Pràctica 12

DETERMINACIÓ DE METANOL EN BEGUDES ALCOHÒLIQUES MITJANÇANT CROMATOGRAFIA

DE GASOS

INTRODUCCIÓ
El metanol es troba a les begudes alcohòliques en quantitats molt petites, no com a producte de la fermentació
sinó com a conseqüència de la desmetilació d’ésters glucorònids de la pectina.
En aquesta pràctica s’analitzarà el metanol present en begudes alcohòliques obtingudes per destil·lació com per
exemple, whisky, ginebra, conyac, ... Per a analitzar aquestes begudes fent servir cromatografia de gasos no cal
altre tractament a banda de la (eventual) dilució i addició del patró intern, donat que si s’han obtingut per
destil·lació no contenen compostos no volàtils que podrien contaminar o fins i tot obstruir les columnes de
cromatografia (seria el cas d’injectar directament un vi).
Concentracions màximes permeses segons la legislació:
Conyac: 1500 mg metanol / L de conyac
Rom: 1 mg metanol / 100 mL de etanol absolut (la qual cosa suposa una concentració de l’ordre de 4 mg
metanol / L de rom)
Whisky: 30 mg metanol / 100 mL etanol absolut (la qual cosa suposa una concentració de l’ordre de 120
mg metanol / L whisky)

EXPERIMENTAL
1. Dissolucions

Dissolució d’etanol:H2O del 40% (v/v): Preparar 1 L i compartir-lo fins que s’acabi (s’empra com a dissolvent).

Dissolució patró de metanol de ≈ 1500 mg · L-1 metanol en etanol:H2O del 40%: Preparar 50 mL (cada grup).
Donada la volatilitat del metanol, per preparar aquest patró, cal seguir el següent procediment: fent servir la
balança de precisió, tarar el matràs aforat de 50 mL amb el tap (posar el tap sobre el plat de la balança).
Introduir en el matràs amb un comptagotes de vidre uns 0,070 g de metanol (6-7 gotes). Tapar el matràs i
esperar a tenir la pesada estable. Afegir el dissolvent (dissolució etanol:H2O del 40% (v/v)) i enrasar.
Homogeneïtzar.

Dissolució de 4-metil-2-pentanol (patró intern) de 5 g · L-1 en etanol:H2O del 40%.

El 4-metil-2-pentanol també és volàtil però, donat que es fa servir com a patró intern, no és necessari conèixer
la concentració exacte. El que és important és afegir la mateixa quantitat a totes les dissolucions (tant
patrons com mostres). Per aquest motius podem emprar la balança monoplat (precisió 0,01 g).

Pesar aproximadament 0,5 g de 4-metil-2-pentanol directament dins el matràs de 100 mL. Enrasar amb
etanol:H2O del 40%. Homogeneïtzar.

2. Recta de calibratge

Patrons: En matrassos aforats de 10 mL, introduir, emprant una pipeta automàtica, 0; 0,5; 0,7; 1,0; 2,0 i 3,0 mL
de la dissolució patró de metanol de 1500 mg · L-1 (en fer els càlculs, considereu la concentració exacta).
 Afegir amb exactitud, fent servir la pipeta automàtica, 1,0 mL de la dissolució de patró intern. Enrasar a 10
mL amb etanol:H2O del 40%. Homogeneïtzar.

Dissolucions de la mostra: Preparar dues rèpliques: a un matràs de 10 mL

introduir, emprant la pipeta automàtica, 1,0 mL de la dissolució de patró
intern i afegir 5 mL de mostra (la beguda alcohòlica). Enrasar a 10 mL amb
etanol:H2O del 40%. Homogeneïtzar.

NOTA: Si no tinguéssim informació bibliogràfica, o del fabricant de la columna,

referent a l’ordre d’elució de les diferents substàncies, caldria preparar
dissolucions individuals de metanol i de patró intern per identificar-los en els
corresponents cromatogrames individuals. A la figura es pot observar que
l’ordre d’elució, en la columna emprada és: metanol, etanol i finalment el patró
intern (4-metil-2-pentanol).

3. Preparació de la xeringa:

Per tenir una millor precisió en volum que injectem cal fer servir la tècnica sandvitx intercalant el volum de
mostra entre dos segments d’aire (vegeu la següent figura)

: opcional; en aquest cas, millor aire

Per preparar la xeringa seguirem les instruccions següents:

1. Netejar unes 10 vegades la xeringa amb etanol. Posar l’èmbol de la xeringa a “0” i aspirar 2-3 µL d’aire

2. Introduir l’agulla dins la dissolució a injectar i aspirar 1,0 µL

3. Aspirar aire fins 70 % de la capacitat de la xeringa (així l’agulla queda ocupada per aire i evitem que
mentre travessem el septum es vaporitzi la dissolució).

4. Injecció en el cromatògraf

Preparar el software segons les instruccions que trobareu al laboratori. Ficar l’agulla de la xeringa a través del
septum de l’injector amb cura de no vinclar-la. Descarregar ràpidament tota la xeringa i, simultàniament, pitjat
la tecla “Start” del cromatògraf (comença a contar el temps). Extreure la xeringa i netejar-la unes 10 vegades
amb etanol.

5. Enregistrament dels cromatogrames

Enregistrar els cromatogrames de totes les dissolucions i llegir les àrees dels pics. Les condicions instrumentals
de treball estan definides en el mètode MetOH.gcm que es troba a la carpeta C:\GCsolution\Data\Pract_QA\
EQA.

MATERIAL I REACTIUS
9 Matrassos aforats de 10 mL Metanol
1 Matràs aforat de 50 mL Etanol absolut i del 96% (per netejar)
2 Vasos de precipitats de 100 mL 4-metil-2-pentanol
1 Pipeta automàtica d’1 mL
2 Comptagotes de vidre
 1 Pipeta aforada de 5 mL

Pràctica 12

DETERMINACIÓ DE METANOL EN BEGUDES ALCOHÒLIQUES MITJANÇANT CROMATOGRAFIA DE

GASOS
Grup: ___ Nom i llinatges:____________________________________________________________

RESULTATS
1. Dissolució patró estoc de metanol d´aproximadament 1,5 g · L-1

Pesada efectuada, g : 0.0697 g

Concentració exacte, mg · L-1: 1394 mg/L

Volum pres de
0 0,5 0,7 1,0 2,0 3,0
dissolució estoc, mL
Concentració de 0 69,7 97,58 139,4 278,8 418,2
metanol dins els
matrassos de 10 mL,
mg · L-1
Àrea del pic de 0 226308,5 381470,9 742002,7 735424,2 1032925,5
metanol, Ametanol

Àrea del pic de patró 1843212 1384365,4 1318620,1 4110442,6 2155679,0 2072468,4
intern, API
Relació d’àrees, Ametanol / 0
API
2. Patrons de calibratge:

Recta de regressió

La recta de regressió que hem d’emprar per obtenir la concentració de la mostra és: Ametanol/API, en front de la
concentració de metanol. Adjunteu el gràfic correctament presentat (títol, escales, eixos,...). Empleneu la següent
taula:

(Ametanol / API) vs mg metanol · L-1

Ordenada, a=
Pendent, b=
Desviació estàndard dels residus, sy/x=
Coeficient de determinació, R2=
Número de punts, n=
3. Mostra

Nom de la mostra

Volum de mostra introduït en els matrassos de 10 mL

Rèpliques 1 2
Àrea del pic de metanol, Ametanol

Àrea del pic de patró intern, API

Ametanol/API Càlcul de la concentració de

metanol a la dissolució (de 10
Mitjana de Ametanol/API , ȳ 0
mL) que hem mesurat, xo,
obtinguda per interpolació.

xo= ______________ mg · L-1 metanol

Càlcul de la desviació estàndard de la concentració (obtinguda per interpolació):

Número de rèpliques de la mostra, m

Número de punts de la recta de calibratge, n
Mitjana de les mesures de les dissolucions de la mostra, yo

Mitjana de les mesures dels patrons emprats a la regressió, ȳ

Mitjana de les concentracions dels patrons emprats a la regressió, x̄
Desviació estàndard dels residus, sy/x

sx0=_____________ mg · L-1 metanol

4. Resultat final
Teniu en compte la dilució duta a terme

Càlculs:

Concentració de metanol en la beguda alcohòlica  s= ___________________ mg · L-1