1‬‬
‫مجموعة الوظائف‬ ‫نوع الرابطة‬
‫‪D‬‬ ‫‪C‬‬ ‫‪B‬‬ ‫‪A‬‬
‫‪Hydroxyl‬‬ ‫‪O-H‬‬ ‫‪3254 3270 3250 3265‬‬
‫‪Aromatic compounds‬‬ ‫‪C-H‬‬ ‫‪2923 2919 2912 2926‬‬
‫‪Carbonyl and carboxylic‬‬ ‫‪C=O‬‬ ‫‪1620 1620 1600 1620‬‬
‫‪Carboxylic‬‬ ‫‪O-H‬‬ ‫‪1397 1400 1397 1400‬‬
‫‪Organosulfur‬‬ ‫‪S=O‬‬ ‫‪1020 1015 1027 1016‬‬

‫‪ ‬تعليق على النتائج‪:‬‬

‫أظهرت مطيافية األشعة تحت الحمراء من مستخلص ميثانولي للثوم ‪ A.sativum‬على وجود‬
‫مجموعات وظيفية مثل مركبات هيدروكسيل و الكربونيل و الكربوكسيل و كبريت عضوي (الشكل‬
‫(‪, )12.IV‬الجدول (‪ ,))8.IV‬حيث نالحظ عند الذروة واسعة ( ‪ )3254,3270,3250,3265 cm-1‬و‬
‫هذا راجع إلى إمتداد لمجموعة هيدروكسيل (‪ )O-H‬التي تشير إلى وجود مركبات متعددة الهيدروكسي‬
‫مثل الفالفونيدات وصابونين و غيرها ‪ .‬و عند الذروة (‪ )2923,2919,2912,2926 cm-1‬حيث‬
‫نالحظ إمتداد غير متماثل ل (‪ )C-H‬التي تشير إلى مركبات العطرية ‪.‬‬

‫وعند الذروة (‪ )1620,1620,1600,1620cm-1‬حيث نالحظ إمتداد لمجموعات الكربونيل و‬

‫الكربوكسيل (‪ .)C=O‬تشير الذروة (‪ )1397,1400 ,1397,1400 cm-1‬ل (‪ )O-H‬من أحماض‬
‫كربوكسيل [ ‪ .]12‬و التي كشفت بدورها عن وجود الفالفونيدات ‪ ,‬صابونين و جليكوسيدات ‪ .‬تشير‬
‫الذروة (‪ )1020,1015,1027,1016 cm-1‬إلى وجود مجموعة (‪ )S=O‬التي كشفت عن وجود‬
‫مركبات عضوية مثل ‪. ]13 [ Allicin , Alliin :‬‬

‫من النتائج المتحصل عليها الحظنا أن جميع المستخلصات تحتوي على مجموعات وظيفية متماثلة ‪,‬‬
‫ذات ترددات متقاربة جدا ‪ .‬عند مقارنتها مع دراسة أخرى في نفس السياق وجدنا أن المعطيات تتوافق‬
‫إلى ما توصلو إليه [‪.] 14‬‬

‫‪.7 .IV‬الفاعلية المضادة البكتيريا‪:‬‬

‫بعد مراجعة بعض الدراسات السابقة لنشاطية البيولوجية لمستخلصات فصوص الثوم )‪(A. Sativum‬‬

‫وبعض المضادات الحيوية المضادة لبعض األنواع البكتيرية الممرضة‪ ,‬تحصلنا النتائج المرفقة في‬
‫األشكال والجداول التالية ‪:‬‬

‫‪61‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪ ‬مستخلص ‪: DMSO‬‬
‫أدت معاملة السالالت البكتيرية المختبرة بالمستخلص ال ‪ DMSO‬بثالث تراكيز مختلفة إلى عدم‬
‫رسم مناطق تثبيط معتبرة موضحة في الجداول التالية ‪:‬‬

‫الجدول (‪ : )9.IV‬أقطار التثبيط (مم) ألنواع البكتيريا الناتجة عن تراكيز مختلفة لمستخلص ‪DMSO‬‬
‫لنبات الثوم ‪A . sativum‬‬

‫نوع البكتيريا وطبيعة الغرام‬

‫‪(G-) E . Coli‬‬ ‫‪)G+( S . aureus‬‬ ‫‪ATB + 5‬‬ ‫‪ATB‬‬
‫)‪)mg/ml‬‬
‫‪10 5 2.5‬‬ ‫‪10‬‬ ‫‪5 2.5‬‬ ‫التراكيز‬
‫(‪)mg/ml‬‬

‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪ 0‬مم ‪0‬مم‬ ‫‪ 0‬مم‬ ‫ثوم أحمر‬ ‫‪ 37‬مم‬ ‫‪ 33‬مم‬
‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪0‬مم ‪0‬مم‬ ‫‪0‬مم‬ ‫ثوم اأبيض‬ ‫‪ 36‬مم‬ ‫‪ 34‬مم‬

‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪ 0‬مم ‪ 0‬مم‬ ‫‪ 0‬مم‬ ‫ثوم أحمر‬ ‫‪ 36‬مم‬ ‫‪ 34‬مم‬
‫(مسحوق)‬
‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪/‬‬ ‫‪ 0‬مم ‪ 0‬مم‬ ‫‪ 0‬مم‬ ‫ثوم أبيض‬ ‫‪ 30‬مم‬ ‫‪ 28‬مم‬
‫(مسحوق)‬

‫مالحظة ‪ :‬القيم المتحصل عليها بوحدة (مم) تكون مضافة مع قطر القرص الذي طوله (‪ 6‬مم)‪.‬‬
‫‪ ‬النتائج ‪:‬‬
‫‪ ‬بالنسبة للبكتيريا من نوع ‪( E . coli‬سالبة الغرام ) لم تعطي أي قطر تثبيطي في كل الحاالت‬
‫بالنسبة لمستخلص (‪. )DMSO‬‬
‫‪ ‬أما بالنسبة للبكتيريا من نوع ‪ S . aureus‬فكانت النتائج كاآلتي ‪:‬‬

‫‪ -‬بالنسبة للعينات الطازجة لم نسجل قيمة للقطر التثبيطي لكال المستخلصين النباتين إال في حالة‬
‫‪ ATB‬و )‪. ATB +( 5 mg/ml‬‬

‫‪ -‬بالنسبة للثوم األحمر ‪ :‬في حالة ‪ ATB‬فقط سجلنا قطر تثبيطي (‪ 33‬مم) و في حالة‬
‫)‪ ATB +( 5 mg/ml‬نالحظ زيادة للقطر التثبيطي و قدر ‪ 37 ):‬مم) ‪.‬‬
‫‪ -‬أما بالنسبة للثوم األبيض عند وجود ‪ ATB‬فقط سجلت قيمة للقطر التثبيطي قدر ‪ 34( :‬مم) ‪,‬‬
‫أما في حالة )‪ ATB +(5 mg/ml‬الحظنا زيادة للقطر التثبيطي و كانت ( ‪ 36‬مم) ‪.‬‬

‫‪62‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪ ‬مالحظات ‪:‬‬
‫من خالل الجدول نالحظ أن بالنسبة للعينات الطازجة سجلنا أعلى قطر تثبيطي بلغ حتى (‪ 37‬مم)‬
‫‪ ,‬أما بالنسبة للعينات الجافة بلغت قيمة القطر التثبيطي بلغت (‪ 36‬مم) ‪.‬‬

‫‪1‬‬
‫‪0.8‬‬
‫‪0.6‬‬

‫تركيز ‪2.5‬‬ ‫‪0.4‬‬

‫تركيز ‪5‬‬ ‫‪0.2‬‬

‫تركيز ‪10‬‬ ‫‪0‬‬
‫الثوم األبيض‬ ‫الثوم األحمر‬ ‫الثوم األبيض‬ ‫الثوم األحمر‬
‫بودر‬ ‫بودر‬

‫نوع بكتريا‬
‫‪S.aureus‬‬
‫‪E.coli‬‬

‫الشكل (‪ :)12.IV‬أقطار تثبيط للمستخلصات العينات الطازجة والجافة لمستخلص ‪ DMSO‬لنبات الثوم ‪.‬‬

‫‪40‬‬
‫‪35‬‬
‫‪30‬‬
‫‪25‬‬
‫‪20‬‬
‫‪ATB‬‬
‫‪15‬‬
‫)‪ATB+5 (mg/ml‬‬
‫‪10‬‬
‫‪5‬‬
‫‪0‬‬
‫الثوم األبيض‬ ‫الثوم األبيض الثوم األحمر‬ ‫الثوم األحمر‬
‫بودر‬ ‫بودر‬
‫بكتيريا ‪S.aureus‬‬

‫الشكل( ‪ :)13.IV‬أقطار تثبيط للمستخلصات لعينات الطازجة والجافة لمستخلص ‪ DMSO‬في وجود‬
‫المضاد الحيوي ‪. ATB‬‬

‫‪63‬‬
‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪ ‬المستخلصات الميثانولية ‪:‬‬

‫الجدول (‪ : )10.IV‬أقطار التثبيط (مم) ألنواع البكتيريا لمستخلص الميثانولي لنبات الثوم‬
‫( ‪)A.sativum‬‬

‫‪20 mg/ml ATB + 20‬‬ ‫‪ATB‬‬ ‫نوع البكتيريا‬

‫‪mg/ml‬‬
‫‪ 0‬مم‬ ‫‪ 32‬مم‬ ‫‪ 28‬مم‬ ‫‪ S. aureus‬ثوم أحمر‬
‫‪ 0‬مم‬ ‫‪ 30‬مم‬ ‫‪ 28‬مم‬ ‫)‪ (G+‬ثوم أبيض‬
‫‪ 0‬مم‬ ‫‪ 28‬مم‬ ‫‪ 27‬مم‬ ‫ثوم أحمر (مسحوق)‬
‫‪ 0‬مم‬ ‫‪ 37‬مم‬ ‫‪ 35‬مم‬ ‫ثوم أبيض (مسحوق)‬
‫‪ 0‬مم‬ ‫‪ 31‬مم‬ ‫‪ 28‬مم‬ ‫)‪ E . coli (G-‬ثوم أحمر‬
‫‪ 0‬مم‬ ‫‪ 30‬مم‬ ‫‪ 28‬مم‬ ‫ثوم أبيض‬
‫‪ 0‬مم‬ ‫‪ 30‬مم‬ ‫‪ 28‬مم‬ ‫ثوم أحمر (مسحوق)‬
‫‪ 0‬مم‬ ‫‪ 31‬مم‬ ‫‪ 28‬مم‬ ‫ثوم أبيض (مسحوق)‬

‫‪40‬‬
‫‪35‬‬
‫‪30‬‬
‫‪25‬‬
‫‪ATB‬‬ ‫‪20‬‬
‫‪ATB+20mg/ml‬‬ ‫‪15‬‬
‫‪10‬‬
‫‪20 mg/ml‬‬
‫‪5‬‬
‫‪0‬‬
‫ثوم األبيض‬ ‫ثوم األحمر‬ ‫ثوم األبيض‬ ‫الثوم االحمر‬
‫بودر‬ ‫بودر‬
‫نوع بكتريا ‪S.aureus‬‬

‫‪64‬‬
 ‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪35‬‬
‫‪30‬‬
‫‪25‬‬
‫‪20‬‬
‫‪ATB‬‬
‫‪15‬‬
‫‪ATB+20mg/ml‬‬ ‫‪10‬‬
‫‪20 mg/ml‬‬ ‫‪5‬‬
‫‪0‬‬
‫ثوم األبيض‬ ‫ثوم األحمر‬ ‫ثوم األبيض‬ ‫ثوم األحمر‬
‫بودر‬ ‫بودر‬
‫نوع بكتيريا ‪E.coli‬‬

‫الشكل (‪ : )14.IV‬أقطار تثبيط للعينات الطازجة والجافة للمستخلص الميثانولي إتجاه ساللتين‬
‫بكتيريتين ‪ E.coli, S.aureus‬في وجود المضاد الحيوي ‪.ATB‬‬

‫‪ ‬النتائج ‪ :‬من خالل الجدول (‪: )10 .IV‬‬

‫تم مالحظة أن األقطار التثبيطية للمستخلص الميثانولي مع المضاد الحيوي )‪ )ATB‬لها قيم معتبرة‬
‫عند الساللتين البكتيريتين المختبرتين ‪:‬‬

‫‪ ‬بالنسبة لساللة ‪ : E .coli‬بالنسبة للعينات الطازجة سجلت أعلى قيمة للقطر التثبيطي (‪30‬مم) ‪ ,‬أما‬
‫بالنسبة للعينات الجافة سجلت أعلى قيمة للقطر التثبيطي كانت (‪ 31‬مم) نالحظ أنها متقاربة ‪.‬‬
‫‪ ‬أما بالنسبة للساللة ‪ : S . aureus‬بالنسبة للعينات الطازجة بلغت قيمة القطر التثبيطي ( ‪ 32‬مم) ‪,‬‬
‫أما بالنسبة للعينات الجافة فكانت أعلى قيمة للقطر التثبيطي ( ‪ 35‬مم) ‪.‬‬
‫‪ ‬بالنسبة للثوم أحمر‪ :‬لم نسجل أي قطر تثبيطي عند تراكيز عالية ( ‪ )20 mg/ml‬أما في حالة مزيج‬
‫)‪ )20 mg/ml + ATB‬سجلنا قطر تثبيطي بلغ (‪ 31‬مم) ‪ .‬أما في حالة ‪ ATB‬فقط سجلنا قطر تثبيطي‬
‫بلغ (‪ 28‬مم) وعند مزيج )‪ )20 mg/ml + ATB‬لم نالحظ زيادة للقطر التثبيطي وكانت قيمة ثابتة (‪28‬‬
‫مم) وهذا دليل على أنه عند التراكيز لم نتحصل على قطر تثبيطي ‪.‬‬
‫‪ ‬ثوم أبيض ‪ :‬سجلنا قطر تثبيطي في حالة ‪ ATB‬فقط قدر ب‪ 28( :‬مم)‪ ,‬ونفس نتيجة بالنسبة لمزيج‬
‫(‪ )ATB +20 mg/ml‬أما في حالة تراكيز عالية لم نسجل أي قطر تثبيطي ‪.‬‬
‫أما في حالة مزيج (‪ )ATB + 20 mg/ml‬سجلنا قطر تثبيطي واضح قدر ب‪ 30( :‬مم) ‪.‬‬
‫نالحظ مع جميع المستخلصات لم نسجل أي قيمة لألقطار التثبيطية أما عند ‪ ATB‬سجلنا قيمة للقطر‬
‫التثبيطي وهذا في كل الحاالت ‪.‬‬
‫‪ ‬النتائج ‪:‬‬
‫‪ ‬من خالل الجدول (‪ : )9 .IV‬تم مالحظة أن األقطار التثبيطية للمستخلص الكحولي (الميثانولي) لها‬
‫قيم معتبرة عند الساللتين البكتيريتين المختبرتين مقارنة ب ‪. DMSO‬‬
‫‪ ‬من خالل النتائج المتحصل عليها الحظنا أن الساللتين ‪ E. coli‬و ‪ S.aureus‬كانتا أكثر حساسية‬
‫للمستخلص الميثانولي عند الترا كيز العالية مقارنة بمستخلص ‪. DMSO‬‬
‫‪65‬‬
 ‫النتائج والمناقشة‬ ‫الفصل الرابع‬

‫‪ ‬مناقشة النتائج ‪:‬‬

‫‪ ‬من خالل ما تحصلنا عليه في األشكال والجداول السابقة بين أنه لمستخلصات فصوص الثوم (الكحولية‬
‫‪ )DMSO /‬له قدرة تثبيطية تجاه السالالت البكتيرية الممرضة ‪ ,‬ولكن عند تراكيز معينة ‪ ,‬كما توافقت‬
‫دراستنا مع دراسة أخرى [‪. [1]]15‬‬
‫‪ ‬تفسير النتائج ‪:‬‬
‫‪ ‬يمكن تفسير اإلختالف في النشاطية المضادة للبكتيريا إلى ‪:‬‬
‫‪ ‬اإلختالف في تركيز المركبات الفعالة التي لها فعالية حيوية بيولوجية ضد األحياء المجهرية وأهمها‬
‫المركبات الفينولية والفالفونيدية ‪.‬‬
‫‪ ‬امتصاص األغشية الخلوية للبكتيريا للمركبات الفينولية مع اإلنزيمات الفعالة والعناصر المعدنية في‬
‫الجدران الخلوية ‪.‬‬
‫‪ ‬كما أن اإلختالف في الحساسية بين السالالت البكتيرية موجبة الغرام وسالبة الغرام يعود لإلختالف في‬
‫البنية ‪ ,‬تركيبة ‪ ,‬طبيعة جدار الخلية البكتيرية بين النوعين ‪ ,‬وفي وجود ‪ Lipopolysaccharides‬التي‬
‫يحتويها الغشاء الخارجي لبكتيريا ) ‪.)G-( )E . coli‬‬

‫‪66‬‬
 ‫مراجع الفصل الرابع‬

‫المراجع العربية ‪:‬‬

‫[‪ ]5‬حليمة نسيب ‪ ,‬نجاح بن علي‪ ,.‬الدرسة الكيميائية لمستخلصات بعض النباتات الطبية المستخدمة في‬
‫الطب التقليدي لعالج إرتفاع ضغط الدم في منطقة وادي سوف ‪ ,‬مذكرة ماستر علوم ‪,‬جامعة حمه‬
‫لخضر الوادي ; ص‪.)2020(,65‬‬

‫[‪ ] 6‬صحراوي صباح ‪ ,‬مساهمة في تحسين ظروف االستخالص المركبات الفينولية من نباتات الطبية‬
‫لمنطقة الوادي نبات الخبيز ‪ , Malva Sylvestris‬مذكرة ماستر كيمياء ‪ ,‬جامعة حمه لخضر الوادي‬
‫; ص ‪.)2018( ,58‬‬

‫[‪ ]11‬عثماني منال ‪,‬واري بسمة ‪ ,‬دراسة الفعالية المضادة لألكسدة للمستخلص الخام لثمار وبذور‬
‫القناوية ‪ , Abelmoschus esculentus L‬مذكرة ماستر كيمياء ‪ ,‬جامعة حمه لخضر الوادي ‪ ,‬ص‬
‫‪.)2019 (, 57‬‬

‫‪68‬‬
 ‫مراجع الفصل الرابع‬

: ‫المراجع األجنبية‬

[1] Victor ,OKOMBE EMBEYE , and NZUZIMAVUNGU Gael .Etude de

l'activite antibactérienne (invitro ) des extraits aqueux et méthanoliques de l'ail
(Allium sativum L.).Journal of Applied Biosciences 141:14419-14425.

]2[ Djemai , S., étude de l'activité biologique des extrait du fruit du zizy plus
lotus L,Mémoire de magister , Université El hadj lakhater , Batna p:91(2009) .

[3] YUSUF, A,. FAGBUARO, S,S,. FAJEMILEHIN, S,O,K,. Chemical

composition, phytochemical and mineral profile of garlic (Allium sativum).
Journal of Bioscience and Biotechnology Discovery.3(5):105-109 . (2018).

[4] Friday, O., Uhegbu, I., Emek, E., Iweala, J., & Ijeoma, K. Studies on the
chemical and antinutritional content of some Nigerian spices. International
Journal of Nutrition and Metabolism, 3(6), 72-76p.(2011).

[7] spingo G., Tramelli L ., de Faveri D.M.Effects of extaction time ,

temperature and solvent on concentraction and antioxidant activity of grape
marc phenolics , Journal of Food Engineering , 81:200-208,(2007).

[8] Telli A., Mahboub N., Boudjeneh S., Siboukeur O.E.K.,Moulti –mati
.F,Optimisation des condition d' extraction des phenols de dattes lyophilisees
(phoenix dactylifera 1) Variete ghars .Annales des Sciences et Technologie
,2(2):107-115,(2010).

[9] Belkamel , A., Bammi,J., Janneot ,V., Belkamel,A., Dehbi,Y.,&

Douira,A.,Evaluation de la biomsse et analyse de huiles essentielles de trois
variétés de basilic (Ocimum basilicum L.) cultivées au Maroc .Acta Botanica
Gallica.155(4),467-476.(2008).

[10] Bozin,Biljana, et al .Phenolics as antioxidants in garlic (Allium sativum

L.,Alliaceae). Food chemistry 111.4:925-929,(2008).

[12] Rastogi L, Arunachalam J. Sunlight based irradiation strategy for

the rapid green synthesis of highly stable silver nanoparticles using
aqueous garlic (Allium sativum) extract and their antibacterial
potential. Materials Chem Physics;129:558–63,( 2011).

69
 ‫مراجع الفصل الرابع‬

[13] Songsungkan J, Chanthai S. Determination of synergic

antioxidant activity of the methanol/ethanol extract of allicin in
the presence of total phenolics obtained from the garlic capsule
compared with fresh and baked garlic clove. Int Food Res J
;21:2377-85,( 2014).

[14] Divya, B.J., et al .A study on phytochemicals , Functional groups and

mineral composition of Allium sativum (garlic ) cloves .International Journal of
current pharmaceutical Research 9.3:42-45,(2017).

[15] Soussy CJ , Bonnet R,. Comité de I'antibiogramme de Ia société Française

de Mocrobiologie .Recommandations .(2013).

70
‫الخاتمة‬
 ‫الخاتمة‬

‫الخاتمة‬
‫فييي إطييار تثمييين الثيييروة المحلييية وبصييفة خاصيية النباتيييات الطبييية المزروعيية فييي منطقييية وادي‬
‫سيييوف ‪ ,‬قمنيييا مييين خيييالل هيييذه الدراسييية بتعييييين الشيييروط المناسيييبة لإلسيييتخالص المركبيييات الفينوليييية‬
‫لنبتيييية الثييييوم ‪ Allium sativum‬المييييأخوذة ميييين منطقيييية وادي سييييوف ‪.‬عيييين طريييييق اإلسييييتخالص‬
‫بالنقع وذلك للعينات الطازجة و الجافة ‪.‬‬
‫على ضوء النتائج المتحصل عليها يمكننا استنتاج مايلي ‪:‬‬
‫‪ ‬المستخلصييييات الفينولييييية المتحصييييل عليهييييا بعييييد عملييييية النقييييع تحتييييوي علييييى خصييييائص مختلفيييية‬
‫(المظهر ‪ /‬اللون ) وذلك على حسب اختالف التراكيز والمذيب وكذلك حالة النبتة‪.‬‬
‫‪ ‬المستخلص الذي أعطى أكبر قيمة في المردود في العينات الجافة قدرت ب ‪:‬‬
‫‪ R=25,9899%‬أما بالنسبة للعينات الطازجة كانت‪. R=18,7746% :‬‬
‫وللتعرف على محتوى المواد الفعالة قمنا بالكشوفات األولية والتي أظهرت أن نبات الثوم يحتوي‬
‫على عدة نواتج أيض ثانوي ‪ ,‬وهذا دليل على أنه غني بالمواد الفعالة ‪.‬‬
‫كما تمت دراسة التقدير الكمي للفينوالت والفالفونيدات باستعمال كاشف فولين وثالثي كلوريد‬
‫األلمنيوم للمستخلص النباتي وكانت النتائج كاألتي ‪:‬‬
‫بالنسبة للعينات الطازجة ‪:‬‬
‫‪ ‬بالنسبة للثوم أحمر قدرت كمية الفينوالت ب‪, (10.07 mgEAG/g) :‬وكمية الفالفونيدات قدرت‬
‫ب‪ . )7.890 mg E AQ/g) :‬نالحظ أن كمية الفينوالت أكبر من الفالفونيدات بالنسبة لهذا النوع ‪.‬‬
‫‪ ‬بالنسبة للثوم أبيض قدرت كمية الفينوالت ب‪, (3.854 mgEAG/g( :‬وكمية الفالفونيدات قدرت‬
‫ب ‪ . )3.610 mgEAQ/g) :‬نالحظ أن كمية كل من الفينوالت والفالفونيدات كانت متقاربة بالنسبة‬
‫لهذا النوع ‪.‬‬

‫بالنسبة للعينات الجافة ‪:‬‬

‫‪ ‬بالنسبة للثوم أحمر قدرت كمية الفينوالت سجلنا أعلى قيمة وقدرت ب‪20.45 E AG mg /g) :‬‬
‫) أما بالنسبة للفالفونيدات قدرت ب‪ )5.181 mg E AQ /g) :‬نالحظ أن كل من كميات الفينوالت‬
‫والفالفونيدات كانت متباعدة ‪.‬‬
‫‪ ‬بالنسبة للثوم أبيض قدرت كمية الفينوالت ب ‪ )13.499 mg E AG /g):‬أما بالنسبة للمحتوى‬
‫الفالفونيدي كان صغير جدا وقدر ب ‪ )0.200 mg E AQ /g) :‬الحظنا بالنسبة لهذا النوع أن كمية‬
‫الفالفونيدات والفينوالت متباعدة جدا ‪.‬‬
‫في األخير يمكننا القول أن كمية الفينوالت كانت كبيرة في كل المستخلصات المدروسة الطازجة‬
‫والجافة ‪.‬‬
‫بعد التقدير الكمي للفينوالت والفالفونيدات لجأنا إلى دراسة الفعالية المضادة لألكسدة‬
‫للمستخلصات ‪ .‬وذلك عن طريق اختبار الجذر الحر ‪ DPPH‬والقدرة اإلرجاعية ‪: CAT‬‬
‫‪ ‬في إختبار تثبيط الجذر الحر ‪ DPPH‬تمكنا من حساب ‪ IC50‬المثبطة ‪ %50‬من الجذر الحر لبعض‬
‫المستخلصات ‪ ,‬حيث أظهرت القيم ‪ IC50‬المتحصل عليها أن النشاطية األفضل لتثبيط (إلقتناص )‬

‫‪72‬‬
 ‫الخاتمة‬

‫)‪ )1.71 mg/ml‬وأقل‬ ‫‪ DPPH‬للعينات الجافة سجلت أفضل نشاطية عند ثوم أبيض وقدرت ب ‪:‬‬
‫نشاطية سجلت عند ثوم أحمر وقدرت ب‪. )2.77 mg /ml) :‬‬
‫‪ ‬أما بالنسبة للعينات الطازجة سجلت أفضل نشاطية عند ثوم أحمر وقدرت ب‪) 3.53 mg/ml) :‬‬
‫واقل نشاطية سجلت بالنسبة لثوم أبيض وقدرت ب ‪( 6.40 mg/ml ) :‬‬
‫‪ ‬العوامل الجيوغرافية ‪ ,‬المناخية ‪ ,‬الوراثية وكذلك مدة التخزين لها تأثير كبير على محتوى متعدد‬
‫الفينول ‪.‬‬
‫وفي الشروط المثالية التي تحصلنا عليها هي أن أكبر قيمة للفينوالت عند عينات النتائج المضادة لألكسدة‬
‫في تثبيط الجذر الحر ‪ ,DPPH‬حيث قدرة أفضل نشاطية لكبح جذور الحرة بالنسبة للعينات الجافة وهذا‬
‫يعود إلحتوائها على كمية كبيرة من الفينوالت وهذا مايمنح لنبات الثوم ‪ Allium sativum‬قدرة عالية‬
‫في الكبح الجذري‪.‬‬
‫كما تم التقدير النوعي بواسطة مطيافية األشعة تحت الحمراء ‪ FTIR‬للمجموعات الوظيفية على‬
‫المستخلص النباتي فتحصلنا على أطياف متشابهة ومتقاربة في كل العينات وهذا مايثبت أن كل األنواع‬
‫لها نفس المجموعات الوظيفية وهذا مايتوافق مع النتائج السابقة للفينوالت والفالفونيدات وال ‪CAT‬‬
‫‪ DPPH ,‬أي النتائج التجريبية توافقت مع النتائج النظرية ‪.‬‬
‫كما تمت دراسة الفاعلية المضادة للبكتيريا لهذه المستخلصات ‪ ,‬وذلك بإختبار ساللتان بكتيريتان‬
‫مزروعه في وسط جيلوزي )‪ , )MH‬وهذا باإلعتماد على طريقة اإلنتشار باألقراص ‪ ,‬حيث كانت‬
‫النتائج جدا إيجابية مع المضاد الحيوي وكانت أحسن بمعية تركيز من المستخلص النباتي إذ كان هناك‬
‫نشاطية بيولوجية عالية ‪.‬‬
‫حيث سجلت أعلى قطر تثبيطي في مستخلص ال ‪ DMSO‬وقدر ب‪37 ):‬ملم ( وهذا في حالة مزيج‬
‫)المضاد الحيوي ‪ . (5 mg /ml +‬أما في حالة المضاد الحيوي فقط سجلت قيمة القطر التثبيطي‬
‫وقدرت ب ‪ 33) :‬ملم ( من هنا يمكننا القول أن المستخلص النباتي المدروس زاد من فعالية المضاد‬
‫للبكتيريا للمضاد الحيوي ‪ .‬بالنسبة للساللة البكتيرية المختبرة ‪ S.aureus‬أما بالنسبة لساللة ال ‪E. coli‬‬
‫لم يعطي أي فعالية ‪.‬‬
‫أما في حالة المستخلص الميثانولي فقد سجل أعلى قطر تثبيطي في حالة المضاد الحيوي ‪ +‬تراكيز عالية‬
‫من المستخلص المدروس )‪ (20 mg /ml‬وقدر ب ‪ 32‬ملم مع بكتيريا ‪. S.aureus‬‬
‫أما بالنسبة لساللة البكتيريا المختبرة الثانية كانت قيمة القطر التثبيطي بمعية المضاد الحيوي ‪ 31‬ملم ‪.‬‬
‫بالمقارنة اإلجمالية مع النتائج السابقة لباقي التراكيز يمكننا استنتاج أنه كلما قل تركيز المستخلص النباتي‬
‫زاد القطر التثبيطي وبالتالي زيادة الفعالية البيولوجية ‪.‬‬
‫وفي األخير ونظرا للنتائج المشجعة المتحصل عليها يمكن القول أن نبتة الثوم مؤهلة لتكون من ضمن‬
‫أقوى النباتات الطبية في الطب الشعبي ‪.‬‬

‫‪73‬‬
 ‫الخاتمة‬

‫وكأفاق أخرى لدراسة نبات الثوم مستقبليا فإننا نأمل أن يتواصل العمل والينتهي عند هذا الحد وأن‬
‫تكون هذه هي إنطالقة إلكمال والتعمق أكثر في هذا الموضوع من خالل ‪:‬‬
‫‪ ‬اجراء دراسات تحليلية كمية ونوعية للمركبات الفعالة مثل ‪ HPLC‬كمية ونوعية للمركبات فعالة من‬
‫خالل التعرف على التركيبة الكيميائية للمواد المسؤولة على هذه الفعالية ‪.‬‬
‫‪ ‬استعمال طرق أخرى للتأكد من نشاطية النبتة ‪.‬‬
‫‪ ‬استعمال طرق اإلستخالص المختلفة )‪. )Ultrasourd , Soxlet‬‬
‫‪ ‬الدراسة الميكروبيولوجية للنبتة مع تراكيز مختلفة للغرام وتجريب الفعالية البكتيرية مع الخمائر‬
‫والفطريات ‪ ,‬العمل بطريقة ‪. CMI‬‬

‫‪74‬‬
‫المالحق‬
 ‫الملحق (‪: )1‬‬

‫جهاز مطيافية ‪FTIR‬‬ ‫الحاضنة‬

‫جهاز ‪ pH‬متر‬ ‫جهاز مبخر دوراني‬

‫جهاز قياس الناقلية ‪Ec‬‬ ‫جهازمطيافية ‪UV-Visible‬‬

‫العينات الطازجة‬ ‫العينات الجافة‬

 ‫ملحق (‪: )2‬‬

‫بكتيريا نوع ‪S.a‬‬ ‫جهاز قياس تركيز بكتيريا‬

‫صيغة مضاد الحيوي ‪Chlorampénicol‬‬ ‫بكتيريا نوع ‪E.coli‬‬

 ‫الملحق (‪: )3‬‬

‫أقطار التثبيط ‪ S.aureus‬لثوم أحمر‬ ‫أقطار التثبيط ‪ S.aureus‬لثوم أحمر (مسحوق)‬

‫أقطار التثبيط ‪ S.aureus‬لثوم أبيض‬ ‫أقطار التثبيط ‪ S.aureus‬لثوم أبيض (مسحوق)‬

‫نتائج تثبيط الساللة البكتيرية على مستخلص )‪ (DMSO‬لنبات الثوم ‪.‬‬

 ‫الملحق(‪: )4‬‬

‫أقطار تثبيط ‪ S.aureus‬لمستخلصات الثوم‬ ‫أقطار تثبيط ‪ E.coli‬لمستخلصات الثوم‬

‫نتائج تثبيط السالالت البكتيرية لمستخلصات الميثانولية لنبات الثوم ‪.‬‬